CN104661651A - 表现出不溶性微粒显著减少的依那西普制剂 - Google Patents

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Abstract

本发明提供适于依那西普的长期储存、具有大幅减少的不溶性微粒(sub-visible particle)的稳定化的依那西普含水药物组合物，以及这些组合物的制造方法，给药方法和制品。

Description

表现出不溶性微粒显著减少的依那西普制剂
技术领域
本发明涉及被稳定化以便依那西普的长期储存的含水药物组合物，制造该组合物的方法、该组合物的给药方法以及包含该组合物的试剂盒，其中，该稳定化的依那西普组合物表现出不溶性微粒(sub-visible particle)的显著减少。本发明包括不需要精氨酸用于稳定化的依那西普制剂。本发明还涉及使患者更少地遭受依那西普制剂中的不溶性微粒的制品和方法。
背景技术
多肽通常必须在其使用之前储存。当长时间储存时，多肽经常在溶液中不稳定(Manning et al.,1989,Pharm.Res.6:903-918)。为了延长其保质期，已经开发了另外的处理步骤，诸如干燥，例如冻干。然而，冻干的药物组合物使用不太方便。
通过改变制剂的元素的浓度，或者通过添加赋形剂来修改该制剂可以提出提高多肽稳定性的典型做法(参见，例如，美国专利第5580856和61715865号)。然而，使用添加剂仍然可导致无活性的多肽。此外，在冻干的情况下，再水化步骤可导致多肽的失活，例如，通过聚集或变性(Hora et al.,1992,Pharm.Res.,9:33-36；Liu et al.,1991,Biotechnol.Bioeng.,37:177-184)。不希望多肽聚集，因为其可能会导致免疫原性(Cleland et al.,1993,Crit.Rev.Therapeutic Drug CarrierSystems,10:307-377；and Robbins et al.,1987,Diabetes,36:838-845)。
另一种提高多肽的稳定性的方式是使用特定浓度的L-精氨酸(美国专利第7648702号)。
在使用之前储存长达两年的一种多肽是依那西普(Immunex公司)，其是由连接于人IgG1的Fc部分的人75千道尔顿(P75)肿瘤坏死因子受体(TNFR)的胞外配体结合部分组成的二聚融合多肽。其由934个氨基酸组成并且具有约150千道尔顿的表观分子量(Physicians Desk Reference,2002,MedicalEconomics Company Inc.)。依那西普的Fc组分包含重链恒定结构域2(CH2)、重链恒定结构域3(CH3)和铰链区，但不包含人IgG1的重链恒定结构域1(CH1)。Fc结构域可以包含上述结构域中的一种或全部。依那西普通常通过在中国仓鼠卵巢(CHO)哺乳动物细胞表达系统中的重组DNA技术产生。
药物蛋白质制剂(包括依那西普制剂)中的公知问题是该种制剂倾向于表现出不溶性微粒的存在。据认为，当对患者给药蛋白质制剂时，这种微粒与不希望的免疫反应(免疫原性)有关。这种免疫反应会减少蛋白质治疗的有效性，并可能对患者有害。
本发明提供一种实现长期储存并且形成不溶性微粒的倾向显著降低的新颖的稳定的依那西普液体制剂。
发明内容
本发明提供一种含水药物组合物，包括依那西普和用于防止、抑制或者减少所述组合物中的不溶性微粒的出现的稳定剂，其中，所述稳定剂包括表面活性剂，优选地，所述表面活性剂选自聚山梨醇酯表面活性剂和泊洛沙姆表面活性剂，其中与不包含表面活性剂的依那西普组合物相比，所述表面活性剂能够使得所述组合物中的不溶性微粒显著减少。本发明考虑使用能够达到不溶性微粒的期望减少的任何药学上可接受的表面活性剂。
在另一个实施方式中，本发明是一种包括依那西普和用于防止、抑制或者减少所述组合物中的不溶性微粒的出现的稳定剂的含水药物组合物，其中，所述稳定剂包括选自聚山梨醇酯表面活性剂和泊洛沙姆表面活性剂的表面活性剂。所述稳定剂包括选自聚山梨醇酯80、聚山梨醇酯60、聚山梨醇酯40和聚山梨醇酯20的聚山梨醇酯表面活性剂，或者泊洛沙姆表面活性剂，诸如，例如普朗尼克F-68。意外地，本发明的制剂在不需要商业制剂中存在的精氨酸稳定剂的情况下表现出优良的稳定性和不溶性微粒的减少。因此，所述制剂优选地不含有精氨酸，或者基本上不含有精氨酸。
在本发明的又一个实施方式中，包含针对不溶性微粒的形成而用于稳定化的聚山梨醇酯或者泊洛沙姆表面活性剂的依那西普制剂可以进一步包括选自以下的额外的稳定化成分：(i)选自丝氨酸、脯氨酸和谷氨酸盐的氨基酸；(ii)选自钙、镁和锌的金属离子；(iii)选自单独的木糖醇、或者木糖醇和葡甲胺的组合的木糖醇稳定剂；(iv)选自单独的氯化钠；氯化钠与蔗糖或者海藻糖的组合，以及氯化钠、蔗糖和海藻糖的组合的氯化钠稳定剂；(v)选自单独的葡甲胺；葡甲胺与蔗糖的组合；葡甲胺与氯化钠的组合；葡甲胺与氯化钠和蔗糖的组合的葡甲胺稳定剂；和(vi)糖和多元醇的组合。
因此，在一个实施方式中，本发明提供包括依那西普、针对不溶性微粒的形成而用于稳定化的聚山梨醇酯或者泊洛沙姆表面活性剂、和抑制依那西普的不稳定、聚集和/或片段化的另外的稳定剂成分的稳定的含水药物组合物，其中，该另外的稳定剂包括选自丝氨酸、脯氨酸和谷氨酸盐的化合物。在优选的实施方式中，该稳定剂包括谷氨酸盐。
在另一实施方式中，本发明提供包括依那西普、针对不溶性微粒形成而用于稳定化的聚山梨醇酯或者泊洛沙姆表面活性剂、和抑制依那西普的不稳定、聚集和/或片段化的另外的稳定剂的稳定的含水药物组合物，其中，所述另外的稳定剂包括稳定化金属离子。优选地，所述表面活性剂是聚山梨醇酯80或者普朗尼克F-68，并且所述金属离子选自钙、镁、锌或者它们的组合。在甚至更优选的实施方式中，钙、镁、锌分别作为氯化钙、氯化镁和氯化锌提供。特别优选氯化钙和氯化镁作为用于依那西普的稳定剂。
在又一个实施方式中，本发明提供包括依那西普、针对不溶性微粒形成而用于稳定化的聚山梨醇酯或者泊洛沙姆表面活性剂、和抑制依那西普的不稳定、聚集和/或片段化的另外的稳定剂成分的稳定的含水药物组合物，其中，所述另外的稳定剂选自离子多元醇衍生物，诸如葡甲胺、甘露糖基甘油酸酯、葡糖基甘油酸酯、甘露糖基乳酸酯、甘露糖基乙醇酸酯和磷酸二甘油酯。在该实施方式中，优选的依那西普含水稳定化制剂包括：依那西普；山梨醇酯80表面活性剂或者普朗尼克表面活性剂；和阻止制剂中的依那西普的不稳定、聚集和片段化的稳定化成分，所述稳定化成分由(a)葡甲胺；或者(b)葡甲胺与蔗糖的组合；或者(c)葡甲胺与氯化钠的组合；或者(d)葡甲胺与氯化钠和蔗糖的组合组成。
在又一个实施方式中，本发明提供包括依那西普、针对不溶性微粒形成而用于稳定化的聚山梨醇酯或者泊洛沙姆表面活性剂、和抑制依那西普的不稳定、聚集和/或片段化的另外的稳定剂成分的稳定的含水药物组合物，其中，所述另外的稳定剂包括糖和多元醇的组合。优选地，表面活性剂是PS-80或者普朗尼克F-68，所述糖是蔗糖以及所述多元醇选自甘露醇和山梨醇。在该实施方式的又一方面中，所述糖是右旋糖以及所述多元醇选自甘露醇和山梨醇。在本实施方式的特别优选的实施例中，本发明涉及稳定化的依那西普制剂，其中，存在蔗糖和甘露醇的组合以提供依那西普单体的稳定化。
在又一个实施方式中，本发明提供包括依那西普、针对不溶性微粒形成而用于稳定化的聚山梨醇酯或者泊洛沙姆表面活性剂的稳定的含水药物组合物，其中，本发明提供用于降低依那西普的不稳定、聚集和/或片段化的另外的用于稳定化的成分，所述制剂包括约25至约75mg/ml的依那西普和一种或者多种稳定剂，其中，所述另外的稳定剂成分选自(i)氯化钠和(ii)氯化钠与蔗糖或者海藻糖的组合；以及(iii)氯化钠、蔗糖和海藻糖的组合；其中，用于减少不溶性微粒的稳定剂/表面活性剂优选PS 80或者普朗尼克F-68。
在又一个实施方式中，本发明提供包括依那西普、针对不溶性微粒形成而用于稳定化的聚山梨醇酯或者泊洛沙姆表面活性剂(优选PS-80或者普朗尼克F-68)的稳定的含水药物组合物，其中，本发明提供用于降低依那西普的不稳定、聚集和/或片段化的另外的稳定化的成分，其中所述另外的稳定剂包括木糖醇或者木糖醇和葡甲胺的组合。
本发明还涉及用于降低依那西普制剂中的不溶性微粒的数量的方法，所述方法包括以构成所述制剂的约0.0001至约0.5w/v％(优选约0.01至0.05w/v％)的量向依那西普制剂加入表面活性剂(优选聚山梨醇酯或者泊洛沙姆表面活性剂)的步骤，从而使得与在不存在所述表面活性剂的情况下制备的相同制剂相比，每毫升制剂中的具有约1至10微米的尺寸的不溶性微粒的数量减少至少50％，并且优选减少至少约60至70％；其中，通过在制备制剂时以及在其任何可感知的储存或者热应力之前进行的流式影像分析测量不溶性微粒的数量。
在又一个实施方式中，本发明提供一种制品，所述制品包括包含最终剂型的依那西普制剂的容纳装置，其中，所述制剂包括依那西普和药学上可接受的表面活性剂，其中，与不具有表面活性剂的相同制剂相比，制剂中存在的不溶性微粒的量大幅降低。在所述制剂中以范围为0.0005-1％(w/v)的量存在的表面活性剂优选是如上所述的聚山梨醇酯(例如，聚山梨醇酯80)或者泊洛沙姆表面活性剂(例如，普朗尼克F-68)。如果需要，所包含的制剂可以包括一种或者多种以上讨论的另外的稳定化的成分。通过诸如流式影像分析的常规手段在“T0”时确定的所包含的制剂中的不溶性微粒的量优选是使得所述制剂具有(i)每毫升少于约2500个、尺寸为约5-10μm的微粒；(ii)少于约3500个、尺寸为约2-5μm的微粒和(iii)每毫升少于约700个、尺寸为约1-2μm的微粒。与不具有表面活性剂的相同的所包含的制剂相比，所包含的依那西普/表面活性剂制剂中存在的不溶性微粒的水平优选表现出不溶性微粒的至少约50％-70％的减少。
在又一个实施方式中，本发明提供一种使受试者更少地遭受依那西普制剂中的不溶性微粒的方法，所述方法包括对所述受试者施用包括依那西普和药学上可接受的表面活性剂的依那西普制剂，其中，与不具有表面活性剂的相同制剂相比，制剂中存在的不溶性微粒的量大幅减少。在所述制剂中以范围为0.0005-1％(w/v)的量存在的表面活性剂优选是如上所述的聚山梨醇酯(例如，聚山梨醇酯80)或者泊洛沙姆表面活性剂(例如，普朗尼克F-68)。如果需要，所包含的制剂可以包括一种或者多种以上讨论的另外的稳定化成分。通过诸如流式影像分析的常规手段在“T0”时确定的所述制剂中的不溶性微粒的量优选是使得所述制剂具有(i)每毫升少于约2500个的尺寸为约5-10μm的微粒；(ii)少于约3500个的尺寸为约2-5μm的微粒和(iii)每毫升少于约700个的尺寸为约1-2μm的微粒。与不具有表面活性剂的相同的制剂相比，依那西普/表面活性剂制剂中存在的不溶性微粒的水平优选表现出不溶性微粒的至少约50％-70％的减少。
不同于市售的依那西普，我们发现，令人意外的是本文所描述和例举的每个依那西普的制剂实施方式都不需要用于长期稳定化的精氨酸，但是如果需要仍然可以加入精氨酸。再者，含有或不含有精氨酸，并且利用本文所述的表面活性剂，该制剂能够表现出不溶性微粒的优良降低。提供不利用精氨酸稳定化的依那西普制剂的能力，以及表现出对不溶性微粒形成的优良抵抗，通过为患者和医疗服务人员提供与需要精氨酸来稳定化的现有商业依那西普制剂(即，)相比可以以更低的成本获得的依那西普的替代制剂(包括商业的生物仿制药和生物改进变体)显示出对医疗系统的潜在显著益处。在减少蛋白治疗的免疫原性方面，不溶性微粒的减少也被看作是一个非常显著的优点。
如本文所用的术语“不稳定”或类似术语表示依那西普单体在储存期间经历各种不希望的转化的倾向，包括可能导致不同粒径的不溶性微粒的形成或者出现的转化。这种转化包括非常高分子量的(多种)聚集体的形成，其中基本上完整的依那西普单体的多个拷贝通过各种非共价的吸引力(例如，静电相互作用)彼此随机地相关联。在储存期间不希望的转化还可以包括依那西普单体降解成更小的片段和/或低聚物。理想的情况下，依那西普制剂应尽量(在最大程度上)减少制剂在储存过程中造成的不溶性微粒、依那西普单体的聚集体、低聚体和/或片段的形成的倾向。由降低不需要的聚集体或者片段的形成的能力带来的重要益处是药物的免疫原性的降低。
可以以任选地不含有或者基本上不含有精氨酸的制剂提供以上提及的每个实施方式。术语“基本上不含有精氨酸”意图表示精氨酸(即便存在)不有助于制剂中的依那西普单体的稳定化以致于本领域的技术人员将从稳定化的立场判断其存在益处。
从以下各个实施方式的描述可以明显看出这些和其他方面，但是可能影响其中的变化和修改而不偏离本公开的新颖构思的精神和范围。
应该理解的是，前述一般描述和以下的详细描述都只是示例和说明性的，并不如所要求地限制本发明。
附图的简要说明
图1是表示对应于说明书的表VIII中的数据的在“T0”时测量的不溶性微粒的流式影响分析的柱状图。如在说明书中进一步解释的，“T0”表示在所研究的样品还未经过可感知的热应力或者储存时间的时间点下的不溶性微粒的评价。Y轴上的值是每毫升的微粒。在图例中：F02C是实施例4.2的制剂(不含PS80)；F03C是实施例3.5的制剂(不含PS80)；F04C是F05C是实施例4.2的制剂(含PS80)以及F06C是实施例3.5的制剂(含PS80)。该图中的数据显示相对于不含有表面活性剂的相同制剂，当PS80存在于实施例4.2和3.5的制剂中时不溶性微粒显著减少。
发明详述
现详细说明本发明的各种实施方式。如在本说明书和整个权利要求书中所使用的，“一(a)”、“一(an)”和“所述(the)”的含义包括复数引用，除非上下文另有明确说明。此外，如在本说明书和整个权利要求书中所使用的，“在…中(in)”的含义包括“在…中(in)”和“在…上(on)”，除非上下文另有明确说明。此外，下面更具体地定义在本说明书中使用的一些术语。
定义
在使用每个术语的本发明的范围内，以及在在具体的上下文中，本说明书中使用的术语通常具有其在本领域中的普通的含义。下面或者在说明书的其他处讨论用于描述本发明的某些术语从而为关注本发明的描述的实践者提供额外指导。提供某些术语的同义词。一个或多个同义词的独用不排除其它同义词的使用。在本说明书的任何位置处使用的实施例(包括本文所讨论的任何术语的实施例)仅是说明性的，而决不限制本发明或者任何示例性术语的范围和含义。本发明并不限于本说明书给出的各种实施例。
除非另有定义，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本发明所属的技术领域的普通技术人员所通常理解的相同的含义。在冲突的情况下，以包括定义的本文献为准。
“大约”、“约”或“近似”一般应当表示在给定值或范围的20％以内、10％以内、在5、4、3、2或1％以内。给定的数值的数量是近似的，这意味着如果不明确说明可以推断术语“大约”、“约”或“近似”。
术语“依那西普”或“依那西普单体”或“单体”是的同义词。它是指一种多肽，其是由连接于人IgG1的Fc部分的人75千道尔顿(P75)肿瘤坏死因子受体(TNFR)的胞外配体结合部分组成的二聚融合多肽。它由934个氨基酸组成并且具有约150千道尔顿的表观分子量。为了本申请的目的，术语“依那西普”也包括在氨基酸结构中具有不显著地影响依那西普的功能、效力、或亲合力的小修改(包括氨基酸的缺失，添加和/或取代)的依那西普。术语“依那西普”包括的所有形式和制剂，包括但不限于浓缩的制剂、可注射的即用型制剂、用水、乙醇和/或其他成分再造的制剂。术语依那西普还意图包括用于商业的依那西普的生物仿制药或生物改进变体。例如，依那西普的生物仿制药或生物改进变体可以具有与商业略微不同的糖基化分布。另外，在商业中发现的依那西普的生物仿制药或生物改进变体可以表现出构成活性依那西普成分的聚集体的量的减少。
