CN104547925B - 一种肝复乐挥发油提取方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种肝复乐挥发油提取方法，包括步骤如下的酶解过程：1)将肝复乐挥发油提取药材加水浸泡、加热；2)维持步骤(1)得到的混合物的pH为7.0～7.5；3)在步骤(2)得到的混合物中加入酶进行酶解，酶解温度为40～60℃，酶解时间为10分钟～5小时，酶与药材重量比为(1～10):1000。本发明的提取方法简单、提取时间短、耗能低、效率高。挥发油的极性较小，采用常规的提取方法，往往会使用大量的低极性的有机溶剂，而本申请中先进行酶解后再用水提取，避免使用了有机溶剂，减少污染。
Description
技术领域
本发明属于中药提取领域，涉及一种肝复乐挥发油提取方法。
背景技术
挥发油是植物体内一类重要的次生代谢产物，具有显著的生物活性，在医药、食品、日化等领域都有着广泛的应用价值。然而，挥发油在植物体内含量非常少且易损失，因此为了最大程度获得目标物质，寻求合适的提取方法技术极其重要。目前，有关肝复乐挥发油提取技术主要是水蒸气蒸馏法，但该方法存在着提取时间长，耗费能量，产率低等缺点，因此选择一种简单、高效地提取肝复乐挥发油的理想方法，具有十分重要的意义。
酶是由生物体活细胞产生、以蛋白质形式存在的一类特殊生物催化剂，能够参与和促进活体细胞内的各类化学反应。酶具有催化效率高，作用专一性强和催化温度温和等特点，用于挥发油提取可提高生产率，降低能耗，改善劳动条件，减少污染。目前酶法提取挥发油技术在20世纪90年代中期以后我国陆续有研究报道将其用于中药的提取制备中，并取得了较好的效果。但未见利用酶法提取肝复乐挥发油的相关报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种肝复乐挥发油的提取方法，该方法简单、提取时间短、耗能低、产率高。
本发明所述肝复乐挥发油提取方法，包括步骤如下的酶解过程：
1)将肝复乐挥发油提取药材加水浸泡、加热；
2)调节步骤(1)得到的混合物的pH为7.0～7.5；
3)在步骤(2)得到的混合物中加入酶进行酶解，酶解温度为40～60℃，酶解时间为10分钟～5小时，酶与药材重量比为1～10:1000。
上述肝复乐挥发油提取方法，所述挥发油提取药材，按重量份计由沉香45份、炒白术440份、陈皮440份、败酱草440份、郁金440份，制香附440份，柴胡222份，茵陈440份组成。
上述肝复乐挥发油提取方法，步骤(1)具体为：将肝复乐挥发油提取药材加入2～10倍量的水中浸泡0.5～2小时，然后加热到40～60℃。
为了更好地促进酶解过程的进行，水的量优选为4倍量；浸泡时间优选为0.5h，加热温度优选为46～47℃，最优选为46℃。
步骤(1)中浸泡、加热条件的为优化的工艺参数，能够提高酶解药材的效果，提高挥发油的产率。
上述肝复乐挥发油提取方法，步骤(2)中调节pH值时可根据需要按照常规的方法，选择酸碱试剂和具体的用量来调节pH值。当pH低于7.0时，优选为20％(w/w)的氢氧化钠溶液。
本发明的提取方法中，酶解前浸泡、加热是为了使药材充分吸水溶胀，利于酶解；调节pH值是为了使酶解时酶的活力达到最大。
上述肝复乐挥发油提取方法，步骤(3)中所述酶为纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶中的一种或几种，优选为纤维素酶。
本发明酶解过程中，当使用的酶为多种时，各酶组分间的配比关系根据实际的需要而确定。
本发明对酶的种类、酶的用量的选择能够有效提高挥发油的收率。
上述肝复乐挥发油提取方法，步骤(3)中所述酶与药材重量比优选为(1～3):1000，更优选为2:1000。
上述肝复乐挥发油提取方法，步骤(3)中所述酶解温度优选为40～60℃，更优选为46-47℃，进一步优选46℃。
上述肝复乐挥发油提取方法，步骤(3)中所述酶解时间优选为0.5～2.5小时，更优选为1小时。
进一步地，本发明所述的提取方法，还包括回流提取步骤：酶解完成后，向步骤(3)得到的混合物中加水进行加热回流提取，收集挥发油。
进一步地，回流提取步骤中加水量为与步骤(1)中的加水量之和为所述挥发油提取药材重量的4～16倍，加热回流温度为80-120℃，加热回流时间为1～6小时。
为了使酶解后药材中的挥发油的产率更高，上述回流提取步骤中加热回流温度为100℃，加热回流时间优选为6小时。
本发明的提取方法简单、提取时间短、耗能低、挥发油的收油率高。由于挥发油的极性较小，采用常规的提取方法，往往会使用大量的低极性的有机溶剂，而本申请中先进行酶解后再用水提取，避免使用了有机溶剂，减少了环境污染。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，所用原料均为市售商品。
实施例1：肝复乐挥发油提取方法
本实施例提供肝复乐挥发油提取方法，包括以下各步骤：
(1)将1000g肝复乐挥发油提取药材(由重量比为45：440：440：440：440：440：222：440的沉香、炒白术、陈皮、败酱草、郁金，制香附，柴胡，茵陈组成)加入4000mL水中浸泡0.5小时，然后加热到46℃；
(2)调节步骤(1)得到的混合物的pH为7.0～7.5，若pH值低于7.0，用20％的氢氧化钠溶液适量调节pH值；
(3)在步骤(2)得到的混合物中加入1g纤维素酶移至恒温培养箱进行酶解，酶解温度为42℃，酶解时间为0.5小时，得到酶解液；将所述酶解液按照常规的回流提取工艺提取肝复乐挥发油。
实施例2：肝复乐挥发油提取方法
