CN104490933A - 鳄鱼血纳米微胶囊及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种鳄鱼血纳米微胶囊及其制备方法。鳄鱼血纳米微胶囊通过下述方法制备得到：将鳄鱼鲜血经抗凝血剂处理，再经过高压均质乳化，得到粒径为30～100nm的鳄鱼血纳米均质化乳化液；在搅拌下，加入乙醇进行初步脱水凝聚固化；在搅拌下，再加入羧甲基茯苓多糖水溶液进行单凝聚；仍在搅拌下，继续加入壳聚糖柠檬酸溶液进行复凝聚，第二次加入乙醇进行脱水处理；最后，经喷雾冷冻干燥，得到鳄鱼血纳米微胶囊。本发明无鳄鱼血血腥味，既最大限度地保留其生理活性，又能靶向控释放，达到靶向营养、保健、食疗作用；既便于贮存运输，又能广泛应用于多种领域。本发明制备方法工艺简单，易于工业化生产。
Description
技术领域
本发明涉及鳄鱼血的应用，具体地指一种鳄鱼血纳米微胶囊及其制备方法。
背景技术
鳄鱼是地球上唯一不患癌症的动物，是目前爬行动物中最长寿的一种。它具有超强的生命力和“长生不老”的生命特征。鳄鱼血具有杀菌、抗辐射、抗衰老的作用，同时，它还是一种全新的、强力的、唯一对人体无任何伤害的超级补体。据最新研究表明，其血液中血红蛋白氨基酸链有着非常奇效的结构，携氧能力超过其他动物的100倍以上，血液中含有极为丰富的超氧化物歧化酶(SOD)和一种超级缩氨酸(SP)，对肿瘤细胞具有极强地抑制和杀灭能力；此外，科学家还从野生湾鳄鱼血液中提取了一种超级抗生素——克罗迪林(crocdilin)，可杀一般抗生素不能杀灭的细菌。据试验，其血清还可杀灭令人恐慌的艾滋病毒。因此，对鳄鱼血的应用已成为人们研究的热门课题。
现有技术中对鳄鱼血的研究应用大多主要有：
CN201310543631.3专利申请公开了一种鳄鱼血保健酒及其制备方法，是先将竹叶、松针、鳄鱼血等置于白酒中浸泡，然后与鳄鱼肉复合酶酶解液混合而成。其鳄鱼血的采取、运输、贮存等都受到了限制。
CN 201110054181.2专利申请公开了一种鳄鱼血米粉末的制作方法。以干净无污染、新鲜的鳄鱼血和优质大米作为原料，将鳄鱼血加到明火猛炒至发黄的热炒米中，充分搅拌混合，让炒米充分吸收鳄鱼血，然后风干或烘干、研磨，制成800目左右的鳄鱼血米粉。这种血粉，易于运输，但在制作过程中，不利于保留鳄鱼血的生理特性，且有效成份有限，产品应用市场受到了限制。
CN 201010133082.9专利申请公开了一种鳄鱼血冻干粉的制作方法。其采用冷冻干燥的方法制取，但需低温贮存，未解决可控释放、靶向营养、保健、食疗效果。
现有专利和文献报道的鳄鱼血的应用大都破坏了其生理活性，且不便于贮存、运输，使得其应用领域及应用市场受到了很大限制。而市场上已商品化的鳄鱼血纳米微胶囊产品尚未见报道。
