CN104558230A - 一种猪苓多糖的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种猪苓多糖的制备方法,该方法提供了一种膜分离技术与冷冻干燥技术相结制备猪苓多糖的方法,该多糖是由分子量为400-800的猪苓多糖组成,包括以下步骤:猪苓水提液的制备;猪苓水提液过膜前处理;超滤膜浓缩猪苓水提液;浓缩液冷冻干燥成猪苓多糖制品。实验结果表明,本发明所提供的制备方法得到的分子量为400-800的猪苓多糖含量较高,可达91.12%,且具有较高的生物活性。具有操作简单、步骤少、成本低、适合工业化生产的特点。
Description
技术领域
本发明属于中药制备技术领域,具体涉及一种猪苓多糖的制备方法。
背景技术
猪苓是一种重要的药用真菌,分布于黑龙江、吉林、四川、贵州、云南等地。近代医学研究表明,猪苓除利水渗湿、治疗淋病及胃炎等功效外,还具有免疫增强、肝保护及治疗肝炎肝硬化、治疗泌尿系统结石、尿道综合症、抗癌、遗传损伤的修复、加强血小板凝集等作用。已报道的猪苓化学成分主要有:麦角甾醇(Ergosterol)、生物素(Biotin)、糖类、蛋白质等。其中猪苓多糖的研究最为广泛,也最为重要。
近年来,人们对真菌多糖的提取工艺进行了广泛的研究,主要有热水浸提(或水煎煮)、乙醇提取、稀酸或稀碱提取等方法。但是这些提取工艺不仅操作复杂,不利于大规模生产,同时在真菌类有效成分含量、得率以及制品纯度等品质方面仍然后一定的缺陷。而膜分离技术具有无需加入任何试剂、无变相、可保持滤液pH值、生产能耗低、工艺流程短、可在常温低压下连续操作等优点,并且尤其适于热不稳定物质如:多糖、蛋白质等大分子物质,并且,在食用菌多糖及在发酵产物分离及生物活性物质提取或水净化中应用较为广泛。而采用膜分离技术浓缩提取猪苓水溶液的方法尚未见报道。
目前,经过提取后的多糖常用的干燥方式主要采用高温干燥、真空干燥、喷雾干燥等,但高温干燥多糖易降解,影响药效;真空干燥时间长,干燥不彻底,样品的色泽较深,影响制剂成型;喷雾干燥易于飞扬,产品得率低[18]。而采用冷冻干燥法对猪苓水提液干燥的方法尚未见报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种操作简单,制品质量稳定,得率高的猪苓多糖的制备方法。
本发明的一种猪苓多糖的制备方法,包括以下步骤:
(1)猪苓水提液的制备:取猪苓药材粉末1份,依次用1.3-2.0份石油醚、1.3-2.0乙酸乙酯、1.3-2.0乙醇,室温条件下浸提脂溶性成分,滤过,沉淀在30-40℃温度条件下挥去残余溶剂后,加入150-250份水,30-45℃加热提取,提取2次,每次1h,过滤,合并滤液;
(2)猪苓水提液过膜前预处理:向猪苓水提液中加入0.3-1份微晶纤维素,沉淀12小时,离心,收集上清液;
(3)超滤膜浓缩猪苓水提液:经过预处理后的猪苓水提液,在操作压力0.13-0.15MP下,用孔径为50000的超滤膜进行浓缩,得到相对分子量大于50000的水溶液和透过该超滤膜的渗透液;再用孔径为5000的超滤膜,将透过50000超滤膜的渗透液进行浓缩处理,得到浓缩液为相对分子量大于5000的水溶液和透过该超滤膜的渗透液;
(4)纳滤膜浓缩猪苓水提液:在操作压力0.25-0.35MPa下,经过孔径为5000超滤膜的渗透液通过孔径为800的纳滤膜进行浓缩,得到浓缩液为相对分子量大于的800水溶液和透过该纳滤膜的渗透液;再用孔径为400的纳滤膜,将透过800纳滤膜的渗透液进行浓缩处理,得到浓缩液为相对分子量大于400的水溶液和透过该超滤膜的渗透液;
(5)浓缩液冷冻干燥成猪苓多糖制品:将经过孔径800未经过孔径400的浓缩液进行预冷处理,通过冷冻干燥的方法进行干燥,除去水分,即得猪苓多糖分子量为400-800。