如本文所用的术语“单体”意图表示上面提及的二聚依那西普融合蛋白。
术语“葡甲胺”是指具有化学式H3NHCH2(CHOH)4CH2OH的化合物，也称为1-去氧-1-甲基氨基山梨醇；N-甲基-d-葡糖胺；和1-脱氧-1-甲基氨基-D-葡糖醇。
术语“甘露糖基甘油酸酯”、“甘露糖基乳酸酯”、“甘露糖基乙醇酸酯”和“磷酸二甘油酯”是本领域公知的并具有其通常接受的含义。以下参考文献描述这些化合物的一些细节：Faria等人,Carbohydrate Res.2008,343:3025-3033；Borges等人,Extremophiles 2002,6:209-216；Faria et al.,ChemBioChem 2003,4:734-741；Sawangwan et al.,Biotechnol.J.2010,5:187-191；和Pais等人,J.Mol.Biol.2009,394:237-250。本申请通过引用并入包含在这些参考文献中的这些化合物的描述。术语“丝氨酸”指的是密码子是UCU、UCC、UCA、UCG、AGU和AGC的氨基酸。
术语“脯氨酸”指的是密码子是CCU、CCC、CCA和CCG的α-氨基酸。
术语“谷氨酸盐”是指谷氨酸(Glu)的羧酸根阴离子或盐。为了本申请的目的，术语“谷氨酸盐”还包括谷氨酸本身。
术语“糖”是指单糖、二糖和多糖。糖的实例包括但不限于蔗糖、葡萄糖、右旋糖和其他。
术语“多元醇”是指含有多个羟基的醇。多元醇的例子包括但不限于甘露醇、山梨醇等等。
术语“金属离子”是指带有正或负净电荷的金属原子。为了本申请的目的，术语“金属离子”还包括金属离子的来源，包括但不限于金属盐。
术语“长期储存”应理解为是指该药物组合物可以储存三个月或以上，六个月或以上，以及优选为一年或以上。长期保存也可以理解为是指该药物组合物作为液体在2-8℃下储存，或冷冻，例如，在-20℃，或者更冷。还预期的是，可以冷冻和解冻该组合物一次以上。
关于长期储存的术语“稳定的”或“稳定化的”应理解为是指包含在药物组合物中的依那西普的活性相对于该组合物在开始储存时的活性，损失不超过20％，或更优选15％，或甚至更优选10％，最优选为5％。稳定性也表示依那西普制剂在长期储存之后出现不溶性微粒的趋势降低。
术语“哺乳动物”包括但不限于人。
术语“药学上可接受的载体”是指无毒的固体、半固体或液体填充剂、稀释剂、封装材料、制剂助剂或任何常规类型的赋形剂。药学上可接受的载体在所使用的剂量和浓度上对于接受者是无毒的并且与制剂的其他成分兼容。
术语“组合物”是指通常包含载体(诸如药学上可接受的载体)或者本领域常规的赋形剂并且适于为了治疗、诊断或预防目的而对受试者给药的混合物。其可以包括其中多肽或多核苷酸存在于细胞或培养基中的细胞培养物。例如，用于口服给药的组合物可形成溶液、悬浮液、片剂、丸剂、胶囊、缓释制剂、口服灌洗剂或粉末。
术语“药物组合物”和“制剂”可互换使用。
术语“治疗”是指用于哺乳动物中的疾病的救济方法的任何施用或应用并且包括抑制疾病、阻止其发展、缓解疾病，例如，通过引起复原、或者恢复或修复丢失、缺失或有缺陷的功能；或者刺激低效过程。该术语包括获得所需的药理学和/或生理学效果，覆盖哺乳动物中的病理状态或病症的任何治疗。该效果就完全或部分地防止病症或其症状方面而言可以是预防性的和/或就病症的部分或完全治愈和/或导致该病症的不利影响方面而言可以是治疗性的。其包括：(1)预防可能易患病症但是还没有症状的受试者发生或者复发该病症，(2)抑制该病症，诸如阻止其发展，(3)停止或终止该病症或至少其相关症状，以使宿主不再遭受该病症或其症状，如引起病症或其症状的消退，例如通过恢复或修复丢失、缺失或有缺陷的功能，或刺激低效过程，或(4)减轻、缓解或改善该病症，或与其相关联的症状，其中广义上的改善是指至少参数量值降低，诸如炎症、疼痛和/或肿瘤大小。
术语“疾病”是指需要医疗干预或期望医疗干预的任何病况、感染、病症或综合征。这种医疗干预可以包括治疗、诊断和/或预防。
术语“治疗有效量”是指当对活的受试者施用时，对该活的受试者实现了所希望的效果的量。例如，用于施用至活的受试者的本发明的多肽的有效量是预防和/或治疗整合素αvβ3-介导的疾病的量。确切的量将取决于治疗的目的，并可由本领域技术人员使用已知的技术确定。如本领域公知的，对于全身与局部递送、年龄、体重、一般健康状况、性别、饮食、给药时间、药物相互作用和病症的严重程度的调整可能是必要的，并且可通过本领域的技术人员用常规实验确定。
术语“T1”是指依那西普制剂已在40℃下储存约一周的时间点。
术语“T2”是指依那西普制剂已在40℃下储存约二周的时间点。
术语“T4”是指依那西普制剂已在40℃下储存约四周的时间点。
本发明的实施方式
当以长期的方式储存含有依那西普的药物组合物(包括依那西普的含水制剂和冻干制剂)时，由于依那西普单体的不稳定，依那西普的活性可能通过聚集和/或降解(包括形成片段和低聚物)而丢失或减少。此外，该制剂可能随着时间的推移显示出不溶性微粒。因此，本发明提供了实现依那西普的稳定的长期储存并且不溶性微粒的减少的依那西普的含水制剂的若干实施方式，从而使依那西普在储存过程中无论是液体还是冷冻状态都稳定。所提供的制剂包括但不限于不含有精氨酸和不需要任何额外的步骤(如再水化)的制剂。
下面更加详细地说明这些实施方式。
依那西普
所有本发明的组合物考虑使用依那西普，包括用于商业的依那西普的生物仿制药或生物改进药(biobetter)变体。如在本申请的背景技术部分说明的，依那西普是由连接于人IgG1的Fc部分的人75千道尔顿(p75)肿瘤坏死因子受体(TNFR)的胞外配体结合部分组成的二聚融合多肽。依那西普由934个氨基酸组成。依那西普的Fc组分包含重链恒定结构域2(CH2)、重链恒定结构域3(CH3)和人IgG1的铰链区。Fc结构域可以包含一种或所有的上述结构域。
可以由表达依那西普的活的宿主细胞产生适于储存在本发明的药物组合物中的依那西普，如抗体情况下的杂交瘤，或者在融合多肽或抗体的情况下已经经过基因工程化以产生多肽的宿主细胞。基因工程化细胞以产生多肽的方法是本领域公知的。参见例如Ausubel等人,eds.(1990),Current Protocols in MolecularBiology(Wiley,New York)。这些方法包括将编码和允许多肽表达的核酸引入到活的宿主细胞内。这些宿主细胞可以是在培养基中生长的细菌细胞、真菌细胞，或优选地，动物细胞。细菌宿主细胞包括但不限于大肠杆菌细胞。合适的大肠杆菌菌株的实例包括：HB101、DH5.阿尔法、GM2929、JM109KW251、NM538、NM539和未能切割外源DNA的任何大肠杆菌菌株。可使用的真菌宿主细胞包括但不限于酿酒酵母、毕赤酵母和曲霉属真菌细胞。可以使用的动物细胞系的一些实例是CHO、VERO、BHK、HeLa、Cos、MDCK、293、3T3和W138。利用本领域的技术人员公知的方法可以建立新的动物细胞系(例如，通过转化、病毒感染、和/或选择)。任选地，依那西普可以由宿主细胞分泌进入培养基。
可以通过任何标准方法进行所表达的依那西普的纯化。当依那西普在细胞内产生时，通过例如离心或超滤去除颗粒碎片。当依那西普分泌到培养基内时，可首先使用标准的多肽浓缩过滤器浓缩来自这种表达系统的上清液。也可以加入蛋白酶抑制剂以抑制蛋白水解并且可以包括抗生素以防止微生物的生长。
可以使用例如羟基磷灰石层析、凝胶电泳、透析和亲和层析、以及已知的或尚待发现的纯化技术的任何组合纯化依那西普，包括但不限于蛋白A层析、离子交换柱上的分级、乙醇沉淀、反相HPLC、硅胶层析、肝素层析、阴离子或阳离子交换树脂层析(如聚天冬氨酸柱)、层析聚焦、SDS-PAGE和硫酸铵沉淀。
I.用表面活性剂，加上丝氨酸、脯氨酸或者谷氨酸盐稳定化的依那西普
在一个实施方式中，本发明提供了包括依那西普、聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂以及抑制依那西普的不稳定性，聚集和/或片段化的稳定剂的稳定的含水药物组合物，其中，所述稳定剂包括选自丝氨酸、脯氨酸和谷氨酸盐的化合物。在优选的实施方式中，稳定剂包括谷氨酸盐。
不打算束缚于本发明的任何特定的理论，据认为，丝氨酸、脯氨酸和谷氨酸盐充当稳定剂以减少依那西普以不希望的三元或四元复合物的方式相结合的倾向，并因此减少依那西普的聚集。据认为，聚集的减少持续很长一段时间，例如两年或超过两年。据认为，丝氨酸、脯氨酸和谷氨酸盐能稳定包含依那西普的含水药物组合物，因为它们被从该蛋白质的表面排除，从而导致净构象稳定。丝氨酸、脯氨酸和/或谷氨酸盐的稳定化作用包括但不限于有利于减少含有依那西普单体的制剂中的依那西普单体的聚集。
本发明的药物组合物可以通过组合纯化的依那西普和所述的稳定剂来制备。另外，根据需要可以添加缓冲液、张力调节剂和额外的赋形剂以及其他常用的非活性成分。为简单起见，在后面的说明书中更充分地讨论这些。本领域的普通技术人员应该理解可以以任何适当的顺序组合待纳入组合物的各种组分。例如，可以首先、中间或最后添加缓冲剂，并且也可以首先、中间或最后添加张力调节剂。本领域的普通技术人员也应该理解一些这些化学物质在某些组合中可能不相容，因此相应地，很容易用具有类似性质但在相关的混合物中相容的不同化学物质代替。
在优选的实施方式中，在所提供的制剂中的丝氨酸、脯氨酸或谷氨酸盐稳定剂的浓度优选高达约150mM。
丝氨酸、脯氨酸和谷氨酸盐购自商业供应商。
在其中稳定剂包括表面活性剂和谷氨酸盐的实施方式中，本发明的制剂可以包括约0.01至约0.05％w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂；约25至约50mg/ml的依那西普；高达150mM的谷氨酸盐；小于约6wt％的蔗糖；任选地高达约100mM的NaCl；约1至约30mM的磷酸钠，以及其中该制剂具有pH6.0至约pH7.0，更优选约6.0至约6.6，以及最优选约6.3至约6.5。
在其中稳定剂包括表面活性剂和丝氨酸的实施方式中，本发明的制剂可以包括约0.01至约0.05％w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂；约25至约50mg/ml的依那西普；小于约150mM的丝氨酸；约0.5至约3wt％的蔗糖；约1至约30mM的磷酸钠，并且其中该制剂具有pH 6.0至约pH 7.0，且更优选约6.0至约6.6，以及最优选约6.3至约6.5。
在其中稳定剂包括脯氨酸的实施方式中，本发明的制剂可以包括约0.01至约0.05％w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂；约25至约50mg/ml的依那西普；小于约150mM的脯氨酸；约0.5至约3wt％的蔗糖；约1至约30mM的磷酸钠，约15至约100mM的NaCl；并且其中该制剂具有pH 6.0至约pH 7.0，且更优选约6.0至约6.6，以及最优选约6.3至约6.5。
包括丝氨酸、脯氨酸或谷氨酸盐的根据本发明的依那西普制剂优选以以下的T2时的SEC分析为特征：约80至约95wt％的单体含量；小于约4wt％的(多种)聚集体含量；和少于约8wt％的片段3含量。
在包含用于稳定的丝氨酸、脯氨酸或谷氨酸盐的制剂中，该制剂更优选特征在于：
(a)大于约90、91、92、93、94、95、96或97wt％的单体含量；和小于约3、2或1wt％的(多种)聚集体含量的T4时的SEC分析；以及
(b)T2时的HIC分析，其中由HIC色谱的峰1表示的组合物的量为小于约3、2或1wt％；由HIC色谱的峰2表示的组合物的量大于80、81、82、83、84或85wt％；以及由HIC色谱的峰3表示的组合物的量小于约20、19、18、17、16、15、14或13wt％；以及
(c)T4时的HIC分析，其中由HIC色谱的峰1表示的组合物的量小于约3、2或1wt％；由HIC色谱的峰2表示的组合物的量大于80、81、82、83、84或85wt％；以及由HIC色谱的峰3表示的组合物的量小于20、19、18、17、16、15、14或13wt％。
在下面的实施例中定义术语“SEC”、“T2”、“T4”、“HIC”、“单体含量”、“(多种)聚集体”和“片段3”、“峰1”、“峰2”和“峰3”。
包含用于稳定的表面活性剂加丝氨酸、脯氨酸或谷氨酸盐的特别优选的制剂优选以具有如下T4或T2时的HIC分析为特征，其中由HIC色谱的峰1表示的组合物的量小于约1％；由HIC色谱的峰2表示的组合物的量大于约95wt.％，并且最优选大于约99wt％；并且由HIC色谱的峰3表示的组合物的量小于约1wt％。
利用使依那西普稳定的表面活性剂加丝氨酸、脯氨酸和/或谷氨酸盐的进一步优选的制剂包括约50mg/ml的依那西普；小于约150mM的丝氨酸、脯氨酸或谷氨酸盐，并且最优选谷氨酸盐；约0至3％的蔗糖；约1至30mM磷酸缓冲液，并且具有约6.0至6.6的pH；并且特征在于：大于约97wt％的单体含量和小于约1wt％的(多种)聚集体含量的T4时的SEC分析；T2时的HIC分析，其中由HIC色谱的峰1表示的组合物的量小于约3wt％；由HIC色谱的峰2表示的组合物的量大于约82wt％；以及由HIC色谱的峰3表示的组合物的量小于约15wt％；以及T4时的HIC分析，其中由HIC色谱的峰1表示的组合物的量小于约2wt％；由HIC色谱的峰2表示的组合物的量大于约84wt％；并且由HIC色谱的峰3表示的组合物的量小于约13wt％。
进一步优选的由谷氨酸盐稳定的依那西普制剂包括：约0.01至约0.05％w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂；约50mg/ml的依那西普；约120mM的谷氨酸盐；约1％的蔗糖，以及约25mM的磷酸盐；具有约6.3至约6.5的pH，并表现出上面提及的SEC和HIC分析特性。
虽然本发明不排除使用精氨酸，然而根据本发明的包含约0.01至约0.05％w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂；加上用于额外的稳定化的丝氨酸、脯氨酸和/或谷氨酸盐的依那西普制剂优选不含或基本上不含精氨酸。
II.用表面活性剂加金属离子稳定化的依那西普
在另一个实施方式中，本发明提供包括依那西普、约0.01至约0.05％w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂；以及抑制依那西普的不稳定性、聚集和/或片段化的稳定剂的稳定化的含水药物组合物，其中该稳定剂包括使稳定化的金属离子。
据认为，如钙、镁、和锌的金属离子减少依那西普以不希望的三元或四元复合物的方式相结合的倾向，并因此减少依那西普的聚集。据认为，聚集的减少持续很长一段时间，例如两年或超过两年。不希望受限于特定的理论，据认为由于金属可以结合至配体的正确几何结构发生的天然态，因此金属离子能够稳定含有依那西普的含水药物组合物。这样做时，存在天然态的净稳定。一旦蛋白质展开，该结合位点丢失，并且变性状态在自由能方面相对未受影响。结果是构象的净稳定，从而提高长期储存。此外，金属结合也可提高蛋白质的胶体稳定性，导致聚集降低和溶解度增加。金属离子的稳定化作用可以不限于减少聚集体，也可能涉及制剂中的依那西普单体的不稳定性的其它方面。
在优选的实施方式中，金属离子选自钙、镁、锌以及它们的组合。在甚至更优选的实施方式中，钙、镁和锌分别作为氯化钙、氯化镁和氯化锌提供。
