CN104666105A - 一种含gsh脂质纳米乳的化妆品 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种含GSH脂质纳米乳的化妆品，所述化妆品由以下重量份的成分组成：谷胱甘肽0.05-5份、磷脂2-20份、油5-15份、非离子表面活性剂1-25份和分散介质45-90份。所述非离子表面活性剂为司盘80、聚甘油油酸酯、吐温80、聚氧乙烯蓖麻油或聚乙二醇辛酸/癸酸甘油酯中的三种以上。本发明提供的化妆品中将谷胱甘肽包裹于磷脂微囊纳米乳中，能够有效的增加谷胱甘肽脂溶性。更重要的是，通过纳米技术，提高了谷胱甘肽透皮吸收能力，从而增强了谷胱甘肽在皮肤外用领域中的应用。
Description
技术领域
本发明涉及含肽的脂质纳米乳，具体涉及一种含GSH脂质纳米乳的化妆品。
背景技术
谷胱甘肽(glutathione，r-glutamyl cysteingl+glycine,GSH)是一种含γ-酰胺键和巯基的三肽，由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸组成的三肽，分子量307，水溶性极佳。一般而言，由于皮肤的脂质性和角质层的存在，亲水性的分子很难通过皮肤障碍而被机体吸收。研究表明通过向亲水分子引入疏水基团，难增加它们透过皮肤的能力(Lintner K,Peschard O,Int J Cosmet Sci(2000)22:207–218)。通过纳米技术，将亲水性分子包裹于乳剂等两亲性体系，也能够显著增强亲水分子的生物利用度。
有关谷胱甘肽的脂质纳米制剂的报道如下：
CN200910192989.X(CN101664372A)涉及一种皮肤外用抗氧化网络功效纳米乳及其制备方法。其特征在于它由下述重量配比的原料组成：维生素E 1.0-1.5，谷胱甘肽2.0-3.0，L-抗坏血酸-2-葡萄糖苷2.0-2.5，沙棘油1.0-1.8，辅酶Q101.0-1.6，a-硫辛酸0.5-0.6，肉豆蔻酸异丙酯8.0-10，辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯20-25，聚甘油脂肪酸酯7.0-9.0，氮酮0.5-1.0，三重蒸馏水46-50，柠檬酸0.05-0.25，柠檬酸钠1.0-1.6。
CN201410239087.8(CN103976961A)公开了一种还原型谷胱甘肽脂质体的制备方法，该方法具体为：一、称取大豆卵磷脂，脂肪酸甘油脂类，溶解于无水乙醇中，水浴加热，制备油相；二、称取还原型谷胱甘肽，表面活性剂，溶解于蒸馏水中，水浴加热，制备水相；三、将制得的油相和水相混合，乳化，减压旋转蒸发去除无水乙醇，加入蒸馏水，冰浴后预冷，然后冻干成脂质体粉末，即得。
未见到有关谷胱甘肽制成纳米乳或脂质纳米乳制剂的报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种含GSH脂质纳米乳的化妆品。
本发明提供的一种含GSH脂质纳米乳的化妆品，其由以下重量份的成分组成：谷胱甘肽0.05-5份、磷脂2-20份、油5-15份、非离子表面活性剂1-25份和分散介质45-90份。
上述化妆品中，
所述磷脂为大豆卵磷脂或蛋黄卵磷脂；
所述油为大豆油或辛酸/癸酸甘油酯；
所述非离子表面活性剂为司盘80、聚甘油油酸酯、吐温80、聚氧乙烯蓖麻油或聚乙二醇辛酸/癸酸甘油酯中的三种以上；
所述分散介质为水、甘油或丙二醇中的一种或两种。
作为本发明的优选方案，所述化妆品由以下重量份的成分组成：谷胱甘肽0.2-3份、磷脂3.5-10份、辛酸/癸酸甘油酯5-15份、司盘800-1.5份、聚甘油单油酸酯0.5-5份、吐温800.5-5份、聚氧乙烯蓖麻油0-5份、聚乙二醇辛酸/癸酸甘油酯0-5份、甘油40-80份和水5-20份。