同实施例1相比，本实施例进一步提供回流提取步骤的工艺：酶解完成后，向步骤(3)得到的酶解物中加入4000mL水，在100℃下加热回流提取6小时，收集挥发油，挥发油收率为万分之十一。
实施例3：肝复乐挥发油提取方法
本实施例提供肝复乐挥发油提取方法，包括以下各步骤：
(1)将1000g肝复乐挥发油提取药材(由重量比为45：440：440：440：440：440：222：440的沉香、炒白术、陈皮、败酱草、郁金、制香附、柴胡、茵陈组成)加入2000mL水中浸泡0.5小时，然后加热到46℃；
(2)调节步骤(1)得到的混合物的pH为7.0～7.5，若pH值低于7.0，用20％的氢氧化钠溶液适量调节pH值；
(3)在步骤(2)得到的混合物中加入2g纤维素酶移至恒温培养箱，进行酶解，酶解温度为46℃，酶解时间为1.5小时，得到酶解液。将所述酶解液按照常规的回流提取工艺提取肝复乐挥发油。
实施例4：肝复乐挥发油提取方法
同实施例3相比，本实施例进一步提供回流提取步骤的工艺，酶解完成后，向步骤(3)得到的酶解液中加入10L水，在100℃下加热回流提取6小时，收集挥发油，挥发油收率为万分之十五。
实施例5：肝复乐挥发油提取方法
本实施例肝复乐挥发油提取方法，包括以下各步骤：
1)将1000g肝复乐挥发油提取药材(由重量比为45：440：440：440：440：440：222：440的沉香、炒白术、陈皮、败酱草、郁金，制香附，柴胡，茵陈组成)加入10L水中浸泡0.5小时，然后加热到42℃
2)调节步骤(1)得到的混合物的pH为7.0～7.5，若pH值低于7.0，用20％的氢氧化钠溶液适量调节pH值；
3)在步骤(2)得到的混合物中加入3g纤维素酶移至恒温培养箱，进行酶解，酶解温度为50℃，酶解时间为2.5小时，得到酶解液。将所述酶解液按照常规的回流提取工艺提取肝复乐挥发油。
实施例6：肝复乐挥发油提取方法
同实施例5相比，本实施例进一步提供回流提取步骤的工艺，酶解完成后，向步骤(3)得到的酶解液中加入6L水，在100℃下加热回流提取1小时，收集挥发油，收油率挥发油收率为万分之十。
实施例7：肝复乐挥发油提取方法
本实施例与实施例3相比，区别仅在于：
步骤(1)中浸泡2小时，加热到60℃；
步骤(3)中加入果胶酶5g、纤维素酶5g，酶解温度为40℃，酶解时间为10分钟。将所述酶解液按照常规的回流提取工艺提取肝复乐挥发油。
实施例8：肝复乐挥发油提取方法
本实施例与实施例7相比，进一步限定回流提取的工艺：酶解完成后，向步骤(3)得到的混合物中加入2L水，在120℃下加热回流提取1小时，收集挥发油，收油率万分之十。
实施例9：肝复乐挥发油提取方法
本实施例与实施例3相比，区别仅在于：
步骤(1)中加热到50℃；
步骤(3)中，加入果胶酶5g、半纤维素酶5g，酶解温度为60℃，酶解时间为5小时。将所述酶解液按照常规的回流提取工艺提取肝复乐挥发油。
实施例10：肝复乐挥发油提取方法
本实施例与实施例9相比，进一步限定回流提取的工艺：酶解完成后，向步骤(3)得到的混合物中加入4L水，在100℃下加热回流提取1小时，收集挥发油，收油率为万分之十一。
对比例1：
同实施例1相比，其区别在于，仅对肝复乐挥发油提取药材进行浸泡，即只进行步骤(1)的操作，省略步骤(2)和步骤(3)，进一步按实施例2的提取操作进行，所得挥发油的提取率为万分之二。
由以上实施例和对比例的结果可以得出，本实验在对肝复乐挥发油提取药材进行浸泡后再进行酶解，可有效的提高肝复乐挥发油的提取率，而且酶解过程简单易于实现，因此，本发明是一种高效、简捷的提取工艺。
虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
Claims (4)
1.一种肝复乐挥发油的提取方法，其特征在于：包括步骤如下的酶解过程：
(1)将肝复乐挥发油提取药材加入2～10倍量的水中浸泡0.5～2小时，然后加热到40-60℃；
(2)调节步骤(1)得到的混合物的pH为7.0～7.5；
(3)在步骤(2)得到的混合物中加入纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶的一种或几种进行酶解，酶解温度为40～60℃，酶解时间为10分钟～5小时，酶与药材重量比为(1～10):1000；
(4)酶解完成后，向步骤(3)得到的混合物中加水进行加热回流提取，收集挥发油；加水后，同步骤(1)中所述加水量之和为所述挥发油提取药材重量的4～16倍，加热回流温度为80-120℃，加热回流时间为1～6小时；
所述挥发油提取药材，按重量份计，由沉香45份、炒白术440份、陈皮440份、败酱草440份、郁金440份，制香附440份，柴胡222份，茵陈440份组成。
2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于：步骤(3)中所述酶与药材重量比为(1～3):1000。
3.根据权利要求1或2所述的提取方法，其特征在于：步骤(3)中所述酶解温度为46～47℃。
4.根据权利要求3所述的提取方法，其特征在于：步骤(3)中所述酶解时间为0.5～2.5小时。
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| Date | Code | Title | Description |
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| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right | ||