本发明的药物组合物可以通过组合纯化的依那西普、约0.01至约0.05％w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂；和金属离子来制备。另外，根据需要可以添加缓冲液、张力调节剂和额外的赋形剂以及其他常用的非活性成分。为简单起见，在后面的说明书中更充分地讨论这些。本领域的普通技术人员应该理解可以以任何适当的顺序组合待纳入组合物的各种组分。例如，可以首先、中间或最后添加缓冲剂，并且也可以首先、中间或最后添加张力调节剂。本领域的普通技术人员也应该理解一些这些化学物质在某些组合中可能不相容，因此相应地，很容易用具有类似性质但在相关的混合物中相容的不同化学物质代替。
在优选的实施方式中，在所提供的制剂中的金属离子的浓度优选为约1mM至0.5M，更优选大约1mM至约100mM，更优选约2mM至约20mM，并且还更优选约2至10mM。
金属离子源购自商业供应商。
在利用表面活性剂加氯化钙稳定化的实施方式中，本发明的依那西普制剂可以包括约0.01至约0.05％w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂；约25至约50mg/ml的依那西普；高达约5mM的氯化钙；任选地约0.5至6wt％的蔗糖或海藻糖；任选地约0至100mM的NaCl；任选地高达约10mM的木糖醇；约1至约30mM的磷酸钠；其中该组合物具有约6.0至约7.0，更优选为约6.0至约6.6以及最优选约6.3至约6.5的pH。
在利用氯化镁稳定化的实施方式中，本发明的依那西普制剂可以包括约0.01至约0.05％w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂；约25至约50mg/ml的依那西普；约1mM至约20mM的氯化镁；任选高达约6wt％的蔗糖；约25至150mM的NaCl；约1至约30mM的磷酸钠；其中该组合物具有约6.0至约7.0，更优选为约6.0至约6.6并且最优选约6.3至约6.5的pH。
用金属离子稳定化的组合物优选以具有如下T2时的SEC分析为特征：约80wt％至约95wt％的单体含量；小于约4wt％的(多种)聚集体含量的T2时的SEC分析；和少于约8wt％的片段3含量的T2时的SEC分析。
更优选地根据本发明的包含使稳定化的金属离子的依那西普制剂的特征在于:
(a)大于约90、91、92、93、94、95、96或97wt％的单体含量；和小于约3、2或1wt％的(多种)聚集体含量的T4时的SEC分析；以及
(b)T2时的HIC分析，其中由HIC色谱的峰1表示的组合物的量为小于约3、2或1wt％；由HIC色谱的峰2表示的组合物的量大于80、81、82、83、84或85wt％；以及由HIC色谱的峰3表示的组合物的量小于约20、19、18、17、16、15、14或13wt％；以及
(c)T4时的HIC分析，其中由HIC色谱的峰1表示的组合物的量小于约3、2或1wt％；由HIC色谱的峰2表示的组合物的量大于80、81、82、83、84或85wt％；以及由HIC色谱的峰3表示的组合物的量小于20、19、18、17、16、15、14或13wt％。
包含用于稳定化的表面活性剂加金属离子的本发明的依那西普制剂更优选以具有如下T4或T2时的HIC分析为特征，其中由HIC色谱的峰1表示的组合物的量小于约1％；由HIC色谱的峰2表示的组合物的量大于约95wt％并且最优选大于约99wt％；并且由HIC色谱的峰3表示的组合物的量小于约1wt％。
在下面的实施例中定义术语“SEC”、“T2”、“T4”、“HIC”、“单体含量”、“(多种)聚集体”和“片段3”、“峰1”、“峰2”和“峰3”。
用表面活性剂加氯化钙稳定化的优选的依那西普制剂包括：约0.01至约0.05％w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂；约50mg/ml的依那西普；1至5mM的氯化钙；约1至30mM的磷酸钠；约0至100mM的NaCl；约0.5％至5％的蔗糖或海藻糖或它们的组合；且其中该组合物具有约6.0至6.6的pH并且特征在于：大于约97wt％的单体含量和小于约1wt％的(多种)聚集体含量的T4时的SEC分析；T2时的HIC分析，其中由HIC色谱的峰1表示的组合物的量小于约4wt％；由HIC色谱的峰2表示的组合物的量大于约82wt％；以及由HIC色谱的峰3表示的组合物的量小于约15wt％；以及T4时的HIC分析，其中由HIC色谱的峰1表示的组合物的量小于约2wt％；由HIC色谱的峰2表示的组合物的量大于约85wt％；并且由HIC色谱的峰3表示的组合物的量小于约13wt％。
用表面活性剂加氯化镁稳定化的优选的依那西普制剂包括：约0.01至约0.05％w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂；约1mM至约20mM的氯化镁；任选地高达约6wt％的蔗糖；约25至150mM的NaCl；约1至约30mM的磷酸钠；其中该组合物具有约6.0至6.6的pH并且其中该组合物的特征在于：大于约97wt％的单体含量和小于约1wt％的(多种)聚集体含量的T4时的SEC分析；T2时的HIC分析，其中由HIC色谱的峰1表示的组合物的量小于约4wt％；由HIC色谱的峰2表示的组合物的量大于约85wt％；以及由HIC色谱的峰3表示的组合物的量小于约14wt％；以及T4时的HIC分析，其中由HIC色谱的峰1表示的组合物的量小于约2wt％；由HIC色谱的峰2表示的组合物的量大于约85wt％；并且由HIC色谱的峰3表示的组合物的量小于约14wt％。
在使用表面活性剂加氯化钙用于稳定化的本发明的特别优选的实施方式中，具有以上所提及的分析性质的稳定的依那西普制剂包括：约50mg/ml的依那西普；约2mM的氯化钙；约15mM的磷酸钠；约75mM的氯化钠；以及约3wt％的蔗糖；其中该制剂具有约6.3至6.5的pH。
在使用表面活性剂加氯化镁用于稳定化的本发明的进一步优选的实施方式中，具有以上所提及的分析性质的稳定化的依那西普制剂包括：约0.01至约0.05％w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂；约50mg/ml的依那西普；约10mM的氯化镁；约15mM的磷酸钠；约75mM的氯化钠；以及约3wt％的蔗糖；并且具有约6.3至6.5的pH。
在下面的实施例中定义术语“SEC”、“T2”、“T4”、“HIC”、“单体含量”、“(多种)聚集体”和“片段3”、“峰1”、“峰2”和“峰3”。
虽然根据本发明的表面活性剂加上稳定化的金属离子的使用不排除使用精氨酸，根据本发明的包括用于稳定化的金属离子的依那西普制剂优选不含或基本上不含精氨酸。
III.用表面活性剂加上离子多元醇衍生物赋形剂稳定化的依那西普
在另一个实施方式中，本发明提供包括依那西普、约0.01至约0.05％w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂；和离子多元醇衍生物赋形剂的稳定的含水制剂，其中所述赋形剂选自由葡甲胺(N-甲基-D-葡糖胺)、甘露糖基甘油酸酯、葡糖基甘油酸酯、甘露糖基乳酸酯、甘露糖基乙醇酸酯和磷酸二甘油酯组成的组。
优选地，在该实施方式或方面中，本发明是含水的稳定的依那西普制剂，包括：依那西普；约0.01至约0.05％w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂；和阻止制剂中的依那西普的不稳定、聚集和片段化的稳定化成分，所述稳定化成分由(a)葡甲胺；或(b)葡甲胺与蔗糖的组合；或(c)葡甲胺与氯化钠的组合；或(d)葡甲胺与氯化钠和蔗糖的组合组成。
葡甲胺是常用的小分子赋形剂。现在我们惊奇地发现，葡甲胺也能稳定含有诸如依那西普的大蛋白的含水药物组合物。
据认为，葡甲胺减少依那西普以不希望的三元或四元复合物的方式相结合的倾向，并因此减少依那西普的聚集。据认为，聚集的减少持续很长一段时间，例如两年或超过两年。不希望受限于特定的理论，据认为，葡甲胺能够通过三种不同机制的组合稳定化包含依那西普的含水药物组合物。首先，葡甲胺可以以甘露醇、蔗糖和山梨醇增加构象稳定性的相同方式充当被排除的溶质。第二，带电溶质可以改变胶体稳定性，从而减少自结合的倾向，从而减缓聚合。第三，这些离子多元醇衍生物，接近中性pH时带电荷，可以充当盐溶(salting-in)试剂，如精氨酸那样，潜在地再增溶聚集体。葡甲胺的稳定作用不限于减少聚集体，也可能涉及包含依那西普单体的制剂中的依那西普单体的稳定化的其它方面。
本发明的药物组合物可以通过组合纯化的依那西普、约0.01至约0.05％w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂；和离子多元醇衍生物(优选葡甲胺)来制备。另外，根据需要可以添加缓冲液、张力调节剂和额外的赋形剂以及其他常用的非活性成分。为简单起见，在后面的说明书中更充分地讨论这些。本领域的普通技术人员应该理解可以以任何适当的顺序组合待纳入组合物的各种组分。例如，可以首先、中间或最后添加缓冲剂，并且也可以首先、中间或最后添加张力调节剂。本领域的普通技术人员也应该理解一些这些化学物质在某些组合中可能不相容，因此相应地，很容易用具有类似性质但在相关的混合物中相容的不同化学物质代替。
在优选的实施方式中，在所提供的制剂中的葡甲胺的浓度优选为约0.1％(w/v)至40％(w/v)，更优选为约1％至约20％，更优选为约2％至约10％，甚至更优选为约2％至约5％。
葡甲胺购自商业供应商。
优选的实施方式包括约25至约75mg/ml的依那西普，约0.01至约0.05％w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂；约1-30mM的磷酸钠；高达约10％的葡甲胺；任选地高达约5wt％的蔗糖；和任选地高达约100mM的氯化钠，其中组合物具有约6.0至7.0的pH，且优选约6.0至约6.6的pH，以及最优选约6.3至约6.5的pH。
表面活性剂/葡甲胺稳定化的依那西普组合物优选以如下T2时的SEC分析为特征：大于约85wt.％的单体含量；小于约3wt％的(多种)聚集体含量；和少于约8wt.％的片段3含量。
其中存在用于稳定化的诸如葡甲胺的离子多元醇衍生物的更优选的依那西普制剂的特征在于：
(a)大于约90、91、92、93、94、95、96或97wt％的单体含量；和小于约3、2或1wt％的(多种)聚集体含量的T4时的SEC分析；以及
(b)T2时的HIC分析，其中由HIC色谱的峰1表示的组合物的量为小于约4、3、2或1wt％；由HIC色谱的峰2表示的组合物的量大于80、81、82、83、84或85wt％；以及由HIC色谱的峰3表示的组合物的量小于约20、19、18、17、16、15、14或13wt％；以及
(c)T4时的HIC分析，其中由HIC色谱的峰1表示的组合物的量小于约3、2或1wt％；由HIC色谱的峰2表示的组合物的量大于80、81、82、83、84或85wt％；以及由HIC色谱的峰3表示的组合物的量小于20、19、18、17、16、15、14或13wt％。
用表面活性剂加上葡甲胺稳定化的特别优选的依那西普制剂以如下T4或T2时的HIC分析为特征，其中由HIC色谱的峰1表示的组合物的量小于约1％；由HIC色谱的峰2表示的组合物的量大于约99wt％；并且由HIC色谱的峰3表示的组合物的量小于约1wt％。
在下面的实施例中定义术语“SEC”、“T2”、“T4”、“HIC”、“单体含量”、“(多种)聚集体”和“片段3”、“峰1”、“峰2”和“峰3”。
在其它实施方式中，在所述制剂，可以用山梨糖醇、甘油或甘露醇的另一离子多元醇衍生物代替葡甲胺，所述另一离子多元醇衍生物诸如甘露糖基甘油酸酯、葡糖基甘油酸酯、甘露糖基乳酸酯、甘露糖基乙醇酸酯和磷酸二甘油酯(在约0.1％至约40％)。
包含约0.01至约0.05％w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂，且不含精氨酸并且呈现如上所述的分析性质的优选的葡甲胺稳定化的依那西普制剂包括约25至约75mg/ml的依那西普；约0.5wt.％的葡甲胺；约25mM的磷酸盐；约1％的蔗糖；以及约100mM的氯化钠。
不含精氨酸并且呈现如上所述的分析性质的进一步优选的表面活性剂/葡甲胺稳定化的依那西普制剂包括约0.01至约0.05％w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂；约50mg/ml的依那西普；约5wt.％的葡甲胺；约25mM的磷酸盐。
虽然本发明不排除使用精氨酸，但是根据本发明的包括用于稳定化的诸如葡甲胺的离子多元醇衍生物的依那西普制剂优选不含或基本上不含精氨酸。
IV.用表面活性剂以及糖和多元醇的组合稳定化的依那西普
在又一个实施方式中，本发明提供包括依那西普、约0.01至约0.05％w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂、糖和多元醇的稳定的含水制剂。
据认为，糖和多元醇的组合减少依那西普以不希望的三元或四元复合物的方式相结合的倾向，并因此减少依那西普的聚集。据认为，聚集的减少持续很长一段时间，例如两年或超过两年。因此，据认为，糖和多元醇的组合能够稳定含有依那西普的含水药物组合物。不希望受限于特定的理论，据认为，糖和多元醇的组合对于使依那西普稳定化的目的是协同的，因为即使被排除的溶质通常存在于主体(bulk)中而不是蛋白质的表面上，事实为在糖/多元醇和蛋白质之间仍将存在相互作用。这些相互作用在糖和较小的多元醇之间可能有所不同。此外，在高浓度时，这两种添加剂会改变其它添加剂的热力学活性，从而导致与从每个单独的组分观察的溶液行为不同的溶液行为。如下面进一步的讨论，多元醇可以取代胺。
本发明的药物组合物可以通过组合纯化的依那西普、约0.01至约0.05％w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂；糖，和多元醇制备。另外，根据需要可以添加缓冲液、张力调节剂和额外的赋形剂以及其他常用的非活性成分。为简单起见，在后面的说明书中更充分地讨论这些。本领域的普通技术人员应该理解可以以任何适当的顺序组合待纳入组合物的各种组分。例如，可以首先、中间或最后添加缓冲剂，并且也可以首先、中间或最后添加张力调节剂。本领域的普通技术人员也应该理解一些这些化学物质在某些组合中可能不相容，因此相应地，很容易用具有类似性质但在相关的混合物中相容的不同化学物质代替。
在一些实施方式中，糖和多元醇可共同发挥作用，与两种金属形成具有任一金属都不呈现的性质的合金的方式相同。应当理解的是，同样的方法会导致同时使用氨基酸(诸如脯氨酸、丝氨酸、或者谷氨酸盐)和糖以实现比任一赋形剂本身可以提供的更好的稳定性特征。据认为合金中的糖与多元醇(或氨基酸)的优选比率介于5：1至1：5之间。
据认为最优选的糖是蔗糖、海藻糖、乳糖、棉子糖和麦芽糖。
据认为最优选的多元醇是山梨醇、甘露醇、甘油和丙二醇。
据认为优选的氨基酸是脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸和谷氨酸盐。
在优选的实施方式中，在所提供的制剂中的糖的浓度优选为约0.1％(w/v)至40％，更优选约1％至约20％，更优选约2％至约10％，并还更优选约5％至9％。
在优选的实施方式中，在所提供的制剂中的多元醇的浓度优选为约0.1％至30％，更优选约1％至约10％，并且还更优选为约2％至约5％。
糖和多元醇购自商业供应商。
