CN104698187A - 膜蛋白cd81在子痫前期预测、分型及诊疗中的应用 - Google Patents

膜蛋白cd81在子痫前期预测、分型及诊疗中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了膜蛋白CD81在子痫前期预测、分型及诊疗中的应用。发明人通过临床调查、体外分子实验及动物实验发现，CD81通过抑制滋养细胞的侵袭能力导致子宫螺旋动脉的重塑障碍，从而引起PE发病。故CD81可作为预测PE的标记分子并可能成为PE分型的标记分子，且有可能成为防治PE的靶点。

Description

膜蛋白CD81在子痫前期预测、分型及诊疗中的应用
技术领域
本发明属于妇产科学高危妊娠领域，涉及膜蛋白CD81在子痫前期预测、分型及诊疗中的应用。
背景技术
子痫前期(preeclampsia,PE)是妊娠期特有的并发症，以妊娠20周后出现的高血压和蛋白尿为主要临床特征。能引起孕妇多器官功能损害，及胎儿宫内缺氧、胎儿生长受限、医源性早产等，是导致孕产妇及围产儿病死率增高的重要原因。PE的病因不明，从发病时间与孕周的关系看，目前分为早发型和迟发型，说明其病因具有异质性，而至今尚无更精确的分型方法，这严重影响了PE预测、预防与针对性治疗方法的建立。目前PE的治疗主要是对症处理，无效时终止妊娠，但这将增加医源性早产。因此，亟待寻找有效的预测、分型及防治方法。
CD81，又名抗增生抗体靶抗原-1(TAPA-1)，是四次跨膜蛋白(TM4SF)超家族成员，表达于哺乳动物的多种有核细胞。CD81分子四次跨越细胞膜，形成胞外区、跨膜区和胞内区，在细胞外形成大小两个环状结构(EC1和EC2)。CD81在细胞内和跨细胞膜区域的成分高度保守，而其大的细胞外环区域(EC2)具有易变性。胞外的较小和较大的环状结构区域，是细胞膜上CD81感知细胞外信号的关键部位。对CD81结构特点进行分析，在其N末端发现了一个潜在的豆蔻酯酰化位点，对CD81的功能调节存在重要作用。细胞膜上的CD81分子并不孤立存在，而是与其它的TM4SF蛋白如CD9，或其它类型的跨膜蛋白分子结合，形成不同的蛋白复合物，传递细胞外的信号，从而参与细胞生物学过程的调节。与CD81分子结合的蛋白质有CD4、CD8、CD9、CD21、CD82、HLA-DR和整合素分子α3β1、α4β1和α6β1等。研究表明CD81在机体的固有免疫及获得性免疫的激活和丙型肝炎病毒(HCV)感染过程均有重要作用。但尚未见CD81与PE有关的相关报道。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术的上述空白，提供膜蛋白CD81在子痫前期预测、分型及诊疗中的应用。
本发明的另一目的是提供子痫前期预测、分型的试剂盒。
本发明的又一目的是提供一种防治子痫前期的药物。
本发明的目的可通过以下技术方案实现：
膜蛋白CD81作为检测靶标在制备预测子痫前期的试剂盒中的应用。
所述的试剂盒中含有检测膜蛋白CD81表达量的试剂；通过所述的试剂盒检测孕妇妊娠前或妊娠初期以及妊娠过程中膜蛋白CD81的表达量，如果妊娠过程中膜蛋白CD81的表达显著高于妊娠前或妊娠初期，则预测孕妇患有子痫前期。
膜蛋白CD81作为检测靶标在制备子痫前期分型试剂盒中的应用。
膜蛋白CD81在早发型重度PE患者(孕周<34周)中表达显著增高，早发型重度PE患者病情发展迅速且容易并发胎儿窘迫及胎儿生长受限等。通过所述的检测试剂盒检测膜蛋白CD81的表达量，能够区分PE为早发型还是迟发型，同时区分轻度还是重度；为临床治疗选择不同方法提供依据和参考。
膜蛋白CD81分子的拮抗物质在制备防治子痫前期的药物中的应用。
所述的膜蛋白CD81分子的拮抗物质可以为中和抗体、siRNA及与CD81具有稳定结合的分子(如四次跨膜蛋白同家族成员CD9)。
一种用于预测子痫前期的检测试剂盒，包括用于检测膜蛋白CD81表达量的试剂。
其中，所述的检测膜蛋白CD81表达量的试剂优选Western blotting检测膜蛋白CD81表达量的试剂、免疫组织化学及组织免疫荧光检测膜蛋白CD81表达量的试剂或者酶联免疫检测膜蛋白CD81表达量的试剂。
