CN104542237A - 一种江蓠属海藻的育苗方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及海藻的育苗方式,具体的说是一种江蓠属海藻的育苗方法。将清洗的成熟江蓠藻体用次氯酸钠消毒藻体3~5min,消毒后在煮沸过的淡水冲洗,而后置于煮沸过的海水中作为种藻备用;随后阴干刺激,再经孢子释放,盘状体生长,盘状体刮下后悬浮培养,而后扩大培养,诱导直立枝形成,再经分级培养进而使苗种生长。本发明整个孢子育苗过程在较小而可控的立体空间实现,育苗量大,成活率高达90%-100%,幼苗生长快,出苗率高,在30-60天时可培养出大小均匀,体长5cm的适养规格的江蓠苗种。
Description
技术领域
本发明涉及海藻的育苗方式,具体的说是一种江蓠属海藻的育苗方法。
背景技术
我国是世界第一海藻大国,人工养殖的海藻产量占世界的70%。近年来,我国藻类开发利用取得重大成就,以藻类为原料的食品加工、化工、保健品和海藻肥产业发展迅速,不论是产业规模还是出口贸易,在世界上都占重要地位,已经初步形成了从海藻育苗、栽培、加工到精加工的产业群。海藻产业已经成为我国海洋经济重要的支柱产业之一。但是我国海藻养殖产业在渔业中的比重仍然相对较小,产业科技含量偏低,产业基础还存在一些制约产业进一步发展的薄弱环节。
江蓠属大型海藻是一类重要的经济海藻,是琼胶产业的主要原料,也是经济动物养殖的重要饲料。目前我国栽培的江蓠主要有二种类型:一种是龙须菜,主要在南方(如福建和广东沿海)浅海区浮筏夹苗栽培;另一种是原产于海南的细基江蓠繁枝变种,在南方半咸淡的池塘中撒播栽培。此外,重要的江蓠属产琼胶海藻还有真江蓠、脆江蓠和菊花心江蓠等。目前,江蓠养殖已成为我国第三大海藻养殖产业。但是,与已经相对成熟海带和紫菜养殖业不同,由于孢子发育需经过盘状体时期,发育过程长,成活率低,目前江蓠属海藻的苗种来源仍依靠营养繁殖。如:龙须菜的栽培采用“夹苗”模式:将龙须菜成菜夹在苗绳上用作种菜,一般每亩用量达100~200千克,且下海20天左右必须收回重新夹苗。如果每亩栽培面积按10公斤的“种”菜计算,10000亩的栽培面积一次性就需要100吨的龙须菜;在台湾地区池养江蓠的苗种用量通常是每亩300Kg,海南岛和广东池塘内栽培细基江蓠繁枝变种的苗种用量达每亩500Kg以上。可靠的苗种供应是海藻养殖业能否持续、健康发展的先决条件之一。并且由于龙须菜在北方不能越冬,在南方不能度夏,从而形成了南北相互供应的局面。一方面,随着江蓠养殖产业的不断扩大,种菜的运输费用高昂,且经常出现菜匮缺,另一方面,采用营养繁殖操作繁杂,劳动强度大,在我国劳动力成本日趋走高的今天,人力成本越来越高。
所谓孢子采苗,就是室内保留龙须菜的雌、雄配子体,然后利用龙须菜果孢子体放散的果孢子以及四分孢子体放散的四分孢子进行采苗的技术。具体地说,就是在育苗池中将雌、雄配子体混合培养,雌配子体性成熟后产生果胞(卵子),雄配子体性成熟后产生精子;雌配子体上的果胞受精后形成合子,合子进一步发育成果孢子体,果孢子体成熟后放散果孢子;果孢子进一步发育为四分孢子体,四分孢子体成熟后大量放散四分孢子。使用孢子采苗,大幅度减少“种菜”数量,并降低保种成本保证生产过程的集约化和延续性。然而,现有技术是将直接将孢子附着与基质(如苗绳、石块等)上养殖,这样育苗占用育苗室的面积大,控温能耗高,苗量不足,成活率低,育苗周期长,幼苗个体小,生长缓慢,所需育苗池面积大。
