CN104483415A - 一种肝素钠中多硫酸软骨素的检测方法 - Google Patents
一种肝素钠中多硫酸软骨素的检测方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104483415A CN104483415A CN201410837520.8A CN201410837520A CN104483415A CN 104483415 A CN104483415 A CN 104483415A CN 201410837520 A CN201410837520 A CN 201410837520A CN 104483415 A CN104483415 A CN 104483415A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- solution
- chondroitin sulfate
- detection method
- sodium
- mobile phase
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
本发明公开了一种肝素钠中多硫酸软骨素的检测方法，本发明使用高效液相色谱法，实现了对肝素钠中微量的多硫酸软骨素的检测，灵敏度达到0.05%，本发明准确性高，重现性好，能够实现对多硫酸软骨素的高灵敏度检测。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域，涉及肝素钠中多硫酸软骨素的检测方法。
背景技术
我国是肝素钠产量最大的国家，国际市场的肝素钠产品原料70％以上来自中国。随着需求的增加，肝素钠的价格一路攀升。2008年2约，美国因注射肝素钠出现4例死亡，多例不良反应的医疗事故，成为震惊世界的“肝素钠事件”。经有关专家分析，上述事故可能是因为与肝素钠中含有的多硫酸软骨素有关。商务部已通过中国医药保健品进出口商会和有关省、市商务主管部门向有关肝素钠出口企业发出紧急通知，要求在进料检验、生产管理和出厂检验环节严格把关，完善出口产品质量管理档案和售后质量跟踪体系，确保出口产品的质量安全。因此，对肝素钠中多硫酸软骨素进行检测成为肝素钠质量控制的重要一环。
发明内容
本发明提供了肝素钠中多硫酸软骨素的检测方法，对极低含量的多硫酸软骨素也能有效检测，灵敏度高达0.05％。本法准确度高，重现性好。
本发明采用如下技术方案予以实现：
一种肝素钠中多硫酸软骨素的检测方法，包括如下步骤：
1.称取多硫酸软骨素标准品适量加水溶解，制成OSCS标准溶液。
2.称取肝素钠标准品适量加水溶解，制成肝素钠标准溶液。
3.取OSCS标准溶液适量加入到肝素钠标准溶液中，制成系统适应性溶液。
4.称取肝素钠精品原料药适量加水溶解，制成待测样品溶液。
5.称取磷酸氢二钠，加适量水溶解，制成流动相A溶液，超声脱气备用。
6.称取高氯酸钠适量加水溶解，制成流动相B溶液，超声脱气备用。
7.使用安捷伦高效液相色谱色谱仪进行分析。
附图说明
图1为系统适应性溶液谱图，其中第一个峰为肝素峰，第二个峰为多硫酸软骨素峰。
图2为待测样品溶液谱图，图中只有一个肝素峰，未检出多硫酸软骨素峰，说明此肝素样品中无多硫酸软骨素。
具体实施方式
1.称取多硫酸软骨素标准品2.1mg，加水2.100mL溶解制成1mg/mL的OSCS标准溶液。
2.称取肝素钠标准品24.6mg，加水0.615mL溶解制成40mg/mL的肝素钠标准溶液。
3.取OSCS标准溶液12.3μL加入到肝素钠标准溶液中，制成多硫酸软骨素相对于肝素钠浓度为0.05％(w/w)的系统适应性溶液。
4.称取待测肝素钠样品95.6mg，加水2.390mL溶解制成40mg/mL的待测样品溶液。
5.称取1.0003g磷酸氢二钠，加水1000mL溶解,用20％磷酸溶液调节pH值为3.5，制成0.1％的流动相A，脱气备用。
6.称取280.0012g高氯酸钠，加水溶解，定容至1000mL,用20％磷酸溶液调节pH值为3.5，制成2mol/L的流动相B，脱气备用。
7.使用高效液相色谱仪按如下条件进行分析：
流速：0.3ml/min；
检测器：紫外检测器254nm；
进样体积：20μl；
色谱柱：2mmx250mm，IonPac AS11；
柱温箱温度：35℃；
流动相梯度：
| 时间 | 流动相A(％) | 流动相B(％) |
| 0.00 | 75 | 25 |
| 5.00 | 30 | 70 |
| 10.00 | 30 | 70 |
| 15.00 | 75 | 25 |
| 24.00 | 75 | 25 |
Claims (8)
1.一种肝素钠中多硫酸软骨素的检测方法，其特征在于包括如下步骤：
1)称取多硫酸软骨素标准品适量加水溶解，制成OSCS标准溶液；
2)称取肝素钠标准品适量加水溶解，制成肝素钠标准溶液；
3)取OSCS标准溶液适量加入到肝素钠标准溶液中，制成系统适应性溶液；
4)称取肝素钠精品原料药适量加水溶解，制成待测样品溶液；
