CN104352582A - 一种防治鸡大肠杆菌的药物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种防治鸡大肠杆菌的药物及其制备方法，所述药物是由以下原料药制备得到：白头翁、苦参、败酱草、厚朴、葶苈子，将各原料药粉碎后加入制剂成型所需的辅料，按照药物制剂常规方法做成临床上适宜的各种制剂，本发明药物共奏清热解毒，凉血止痢，降气平喘，调整胃肠功能，提高机体免疫力的功效，能有效防治鸡大肠杆菌病。

Description

一种防治鸡大肠杆菌的药物及其制备方法

技术领域

本发明涉及兽药领域，特别是涉及一种防治鸡大肠杆菌的药物及其制备方法。 

背景技术

鸡大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌(Escherichia coli)引起的鸡急性、亚急性及慢性细菌性传染病。二十世纪中期以后，随着养鸡业的快速发展，鸡大肠杆菌病在各国的流行日益严重，该病已成为危害养鸡业中最重要的细菌性传染病。 

鸡大肠杆菌病可在各种年龄鸡群发生，可引起急性败血症、纤维蛋白性心包炎、纤维蛋白性肝周炎、气囊炎、肉芽肿、腹膜炎、输卵管炎、脐带炎、眼炎、肠炎等多种疾病，还可引起孵化死胚和弱胚，给养鸡业造成很大的经济损失。 

大肠杆菌的血清型较多，在我国证实对鸡群有致病性的血清型有O1、O2、O3、O5、O6、O8、O22、O26、O53、O65、O66、O71、O74、O78、O86、O88、O89、O93、O103及O145等。血清型不同，临床表现和流行特征也不同，且大肠杆菌易产生耐药性，这些为防治大肠杆菌病增加难度。研究表明，随着时间的推移，大肠杆菌耐药菌株越来越多，耐药谱越来越广，有的菌株甚至对尚未用于兽医临床的新型抗生素也表现出很强的耐药性。张铁等研究表明，在华北地区分离的205株禽源大肠杆菌对多种抗生素有耐药性，青霉素类、大环内酯类、磺胺类、林可胺类抗生素耐药率均在50％以上，且多重耐药，多重耐药率为100％。 

因此寻求新型的、对人体和环境无污染的纯天然绿色治疗药物已成为发展目标之一。中草药因其低毒性，低残留、不易产生耐药性等特点，且使用后也不会影响畜禽产品的食用安全性与食用品质要求，符合当今社会倡导的绿色养殖主题，引起中外研究者的共同关注，同时积累了数千年的临床应用经验，被 人们广泛认同。因此研制出既能防治疾病又能提高机体免疫机能的纯天然绿色药物具有重要的现实意义。 

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种结构简单、成本低、操作简便的X。 

为达上述目的，本发明一种防治鸡大肠杆菌的药物，其由以下原料药制备得到：白头翁、苦参、败酱草、厚朴、葶苈子。 

作为优选所述药物其由以下重量份的各原料药制备得到： 

白头翁75-225份、苦参50-150份、败酱草50-150份、厚朴25-75份、葶苈子50-150份。 

进一步作为优选所述药物由以下重量份的各原料药制备得到： 

白头翁150份、苦参100份、败酱草100份、厚朴50份、葶苈子100份。 

一种防治鸡大肠杆菌药物的制备方法，其是将各原料药粉碎后加入制剂成型所需的辅料，按照药物制剂常规方法做成临床上适宜的各种制剂。 

进一步低，所述的制剂包括片剂、散剂、溶液剂、注射剂、胶囊剂。 

本发明防治鸡大肠杆菌的药物与现有技术不同之处在于本发明取得了如下技术效果： 

本发明方中白头翁苦寒，清热解毒，凉血止痢，为君药。苦参苦寒，败酱草辛苦寒，助君药清热燥湿，解毒消痈，杀虫止痢，共为臣药。厚朴苦温，行气燥湿，降逆平喘，行胃肠之滞气并降肺气平喘；葶苈子辛苦寒，泻肺平喘，行水消肿，共为佐使药。全方共奏清热解毒，凉血止痢，降气平喘，调整胃肠功能，提高机体免疫力之功效，能有效防治鸡大肠杆菌病。 