因而现急需能够推广并能大大促进江蓠属海藻的孢子育苗在海藻养殖业中应用的方法。
发明内容
本发明目的在于提供一种江蓠属海藻的育苗方法。
为实现上述目的,本发明采用技术方案为:
一种江蓠属海藻的育苗方法:
1)种藻前处理:将清洗的成熟江蓠藻体用次氯酸钠消毒藻体3~5min,消毒后在煮沸过的淡水刷洗,而后置于煮沸过的海水中作为种藻备用;
2)阴干刺激:将种藻放在空气流通较好的阴凉处进行阴干刺激30~70min,脱水率控制在20%~50%;
3)孢子释放:在光照强度1000-2000lux的光照条件下,将上述阴干刺激后种藻置于承装海水并底部铺有无毒光滑平板的容器中,使藻体吸水后孢子自然释放,待附着孢子平均密度达到每平方厘米50-80个时取出种藻;并向海水培养液中加入6-10ppm二氧化锗,光周期12:12,温度为22±5℃条件下静置培养2-3天;
4)盘状体生长:上述孢子释放的孢子在2000-4000lux的光照强度,12:12的光周期,22±5℃的温度下,静置进一步培养6-8天,而后将发育中的盘状体剥离置于承装海水的容器中,并向海水培养液中加入40-80ppm二氧化锗,悬浮培养10-15天;
所述每立方海水中添加4-8ppm的NO3-N和0.4-0.8ppm的PO4-P;
5)扩大培养:将上述培养的盘状体组织用切碎,置于承装海水的容器中,进行循环扩大种质培养,将切碎的组织置于承装海水的容器中,并向海水中加入6-10ppm二氧化锗,在2000-4000lux的光照强度,12:12的光周期,22±5℃的温度下悬浮培养10-15天,此步骤可循环进行,从而实现种质扩大培养;
所述每立方米海水中添加4-8的NO3-N和0.4-0.8ppm的PO4-P;
6)分级培养:将上述扩大培养获得的组织在加入6-10ppm二氧化锗和0.2-1mg/L生长素(IAA)的海水中,以2000-4000lux的光照强度,12:12的光周期,22±5℃的温度下培养,培养的过程中通入空气使盘状体保持悬浮状态,培养至直立枝开始形成,而后调节光强至3000-4000lux,在5-10g/L的培养密度下,使苗种不断生长,在直立枝长度达到4-5cm后可用于海上养殖。
上述海水均为经过多次煮沸消毒的消毒海水,其盐度为15-30‰。
所述采集成熟江蓠藻体切段,剪除基部污染严重的藻体,取藻体表面光滑,颜色鲜艳,无明显附着物和坏死组织的藻段作为种藻,洗净,去除杂藻和其他附生物;将挑取的种藻在煮沸过的淡水中刷洗3-5遍,然后用2-5%的次氯酸钠消毒种藻,进一步去除可能残留的杂藻和原生动物。
所述步骤3)静置培养2-3天后,在附着有孢子的无毒光滑平板上撒一层薄薄的经过煮沸消毒处理的细沙,同时向海水培养液中加入40ppm二氧化锗。
所述扩大培养获得的盘状体或盘状体培养物在10℃弱光(光强<50lux)条件下静置保存。
本发明所具有的优点:
本发明整个孢子育苗过程在较小而可控的立体空间实现,育苗量大,成活率高达90%-100%,幼苗生长快,出苗率高,在30-40天时可培养出大小均匀,体长5cm的适养规格的江蓠苗种。同时获得的悬浮盘状体培养物可用于长期保种,以及褪化苗种复壮,解决龙须菜种质退化问题,建立琼胶含量高、生长势强等经济性状优势明显的龙须菜基础种群体系。本发明也可用于其他经历盘状体(匍匐组织)发育生物,如石花菜等。
具体实施方式
