CN104491838A - 抗hpv病毒凝胶敷料及其制备方法 - Google Patents
抗hpv病毒凝胶敷料及其制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104491838A CN104491838A CN201410798607.9A CN201410798607A CN104491838A CN 104491838 A CN104491838 A CN 104491838A CN 201410798607 A CN201410798607 A CN 201410798607A CN 104491838 A CN104491838 A CN 104491838A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- hpv
- gel dressing
- hpv virus
- acid protein
- lyophilized powder
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 24
- 241000701806 Human papillomavirus Species 0.000 title abstract description 4
- 208000022361 Human papillomavirus infectious disease Diseases 0.000 claims abstract description 118
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 33
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 22
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims abstract description 19
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 claims abstract description 15
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 claims abstract description 15
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 claims abstract description 15
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 claims abstract description 15
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 14
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 13
- 210000004392 genitalia Anatomy 0.000 claims abstract description 13
- 206010008323 cervicitis Diseases 0.000 claims abstract description 11
- 201000003988 chronic cervicitis Diseases 0.000 claims abstract description 11
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims abstract description 10
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 claims abstract description 9
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 claims abstract description 7
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims abstract description 7
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 claims abstract description 7
- 101800000263 Acidic protein Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 86
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 42
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 42
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 42
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 claims description 33
- 239000006166 lysate Substances 0.000 claims description 19
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 claims description 12
- 239000012043 crude product Substances 0.000 claims description 10
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 10
- 208000030940 penile carcinoma Diseases 0.000 claims description 9
- 201000008174 penis carcinoma Diseases 0.000 claims description 9
- GHXZTYHSJHQHIJ-UHFFFAOYSA-N Chlorhexidine Chemical compound C=1C=C(Cl)C=CC=1NC(N)=NC(N)=NCCCCCCN=C(N)N=C(N)NC1=CC=C(Cl)C=C1 GHXZTYHSJHQHIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 229960003260 chlorhexidine Drugs 0.000 claims description 8
