CN104498547A - 提高西兰花种子的莱菔硫烷水解产量的预处理方法 - Google Patents

提高西兰花种子的莱菔硫烷水解产量的预处理方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及提高西兰花种子的莱菔硫烷水解产量的预处理方法。本方法将西兰花种子进行物理压榨，提高细胞破碎的程度，帮助水解生成莱菔硫烷(sulforaphane，简称SFA)的前体物质葡糖莱菔硫烷(glucophanin，简称GRA)充分溶出。将去除油脂之后的固体残渣回收，在去除油脂的过程中可以使西兰花中普遍存在的可以催化GRA转化为没有抗癌活性的莱菔硫烷腈的ESP蛋白失活。在特定的pH值下，将灭酶之后的油渣加入到不含有ESP酶的黑芥子酶液中，大幅度提高GRA水解生成SFA的转化率。本方法较老式的西兰花酶解莱菔硫烷处理方式简单，过程中GRA损失小，最终莱菔硫烷转化率高，西兰花种子选择范围广，适合大规模工业生产。

Description

提高西兰花种子的莱菔硫烷水解产量的预处理方法
技术领域
本发明属于生物化工领域，涉及一种能显著提高西兰花种子水解产生莱菔硫烷产量的预处理方式，以及缩短反应时间的方法。
背景技术
十字花科的植物是目前广泛认为具有抗癌功能的一类植物。这主要是因为十字花科的植物含有大量的硫代葡萄糖苷(glucosinolates，简称GLS)，硫代葡萄糖苷是植物的一种含硫次级代谢产物，目前在植物中已发现了120多种硫代葡萄糖苷，其基本结构如下式所示。硫代葡萄糖苷是水溶性、无挥发性、热稳定性的离子型化合物。若植物细胞发生破损，硫代葡萄糖水解酶，即芥子硫苷酸酶(myrosinase，thioglucoside glucohydrolase；EC3.2.3.1)被释放出来，并水解硫代葡萄糖苷，生成硫酸氢盐、葡萄糖和一系列葡萄糖苷配基，这些配基在经过分子内的重排形成异硫氰酸酯、硫氰酸酯、腈和少量的环硫腈。目前，有很多研究已经表明异硫氰酸酯有良好的抗癌效果。同时，异硫氰酸酯还具有防止微生物繁殖和间接的抗氧化作用。
硫代葡萄糖苷在有酶和无酶(如加温、加压)的条件下都会发生降解，有酶时称为硫代葡萄糖苷的酶解，无酶则称为非酶解。硫代葡萄糖苷的非酶解过程非常复杂，主要生成腈类化合物和异硫氰酸盐，反应产物和反应速度均与外界条件有关。中性条件下主要生成异硫氰酸酯；酸性条件产物以腈为主；在有epithiospecifier protein(简称ESP)和亚铁离子存在，降解产物主要是环硫腈。
在西兰花种子中，有90％的硫代葡萄糖苷是葡糖莱菔硫烷(glucophanin，简称GRA)。由于ESP蛋白普遍存在于各个品种的西兰花种子中，因此GRA在西兰花种子自身的酶催化水解后转化莱菔硫烷(sulforaphane，简称SFA)的转化率为10％-40％，转化为莱菔硫烷腈(sulforaphane nitrile，简称SFN)的转化率为50％-80％。SFA不具有任何细胞毒性，能够抑制肺癌、食道癌、结肠癌、乳腺癌、肝癌及大肠癌等癌细胞的形成，提高组织谷胱甘肽的水平，诱导细胞合成Ⅱ型解毒酶。但是有很多文献都均报道未发现SFN有任何抗癌活性。目前莱菔硫烷的制备方法主要有化学合成和天然产物提取。化学法采用立体手性合成的方法，实验复杂，反应步骤多，副产物多，毒性大，产率低，原料成本高，分离难等缺点，难以实现大规模生产。天然产物提取方法利用西兰花等十字花科植物中黑芥子酶水解GRA得到SFA，申请号为200510130467.9的中国发明专利申请公开了利用芸苔属蔬菜为原料制备莱菔硫烷的方法，由于西兰花种子中普遍含有ESP蛋白，水解生成大量的SFN，得到的SFA产品少，原料浪费严重。申请号为200910037363.1的中国发明专利申请公开了一种从西兰花芽苗菜中提取多功能莱菔硫烷的方法，该方法需考虑芽苗菜的生长时间，对芽苗菜进行预处理，实验复杂，且同样无法完全解决ESP蛋白的问题，因此产率低，成本较高。
