CN104491038B - 一种治疗犊牛腹泻的中药口服液及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属于兽药领域，具体涉及一种治疗犊牛腹泻的中药口服液及其制备方法。该中药口服液由黄连19‑20份、白头翁29‑30份、金银花27‑29份、黄芩30‑32份、甘草30‑31份、青蒿25‑30份、茵陈27‑30份制成，本发明的中药复方可以制成黄白双花口服液，一方面可以驱湿解热、抗菌消炎，有效抑制大肠杆菌、沙门氏菌、巴氏杆菌等病菌，另一方面能够保护脾胃，增强机体免疫力，通过防治结合，有效地治疗犊牛腹泻。临床试验表明，本发明的中药口服液的对犊牛腹泻的治愈率达到了86.7％；另外，该中药口服液配方中采用的中药原料来源广泛，成本低廉，从整体上降低了中药组合物的成本。

Description

一种治疗犊牛腹泻的中药口服液及其制备方法
技术领域
本发明属于中兽药领域，具体涉及一种治疗犊牛腹泻的中药口服液及其制备方法。
背景技术
腹泻是犊牛常见的一种疾病，特别在哺乳期犊牛中更为常见。犊牛腹泻的主要原因是犊牛身体抵抗力较差，再加上外界恶劣环境、天气等因素的影响，引起犊牛消化道功能紊乱、病菌感染或毒素中毒，并导致出现腹泻。其中引起犊牛腹泻的病菌主要有大肠杆菌、沙门氏菌、巴氏杆菌、弯曲杆菌、产气荚膜梭状芽孢杆菌等。单纯的病菌感染一般不容易引起犊牛腹泻，往往是在病菌感染的同时还伴随着饲养环境恶劣、犊牛抵抗力下降等因素，造成犊牛肠道菌群失调，并最终诱发腹泻。
目前，针对犊牛腹泻，常用庆大霉素、土霉素、头孢哌酮、恩诺沙星、氟派酸等进行治疗。上述药物治疗虽然疗效较好，但长期服用易产生耐药性，影响治疗效果，并会导致治疗使用剂量愈来愈大，引起食品安全和公共卫生问题。因此，寻求开发无公害、安全和绿色的用以替代抗生素等负面作用较大的兽药和饲料添加剂已迫在眉睫。
中兽药在我国畜牧业生产中的应用已有几千年的历史，在防治畜禽疾病、促进养殖业发展方面发挥着积极的作用，其无污染、无残留、不易产生耐药性、不污染动物源性食品的特点，已引起各国学者的重视。传统经典方剂、新组方、药物饲料添加剂等中草药在防治畜禽疾病方面已有应用，但是普遍存在原料药材成本较高、制备方法复杂、不利于规模化生产等缺点。
发明内容
本发明的目的在于提供一种治疗犊牛腹泻的中药口服液。
本发明的第二个目的在于提供一种疗犊牛腹泻的中药口服液的制备方法，该方法简单、成本低廉、提取率高。
为了实现以上目的，本发明的技术方案如下：
一种治疗犊牛腹泻的中药口服液，主要由下述重量份数的原料制成：黄连19-20份、白头翁29-30份、金银花27-29份、黄芩30-32份、甘草30-31份、青蒿25-30份、茵陈27-30份。
所述的口服液的制备方法，包括以下步骤：
(1)取配方量的黄连、白头翁、金银花、黄芩、甘草、青蒿、茵陈为原料，粉碎，过10目筛，加入原料总重量12倍的水，调节pH值为酸性，搅拌浸泡，超声搅拌萃取，对萃取后的混合物加热搅拌使其沸腾，过滤，得第一滤液和滤渣；
(2)将步骤(1)中的滤渣中加入滤渣总重量8倍的水，调节pH值为中性，超声搅拌萃取，对萃取后的混合物加热搅拌使其沸腾，过滤，得第二滤液和滤渣；
(3)向步骤(2)中的滤渣中加入滤渣总重量8倍的水，调节pH值为碱性，超声搅拌萃取，对萃取后的混合物加热搅拌使其沸腾，过滤，得第三滤液和滤渣；
(4)将第一、二、三滤液合并，离心分离，取上清液浓缩，调节pH值，加水稀释得药液，灭菌后即得。