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims description 8
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims description 8
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims description 8
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 8
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 claims description 8
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 7
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 7
- 235000006468 Thea sinensis Nutrition 0.000 claims description 6
- 101710093543 Probable non-specific lipid-transfer protein Proteins 0.000 claims description 5
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 claims description 5
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 5
- -1 fluidizer Substances 0.000 claims description 5
- 238000000227 grinding Methods 0.000 claims description 5
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 5
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 5
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 5
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 claims description 5
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 claims description 3
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 claims description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 14
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 9
- 208000009608 Papillomavirus Infections Diseases 0.000 abstract description 3
- 230000006870 function Effects 0.000 abstract description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 abstract description 2
- 206010008263 Cervical dysplasia Diseases 0.000 abstract 2
- 208000007951 cervical intraepithelial neoplasia Diseases 0.000 abstract 2
- BLSQLHNBWJLIBQ-OZXSUGGESA-N (2R,4S)-terconazole Chemical compound C1CN(C(C)C)CCN1C(C=C1)=CC=C1OC[C@@H]1O[C@@](CN2N=CN=C2)(C=2C(=CC(Cl)=CC=2)Cl)OC1 BLSQLHNBWJLIBQ-OZXSUGGESA-N 0.000 abstract 1
- 208000032271 Malignant tumor of penis Diseases 0.000 abstract 1
- 235000006679 Mentha X verticillata Nutrition 0.000 abstract 1
- 235000002899 Mentha suaveolens Nutrition 0.000 abstract 1
- 235000001636 Mentha x rotundifolia Nutrition 0.000 abstract 1
- 208000002471 Penile Neoplasms Diseases 0.000 abstract 1
- 206010034299 Penile cancer Diseases 0.000 abstract 1
- 241001122767 Theaceae Species 0.000 abstract 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 abstract 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000003899 bactericide agent Substances 0.000 abstract 1
- 229940089256 fungistat Drugs 0.000 abstract 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 abstract 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 abstract 1
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 abstract 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 abstract 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 32
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 12