5)称取磷酸氢二钠，加适量水溶解，制成流动相A溶液，超声脱气备用；
6)称取高氯酸钠适量加水溶解，制成流动相B溶液，超声脱气备用；
7)使用高效液相色谱仪进行分析。
2.根据权利要求1所述的一种肝素钠中多硫酸软骨素的检测方法，其特征在于：步骤1)所述的OSCS标准溶液的浓度为1mg/mL。
3.根据权利要求1所述的一种肝素钠中多硫酸软骨素的检测方法，其特征在于：所述的肝素钠标准溶液的浓度为40mg/mL。
4.根据权利要求1所述的一种肝素钠中多硫酸软骨素的检测方法，其特征在于：步骤3)所述的系统适应性溶液的配制要求：多硫酸软骨素相对于肝素钠浓度为0.05％(w/w)。
5.根据权利要求1所述的一种肝素钠中多硫酸软骨素的检测方法，其特征在于：步骤4)所述的待测样品溶液的浓度应为40mg/mL。
6.根据权利要求1所述的一种肝素钠中多硫酸软骨素的检测方法，其特征在于：步骤5)所述的流动相A溶液的浓度为0.1％，并且用20％的磷酸溶液调节pH值为3.5。
7.根据权利要求1所述的一种肝素钠中多硫酸软骨素的检测方法，其特征在于：步骤6)所述的流动相B溶液的浓度为2mol/L，并且用20％的磷酸溶液调节pH值为3.5。
8.根据权利要求1所述的一种肝素钠中多硫酸软骨素的检测方法，其特征在于：步骤7)所述的检测条件为：
流速：0.3ml/min；
检测器：紫外检测器254nm；
进样体积：20μl；
色谱柱：2mm x 250mm，IonPac AS11；
柱温箱温度：35℃；
流动相梯度：
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410837520.8A CN104483415A (zh) | 2014-12-29 | 2014-12-29 | 一种肝素钠中多硫酸软骨素的检测方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410837520.8A CN104483415A (zh) | 2014-12-29 | 2014-12-29 | 一种肝素钠中多硫酸软骨素的检测方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN104483415A true CN104483415A (zh) | 2015-04-01 |
Family
ID=52757983
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201410837520.8A Pending CN104483415A (zh) | 2014-12-29 | 2014-12-29 | 一种肝素钠中多硫酸软骨素的检测方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN104483415A (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109613132A (zh) * | 2018-12-06 | 2019-04-12 | 上海景峰制药有限公司 | 一种杂合硫酸软骨素的检测方法 |
| CN110470750A (zh) * | 2019-05-27 | 2019-11-19 | 南京健友生化制药股份有限公司 | 一种测定粗品肝素钠中多硫酸软骨素的方法 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20130177992A1 (en) * | 2008-09-03 | 2013-07-11 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Evaluating heparin preparations for pharmaceutical use |
-
2014
- 2014-12-29 CN CN201410837520.8A patent/CN104483415A/zh active Pending
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20130177992A1 (en) * | 2008-09-03 | 2013-07-11 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Evaluating heparin preparations for pharmaceutical use |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| G.KAVITHA ET AL.: "A pH-GRADIENT SAX-HPLC METHOD FOR DETERMINATION OF TRACE LEVELS OF OVER SULFATED CHONDROITIN SULFATE AND DERMATAN SULFATE IN HEPARIN SODIUM", 《INTERNATIONAL JOURNAL OF PHARMACEUTICAL SCIENCES AND RESEARCH》 * |