步骤(1)中所述的搅拌浸泡是在25-30℃条件下，以50-80rph的速度进行搅拌浸泡，搅拌浸泡时间为2-4h。
步骤(1)-(3)中所述的超声萃取使用的超声波频率为30-45kHz，超声萃取的时间为1-2h，超声萃取的同时以50-80rph的速度进行搅拌。
步骤(1)中加热沸腾时间为100-140min，步骤(2)中加热沸腾时间为70-90min，步骤(3)中加热沸腾时间为50-60min。
步骤(4)中所述离心分离转速为1.5×104-2×104rpmin，离心分离时间为15-20min。
步骤(4)中所述浓缩为浓缩至上清液相对密度为1.15-1.25，所述相对密度在65℃下测得。
步骤(4)中所述加水稀释为每1克原料总重量对应地稀释至药液总体积为1.2-1.5mL。
步骤(4)中所述灭菌为105℃温度下，采用0.14-0.16MPa的流通蒸汽进行灭菌，灭菌时间为40min。
步骤(1)中所述调节pH值为酸性为调节pH值为3.5-4.3，步骤(2)中所述调节pH值为中性为调节pH值为6.5-7，步骤(3)中所述调节pH值为碱性为调节pH值为8.4-8.8。
步骤(4)中所述调节pH值是调节pH值至4.5-8。
本发明的中药组合物中各种原料中药材的作用如下：
黄连，性味苦寒，能具有泻火、燥湿、解毒、止泻等功能。
白头翁，具有清热解毒、凉血止痢、燥湿杀虫的功效，对细菌性痢疾等有良好的疗效。
金银花，含挥发油、绿原酸、木樨草苷、环己六醇、肌醇、皂苷、鞣质、黄酮类化合物等，有光谱抗菌、抑制病原微生物、促进白细胞的吞噬、抗炎、解毒等作用。
黄岑，具有清热、燥湿、解毒等功能，可清肺火、去脾湿，对治疗病菌感染有特殊的功效。
甘草，具有抗炎、抗病毒的功能，还可以保肝解毒、增强免疫力。
青蒿，具有清热、健胃的功能。
茵陈，具有驱湿热、利水通淋的功能，并由驱虫、解热、护肝等功效。
本发明的中药口服液由黄连、白头翁、金银花、黄芩、甘草、青蒿、茵陈为原料制成，一方面可以驱湿解热、抗菌消炎，有效抑制大肠杆菌、沙门氏菌、巴氏杆菌等病菌，从根本上通过抑制病菌来止泻，另一方面能够保护脾胃，增强机体免疫力，通过防治结合，有效地治疗犊牛腹泻。临床试验表明，本发明的中药口服液的对犊牛腹泻的治愈率达到了86.7％；另外，该中药口服液配方中采用的中药原料来源广泛，成本低廉，从整体上降低了中药组合物的成本。
本发明的中药口服液的制备方法采用三次超声萃取，并且依次调节混合液的pH值为酸性、中性、碱性，对原料药物中的不同有效成分进行了全面、彻底的提取，使最终制得的中药口服液中有效药物成分丰富，治疗效果非常显著，而且采用三次超声萃取也提高原料药材的提取率，采用本发明的制备方法制备的中药口服液澄清、无可见异物，微生物限度符合标准，成品pH为4.5-8，成品盐酸小檗碱含量为75.42-80.23μg/mL；另外，该制备方法设备简单、操作简便，生产效率高，便于规模化生产。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明作进一步的说明。
实施例1
本实施例的治疗犊牛腹泻的中药口服液，由黄连9500g、白头翁14500g、金银花14500g、黄芩16000g、甘草15500g、青蒿15000g、茵陈15000g制成。
本实施例的治疗犊牛腹泻的中药口服液为黄白双花口服液。
本实施例的治疗犊牛腹泻的口服液的制备方法，包括如下步骤：