进一步优选，所述化妆品(吸收效果较佳)由以下重量份的成分组成：谷胱甘肽1-3份、磷脂5-10份、辛酸/癸酸甘油酯10-15份、司盘801-1.5份、聚甘油单油酸酯2-3份、吐温803-5份、聚乙二醇辛酸/癸酸甘油酯1-2份、甘油50-65份和水5-12份。
更进一步优选，所述化妆品(吸收效果最佳)由以下重量份的成分组成：谷胱甘肽3份、磷脂10份、辛酸/癸酸甘油酯15份、司盘801.5份、聚甘油单油酸酯2.5份、吐温805份、聚乙二醇辛酸/癸酸甘油酯1份、甘油57份和水5份。
本发明还提供了上述化妆品的制备方法，包括下述步骤：
1)分别将磷脂、谷胱甘肽溶于体积比为5：7的氯仿-正己烷溶液，和蒸馏水中，搅拌均匀后，将两溶液混合，并超声处理，所得乳剂经冷冻干燥处理，即得谷胱甘肽-磷脂复合物，所述氯仿-正己烷溶液的用量为磷脂的5-20倍，蒸馏水的用量为谷胱甘肽的5-20倍；
2)将步骤1)所得谷胱甘肽-磷脂复合物、油、非离子表面活性剂混合，在8000-12000rpm条件下高速剪切，至体系中无肉眼可见固形物；
3)将分散介质加入步骤2)产物，8000-12000rpm条件下高速剪切，得初乳，初乳经高压均质机处理，所用压力800-2000bar，循环次数5-10次，即得化妆品。
上述方法中：
所述氯仿-正己烷溶液的用量为磷脂的5-50倍；
所述蒸馏水的用量为谷胱甘肽的5-20倍。
本发明还提供了上述化妆品在制备抗氧化的化妆品中的应用。
本发明提供的含GSH脂质纳米乳的化妆品具有以下优点：
1、本发明将谷胱甘肽包裹于磷脂微囊纳米乳中，能够有效的增加谷胱甘肽脂溶性。更重要的是，通过纳米技术，提高了谷胱甘肽透皮吸收能力，从而增强了谷胱甘肽在皮肤外用领域中的应用。
2、本发明提供的含GSH脂质纳米乳的化妆品包封率高于84％，优于现有技术。
3、本发明提供的含谷胱甘肽的脂质纳米乳粒径范围小于150nm，优于现有技术。
4、本发明提供的GSH脂质纳米乳的化妆品能促进谷胱甘肽被皮肤吸收，且优于现有技术；在37℃的条件下密闭保存3个月，本发明提供的谷胱甘肽脂质纳米乳依然保持很好的吸收效果。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
所述聚乙二醇辛酸/癸酸甘油酯又称为辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯(Labrasol)。
实施例1：含GSH脂质纳米乳的化妆品
1、组成：
2、制备方法：
1)分别将磷脂溶于70ml氯仿-正己烷溶液(氯仿：正己烷，5：7，v/v)，谷胱甘肽溶于10ml蒸馏水中，搅拌均匀后，将两溶液混合，并超声处理，所得乳剂经冷冻干燥处理，即得谷胱甘肽-磷脂复合物；
2)将谷胱甘肽-磷脂复合物、辛酸/癸酸甘油酯、聚甘油油酸酯、吐温80、聚氧乙烯蓖麻油、聚乙二醇辛酸/癸酸甘油酯混合，在8000rpm条件下高速剪切，至体系中无肉眼可见固形物；
3)将甘油和水加入步骤2)产物，12000rpm条件下高速剪切，得初乳，初乳经高压均质机处理，所用压力800bar，循环5次，即得透明清亮状化妆品。
实施例2：含GSH脂质纳米乳的化妆品
1、组成：
2、制备方法：
1)分别将磷脂溶于50ml氯仿-正己烷溶液(氯仿：正己烷，5：7，v/v)，谷胱甘肽溶于10ml蒸馏水中，搅拌均匀后，将两溶液混合，并超声处理，所得乳剂经冷冻干燥处理，即得谷胱甘肽-磷脂复合物；
2)将谷胱甘肽-磷脂复合物、辛酸/癸酸甘油酯、司盘80、聚甘油油酸酯、吐温80、聚氧乙烯蓖麻油混合，在12000rpm条件下高速剪切，至体系中无肉眼可见固形物；
3)将甘油和水加入步骤2)产物，8000rpm条件下高速剪切，得初乳，初乳经高压均质机处理，所用压力1200bar，循环7次，即得透明清亮状化妆品。