- 206010059313 Anogenital warts Diseases 0.000 description 9
- 230000003628 erosive effect Effects 0.000 description 7
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 6
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 6
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 6
- 201000003505 cervical polyp Diseases 0.000 description 6
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 6
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 5
- 210000000270 basal cell Anatomy 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 210000001215 vagina Anatomy 0.000 description 5
- 210000003679 cervix uteri Anatomy 0.000 description 4
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 4
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 4
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 4
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000002845 virion Anatomy 0.000 description 4
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 3
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 3
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 238000012797 qualification Methods 0.000 description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 3
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 3
- 239000000003 vaginal tablet Substances 0.000 description 3
- 229940044977 vaginal tablet Drugs 0.000 description 3
- 108090000565 Capsid Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102100023321 Ceruloplasmin Human genes 0.000 description 2
- 206010047786 Vulvovaginal discomfort Diseases 0.000 description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- 230000000857 drug effect Effects 0.000 description 2
- 239000007938 effervescent tablet Substances 0.000 description 2
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 2
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 2
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 2
- 210000004777 protein coat Anatomy 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N Acetaminophen Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(O)C=C1 RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000000907 Condylomata Acuminata Diseases 0.000 description 1
- 208000006313 Delayed Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 206010048461 Genital infection Diseases 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108010077850 Nuclear Localization Signals Proteins 0.000 description 1
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 1
- 206010040914 Skin reaction Diseases 0.000 description 1
- 206010046914 Vaginal infection Diseases 0.000 description 1
- 201000008100 Vaginitis Diseases 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 208000030961 allergic reaction Diseases 0.000 description 1