(1)取配方量的黄连、白头翁、金银花、黄芩、甘草、青蒿、茵陈为原料，粉碎，过10目筛，加入原料总重量12倍的去离子水，调节pH值至3.5，以50rph的转速搅拌浸泡2h，使用频率为30kHz的超声波超声萃取1h后得萃取液和药渣，超声萃取的同时以50rph的转速搅拌，然后对萃取液和药渣混合物加热使其沸腾100min，加热的同时以50rph的转速搅拌，过滤后得第一滤液和滤渣；
(2)将步骤(1)中的滤渣中加入滤渣总重量8倍的去离子水，调节pH值至6.5，使用频率为30kHz的超声波超声萃取1h后得萃取液和药渣，超声萃取的同时以50rph的转速进行搅拌，然后对萃取液和药渣混合物加热使其沸腾70min，加热的同时以50rph的转速进行搅拌，过滤后得第二滤液和滤渣；
(3)将步骤(2)中滤渣中加入滤渣总重量8倍的去离子水，调节pH值至8.4，使用频率为30kHz的超声波超声萃取1h后得萃取液和药渣，超声萃取的同时以50rph的转速进行搅拌，对萃取液和药渣混合物加热使其沸腾50min，加热的同时以50rph的转速进行搅拌，过滤后得第三滤液和滤渣；
(4)将第一、二、三滤液合并，用管式离心机以1.5×104rpmin的速度离心15min，离心后取上清液在65℃下减压浓缩至相对密度为1.15(65℃)，然后用柠檬酸钠调节浓缩液的pH值为4.5，加水稀释至120000mL，灌装，在105℃下用0.14MPa的流通蒸汽灭菌40min，即得黄白双花口服液。
实施例2
本实施例的治疗犊牛腹泻的中药口服液，由黄连475g、白头翁725g、金银花725g、黄芩800g、甘草775g、青蒿750g、茵陈750g制成。
本实施例的治疗犊牛腹泻的中药口服液为黄白双花口服液。
本实施例的治疗犊牛腹泻的口服液的制备方法，包括如下步骤：
(1)取配方量的黄连、白头翁、金银花、黄芩、甘草、青蒿、茵陈为原料，粉碎，过10目筛，加入原料总重量12倍的去离子水，调节pH值至4.0，以70rph的转速搅拌浸泡3h，使用频率为45kHz的超声波超声萃取1.5h后得萃取液和药渣，超声萃取的同时以70rph的转速搅拌，然后对萃取液和药渣的混合物加热使其沸腾120min，加热的同时以70rph的转速搅拌，过滤后得第一滤液和滤渣；
(2)将步骤(1)中的滤渣中加入滤渣总重量8倍的去离子水，调节pH值至6.8，使用频率为45kHz的超声波超声萃取1.5h后得萃取液和药渣，超声萃取的同时以70rph的转速进行搅拌，然后对萃取液和药渣的混合物加热使其沸腾90min，加热的同时以70rph的转速进行搅拌，过滤后得第二滤液和滤渣；
(3)将步骤(2)中的滤渣中加入滤渣总重量8倍的去离子水，调节pH值至8.7，使用频率为45kHz的超声波超声萃取1.5h后得萃取液和药渣，超声萃取的同时以70rph的转速进行搅拌，对萃取液和药渣的混合物加热使其沸腾55min，加热的同时以70rph的转速进行搅拌，过滤后得第三滤液和滤渣；
(4)将第一、二、三滤液合并，用管式离心机以1.7×104rpmin的速度离心17min，离心后取上清液在70℃下减压浓缩至相对密度为1.15(65℃)，然后用柠檬酸钠调节浓缩液的pH值为6.0，加水稀释至7500mL，灌装，在105℃下用0.15MPa的流通蒸汽灭菌40min，即得黄白双花口服液。
实施例3
本实施例的治疗犊牛腹泻的中药口服液，由黄连190g、白头翁290g、金银花290g、黄芩320g、甘草310g、青蒿300g、茵陈270g制成。
本实施例的治疗犊牛腹泻的中药口服液为黄白双花口服液。
本实施例的治疗犊牛腹泻的口服液的制备方法，包括如下步骤：
