CN104606277B - 葛花处理物的应用、以及含有葛花处理物的饮食品和化妆品 - Google Patents

Abstract

本发明涉及葛花处理物在制造降体脂剂、抗肥胖剂和肝功能改善剂中的应用、以及含有葛花处理物的饮食品和化妆品。肝功能改善，具体而言是指抑制肝中脂质蓄积、抑制酒精代谢物浓度的上升以及肝细胞活化任一者的作用。

Description

葛花处理物的应用、以及含有葛花处理物的饮食品和化妆品

技术领域

本发明涉及葛花处理物在制造降体脂剂、抗肥胖剂和肝功能改善剂中的应用、以及含有葛花处理物的饮食品和化妆品。

背景技术

由于近年来的饮食生活的变化等而身体脂肪的蓄积、肥胖的增加、肝功能的降低成为问题，正在寻求新型的降体脂剂、抗肥胖剂和肝功能改善剂。

发明内容

发明要解决的问题

本发明的目的在于得到对于降体脂、抗肥胖和肝功能改善有效的剂、饮食品和化妆品。

用于解决问题的方案

本发明提供葛花处理物在制造降体脂剂、抗肥胖剂和肝功能改善剂中的应用、以及含有葛花处理物的饮食品和化妆品。

发明的效果

根据本发明，提供对于降体脂、抗肥胖和肝功能改善有效的剂、饮食品和化妆品。

附图说明

图1是表示抑制酒精代谢物浓度上升效果的结果的图。

图2是表示基因表达试验的结果的图。

具体实施方式

以下，基于本发明优选的实施方式来说明本发明。本发明涉及降体脂剂、抗肥胖剂和肝功能改善剂。以下，也将这些剂总称为本发明的剂。另外，本发明还涉及含有葛花处理物且起到与本发明的剂同样效果的饮食品和化妆品。以下的说明，只要没有特别的限定，就均符合本发明的剂、饮食品和化妆品。

(葛花处理物)

本发明所使用的葛花处理物，只要是属于豆科植物的葛植物的花部的处理物，则没有特别的限定。葛花包括由花蕾至全开的花的阶段采集到的花。本说明书中，“葛花处理物”是指对葛花进行干燥处理、粉碎处理和提取处理中的至少一种处理而得到的物质。葛花处理物包括葛花的干燥物、葛花破碎物、葛花的干燥粉碎物(葛花粉末)和葛花提取物。葛花提取物包括从葛花、葛花破碎物、葛花干燥物或葛花粉末中进行提取处理而得到的提取物。葛花提取物不论形状，可以为液状、糊状、粉状。

本发明中所使用的葛花处理物可以含有异黄酮类等类黄酮、皂苷、色氨酸糖苷等，优选含有异黄酮类和皂苷。作为大量含有异黄酮类和皂苷的葛花处理物，优选使用葛花提取物。葛花提取物的防止身体脂肪蓄积效果(防止内脏脂肪和皮下脂肪的蓄积效果)、降体脂效果、抗肥胖效果和血中脂质改善效果，例如，如后述的实施例所示，与含有等量的异黄酮类或皂苷的大豆提取物等相比较还要优异。

以下，对于作为上述葛花处理物的葛花的干燥物、葛花粉末和葛花提取物的调制方法进行说明。

葛花的干燥物为将葛花、优选花蕾阶段的葛花通过晒干、热风干燥等方法干燥而成的物质。

葛花粉末可以将上述葛花的干燥物粉碎而得到。粉末化可以使用本领域技术人员通常使用的方法例如：球磨机、锤磨机、辊磨机等而进行。

葛花粉末也可以如下得到：将采集的葛花使用石磨型超细颗粒研磨机(Masscolloider)、切片机、Comitrol等进行破碎而得到葛花破碎物，将该葛花破碎物进行干燥，从而得到。

葛花提取物可以如下得到：例如向葛花采集物、葛花破碎物、葛花的干燥物或葛花粉末(以下，有时简单地称为提取原料)中添加溶剂，根据需要进行加温而提取，通过离心分离或过滤而回收提取液，从而得到。