| GOVERTW.SOMSEN ET AL.: "Determination of oversulfated chondroitin sulfate and dermatan sulfate impurities in heparin by capillary electrophoresis", 《JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY A,》 * |
| MICHAEL L.TREHY ET AL.: "Analysis of heparin sodium by SAX/HPLC for contaminants and impurities", 《JOURNAL OF PHARMACEUTICAL AND BIOMEDICAL ANALYSIS》 * |
| 方井晋 等: "阴离子交换HPLC法精确测定肝素钠中的多硫酸软骨素和硫酸皮肤素", 《药物分析杂志》 * |
| 迟培升 等: "污染肝素钠中多硫酸化硫酸软骨素测定方法新进展", 《化学与生物工程》 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109613132A (zh) * | 2018-12-06 | 2019-04-12 | 上海景峰制药有限公司 | 一种杂合硫酸软骨素的检测方法 |
| CN110470750A (zh) * | 2019-05-27 | 2019-11-19 | 南京健友生化制药股份有限公司 | 一种测定粗品肝素钠中多硫酸软骨素的方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN104569271A (zh) | 葡萄酒中吡唑类杀菌剂的固相萃取-气相色谱-串联质谱检测方法 | |
| CN102072942A (zh) | 一种离子对色谱法测定吡咯并喹呤醌含量的分析方法 | |
| CN106950290B (zh) | 克林霉素磷酸酯凝胶中有关物质的检测方法 | |
| CN102323344A (zh) | 一种定量检测透明质酸片段结构变化的方法 | |
| CN103743844B (zh) | 甲醇中乙醇含量的测定方法 | |
| CN104483415A (zh) | 一种肝素钠中多硫酸软骨素的检测方法 | |
| Huang et al. | Simultaneous determination of eight biogenic amines in the traditional Chinese condiment Pixian Douban using UHPLC–MS/MS | |
| CN103197022A (zh) | 一种检测食醋中所含氨基酸的方法 | |
| CN101446574B (zh) | 一种人尿中三聚氰胺和三聚氰酸的定量检测法 | |
| CN101980012A (zh) | 水产品中氨苄青霉素和阿莫西林残留量的高效液相色谱荧光检测法 | |
| CN102565208B (zh) | 一种硫酸依替米星新的检测方法 | |
| CN104359993B (zh) | 一种安立生坦有关物质的检测方法 | |
| CN103235056A (zh) | 食物中鸟嘌呤和腺嘌呤检测方法 | |
| CN103424499B (zh) | 一种苦木中苦木碱含量的检测方法 | |
| CN103852542B (zh) | 一种基于柱后衍生的低分子量肝素完全降解产物检测方法 | |
| CN103323541B (zh) | 肝素钠封管注射液的质量检测方法 | |
| CN109738554A (zh) | 固相萃取-液相色谱联用测定水中微量苯乙酸的方法 | |
| CN103760267B (zh) | 磷酸肌酸二钠盐含量及杂质的高效液相色谱检测方法 | |
| CN109596728A (zh) | 一种阿卡波糖片溶出度的测定方法 | |
| CN110007034A (zh) | 一种基于液相色谱串联质谱测定医用食品中氨基酸的方法 | |
| CN105004803A (zh) | 一种分离测定托伐普坦中多个杂质的液相色谱方法 | |
| CN107782821A (zh) | 一种神经肌肉阻滞剂的分析方法 | |
| CN104535683B (zh) | 一种精氨洛芬中游离布洛芬的高效液相色谱测定方法 | |
| CN103267816A (zh) | 测定邻苯二甲酸酯类化合物的方法 | |
| CN102735780B (zh) | 一种监测3，2’，6’-三-N-乙酰基庆大霉素Cla含量的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20150401 |