鳄鱼血由占10％血红细胞和血浆及占90％水分组成，血红蛋白在其正常生理环境条件下的平均粒径为5nm左右，呈单弥散状态发布，携氧能力超过其他动物的100倍；血浆液中含有极为丰富的超氧化物歧化酶(SOD)和一种超级缩氨酸(SP)，对肿瘤细胞具有极强地抑制和杀灭能力；鳄鱼血清还可杀灭令人恐慌的艾滋病毒。如何除去占90％水分，而保留占10％血红细胞和血浆的鳄鱼血有效成分，既要最大限度保留其生理功能，又要控释放靶向营养，制成稳定的鳄鱼血纳米微胶囊，是本发明重点要解决的技术难题。
发明内容
本发明的目的就是要克服现有技术所存在的不足，提供一种鳄鱼血纳米微胶囊及其制备方法。
本发明公开了一种鳄鱼血纳米微胶囊，所述微胶囊以鳄鱼鲜血为原料，通过下述方法制备得到：
1)高压均质乳化：将鳄鱼鲜血经抗凝血剂处理，再经过高压均质乳化，得到粒径为30～100nm的鳄鱼血纳米均质化乳化液；
2)初凝聚：在鳄鱼血纳米均质化乳化液中，搅拌下，首次加入乙醇进行初步脱水凝聚固化，得到鳄鱼血纳米粒初凝聚体；
3)单凝聚：在鳄鱼血纳米粒初凝聚体中，搅拌下加入羧甲基茯苓多糖水溶液进行单凝聚，使羧甲基茯苓多糖通过静电引力均匀地均匀吸附在鳄鱼血纳米粒初凝聚体表面，得到鳄鱼血纳米粒单凝聚体；
4)复凝聚：在鳄鱼血纳米粒单凝聚体中，搅拌下，加入壳聚糖溶液进行复凝聚，使壳聚糖通过静电引力均匀地吸附在鳄鱼血纳米粒单凝聚体表面，得到鳄鱼血纳米粒复凝聚体；
5)喷雾冷冻干燥：复凝聚后，继续搅拌，第二次加入乙醇进行深度脱水处理；然后进行喷雾冷冻干燥处理，最后，过筛、包装，得到鳄鱼血纳米微胶囊。
本发明在步骤1)中，所述抗凝血剂为5～25IU/ml的肝素钠或质量分数为4％柠檬酸钠水溶液或质量分数为5％EDTA溶液。
优选地，所述抗凝血剂为质量分数为4％柠檬酸钠水溶液，所述柠檬酸钠水溶液与鳄鱼血的质量比为1：9。
优选地，所述抗凝血剂为质量分数为5％EDTA溶液，所述EDTA溶液与鳄鱼血的质量比为0.5：9.5。
本发明在步骤1)中，高压均质乳化的压力为350～450MPa，线速度为150～300m/s。
本发明步骤2)、3)、4)、5)中，搅拌转速为60～100r/min，搅拌时间为10～40分钟。
本发明步骤2)、5)中，所述乙醇的添加量均为鳄鱼血初始重量的1～2倍。
为了使羧甲基茯苓多糖能更均匀地吸附在鳄鱼血纳米粒初凝聚体表面，在步骤3)中，所述羧甲基茯苓多糖水溶液的质量分数为8％，所述羧甲基茯苓多糖水溶液的添加量为鳄鱼血初始重量的5～8％。
为了使壳聚糖能更均匀地吸附在鳄鱼血纳米粒单凝聚体表面，在步骤4)中，所述壳聚糖溶液为含有4wt％柠檬酸的4wt％壳聚糖水溶液，所述壳聚糖溶液的添加量为鳄鱼血初始重量的10～15％。壳聚糖水溶液中柠檬酸与囊芯中鳄鱼血抗凝剂柠檬酸钠组成pH值缓冲液，能够维持正常生理活动。
本发明中，所用乙醇为食用级95％乙醇或食用级无水乙醇，优选食用级无水乙醇。
本发明还公开了一种鳄鱼血纳米微胶囊的制备方法，在本发明方法中：鳄鱼血在水溶剂(鳄鱼血自身中的大量水和抗凝血剂溶液中的水)下进行高压均质，会同时受到高速剪切、高频震荡、空穴现象和对流撞击等机械力作用和相应的热效应，这个过程中集内射流、超声波均质机，胶体磨、球磨机等功能原理于一体。产品保持原有的活性，稳定性、混合性和易吸收性、营养值、保质期、口味、色彩都可在均质机中得以实现。通过调节高压均质压力速度时间来控制乳化液中微粒的直径，获得理想的乳化液，使鳄鱼血的有效成分在乳化液中以的纳米级微粒形式存在。