发明内容
本发明的目的在于克服西兰花种子水解产生SFA工艺步骤多，生产过程中GRA损耗大，GRA到SFA的转化率低等缺点，采用物理挤压的方法，结合细胞破碎、去除油脂、加热除水于一体，使得西兰花种子中的细胞破碎更加完全，减少油脂对GRA的包埋，提高GRA溶出2-3倍，比例达到99.5％，切断GRA向SFN转化的通路，提高GRA向SFA的转化率2-10倍，最终提高SFA的产量5-12倍。
GLS广泛存在于十字花科植物中，GRA是GLS中的一种，且在西兰花属中占总GLS的90％以上。GRA可以被黑芥子酶水解，其主要产物为SFA与SFN，前者为不稳定的中间体通过重排反应生成，后者需要有一种热敏性蛋白ESP催化生成，反应原理如下：
葡糖莱菔硫烷(2)经酶解生成莱菔硫烷(1)和莱菔硫烷腈(3)
一种利用西兰花种子制备莱菔硫烷的方法，以十字花科蔬菜为原料，依次包括如下步骤：
A.对西兰花种子进行物理挤压
将西兰花种子进行物理挤压，保持出油温度40℃-80℃，油渣出料温度80℃-130℃，分别回收油脂与去除油脂后的种子残渣；；
B.黑芥子酶的提取与纯化
将未经高温处理的十字花科植物的种子、花、茎或叶粉碎，超声破碎后用纱布过滤，得到清液用饱和度55％的(NH4)2SO4水溶液将黑芥子酶沉淀析出；10000r/min离心20分钟后弃去上清，将沉淀用8000-14000分子量的透析膜透析12小时后得到黑芥子酶粗酶液；
C.纯化莱菔硫烷
用黑芥子酶粗酶液反应(A)得到的西兰花种子残渣，调pH至7，温度30℃，水解60分钟，水解后过滤用SP850树脂柱纯化，用3倍柱体积的去离子水和3倍柱体积体积浓度为5％的乙醇溶液洗杂质，用5倍柱体积的体积浓度为85％乙醇洗产品；样品旋蒸脱除溶剂至原体积的10％后，用二氯甲烷萃取3次，将二氯甲烷相旋干后进行冷冻干燥处理，得到纯度为98％的莱菔硫烷产品。
本发明的具体方法和步骤如下：
(1)对西兰花种子进行高温物理挤压
将西兰花种子进行高温物理挤压，保持出油温度40℃-80℃，油渣出料温度80℃-130℃，分别回收油脂与去除油脂后的种子残渣。
(2)黑芥子酶的提取与纯化
将未经高温处理的十字花科植物的种子、花、茎和叶粉碎，超声破碎后用纱布过滤，得到清液用饱和度55％的(NH4)2SO4水溶液将黑芥子酶沉淀析出。10000r/min离心20分钟后弃去上清，将沉淀用8000-14000分子量的透析膜过夜透析后得到粗酶液。这样可以在保持大部分黑芥子酶活性的同时去除ESP酶活。
(3)筛选并加入外源黑芥子酶
从多种不同的十字花科植物中提取黑芥子酶的粗酶液，包括西兰花、甘蓝、芥蓝、白菜、花椰菜等植物的种子、花、茎和叶，并且在提取过程中去除ESP蛋白并测定黑芥子酶的比活力。筛选出西兰花种子中提取的黑芥子酶酶活最高，其比活力最高为87U/ml，且不含有ESP蛋白。
(4)纯化莱菔硫烷
用(3)中的黑芥子酶粗酶液反应(2)得到的西兰花种子残渣，水解60分钟，调pH至7，温度30℃，水解后过滤用SP850树脂柱纯化，用3倍柱体积的去离子水和3倍柱体积5％的乙醇溶液洗杂质，用5倍柱体积的85％乙醇洗产品。样品旋蒸去除溶剂后，用二氯甲烷萃取3次，旋干后进行冷冻干燥处理，得到纯度为98％的莱菔硫烷产品。
1.步骤(1)和(4)中PH值缓冲液为柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液，醋酸缓冲液，Na2HPO4-NaH2PO4缓冲液，K2HPO4-KH2PO4缓冲液。