在一个实施方式中，本发明的制剂包括约25至约75mg/ml的依那西普；约0.01至约0.05％w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂；约1％至约10％的蔗糖；约1％至约5％的甘露醇；约10mM至约50mM的磷酸钠；以及约0mM至约100mM的NaCl，处于约pH 6.3至约pH 7.0。
在另一个实施方式中，在制剂中可以用诸如海藻糖的另一种糖(为约1％至约10％)替换蔗糖。在又一个实施方式中，在制剂中可以用如山梨醇的另一种多元醇替换甘露醇(为约1％至约5％)。
虽然本发明不排除使用精氨酸，但是包含用于稳定化的糖和多元醇(或氨基酸)的依那西普制剂优选不含或基本上不含精氨酸。
V.用表面活性剂加木糖醇稳定化的依那西普
在又一个实施方式中，本发明提供一种包括依那西普、约0.01至约0.05％w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂、以及抑制依那西普的不稳定性、聚集和/或片段化的稳定剂的稳定化的含水药物组合物，其中该稳定剂包含木糖醇或木糖醇和葡甲胺的组合。
不希望受限于任何特定的理论，据认为，木糖醇减少依那西普以不希望的三元或四元复合物的方式相结合的倾向，并因此减少依那西普的聚集。据认为，聚集的减少持续很长一段时间，例如两年或超过两年。木糖醇的稳定化效果不限于聚集体的减少，也可能涉及含有依那西普单体的制剂中的依那西普单体的稳定化的其他方面。
优选的含有用于稳定化的木糖醇的稳定化的依那西普制剂由约0.01至约0.05％w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂、加上木糖醇和葡甲胺的组合提供。
本发明的药物组合物可以通过组合纯化的依那西普、约0.01至约0.05％w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂；和木糖醇、或者木糖醇和葡甲胺的组合制备。另外，根据需要可以添加缓冲液、张力调节剂和额外的赋形剂以及其他常用的非活性成分。为简单起见，在后面的说明书中更充分地讨论这些。本领域的普通技术人员应该理解可以以任何适当的顺序组合待纳入组合物的各种组分。例如，可以首先、中间或最后添加缓冲剂，并且也可以首先、中间或最后添加张力调节剂。本领域的普通技术人员也应该理解一些这些化学物质在某些组合中可能不相容，因此相应地，很容易用具有类似性质但在相关的混合物中相容的不同化学物质代替。
本发明的木糖醇稳定化的依那西普制剂可以包括约25至75mg/ml的依那西普；约0.01至约0.05％w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂；约1-10wt.％的木糖醇；约1至30mM的磷酸钠；任选高达约5wt％的葡甲胺；任选高达约5mM的NaCl；和任选高达约5wt％的蔗糖。
额外地包含葡甲胺、氯化钠和蔗糖的表面活性剂/木糖醇稳定化的依那西普制剂除了木糖醇之外还可以包括约1-3mM的NaCl；约1至5wt％的蔗糖；和量为组合物的约1-5wt％的葡甲胺。
在进一步的实施方式中，木糖醇稳定化的依那西普制剂可以包括：约25至约75mg/ml的依那西普；约0.01至约0.05％w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂；以及抑制依那西普的不稳定性、聚集和/或片段化的稳定剂，其中稳定剂是含量构成组合物的高达约10wt.％的木糖醇，并且其中该组合物以如下T2时的SEC分析为特征：约80wt％至约95wt％的单体含量；小于约4wt％和优选小于约3％的聚集体含量的T2时的SEC分析；小于约8wt％以及优选小于约6wt％的片段3含量的T2时的SEC分析；其中该组合物具有约6.0至约pH7.0，更优选为约6.0至约6.6，最优选约6.3至约6.5的pH。
在含有表面活性剂加木糖醇或表面活性剂加木糖醇与葡甲胺的组合的稳定化的依那西普制剂(诸如以上提及的那些)中，该制剂更优选特征在于：
(a)大于约90、91、92、93、94、95、96或97wt％的单体含量；和小于约3、2或1wt％的(多种)聚集体含量的T4时的SEC分析；以及
(b)T2时的HIC分析，其中由HIC色谱的峰1表示的组合物的量为小于约3、2或1wt％；由HIC色谱的峰2表示的组合物的量大于80、81、82、83、84或85wt％；以及由HIC色谱的峰3表示的组合物的量小于约20、19、18、17、16、15、14或13wt％；以及
(c)T4时的HIC分析，其中由HIC色谱的峰1表示的组合物的量小于约3、2或1wt％；由HIC色谱的峰2表示的组合物的量大于80、81、82、83、84或85wt％；以及由HIC色谱的峰3表示的组合物的量小于20、19、18、17、16、15、14或13wt％。
在下面的实施例中定义术语“SEC”、“T2”、“T4”、“HIC”、“单体含量”、“(多种)聚集体”和“片段3”、“峰1”、“峰2”和“峰3”。
包含约0.01至约0.05wt％w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂；加上木糖醇，或者木糖醇与葡甲胺的组合的特别优选的制剂以具有如下T4或T2时的HIC分析为特征，其中由HIC色谱的峰1表示的组合物的量小于约1％；由HIC色谱的峰2表示的组合物的量大于约95wt.％并且优选大于约99wt％；并且由HIC色谱的峰3表示的组合物的量小于约1wt％。在详细实施例中提供具体的木糖醇稳定化的制剂。
虽然本发明不排除使用精氨酸，但是根据本发明的包含用于稳定化的表面活性剂加木糖醇的依那西普制剂不含或基本上不含精氨酸。
VI.用表面活性剂加NaCl稳定化的依那西普制剂
在又一个实施方式中，本发明提供一种稳定化以减少依那西普的不稳定、聚集和/或片段化的含水依那西普制剂，所述制剂包括约25至约75mg/ml的依那西普，约0.01至约0.05％w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂；以及一种或者多种稳定剂，其中稳定剂选自(ⅰ)氯化钠和(ii)氯化钠与蔗糖或海藻糖的组合；以及(iii)氯化钠，蔗糖和海藻糖的组合。
本发明的药物组合物可以通过组合纯化的依那西普、约0.01至约0.05％w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂；和氯化钠，可选地与蔗糖和/或海藻糖来制备。另外，根据需要可以添加缓冲液、张力调节剂和额外的赋形剂以及其他常用的非活性成分。为简单起见，在后面的说明书中更充分地讨论这些。本领域的普通技术人员应该理解可以以任何适当的顺序组合待纳入组合物的各种组分。例如，可以首先、中间或最后添加缓冲剂，并且也可以首先、中间或最后添加张力调节剂。本领域的普通技术人员也应该理解一些这些化学物质在某些组合中可能不相容，因此相应地，很容易用具有类似性质但在相关的混合物中相容的不同化学物质代替。
在利用表面活性剂加氯化钠稳定化的实施方式中，本发明的依那西普制剂可以包括约25至75mg/ml的依那西普，约0.01至约0.05％w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂；高达约150mM的氯化钠，约1至约30mM的磷酸钠；以及约0至5wt％的蔗糖或者海藻糖或者它们的组合；其中该组合物具有约6.0至约pH7.0，更优选为约6.0至约6.6，最优选约6.3至约6.5的pH。
表面活性剂/氯化钠稳定化的组合物优选以如下T2时的SEC分析为特征：大于约80wt.％的单体含量；小于约3wt％的(多种)聚集体含量，以及约8wt.％的片段3含量。
氯化钠稳定化的依那西普组合物的优选特征在于：
(a)大于约90、91、92、93、94、95、96或97wt％的单体含量；和小于约3、2或1wt％的(多种)聚集体含量的T4时的SEC分析；以及
(b)T2时的HIC分析，其中由HIC色谱的峰1表示的组合物的量为小于约4、3、2或1wt％；由HIC色谱的峰2表示的组合物的量大于80、81、82、83、84或85wt％；以及由HIC色谱的峰3表示的组合物的量小于约20、19、18、17、16、15、14或13wt％；以及
(c)T4时的HIC分析，其中由HIC色谱的峰1表示的组合物的量小于约3、2或1wt％；由HIC色谱的峰2表示的组合物的量大于80、81、82、83、84或85wt％；以及由HIC色谱的峰3表示的组合物的量小于20、19、18、17、16、15、14或13wt％。
在进一步的实施方式中，利用表面活性剂加氯化钠稳定化的优选的组合物包括高达约150mM的氯化钠，约1至30mM的磷酸钠，以及约0-5wt.％的蔗糖或者海藻糖，或者蔗糖和海藻糖的组合并且具有约6.0至6.6的pH；以及特征在于：大于约95wt.％的单体含量和小于约1wt％的(多种)聚集体含量的T4时的SEC分析；其中由HIC色谱的峰1表示的组合物的量小于或者等于约3wt％、由HIC色谱的峰2表示的组合物的量大于约82wt％以及由HIC色谱的峰3表示的组合物的量小于约15wt％的T2时的HIC分析；以及其中由HIC色谱的峰1表示的组合物的量小于约2wt％、由HIC色谱的峰2表示的组合物的量大于约84wt％以及由HIC色谱的峰3表示的组合物的量小于或者等于约14wt％的T4时的HIC分析。
就聚集体和片段减少而言，特别优选的组合物是其中表面活性剂/氯化钠稳定化的依那西普制剂表现出如下T4或T2时的HIC分析的那些，其中由HIC色谱的峰1表示的组合物的量小于约1％；由HIC色谱的峰2表示的组合物的量大于约95wt.％以及优选大于约99wt％，并且由HIC色谱的峰3表示的组合物的量小于约1wt％。
在本发明的进一步的实施方式中，NaCl稳定化的依那西普制剂包含高达约5mM的精氨酸。
在以上提及的NaCl稳定化的依那西普制剂中，术语“SEC”、“T2”、“T4”、“HIC”、“单体含量”、“(多种)聚集体”和“片段3”、“峰1”、“峰2”和“峰3”在下面的实施例中进行定义。
用于减少不溶性微粒的表面活性剂
如上所述，本发明采用表面活性剂(优选聚山梨醇酯表面活性剂或者泊洛沙姆表面活性剂)以实现依那西普制剂中的不溶性微粒的形成的显著减少。虽然本发明预期使用任何表面活性剂，以及任何聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂，然而用于本发明的优选表面活性剂是聚山梨醇酯80和普朗尼克F-68，这两者可容易地购买到。在具有或不具有在以上实施方式中描述的额外的稳定化成分的情况下，可利用表面活性剂添加剂实现不溶性微粒的减少来实施本发明。本发明部分基于我们的令人惊奇和意外的发现，即存在的表面活性剂可以大大降低依那西普制剂中的不溶性微粒，相比于缺乏这类表面活性剂的制剂而言。
预期用于本文的聚山梨醇酯表面活性剂衍生自聚乙氧基山梨糖醇。聚山梨醇酯80(也称为聚氧乙烯-脱水山梨糖醇-20单油酸酯)也可作为“吐温80”商购并且特别优选用于本发明。也可以使用聚山梨醇酯20、40和60。
预期用于本文的泊洛沙姆表面活性剂是药物制剂领域公知的，并且由基于环氧乙烷和环氧丙烷的嵌段共聚物组成并且可以购自BASF。例如，BASF销售商业上称为普朗尼克F-68的泊洛沙姆并且其特别优选用于本发明。
用于本发明的依那西普制剂的聚山梨醇酯或泊洛沙姆在制剂中的加入量为制剂的0.0005％至1％(w/v)；优选约0.005％至约0.1％(w/v)，并且最优选约0.01至约0.05％(w/v)。
所提供的药物组合物的额外组分
本发明的制剂还可以包括缓冲剂、张力调节剂、赋形剂、药学上可接受的载体和药物组合物的其他常用的非活性成分。为简单起见，这些随后在申请中更充分地讨论。
缓冲剂使pH维持在所需范围内。合适的缓冲剂包括组氨酸、磷酸钾、柠檬酸钠或柠檬酸钾、马来酸、乙酸铵、三-(羟甲基)-氨基甲烷(tris)、各种形式的乙酸酯和二乙醇胺。制剂中的缓冲剂的浓度优选为约1mM至约1M，更优选为约10mM至约200mM。缓冲剂是本领域公知的并通过已知的方法制成以及购自商业供应商。
合适的缓冲剂的实例为磷酸盐、组氨酸、柠檬酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、琥珀酸盐、醋酸盐、三-(羟甲基)-氨基甲烷(tris)、碳酸氢盐。
在优选的实施方式中，缓冲剂为磷酸钠。
在优选的实施方式中，药物组合物的pH处于或接近生理水平。因此，优选地，所提供的组合物的pH介于约5.8至约8.4之间；甚至更优选，介于约6.2至约7.4之间。本领域的普通技术人员将理解，可根据需要调整pH以使特定制剂中的依那西普的稳定性和溶解度最大化。因此，处于生理范围之外的pH但患者可忍受的依那西普制剂也在本发明的范围之内。
张力调节剂是有助于溶液的渗透压的分子。优选调整药物组合物的渗透压以使活性成分的稳定性最大化和/或使给药时患者的不适最小化。通常优选的药物组合物是与血清等渗的药物组合物，即，具有相同或相似的渗透压，这通过加入张力调节剂实现。
在优选的实施方式中，所提供的制剂的渗透压为约180至约420mOsM。然而，应该理解，根据特定条件的需要，渗透压可以更高或更低。
适于改变渗透压的张力调节剂的实例包括但不限于氨基酸(不包括精氨酸)(如，半胱氨酸、组氨酸和甘氨酸)、盐(例如，氯化钠、氯化钾和柠檬酸钠)和/或糖类(例如，蔗糖、葡萄糖和甘露醇)。
优选的张力调节剂是甘氨酸、丙氨酸、氯化钠、氯化钾和硫酸钠。
在优选的实施方式中，制剂中的张力调节剂的浓度优选介于约1mM至约1M之间，更优选约10mM至约200mM。张力调节剂是本领域公知的并通过公知的方法制造和购自商业供应商。
以溶液形式(也可以是干燥或冷冻的形式)稳定化多肽的赋形剂(也称为化学添加剂、共溶质或助溶剂)也可以加入到药物组合物中。赋形剂是本领域公知的并通过公知的方法制造和购自商业供应商。
合适的赋形剂的实例包括但不限于糖/多元醇，诸如：蔗糖、乳糖、甘油、木糖醇、山梨醇、甘露醇、麦芽糖、肌醇、海藻糖、葡萄糖；聚合物，诸如：血清白蛋白(牛血清白蛋白(BSA)、人SA或重组HA)、葡聚糖、聚(乙烯醇)PVA、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、聚乙烯亚胺、明胶、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、羟乙基纤维素(HEC)；非水溶剂，诸如：多元醇、(例如，PEG和甘油)和二甲基甲酰胺(DMF)；氨基酸，诸如：脯氨酸、L-丝氨酸、谷氨酸钠、丙氨酸、甘氨酸、赖氨酸盐酸盐、肌氨酸和γ-氨基丁酸；以及杂赋形剂，诸如：磷酸钾、乙酸钠、硫酸铵、硫酸镁、硫酸钠、三甲胺N-氧化物、甜菜碱、金属离子(例如，锌、钙、和镁)、CHAPS、单月桂酸酯、2-O-β-甘露糖基甘油酸酯(mannoglycerate)或上述的任意组合。
优选的赋形剂是蔗糖、乳糖、甘油、木糖醇、山梨醇、甘露醇、麦芽糖、肌醇、海藻糖、葡萄糖、牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HSA)、重组白蛋白、葡聚糖、PVA、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、聚乙烯亚胺、明胶、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、羟乙基纤维素(HEC)、聚乙二醇、乙二醇、甘油、丙氨酸、甘氨酸、赖氨酸盐酸盐、肌氨酸、SDS、三甲胺N-氧化物、甜菜碱、锌离子、钙离子、镁离子、CHAPS、蔗糖单月桂酸酯、和2-O-β-甘露糖基甘油酸酯(mannoglycerate)。