(1)取配方量的黄连、白头翁、金银花、黄芩、甘草、青蒿、茵陈为原料，粉碎，过10目筛，加入原料总重量12倍的去离子水，调节pH值至4.3，以80rph的转速搅拌浸泡4h，使用频率为30kHz的超声波超声萃取2h后得萃取液和药渣，超声萃取的同时以80rph的转速搅拌，然后对萃取液和药渣的混合物加热使其沸腾140min，加热的同时以80rph的转速搅拌，过滤后得第一滤液和滤渣；
(2)将步骤(1)中的滤渣中加入滤渣总重量8倍的去离子水，调节pH值至7.0，使用频率为30kHz的超声波超声萃取1h后得萃取液和药渣，超声萃取的同时以80rph的转速进行搅拌，然后对萃取液和药渣的混合物加热使其沸腾80min，加热的同时以80rph的转速进行搅拌，过滤后得第二滤液和滤渣；
(3)将步骤(2)中的滤渣中加入滤渣总重量8倍的去离子水，调节pH值至8.8，使用频率为30kHz的超声波超声萃取1h后得萃取液和药渣，超声萃取的同时以80rph的转速进行搅拌，对萃取液和药渣的混合物加热使其沸腾60min，加热的同时以80rph的转速进行搅拌，过滤后得第三滤液和滤渣；
(4)将第一、二、三滤液合并，用管式离心机以2×104rpmin的速度离心20min，离心后取上清液在80℃下减压浓缩至相对密度为1.25(65℃)，然后用柠檬酸钠调节浓缩液的pH值为6.8，加水稀释至2560mL，灌装，在105℃下用0.16MPa的流通蒸汽灭菌40min，即得黄白双花口服液。
实施例4
本实施例的治疗犊牛腹泻的中药口服液，由黄连200g、白头翁300g、金银花270g、黄芩300g、甘草300g、青蒿250g、茵陈300g制成。
本实施例的治疗犊牛腹泻的中药口服液为黄白双花口服液。
本实施例的治疗犊牛腹泻的口服液的制备方法，包括如下步骤：
(1)取配方量的黄连、白头翁、金银花、黄芩、甘草、青蒿、茵陈为原料，粉碎，过10目筛，加入原料总重量12倍的去离子水，调节pH值至3.9，以60rph的转速搅拌浸泡3h，使用频率为30kHz的超声波超声萃取1.2h后得萃取液和药渣，超声萃取的同时以60rph的转速搅拌，然后对萃取液和药渣的混合物加热使其沸腾120min，加热的同时以60rph的转速搅拌，过滤后得第一滤液和滤渣；
(2)将步骤(1)中的滤渣中加入滤渣总重量8倍的去离子水，调节pH值至6.7，使用频率为30kHz的超声波超声萃取1.2h后得萃取液和药渣，超声萃取的同时以60rph的转速进行搅拌，然后对萃取液和药渣的混合物加热使其沸腾70min，加热的同时以60rph的转速进行搅拌，过滤后得第二滤液和滤渣；
(3)将步骤(2)中的滤渣中加入滤渣总重量8倍的去离子水，调节pH值至8.7，使用频率为30kHz的超声波超声萃取1.2h后得萃取液和药渣，超声萃取的同时以60rph的转速进行搅拌，对萃取液和药渣的混合物加热使其沸腾50min，加热的同时以60rph的转速进行搅拌，过滤后得第三滤液和滤渣；
(4)将第一、二、三滤液合并，用管式离心机以2×104rpmin的速度离心15min，离心后取上清液在60℃下减压浓缩至相对密度为1.25(65℃)，然后用柠檬酸钠调节浓缩液的pH值为6.5，加水稀释至2720mL，灌装，在105℃下用0.15MPa的流通蒸汽灭菌40min，即得黄白双花口服液。
实验例：
按照实施例1-4中的制备方法制得的黄白双花口服液，其成品率、性状﹑鉴别﹑澄明度﹑微生物限度﹑pH﹑相对密度﹑装量差异及盐酸小檗碱含量(采用兽药典2010年版二部附录35页高效液相色谱法测定)测试结果见表1。