通过以下实施例,对本发明作进一步具体说明。但是本发明绝非仅限于此。
其中海水均为经过多次煮沸消毒的消毒海水,或是按照所需盐度要求用淡水配好盐度为15-30‰半咸水经多次煮沸消毒后待用。
实施例1
1.种藻准备:采集成熟龙须菜藻体(果孢子体、四分孢子体),选取发育健壮,成熟度较好的藻株,剪掉藻体基部表面附着有大量杂藻的老枝部分,取藻体表面光滑,颜色鲜艳,无明显附着物和坏死组织的藻段作为种藻,洗净,去除杂藻和其他附生物;
2.种藻清洗:将挑取的藻体在煮沸过的淡水中刷洗3遍,然后用3%次氯酸钠消毒藻体4min,进一步去除可能残留的杂藻和原生动物,最后在煮沸过的淡水冲洗后置于煮沸过的海水中备用;
3.阴干刺激:将种菜放在空气流通较好的阴凉处进行阴干刺激50min,脱水率控制在20-30%;
4.孢子释放:种菜经阴干刺激后,放装有盐度为30‰的消毒海水,且底部铺有玻璃板的容器中,让孢子自然脱落在玻璃板上,然后将藻体和生殖枝取出,静置培养,光照强度1500lux,光周期12:12,温度为20±2℃,静置培养2-3天后,撒上一层薄薄的经过煮沸消毒处理的细沙,同时向海水培养液中加入40ppm二氧化锗,以保护开始分裂的孢子免受直射光的伤害,并进一步去除可能存在的杂藻,使用此方法孢子的成活率可达90-100%;
所述容器中的消毒海水每立方米内添加4ppm的NO3-N和0.4ppm的PO4-P;
5.盘状体生长,上述附着的孢子在2500lux的光照强度,12:12的光周期,20±2℃的温度下,静置进一步培养6-8天,而后将发育中的盘状体从玻璃板上用软毛刷刷下,置于承装有盐度为30‰的消毒海水的锥形瓶中,并向培养液中加入40ppm二氧化锗,悬浮培养10-15天。
所述容器中的消毒海水每立方米内添加4ppm的NO3-N和0.4ppm的PO4-P;
6.扩大培养:将上述培养的盘状体组织用捣碎机切碎,置于承装盐度为30‰的消毒海水的锥形瓶中,将切碎的组织置于承装海水的容器中,并向海水培养液中加入10ppm二氧化锗,在2500lux的光照强度,12:12的光周期,20±2℃的温度下悬浮培养10-15天,此步骤循环进行,从而实现种质扩大培养;
由于盘状体及其培养物本身具有耐储存和逆境的特性,并且在低温低光条件下,保存组织只进行微弱的光合和呼吸作用,因此可以长期保存。培养获得的盘状体或盘状体培养物可在10℃弱光条件下静置保存;将采用本发明获得组织保存期达1年以后组成仍保持活性可用于育苗。
所述容器中的消毒海水每立方米内添加4ppm的NO3-N和0.4ppm的PO4-P;
7.诱导直立枝形成和分级培养:将上述扩大培养获得的组织在5g/L的培养密度下在10ppm二氧化锗,在1500lux的光照强度,12:12的光周期,20±2℃的温度下培养,并加入0.5mg/L生长素(IAA),培养至直立枝开始形成后调高光强至3000lux,并根据组织大小使用新的培养容器,降低培养密度,从而分级扩大培养规模,使苗种不断生长,在40-60天时可培养出大小均匀,体长5cm的适养规格的江蓠苗种。
所述容器中的消毒海水每立方米内添加4ppm的NO3-N和0.4ppm的PO4-P。
实施例2
1.种藻准备:采集成熟真江蓠藻体(果孢子体、四分孢子体),将其切段,取藻体表面光滑,颜色鲜艳,无明显附着物和坏死组织的藻段作为种藻,洗净,去除杂藻和其他附生物;