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 210000003756 cervix mucus Anatomy 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- NKLPQNGYXWVELD-UHFFFAOYSA-M coomassie brilliant blue Chemical compound [Na+].C1=CC(OCC)=CC=C1NC1=CC=C(C(=C2C=CC(C=C2)=[N+](CC)CC=2C=C(C=CC=2)S([O-])(=O)=O)C=2C=CC(=CC=2)N(CC)CC=2C=C(C=CC=2)S([O-])(=O)=O)C=C1 NKLPQNGYXWVELD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 1
- 238000002651 drug therapy Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000416 exudates and transudate Anatomy 0.000 description 1
- 210000004996 female reproductive system Anatomy 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 1
- 210000002445 nipple Anatomy 0.000 description 1
- 231100000957 no side effect Toxicity 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 1
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 239000003380 propellant Substances 0.000 description 1
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 1
- 208000015608 reproductive system cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 1
- 230000035483 skin reaction Effects 0.000 description 1
- 231100000430 skin reaction Toxicity 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 230000029812 viral genome replication Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
本发明公开一种抗HPV病毒凝胶敷料及其制备方法，特别是在治疗和预防HPV病毒感染及其相关疾病中的应用。抗HPV病毒凝胶敷料主要包括抗HPV病毒冻干粉和溶解液；其中抗HPV病毒冻干粉组分包括茶酸性蛋白AP、异聚麦芽糖、冻干保护剂、杀/抑菌剂；溶解液组分包括水、磷酸盐、甘油、薄荷油。本发明制备的抗HPV病毒凝胶敷料，无油腻感，能吸收组织渗出液，不易流出，不妨碍黏膜正常功能，能有效治疗生殖器病毒感染，预防宫颈癌和阴茎癌，对由病毒感染引发的宫颈上皮细胞瘤变(CIN)、慢性宫颈炎等疾病具有显著疗效。
Description
技术领域
本发明涉及医药领域，更具体地说，涉及抗HPV病毒凝胶敷料及其制备方法，以及在治疗和预防生殖器病毒感染，慢性宫颈炎、宫颈癌和阴茎癌等HPV相关疾病中的应用。
背景技术
在我国，宫颈癌新增发病数占女性生殖系统恶性肿瘤发病率的73-93％，是发达国家的6倍，以25岁到45岁的妇女最为常见，个别地区高于全国平均数的10倍。2008年诺贝尔生理学和医学奖获得者哈拉尔德·楚尔·豪森博士发现(Human Papillomavirus，HPV)是导致子宫颈癌的病因。在美国等发达国家的医疗保险中已明确规定，女性在30岁以后每年进行一次宫颈涂片细胞学检查，如发现细胞异常，马上进行HPV病毒检测。由于引发宫颈癌病变的高危型HPV病毒为弱病毒，如能及时发现感染，及时清除，可达到防治宫颈癌的目的。控制宫颈癌的发生，重在预防，关键在早期筛查，而难点是，目前还没有理想的方法能有效的将HPV病毒清除。
HPV是一种嗜上皮性病毒，在人和动物中分布广泛，有高度的特异性。病毒粒子呈球形，20面体对称，直径45-55nm，是一类无包膜双链小分子环状DNA病毒，由蛋白衣壳和DNA核心组成，其中蛋白衣壳由L1和L2组成，其中L1蛋白的C端具有一段富含正电荷氨基酸(R和K)，这段顺序即核定位信号，可以和宿主细胞内相应的受体结合而进入核内。L2蛋白的的N端有一段富含正电荷氨基酸区域。研究发现(Dasgupta J,Bienkowska-Haba M,Ortega ME,PatelHD,Bodevin S,Spillmann D,Bishop B,Sapp M,Chen XS.Structuralbasis of oligosaccharide receptor recognition by human papillomavirus.J BiolChem.2011,28；286(4):2617-24)，带有大量负电荷的肝素(糖蛋白)可以和携带正电荷的病毒外壳蛋白结合，从而阻止HPV病毒感染。
目前妇科疾病的药物治疗主要通过阴道给药，目前常用阴道给药制剂的剂型主要有栓剂、凝胶剂、泡腾片、阴道片、洗剂、胶囊剂、膜剂等，但这些剂型或多或少存在一些缺陷，影响药物发挥作用。
如①洗液，作用时间短，不易深入腔道深处，难以充分到达病症部位，药物不易充分发挥作用，用于治疗宫颈糜烂的药物，不宜制成洗剂。
②阴道片剂，普通阴道片剂分布性差，与粘膜接触面小，不宜渗入皱襞；阴道泡腾片需要阴道黏液的配合，不适于干燥性阴道炎患者。同时泡腾片易吸潮崩解，影响储存。而且，片剂的辅料主要为一些不溶性成分，排除困难，引起病人的不适。
③栓剂，药物释放不好，与阴道粘膜接触面小，难以渗入粘膜皱襞。而且栓剂在温度较高时易变形，稳定性不好。
④胶囊剂，药物不易释放，涂布面较差，受胶囊崩解的影响。
⑤阴道膜剂，药物与粘膜接触面小、渗透性差，不适于阴道分泌物少的妇女。有时粘滞的高分子浆状物会使人产生不适。
⑥阴用凝胶剂，药物涂布面及渗透性较不够，稳定性不好。
⑦喷雾剂，不易达到腔道深处，在阴道给药中应用较少。喷雾用药难以均匀分布到阴道壁，难以充分发挥药效。治疗宫颈糜烂时，喷雾用药也有难以达到用药部位的缺点。
⑧泡沫气雾剂，成本较高(因需内压容器、阀门系统和特殊的生产设备)，抛射剂的致冷效应可引起创面不适与刺激。
⑨挤捏液，站位时药物易流出。
发明内容
本发明的目的是提供了一种抗HPV病毒凝胶敷料及其制备方法，以及在治疗和预防生殖器病毒感染，慢性宫颈炎、宫颈癌和阴茎癌等HPV相关疾病中的应用。
为了实现上述目的，本发明的技术方案为：提供抗HPV病毒凝胶敷料，包括抗HPV病毒冻干粉和溶解液；其中所述抗HPV病毒冻干粉组分包括茶酸性蛋白AP、异聚麦芽糖、杀/抑菌剂、冻干保护剂；所述溶解液组分包括水、磷酸盐、甘油、薄荷油。