本发明的制剂中的一种或多种赋形剂的浓度优选介于约0.001至5重量百分比之间，更优选约0.1至2重量百分比。
治疗方法
在另一个实施方式中，本发明提供治疗哺乳动物的方法，包括对哺乳动物施用治疗有效量的本发明的药物组合物，其中该哺乳动物具有可以用依那西普有益地治疗的疾病或病症。
在优选的实施方式中，依那西普衍生自将要用该组合物治疗的哺乳动物的相同物种。
在优选的实施方式中，哺乳动物是人。
可以用所提供的组合物治疗的疾病或病症包括但不限于：类风湿性关节炎、牛皮癣关节炎、强直性脊柱炎、韦格纳氏病(肉芽肿)、克罗恩病(或炎性肠炎)、慢性阻塞性肺疾病(COPD)、丙型肝炎、子宫内膜异位症、哮喘、恶病质、牛皮癣和特应性皮炎。可以用本发明的组合物治疗的另外的疾病或病症包括在WO00/62790、WO 01/62272、美国专利申请第2001/0021380号和美国专利7648702B2中描述的那些，其相关部分通过引用并入本文。
可以通过全身性注射，例如通过静脉内注射；或通过对相关位点注射或施用，例如当位点在手术中暴露时通过对位点直接注射或直接施用；或者通过局部施用对需要治疗的受试者施用所提供的药物组合物。
在一个实施方式中，本发明提供治疗和/或预防类风湿性关节炎的方法，包括对有需要的哺乳动物施用治疗有效量的所提供的依那西普组合物之一。
所提供的组合物中的依那西普的治疗有效量将取决于待治疗的病况、病况的严重程度、之前的治疗以及患者的临床史和对治疗剂的反应。可以根据主治医生的判断调整适当的剂量，使得可以对患者一次给药或进行一系列给药。
在一个实施方式中，每个成人剂量的依那西普有效量为约1-500mg/m2，或约1-200mg/m2，或约1-40mg/m2或约5-25mg/m2。
可选地，可以施用平剂量(a flat dose)，其量的范围可以是2-500mg/剂量、2-100mg/剂量或者约10-80mg/剂量。
如果每周施用该剂量一次以上，那么示例性的剂量范围与上述剂量范围相同或更低且优选以25-100mg/剂量的剂量范围每周施用两次或更多次。
在另一个实施方式中，通过注射给药的可接受的剂量包含80-100mg/剂量，或可替代地，包含每剂80mg。
可以每周、每两周或者相隔几周(例如2至8)地施用该剂量。
在一个实施方式中，通过单次皮下(SC)注射以25至75mg/ml施用依那西普。
在一些情况下，通过在至少三周的时期内一周一到三次地施用高达约100mg的剂量的药物组合物将实现患者的病况的改善。可能需要更长时间的治疗以引起期望的改善程度。对于无法治愈的慢性疾病，可无限期地继续该治疗方案。对于儿科患者(4-17岁)，合适的治疗方案可包括每周一次或多次地施用0.4mg/kg至5mg/kg的剂量的依那西普。
在另一个实施方式中，可以以散装制剂(bulk formulation)来制备本发明的药物制剂，且因此，该药物组合物的组分被调节至高于施用所需并且在给药之前适当稀释。
根据需要，该药物组合物可以作为单一治疗剂或与其它疗法组合施用。因此，在一个实施方式中，所提供的治疗和/或预防的方法与施用治疗有效量的另一活性剂组合使用。可以在施用本发明的药物组合物之前、期间或之后施用其它活性剂。另一种活性剂可以作为所提供的组合物的一部分，或者可选地，作为单独的制剂施用。
可以以各种方式，包括肠胃外、口服、口腔、鼻、直肠、腹膜内、皮内、经皮、皮下、静脉内、动脉内、心内、心室内、颅内、气管内、鞘内给药、肌内注射、玻璃体内注射和局部施用来实现所提供的药物组合物的施用。
本发明的药物组合物特别用于肠胃外给药，即，皮下、肌内、静脉内、腹膜内、脑脊内、关节内、滑膜内，和/或鞘内。可通过大药丸注射(bolus injection)或连续输注进行肠胃外给药。用于注射的药物组合物可以以单位剂量形式存在，例如，在安瓿或多剂量容器中，并添加防腐剂。此外，已经开发了一些最新的给药方法并且本发明的药物组合物适于使用这些新方法给药，例如， 如的注射器笔，和诸如和的无针设备。本发明的药物组合物还可以适于为尚未被发现的给药方法。又参见Langer,1990,Science,249:1527-1533。
所提供的药物组合物也可配制成贮库制剂(depot preparation)。这种长效制剂可以通过植入(例如皮下或肌内)或通过肌内注射施用。因此，例如，该制剂可以用合适的聚合或疏水材料(例如作为在可接受的油中的乳剂)或者离子交换树脂进行改造，或改造为微溶的衍生物，例如，作为微溶盐。
如果需要的话，药物组合物可以存在于可以包含一个或者多个含有活性成分的单位剂型的小瓶、包装或分配装置中。在一个实施方式中，所述分配装置可包括准备用于注射的具有单次剂量的液体制剂的注射器。注射器可以随附施用说明书。
在另一个实施方式中，本发明涉及试剂盒或容器，其包含本发明的含水药物组合物。含水药物组合物中的多肽的浓度可在宽范围内变化，但通常在每毫升含水制剂约0.05至约20,000微克(μg/ml)的范围内。该试剂盒还可以随附使用说明书。
在下面的仅仅用于说明的实施例中更具体地描述本发明，因为其中的许多修改和变化对于本领域的技术人员将是显而易见的。应该理解的是，在以下的实施例中，各种成分的重量百分数表示为w/v百分比。
实施例1A
用表面活性剂加丝氨酸稳定化的依那西普
含有依那西普并且用表面活性剂和丝氨酸(无精氨酸)稳定化的稳定的含水药物组合物的制备如下：
按照给定体积的制剂缓冲液所需的量，称量各制剂组分(缓冲液、氨基酸、糖、多元醇、表面活性剂等)。将这些组分并入能够承载和测量给定体积的制剂缓冲液的烧杯或容器内。将相当于目标给定制剂缓冲液的大约3/4体积的去离子水添加到烧杯中，并且通过使用磁力搅拌棒溶解组分。使用1摩尔的氢氧化钠和/或1摩尔的氯化氢将缓冲液的pH调节至目标制剂pH。然后通过加入去离子水将最终的制剂缓冲液体积升高到目标体积。在最终水加入之后用磁力搅拌棒混合溶液。将依那西普蛋白质溶液置于透析材料外壳(如Thermo ScientificSlide-A-Lyzer迷你透析单元10000MWCO)中，然后将其与所需的制剂缓冲液在4℃下接触12小时。制剂缓冲液体积与蛋白质溶液体积的比值应不小于1000：1。然后将其包含的透析外壳和蛋白质溶液置于第二、等体积的制剂缓冲液中并在4℃下保持另外12小时。
从透析材料外壳移出所得的蛋白质溶液，并用紫外光谱确定蛋白质的浓度。使用离心分离(如Amicon超10000MWCO离心浓缩器)和/或用制剂缓冲液稀释将蛋白质浓度调节到所需水平。
以下代表其中依那西普用丝氨酸(不存在精氨酸)稳定化的本发明组合物的五个样品。
(制剂1:15)
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
丝氨酸(非活性成分) 25mM
磷酸钠，pH 6.3(非活性) 25mM
蔗糖(非活性) 1％(w/v)
NaCl(非活性) 100mM
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
(制剂1:12)
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
丝氨酸(非活性成分) 25mM
磷酸钠，pH 6.4(非活性) 25mM
蔗糖(非活性) 2.5％(w/v)或者5％(w/v)
NaCl(非活性) 100mM
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
(制剂1:16)
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
丝氨酸(非活性成分) 50mM
磷酸钠，pH 6.4(非活性) 25mM
蔗糖(非活性) 5％(w/v)
NaCl(非活性) 25mM
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
(制剂2:4)
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
丝氨酸(非活性成分) 100mM
磷酸钠，pH 6.3(非活性) 25mM
蔗糖(非活性) 1％(w/v)
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
(制剂3:8)
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
丝氨酸(非活性成分) 120mM
磷酸钠，pH 6.3(非活性) 25mM
蔗糖(非活性) 1％(w/v)
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
通过尺寸排阻色谱法(SEC)、变性SEC(dSEC)、疏水作用层析(HIC)、十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)可以测试该组合物的长期稳定性，并且可以测试该组合物在不同时间点的结合和生物活性。如下面所讨论的，可以通过许多公知测定法测量生物活性，包括通过SEC、dSEC、HIC。流式影像仪分析可用于评估不溶性微粒。
例如，在Hawe et al,Pharm.Res.2011,28:2302和/或van Marrschalkerweerd etal.,Eur.J.Pharm.Biopharm.2011,78:213中描述了尺寸排阻色谱法的技术。同样，变性尺寸排阻色谱法、疏水作用色谱和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳的技术也是本领域的普通技术人员公知的。
据认为，该组合物在两年或超过两年的期限内将是稳定的。
实施例1B
用表面活性剂加脯氨酸稳定化的依那西普
使用与实施例1A中描述的过程类似的过程制备和测试该实施例1B中的用表面活性剂加脯氨酸稳定化的组合物。以下举例说明利用表面活性剂加脯氨酸稳定化的依那西普制剂，不含有精氨酸。
(制剂1:4)
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
脯氨酸(非活性成分) 25mM
磷酸钠，pH 6.3(非活性) 25mM
蔗糖(非活性) 2.5％(w/v)
NaCl(非活性) 50mM
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
(制剂1:5)
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
脯氨酸(非活性成分) 50mM
磷酸钠，pH 6.3(非活性) 25mM
蔗糖(非活性) 1.0％(w/v)
NaCl(非活性) 25mM
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
(制剂1:6)
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
脯氨酸(非活性成分) 100mM
磷酸钠，pH 6.3(非活性) 25mM
蔗糖(非活性) 1.0％(w/v)
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
以与实施例1A中讨论的方式相同的方式可以测试该组合物的长期稳定性，并且可以测量生物活性。流式影像仪分析可用于评估不溶性微粒。
据认为，该组合物在两年或超过两年的期限内将是稳定的。
实施例1C
用表面活性剂加谷氨酸盐稳定化的依那西普
使用与实施例1A中描述的过程类似的过程制备和测试用表面活性剂加谷氨酸盐稳定化的组合物。
以下举例说明利用表面活性剂/谷氨酸盐稳定化的依那西普组合物，不含有精氨酸。
(制剂1:9)
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
谷氨酸盐(非活性成分) 25mM
磷酸钠，pH 6.3(非活性) 25mM
蔗糖(非活性) 1％(w/v)
NaCl(非活性) 100mM
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
(制剂2:2)
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
谷氨酸盐(非活性成分) 50mM
磷酸钠，pH 6.3(非活性) 25mM
蔗糖(非活性) 1％(w/v)
NaCl(非活性) 50mM
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
(制剂2:3)
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
谷氨酸盐(非活性成分) 100mM
磷酸钠，pH 6.3(非活性) 25mM
蔗糖(非活性) 1％(w/v)
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
(制剂3:5)
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
谷氨酸盐(非活性成分) 120mM
磷酸钠，pH 6.5(非活性) 25mM
蔗糖(非活性) 1％(w/v)
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
以与实施例1A中讨论的方式相同的方式可以测试该组合物的长期稳定性，并且可以测量生物活性。流式影像仪分析可用于评估不溶性微粒。
据认为，该组合物在两年或超过两年的期限内将是稳定的。
实施例2A
用表面活性剂加氯化钙稳定化的依那西普
使用与实施例1A中描述的过程类似的过程制备和测试用表面活性剂加氯化钙稳定化的依那西普制剂。
以下举例说明利用表面活性剂加氯化钙稳定化并且不含有精氨酸的依那西普组合物。
(制剂P1:1)
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
氯化钙(非活性成分) 2mM
磷酸钠，pH 6.3(非活性) 25mM
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
(制剂1:11)
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
氯化钙(非活性成分) 2mM
磷酸钠，pH 6.3(非活性) 25mM
NaCl(非活性) 100mM
蔗糖(惰性) 2.5％(w/v)
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
(制剂1:18)
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
氯化钙(非活性成分) 2mM
磷酸钠，pH 6.3(非活性) 25mM
木糖醇(非活性) 10mM
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
(制剂3:6)
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
氯化钙(非活性成分) 2mM
磷酸钠，pH 6.3(非活性) 15mM
NaCl(非活性) 75mM
蔗糖(非活性) 3％(w/v)
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
(制剂3:9)
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
氯化钙(非活性成分) 1mM
磷酸钠，pH 6.6(非活性) 10mM
NaCl(非活性) 50mM
海藻糖(非活性) 5％(w/v)