2.种藻清洗:将挑取的藻体在煮沸过的淡水中刷洗3遍,然后用3%次氯酸钠消毒藻体3min,进一步去除可能残留的杂藻和原生动物,最后在煮沸过的淡水冲洗后置于煮沸过的海水中备用;
3.阴干刺激:将种菜放在空气流通较好的阴凉处进行阴干刺激50min,脱水率控制在30-40%;
4.孢子释放:种菜经阴干刺激后,放装有盐度为30‰的消毒海水,且底部铺有玻璃板的容器中,让孢子自然脱落在玻璃板上,然后将藻体和生殖枝取出,静置培养,光照强度2500lux,光周期12:12,温度为20±2℃,静置培养2-3天后,撒上一层薄薄的经过煮沸消毒处理的细沙,同时向海水培养液中加入40ppm二氧化锗,以保护开始分裂的孢子免受直射光的伤害,并进一步去除可能存在的杂藻;
所述容器中的每立方米消毒海水内添加4ppm的NO3-N和0.4ppm的PO4-P;
5.盘状体生长,上述孢子释放的种菜在3500lux的光照强度,12:12的光周期,20±2℃的温度下,静置进一步培养6-8天,而后将发育中的盘状体从玻璃板上用软毛刷刷下,置于承装有盐度为30‰的消毒海水的锥形瓶中,并向海水培养液中加入40ppm二氧化锗,悬浮培养10-15天。
所述容器中的每立方米消毒海水内添加4ppm的NO3-N和0.4ppm的PO4-P;
6.扩大培养:将上述培养的盘状体组织用捣碎机切碎,置于承装海水的锥形瓶中,将切碎的组织置于承装盐度为30‰的消毒海水的容器中,并向海水培养液中加入6-10ppm二氧化锗,在3000lux的光照强度,12:12的光周期,20±2℃的温度下悬浮培养10-15天,此步骤循环进行,从而实现种质扩大培养;。
由于盘状体及其培养物本身具有耐储存和逆境的特性,并且在低温低光条件下,保存组织只进行微弱的光合和呼吸作用,因此可以长期保存。培养获得的盘状体或盘状体培养物可在10℃弱光条件下静置保存;将采用本发明获得组织保存期达1年以后组成仍保持活性可用于育苗。
所述容器中的每立方米消毒海水内添加4ppm的NO3-N和0.4ppm的PO4-P;
7.诱导直立枝形成和分级培养:将上述扩大培养获得的组织在5g/L的培养密度下在10ppm二氧化锗,在1500lux的光照强度,12:12的光周期,20±2℃的温度下培养,并加入0.6mg/L生长素(IAA),培养至直立枝开始形成后调高光强至3000lux,并根据组织大小使用新的培养容器,降低培养密度,从而分级扩大培养规模,使苗种不断生长,在40-60天时可培养出大小均匀,体长5cm的适养规格的江蓠苗种。
所述容器中的每立方米消毒海水内添加4ppm的NO3-N和0.4ppm的PO4-P。
实施例3
1.复苏:将10℃弱光条件下静置保存1年的龙须菜盘状体培养组织取出,每次更换1/3的培养溶液在依次500lux的光强下静置培养2天,1000lux的光强下静置培养2天,然后置于2500lux的光强下充气培养2天完成复苏;
所述容器中的每立方米消毒海水内添加4ppm的NO3-N和0.4ppm的PO4-P;
2.扩大培养:将复苏后的龙须菜盘状体组织用捣碎机切碎,置于承装盐度为30‰的消毒海水的锥形瓶中,并向海水培养液中加入8ppm二氧化锗,在2500lux的光照强度,12:12的光周期,20±2℃的温度下悬浮培养10-15天,此步骤循环进行,从而实现种质扩大培养;
所述容器中的每立方米消毒海水内添加4ppm的NO3-N和0.4ppm的PO4-P;