实施例3：含GSH脂质纳米乳的化妆品
1、组成：
2、制备方法：
1)分别将磷脂溶于50ml氯仿-正己烷溶液(氯仿：正己烷，5：7，v/v)，谷胱甘肽溶于15ml蒸馏水中，搅拌均匀后，将两溶液混合，并超声处理，所得乳剂经冷冻干燥处理，即得谷胱甘肽-磷脂复合物；
2)将谷胱甘肽-磷脂复合物、辛酸/癸酸甘油酯、司盘80、聚甘油油酸酯、吐温80、聚乙二醇辛酸/癸酸甘油酯混合，在10000rpm条件下高速剪切，至体系中无肉眼可见固形物；
3)将甘油和水加入步骤2)产物，10000rpm条件下高速剪切，得初乳，初乳经高压均质机处理，所用压力2000bar，循环10次，即得透明清亮状化妆品。
实施例4：含GSH脂质纳米乳的化妆品
1、组成：
2、制备方法：
1)分别将磷脂溶于60ml氯仿-正己烷溶液(氯仿：正己烷，5：7，v/v)，谷胱甘肽溶于20ml蒸馏水中，搅拌均匀后，将两溶液混合，并超声处理，所得乳剂经冷冻干燥处理，即得谷胱甘肽-磷脂复合物；
2)将谷胱甘肽-磷脂复合物、辛酸/癸酸甘油酯、司盘80、聚甘油油酸酯、吐温80、聚乙二醇辛酸/癸酸甘油酯混合，在10000rpm条件下高速剪切，至体系中无肉眼可见固形物；
3)将甘油和水加入步骤2)产物，10000rpm条件下高速剪切，得初乳，初乳经高压均质机处理，所用压力2000bar，循环10次，即得透明清亮状化妆品。
实施例5：含GSH脂质纳米乳的化妆品
1、组成：
2、制备方法：
1)分别将磷脂溶于50ml氯仿-正己烷溶液(氯仿：正己烷，5：7，v/v)，谷胱甘肽溶于35ml蒸馏水中，搅拌均匀后，将两溶液混合，并超声处理，所得乳剂经冷冻干燥处理，即得谷胱甘肽-磷脂复合物；
2)将谷胱甘肽-磷脂复合物、辛酸/癸酸甘油酯、司盘80、聚甘油油酸酯、吐温80、聚乙二醇辛酸/癸酸甘油酯混合，在10000rpm条件下高速剪切，至体系中无肉眼可见固形物；
3)将甘油和水加入步骤2)产物，10000rpm条件下高速剪切，得初乳，初乳经高压均质机处理，所用压力2000bar，循环10次，即得透明清亮状化妆品。
对比例1：
参考CN200910192989.X(CN101664372A)的实施例制备，将维生素E 1.0-1.5，L-抗坏血酸-2-葡萄糖苷2.0-2.5，沙棘油1.0-1.8，辅酶Q101.0-1.6，a-硫辛酸0.5-0.6等成分删除，其余配方及制备方法详见该专利的实施例部分。
对比例2：
参考CN201410239087.8(CN103976961A)的实施例1，因为原实施例1没有对表面活性剂的具体成分进行限定，并用谷胱甘肽替换还原型谷胱甘肽因此，用本发明的实施例3的非离子表面活性剂进行替换，其余成分及方法依然按照该文献实施例1的方式进行组合和配制。
实验例1：包封率测定
1、试验样品：
样品1-5：实施例1-5制备的化妆品；
对照品1：对比例1制备的样品；
对照品2：对比例2制备的样品。
2、实验方法：采用透析法，取1ml谷胱甘肽脂质纳米乳放入透析袋中，40ml去离子水进行8h透析。包封率(encapsulating efficiency,EE)按如下公式计算：
EE＝析后脂质纳米乳中谷胱甘肽含量/谷胱甘肽脂质纳米理论含量×100％。
3、试验结果：见表1。
表1：不同样品包封率
| 名称 | 样品1 | 样品2 | 样品3 | 样品4 | 样品5 | 对照品1 | 对照品2 |
| 包封率 | 86.8％ | 84.5％ | 96.1％ | 93.6％ | 92.9％ | 42.5％ | 76.8％ |
表1结果显示：与对照品1相比，经过8h的透析试验，样品1-5有着极好的包封率，对照品2的包封率也较高，但是低于样品1-5。
结果表明：本发明提供的含GSH脂质纳米乳的化妆品包封率高于84％，优于现有技术。
实验例2：粒径测定
1、试验样品：同实验例1。
2、粒径测定：