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
以与实施例1A中讨论的方式相同的方式可以测试该组合物的长期稳定性，并且可以测量生物活性。流式影像仪分析可用于评估不溶性微粒。
据认为，该组合物在两年或超过两年的期限内将是稳定的。
实施例2B
用表面活性剂加氯化镁稳定化的依那西普
使用与实施例1A中描述的过程类似的过程制备和测试用表面活性剂加氯化镁稳定化的依那西普制剂。以下举例说明的依那西普制剂不含有精氨酸。
(制剂P1:2)
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
氯化镁(非活性成分) 2mM
磷酸钠，pH 6.3(非活性) 25mM
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
(制剂2:15)
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
氯化镁(非活性成分) 4mM
磷酸钠，pH 6.4(非活性) 25mM
NaCl(非活性) 100mM
蔗糖(非活性) 2.5％(w/v)
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
(制剂3:7)
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
氯化镁(非活性成分) 5mM
磷酸钠，pH 6.3(非活性) 15mM
NaCl(非活性) 75mM
蔗糖(非活性) 2.5％(w/v)
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
(制剂3:14)
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
氯化镁(非活性成分) 10mM
磷酸钠，pH 6.3(非活性) 25mM
NaCl(非活性) 110mM
蔗糖(非活性) 1％(w/v)
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
(制剂4:2)
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
氯化镁(非活性成分) 10mM
磷酸钠，pH 6.5(非活性) 15mM
NaCl(非活性) 75mM
蔗糖(非活性) 3％(w/v)
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
以与实施例1A中讨论的方式相同的方式可以测试该组合物的长期稳定性，并且可以测量生物活性。流式影像仪分析可用于评估不溶性微粒。
据认为，该组合物在两年或超过两年的期限内将是稳定的。
实施例2C
用表面活性剂加氯化锌稳定化的依那西普
使用与实施例1A中描述的过程类似的过程制备和测试用表面活性剂加氯化锌稳定化的依那西普制剂。
以下举例说明的依那西普制剂不含有精氨酸。
(制剂P1:3)
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
氯化锌(非活性成分) 2mM
磷酸钠，pH 6.3(非活性) 25mM
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
以与实施例1A中讨论的方式相同的方式可以测试该组合物的长期稳定性，并且可以测量生物活性。流式影像仪分析可用于评估不溶性微粒。
据认为，该组合物在两年或超过两年的期限内将是稳定的。
实施例3A
用表面活性剂加葡甲胺稳定化的依那西普
使用与实施例1A中描述的过程类似的过程制备和测试用表面活性剂加葡甲胺稳定化的依那西普组合物。以下举例说明的表面活性剂/葡甲胺稳定化的依那西普组合物不含有精氨酸。
(制剂1:19)
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
葡甲胺(非活性成分) 5％(w/v)
磷酸钠，pH 6.3(非活性) 25mM
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
(制剂1:21)
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
葡甲胺(非活性成分) 0.49％(w/v)
磷酸钠，pH 6.3(非活性) 25mM
蔗糖(非活性) 1％(w/v)
NaCl(非活性) 100mM
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
以与实施例1A中讨论的方式相同的方式可以测试该组合物的长期稳定性，并且可以测量生物活性。流式影像仪分析可用于评估不溶性微粒。
据认为，该组合物在两年或超过两年的期限内将是稳定的。
实施例3B
用表面活性剂加甘露醇的衍生物稳定化的依那西普
使用与实施例1A中描述的过程类似的过程制备和测试用甘露醇的衍生物稳定化的依那西普组合物。
以下举例说明的依那西普制剂不含有精氨酸。
成分 重量％
依那西普(活性成分) 50mg/ml
甘露糖基甘油酸酯(非活性成分) 4％(w/v)
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
以与实施例1A中讨论的方式相同的方式可以测试该组合物的长期稳定性，并且可以测量生物活性。流式影像仪分析可用于评估不溶性微粒。
据认为，该组合物在两年或超过两年的期限内将是稳定的。
实施例4A
用表面活性剂加海藻糖(或者蔗糖)和甘露醇稳定化的依那西普
使用与实施例1A中描述的过程类似的过程可以制备和测试用甘露醇和海藻糖(或者蔗糖)的组合稳定化的依那西普组合物。以下举例说明的稳定化的制剂不含有精氨酸。
(制剂P1:5)
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
海藻糖(非活性成分) 4％(w/v)
甘露醇(非活性) 2％(w/v)
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
(制剂1:10)
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
磷酸钠，pH 6.32(非活性) 25mM
蔗糖(非活性) 5％(w/v)
甘露醇(非活性) 2％(w/v)
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
以与实施例1A中讨论的方式相同的方式可以测试该组合物的长期稳定性，并且可以测量生物活性。流式影像仪分析可用于评估不溶性微粒。
据认为，该组合物在两年或超过两年的期限内将是稳定的。
实施例4B
用表面活性剂加蔗糖和山梨醇稳定化的依那西普
使用与实施例1A中描述的过程类似的过程可以制备和测试用表面活性剂加蔗糖和山梨醇的组合稳定化的依那西普组合物。以下举例说明的制剂不含有精氨酸。
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
蔗糖(非活性成分) 4％(w/v)
山梨醇(非活性) 2％(w/v)
磷酸钠，pH 6.3(非活性) 25mM
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
以与实施例1A中讨论的方式相同的方式可以测试该组合物的长期稳定性，并且可以测量生物活性。流式影像仪分析可用于评估不溶性微粒。
据认为，该组合物在两年或超过两年的期限内将是稳定的。
前面描述的本发明的示例性实施方式仅仅是为了说明和描述的目的，并且不旨在是详尽的或将本发明限制为所公开的精确形式。根据上述教导，许多修改和变化是可能的。
实施例5
用表面活性剂加木糖醇稳定化的依那西普
使用与实施例1A中描述的过程类似的过程可以制备和测试用表面活性剂加木糖醇稳定化的依那西普制剂。以下举例说明的制剂不含有精氨酸。
(制剂1:17)
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
磷酸钠，pH 6.3(非活性) 25mM
木糖醇(非活性) 10％(w/v)
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
(制剂2:10)
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
磷酸钠，pH 6.31(非活性) 25mM
木糖醇(非活性) 6％(w/v)
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
(制剂2:11)
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
磷酸钠，pH 6.3(非活性) 25mM
木糖醇(非活性) 2.5％(w/v)
蔗糖(非活性成分) 5％(w/v)
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
(制剂2:18)
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
磷酸钠，pH 6.4(非活性) 25mM
木糖醇(非活性) 2.5％(w/v)
葡甲胺(非活性) 2.5％(w/v)
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
(制剂2:19)
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
磷酸钠，pH 6.24(非活性) 10mM
木糖醇(非活性) 2.5％(w/v)
葡甲胺(非活性) 2.5％(w/v)
NaCl(非活性) 2.5％(w/v)
蔗糖(非活性) 1％(w/v)
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
实施例6
用表面活性剂和NaCl稳定化的依那西普
使用与实施例1A中描述的过程类似的过程可以制备和测试用表面活性剂和NaCl(单独的)、或者NaCl与蔗糖、海藻糖和/或精氨酸的组合稳定化的依那西普制剂。下面除了制剂3:13之外，以下举例说明的组合物均不含有精氨酸。
(制剂2:8)
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
磷酸钠，pH 6.32(非活性) 25mM
NaCl(非活性) 150mM
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
(制剂2:6)
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
磷酸钠，pH 6.3(非活性) 15mM
NaCl(非活性) 100mM
蔗糖(非活性) 2％(w/v)
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
(制剂3:10)
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
磷酸钠，pH 6.57(非活性) 10mM
NaCl(非活性) 75mM
蔗糖(非活性) 3％(w/v)
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
(制剂3:11)
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
磷酸钠，pH 6.30(非活性) 25mM
NaCl(非活性) 75mM
海藻糖(非活性) 3％(w/v)
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
(制剂3:12)
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
磷酸钠，pH 6.3(非活性) 25mM
NaCl(非活性) 75mM
蔗糖(非活性) 3％(w/v)
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
(制剂3:13)
成分 浓度
依那西普(活性成分) 50mg/ml
磷酸钠，pH 6.3(非活性) 25mM
NaCl(非活性) 120mM
蔗糖(非活性) 1％(w/v)
精氨酸(非活性) 5mM
聚山梨醇酯80 .02％(w/v)
以与实施例1A中讨论的方式相同的方式可以测试该组合物的长期稳定性，并且可以测量生物活性。流式影像仪分析可用于评估不溶性微粒。
依那西普制剂的分析
A.热稳定性储存
在透析和浓缩之后，在生物安全柜中无菌过滤以上例举的依那西普制剂的样品。使用无菌移液器和高压灭菌的移液器吸头，将依那西普制剂的样品转移至预先标记并高压灭菌的1ml冻干小瓶中。用无菌丁基瓶塞塞住并用铝帽卷住小瓶。然后将所有的小瓶转移至热稳定性烘箱。样品经受两种热稳定性条件：(1)40℃下2周和(2)25℃下4周。在整个本说明书中，分别将这两种温度条件标示为“T2”和“T4”。
B.尺寸排阻色谱法(SEC)
利用其中通过尺寸分离分析物的尺寸排阻色谱法(SEC)、高效液相色谱法的公知技术分析本文公开的依那西普制剂(参见Rogner,M.(2000)Size ExclusionChromatography.Protein Liquid Chromatography.M.Kastner.Amsterdam,Elsevier.61:89-145.)。为了评价上述依那西普样品的热稳定性，基于文献(vanMaarschalkerweerd,A.,G.J.Wolbink,et al.(2011)."Comparison of analyticalmethods to detect instability of etanercept during thermal stress testing."European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics 78(2):213-221.)通过SEC法检测样品。将流动相缓冲液制备成含有50mM的磷酸钠一水合物和150mM的精氨酸。用1M的HCl将pH调节到6.5。利用线性连接到Tosoh TSK-Gel G4000SWxl 7.8mm x 30cm(目录号8542)的Tosoh TSK-Gel SWxl 6mm x 4cm保护柱(目录号8543)实施所有的分离。为了实施分离，将所述柱置于室温下(23℃)并在0.5mL/min的流速下用流动相平衡。利用自动进样器将5微升的50mg/ml的依那西普制剂注射到柱上。以0.5mL/分钟的流速在30分钟内完成分离。在这段时间以280nm的波长监测柱洗脱液。
C.尺寸排阻色谱法色谱图的整合
使用Chromeleon软件(Dionex)进行所有的整合。在整合之前，从所有的色谱图减去不含有依那西普的缓冲液的SEC色谱图。在12分钟和26分钟的保留时间之间进行所有的整合。使用若干参数定义一个峰。将检测到的峰的最小面积设定为0.05mAU*min。将峰值检测的二维灵敏度设定为0.01mAU和75秒。使用手动整合工具手动加峰肩。以两个步骤手动地调整所有检测到的峰。首先，将峰基线(峰的底部边界)调整成水平。其次，将峰基线的垂直位置调整成色谱图基线的垂直部分。将色谱图基线值定义为不存在分析物时的信号。将不存在分析物时的信号定义为12分钟保留时间处的以mAu计的吸光度。
D.依那西普制剂的SEC馏分