2.步骤(1)中采用的原料为西兰花种子。
3.步骤(2)中所用的粗酶液来源是西兰花、甘蓝、芥蓝、白菜、花椰菜等植物的种子、花、茎和叶。
4.步骤(3)中提取黑芥子酶的方法是以西兰花种子为原料提取粗酶液，此种方法可以保留很高的黑芥子酶酶活且完全不具有ESP酶活。
5.步骤(4)中使用的树脂为SP 850大孔吸附树脂。
附图说明
图1为莱菔硫烷(sulforaphane)的HPLC图谱。
图2为莱菔硫烷(sulforaphane)的质谱图。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步的描述，但这些实施例的目的并不在于限制本发明的保护范围。
以下实施例子中乙醇水溶液前面的百分数表示体积浓度，SFA的制备中油渣和黑芥子酶粗酶液在30℃反应60分钟。
实施例1
西兰花种子的预处理：将200gGRA含量为2.68％的某西兰花种子进行物理挤压，保持出油温度60℃，油渣温度115℃，分别回收油脂及残渣。得到油渣135g，西兰花籽油65g。
黑芥子酶粗酶液的提取：选用20g芥蓝种子为原料提取黑芥子酶，得到粗酶液100ml。
SFA的制备：取上步得到的油渣135g，加入1900mL去离子水，调节pH为7.0，之后加入筛选得到的高酶活的黑芥子酶粗酶液100mL，共配制成2L的反应体系。反应60分钟后离心上清液，之后用滤布过滤得到清液上SP850树脂柱。用3倍柱体积的去离子水和3倍柱体积的5％的乙醇水溶液洗去杂质，用5倍柱体积80％的乙醇水溶液洗出产品。样品通过旋蒸去除大部分溶剂后用乙酸乙酯萃取3次，旋干样品后进行冷冻干燥，得到2.08gSFA，GRA到SFA的转化率为95％，GRA溶出率为99％。用分析性HPLC测定产品纯度为98％(图1)并用EI-MS对产品进行鉴定(图2)。该化合物[M+H+]＝178.0，该化合物的理论分子量为177.29。
实施例2
西兰花种子的预处理：将200gGRA含量为2.68％的某西兰花种子进行物理挤压，保持出油温度50℃，油渣温度105℃，分别回收油脂及残渣。得到油渣138g，西兰花籽油62g。
黑芥子酶粗酶液的提取：选用20g花椰菜种子为原料提取黑芥子酶，得到粗酶液100ml。
SFA的制备：取上步得到的油渣138g，加入1900mL去离子水，调节pH为7.0，之后加入筛选得到的高酶活的黑芥子酶粗酶液100mL，共配制成2L的反应体系。反应60分钟后离心上清液，之后用滤布过滤得到清液上SP850树脂柱。用3倍柱体积的去离子水和3倍柱体积的5％的乙醇水溶液洗去杂质，用5倍柱体积80％的乙醇水溶液洗出产品。样品通过旋蒸去除大部分溶剂后用乙酸乙酯萃取3次，旋干样品后进行冷冻干燥，得到2.07gSFA，GRA到SFA的转化率为95％，GRA溶出率为98.5％。
实施例3
西兰花种子的预处理：将200gGRA含量为3.17％的某西兰花种子进行物理挤压，保持出油温度70℃，油渣温度120℃，分别回收油脂及残渣。得到油渣133g，西兰花籽油67g。
黑芥子酶粗酶液的提取：选用200g白菜叶为原料提取黑芥子酶，得到粗酶液100ml。
SFA的制备：取上步得到的油渣133g，加入1900mL去离子水，调节pH为7.0，之后加入筛选得到的高酶活的黑芥子酶粗酶液100mL，共配制成2L的反应体系。反应60分钟后离心上清液，之后用滤布过滤得到清液上SP850树脂柱。用3倍柱体积的去离子水和3倍柱体积的5％的乙醇水溶液洗去杂质，用5倍柱体积80％的乙醇水溶液洗出产品。样品通过旋蒸去除大部分溶剂后用二氯甲烷萃取3次，旋干样品后进行冷冻干燥，得到2.38gSFA，GRA到SFA的转化率为92％，GRA溶出率为99％。