具体实施方式

以下结合实施例，对本发明上述的和另外的技术特征和优点作更详细的说明。 

实施例1 

将白头翁75g、苦参50g、败酱草50g、厚朴25g、葶苈子50g，以上5味药材加水煎煮3次，每次加水量为2500g，每次2h，合并煎煮液，滤过，静置过夜、滤取上清液，减压(0.08Mp，80℃)浓缩至相对密度1.05～1.10(50℃)，放冷，加入乙醇，使含醇量至60％，放置48h，滤取上清液，回收乙醇至无醇 味，加入1.5g山梨酸钾，搅匀，加水调节至500mL，滤过，灌装，灭菌(116℃，30min)即得溶液剂1。 

实施例2 

将白头翁150g、苦参100g、败酱草100g、厚朴50g、葶苈子100g，以上5味药材加水煎煮3次，每次加水量为2500g，每次2h，合并煎煮液，滤过，静置过夜、滤取上清液，减压(0.08Mp，80℃)浓缩至相对密度1.05～1.10(50℃)，放冷，加入乙醇，使含醇量至60％，放置48h，滤取上清液，回收乙醇至无醇味，加入2g山梨酸钾，搅匀，加水调节至1000mL，滤过，灌装，灭菌(116℃，30min)即得溶液剂2。 

实施例3 

将白头翁225g、苦参150g、败酱草150g、厚朴75g、葶苈子150g，以上5味药材加水煎煮3次，每次加水量为2500g，每次2h，合并煎煮液，滤过，静置过夜、滤取上清液，减压(0.08Mp，80℃)浓缩至相对密度1.05～1.10(50℃)，放冷，加入乙醇，使含醇量至60％，放置48h，滤取上清液，回收乙醇至无醇味，加入2.5g山梨酸钾，搅匀，加水调节至1500mL，滤过，灌装，灭菌(116℃，30min)即得溶液剂3。 

以实施例2获得溶液剂为例进行防治鸡大肠杆菌病临床试验 

本试验旨在观察溶液剂2对人工感染鸡致病性大肠杆菌的临床疗效，为其研制，临床应用及其给药剂量确定提供试验依据。 

试验时间：2012年10月8日～2012年11月15日。 

试验地点：北京农学院实验动物房。 

实验材料 

大肠杆菌毒株：鸡大肠杆菌标准株C83863，血清型O2，购自中国兽医药品监察所。 

大肠杆菌O2分型鉴定血清，购于中国兽医药品监察所。 

供试药：溶液剂2，100mL/瓶(生药含量：0.5g/mL) 

阳性药：氧氟沙星溶液(碱性)，爱迪森(北京)生物科技有限公司，批号1204101；用法用量：饮水给药，1.5mL/kg·bw。对照药功能及主治均与溶液剂2相似，符合公认疗效，同类可比原则。 

实验动物：3周龄SPF雄性来航鸡180只，购自维通利华实验动物技术有限公司(动物生产许可证编号：SCXK(京)2009-0003)。 

饲料：SPF鸡料，购自北京科澳协力饲料有限公司。 

试验分组和方法 

3周龄SPF雄性来航鸡180只，随机分为6组，每组30只鸡。分别为阴性对照组、阳性对照组、阳性药对照组、溶液剂2高、中、低剂量组。阴性对照组鸡另室单独饲养，其他试验组饲养在三层育雏笼中，自由采食及饮水。除阴性对照组外，其他各组腹腔注射0.2mL(感染剂量8×107.6cfu/mL)菌液(方法参照附录2)，感染24h后，开始给药，每天1次，连续7d。试验期14d，适应性饲养7d，正式试验7d。组别和处理见表1。 