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right |
Denomination of invention: A method for extracting volatile oil from Ganfule Effective date of registration: 20210730 Granted publication date: 20171114 Pledgee: Hunan Hanshou Rural Commercial Bank Co.,Ltd. Pledgor: KAMP PHARMACEUTICALS Co.,Ltd. Registration number: Y2021430000029 |
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| PC01 | Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right |
Date of cancellation: 20211014 Granted publication date: 20171114 Pledgee: Hunan Hanshou Rural Commercial Bank Co.,Ltd. Pledgor: KAMP PHARMACEUTICALS Co.,Ltd. Registration number: Y2021430000029 |
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| PC01 | Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right | ||
| CP02 | Change in the address of a patent holder | ||
| CP02 | Change in the address of a patent holder |
Address after: No.8 Kangpu Avenue, high tech Industrial Park, Hanshou County, Changde City, Hunan Province, 415900 Patentee after: KAMP PHARMACEUTICALS Co.,Ltd. Address before: 12 / F, building B, Lugu information port, 658 Lugu Avenue, high tech Zone, Changsha City, Hunan Province, 410205 Patentee before: KAMP PHARMACEUTICALS Co.,Ltd. |
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| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right | ||
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right |
Denomination of invention: A method for extracting volatile oil from Ganfule Effective date of registration: 20211028 Granted publication date: 20171114 Pledgee: Hunan Hanshou Rural Commercial Bank Co.,Ltd. Pledgor: KAMP PHARMACEUTICALS Co.,Ltd. Registration number: Y2021980011259 |
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| PC01 | Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right |
Granted publication date: 20171114 Pledgee: Hunan Hanshou Rural Commercial Bank Co.,Ltd. Pledgor: KAMP PHARMACEUTICALS Co.,Ltd. Registration number: Y2021980011259 |
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| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right |
Denomination of invention: A method for extracting volatile oil from Ganfule Granted publication date: 20171114 Pledgee: Hunan Hanshou Rural Commercial Bank Co.,Ltd. Pledgor: KAMP PHARMACEUTICALS Co.,Ltd. Registration number: Y2024980045611 |