上述的猪苓多糖的制备方法,其中:所述冷冻干燥采用预冷温度为-40℃,升华温度为15-30℃,解析干燥温度为60-70℃。
本发明与现有技术相比,具有明显有益效果,从以上技术方案可知:本发明所提供的猪苓多糖的制备方法采用了超滤-纳滤膜浓缩技术与冷冻干燥技术集成工艺对猪苓水提液进行浓缩、干燥,制品可以分装后直接应用于产品,也可作为中间产品。其操作简单,避免高温加热浓缩产生的副产物,猪苓多糖制品质量稳定,具有较高的得率。
具体实施方式
下面通过实验例和实施例进一步说明本发明的有益效果。
实验例
采用膜分离技术与冷冻干燥技术相结,分别提取不同分子量的猪苓多糖,具体实验步骤如下:
1、一种猪苓多糖的制备方法,包括以下步骤:
(1)猪苓水提液的制备:称取300g猪苓药材粉碎,依次用石油醚、乙酸乙酯、乙醇各500g室温条件下浸提脂溶性成分,滤过,沉淀在35℃挥去残余有机溶剂,加入60000g水,35℃加热提取,提取2次,每次1h,过滤,合并滤液,备用;
(2)猪苓水提液过膜前预处理:向猪苓水提液中加入微晶纤维素200g,沉淀12小时,离心,收集上清液备用。
(3)超滤膜浓缩猪苓水提液:将经过预处理的猪苓水提液在0.13-0.15MPa操作压力下,先经过孔径为50000的超滤膜浓缩,得到浓缩液为相对分子量大于50000的水溶液和透过该超滤膜的渗透液;再用孔径为5000的超滤膜,将透过50000超滤膜的渗透液进行浓缩处理,得到浓缩液为相对分子量大于5000的水溶液和透过该超滤膜的渗透液;
(4)纳滤膜浓缩猪苓水提液:经过孔径为5000超滤膜的渗透液,在0.25-0.35MPa的操作压力下,先经过孔径为800的纳滤膜浓缩,得到浓缩液为相对分子量大于800的水溶液和透过该纳滤膜的渗透液;再用孔径为400的纳滤膜,将透过800纳滤膜的渗透液进行浓缩处理,得到浓缩液为相对分子量大于400物质的水溶液和透过该超滤膜的渗透液;最后用孔径为200的纳滤膜对透过400纳滤膜的渗透液进行浓缩处理,得到浓缩液;
(5)浓缩液冷冻干燥成猪苓多糖制品:合并两次超滤和三次纳滤浓缩获得的浓缩液,预冷至-40℃,在升华温度为15-30℃、解析干燥温度为60-70℃的冷冻干燥条件下进行干燥,得到外观呈淡褐色的不同分子的猪苓多糖总重104.85g。
、一种猪苓多糖的制备方法,包括以下步骤:
(1)猪苓水提液的制备:称取300g猪苓药材粉碎,依次用石油醚、乙酸乙酯、乙醇各390g室温条件下浸提脂溶性成分,滤过,沉淀在33℃挥去残余有机溶剂,加入45000g水,30℃加热提取,提取2次,每次1h,过滤,合并滤液,备用;
(2)猪苓水提液过膜前预处理:向猪苓水提液中加入微晶纤维素90g,沉淀12小时,离心,收集上清液备用。
将步骤(3)变更为:经过预处理的猪苓水提液,先将操作压力从0.13MPa逐渐升高至0.15MPa,经过孔径为50000的超滤膜,得到浓缩液为相对分子量大于50000的水溶液和透过该超滤膜的渗透液;
步骤(5)变更为:将相对分子量大于50000的浓缩液预冷至-40℃,在升华温度为在升华温度为20℃、解析干燥温度为65℃的冷冻干燥条件下进行干燥,得到外观呈淡褐色的分子量大于50000的猪苓多糖55.50g。
、一种猪苓多糖的制备方法,包括以下步骤:
(1)猪苓水提液的制备:称取300g猪苓药材粉碎,依次用石油醚、乙酸乙酯、乙醇各600g室温条件下浸提脂溶性成分,滤过,沉淀在40℃挥去残余有机溶剂,加入75000g水,45℃加热提取,提取2次,每次1h,过滤,合并滤液,备用;
(2)猪苓水提液过膜前预处理:向猪苓水提液中加入微晶纤维素300g,沉淀12小时,离心,收集上清液备用。