实施例4
西兰花种子的预处理：向20kgGRA含量为3.17％的某西兰花种子进行物理挤压，保持出油温度70℃，油渣温度120℃，分别回收油脂及残渣。得到油渣13kg，西兰花籽油7kg。
黑芥子酶粗酶液的提取：选用400g西兰花种子为原料提取黑芥子酶，得到粗酶液2L。
SFA的制备：取上步得到的油渣13kg，加入198L去离子水，调节pH为7.0，之后加入筛选得到的高酶活的黑芥子酶粗酶液2L，共配制成400L的反应体系。反应300分钟后过滤得到清液上SP850树脂柱。用3倍柱体积的去离子水和3倍柱体积的5％的乙醇水溶液洗去杂质，用5倍柱体积80％的乙醇水溶液洗出产品。样品通过旋蒸去除大部分溶剂后用二氯甲烷萃取3次，旋干样品后进行冷冻干燥，得到239.60gSFA，GRA到SFA的转化率为92％，GRA溶出率为99.5％。
实施例5
西兰花种子的预处理：向20kgGRA含量为6.23％的某西兰花种子进行物理挤压，保持出油温度70℃，油渣温度120℃，分别回收油脂及残渣。得到油渣13.5kg，西兰花籽油6.5kg。
黑芥子酶粗酶液的提取：选用400g西兰花种子为原料提取黑芥子酶，得到粗酶液2L。
SFA的制备：取上步得到的油渣13.5kg，加入198L去离子水，调节pH为7.0，之后加入筛选得到的高酶活的黑芥子酶粗酶液2L，共配制成400L的反应体系。反应600分钟后过滤得到清液上SP850树脂柱。用3倍柱体积的去离子水和3倍柱体积的5％的乙醇水溶液洗去杂质，用5倍柱体积80％的乙醇水溶液洗出产品。样品通过旋蒸去除大部分溶剂后用二氯甲烷萃取3次，旋干样品后进行冷冻干燥，得到476.00gSFA，GRA到SFA的转化率为93％，GRA溶出率为99.5％。

Claims (2)

1.提高西兰花种子的莱菔硫烷水解产量的预处理方法，其特征在于，依次包括如下步骤：
A.对西兰花种子进行物理挤压
将西兰花种子进行物理挤压，保持出油温度40℃-80℃，油渣出料温度80℃-130℃，分别回收油脂与去除油脂后的种子残渣；
B.黑芥子酶的提取与纯化
将未经高温处理的十字花科植物的种子、花、茎或叶粉碎，超声破碎后用纱布过滤，得到清液用饱和度55％的(NH4)2SO4水溶液将黑芥子酶沉淀析出；10000r/min离心20分钟后弃去上清，将沉淀用8000-14000分子量的透析膜透析12小时后得到黑芥子酶粗酶液；
C.纯化莱菔硫烷
用黑芥子酶粗酶液反应(A)得到的西兰花种子残渣，调pH至7，温度30℃，水解60分钟，水解后过滤用SP850树脂柱纯化，用3倍柱体积的去离子水和3倍柱体积体积浓度为5％的乙醇溶液洗杂质，用5倍柱体积的体积浓度为85％乙醇洗产品；样品旋蒸脱除溶剂至原体积的10％后，用二氯甲烷萃取3次，将二氯甲烷相旋干后进行冷冻干燥处理，得到纯度为98％的莱菔硫烷产品。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征是：步骤B中的十字花科植物是西兰花、甘蓝、芥蓝、白菜或花椰菜。
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Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105906539A (zh) * 2016-05-15 2016-08-31 北京化工大学 莱菔素抗癌衍生化合物及其制备方法
CN106588724A (zh) * 2016-12-02 2017-04-26 湖南农业大学 一种亚临界流体萃取制备萝卜硫素的方法
CN110066776A (zh) * 2019-04-19 2019-07-30 乐山师范学院 一种萝卜硫素的提取方法及黑芥子酶磁性微球