所述的Western blotting检测膜蛋白CD81表达量的试剂包括CD81鼠单克隆抗体，所述单抗可按照现有技术公开的方法自制，也可购买商业化的产品，如Santa Cruz公司生产的CD81鼠单克隆抗体。
所述的免疫组织化学及组织免疫荧光检测膜蛋白CD81表达量的试剂包括CD81兔单克隆抗体，所述单抗可按照现有技术公开的方法自制，也可购买商业化的产品，如Epitomics公司生产的CD81兔单克隆抗体。
所述的酶联免疫检测膜蛋白CD81表达量的试剂优选使用双抗体夹心ELISA法检测膜蛋白CD81的试剂。
一种用于子痫前期分型的试剂盒，包括用于检测膜蛋白CD81表达量的试剂。
其中，所述的检测膜蛋白CD81表达量的试剂包括Western blotting检测膜蛋白CD81表达量的试剂、免疫组织化学及组织免疫荧光检测膜蛋白CD81表达量的试剂或者酶联免疫检测膜蛋白CD81表达量的试剂。
一种用于防治子痫前期的药物，包括膜蛋白CD81分子的拮抗物质以及药学上允许的辅料。所述的膜蛋白CD81分子的拮抗物质选自中和抗体、siRNA或者与CD81具有稳定结合的分子(如四次跨膜蛋白同家族成员CD9)。
有益效果：
本发明从临床调查、体外检测CD81分子水平及整体动物实验，系统探讨CD81高表达引起PE发病及其分子机制。临床调查研究表明，与相同孕龄的正常孕妇相比，早发型重度PE患者的胎盘中CD81的表达显著升高。同时，对胎盘组织的切片进行CD81及CK(滋养细胞的标记分子)免疫组化染色，发现PE患者胎盘组织的CD81染色明显深于正常孕妇的胎盘切片，且CD81高表达部位主要在细胞滋养细胞。进一步，提取原代胎盘细胞滋养细胞(cytotrophoblasts,CTBs)发现其高表达CD81，而CD81能抑制CTBs的侵袭。最后，我们将CD81腺病毒经尾静脉注射妊娠大鼠，成功诱导大鼠PE的高血压表型。说明CD81可能是PE发病的关键分子。基于上述研究成果，提出膜蛋白CD81作为检测靶标可用于制备预测子痫前期的试剂盒、子痫前期分型试剂盒以及膜蛋白CD81拮抗物质可用于制备防治子痫前期的药物。
附图说明
图1、组织免疫荧光检测胎盘绒毛中CD81的表达
其中,亮灰色表示有CD81表达。A,B,C图显示在游离绒毛的内侧为细胞滋养细胞，外侧为合体滋养细胞，不同孕周的游离绒毛的外侧合体滋养细胞未有亮灰色，而内侧细胞滋养细胞上的亮灰色随孕周的增加而变少。D,E,F图显示固定绒毛的近端及远端的滋养细胞的亮灰色随孕周的增加而减少。
图2、Western blotting检测PE患者胎盘中CD81表达
其中，nPTL表示正常妊娠妇女组，sPE表示早发型重度PE患者组。
图3、免疫组化检测PE患者胎盘组织切片中CD81(图A)与CK(图B)表达
图4、Western blotting检测PE患者血清中CD81表达
图5、胎盘原代CTBs的提取及培养
图6、Transwell检测CD81对CTBs侵袭能力的作用
图7、Western blotting检测大鼠胎盘中CD81表达情况
图8、免疫组化检测大鼠胎盘中CD81表达情况
其中箭头表示单个的大滋养细胞。
图9、免疫组化检测子宫螺旋动脉CD81和CK的表达
具体实施方式
实施例1：CD81在早发型重度PE患者胎盘及血清中表达
1、材料，试剂，设备
1.1人胎盘组织及血清来源
选择2011年10月至2014年10月间在南京大学医学院附属鼓楼医院择期剖宫产分娩的单胎初产妇，签署知情同意书，排除慢性高血压、孕前糖尿病、肾病、胎膜早破、感染性疾病以及其它妊娠合并症和并发症。重度PE的诊断标准根据Williams产科学第23版。在孕妇刚入院抽取静脉血，离心后血清保留-80℃冰箱。胎盘娩出后10min内采集胎盘母面正中(避开钙化区及出血点)大小约1.0cm×1.0cm×1.0cm的组织数块，包括胎盘全层，从底蜕膜板到绒毛板，不含羊膜层。用DEPC水处理过的PBS反复漂洗干净，干纱布吸除水分，装入EP管后迅速经液氮速冻后置于-80℃冰箱备用。同时记录产妇年龄、身高、孕前体重、孕龄、发病以来最高血压及最多的蛋白尿、血谷丙转氨酶、尿素氮，以及新生儿性别、出生体重等。选择同期孕龄相匹配的正常妊娠妇女为对照组(表1)。
表1
正常妊娠(n＝10) 严重子痫前期(n＝10) P-value
产妇年龄(岁) 28(22～32) 32(22～37) n.s.