在上述依那西普制剂的SEC分析中，鉴定和研究3个SEC色谱馏分。按照从SEC柱洗脱的顺序，所分析的馏分是：(1)代表可能通过完整的依那西普分子间的非共价静电引力聚集的完整的依那西普TNFR：Fc融合蛋白的聚集体的非常高分子量的馏分(下文中称为“(多种)聚集体”或(多种)聚集体含量)；(2)单体含量，代表完整的依那西普TNFR：FC融合蛋白(以下称为“单体”或者“单体含量”)；(3)可能代表其中TNFR：分子融合蛋白的一部分已经从单体解离的依那西普分子的一个片段或者片段群的馏分；举例来说，诸如在分子的铰链区处的融合蛋白的FC部分的臂解离(以下称为“片段3”)。下表显示了通过如上所述的SEC分析确定的聚集体、单体和片段3的相对量。
E.不溶性微粒的分析
可以使用带有非样品的Manuel Prime程序(液-液相间)进行方法开发。在流动池中观察到显著的混合效果，因此，选择另外的气隙程序(带有样品的ManuelPrime)用于样品评价。
在“T0”时，在有和无PS80的情况下评价实施例3.5和4.2的制剂。关于flowCAM分析使用的术语“T0”表示样品未经受任何可感知的热或储存应力(即，维持在5℃或更低)，然后在制备完所测试的制剂后立即使用flowCAM分析进行测试(24至72小时内)。
仪器&配件
背景设置(方法&设置参数)
最近距离
在运行样品之前，安装流动池和物镜并且实施视野和焦点优化。系统条件包括多次重复地运行水空白和粒度标准。在运行样品之前，进行清洁程序以确保粒子计数是处于可接受的水平，该可接受的水平在样品之间通常小于1000个微粒/mL或者在重复样品之间小于5％的样品微粒/mL。日常的清洁过程在清洁剂之间使用水(Millipore Direct-Q型1，0.22μm过滤，18.2MΩ)并在确定计数水平之前作为最终冲洗。一旦粒子计数达到可接受的微粒/mL水平，在启动样品分析之前，将样品小心地吸移到样品吸头并载入流体中。使用VisualSpreadSheet中的一系列诊断工具在每次运行期间和紧接着每次运行之后确定运行质量，包括x-y捕捉图(使流型动力学可视化)、长宽比对直径尺寸图(识别卡住的微粒)、在运行期间的图像查看和利用各种微粒特征(例如，尺寸、圆度、长度、长宽比)的在运行完成时的图像分析。利用流体成像技术软件测量技术确定单个微粒尺寸，称为等效球体直径(ESD)。ESD是基于36样品测量(每隔5°进行)的粒子的平均费雷特测量。费雷特测量是接触微粒的相对侧面的平行切线之间的垂直距离。
表1
单体的SEC分析
注：表I、II和III报告的数量是重量百分比
T0＝在5℃下保存并且在产生的24小时内分析的制剂。
T1＝在40℃下储存一周的制剂
T2＝在40℃下储存两周的制剂
表II
聚集体的SEC分析
表III
片段3的分析
表IV
SEC单体含量
(4周/25℃)
下面的表IV显示了在25℃下储存四周时的根据本发明制备的依那西普制剂(用符号T4表示)的单体(依那西普)含量。在下表中T0代表在制剂制备的24小时之内在5℃的样品温度下进行的SEC测量；以及T4代表在25℃下储存4周之后进行SEC分析的依那西普制剂样品。
表V
SEC聚集体含量
(4周/25℃)
下面的表V显示了在25℃下储存四周后的根据本发明制备的依那西普制剂的(多种)聚集体含量。在下表中，T0代表在制剂制备的24小时之内在5℃的样品温度下进行的SEC测量；以及T4代表在25℃下储存4周之后进行SEC分析的依那西普制剂样品。
依那西普制剂的HIC分析
下面的表格(表VI和VII)显示对样品3:5至3:14进行的疏水相互作用色谱法(“HIC色谱法”)的结果。以美国专利7294481中描述的方式实施HIC色谱法，其通过引用并入本文。t0时(在5℃下在制备的24小时内)评估样品以及在25℃下储存两个星期(t2)(参见表VI)之后或者在25℃下储存4个星期(t4)(参见表VII)之后再次评估样品。峰1被认为是或包括以上在SEC数据的讨论中提及的“片段3”；峰2是如以上在SEC数据的讨论中提及的依那西普单体；以及峰3代表或包括如以上在SEC数据的讨论中提及的“(多种)聚集体”。应该进一步理解，这里使用的术语“峰1”、“峰2”和“峰3”也构成对HIC峰1、峰2以及通过引用并入本文的美国专利7294481中提及和公开的峰的引用。
表VI
在40℃下储存两个星期之后的HIC数据。
表VII
在25℃下储存4个星期之后的HIC数据
表VIII
不溶性微粒的流式影像分析
(每毫升微粒数)
对于考虑了本文公开的本发明的说明书和实践的本领域的技术人员，本发明的其他实施方式是显而易见的。意图是将本说明书和实施例认为是示例性的，通过以下权利要求表明本发明的真实范围和精神。

Claims (15)

1.一种为了长期储存而稳定化的含水药物组合物，其包括依那西普和用于防止、抑制或者减少所述组合物中的不溶性微粒的出现的稳定剂，其中，所述稳定剂包括表面活性剂，优选地，所述表面活性剂选自聚山梨醇酯表面活性剂和泊洛沙姆表面活性剂，而且与不包含表面活性剂的依那西普组合物相比，所述表面活性剂能够使得所述组合物中的不溶性微粒显著减少；其中，所述组合物不含有，或者基本上不含有作为稳定剂的精氨酸。
2.根据权利要求1所述的稳定化的组合物，其中，所述稳定剂包括选自聚山梨醇酯80、聚山梨醇酯60、聚山梨醇酯40和聚山梨醇酯20的聚山梨醇酯表面活性剂。
3.根据权利要求2所述的稳定化的组合物，其中，所述稳定剂包括聚山梨醇酯80。
4.根据权利要求1所述的稳定化的组合物，其中，所述稳定剂包括泊洛沙姆表面活性剂，并且所述泊洛沙姆表面活性剂是普朗尼克F-68。
5.根据权利要求1所述的稳定化的组合物，其中，所述组合物的特征在于：(a)“T0”时每毫升所述组合物包含尺寸为约1-10μm的一定量的不溶性微粒，其中，与不具有表面活性剂的相同组合物相比，所述一定量的不溶性微粒相当于这种不溶性微粒的至少约50％至70％的减少；和/或(b)“T0”时的制剂中包括一定量的不溶性微粒，从而使得所述依那西普组合物具有(i)每毫升少于约2500个、尺寸为约5-10μm的微粒；(ii)少于约3500个、尺寸为约2-5μm的微粒和(iii)每毫升少于约700个、尺寸为约1-2μm的微粒。
6.根据权利要求5所述的稳定化的组合物，其包括另外的稳定化成分，其中，所述另外的稳定化成分选自：(i)选自丝氨酸、脯氨酸和谷氨酸盐的氨基酸；(ii)选自钙、镁和锌的金属离子；(iii)选自单独的木糖醇或者木糖醇和葡甲胺的组合的木糖醇稳定剂；(iv)选自单独的氯化钠；氯化钠与蔗糖或者海藻糖的组合，以及氯化钠、蔗糖和海藻糖的组合的氯化钠稳定剂；(v)选自单独的葡甲胺；葡甲胺与蔗糖的组合；葡甲胺与氯化钠的组合；葡甲胺与氯化钠和蔗糖的组合的葡甲胺稳定剂；和(vi)糖和多元醇的组合。
7.根据权利要求6所述的稳定化的组合物，其中，所述另外的稳定化成分是葡甲胺并且所述组合物包括：约25至约75mg/ml的依那西普；高达约150mM的葡甲胺；小于约6wt％的蔗糖；任选地高达约100mM的NaCl；约1至约30mM的磷酸钠，以及约0.01至约0.05％(w/v)的聚山梨醇酯或者泊洛沙姆表面活性剂；其中，所述组合物具有约6.0至6.6的pH。
8.根据权利要求6所述的稳定化的组合物，其中，所述另外的稳定化成分是丝氨酸并且所述组合物包括：约0.01至约0.05％w/v的聚山梨醇酯或者泊洛沙姆表面活性剂；约25至约50mg/ml的依那西普；小于约150mM的丝氨酸；约0.5至约3wt％的蔗糖；约1至约30mM的磷酸钠，其中，制剂具有pH 6.0至约7.0以及更优选地约6.0至约6.6，而且最优选介于约6.3至约6.5之间。
9.根据权利要求6所述的稳定化的组合物，其中，所述另外的稳定化成分是脯氨酸并且所述组合物包括：约0.01至约0.05％w/v的聚山梨醇酯或者泊洛沙姆表面活性剂；约25至约50mg/ml的依那西普；小于约150mM的脯氨酸；约0.5至约3wt％的蔗糖；约1至约30mM的磷酸钠，约15至约100mM的NaCl；其中，制剂具有pH 6.0至约7.0。
10.根据权利要求6所述的稳定化的组合物，其中，所述另外的稳定化成分是氯化镁，并且所述组合物包括：约0.01至约0.05％w/v的聚山梨醇酯或者泊洛沙姆表面活性剂；约25至约50mg/ml的依那西普；约1mM至约20mM的氯化镁；任选地高达约6wt％的蔗糖；约25至约150mM的NaCl；约1至约30mM的磷酸钠；其中，所述组合物具有约6.0至约7.0的pH。
11.根据权利要求6所述的稳定化的组合物，其中，所述另外的稳定化成分是氯化钙，并且所述组合物包括约0.01至约0.05％w/v的聚山梨醇酯或者泊洛沙姆表面活性剂；约25至约50mg/ml的依那西普；高达约5mM的氯化钙；任选地约0.5至6wt％的蔗糖或者海藻糖；任选地约0至100mM的NaCl；任选地高达约10mM的木糖醇；约1至约30mM的磷酸钠；其中，所述组合物具有约6.0至约7.0的pH。
12.根据权利要求6所述的稳定化的组合物，其中，所述另外的稳定化成分是木糖醇并且所述组合物包括约25至75mg/ml的依那西普；约1-10wt.％的木糖醇；约1至30mM的磷酸钠；任选地高达约5wt％的葡甲胺；任选地高达约5mM的NaCl；以及任选地高达约5wt％的蔗糖；以及具有6.0至6.6的pH。
13.根据权利要求6所述的稳定化的组合物，其中，所述另外的稳定化成分是氯化钠，其中，所述组合物包括约25至75mg/ml的依那西普，约0.01至约0.05％w/v的聚山梨醇酯或者泊洛沙姆表面活性剂；高达约150mM的氯化钠，约1至约30mM的磷酸钠；以及约0至5wt％的蔗糖或者海藻糖或者它们的组合；其中，所述组合物具有约6.0至约7.0的pH。
14.根据权利要求6所述的稳定化的组合物，其中，所述另外的稳定化成分是葡甲胺并且其中所述组合物包括：约25至约75mg/ml的依那西普，约0.01至约0.05％w/v的聚山梨醇酯或者泊洛沙姆表面活性剂；约1-30mM的磷酸钠；高达约10％的葡甲胺；任选地高达约5wt％的蔗糖；以及任选地高达约100mM的氯化钠，其中，所述组合物具有约6.0至7.0的pH。
15.根据权利要求6所述的稳定化的组合物，其中，所述组合物的特征在于：
(a)大于约90、91、92、93、94、95、96或97wt％的单体含量；和小于约3、2或1wt％的(多种)聚集体含量的T4时的SEC分析；以及
(b)T2时的HIC分析，其中由HIC色谱的峰1表示的所述组合物的量为小于约4、3、2或1wt％；由HIC色谱的峰2表示的所述组合物的量大于80、81、82、83、84或85wt％；以及由HIC色谱的峰3表示的所述组合物的量小于约20、19、18、17、16、15、14或13wt％；以及
(c)T4时的HIC分析，其中由HIC色谱的峰1表示的所述组合物的量小于约3、2或1wt％；由HIC色谱的峰2表示的所述组合物的量大于80、81、82、83、84或85wt％；以及由HIC色谱的峰3表示的所述组合物的量小于20、19、18、17、16、15、14或13wt％。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109982685A (zh) * 2016-10-21 2019-07-05 美国安进公司 药物配制品及其制备方法
CN114206391A (zh) * 2019-08-09 2022-03-18 艾瑞克有限公司 包含抗体的新组合物

Families Citing this family (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1909831A4 (en) 2005-06-14 2013-02-20 Amgen Inc PREPARATIONS OF SPONTANEOUS TAMPING PROTEINS
ES2657377T3 (es) * 2012-09-11 2018-03-05 Coherus Biosciences, Inc. Etanercept plegado correctamente con alta pureza y excelente rendimiento
CA2911068A1 (en) * 2013-05-02 2014-11-06 Mabxience, S.A. Alternative formulations for tnfr: fc fusion polypeptides
PL3122358T3 (pl) 2014-03-26 2021-06-14 Astex Therapeutics Ltd. Połączenia inhibitorów fgfr i cmet w leczeniu nowotworu
US20180200325A1 (en) * 2014-11-18 2018-07-19 Shionogi & Co., Ltd. Stabilized peptide composition
JOP20200201A1 (ar) 2015-02-10 2017-06-16 Astex Therapeutics Ltd تركيبات صيدلانية تشتمل على n-(3.5- ثنائي ميثوكسي فينيل)-n'-(1-ميثيل إيثيل)-n-[3-(ميثيل-1h-بيرازول-4-يل) كينوكسالين-6-يل]إيثان-1.2-ثنائي الأمين
MX2015010517A (es) * 2015-08-13 2017-02-13 Landsteiner Scient S A De C V Composicion de estabilidad mejorada de etanercept.
KR102429646B1 (ko) * 2016-03-14 2022-08-04 산텐 세이야꾸 가부시키가이샤 메글루민 또는 그의 염을 포함하는 방부제
CN116327963A (zh) * 2016-11-21 2023-06-27 济世-伊沃泰克生物制品有限公司 一种眼科制剂及其用途
MX2017013995A (es) * 2017-10-31 2019-05-01 Probiomed S A De C V Formulacion farmaceutica estable de una proteina de fusion.
MA50911A (fr) * 2017-11-13 2020-09-23 Amgen Inc Procédés de production de produits protéiniques
EP3781124A1 (en) * 2018-04-16 2021-02-24 Merck Patent GmbH Method for stabilizing protein comprising formulations by using a meglumine salt
SG11202010430QA (en) * 2018-04-24 2020-11-27 Amgen Inc Method for making injectable pharmaceutical compositions
US11253569B2 (en) 2018-05-03 2022-02-22 Seattle Children's Hospital Methods of treating Kawasaki Disease
TR201808283A2 (tr) * 2018-06-11 2018-07-23 Centurion Ilac San Ve Tic A S Sulu farmasöti̇k etenersept bi̇leşi̇mi̇