表1试验分组及处理 

30.2.3疗效判定标准 

无效：在试验期间，呈现鸡大肠杆菌病典型临床症状，病鸡精神萎顿，闭目嗜睡，羽毛松乱，呼吸困难，水样便腹泻，进而死亡；剖检观察心脏、肝脏、气囊等可见鸡大肠杆菌病典型病理变化。无菌采集肝脏、脾脏组织样品，进行细菌分离培养，经血清玻片凝集试验鉴定为大肠杆菌O2，判为无效。试验结束时每组死亡鸡数占该组试验鸡数的百分率为死亡率。 

有效：经用药治疗后，临床症状有明显缓解，病鸡精神不振，羽毛松乱，驱赶可走，食欲稍差或接近正常，偶见排稀粪；剖检观察心脏、肝脏、气囊等仍可见鸡大肠杆菌病典型病理变化，其程度与无效死亡鸡比较，明显减轻，但仍未治愈的鸡判为有效。试验结束时有效鸡数占该组试验鸡数的百分率为有效率。 

治愈：经用药治疗后，病鸡精神状态、食欲、饮水、呼吸、行为、粪便形态等恢复正常；剖检观察各脏器无明显病理变化，判为治愈。治愈鸡数占该组试验鸡数的百分率为治愈率。 

总有效率：试验期间，经过用药治疗后，有效及治愈鸡数占该组试验鸡数的百分率为总有效率。 

观测指标 

临床症状观察 

每天8:00和20:00观察和记录各组试验鸡的精神状态、羽毛状态、行为、采食、呼吸、粪便(颜色、质地)、死亡情况等。 

生产性能指标 

试验前及试验后(包括试验期间死亡)，对试验鸡空腹6h后称重，计算日增重；每天记录采食量，计算试验期间内日采食量和料肉比。计算公式如下。 

日增重＝(试验后体重(g)－试验前体重(g))/试验天数 

日均采食量＝每组总耗料量(g)/天数(d)/只数 

料肉比＝日采食量(g)/日增重(g) 

剖检病理变化观察 

试验结束后，各组随机抽取10只试验鸡，剖检，参照鸡大肠杆菌病剖检病理变化，观察并记录各组试验鸡主要脏器病理变化。 

有效率、治愈率和死亡率 

试验期间，观察各组试验鸡发病情况，记录死亡鸡数，及时剖检观察其病理变化和采样做细菌分离和鉴定。试验结束后，按照疗效判定标准整理、计算有效率、治愈率、死亡率和总有效率，并进行差异显著性统计学分析。 

数据处理 

应用SPSS11.5统计处理软件进行统计分析，用Duncan氏检验法进行各组间的多重比较，数据以平均数±标准差表示。P<0.05表示差异显著。 

结果与分析 

各组试验鸡临床症状观察及剖检变化 

攻毒24h后，除阴性对照组外其他各组鸡100％发病。表现为：精神沉郁、羽毛松乱、食欲下降、呼吸困难、呆立不动、两翼下垂、缩颈、闭目嗜睡；病鸡排白或者黄绿色稀便，严重者伏地不起，或死亡。 

死亡鸡无菌采取肝脏及脾脏等病料进行病原分离，得到一种病原菌，经病原菌生化及血清型鉴定试验，判断为大肠杆菌O2血清型。 

临床观察：阳性对照组，在第二天试验鸡死亡数达到高峰，其后逐渐减少，陆续死亡，结束时仅个别鸡自然恢复，其它鸡仍精神不振，被羽松乱，呆立不动，消瘦。阳性药对照组，溶液剂2高、中剂量组，在攻毒后出现死亡，治疗后第三天死亡数减少，症状开始逐渐好转，至试验结束大多数鸡精神、采食、呼吸恢复正常，羽毛平顺，粪便正常。死亡统计见表2。 

表2治疗期间各组试验鸡死亡统计表(只) 