为了获得稳定的鳄鱼血纳米级微粒，还需将其分离出来并固化。向鳄鱼血纳米均质化乳化液中添加初凝聚剂乙醇后，由于大量水与乙醇混溶结合，致使包埋物囊芯(鳄鱼血的有效成分)因脱水而溶解度下降，沉淀出来，凝聚成鳄鱼血纳米粒初凝聚体。
这只是颗粒状纳米级微胶囊初步脱水凝聚固化，还需通过加热、交联或去溶剂等方法使之进一步固化。因为加热会使蛋白质变性，失去鳄鱼血生物活性，交联会使微胶囊壳失去复溶性，无法实现鳄鱼血纳米微胶囊的缓控释放、靶向营养，降低功能成分营养或治疗效果，显然不妥！因此，本发明采用微胶囊化包埋技术。
根据微胶囊化包埋技术的一般原则：视所包埋物囊芯的性质，油溶性囊芯需选水溶性包囊材料，水溶性囊芯则选油溶性包囊材料，即分别制成水包油型微胶囊和油包水型微胶囊。
本发明囊芯为鳄鱼血是水溶性物质，按理应选择油溶性包囊材料(囊壳)，然而，本发明却选择水溶性的羧甲基茯苓多糖作包囊材料(囊壳)。这是因为，鳄鱼血和羧甲基茯苓多糖都具有溶于水、而不溶于乙醇的特性。本发明正是利用此特点，在鳄鱼血纳米粒初凝聚体中加入羧甲基茯苓多糖进行单凝聚，得到鳄鱼血纳米粒单凝聚体。羧甲基茯苓多糖作为鳄鱼血的载体、保护剂，还可作为新型的抗肿瘤、免疫增强药物的协同增效剂，又是微胶囊的囊壳材料。
仅仅通过羧甲基茯苓多糖包埋处理的鳄鱼血的纳米级微粒还不能实现鳄鱼血纳米胶囊的缓控释放、靶向营养，需要在羧甲基茯苓多糖单凝聚形成壁膜后的基础上，采用添加一种天然高分子，通过静电吸附，实现复凝聚。本发明选用壳聚糖进行复凝聚，其一是利用壳聚糖的成膜性，加固微胶囊膜；其二是利用壳聚糖的抗菌性，延长产品保质期；其三是利用壳聚糖的复溶性，达到缓控释放、靶向营养、治疗效果。
复凝聚机理是，壳聚糖分子链上有大量的伯氨基，而羧甲基茯苓多糖的分子链上有大量的羧基，所以，壳聚糖和羧甲基茯苓多糖，可以通过正、负电荷吸引形成聚电解质膜，从而实现鳄鱼血微胶囊的静电吸附，复凝聚二次包埋。
还有，功能活性物鳄鱼血是蛋白质，有氨基末端NH3 +阳离子，有羧基末端COO-阴离子，可分别与阴离子(-COO-)羧甲基茯苓多糖、与阳离子(-NH3 +)壳聚糖，产生静电引力，使得制得的鳄鱼血纳米微胶囊体系更加稳定。
相对于现有技术的鳄鱼血产品，本发明的有益效果在于：经过了单凝聚、复凝聚二次包覆，有效地保留了鳄鱼血生理活性、协同增效性、对外界环境的稳定性，产品的保质期延长，同时也掩盖了鳄鱼血腥味，这是现有技术无法实现的效果。将鳄鱼血制成微胶囊，不仅能最大限度保留鳄鱼血的生理活性，还能缓控释放、靶向营养，富集到目标器官，从而达到靶向营养、保健、食疗作用，应用效果更明显。
本发明制备方法工艺简单，易于工业化生产。本发明方法生产的鳄鱼血纳米微胶囊，不仅贮存时间(保质期)更长、运输更方便，还能广泛应用于食品饮料(酒饮料、水饮料)、口服制剂(含片、咀嚼片、吞服片)，美容化妆品等领域。