作为上述提取中使用的溶剂，可列举出例如：水、有机溶剂、含水有机溶剂等。作为有机溶剂，可列举出例如：甲醇、乙醇、正丙醇、正丁醇、丙酮、己烷、环己烷、丙二醇、甲乙酮、甘油、醋酸甲酯、醋酸乙酯、二乙基醚、二氯甲烷、食用油脂、1,1,1,2-四氟乙烷和1,1,2-三氯乙烯等。

提取温度只要是使用的溶剂的沸点以下的温度，则没有特别的限制。提取温度根据所使用的溶剂而不同，考虑到有效成分的分解等，通常为4℃～130℃。进行加温而提取的情况下，可以采用例如加热回流等加温提取法、超临界提取法等。加温的情况下，也可以加压而进行。提取时间只要是能够由提取原料充分提取可溶性成分的时间即可。

另外，得到的提取液可以根据需要通过减压浓缩、冷冻干燥等本领域技术人员所使用的方法进行浓缩，制成为液状、糊状或粉末，由此得到葛花提取物。需要说明的是，有时将粉末状的葛花提取物称为提取浸膏末。

或者，将该提取物使用合成吸附剂、葡聚糖树脂进一步纯化，可以得到类黄酮、皂苷等浓度高的葛花提取物。

(抑制脂质吸收的成分或促进脂质代谢的成分、强化肝脏功能的成分)

本发明的剂作为降体脂剂、抗肥胖剂或肝功能改善剂(特别是肝中脂质蓄积抑制剂)使用的情况下，除了上述葛花处理物以外，优选还含有抑制脂质吸收的成分和促进脂质代谢的成分中的至少一种成分。可以通过组合葛花处理物和抑制脂质吸收的成分或促进脂质代谢的成分，从而得到协同的效果。作为抑制脂质吸收的成分，可列举出例如：壳聚糖及其衍生物、欧车前、原花青素等具有排泄胆汁酸的作用的成分；单宁酸、枇杷叶等植物及其提取物等具有脂肪酶抑制作用的成分等。也可以使用丰富地含有这些成分的植物提取物例如大量含有原花青素的松树皮提取物。作为促进脂质代谢的成分，可列举出：核黄素及其衍生物、儿茶素类、异构化亚油酸、咖啡因、辣椒素、肉毒碱、辅酶Q10、α-硫辛酸、大豆肽、氨基酸、精氨酸、槲皮素、及它们的盐等。也可以使用含有这些成分的植物提取物例如：茶、毛喉鞘蕊花(Coleus forskohlii)、童氏落新妇(Astilbe thunbergii(Siebold et Zucc.)Miq.)、黄杞、大豆、辣椒、荞麦、大蒜、洋葱、咖啡豆等的提取物。

另外，以肝细胞活化剂和饮食品的形态使用本发明的剂的情况下，通过配混强化肝脏的功能的来源于植物的成分，能够期待协同效果。作为这样的强化肝脏功能的植物，可列举出例如：姜黄、姜、蓟类(例如，水飞蓟(Silybum marianum)、奶蓟(Milk thistle)、朝鲜蓟等)、银杏(例如银杏叶)、辽东楤木(Aralia elata)、蒲公英(Taraxacum)(例如，西洋蒲公英(Taraxacum officinale)等)、金钱草(Lysimachia christinae)、甘草、螺旋藻(Spirulina)、枸杞(Lycium barbarum)(例如，枸杞的果实、枸杞的叶等)、洋蓟(Cynarascolymus)及它们的提取物等。也可以使用由这些植物得到的特征成分(例如，姜黄素、姜辣素类等)。

(本发明的剂、饮食品和化妆品)