优选的，所述茶酸性蛋白AP是一类分子量为3-100KD的糖蛋白，等电点PI为2.0-5.0。
优选的，所述茶酸性蛋白AP按照下述方法制备获得：
(a)取新鲜茶叶以1：3-10(w/v)料水比研磨匀浆，调PH7-9，10-40℃浸提1-5小时，过滤离心，取上清液，调PH2-5，离心，取沉淀，冷冻干燥后得到茶酸性蛋白AP粗品；
(b)茶酸性蛋白AP粗品复溶后，过CM Sepharose Fast Flow层析柱，去除碱性蛋白，收取含酸性蛋白的流穿液，经真空冷冻干燥制成茶酸性蛋白AP。
优选的，所述抗HPV病毒冻干粉组分包括以下重量百分比的组分：
茶酸性蛋白AP：0.01-10％；
异聚麦芽糖：1-25％
冻干保护剂：20-90％
杀/抑菌剂：0.01-1％；
其中所述茶酸性蛋白AP从茶树(Camellia sinensis)新鲜叶片中提取，优先选择海南种植的茶树(海南五指山新鲜茶叶)；所述冻干保护剂为多糖；所述杀/抑菌剂为氯己定。
优选的，所述溶解液具体包括以下重量百分比的组分：
水：60-100％
磷酸盐：0-2％
甘油：0-15％
薄荷油：0-8％
抗HPV病毒凝胶敷料的制备方法，其中，包括以下步骤：
(1)茶酸性蛋白AP提取；
(2)将步骤(1)提取的茶酸性蛋白AP在溶剂介质中溶解，加入异聚麦芽糖、冻干保护剂和杀/抑菌剂的一种或几种，均匀搅拌后，低温真空干燥，制得抗HPV病毒冻干粉；
(3)将步骤(2)制得的抗HPV病毒冻干粉，根据等量递增原则，添加生物凝胶、增稠剂、助流剂，混合均匀，制备成冻干粉散剂，分装后包装；
(4)将水、磷酸盐、甘油、薄荷油的一种或几种按比例配成溶解液，分装后包装；
(5)使用前将步骤(3)得到的散剂和步骤(4)制备的溶解液混合。
本发明中，所述的抗HPV病毒冻干粉疏松多孔，可直接配合喷粉器使用，在治疗和预防生殖器病毒感染，慢性宫颈炎、宫颈癌和阴茎癌等HPV相关疾病中的应用。
本发明中，所述的抗HPV病毒冻干粉散剂，可直接配合喷粉器使用，在治疗和预防生殖器病毒感染，慢性宫颈炎、宫颈癌和阴茎癌等HPV相关疾病中的应用。
本发明中，所述的抗HPV病毒凝胶敷料在治疗和预防生殖器病毒感染，慢性宫颈炎、宫颈癌和阴茎癌中应用。
HPV病感染毒宿主特异，双受体，不进入血液。HPV感染特异宿主宫颈鳞状上皮基底细胞有2个必要条件：1、游离态HPV病毒粒子，2、游离态的HPV病毒粒子通过由于宫颈上皮粘膜的微创而导致的通往宫颈上皮基底细胞层，先与基底细胞膜的第一受体结合，然后通过病毒外壳结构的改变，才能与基底细胞吸附，进入细胞，进行病毒复制。本发明的茶酸性蛋白AP等电点为2.0-5.0，在抗HPV病毒凝胶敷料中带有大量的负电荷，可以和携带正电荷的病毒外壳蛋白结合，阻断游离态HPV病毒粒子通过鳞状上皮微创而导致的间隙进入基底细胞层，从而阻断和清除HPV病毒感染。
本发明的抗HPV病毒凝胶敷料，具有较好的贮存稳定性，在常温下更稳定，更易于保存。给药后，可深入腔道深处并达到宫颈等病症部位，遇水后溶解迅速并黏附在黏膜上，与粘膜接触面大，药物作用直接，起效快。无油腻感，能吸收组织渗出液，不易流出，不妨碍黏膜正常功能。同时，本发明的冻干粉在制造工艺过程中，不会对热敏性物质(如蛋白)、成分造成损害，是一种疗效确切、使用方便、稳定性好的新型阴道给药制剂。该制剂能有效治疗HPV病毒感染，预防宫颈癌和阴茎癌，对由HPV病毒感染引发的宫颈上皮细胞瘤变(CIN)、慢性宫颈炎等疾病具有显著疗效，具有良好的临床应用前景。
具体实施方式
实施例1
1、茶酸性蛋白AP的制备
取海南五指山新鲜茶叶以1：5(w/v)料水比研磨匀浆，调PH7-9，40℃浸提3小时，过滤离心，取上清液，调PH2-5，离心，取沉淀，冷冻干燥后得到茶酸性蛋白AP粗品。茶酸性蛋白AP粗品复溶后，过CM Sepharose Fast Flow层析柱，去除碱性蛋白，收取含酸性蛋白的流穿液，经真空冷冻干燥制成茶酸性蛋白AP。
2、抗HPV病毒冻干粉的制备：
加入茶酸性蛋白AP 0.01份、异聚麦芽糖10份、多糖89.94份，氯己定0.05份，加水溶解后，均匀搅拌，低温真空干燥制得。
3、溶解液的制备：
加入甘油5份，薄荷油5份、水90份，所有原料混合均匀制成。
4、抗HPV病毒凝胶敷料的制备方法，包括以下步骤：
(1)茶酸性蛋白AP提取；
(2)将步骤(1)提取的茶酸性蛋白AP在溶剂介质中溶解，加入异聚麦芽糖、多糖和氯己定，均匀搅拌后，低温真空干燥，制得抗HPV病毒冻干粉；
(3)将步骤(2)制得的抗HPV病毒冻干粉，根据等量递增原则，添加生物凝胶、增稠剂、助流剂，混合均匀，制备成冻干粉散剂，分装后包装；
(4)将水、甘油、薄荷油按比例配成溶解液，分装后包装；
(5)使用前将步骤(3)得到的散剂和步骤(4)制备的溶解液混合。
实施例2
1、茶酸性蛋白AP的制备
取海南五指山新鲜茶叶以1：8(w/v)料水比研磨匀浆，调PH7-9，25℃浸提3小时，过滤离心，取上清液，调PH2-5，离心，取沉淀，冷冻干燥后得到茶酸性蛋白AP粗品。茶酸性蛋白AP粗品复溶后，过CM Sepharose Fast Flow层析柱，去除碱性蛋白，收取含酸性蛋白的流穿液，经真空冷冻干燥制成茶酸性蛋白AP。
2、抗HPV病毒冻干粉的制备：
加入茶酸性蛋白AP 1份、异聚麦芽糖15份、多糖83.99份，氯己定0.01份，加水溶解后，均匀搅拌，低温真空干燥制得。
3、溶解液的制备：
加入磷酸二氢钾0.03份，磷酸氢二钾0.18份，水99.79份，所有原料混合均匀制成。
4、抗HPV病毒凝胶敷料的制备方法，包括以下步骤：
(1)茶酸性蛋白AP提取；
(2)将步骤(1)提取的茶酸性蛋白AP在溶剂介质中溶解，加入异聚麦芽糖、多糖和氯己定，均匀搅拌后，低温真空干燥，制得抗HPV病毒冻干粉；
(3)将步骤(2)制得的抗HPV病毒冻干粉，根据等量递增原则，添加生物凝胶、增稠剂、助流剂，混合均匀，制备成冻干粉散剂，分装后包装；
(4)将水、磷酸二氢钾，磷酸氢二钾按比例配成溶解液，分装后包装；
(5)使用前将步骤(3)得到的散剂和步骤(4)制备的溶解液混合。
实施例3
1、茶酸性蛋白AP的制备
取海南五指山新鲜茶叶以1：10(w/v)料水比研磨匀浆，调PH7-9，10℃浸提3小时，过滤离心，取上清液，调PH2-5，离心，取沉淀，冷冻干燥后得到茶酸性蛋白AP粗品。茶酸性蛋白AP粗品复溶后，过CM Sepharose Fast Flow层析柱，去除碱性蛋白，收取含酸性蛋白的流穿液，经真空冷冻干燥制成茶酸性蛋白AP。
2、抗HPV病毒冻干粉的制备：
加入茶酸性蛋白AP 5份、异聚麦芽糖25份、多糖69.98份，氯己定0.02份，加水溶解后，均匀搅拌，低温真空干燥制得。
3、溶解液的制备：
加入磷酸二氢钾0.05份，甘油3份，水96.95份，所有原料混合均匀制成。
4、抗HPV病毒凝胶敷料的制备方法，包括以下步骤：