具体实施方式
为了更好地解释本发明，以下结合具体实施例对本发明作进一步的详细说明，但它们不对本发明构成限定。
实施例1
1)高压均质乳化：无菌条件下，在健康鳄鱼颈部抽取动脉血1.8kg，放至装有0.2kg的质量分数为4％柠檬酸钠溶液的采血袋中密闭；然后在摇床上摇45min后取下备用；再将经抗凝血剂处理的鳄鱼血物料经高压匀质机，在420MPa的高压作用下，鳄鱼血溶液以300m/s的线速度通过高压匀质机的均质腔，鳄鱼血会同时受到高速剪切、高频震荡、空穴现象和对流撞击等机械力作用和相应的热效应，最终获得鳄鱼血纳米均质化乳化液。电镜下测得鳄鱼血纳米均质化乳化液中90％微粒的粒径为80nm，且分布均匀。
2)初凝聚：将鳄鱼血纳米均质化乳化液加入到10立升玻璃三口瓶中，在80r/min定速搅拌下，首次加入2kg食用级无水乙醇作为初凝聚剂，搅拌20分钟，进行初步脱水凝聚固化，得到鳄鱼血纳米粒初凝聚体；
3)单凝聚：维持搅拌速度80r/min，在10分钟内，将0.1kg质量分数为8％的羧甲基茯苓多糖水溶液加入鳄鱼血纳米粒初凝聚体中，进行单凝聚，使羧甲基茯苓多糖通过静电引力均匀地吸附在鳄鱼血纳米粒初凝聚体表面，得到鳄鱼血纳米粒单凝聚体；
4)复凝聚：维持搅拌速度80r/min，在10分钟内，将含有4wt％柠檬酸的4wt％壳聚糖水溶液0.2kg加入到鳄鱼血纳米粒单凝聚体中进行复凝聚，使壳聚糖通过静电引力均匀地吸附在鳄鱼血纳米粒单凝聚体表面，得到鳄鱼血纳米粒复凝聚体；
5)喷雾冷冻干燥：复凝聚后，维持搅拌速度80r/min，第二次加入2kg食用级无水乙醇进行深度脱水处理，继续搅拌30分钟；然后移入不锈钢储罐中，连接并开启YC-3000喷雾冷冻干燥机，制得鳄鱼血纳米冷冻干燥产物，最后，过100目筛，包装，入库，得到鳄鱼血纳米微胶囊。
实施例2
1)高压均质乳化：无菌条件下，在健康鳄鱼颈部抽取动脉血1.8kg，放至装有0.2kg的质量分数为4％柠檬酸钠溶液的采血袋中密闭；然后在摇床上摇45min后取下备用；再将经抗凝血剂处理的鳄鱼血物料经高压匀质机，在400MPa的高压作用下，高压鳄鱼血溶液以200m/s的线速度通过高压匀质机的均质腔，鳄鱼血会同时受到高速剪切、高频震荡、空穴现象和对流撞击等机械力作用和相应的热效应，最终获得鳄鱼血纳米均质化乳化液。电镜下测得鳄鱼血纳米均质化乳化液中90％微粒的粒径为70nm，且分布均匀。
2)初凝聚：将鳄鱼血纳米均质化乳化液加入10立升玻璃三口瓶中，在100r/min定速搅拌下，首次加入4kg食用级无水乙醇作为初凝聚剂，搅拌20分钟，进行初步脱水凝聚固化，得到鳄鱼血纳米粒初凝聚体；
3)单凝聚：维持搅拌速度100r/min，在10分钟内，将0.1kg质量分数为8％的羧甲基茯苓多糖水溶液加入鳄鱼血纳米粒初凝聚体中进行单凝聚，使羧甲基茯苓多糖通过静电引力均匀地吸附在鳄鱼血纳米粒初凝聚体表面，得到鳄鱼血纳米粒单凝聚体；