孕龄(周) 30+6(24～34+1) 31+2(29～34) n.s.
收缩压(mmHg) 100(95～133) 162(158～200) ＜0.05
舒张压(mmHg) 70(58～91) 109(96～137) ＜0.05
蛋白尿 — ++～++++ ＜0.05
1.2主要试剂
蛋白酶抑制剂(Roche公司)，聚偏二氟乙烯膜(Polyvinylidene fluoride,PVDF,Millipore公司)，BCA蛋白定量检测试剂盒(Thermo公司)，抗体：CD81单克隆抗体(SantaCruz公司)，cytokeratin 7单克隆抗体(PTG公司)，GAPDH抗体(Bioworld公司)，化学显色底物ImmobilonTM Western HRP底物(Millipore公司)，SABC试剂盒(博士德公司)，其它试剂：Tris HCl(pH 7.6)，无水乙醇，甲醇，生理盐水，EDTA，NH4Ac，甘油，SDS，NaCl，Tris碱等。
1.3主要仪器
凝胶成像系统(美国UVP GDS-8000系统)，超低温冰箱(SANYO，MDF-382E)，液氮罐(乐山市东亚机电工贸公司)，摇床(GFL3010)，超声波细胞粉碎机(宁波新芝生物科技公司)，水浴锅(上海森信实验仪器有限公司)，全自动高压灭菌器(ZEALWAY,GI54DW)，电泳仪和电泳槽(Bio-Rad公司)，低速离心机(Wealtec公司)，振荡器(HZ-2011KC)，旋涡混合器(上海医科大学仪器厂，XW-80A)，PH计(上海雷磁仪器，PHSJ-3F型)，电子天平
(Sartorious,BS200S)，电热恒温鼓风干燥箱(上海精红实验有限公司，DHG-9070A)，磁力加热搅拌器(常州国华仪器厂，79-1)，荧光显微镜(Leica)。
1.4主要方法
1.4.1 Western blotting(WB)检测
胎盘组织在液氮中研磨至粉状，根据组织大小加入一定体积的蛋白裂解缓冲液和蛋白酶抑制剂；Bradford法测定蛋白质浓度；SDS-PAGE胶电泳、湿转、封闭、杂抗后显色。自动电泳凝胶成像分析仪采集图像，用Quantity One软件对图片进行灰度扫描，以CD81蛋白与GAPDH的密度比值作为目的蛋白的相对含量。血清样本定体积进行SDS-PAGE胶电泳。
1.4.2免疫组织化学及组织免疫荧光检测
获取新鲜胎盘组织，4％中性甲醛溶液固定过夜，石蜡包埋，5μm连续切片；将石蜡切片脱蜡和水化；浸泡于3％H2O2中灭活内源性过氧化物酶；将切片加入含10mM EDTA的抗原修复液进行热修复；进行封闭，杂抗，显色后显微镜观察。进行组织免疫荧光检测的胎盘需制作冰冻切片。
2、结果
2.1胎盘组织中CD81的表达随着孕龄的增加而减少
我们选取不同孕龄(6w、11w、15w)的胎盘绒毛组织进行组织免疫荧光检测。结果显示无论在游离绒毛还是固定绒毛中，CD81的表达均随着孕龄的增加而减少，且CD81表达主要在细胞滋养细胞，而少表达于合体滋养细胞(图1)。
2.2早发重度PE患者胎盘及血清中CD81表达情况
我们收集并选取了早发型重度PE患者胎盘和正常妊娠妇女胎盘各10例，经Westenbolttiong及免疫组化检测CD81的蛋白表达。以GAPDH为内参，早发重度PE患者胎盘中CD81蛋白水平的相对含量显著高于正常妊娠妇女胎盘中的CD81(图2)。同时，免疫组化的结果表明早发重度PE患者胎盘中CD81染色较深，且主要表达于CK阳性的滋养细胞中(图3)。说明在早发型重度PE患者胎盘滋养细胞中CD81表达显著升高。同时，对血清标本进行定体积的WB检测，发现早发重度PE患者的血清中CD81表达也显著增加(图4)。