本发明将上述葛花处理物用于本发明的剂、饮食品和化妆品的制造中，本发明的剂以及饮食品和化妆品含有上述葛花处理物。需要说明的是，本发明的剂也可以制成为药品。

本发明的剂和本发明的饮食品中，除了添加葛花处理物之外，还可以根据需要进而含有赋形剂、增量剂、粘结剂、增稠剂、乳化剂、着色剂、香料、其他的食品原料、调味料、药品原料等其他的成分。作为食品原料，可列举出：蜂王浆、蜂胶、维生素类(A、B、C、D、E、K、叶酸、泛酸、生物素、它们的衍生物等)、矿物质(铁、镁、钙、锌等)、硒、几丁质·壳聚糖、卵磷脂、多酚(类黄酮及其衍生物等)、类胡萝卜素(番茄红素、虾青素、玉米黄质、黄体素等)、黄嘌呤衍生物(咖啡因等)、脂肪酸、蛋白质(胶原蛋白、弹性蛋白等)、粘多糖类(透明质酸、软骨素、它们的盐等)、氨基糖(葡萄糖胺、乙酰氨基葡萄糖、它们的盐等)、低聚糖(低聚麦芽糖、环状低聚糖等)、鞘脂及其衍生物(磷脂酰胆碱、神经酰胺等)、含硫化合物(蒜氨酸，牛磺酸，谷胱甘肽、甲磺酰甲烷等)、糖醇、木酚素类(芝麻素等)、含有它们的动植物提取物、根菜类(姜黄、姜等)、大麦嫩叶末等稻科植物的绿叶、羽衣甘蓝等十字花科植物的绿叶等。作为调味料，可以使用糖液、糖醇液等用于甜味的调节等。

作为本发明的剂和饮食品的形态，为液体的情况下可以作为饮料直接饮用，也可制成硬胶囊、软胶囊等胶囊剂、片剂、或丸剂。另外，还可以成型为粉末状、颗粒状、茶状、袋泡茶状、或糖稀状等形态。本发明的剂或本发明的饮食品可以根据它们的形状或形态直接食用，或者也可以根据喜好溶入水、热水、牛奶等中而饮用。另外，作为粉末化而制成为袋泡茶状等的情况下，也可以使成分浸出后饮用。进而，也可以应用于例如：植物发酵汁、蔬菜汁(例如，胡萝卜汁)、植物提取物、果汁等中。

本发明的剂、饮食品和化妆品的制造，只要使用葛花处理物则对其制造方法没有限定。

葛花处理物起到优异的降体脂效果。另外，葛花处理物起到优异的肝功能改善效果，具体而言为：抑制肝中脂质蓄积效果、抑制摄取酒精后产生的血液中的乙醛浓度上升的效果、抑制摄取酒精后产生的血液中的醋酸浓度上升的效果及肝细胞活化效果。

利用这些作用，可以以抗肥胖、降体脂或肝功能的改善为目的将葛花处理物用于剂或饮食品的制造中，由此能够得到对于这些目的有效的剂或饮食品。例如，这些剂或饮食品能够预防和改善身体脂肪的蓄积和脂肪肝(非酒精性脂肪肝)，另外，能够预防和治疗由血液中的乙醛浓度上升导致的脸面潮红、醉后难受，能够抑制摄取酒精后作为代谢产物的醋酸所引起的呕吐、血压降低。另外，本发明的剂可以作为肝细胞活化剂而使用。

另外，葛花处理物对于存在于表皮的温度敏感性受体蛋白质之一的TRPV4的基因表达亢进发挥优异的效果，由此具有促进上皮细胞间的细胞间连接结构之一的紧密连接形成，从而改善皮肤屏障功能的效果。因此，通过利用葛花处理物的该作用而将葛花处理物应用于以皮肤屏障功能改善为目的的剂、饮食品和化妆品的制造中，能够得到对于这些目的有效的剂、饮食品和化妆品。这些剂、饮食品和化妆品能够通过使TRPV4的表达亢进而强化皮肤对于病原体等、物理刺激、异物的屏障功能，所以能够预防由体外的细菌、有害物质的侵入导致的直接的损伤、变态反应等，对于皮肤感染症、特应性皮炎、皮脂缺乏性湿疹等皮肤障碍的发病的预防、改善有效果。