4)复凝聚：维持搅拌速度100r/min，在10分钟内，将含有4wt％柠檬酸的4wt％壳聚糖水溶液0.2kg加入到鳄鱼血纳米粒单凝聚体中进行复凝聚，使壳聚糖通过静电引力均匀地吸附在鳄鱼血纳米粒单凝聚体表面，得到鳄鱼血纳米粒复凝聚体；
5)喷雾冷冻干燥：复凝聚后，维持搅拌速度100r/min，第二次加入2kg食用级无水乙醇进行深度脱水处理，继续搅拌30分钟；然后移入不锈钢储罐中，连接并开启YC-3000喷雾冷冻干燥机，制得鳄鱼血纳米冷冻干燥产物，最后，过100目筛，包装，入库，得到鳄鱼血纳米微胶囊。
实施例3
1)高压均质乳化：无菌条件下，在健康鳄鱼颈部抽取动脉血1.8kg，放至装有0.2kg的质量分数为4％柠檬酸钠溶液的采血袋中密闭；然后在摇床上摇45min后取下备用；再将经抗凝血剂处理的鳄鱼血物料经高压匀质机，在390MPa的高压作用下，高压鳄鱼血溶液以220m/s的线速度通过高压匀质机的均质腔，鳄鱼血会同时受到高速剪切、高频震荡、空穴现象和对流撞击等机械力作用和相应的热效应，最终获得鳄鱼血纳米均质化乳化液。电镜下测得其90％的粒径为60nm；且分布均匀。
2)初凝聚：将鳄鱼血纳米均质化乳化液加入10立升玻璃三口瓶中，在70r/min定速搅拌下，首次加入4kg食用级无水乙醇作为初凝聚剂，搅拌20分钟，进行初步脱水凝聚固化，得到鳄鱼血纳米粒初凝聚体；
3)喷雾单凝聚：维持搅拌速度70r/min，在10分钟内，将0.1kg质量分数为8％的羧甲基茯苓多糖水溶液加入鳄鱼血纳米粒初凝聚体中进行单凝聚，使羧甲基茯苓多糖通过静电引力均匀地吸附在鳄鱼血纳米粒初凝聚体表面，进行单凝聚，得到鳄鱼血纳米粒单凝聚体；
4)复凝聚：维持搅拌速度70r/min，在10分钟内，将含有4wt％柠檬酸的4wt％壳聚糖水溶液0.2kg加入到鳄鱼血纳米粒单凝聚体中进行复凝聚，使壳聚糖通过静电引力均匀地吸附在鳄鱼血纳米粒单凝聚体表面，得到鳄鱼血纳米粒复凝聚体；
5)喷雾冷冻干燥：复凝聚后，维持搅拌速度70r/min，第二次加入4kg食用级无水乙醇进行深度脱水处理，继续搅拌30分钟；然后移入不锈钢储罐中，连接并开启YC-3000喷雾冷冻干燥机，制得鳄鱼血纳米冷冻干燥产物，最后，过100目筛，包装，入库，得到鳄鱼血纳米微胶囊。
实施例4
1)高压均质乳化：无菌条件下，在健康鳄鱼颈部抽取动脉血1.9kg，放至装有0.1kg的质量分数为5％EDTA溶液的采血袋中密闭；然后在摇床上摇45min后取下备用；再将经抗凝血剂处理的鳄鱼血物料经高压匀质机，在450MPa的高压作用下，高压鳄鱼血溶液以280m/s的线速度通过高压匀质机的均质腔，鳄鱼血会同时受到高速剪切、高频震荡、空穴现象和对流撞击等机械力作用和相应的热效应，最终获得鳄鱼血纳米均质化乳化液。电镜下测得鳄鱼血纳米均质化乳化液中90％微粒的粒径为50nm，且分布均匀。
2)初凝聚：将鳄鱼血纳米均质化乳化液加入10立升玻璃三口瓶中，在90r/min定速搅拌下，加入4kg食用级无水乙醇作为初凝聚剂，搅拌20分钟，进行初步脱水凝聚固化，得到鳄鱼血纳米粒初凝聚体；