实施例2：CD81对胎盘原代细胞滋养细胞(CTBs)侵袭功能的作用
1、材料，试剂，设备
1.1人孕早期绒毛的收集
收集因早孕要求人工流产，在南京鼓楼医院计划生育科行人流手术的孕妇的新鲜绒毛。孕妇无任何疾病，孕周在6-8w。
1.2主要试剂及设备
胶原酶，透明质酸酶，DNA抑制酶，丙酮酸钠，谷氨酰胺，Hepes平衡液，BSA(Sigma公司)；Nutridoma-SP(Roche公司)；Percoll(GE Healthcare)；Matrigel(BD公司)；DMEH培养基，0.05％胰酶，胎牛血清(FBS)，青链霉素，庆大霉素(Invitrogen公司)；Ad-CTL腺病毒及Ad-Flag-CD81腺病毒(GENECHEM,上海)。
超净台(苏净集团安泰公司)，高速离心机(德国Heraeus公司)，快速恒温数显水箱(常州国华仪器长，HH-42)。
1.3主要方法
1.3.1 CTBs分离与培养
取早孕人工流产的无菌绒毛，清除血块，以无菌PBS反复冲洗，尽可能去除肉眼可见的小血管及纤维连接成分。将获取的绒毛组织800rpm/min离心2min，弃掉上清液。将绒毛组织称重(约1g/mL)，加入相应量的胶原酶[绒毛组织(g)：胶原酶(mL)＝1:6]，置于37℃水浴锅，175rpm/min消化10min，至看到大的圆形细胞滋养细胞(较周围合体滋养细胞约大10倍左右)脱落，即停止消化；将装有绒毛组织的容器倾斜放置，待绒毛组织下沉，吸弃上清，加入相应量的0.05％Trypsin[绒毛组织(g)：0.05％Trypsin(mL)＝1:6]，置于37℃水浴锅，175rpm/min孵育10min，置于显微镜下观察,若见到大量细胞滋养细胞脱落，则加入适量DME H，将上清液纱布过滤；将滤液加至预先加有1mL FBS的50mL离心管内，将上述装于50mL离心管中的细胞滋养细胞悬液，1300rpm，4℃离心10min，吸弃上清液；再次加入胶原酶，37℃，175rpm/min孵育4min，将上清液经100目不锈钢筛网过滤，并用含2.5％FBS的DME H培养液冲洗不锈钢筛网，上述滤液加至50mL离心管内，4℃，1300rpm/min离心10min，吸弃上清液；将上述50mL离心管内的细胞滋养细胞沉淀用4mL含2.5％FBS的DME H重悬细胞沉淀，将4mL细胞悬液缓慢加至Percoll分离液最上层,4℃，2800rpm/min离心25min，用移液管小心吸取云雾状的细胞滋养细胞层置于新的50mL离心管内；用含2.5％FBS的DME H悬浮细胞，4℃，1300rpm/min离心10min，吸弃上清，再重复洗涤细胞一次；用DME H悬浮细胞，计数；将细胞接种至皿底涂满Matrigel胶的细胞培养皿中，置于37℃，5％CO2细胞培养箱中继续培养，进行后续试验。
1.3.2 transwell细胞侵袭实验
原代分离培养的CTBs计数后接种于包被Matrigel胶的transwell小室，分别感染Ad-CTL腺病毒或Ad-Flag-CD81腺病毒(MOI＝50)，6h后更换培养液以去除腺病毒，24孔板下室加入800μl培养基；轻柔放置小室，避免出现气泡，培养1–2h，再次确认有无气泡，37℃，5％CO2培养箱中培养36h后。用湿棉签擦去基质胶和上室内细胞；将小室置于4％多聚甲醛室温固定20min；PBS清洗后，将膜室温风干30min；0.2％结晶紫染色，室温20min；用清水轻柔冲洗冗余染液，小室正面朝上置于倒置显微镜下观察；200倍镜光学显微镜镜下随机选取8个视野计数细胞数评价细胞侵袭能力的变化。
2.结果
2.1胎盘原代CTBs的分离及培养