另外已知，葛花处理物以以下的剂和组合物等形式也是有效的。

·含有葛花处理物的能量利用效率提高剂。

·含有葛花处理物的β3肾上腺素受体表达亢进剂。

·含有葛花处理物以及选自由姜黄、药用胡萝卜、和甘草组成的组的至少一种植物的食品用组合物。

·含有葛花处理物的经口用肤质改善剂。

·含有葛花处理物的外用剂。

·含有葛花处理物的血流改善剂。

·含有葛花处理物的抗炎症剂。

·含有葛花处理物的容器包装饮料。

·含有葛花处理物的颗粒制剂或粉末制剂。

实施例

〔实施例1：关于体脂肪的降低效果和抗肥胖效果的研究〕

使用ICR系小鼠，将35只小鼠用标准饲料驯化1周。接着，以使每1组的平均体重均匀的方式，1组7只分为5组。

另外地，以含有5质量％的葛花提取物(含有异黄酮类10质量％)、40质量％的牛脂、和9质量％的砂糖的方式，将各成分添加至标准饲料中从而调制试验饲料1。

除了上述葛花提取物之外还以含有5质量％的松树皮提取物的方式添加至标准饲料，除此以外，与上述试验饲料1的调制方法同样地，调制试验饲料2。

除了上述葛花提取物以外还以含有1质量％的CoQ10的方式添加至标准饲料，除此以外，与上述试验饲料1的调制方法同样地，调制试验饲料3。

使用大豆提取物(含有异黄酮类10质量％)代替葛花提取物，除此以外，与上述试验饲料1的调制方法同样地，调制比较饲料。

不添加葛花提取物，除此以外，按照与上述试验饲料1同样的调制方法，同样地调制对照饲料。

使上述5组小鼠分别自由摄取试验饲料1～3、比较饲料和对照饲料。

从自由摄取开始起第25天，测定各小鼠的体重。测定后，由下述式(I)算出体重增加率(％)。

进而，用实验动物用X射线CT测定各小鼠的皮下脂肪。接着，从各小鼠的眼底进行采血，之后进行解剖，摘除后腹膜脂肪和子宫周围脂肪，测定总计的重量(内脏脂肪的重量)。将这些结果组合示于表1中。

[表1]

*：相对于对照饲料p＜0.05有显著性差异

数值为平均值±标准偏差

〔实施例2：肝功能改善效果的研究〕

(实施例2-1)抑制肝中脂质蓄积效果

将SD大鼠18只用前述标准饲料驯化1周。接着，以使每1组的平均体重均匀的方式，1组6只分为3组。

使1组自由摄取：以含有2质量％葛花提取物(异黄酮类10质量％)、1质量％胆固醇、0.25质量％胆酸的方式向标准饲料中添加了各成分的饲料(试验饲料1)。

使另1组自由摄取：以含有1质量％胆固醇、0.25质量％胆酸的方式向标准饲料中添加了各成分的饲料(高胆固醇负荷食品、比较饲料1)。

使剩下的1组仅自由摄取标准饲料(对照饲料1)。

从自由摄取开始起第28天，摘除各大鼠的肝脏，通过Folch法提取肝脏中的总脂质。接着，使用测定试剂盒分别测定中性脂肪量和总胆固醇量。将结果示于表2中。

[表2]

数值为平均值±标准偏差

(实施例2-2)抑制酒精代谢物浓度上升效果

使用葛花提取物(异黄酮类10质量％)，对于其抑制血中乙醛浓度上升效果进行以下的研究。

(对照试验1)

使6名受试者禁酒1天，禁酒后的第二天不吃早餐而进行断食。接着，使受试者摄取水50mL，摄取水后90分钟后进行采血(饮酒后设为0小时)，之后使受试者饮用酒精度数为25度的烧酒60mL。饮酒1小时后和2小时后再次进行采血，使用采血得到的血液，用乙醛测定试剂盒测定血浆中的乙醛浓度，计算出平均值。

(试验1)