表1实施例1-4制得的中药口服液的测试数据表
序号 实施例1 实施例2 实施例3 实施例4
理论成品量 120L 7500mL 2560mL 2720mL
实际成品量 118.3L 7470mL 2530mL 2700mL
成品率 98.6％ 99.6％ 98.8％ 99.3％
性状 棕褐色澄清液体 棕褐色澄清液体 棕褐色澄清液体 棕褐色澄清液体
鉴别 呈正反应 呈正反应 呈正反应 呈正反应
澄明度 澄清，无可见异物 澄清，无可见异物 澄清，无可见异物 澄清，无可见异物
相对密度 1.18 1.16 1.16 1.17
微生物限度 符合规定 符合规定 符合规定 符合规定
成品pH 4.5 6.0 6.8 6.5
成品盐酸小檗碱 80.23μg/mL 79.78μg/mL 79.17μg/mL 80.04μg/mL
含量
实验结果表明，实施例1-4制得的黄白双花口服液的成品率为大于98.6％，成品盐酸小檗碱含量为79.17-80.23μg/mL，其他的性状﹑鉴别﹑澄明度﹑微生物限度﹑pH﹑相对密度等参数也均符合规定。
本发明临床试验结果如下：
a.病例筛选标准
试验动物具有如下症状：
精神倦怠，食欲减退，体温呈现微热或高热，口色赤红；卧多立少，起立迟缓、困难；频排稀糊状粪便，呈红色或黑色，常混杂有凝血块、血丝或气泡；有不同程度的脱水症状：眼球凹陷、皮毛粗糙、皮肤无弹性等。
b.试验方法
选取5～60日龄的患腹泻犊牛60头，试验前均未给任何药物，随机分为4组：试验组A、B、C组和对照组D组，每组试验动物15头。试验组A、B、C组分别按高(150mL)、中(100mL)、低(50mL)3个剂量灌服本发明制得的口服液，空白对照组灌服生理盐水，每日2次(早晚各1次)，连续用药2天，停药后观察3天。
患犊牛腹泻的病牛在治疗期间，每天进行临床检查，并记录每头犊牛在用药前后及用药过程中精神状态、体温、呼吸、饮食欲、粪便颜色和形状的变化等，观察用药后是否有不良反应发生。
c.疗效判定标准
治愈：犊牛精神饮食均恢复正常，粪便软硬适中，鼻腔湿润，腹泻症状消失，实验室检查各项指标恢复正常。
显效：犊牛临床症状明显改善，腹泻症状明显减轻或消失，粪便已成形，饮食和其他症状有所好转，但尚未完全康复，实验室检查各项指标接近正常。
有效：犊牛临床症状有所改善，腹泻症状减轻，粪便由水样变成糊状，饮食和其他症状有所好转，但尚未完全康复，实验室检查大多数指标接近正常。
无效：患病犊牛所有症状未见好转或有所加重，甚至治疗无效死亡，实验室检查各项指标无明显变化。
d.试验结果
在整个试验治疗过程中，每天进行临床检查，60头腹泻犊牛的临床治疗结果见表2。
表2本发明制得的中药口服液对犊牛腹泻的临床治疗结果
由表2可见，本发明制得的口服液对腹泻犊牛治疗效果显著，高、中、低剂量组的治愈率分别为86.7％、86.7％和53.34％，空白对照组为0％。经数理统计分析显示，高、中剂量组之间无显著性差异(P>0.05)，高、中剂量组与低剂量组之间有显著差异(P<0.05)，高、中剂量组与空白对照组之间有显著差异(P<0.05)，低剂量组和空白对照组之间有显著差异(P<0.05)。
此次试验表明，本发明制得的口服液高、中剂量(150mL、100mL)对犊牛腹泻治疗效果明显，高、中剂量组治疗效果无显著差异。综合各方面的情况，建议以中剂量为推荐剂量。
本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。