将步骤(3)变更为:将经过预处理的猪苓水提液在0.15MPa操作压力下,先经孔径为50000的超滤膜浓缩,得到浓缩液为相对分子量大于50000的水溶液和透过该超滤膜的渗透液;再将操作压力从0.13MPa逐渐升高至0.15MPa,用孔径为5000的超滤膜,将透过50000超滤膜的渗透液进行浓缩处理,得到浓缩液为相对分子量大于5000物质的水溶液和透过该超滤膜的渗透液;
步骤(5)变更为:将相对分子量为5000-50000的浓缩液预冷至-40℃,在升华温度为30℃、解析干燥温度为60℃的冷冻干燥条件下进行干燥,得到外观呈淡褐色的分子量为5000-50000的猪苓多糖9.90g。
、一种猪苓多糖的制备方法,包括以下步骤:
(1)猪苓水提液的制备:称取300g猪苓药材粉碎,依次用石油醚、乙酸乙酯、乙醇各500g室温条件下浸提脂溶性成分,滤过,沉淀在35℃挥去残余有机溶剂,加入60000g水,35℃加热提取,提取2次,每次1h,过滤,合并滤液,备用;
(2)猪苓水提液过膜前预处理:向猪苓水提液中加入微晶纤维素200g,沉淀12小时,离心,收集上清液备用。
将步骤(4)变更为:经过孔径为5000超滤膜纯化的渗透液,先将操作压力从0.25MPa逐渐升高至0.35MPa,经过孔径为800的纳滤膜进行浓缩,得到浓缩液为相对分子量大于800的水溶液和透过该纳滤膜的渗透液;;
步骤(5)变更为:将相对分子量为800-5000的浓缩液预冷至-40℃,在升华温度为20℃、解析干燥温度为60℃的冷冻干燥条件下进行干燥,得到外观呈淡褐色的分子量为800-5000的猪苓多糖6.30g。
、一种猪苓多糖的制备方法,包括以下步骤:
(1)猪苓水提液的制备:称取300g猪苓药材粉碎,依次用石油醚、乙酸乙酯、乙醇各500g室温条件下浸提脂溶性成分,滤过,沉淀在35℃挥去残余有机溶剂,加入60000g水,35℃加热提取,提取2次,每次1h,过滤,合并滤液,备用;
(2)猪苓水提液过膜前预处理:向猪苓水提液中加入微晶纤维素200g,沉淀12小时,离心,收集上清液备用。
将步骤(4)变更为:经过孔径为5000超滤膜纯化的渗透液,在0.35MPa的操作压力下,先经孔径为800的纳滤膜进行浓缩,得到浓缩液为相对分子量大于800的水溶液和透过该纳滤膜的渗透液;再将操作压力从0.25MPa逐渐升高至0.35MPa,用孔径为400的纳滤膜,将透过800纳滤膜的渗透液进行浓缩处理,得到浓缩液为相对分子量大于400的水溶液和透过该超滤膜的渗透液;
步骤(5)变更为:将相对分子量为400-800的浓缩液预冷至-40℃,在升华温度为15℃、解析干燥温度为70℃的冷冻干燥条件下进行干燥,得到外观呈淡褐色的分子量为400-800的猪苓多糖17.25g。
、一种猪苓多糖的制备方法,包括以下步骤:
(1)猪苓水提液的制备:称取300g猪苓药材粉碎,依次用石油醚、乙酸乙酯、乙醇各500g室温条件下浸提脂溶性成分,滤过,沉淀在35℃挥去残余有机溶剂,加入60000g水,35℃加热提取,提取2次,每次1h,过滤,合并滤液,备用;
(2)猪苓水提液过膜前预处理:向猪苓水提液中加入微晶纤维素200g,沉淀12小时,离心,收集上清液备用。
将步骤(4)变更为:经过孔径为5000超滤膜的渗透液,在0.35MPa的操作压力下,先经过孔径为800的纳滤膜进行浓缩,得到浓缩液为相对分子量大于800的水溶液和透过该纳滤膜的渗透液;再用孔径为400的纳滤膜,将透过800纳滤膜的渗透液进行浓缩处理,得到浓缩液为相对分子量大于400的水溶液和透过该超滤膜的渗透液;最后将操作压力从0.25MPa逐渐升高至0.35MPa,用孔径为200的纳滤膜,将透过400纳滤膜的渗透液进行浓缩处理,得到浓缩液;
步骤(5)变更为:将相对分子量为200-400的浓缩液预冷至-40℃,在升华温度为15℃、解析干燥温度为70℃的冷冻干燥条件下进行干燥,得到外观呈淡褐色的分子量为200-400的猪苓多糖15.90g。
、一种猪苓多糖的制备方法,包括以下步骤:
将6中通过孔径为200的纳滤膜的渗透液预冷至-40℃,在升华温度为15℃、解析干燥温度为70℃的冷冻干燥条件下进行干燥,得到外观呈淡褐色的分子量小于200的猪苓多糖6.60g。
通过测定2-7各段浓缩液中不同分子量猪苓多糖含量,结果如下:
表1 各段浓缩液中猪苓多糖含量
样品 | 冻干粉得率(%) | 各分段糖含量(%) |
大于50000 | 18.5 | 72.57 |
5000-50000 | 3.3 | 88.00 |
800-5000 | 2.1 | 76.22 |
400-800 | 5.75 | 91.12 |
200-400 | 5.3 | 69.40 |
200以下 | 2.2 | 34.15 |
通过以上结果可知,相对分子量为400-800浓缩液中的猪苓多糖含量最高,为91.12%。
通过对2-7各段浓缩液中猪苓多糖,分别进行小鼠体外淋巴细胞增殖试验、免疫器官重量法实验、溶血素抗体生成影响实验,结果如下:
表2 各段猪苓多糖对淋巴细胞的直接作用
组别 | 5μg/mL | 25μg/mL | 50μg/mL |
阴性对照 | 0.078±0.05 | ||
猪苓原液 | 0.105±0.018* | 0.205±0.019** | 0.053±0.009 |
>50000 | 0.023±0.005 | 0.019±0.003 | 0.014±0.001 |
5000-50000 | 0.152±0.013* | 0.146±0.011* | 0.164±0.014* |
800-5000 | 0.093±0.001 | 0.029±0.007 | 0.016±0.004 |
400-800 | 0.234±0.012** | 0.290±0.018** | 0.273±0.007** |
200-400 | 0.085±0.003 | 0.067±0.001 | 0.114±0.014* |
200以下 | 0.093±0.06 | 0.059±0.004 | 0.086±0.004 |
*P<0.05 **P<0.01
通过以上结果可知,相对分子量为400-800的猪苓多糖相对其他各组均较为优秀,且呈极显著性差异(P<0.01)。
表3不同分子量段刺激脾指数与胸腺指数( ±S)
组别 | 动物(只) | 剂量(mg/kg·d-1) | 脾系数 | 胸腺系数 |
正常对照 | 12 | - | 4.53±1.80 | 3.19±1.29 |
猪苓原液 | 12 | 200 | 6.03±2.74** | 2.07±0.55** |
>50000 | 12 | 200 | 4.03±2.17 | 1.77±0.54 |
5000-50000 | 12 | 200 | 4.66±1.73* | 2.52±0.80** |
800-5000 | 12 | 200 | 3.96±2.96 | 1.98±1.67 |
400-800 | 12 | 200 | 6.50±1.53** | 3.47±1.15** |
200-400 | 12 | 200 | 3.87±2.85 | 1.53±1.65 |
200以下 | 12 | 200 | 3.59±2.88 | 1.16±0.87 |
地塞米松模型 | 12 | - | 3.28±0.86△ | 0.81±0.36△△ |
与正常对照组比较:△P<0.05 △△P<0.01;与模型组比较: * P<0.05 ** P<0.01
通过以上结果可知,相对分子量为400-800的猪苓多糖对盐酸地塞米松致免疫缺陷小鼠胸腺有增殖作用,呈极显著性差异(P<0.01)。
表4 各段猪苓多糖对小鼠血清溶血素形成的影响(HC50)
组别 | 动物(只) | 剂量(mg/kg·d-1) | HC50 |
正常对照 | 12 | - | 49.90±21.69 |