在与对照试验1不同的日子，使同一受试者参加，使之与水一起摄取葛花提取物100mg，除此以外，与对照试验1同样地进行。

(试验2)

在与对照试验1和试验1不同的日子，使同一受试者参加，使之与水一起摄取葛花提取物200mg，除此以外，与对照试验1同样地进行。

将以上的对照试验1、试验1和试验2的结果示于图1中。

(实施例2-3)肝细胞活化效果

将HepG2细胞(人肝脏肿瘤细胞)以2×10⁴细胞/孔的方式接种至96孔板，用0.1mL的标准培养基(包含5体积％的血清的DMEM培养基)进行24小时培养。接着，将其中的3孔置换为包含血清和乙醇300mM且含有葛花提取物(含异黄酮类10质量％)0.001质量％的标准培养基，进行24小时培养(试验组1)。

对于另外的3个孔，除了将葛花提取物设为0.003质量％以外，与试验组1同样地进行培养(试验组2)。

对照组1将置换后的培养基设为标准培养基，除此以外，与试验组1同样地进行培养。乙醇对照组1将置换后的培养基设为包含乙醇300mM的标准培养基，除此以外，与试验组1同样地进行培养。

之后，从各组的孔中去除培养液，用PBS(-)洗涤孔。接着，用细胞计数试剂盒(CellCounting Kit)利用表示细胞活化的标记物即线粒体脱氢酶测定WST-1值，计算出将对照组的WST-1值的平均值设为100％时的比例(％)。将结果示于表3中。WST-1值越高表示细胞越活化。

[表3]

数值为平均值±标准偏差(对照组的％)

〔实施例3：改善皮肤屏障功能效果的研究〕

作为葛花处理物使用粉末状的葛花提取物。将该葛花提取物用DMSO进行溶解，制成0.4mg/mL浓度之后，将其用Keratinocyte Basal Medium(TAKARA BIO INC.制，以下简称为“KBM“)进一步稀释1000倍(DMSO终浓度0.1质量％)，得到含有被检物质的培养基1。另外，将含有0.1质量％DMSO的KBM作为比较培养基1。将它们供于以下的＜基因表达试验＞。

＜基因表达试验＞

将正常人表皮角化细胞(Promo Cell制，以下简称为“NHEK细胞“)以成为5×10⁴细胞/孔的方式接种至24孔板。将孔中的NHEK细胞在37℃下进行24小时预培养。接着，将培养基去除之后，添加1mL/孔含有被检物质的培养基1，在37℃下进行48小时培养(n＝3)。作为阴性对照(Control)，代替含有被检物质的培养基1使用比较培养基1，进行同样的培养。

由培养后的细胞，使用QIAGEN制RNeasy Mini Kit，得到作为mRNA的总RNA样品。使用得到的总RNA样品，使用(QIAGEN制逆转录试剂盒(Reverse Transcription Kit)，制作cDNA。将得到的cDNA样品用去核糖核酯酶(RNase)水进行10倍稀释，作为模板。另外，为了制成标准曲线，将1个样品稀释10倍之后进而稀释4倍、16倍。对于稀释后的cDNA，按照以下的条件实施RT-PCR。引物(Primer)使用以下的物质。

(RT-PCR的条件)

保持(Hold)：95℃·5分钟

循环(Cycle)：95℃·5秒→60℃·10秒×40个循环

解链温度(Melt)：55-99℃

引物(Primer)

·GAPDH：Hs_GAPDH_2_SG(QT01192646)

·TRPV4：Hs_TRPV4_1_SG(QT00077217)

使用由稀释了1倍(cDNA样品的10倍稀释物)、4倍、16倍的样品制作的标准曲线，计算出各样品中的基因表达量。将GAPDH(管家基因)作为内标修正mRNA量，计算出相对于阴性对照的相对基因表达量。将该结果示于图2中。

Claims (2)

1.葛花处理物在制造使TRPV4的表达亢进而具有促进上皮细胞间的细胞间连接结构之一的紧密连接形成的皮肤屏障功能改善剂中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，所述葛花处理物用于饮食品。

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