胎盘原代CTBs的消化及提取过程如附图5所示，采用胶原酶联合胰酶消化及淋巴细胞分离液(percoll)密度梯度高速离心的方式能够得到纯度达90％以上的CTBs。
2.2 CD81抑制原代CTBs侵袭功能
原代分离培养的CTBs计数后接种于包被Matrigel胶的transwell小室，分别感染Ad-CTL腺病毒或Ad-Flag-CD81腺病毒(MOI＝50)，培养36h后检测细胞的侵袭能力。结果显示相比感染Ad-CTL腺病毒的对照组，感染Ad-Flag-CD81腺病毒的细胞侵袭过Matrigel胶至小室反面的细胞数目显著减少(2.65倍，图6)。表明CD81抑制原代CTBs的侵袭。
实施例3：CD81腺病毒诱导大鼠PE模型
1.1材料及分组
SPF级SD大鼠，按完全随机法分成二组：对照组(Ad-CTL组)和Ad-Flag-CD81组(n＝8)。按雌雄1：1合笼，观察阴栓，见阴栓记为妊娠第0天。每只分别注射病毒量为3×109PFU。给药方式选择尾静脉注射，静脉注射泵控制注射速度。给药时间都是妊娠第5天，在妊娠第15天处死。同时，将非妊娠大鼠随机分为二组：对照组(Ad-CTL组)和Ad-Flag-CD81组(n＝5)，在注射后第10天处死。
1.2血压监测
实验前一周起每天测量尾动脉收缩压训练母鼠。每只母鼠于合笼前、妊娠第3、6、9、12、14天测量，非妊娠母鼠在注射后1、4、7、9天测量，记录血压值。测定时间均在固定时间段进行，每只母鼠测量至少15个数值，取母鼠安静状态下连续3组变异小于6mmHg的收缩压，其均值作为所测血压值。血压描记后，进行数据统计。血压测量仪器是智能无创血压计
(BP-98A)。
1.3尿蛋白监测
母鼠置于代谢笼中，装好滤网隔板过滤粪便，禁食，自由摄水。选取固定时间留取15小时空腹尿液，用50ml离心管接取母鼠尿液，用量筒测量尿液体积，记录尿量。尿液混匀分装于2个EP管(每管1ml)。全自动生化分析仪测定尿总蛋白。每只母鼠于合笼前、妊娠第3、6、9、12、14天留取尿液检测，非妊娠母鼠在注射后1、4、7、9天留尿。
1.4胎仔、胎盘及妊娠结果统计
妊娠第15天行剖宫产，分离胎仔和胎盘，记录胎仔数，胎盘和胎仔重量。皆取平均值作为该母鼠的胎仔数，胎盘和胎仔重量。
1.5子宫螺旋动脉的免疫组化
收取实验鼠胎盘及其附着的部分子宫壁(子宫蜕膜三角带)，用PBS清洗两次后，10％中性甲醛固定过夜，用特定模具将其切成较厚片状，脱水，石蜡包埋。2μm连续切片。每张片子以母体中心动脉通道为标志，分别做CK和CD81的免疫组化，CK用于标记滋养细胞。分析大鼠胎盘滋养细胞侵袭及螺旋动脉重塑情况。
2.结果
2.1血压及尿蛋白的变化
对妊娠组大鼠的血压分析显示，与自身基础血压值相比，Ad-Flag-CD81组大鼠在妊娠第5天注射病毒以后，血压升高。在妊娠第12天达到最高峰，平均升高14mmHg。Ad-CTL组血压值与基础值相比，变化不明显。组间比较表明，Ad-CTL组和Ad-Flag-CD81组大鼠基础体重及基础血压值没有差异，基础血压分别为(104.75±1.67)mmHg和(104.95±2.66)mmHg。
Ad-Flag-CD81组在妊娠第6天血压值比Ad-CTL组增高4.66％，随妊娠进展持续升高，在妊娠第12天最大增幅为11.64％，差异具有显著统计学意义(表2，P<0.01)。
而非妊娠组大鼠，Ad-Flag-CD81组与自身基础血压相比，在注射病毒后血压没有显著变化；同时与Ad-CTL组相比，Ad-Flag-CD81组大鼠的血压没有显著变化(P<0.01)。
表2
2.2大鼠妊娠情况及胎盘和胎仔情况