(1)茶酸性蛋白AP提取；
(2)将步骤(1)提取的茶酸性蛋白AP在溶剂介质中溶解，加入异聚麦芽糖、多糖和氯己定，均匀搅拌后，低温真空干燥，制得抗HPV病毒冻干粉；
(3)将步骤(2)制得的抗HPV病毒冻干粉，根据等量递增原则，添加生物凝胶、增稠剂、助流剂，混合均匀，制备成冻干粉散剂，分装后包装；
(4)将水、磷酸二氢钾，甘油按比例配成溶解液，分装后包装；
(5)使用前将步骤(3)得到的散剂和步骤(4)制备的溶解液混合。
上述三个实施例制备的抗HPV病毒凝胶敷料的批号为1308001、1308002、1308003。
1、抗HPV病毒冻干粉稳定性考察
采用考马斯亮蓝法检测蛋白含量。将抗HPV病毒冻干粉样品(1308001、1308002、1308003)室温留样考察24个月，在第3、6、9、12、18、24个月检测，考察结果如下表1
表1 抗HPV病毒冻干粉样品室温留样考察结果
2、安全性检测
经广州医疗器械质量监督检测中心安全性检测，结果证明无毒无副作用。其中“迟发型超敏反应”按GB/T16886.10-2005中7章的规定进行检测，鉴定结果为皮肤致敏反应阴性；“细胞毒性”按GB/T16886.5-2003中8.3的规定进行检测，鉴定结果为细胞毒性不大于2；“阴道刺激试验”按GB/T16886.10-2005中附录B中B7的规定进行检测，鉴定结果为阴道刺激反应程度为无，未见皮肤变态反应。
3、试用效果
对本发明的抗HPV病毒凝胶敷料治疗HPV病毒(含低危和高危HPV病毒)感染阳性患者及相关疾病做了初步试用观察，结果表明，该敷料能有效治疗HPV病毒对生殖器感染，并对由HPV病毒感染引发的慢性宫颈炎(宫颈糜烂、宫颈息肉)、尖锐湿疣等均有显著的治疗效果，无任何刺激和不良反应。
(1)抗HPV病毒凝胶敷料治疗单纯型和混合型HPV感染的临床效果。
观察抗HPV病毒凝胶敷料(1308001、1308002、1308003)治疗单纯型和混合型HPV感染的临床效果。试用组1采用抗HPV病毒凝胶敷料1308001，试用组2采用采用抗HPV病毒凝胶敷料1308002，试用组3采用抗HPV病毒凝胶敷料1308003，如下表2结果显示：单一高危HPV感染者使用抗HPV病毒凝胶敷料(1308001、1308002、1308003)3个月后转阴率分别是72.0％、76.0％、68.0％，对照组是16.0％；6个月后试用组全部转阴，对照是56.0％。混合型高危HPV感染者使用抗HPV病毒凝胶敷料(1308001、1308002、1308003)3个月后转阴率分别是52.0％、48.0％、44.7％，对照是0，6个月后试用组转阴率分别为84.0％、88.0％、80.0％，对照为8％。
表2 抗HPV病毒凝胶敷料治疗单纯型和混合型HPV感染的临床效果。
(2)抗HPV病毒凝胶敷料对尖锐湿疣及低危型HPV感染的疗效。
观察抗HPV病毒凝胶敷料(1308001、1308002、1308003)对尖锐湿疣及低危型HPV感染的疗效。生殖器尖锐湿疣患者，采用物理治疗去除赘物后，阴道后穹窿内置及外阴部涂抹治疗。试用组1采用抗HPV病毒凝胶敷料1308001，试用组2采用采用抗HPV病毒凝胶敷料1308002，试用组3采用抗HPV病毒凝胶敷料1308003，对照组物理治疗去除赘物后不做任何治疗。疗效判定：①痊愈：宫颈HPV-DNA转阴，生殖器尖锐湿疣无复发；②有效：宫颈HPV-DNA复查结果下降；③无效：宫颈HPV-DNA复查未下降或上升，生殖器疣反复发作。结果如下表3显示：150例尖锐湿疣及低危型HPV感染患者使用抗HPV病毒凝胶敷料一个疗程后，全部痊愈，宫颈HPV-DNA转阴，生殖器尖锐湿疣无复发。对照组痊愈例数只有5例，有效例数为20例，无效例数为25例。
表3 抗HPV病毒凝胶敷料对尖锐湿疣及低危型HPV感染的疗效
| 病例总数 | 痊愈例数 | 有效例数 | 无效例数 | |
| 试用组1 | 50 | 50 | 0 | 0 |
| 试用组2 | 50 | 50 | 0 | 0 |
| 试用组3 | 50 | 50 | 0 | 0 |
| 对照组 | 50 | 5 | 20 | 25 |
(3)抗HPV病毒凝胶敷料对宫颈糜烂的疗效
观察抗HPV病毒凝胶敷料(1308001、1308002、1308003)对宫颈糜烂的疗效。宫颈糜烂患者试用组1采用抗HPV病毒凝胶敷料1308001，试用组2采用采用抗HPV病毒凝胶敷料1308002，试用组3采用抗HPV病毒凝胶敷料1308003，疗效判定：①痊愈：子宫颈光滑，糜烂面消失；②显效：糜烂面积缩小>50％或Ⅱ度转为Ⅰ度，Ⅲ度转为Ⅱ度；③有效：糜烂面积缩小<50％，糜烂面积明显缩小但好转不足Ⅰ度或糜烂面积无明显缩小而颗粒型变为单纯型，乳头型变为颗粒型；④无效：治疗前后糜烂面无变化或有发展。结果如下表4显示：抗HPV病毒凝胶敷料对宫颈糜烂的有效率为90％以上。
表4 抗HPV病毒凝胶敷料对宫颈糜烂的疗效
(4)抗HPV病毒凝胶敷料对宫颈息肉的疗效
观察抗HPV病毒凝胶敷料(1308001、1308002、1308003)对对宫颈息肉的疗效。宫颈息肉患者采用物理治疗去除赘物或微创后给药，试用组1采用抗HPV病毒凝胶敷料1308001，试用组2采用采用抗HPV病毒凝胶敷料1308002，试用组3采用抗HPV病毒凝胶敷料1308003。如下表5结果显示：抗HPV病毒凝胶敷料对宫颈息肉的有效率为90％以上。
表5 抗HPV病毒凝胶敷料对宫颈息肉的疗效
以上所揭露的仅为本发明的较佳实施例而已，当然不能以此来限定本发明之权利范围，因此依本发明权利要求所作的等同变化，仍属于本发明所涵盖的范围。
Claims (9)
1.一种抗HPV病毒凝胶敷料，其特征在于：包括抗HPV病毒冻干粉和溶解液；其中所述抗HPV病毒冻干粉组分包括茶酸性蛋白AP、异聚麦芽糖、冻干保护剂、杀/抑菌剂；所述溶解液组分包括水、磷酸盐、甘油、薄荷油。
2.如权利要求1所述的抗HPV病毒凝胶敷料，其特征在于：所述茶酸性蛋白AP是一类分子量为3-100KD的糖蛋白，等电点PI为2.0-5.0。
3.如权利要求2所述的抗HPV病毒凝胶敷料，其特征在于：所述茶酸性蛋白AP的制备方法包括以下步骤：
(a)取新鲜茶叶以1：3-10w/v料水比研磨匀浆，调PH7-9，10-40℃浸提1-5小时，过滤离心；取上清液，调PH2-5，离心，取沉淀；冷冻干燥后得到茶酸性蛋白AP粗品；
(b)茶酸性蛋白AP粗品复溶后，过CM Sepharose Fast Flow层析柱，去除碱性蛋白，收取含酸性蛋白的流穿液，经真空冷冻干燥制成茶酸性蛋白AP。
4.如权利要求1所述的抗HPV病毒凝胶敷料，其特征在于：所述抗HPV病毒冻干粉组分具体包括：
茶酸性蛋白AP：0.01-10％
异聚麦芽糖1-25％
冻干保护剂20-90％
杀/抑菌剂0.01-1％；
其中所述茶酸性蛋白AP从茶树(Camellia sinensis)新鲜叶片中提取，优先选择海南种植的茶树；所述冻干保护剂为多糖；所述杀/抑菌剂为氯己定。