3)单凝聚：维持搅拌速度90r/min，在10分钟内，将0.1kg质量分数为8％的羧甲基茯苓多糖水溶液加入到鳄鱼血纳米粒初凝聚体中进行单凝聚，使羧甲基茯苓多糖通过静电引力均匀地吸附在鳄鱼血纳米粒初凝聚体表面，得到鳄鱼血纳米粒单凝聚体；
4)复凝聚：维持搅拌速度90r/min，在10分钟内，将含有4wt％柠檬酸的4wt％壳聚糖水溶液0.2kg加入到鳄鱼血纳米粒单凝聚体中进行复凝聚，使壳聚糖通过静电引力均匀地吸附在鳄鱼血纳米粒单凝聚体表面，得到鳄鱼血纳米粒复凝聚体；
5)喷雾冷冻干燥：复凝聚后，维持搅拌速度90r/min，第二次加入4kg食用级无水乙醇进行深度脱水处理，继续搅拌30分钟；然后移入不锈钢储罐中，连接并开启YC-3000喷雾冷冻干燥机，制得鳄鱼血纳米冷冻干燥产物，最后，过100目筛，包装，入库，得到鳄鱼血纳米微胶囊。
将实施例1所制备的鳄鱼血纳米微胶囊进行靶向控制释放实验。选用小杯法，介质选择200mL、0.10mol/L的盐酸，酶选择胃蛋白酶重2.0g，转速选择50～75rpm/min，温度选择(37±1)℃测试时间60分钟。测试的鳄鱼血纳米微胶囊，在1小时内全部崩解溶散，且其溶出量为标示量的75％以上，符合中国药典2010年版规定。
Claims (10)
1.一种鳄鱼血纳米微胶囊，其特征在于：所述微胶囊以鳄鱼鲜血为原料，通过下述方法制备得到：
1)高压均质乳化：将鳄鱼鲜血经抗凝血剂处理，再经过高压均质乳化，得到粒径为30～100nm的鳄鱼血纳米均质化乳化液；
2)初凝聚：在鳄鱼血纳米均质化乳化液中，搅拌下，首次加入乙醇进行初步脱水凝聚固化，得到鳄鱼血纳米粒初凝聚体；
3)单凝聚：在鳄鱼血纳米粒初凝聚体中，搅拌下，加入羧甲基茯苓多糖水溶液进行单凝聚，使羧甲基茯苓多糖通过静电引力均匀地均匀吸附在鳄鱼血纳米粒初凝聚体表面，得到鳄鱼血纳米粒单凝聚体；
4)复凝聚：在鳄鱼血纳米粒单凝聚体中，搅拌下，加入壳聚糖溶液进行复凝聚，使壳聚糖通过静电引力均匀地吸附在鳄鱼血纳米粒单凝聚体表面，得到鳄鱼血纳米粒复凝聚体；
5)喷雾冷冻干燥：复凝聚后，继续搅拌，第二次加入乙醇进行深度脱水处理；然后进行喷雾冷冻干燥处理，最后，过筛、包装，得到鳄鱼血纳米微胶囊。
2.根据权利要求1所述的鳄鱼血纳米微胶囊，其特征在于：步骤1)中，所述抗凝血剂为5～25IU/ml的肝素钠或质量分数为4％柠檬酸钠水溶液或质量分数为5％EDTA溶液；高压均质乳化的压力为350～450MPa，线速度为150～300m/s。
3.根据权利要求1所述的鳄鱼血纳米微胶囊，其特征在于：步骤2)、3)、4)、5)中，搅拌转速为60～100r/min，搅拌时间为10～40分钟。
4.根据权利要求1所述的鳄鱼血纳米微胶囊，其特征在于：步骤2)、5)中，所述乙醇的添加量均为鳄鱼血初始重量的1～2倍。