Claims (9)

1.一种治疗犊牛腹泻的中药口服液，其特征在于，主要由下述重量份数的原料制成：黄连19-20份、白头翁29-30份、金银花27-29份、黄芩30-32份、甘草30-31份、青蒿25-30份、茵陈27-30份；
该中药口服液由包括以下步骤的方法制成：
(1)取配方量的黄连、白头翁、金银花、黄芩、甘草、青蒿、茵陈为原料，粉碎，过10目筛，加入原料总重量12倍的水，调节pH值为酸性，搅拌浸泡，超声搅拌萃取，对萃取后的混合物加热搅拌使其沸腾，过滤，得第一滤液和滤渣；
(2)将步骤(1)中的滤渣中加入滤渣总重量8倍的水，调节pH值为中性，超声搅拌萃取，对萃取后的混合物加热搅拌使其沸腾，过滤，得第二滤液和滤渣；
(3)向步骤(2)中的滤渣中加入滤渣总重量8倍的水，调节pH值为碱性，超声搅拌萃取，对萃取后的混合物加热搅拌使其沸腾，过滤，得第三滤液和滤渣；
(4)将第一、二、三滤液合并，离心分离，取上清液浓缩，调节pH值，加水稀释得药液，灭菌后即得。
2.一种如权利要求1所述的中药口服液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)取配方量的黄连、白头翁、金银花、黄芩、甘草、青蒿、茵陈为原料，粉碎，过10目筛，加入原料总重量12倍的水，调节pH值为酸性，搅拌浸泡，超声搅拌萃取，对萃取后的混合物加热搅拌使其沸腾，过滤，得第一滤液和滤渣；
(2)将步骤(1)中的滤渣中加入滤渣总重量8倍的水，调节pH值为中性，超声搅拌萃取，对萃取后的混合物加热搅拌使其沸腾，过滤，得第二滤液和滤渣；
(3)向步骤(2)中的滤渣中加入滤渣总重量8倍的水，调节pH值为碱性，超声搅拌萃取，对萃取后的混合物加热搅拌使其沸腾，过滤，得第三滤液和滤渣；
(4)将第一、二、三滤液合并，离心分离，取上清液浓缩，调节pH值，加水稀释得药液，灭菌后即得。
3.根据权利要求2所述的中药口服液的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述的搅拌浸泡是在25-30℃条件下，以50-80rph的速度进行搅拌浸泡，搅拌浸泡时间为2-4h。
4.根据权利要求2所述的中药口服液的制备方法，其特征在于，步骤(1)-(3)中所述的超声萃取使用的超声波频率为30-45kHz，超声萃取的时间为1-2h，超声萃取的同时以50-80rph的速度进行搅拌。
5.根据权利要求2所述的中药口服液的制备方法，其特征在于，步骤(1)中加热沸腾时间为100-140min，步骤(2)中加热沸腾时间为70-90min，步骤(3)中加热沸腾时间为50-60min。
6.根据权利要求3所述的中药口服液的制备方法，其特征在于，步骤(4)中所述离心分离转速为1.5×104-2×104rpmin，离心分离时间为15-20min。
7.根据权利要求2所述的中药口服液的制备方法，其特征在于，步骤(4)中所述浓缩为浓缩至上清液相对密度为1.15-1.25。
8.根据权利要求2所述的中药口服液的制备方法，其特征在于，步骤(4)中所述加水稀释为每1克原料总重量对应地稀释至药液总体积为1.2-1.5mL。
9.根据权利要求2所述的中药口服液的制备方法，其特征在于，步骤(4)中所述灭菌为105℃温度下，采用0.14-0.16MPa的流通蒸汽进行灭菌，灭菌时间为40min。
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