剖检变化：阳性对照组病死鸡可见鸡大肠杆菌病的典型病理变化，纤维素性心包炎，肝周炎，肝淤血，气囊增厚浑浊伴有纤维素性渗出，肠道鼓气有出血点。阳性药对照组剖检仍可见轻度“三包炎”病理变化，心包周围仍有少量纤维素性干酪样物质，肝脏周围仍有纤维素膜，气囊有黄色干酪物质存在。溶液剂2高、中剂量组剖检观察，除个别鸡只外，未见鸡大肠杆菌病典型病理变化。溶液剂2低剂量组仍有部分试验鸡可见轻度“三包炎”病理变化。 

各组试验鸡生产性能变化 

试验鸡攻毒发病后，采食量下降，消瘦。表3结果显示，阳性药对照组和溶液剂2高、中、低剂量组治疗后试验鸡病情迅速改善，采食量逐渐恢复，体重增加显著高于阳性对照组(P<0.05)，接近阴性对照组，差异不显著。 

表3溶液剂2对试验前后鸡体重的影响(n＝10) 

注：各试验组组间相比较，数字后缀不同字母表示组间差异显著(P<0.05)。 

溶液剂2临床疗效评价 

综合临床症状观察和剖检变化观察，统计死亡、有效及治愈鸡数目，结果见表4显示。经Duncan氏检验，与阳性对照组相比，阳性药对照组，溶液剂2高、中剂量组都能有效地治疗鸡大肠杆菌病，促进鸡群康复，差异显著(P<0.05)。与阳性药对照组相比，溶液剂2高、中、低剂量组的治疗效果差异不显著，且溶液剂2高剂量组总有效率高于阳性药对照组，溶液剂2中剂量组与阳性药对照组治疗效果相当，无显著差异。 

表4溶液剂2对人工感染鸡大肠杆菌病的疗效 

注：各试验组组间相比较，数字后缀不同字母表示组间差异显著(P<0.05)。 

溶液剂2对人工感染鸡大肠杆菌病疗效显著。大部分病鸡给药治疗后精神、采食、呼吸恢复正常，羽毛平顺，粪便正常。剖检显示脏器病变“三包炎”病变减轻或消失。生产性能结果显示，各治疗组增重恢复迅速，与阴性对照组比较，无显著差异；与阳性对照组比较，差异显著，与阳性药对照组疗效结果相比略好，具备一定的生产性能恢复优势。 

综上试验结果表明，溶液剂2中剂量1.5mL/kg·bw和高剂量3.0mL/kg·bw均能有效防治鸡大肠杆菌病，降低死亡率，止痢效果明显，能消除或明显减轻鸡大肠杆菌所致心包炎、肝周炎和气囊炎等；有利于恢复病鸡的采食量和增重，降低料肉比。其功能建议为清热解毒，凉血消痈，燥湿止痢；主治鸡大肠杆菌病。综合考虑用药成本和中、高剂量疗效差异不显著，故推荐溶液剂2中剂量1.5mL/kg·bw为临床使用剂量。 

以上所述的实施例仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案作出的各种变形和改进，均应落入本发明权利要求书确定的保护范围内。 

Claims (5)

1.一种防治鸡大肠杆菌的药物，其特征在于其由以下原料药制备得到：白头翁、苦参、败酱草、厚朴、葶苈子。

2.根据权利要求1所述的防治鸡大肠杆菌的药物，其特征在于其由以下重量份的各原料药制备得到：

白头翁75-225份、苦参50-150份、败酱草50-150份、厚朴25-75份、葶苈子50-150份。

3.根据权利要求1所述的防治鸡大肠杆菌的药物，其特征在于其由以下重量份的各原料药制备得到：

白头翁150份、苦参100份、败酱草100份、厚朴50份、葶苈子100份。

4.根据权利要求1-3中任一项所述防治鸡大肠杆菌药物的制备方法，其特征在于其是将各原料药粉碎后加入制剂成型所需的辅料，按照药物制剂常规方法做成临床上适宜的各种制剂。

5.根据权利要求4所述的制备方法，所述的制剂包括片剂、散剂、溶液剂、注射剂、胶囊剂。