5.根据权利要求1所述的鳄鱼血纳米微胶囊，其特征在于：在步骤3)中，所述羧甲基茯苓多糖水溶液的质量分数为8％，所述羧甲基茯苓多糖水溶液的添加量为鳄鱼血初始重量的5～8％；在步骤4)中，所述壳聚糖溶液为含有4wt％柠檬酸的4wt％壳聚糖水溶液，所述壳聚糖溶液的添加量为鳄鱼血初始重量的10～15％。
6.一种鳄鱼血纳米微胶囊的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)高压均质乳化：将鳄鱼鲜血经抗凝血剂处理，再经过高压均质乳化，得到粒径为30～100nm的鳄鱼血纳米均质化乳化液；
2)初凝聚：在鳄鱼血纳米均质化乳化液中，搅拌下，首次加入乙醇进行初步脱水凝聚固化，得到鳄鱼血纳米粒初凝聚体；
3)单凝聚：在鳄鱼血纳米粒初凝聚体中，搅拌下，加入羧甲基茯苓多糖水溶液进行单凝聚，使羧甲基茯苓多糖通过静电引力均匀地均匀吸附在鳄鱼血纳米粒初凝聚体表面，得到鳄鱼血纳米粒单凝聚体；
4)复凝聚：在鳄鱼血纳米粒单凝聚体中，搅拌下，加入壳聚糖溶液进行复凝聚，使壳聚糖通过静电引力均匀地吸附在鳄鱼血纳米粒单凝聚体表面，得到鳄鱼血纳米粒复凝聚体；
5)喷雾冷冻干燥：复凝聚后，继续搅拌，第二次加入乙醇进行深度脱水处理；然后进行喷雾冷冻干燥处理，最后，过筛、包装，得到鳄鱼血纳米微胶囊。
7.根据权利要求2所述的鳄鱼血纳米微胶囊的制备方法，其特征在于：步骤1)中，所述抗凝血剂为5～25IU/ml的肝素钠或质量分数为4％柠檬酸钠水溶液或质量分数为5％EDTA溶液；高压均质乳化的压力为350～450MPa，线速度为150～300m/s。
8.根据权利要求2所述的鳄鱼血纳米微胶囊的制备方法，其特征在于：步骤2)、3)、4)、5)中，搅拌转速为60～100r/min，搅拌时间为10～40分钟。
9.根据权利要求2所述的鳄鱼血纳米微胶囊的制备方法，其特征在于：步骤2)、5)中，所述乙醇的添加量均为鳄鱼血初始重量的1～2倍。
10.根据权利要求2所述的鳄鱼血纳米微胶囊的制备方法，其特征在于：在步骤3)中，所述羧甲基茯苓多糖水溶液的质量分数为8％，所述羧甲基茯苓多糖水溶液的添加量为鳄鱼血初始重量的5～8％；在步骤4)中，所述壳聚糖溶液为含有4wt％柠檬酸的4wt％壳聚糖水溶液，所述壳聚糖溶液的添加量为鳄鱼血初始重量的10～15％。
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105147732A (zh) * | 2015-10-26 | 2015-12-16 | 北京百生康生物科技有限公司 | 鳄鱼血多糖在乳腺癌治疗中的应用 |
| CN105175567A (zh) * | 2015-10-26 | 2015-12-23 | 北京百生康生物科技有限公司 | 鳄鱼血多糖的提取方法及其在肺癌治疗中的应用 |
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| CN104490933B (zh) | 2020-04-03 |
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