猪苓原液 | 12 | 200 | 31.11±24.63 |
>50000 | 12 | 200 | 41.33±24.63 |
5000-50000 | 12 | 200 | 52.36±22.37** |
800-5000 | 12 | 200 | 54.93±20.09** |
400-800 | 12 | 200 | 58.27±27.77** |
200-400 | 12 | 200 | 51.55±23.54* |
<200 | 12 | 200 | 50.96±21.36* |
模型 | 12 | - | 23.68±24.47△ |
与正常对照组比较:△P<0.05;与模型组比较:*P<0.05 **P<0.01
通过以上实验结果可知,相对分子量为400-800的猪苓多糖对小鼠血清溶血素形成效果较为明显,呈极显著差异(P<0.01)。
结合测定前述2-7各段浓缩液中不同分子量猪苓多糖含量的结果可知,相对分子量为400-800的猪苓多糖免疫效果较其他各段较为优秀,且均呈现极显著差异(P<0.01)。
实施例
实施例1
一种猪苓多糖的制备方法:包括以下步骤:
(1)猪苓水提液的制备:称取300g猪苓药材粉碎,依次用石油醚、乙酸乙酯、乙醇各500g室温条件下浸提脂溶性成分,滤过,沉淀在35℃挥去残余有机溶剂,加入60000g水,35℃加热提取,提取2次,每次1h,过滤,合并滤液,备用;
(2)猪苓水提液过膜前预处理:向猪苓水提液中加入微晶纤维素200g,沉淀12小时,离心,收集上清液备用。
(3)超滤膜浓缩猪苓水提液:经过预处理后的猪苓水提液,在0.13MPa的操作压力下,先经过孔径为50000的超滤膜浓缩,得到浓缩液为相对分子量大于50000的水溶液和透过该超滤膜的渗透液;再用孔径为5000的超滤膜,将透过50000超滤膜的渗透液进行浓缩处理,得到浓缩液为相对分子量大于5000的水溶液和透过该超滤膜的渗透液;
(4)纳滤膜浓缩猪苓水提液:经过孔径为5000超滤膜浓缩的渗透液,在0.35Mpa的操作压力下,先通过孔径为800的纳滤膜进行浓缩,得到浓缩液为相对分子量大于800的水溶液和透过该纳滤膜的渗透液;再将操作压力从0.25MPa逐渐升高至0.35MPa,用孔径为400的纳滤膜,将透过800纳滤膜的渗透液进行浓缩处理,得到浓缩液为相对分子量大于400的水溶液和透过该超滤膜的渗透液;
(5)浓缩液冷冻干燥成猪苓多糖制品:将经过孔径800而未经过孔径400的浓缩液预冷至-40℃,在升华温度为15℃,解析干燥温度为70℃的冷冻干燥条件下进行干燥,得到外观呈淡褐色的猪苓多糖17.25g。
实施例2
一种猪苓多糖的制备方法:包括以下步骤:
(1)猪苓水提液的制备:称取300g猪苓药材粉碎,依次用石油醚、乙酸乙酯、乙醇各500g室温条件下浸提脂溶性成分,滤过,沉淀在35℃挥去残余有机溶剂,加入60000g水,35℃加热提取,提取2次,每次1h,过滤,合并滤液,备用;
(2)猪苓水提液过膜前预处理:向猪苓水提液中加入微晶纤维素200g,沉淀12小时,离心,收集上清液备用。
(3)超滤膜浓缩猪苓水提液:经过预处理后的猪苓水提液,在0.15MPa的操作压力下,先经过孔径为50000的超滤膜浓缩,得到浓缩液为相对分子量大于50000的水溶液和透过该超滤膜的渗透液;再用孔径为5000的超滤膜,将透过50000超滤膜的渗透液进行浓缩处理,得到浓缩液为相对分子量大于5000的水溶液和透过该超滤膜的渗透液;
(4)纳滤膜浓缩猪苓水提液:经过孔径为5000超滤膜浓缩的渗透液,在0.25Mpa的操作压力下,先通过孔径为800的纳滤膜进行浓缩,得到浓缩液为相对分子量大于800的水溶液和透过该纳滤膜的渗透液;再用孔径为400的纳滤膜,将透过800纳滤膜的渗透液进行浓缩处理,得到浓缩液为相对分子量大于400的水溶液和透过该超滤膜的渗透液;