3.诱导直立枝形成和分级培养:将上述扩大培养获得的组织在5g/L的培养密度下在10ppm二氧化锗,在1500lux的光照强度,12:12的光周期,20±2℃的温度下培养,并加入0.5mg/L生长素(IAA),培养至直立枝开始形成后调高光强至3000lux,并根据组织大小使用新的培养容器,降低培养密度,从而分级扩大培养规模,使苗种不断生长,在40-60天时可培养出大小均匀,体长5cm的适养规格的江蓠苗种。
所述容器中的每立方米消毒海水内添加4ppm的NO3-N和0.4ppm的PO4-P。
Claims (4)
1.一种江蓠属海藻的育苗方法,其特征在于:
1)种藻前处理:将清洗的成熟江蓠藻体用次氯酸钠消毒藻体3~5min,消毒后在煮沸过的淡水刷洗,而后置于煮沸过的海水中作为种藻备用;
2)阴干刺激:将种藻放在空气流通较好的阴凉处进行阴干刺激30~70min,脱水率控制在20%~50%;
3)孢子释放:在光照强度1000-2000lux的光照条件下,将上述阴干刺激后种藻置于承装海水并底部铺有无毒光滑平板的容器中,使藻体吸水后孢子自然释放,待附着孢子平均密度达到每平方厘米50-80个时取出种藻;并向海水培养液中加入6-10ppm二氧化锗,光周期12:12,温度为22±5℃条件下静置培养2-3天;
4)盘状体生长:上述孢子释放的孢子在2000-4000lux的光照强度,12:12的光周期,22±5℃的温度下,静置进一步培养6-8天,而后将发育中的盘状体剥离置于承装海水的容器中,并向海水培养液中加入40-80ppm二氧化锗,悬浮培养10-15天;
所述每立方海水中添加4-8ppm的NO3-N和0.4-0.8ppm的PO4-P;
5)扩大培养:将上述培养的盘状体组织切碎,置于承装海水的容器中,进行种质循环扩大培养,将切碎的组织置于承装海水的容器中,并向海水中加入6-10ppm二氧化锗,在2000-4000lux的光照强度,12:12的光周期,22±5℃的温度下悬浮培养10-15天,此步骤可循环进行,从而实现种质扩大培养;
所述每立方米海水中添加4-8的NO3-N和0.4-0.8ppm的PO4-P;
6)诱导直立枝形成和分级培养:将上述扩大培养获得的组织在加入6-10ppm二氧化锗和0.2-1mg/L生长素(IAA)的海水中,以2000-4000lux的光照强度,12:12的光周期,22±5℃的温度下培养,培养的过程中通入空气使盘状体保持悬浮状态,培养至直立枝开始形成,而后调节光强至3000-4000lux,在5-10g/L的培养密度下,使苗种不断生长,在直立枝长度达到4-5cm后可用于海上养殖。
2.按权利要求1所述的江蓠属海藻的育苗方法,其特征在于:所述采集成熟江蓠藻体切段,剪除基部污染严重的藻体,取藻体表面光滑,颜色鲜艳,无明显附着物和坏死组织的藻段作为种藻,洗净,去除杂藻和其他附生物;将挑取的种藻在煮沸过的淡水中刷洗3-5遍,然后用2-5%的次氯酸钠消毒种藻,进一步去除可能残留的杂藻和原生动物。
3.按权利要求1所述的按权利要求1所述的江蓠属海藻的育苗方法,其特征在于:所述步骤3)静置培养2-3天后,在附着有孢子的无毒光滑平板上撒一层薄薄的经过煮沸消毒处理的细沙,同时向海水培养液中加入40ppm二氧化锗。
4.按权利要求1所述的江蓠属海藻的育苗方法,其特征在于:所述扩大培养获得的盘状体或盘状体培养物可在10℃弱光(光强<50lux)条件下静置保存。
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