Ad-Flag-CD81组大鼠中有4只孕鼠都见到胚胎吸收、胎盘出血、子宫水肿及流产现象，而Ad-CTL组只出现1只孕鼠有胚胎吸收。虽Ad-Flag-CD81组大鼠妊娠结局较差，但胎鼠重量(0.309±0.054g)较Ad-CTL组(0.293±0.049g)无统计学差异(P>0.05)。二组的平均产仔数、胎盘平均重量及肾脏重量均无明显统计学差异。
2.3大鼠胎盘中CD81表达情况
利用western blotting及免疫组化方法，我们检测Ad-CTL组和Ad-Flag-CD81组大鼠的胎盘组织中CD81表达。相比于Ad-CTL组，Ad-Flag-CD81组大鼠胎盘组织中CD81表达显著升高(图7)。同时免疫组化的结果显示，Ad-Flag-CD81组大鼠胎盘的迷路层、海绵层及大滋养细胞层中CD81的染色均显著强于Ad-CTL组的大鼠胎盘的CD81的染色(图8)。
2.4大鼠子宫螺旋动脉重塑情况
我们利用免疫组化的方法检测胎盘附着的子宫部位中螺旋动脉CD81及CK的表达。结果显示，Ad-Flag-CD81组中子宫螺旋动脉中CD81表达显著高于Ad-CTL组。同时，相同部位的CK表达量显著低于Ad-CTL组(图9)。表明Ad-Flag-CD81模型组的滋养细胞侵袭减少导致子宫螺旋动脉重塑障碍。提示CD81通过影响子宫螺旋动脉重塑的过程导致大鼠PE的发生。大鼠与人类的胎盘发育及子宫螺旋动脉重塑的过程具有高度的一致性，故动物实验的体内研究进一步表明CD81是参与PE发病的重要分子。
发明人通过临床调查、体外分子实验及动物实验发现，CD81通过抑制滋养细胞的侵袭能力导致子宫螺旋动脉的重塑障碍，从而引起PE发病。故CD81有可能成为预测PE的标记分子并可能成为PE分型的标记分子，且有可能成为防治PE的靶点。

Claims (10)

1.膜蛋白CD81作为检测靶标在制备预测子痫前期的试剂盒中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于所述的试剂盒中含有检测膜蛋白CD81表达量的试剂；通过所述的试剂盒检测孕妇妊娠前或妊娠初期以及妊娠过程中膜蛋白CD81的表达量，如果妊娠过程中膜蛋白CD81的表达显著高于妊娠前或妊娠初期，则预测孕妇患有子痫前期。
3.膜蛋白CD81作为检测靶标在制备子痫前期分型试剂盒中的应用。
4.膜蛋白CD81分子的拮抗物质在制备防治子痫前期的药物中的应用。
5.一种用于预测子痫前期的检测试剂盒，其特征在于包括用于检测膜蛋白CD81表达量的试剂。
6.根据权利要求5所述的用于预测子痫前期的检测试剂盒，其特征在于所述的检测膜蛋白CD81表达量的试剂选自Western blot检测膜蛋白CD81表达量的试剂、免疫组织化学或组织免疫荧光检测膜蛋白CD81表达量的试剂，或者酶联免疫检测膜蛋白CD81表达量的试剂。
7.一种用于子痫前期分型的试剂盒，其特征在于包括用于检测膜蛋白CD81表达量的试剂。
8.根据权利要求7所述的用于子痫前期分型的试剂盒，其特征在于所述的检测膜蛋白CD81表达量的试剂包括Western blot检测膜蛋白CD81表达量的试剂、免疫组织化学或组织免疫荧光检测膜蛋白CD81表达量的试剂，或者酶联免疫检测膜蛋白CD81表达量的试剂。
9.一种用于防治子痫前期的药物，其特征在于包括膜蛋白CD81分子的拮抗物质以及药学上允许的辅料。
10.根据权利要求9所述的药物，其特征在于所述的膜蛋白CD81分子的拮抗物质选自中和抗体、siRNA或者与CD81具有稳定结合的分子；所述的与CD81具有稳定结合的分子优选四次跨膜蛋白同家族成员CD9。
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