US20220401365A1 (en) * 2019-10-28 2022-12-22 Astrazeneca Ab Dry powder formulations containing leucine and trileucine
CN116867481A (zh) 2021-02-17 2023-10-10 艾瑞克有限公司 包含Fc结构域的工程化蛋白质构建体的水性组合物

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20080124326A1 (en) * 2006-10-20 2008-05-29 Amgen Inc. Stable polypeptide formulations
CN101378773A (zh) * 2005-12-20 2009-03-04 布里斯托尔-迈尔斯斯奎布公司 稳定蛋白质制剂
WO2011141926A2 (en) * 2010-05-10 2011-11-17 Intas Biopharmaceuticals Limited Liquid formulation of polypeptides containing an fc domain of an immunoglobulin
WO2012013980A1 (en) * 2010-07-30 2012-02-02 Arecor Limited Stabilized aqueous antibody compositions
CN103619324A (zh) * 2011-06-03 2014-03-05 株式会社Lg生命科学 依那西普的稳定液体制剂

Family Cites Families (45)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5580856A (en) 1994-07-15 1996-12-03 Prestrelski; Steven J. Formulation of a reconstituted protein, and method and kit for the production thereof
EP0852951A1 (de) 1996-11-19 1998-07-15 Roche Diagnostics GmbH Stabile lyophilisierte pharmazeutische Zubereitungen von mono- oder polyklonalen Antikörpern
US6171586B1 (en) 1997-06-13 2001-01-09 Genentech, Inc. Antibody formulation
US7294481B1 (en) 1999-01-05 2007-11-13 Immunex Corporation Method for producing recombinant proteins
US20010021380A1 (en) 1999-04-19 2001-09-13 Pluenneke John D. Soluble tumor necrosis factor receptor treatment of medical disorders
WO2000062790A2 (en) 1999-04-19 2000-10-26 Immunex Corporation Soluble tumor necrosis factor receptor treatment of medical disorders
US20040220103A1 (en) 1999-04-19 2004-11-04 Immunex Corporation Soluble tumor necrosis factor receptor treatment of medical disorders
MXPA02007683A (es) 2000-02-10 2002-12-13 American Home Prod Metodo para tratar o inhibir la lesion celular o muerte celular.
CA2466034C (en) * 2001-11-08 2012-12-18 Protein Design Labs, Inc. Stable aqueous pharmaceutical formulations of daclizumab antibodies
ES2311094T3 (es) * 2002-02-27 2009-02-01 Immunex Corporation Composicion estabilizada de tnfr-fc que comprende arginina.
JP4980048B2 (ja) 2003-02-28 2012-07-18 アレス トレーディング ソシエテ アノニム 腫瘍壊死因子結合タンパク質の液体製剤
EP1607103A1 (en) * 2003-03-20 2005-12-21 Eisai Co., Ltd. Concomitant drug as therapeutic agent for inflammatory bowel disease
BRPI0413197A (pt) 2003-08-01 2006-10-03 Amgen Inc cristal de eta wercept; método para fabricar um cristal de etanercept; composição; uso de um cristal de etanercept
NZ546347A (en) * 2003-10-14 2009-11-27 Intermune Inc Macrocyclic carboxylic acids and acylsulfonamides as inhibitors of HCV replication
JP5554466B2 (ja) 2004-03-01 2014-07-23 味の素株式会社 抗ヒトＴＮＦ−α抗体活性低下抑制剤
EP2308958A3 (en) 2004-03-05 2011-08-10 DSM IP Assets B.V. Process for cell culturing by continuous perfusion and alternating tangential flow
US20060008415A1 (en) * 2004-06-25 2006-01-12 Protein Design Labs, Inc. Stable liquid and lyophilized formulation of proteins
US20070196364A1 (en) 2004-07-27 2007-08-23 Human Genome Sciences, Inc. Pharmaceutical Formulation and Process
TWI364458B (en) 2004-08-27 2012-05-21 Wyeth Res Ireland Ltd Production of tnfr-lg
KR101367544B1 (ko) 2005-06-10 2014-02-26 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 메글루민을 함유하는 단백질 제제의 안정화제, 및 그의이용
CN101378782A (zh) 2005-12-21 2009-03-04 惠氏公司 粘度降低的蛋白质制剂及其用途
JP5374359B2 (ja) 2006-03-17 2013-12-25 バイオジェン・アイデック・エムエイ・インコーポレイテッド 安定化されたポリペプチド化合物
US20080003220A1 (en) 2006-04-21 2008-01-03 Amgen, Inc. Buffering agents for biopharmaceutical formulations
EP2081553B1 (en) 2006-10-06 2020-08-12 Amgen Inc. Stable antibody formulations
EP2395077A1 (en) 2006-11-03 2011-12-14 Wyeth LLC Glycolysis-inhibiting substances in cell culture
CA2672902C (en) 2006-12-21 2012-11-27 Amgen Inc. Formulations
AU2008223133A1 (en) 2007-03-02 2008-09-12 Wyeth Use of copper and glutamate in cell culture for production of polypeptides
EP2014760A1 (en) 2007-06-13 2009-01-14 CMC Biopharmaceuticals A/S A method for producing a biopolymer (e.g. polypeptide) in a continuous fermentation process
PL2170390T3 (pl) 2007-06-14 2019-05-31 Biogen Ma Inc Preparaty przeciwciała natalizumab
US8420081B2 (en) 2007-11-30 2013-04-16 Abbvie, Inc. Antibody formulations and methods of making same
AU2009210741A1 (en) * 2008-02-07 2009-08-13 Amgen Inc. Stabilized protein compositions
US20110129468A1 (en) 2008-02-29 2011-06-02 Biogen Idec Ma Inc. Purified immunoglobulin fusion proteins and methods of their purification
EP2331090B1 (en) * 2008-09-19 2018-01-03 Pfizer Inc. Stable liquid antibody formulation
WO2011015926A1 (en) 2009-08-03 2011-02-10 Avesthagen Limited A process of fermentation, purification and production of recombinant soluble tumour necrosis factor alfa receptor (tnfr) - human igg fc fusion protein
SG10201901417UA (en) 2009-08-11 2019-03-28 Genentech Inc Production of proteins in glutamine-free cell culture media
WO2011049798A1 (en) 2009-10-20 2011-04-28 Merck Sharp & Dohme Corp. Use of mixed mode chromatography for the capture and purification of basic antibody products
WO2011079308A2 (en) 2009-12-23 2011-06-30 Emergent Product Development Seattle, Llc Compositions comprising tnf-alpha and il-6 antagonists and methods of use thereof
SG185038A1 (en) 2010-04-26 2012-11-29 Novartis Ag Improved cell culture medium
WO2012023085A1 (en) 2010-08-20 2012-02-23 Wyeth Llc Cell culture of growth factor-free adapted cells
JP2012049074A (ja) 2010-08-30 2012-03-08 Makita Corp 電動工具のバッテリパック
KR20130101034A (ko) 2010-08-31 2013-09-12 프리슬랜드 브랜즈 비브이 진핵 세포를 위한 배양 배지
AU2012244764B2 (en) * 2011-04-20 2016-10-13 Sandoz Ag Stable pharmaceutical liquid formulations of the fusion protein TNFR:Fc
EA026226B1 (ru) * 2011-07-01 2017-03-31 Байоджен Айдек Ма Инк. Не содержащие аргинина композиции слитого fc-полипептида и способы их применения
KR102558247B1 (ko) 2011-07-01 2023-07-24 암젠 인크 포유동물 세포 배양
SG11201401562RA (en) * 2011-10-18 2014-09-26 Coherus Biosciences Inc Etanercept formulations stabilized with sodium chloride

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101378773A (zh) * 2005-12-20 2009-03-04 布里斯托尔-迈尔斯斯奎布公司 稳定蛋白质制剂
US20080124326A1 (en) * 2006-10-20 2008-05-29 Amgen Inc. Stable polypeptide formulations
WO2011141926A2 (en) * 2010-05-10 2011-11-17 Intas Biopharmaceuticals Limited Liquid formulation of polypeptides containing an fc domain of an immunoglobulin
WO2012013980A1 (en) * 2010-07-30 2012-02-02 Arecor Limited Stabilized aqueous antibody compositions
CN103619324A (zh) * 2011-06-03 2014-03-05 株式会社Lg生命科学 依那西普的稳定液体制剂

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109982685A (zh) * 2016-10-21 2019-07-05 美国安进公司 药物配制品及其制备方法
CN109982685B (zh) * 2016-10-21 2022-03-11 美国安进公司 药物配制品及其制备方法
CN114206391A (zh) * 2019-08-09 2022-03-18 艾瑞克有限公司 包含抗体的新组合物

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