(5)浓缩液冷冻干燥成猪苓多糖制品:将经过孔径800而未经过孔径400的浓缩液预冷至-40℃,在升华温度为30℃,解析干燥温度为60℃的冷冻干燥条件下进行干燥,得到外观呈淡褐色的猪苓多糖17.13g。
实施例3
一种猪苓多糖的制备方法:包括以下步骤:
(1)猪苓水提液的制备:称取300g猪苓药材粉碎,依次用石油醚、乙酸乙酯、乙醇各500g室温条件下浸提脂溶性成分,滤过,沉淀在35℃挥去残余有机溶剂,加入60000g水,35℃加热提取,提取2次,每次1h,过滤,合并滤液,备用;
(2)猪苓水提液过膜前预处理:向猪苓水提液中加入微晶纤维素200g,沉淀12小时,离心,收集上清液备用。
(3)超滤膜浓缩猪苓水提液:经过预处理后的猪苓水提液,在0.14MPa的操作压力下,先经过孔径为50000的超滤膜浓缩,得到浓缩液为相对分子量大于50000的水溶液和透过该超滤膜的渗透液;再用孔径为5000的超滤膜,将透过50000超滤膜的渗透液进行浓缩处理,得到浓缩液为相对分子量大于5000的水溶液和透过该超滤膜的渗透液;
(4)纳滤膜浓缩猪苓水提液:经过孔径为5000超滤膜浓缩的渗透液,在0.30Mpa的操作压力下,先通过孔径为800的纳滤膜进行浓缩,得到浓缩液为相对分子量大于800的水溶液和透过该纳滤膜的渗透液;再用孔径为400的纳滤膜,将透过800纳滤膜的渗透液进行浓缩处理,得到浓缩液为相对分子量大于400的水溶液和透过该超滤膜的渗透液;
(5)浓缩液冷冻干燥成猪苓多糖制品:将经过孔径800而未经过孔径400的浓缩液预冷至-40℃,在升华温度为22.5℃,解析干燥温度为65℃的冷冻干燥条件下进行干燥,得到外观呈淡褐色的猪苓多糖17.18g。
以上所述,仅是本发明的较佳实施例而已,并非对本发明作任何形式上的限制,任何未脱离本发明技术方案内容,依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰,均仍属于本发明技术方案的范围内。
Claims (2)
1.一种猪苓多糖的制备方法,包括以下步骤:
(1)猪苓水提液的制备:取猪苓药材粉末1份,依次用1.3-2.0份石油醚、1.3-2.0乙酸乙酯、1.3-2.0乙醇,室温条件下浸提脂溶性成分,滤过,沉淀在30-40℃温度条件下挥去残余溶剂后,加入150-250份水,30-45℃加热提取,提取2次,每次1h,过滤,合并滤液;
(2)猪苓水提液过膜前预处理:向猪苓水提液中加入0.3-1份微晶纤维素,沉淀12小时,离心,收集上清液;
(3)超滤膜浓缩猪苓水提液:经过预处理后的猪苓水提液,在操作压力0.13-0.15MP下,用孔径为50000的超滤膜进行浓缩,得到相对分子量大于50000的水溶液和透过该超滤膜的渗透液;再用孔径为5000的超滤膜,将透过50000超滤膜的渗透液进行浓缩处理,得到浓缩液为相对分子量大于5000的水溶液和透过该超滤膜的渗透液;
(4)纳滤膜浓缩猪苓水提液:在操作压力0.25-0.35MPa下,经过孔径为5000超滤膜的渗透液通过孔径为800的纳滤膜进行浓缩,得到浓缩液为相对分子量大于的800水溶液和透过该纳滤膜的渗透液;再用孔径为400的纳滤膜,将透过800纳滤膜的渗透液进行浓缩处理,得到浓缩液为相对分子量大于400的水溶液和透过该超滤膜的渗透液;
(5)浓缩液冷冻干燥成猪苓多糖制品:将经过孔径800未经过孔径400的浓缩液进行预冷处理,通过冷冻干燥的方法进行干燥,除去水分,即得猪苓多糖分子量为400-800。
2.根据权利要求1所述的猪苓多糖的制备方法,其中:所述冷冻干燥采用预冷温度为-40℃,升华温度为15-30℃,解析干燥温度为60-70℃。
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