5.如权利要求1所述的抗HPV病毒凝胶敷料，其特征在于：所述溶解液组分具体包括：
水：60-100％
磷酸盐：0-2％
甘油：0-15％
薄荷油：0-8％。
6.如权利要求1所述的抗HPV病毒凝胶敷料的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：
(1)茶酸性蛋白AP提取；
(2)将步骤(1)提取的茶酸性蛋白AP在溶剂介质中溶解，加入异聚麦芽糖、冻干保护剂和杀/抑菌剂的一种或几种，均匀搅拌后，低温真空干燥，制得抗HPV病毒冻干粉；
(3)将步骤(2)制得的抗HPV病毒冻干粉，根据等量递增原则，添加生物凝胶、增稠剂、助流剂，混合均匀，制备成冻干粉散剂，分装后包装；
(4)将水、磷酸盐、甘油、薄荷油的一种或几种按比例配成溶解液，分装后包装；
(5)使用前将步骤(3)得到的冻干粉散剂和步骤(4)制备的溶解液混合。
7.如权利要求1所述的抗HPV病毒凝胶敷料，其特征在于：所述的抗HPV病毒冻干粉疏松多孔，可直接配合喷粉器使用，在治疗和预防生殖器病毒感染，慢性宫颈炎、宫颈癌和阴茎癌HPV疾病中的应用。
8.如权利要求6所述的抗HPV病毒凝胶敷料，其特征在于：所述冻干粉散剂，可直接配合喷粉器使用，在治疗和预防生殖器病毒感染，慢性宫颈炎、宫颈癌和阴茎癌HPV疾病中的应用。
9.一种如权利要求6所述制备的抗HPV病毒凝胶敷料在治疗和预防生殖器病毒感染，慢性宫颈炎、宫颈癌和阴茎癌HPV疾病中的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410798607.9A CN104491838B (zh) | 2014-12-19 | 2014-12-19 | 抗hpv病毒凝胶敷料及其制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410798607.9A CN104491838B (zh) | 2014-12-19 | 2014-12-19 | 抗hpv病毒凝胶敷料及其制备方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN104491838A true CN104491838A (zh) | 2015-04-08 |
| CN104491838B CN104491838B (zh) | 2017-04-19 |
Family
ID=52933352
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201410798607.9A Active CN104491838B (zh) | 2014-12-19 | 2014-12-19 | 抗hpv病毒凝胶敷料及其制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN104491838B (zh) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106177900A (zh) * | 2016-08-19 | 2016-12-07 | 吉安市御美丽健康产业股份有限公司 | 一种抗人乳头瘤病毒的凝胶及其制备方法 |
| CN109821007A (zh) * | 2018-04-23 | 2019-05-31 | 海南海泽惠生物科技有限公司 | 苦瓜蛋白在制备抗人乳头瘤病毒感染药物中的应用 |
| CN110478514A (zh) * | 2019-06-18 | 2019-11-22 | 广西信业生物技术有限公司 | 一种抗hpv病毒敷料及其制备方法 |
| CN113730553A (zh) * | 2021-07-06 | 2021-12-03 | 江苏实干家生物科技有限公司 | 一种抗hpv病毒凝胶敷料及其制备方法 |
| CN114767921A (zh) * | 2022-03-03 | 2022-07-22 | 吉林省国大生物工程有限公司 | 一种带负电荷抗hpv生物蛋白凝胶敷料的制备方法和应用 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102652778A (zh) * | 2012-03-29 | 2012-09-05 | 武汉华大药业有限公司 | 药物组合物 |
| CN102908611A (zh) * | 2012-10-26 | 2013-02-06 | 太原锦波生物医药科技有限公司 | 一种预防和控制人乳头瘤病毒感染的生物蛋白敷料及隐形膜 |
| CN103083472A (zh) * | 2013-01-25 | 2013-05-08 | 北海光谷纳米科技研发中心 | 一种治疗妇科炎症的纳米银抗炎凝胶及制备方法 |
-
2014
- 2014-12-19 CN CN201410798607.9A patent/CN104491838B/zh active Active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102652778A (zh) * | 2012-03-29 | 2012-09-05 | 武汉华大药业有限公司 | 药物组合物 |
| CN102908611A (zh) * | 2012-10-26 | 2013-02-06 | 太原锦波生物医药科技有限公司 | 一种预防和控制人乳头瘤病毒感染的生物蛋白敷料及隐形膜 |
| CN103083472A (zh) * | 2013-01-25 | 2013-05-08 | 北海光谷纳米科技研发中心 | 一种治疗妇科炎症的纳米银抗炎凝胶及制备方法 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| 周裔彬: "茶多糖的纯化及结构分析", 《化学通报》 * |
| 徐仲溪: "茶多糖化学及生物活性的研究", 《茶叶科学》 * |
| 茶多糖化学及生物活性的研究;徐仲溪;《茶叶科学》;20040228;第24卷(第2期);75-81 * |
| 茶多糖的纯化及结构分析;周裔彬;《化学通报》;20080930(第9期);691-695 * |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106177900A (zh) * | 2016-08-19 | 2016-12-07 | 吉安市御美丽健康产业股份有限公司 | 一种抗人乳头瘤病毒的凝胶及其制备方法 |
| CN109821007A (zh) * | 2018-04-23 | 2019-05-31 | 海南海泽惠生物科技有限公司 | 苦瓜蛋白在制备抗人乳头瘤病毒感染药物中的应用 |