采用Malvern Zetasizer 3000HSA粒度分析仪检测粒径，测定前，将样品1-3和对照品用Millipore超纯水稀释30倍
3、试验结果：见表2：
表2：不同样品粒径大小
| 名称 | 样品1 | 样品2 | 样品3 | 样品4 | 样品5 | 对照品1 | 对照品2 |
| 平均粒径 | 136nm | 141nm | 68nm | 83nm | 91nm | 210nm | -- |
表2结果显示：与对照品1相比，样品1-5乳化后的平均粒径较小，以样品3-5的粒径较优。
结果表明：本发明提供的含GSH脂质纳米乳的化妆品乳粒径范围小于150nm，优于现有技术。
实验例3：体外透皮试验
1、实验样品：同实验例1，增加对照品3为0.2％的谷胱甘肽水溶液.
测试前，通过稀释，将不同试样中谷胱甘肽浓度统一为0.2％。
2、试验方法：取(25±5)g雄性小鼠，用6％的Na2S溶液脱去腹部毛，断颈处死后立即剪下腹部皮肤，剔除皮下组织和脂肪，用纯化水反复冲洗。将皮肤固定在扩散池上，角质层朝上，用纯化水作为接受液，转速为180rpm，扩散面积为3.3cm2，接受池总体积为18ml，37℃水浴循环。取1克试样放于鼠皮上，于1，2，4，6，8h分别取接受液2ml，并补充相同体积的空白接受液，通过HPLC法测定各样品含量，并计算单位面积累积透过量Q，计算公式如下：
Q＝ΣCnV/A(其中Cn代表第n次取样的样品浓度，V代表接受池的液体的体积，A代表扩散面积)。
在第3个月后，用本发明的产品再重复进行上次实验。
3个月的保存方法是，置于37℃条件下，密闭放置。
3、结果：
3.1不同样品单位面积累积透过量：见表3
表3：不同样品单位面积累积透过量(μg/cm2)
| 名称 | 样品1 | 样品2 | 样品3 | 样品4 | 样品5 | 对照品1 | 对照品2 | 对照品3 |
| 透过量 | 246 | 302 | 482 | 467 | 435 | 145 | 287 | 25.1 |
表3结果显示：分别与对照品1-3相比，样品1-5能极显著的增加谷胱甘肽的透过量，其中样品3-5的透过量更加明显。
3.2：3个月后不同样品单位面积累积透过量：见表4
表4：3个月后不同样品单位面积累积透过量(μg/cm2)
| 名称 | 样品1 | 样品2 | 样品3 | 样品4 | 样品5 | 对照品1 | 对照品2 | 对照品3 |
| 透过量 | 158 | 170 | 315 | 301 | 298 | 64 | 124 | -- |
表4结果显示：分别与对照品1-3相比，样品3-5能极显著的增加谷胱甘肽的透过量，其中样品3效果最佳。
结果表明：本发明提供的含GSH脂质纳米乳的化妆品能促进谷胱甘肽被皮肤吸收，且优于现有技术；在37℃的条件下密闭保存3个月，本发明提供的含谷胱甘肽的脂质纳米乳依然保持很好的吸收效果。
实验例4：自由基清除试验
1、试验原理：DPPH·在有机溶剂中是一种稳定的自由基，其孤对电子在517nm附近有强吸收(显深紫色)。当有机清除剂存在时，孤对电子被配对，吸收消失或减弱，通过测定吸收减弱的程度，可评价自由基清除剂的活性。
2、试验样品：同实验例3。
3、试验方法：取样品溶液2mL和浓度为100μmoL/L的DPPH溶液2mL先后加入同一具塞试管中，摇匀；室温下静置30min，于517nm波长下测定样品吸光度。
抑制率：K％＝[1-(Ai-Aj)/Ac]×100％
Ai：2mLDPPH溶液+2mL待测品溶液的吸光度
Aj：2mL待测品溶液+2mL溶剂的吸光度
Ac：2mLDPPH溶液+2mL溶剂的吸光度
4、实验结果：见表5。
表5不同样品对DPPH的清除率(％)
| 名称 | 样品1 | 样品2 | 样品3 | 样品4 | 样品5 | 对照品1 | 对照品2 | 对照品3 |