CN113512570A (zh) * 2021-05-26 2021-10-19 劲牌有限公司 一种快速从西兰花种子中提取萝卜硫素的方法
CN113854449A (zh) * 2021-08-25 2021-12-31 苏州虞景智田农业科技有限公司 西兰花南瓜复合果汁的制备方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006065736A2 (en) * 2004-12-14 2006-06-22 Johns Hopkins University Method of extraction of isothiocyanates into oil from glucosinolsate-containing plants
CN1982294A (zh) * 2005-12-13 2007-06-20 北京化工大学 一种莱菔硫烷的制备方法
CN102492745A (zh) * 2011-11-28 2012-06-13 北京化工大学 利用芝麻菜苷制备莱菔硫烷的方法
CN104086469A (zh) * 2014-05-22 2014-10-08 苏州泽达兴邦医药科技有限公司 一种从西兰花种子中提取纯化莱菔硫烷的方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006065736A2 (en) * 2004-12-14 2006-06-22 Johns Hopkins University Method of extraction of isothiocyanates into oil from glucosinolsate-containing plants
CN1982294A (zh) * 2005-12-13 2007-06-20 北京化工大学 一种莱菔硫烷的制备方法
CN102492745A (zh) * 2011-11-28 2012-06-13 北京化工大学 利用芝麻菜苷制备莱菔硫烷的方法
CN104086469A (zh) * 2014-05-22 2014-10-08 苏州泽达兴邦医药科技有限公司 一种从西兰花种子中提取纯化莱菔硫烷的方法

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105906539A (zh) * 2016-05-15 2016-08-31 北京化工大学 莱菔素抗癌衍生化合物及其制备方法
CN105906539B (zh) * 2016-05-15 2018-10-23 北京化工大学 莱菔素抗癌衍生化合物及其制备方法
CN106588724A (zh) * 2016-12-02 2017-04-26 湖南农业大学 一种亚临界流体萃取制备萝卜硫素的方法
CN110066776A (zh) * 2019-04-19 2019-07-30 乐山师范学院 一种萝卜硫素的提取方法及黑芥子酶磁性微球
CN110066776B (zh) * 2019-04-19 2021-06-01 乐山师范学院 一种萝卜硫素的提取方法及黑芥子酶磁性微球
CN113512570A (zh) * 2021-05-26 2021-10-19 劲牌有限公司 一种快速从西兰花种子中提取萝卜硫素的方法
CN113854449A (zh) * 2021-08-25 2021-12-31 苏州虞景智田农业科技有限公司 西兰花南瓜复合果汁的制备方法

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