| CN109821007B (zh) * | 2018-04-23 | 2022-03-15 | 海南海泽惠生物科技有限公司 | 苦瓜蛋白在制备抗人乳头瘤病毒感染药物中的应用 |
| CN110478514A (zh) * | 2019-06-18 | 2019-11-22 | 广西信业生物技术有限公司 | 一种抗hpv病毒敷料及其制备方法 |
| CN113730553A (zh) * | 2021-07-06 | 2021-12-03 | 江苏实干家生物科技有限公司 | 一种抗hpv病毒凝胶敷料及其制备方法 |
| CN114767921A (zh) * | 2022-03-03 | 2022-07-22 | 吉林省国大生物工程有限公司 | 一种带负电荷抗hpv生物蛋白凝胶敷料的制备方法和应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN104491838B (zh) | 2017-04-19 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN104491838B (zh) | 抗hpv病毒凝胶敷料及其制备方法 | |
| CN101406557A (zh) | 一种治疗烧伤、烫伤及多种皮肤损伤的外用中药 | |
| CN104353058A (zh) | 商陆抗病毒蛋白冻干粉复合剂及其制备方法 | |
| WO2013143412A1 (zh) | 药物组合物 | |
| WO2020010919A1 (zh) | 一种中药组合物、中药复方制剂及其制备方法和应用 | |
| WO2018137319A1 (zh) | 大叶清香桂的应用，治疗皮肤病的中药膏剂、制备方法及其应用 | |
| CN113616714A (zh) | 一种高硒抗hpv病毒的生物蛋白凝胶敷料及其制备方法 | |
| CN104173601B (zh) | 板蓝大青片及其制备方法 | |
| CN104721234A (zh) | 美洲大蠊提取物离子敏感型原位凝胶及其制备方法 | |
| JP2020528927A (ja) | ヒト乳頭腫ウイルスによる疾患を治療するための漢方薬組成物、その調製方法及び用途 | |
| CN102028922B (zh) | 关节炎膏 | |
| CN103191163B (zh) | 一种皮肤创面修复药物组合物 | |
| CN103120727B (zh) | 一种治疗妇科炎症的中药组合物及其制备方法 | |
| CN111759905A (zh) | 一种治疗骨关节炎的巴布剂及其制备方法 | |
| CN101829188B (zh) | 一种治疗泌尿系感染和结石病的药物 | |
| CN104706914B (zh) | 一种治疗细菌性阴道炎的中药及制备方法 | |
| CN101612203A (zh) | 一种用于治疗尖锐湿疣的中药组合物及其应用 | |
| CN103386101A (zh) | 一种治疗非特异性膀胱炎的中药制剂及其制备方法 | |
| CN103181964B (zh) | 治疗动物体表创伤的中药组合物及其制备方法 | |
| CN107970381A (zh) | 一种化痰的宣木瓜茶及其制备方法和应用 | |
| CN107551174A (zh) | 一种治疗宫颈hpv感染的外用中药及其制备方法 | |
| CN110064003B (zh) | 一种治疗带状疱疹的中药组合物及其制备方法 | |
| CN106924326A (zh) | 一种横根费菜提取物及其制备方法和用途 | |
| CN104873654A (zh) | 一种用于治疗荨麻疹的药物制剂 | |
| CN116421705A (zh) | 降低宫颈癌发病风险的药物制剂 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| TR01 | Transfer of patent right | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20191030 Address after: 225300 No. 6 Yuzhu Road, Taizhou Medical High-tech Zone, Jiangsu Province Patentee after: JIANGSU SR-BIOPHARMA BIOLOGICAL PHARMACEUTICAL CO.,LTD. Address before: The national high tech Industrial Park in Hainan province Haikou trough road 570000 No. 5 Patentee before: HAINAN SR-BIOPHARMA CO.,LTD. |
|
| TR01 | Transfer of patent right | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20200317 Address after: The national high tech Industrial Park in Hainan province Haikou trough road 570000 No. 5 Patentee after: HAINAN SR-BIOPHARMA Co.,Ltd. Address before: 225300 No. 6 Yuzhu Road, Taizhou Medical High-tech Zone, Jiangsu Province Patentee before: JIANGSU SR-BIOPHARMA BIOLOGICAL PHARMACEUTICAL Co.,Ltd. |
|
| CP03 | Change of name, title or address | ||
| CP03 | Change of name, title or address |
Address after: No. 5 Yaogu 1st Road, National High tech Industrial Park, Haikou City, Hainan Province, 570311 Patentee after: Senruipu Life Science Pharmaceutical (Hainan) Group Co.,Ltd. Address before: 570000 No.5, Yaogu 1st Road, national high tech Industrial Park, Haikou City, Hainan Province Patentee before: HAINAN SR-BIOPHARMA CO.,LTD. |