| 清除率 | 82.3％ | 89.1％ | 97.6％ | 96.1％ | 95.9％ | 53.6％ | 64.5％ | 74.2％ |
表5结果显示：分别与对照品1-3相比，样品1-5中谷胱甘肽抗氧化活性没有丢失。
结果表明：本发明提供的含GSH脂质纳米乳的化妆品抗氧化活性好。
虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
Claims (9)
1.一种含GSH脂质纳米乳的化妆品，其由以下重量份的成分组成：谷胱甘肽0.05-5份、磷脂2-20份、油5-15份、非离子表面活性剂1-25份和分散介质45-90份。
2.根据权利要求1所述的化妆品，其特征在于，所述油为大豆油或辛酸/癸酸甘油酯中一种或两种。
3.根据权利要求1所述的化妆品，其特征在于，所述非离子表面活性剂为司盘80、聚甘油油酸酯、吐温80、聚氧乙烯蓖麻油或聚乙二醇辛酸/癸酸甘油酯中的三种以上。
4.根据权利要求1所述的化妆品，其特征在于，所述分散介质为水、甘油或丙二醇中的一种或两种。
5.根据权利要求1-4任一项所述的化妆品，其特征在于，所述化妆品由以下重量份的成分组成：谷胱甘肽0.2-3份、磷脂3.5-10份、辛酸/癸酸甘油酯5-15份、司盘800-1.5份、聚甘油单油酸酯0.5-5份、吐温800.5-5份、聚氧乙烯蓖麻油0-5份、聚乙二醇辛酸/癸酸甘油酯0-5份、甘油40-80份和水5-20份。
6.根据权利要求1-4任一项所述的化妆品，其特征在于，所述化妆品由以下重量份的成分组成：谷胱甘肽1-3份、磷脂5-10份、辛酸/癸酸甘油酯10-15份、司盘801-1.5份、聚甘油单油酸酯2-3份、吐温803-5份、聚乙二醇辛酸/癸酸甘油酯1-2份、甘油50-65份和水5-12份。
7.根据权利要求1-4任一项所述的化妆品，其特征在于，所述化妆品由以下重量份的成分组成：谷胱甘肽3份、磷脂10份、辛酸/癸酸甘油酯15份、司盘801.5份、聚甘油单油酸酯2.5份、吐温805份、聚乙二醇辛酸/癸酸甘油酯1份、甘油57份和水5份。
8.一种制备权利要求1-7任一项所述的化妆品的方法，其特征在于，该方法包括下述步骤：
1)分别将磷脂、谷胱甘肽溶于体积比为5：7的氯仿-正己烷溶液，和蒸馏水中，搅拌均匀后，将两溶液混合，并超声处理，所得乳剂经冷冻干燥处理，即得谷胱甘肽-磷脂复合物，所述氯仿-正己烷溶液的用量为磷脂的5-20倍，蒸馏水的用量为谷胱甘肽的5-20倍；
2)将步骤1)所得谷胱甘肽-磷脂复合物、油、非离子表面活性剂混合，在8000-12000rpm条件下高速剪切，至体系中无肉眼可见固形物；
3)将分散介质加入步骤2)产物，8000-12000rpm条件下高速剪切，得初乳，初乳经高压均质机处理，所用压力800-2000bar，循环次数5-10次，即得化妆品。
9.权利要求1-7任一项所述的化妆品在制备抗氧化的化妆品中的应用。
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Legal Events
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|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| EXSB | Decision made by sipo to initiate substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20150603 |
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| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |