CN104473938A

CN104473938A - 一种治疗慢性心衰药物及其制备方法

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Publication number: CN104473938A
Application number: CN201410839265.0A
Authority: CN
Inventors: 管文珍; 洪建波; 杨建平
Original assignee: Beijing Ruidu Pharmaceutical Co ltd
Current assignee: Beijing Xinlan Pharmaceutical Co ltd
Priority date: 2014-12-30
Filing date: 2014-12-30
Publication date: 2015-04-01
Anticipated expiration: 2034-12-30
Also published as: CN104473938B

Abstract

本发明涉及一种降血压和可治疗慢性心衰的药物。此外，本发明还涉及以该药物作为有效药物成分，优选一种或多种赋形剂或载体的药物混合物，用于治疗高血压、慢性心衰、高血压脑病等的药物组合物。此外，本发明还涉及该药物的制备方法。

Description

一种治疗慢性心衰药物及其制备方法

技术领域

本发明涉及治疗慢性心衰药物，特别是脑啡肽酶抑制剂Sacubitril和血管紧张素受体阻滞剂缬沙坦的衍生物，更特别为Sacubitril-人参二醇-缬沙坦的酯键衍生物，该衍生物及其盐可用作降压药物和心脑血管保护剂用于治疗高血压、慢性心衰等疾病；本发明还涉及该药物的制备方法。

背景技术

慢性心衰是由于慢性心脏病变和长期心室负荷过重，以致心肌收缩力减损，因心血液排出困难，静脉系统瘀血，而动脉系统搏出量减少，不能满足组织代谢需要的一种心脏疾病。本病临床又分左心衰，右心衰和合心衰三种。多数右心衰乃左心衰影响到右心所致。慢性心衰是大多数心血管疾病的最终归宿，也是最主要的死亡原因。

高血压脑病是指当血压突然升高超过脑血流自动调节的阈值（中心动脉压大于140mmHg）时，脑血流出现高灌注，毛细血管压力过高，渗透性增强，导致脑水肿和颅内压增高，甚至脑疝的形成，引起的一系列暂时性脑循环功能障碍的临床表现。高血压脑病为高血压病程中一种危及患者生命的严重情况，是内科常见的急症之一。起病急，进展快，及时治疗其症状可完全消失，若治疗不及时或治疗不当则可导致不可逆脑损害及其他严重并发症，甚至可导致死亡。

LCZ696（结构如下）为Sacubitril和缬沙坦以1:1摩尔比共结晶组成的复合物，溶解后即解离为单独的两种成分，从化学的角度来讲，它相当于血管紧张素受体阻滞剂（ARB）缬沙坦+脑啡肽酶抑制剂Sacubitril。LCZ696的临床研究表明，和传统的血管紧张素转化酶抑制剂（ACEI）类标准药物依那普利相比，使用LCZ696的慢性心衰患者因心衰而住院的次数减少了，其心血管死亡率也下降了。最终在接受新药LCZ696的受试者中，这2项终点指标的发生风险（无论是独立风险还是复合风险）均下降了约20%。而全因死亡率的下降为16%左右。

人参二醇（结构式如下）对人体神经系统、内分泌和循环系统起双向调节作用，可增加细胞的活力，并有促进陈新代谢和末梢血管流通的功效。此外，人参二醇具有抗休克作用，快速改善心肌缺血和缺氧，治疗和预防冠心病。

我们在对化合物进行结构改造过程中，意外地发现下述结构的化合物（以下简称代号Pana-002）对正常小鼠的血压几乎没有影响，对高血压小鼠具有明显的降血压作用，比改造前的LCZ696降压效果明显提高，且令人惊讶地发现，给予Pana-002的高血压模型小鼠停药后血压不反弹，在观察期内血压保持正常水平，这可能与人参二醇结构的双向调节作用有关。同时该药物可明显降低慢性心衰大鼠的血清脑啡肽水平，有望成为更佳的治疗药物。

发明内容

本发明的目的是提供一种治疗慢性心衰药物及其制备方法。

为了实现以上目的，本发明一种如下通式的化合物及其药学上可接受的盐：

。

其中，R为烷基、芳基、芳烷基、烷基羰基、芳基羰基、芳烷基羰基、烷氧基、萜类结构，R中的一个或多个氢可被氨基取代。

“烷基”指具有一个到指定数目碳原子的直连或支链饱和烃基。例如甲基、乙基、异丙基、正丙基、正丁基、正戊基、正庚基、十二烷基、十八烷基等。

“芳基”指从芳香烃去除一个或多个氢原子所衍生的有机基团。优选的芳基在芳烃中有6-12个碳原子作为环碳原子。

“芳烷基”指衍生自芳基烷的有机基团，其中烷基氢原子被上述定义的芳基取代。

“萜类”指的是具有(C₅H₈)_n通式以及其含氧和不同饱和程度的衍生物,可以看成是由异戊二烯或异戊烷以各种方式连结而成的一类化合物。

特别地，R为人参二醇结构，结构式如下：

。

本发明提供一种以上述化合物作为有效药物成分，优选一种或多种赋形剂或载体的混合物，用于治疗高血压、慢性心衰、高血压脑病等的药物组合物。

上述治疗慢性心衰药物（Pana-002）的制备方法是：

取1当量的Sacubitril和1当量的缬沙坦，加入10倍量DMF使溶解；取1当量人参二醇，1倍量的DCC和0.15倍量的DMAP，加入10倍量DMF，搅拌10分钟后，将上述Sacubitril和缬沙坦溶液加入至反应液中，室温搅拌24小时，HPLC监测反应，反应完成后，将反应液过滤，滤液加入5倍量硅胶炒干，置于预先填装的30倍量硅胶柱上，以二氯甲烷-甲醇（95:5）→二氯甲烷-甲醇（80:20）梯度洗脱，收集含有目标产物的流分（TLC监测），减压蒸干，用丙酮-乙酸乙酯混合物重结晶，即得。

经核磁共振波谱（1H-NMR、13C-NMR、HMBC和HMQC）以及质谱分析，确证合成出的产物为上述目标结构的化合物。

本发明的化合物（Pana-002），与LCZ696相比具有以下显著优势：

（1）本发明的化合物能够更显著降低血压，且持续时间更长，停药后不反弹，可能与人参二醇结构的双向调节作用有关；

（2）本发明的化合物不影响正常血压小鼠的血压，毒性更小，治疗窗更宽，在治疗剂量对于小鼠几乎未观察到任何不良反应，这有利于高血压、慢性心衰病人的长期服药治疗；

（3）对于慢性心衰大鼠模型，治疗效果比LCZ696更好；

（4）本发明的化合物为单一化合物，对于溶出、吸收、代谢等过程比复合物LCZ696具有更稳定的化学特性，这有可能更有利于在目标靶器官中的药物分布，并延长体内的半衰期。

附图说明

图1显示各化合物对正常血压小鼠血压的影响；

图2显示各化合物对高血压小鼠的急性降压作用；

图3显示各化合物对高血压小鼠的慢性降压作用；

图4显示各化合物对慢性心衰大鼠的血清脑啡肽水平的影响。

具体实施方式

以下通过具体实施方式对本发明一种治疗慢性心衰药物及其制备方法作进一步详细说明。

实施例1 Pana-002（人参二醇结构）

取41.15g（0.1mol）Sacubitril和43.55g（0.1mol）缬沙坦，加入400ml N,N-二甲基甲酰胺（DMF）使溶解；取46.07g（0.1mol）人参二醇，加入50.03g二环己基碳化二亚胺（DCC）和6.21g 4-二甲氨基吡啶（DMAP），加入500ml DMF，搅拌10分钟后，不停搅拌下将上述Sacubitril和缬沙坦溶液缓慢滴加至反应液中，滴加完毕后室温搅拌24小时，HPLC监测反应，反应完成后，将反应液过滤，滤液加入200.36g硅胶炒干，置于预先填装的1.20kg硅胶柱上，以二氯甲烷-甲醇（95:5）→二氯甲烷-甲醇（80:20）梯度洗脱，每1L为一份收集，收集含有目标产物的流分（TLC监测），减压蒸干，用丙酮-乙酸乙酯混合物重结晶，即得。高分辨质谱（+ESI，m/z）：1272.7048[M+H]⁺；¹H-NMR (DMSO-d₆,600 MHz): δ8.0 (brs, 1H), 7.54-7.12(m, 17H), 4.46-4.41 (m, 3H), 4.12-3.09 (m, 6H), 2.89-2.64 (m, 2H), 2.57-2.49 (m, 5H), 2.18-1.24 (m, 47H), 1.16 (s, 9H), 1.11 (s, 6H), 1.01 (s, 6H) , 0.96 (s, 3H)；¹³C-NMR (DMSO-d₆, 150 MHz): δ 173.1, 171.6, 171.4, 163.5, 137.6, 136.5, 135.4, 135.1, 134.8, 133.7, 129.3, 128.7, 128.5, 128.2, 128.0, 127.9, 127.7, 85.1, 74.7, 74.2, 73.0, 67.3, 61.6, 53.9, 48.8, 48.4, 47.9, 47.4, 47.3, 47.0, 43.2, 40.4, 39.9, 38.0, 37.7, 37.5, 35.8, 35.2, 35.0, 34.0, 33.9, 33.6, 31.7, 30.4, 28.6, 28.3, 28.0, 24.1, 23.9, 21.8, 21.6, 21.5, 19.8, 19.6, 18.8, 18.2, 17.8, 16.9, 16.6, 14.1, 13.4；经HMBC和HMQC确证了酯键的连接位置以及C-H耦合关系。

实施例2 Pana-003（辛二醇结构）

使用辛二醇与实施例1类似方法制备，得到目标化合物。高分辨质谱（+ESI，m/z）：958.2103[M+H]⁺。

实施例3 Pana-004（大豆苷元结构）

使用大豆苷元与实施例1类似方法制备，得到目标化合物。高分辨质谱（+ESI，m/z）：1066.2141[M+H]⁺。

实施例4 Pana-005（1,3-二氨基金刚烷结构）

使用1,3-二氨基金刚烷与实施例1类似方法制备，得到目标化合物。高分辨质谱（+ESI，m/z）：978.2402[M+H]⁺。

实施例5 Pana-006（对羟基苯基华法林结构）

使用对羟基苯基华法林与实施例1类似方法制备，得到目标化合物。高分辨质谱（+ESI，m/z）：1136.3097[M+H]⁺。

下面通过试验例对本发明提供的衍生物的有效性和安全性作进一步比较说明。

试验例1

对正常血压小鼠血压的影响

在正常昆明小鼠适应性喂养一周后，所有小鼠每天测血压训练1次，待动物适应环境、血压稳定后，随机分组，每组8只，分别给予双蒸水、10mg/kg的Pana系列化合物和10mg/kg的LCZ 696。各组均自由饮水和正常饲养。

使用智能无创血压计进行清醒状态下小鼠尾动脉简介测压，分别测定各组给药前和给药后30min、1h、2h、4h、8h和12h的收缩压，每个时间点连续测定三次计算平均值（单位：mmHg），结果见表1和图1。

表1 各化合物对正常血压小鼠血压的影响（X±SD）

结果表明，LCZ 696和Pana-006给药后血压均显著降低，但在12h内基本恢复到正常水平，Pana-003和Pana-004给药血压稍有降低，但很快（2h内）恢复到正常水平，而Pana-002基本保持血压不变，这很可能与人参二醇结构的双向调节作用有关。

试验例2

对高血压小鼠的急性降压作用

将高血压模型小鼠按体重随机分组，分别为模型对照组、阳性对照组、LCZ 696组和Pana系列化合物组，每组8只，其中模型对照组给予双蒸水，阳性对照组给予3mg/kg的卡托普利混悬液，lCZ 696组给予10mg/kg的LCZ 696，而Pana系列组分别给予10mg/kg的各Pana系列化合物。

使用智能无创血压计进行清醒状态下小鼠尾动脉简介测压，分别测定各组给药前和给药后30min、1h、2h、4h、8h和12h的收缩压，每个时间点连续测定三次计算平均值（单位：mmHg），结果见表2和图2。

表2 各化合物对高血压小鼠的急性降压作用（X±SD）

结果表明，阳性对照和各实验药物均能显著降低血压，LCZ 696给药30min血压下降至最低点，之后血压快速回升，给药60min后再次降低，给药12h后基本回到给药前血压水平，然而Pana-002和Pana-005给药30min后血压下降至最低点，随后血压有所回升，但在12h内血压仍保持在较低水平，说明Pana-002和Pana-005对高血压小鼠的疗效较持久，这可能与这两种药物具有较长的半衰期有关。

试验例3

对高血压小鼠的慢性降压作用

取实施例1的正常对照组动物作为正常对照，每日同一时间给予双蒸水；将实施例2的各实验动物每日同一时间继续分别给予双蒸水、卡托普利混悬液、LCZ 696和Pana系列，连续15天，随后停药，停药再继续观察15天。

在实验过程中同时观察小鼠的毛色、激惹度、饮水量等一般行为学情况，同时在实验室开始前、第3天、第9天、第15天、停药后第3天、第9天和第15天测量各组血压，每次同一时间连续三次测量，取平均值（单位：mmHg），结果见表3和图3。

整个实验期间，正常组小鼠毛色有光泽，双眼灵活，行动敏捷，对周围变化反应灵敏；而高血压小鼠毛发无光泽成簇，消瘦，口渴，饮水量多，提尾，握持颈部时抵抗剧烈、尖叫、暴跳以及同笼小鼠频繁打斗、咬人等攻击行为。LCZ 696给药组精神状态好转，打斗较少，毛发逐渐有光泽，Pana-002给药组在给药3天后精神状态明显好转，行动敏捷，对周围变化反应灵敏，而Pana-006组有1只小鼠在给药4天后死亡，身体有明显伤痕，推测为同笼小鼠撕咬致死。

表3 各化合物对高血压小鼠的慢性降压作用（X±SD）

结果表明，阳性对照组、LCZ 696组和Pana系列组在给药后血压均不同程度下降，并在给药期间保持在相对稳定的水平，但是停药后阳性对照和LCZ 696、Pana-003、Pana-004、Pana-006均出现反弹，血压上升，令人惊奇的是Pana-002组在停药后15天内血压仍保持在稳定的水平，并未出现反弹，这可能是该药较长的半衰期和人参二醇结构的协同作用所致。

试验例4

对慢性心衰大鼠的治疗效果

取雄性Wistar大鼠按1.5mg/kg体重腹腔注射阿霉素，每周2次，共7周，累积总量21mg/kg体重进行造模；正常组（n=6）则注射相同体积的生理盐水。

将造模后存活的大鼠随机分组，分别为模型对照组、阳性对照组、LCZ 696组和Pana系列化合物组，每组8只。正常组（n=6）维持不变（即为空白对照组）。阳性对照组给予13.5mg/kg的卡托普利，LCZ 696组给予20mg/kg的LCZ 696，Pana系列组给予20mg/kg的Pana系列化合物，连续给药4周，考察大鼠的死亡情况、心率、收缩压、大鼠血清脑啡肽水平，结果见表4和图4。

表4 各化合物对慢性心衰大鼠的治疗效果

结果表明，LCZ 696和Pana-002均显著降低慢性心衰大鼠的血清脑啡肽水平，均显著保护了动物避免死亡（死亡率动物数/总动物数分别为1/8和0/8），Pana-002给药后血清脑啡肽水平几乎降低为正常水平，种种迹象表明，Pana-002似乎比LCZ 696更有效，很有可能成为疗效更好的治疗慢性心衰药物。

本发明可制成各种制剂，如制剂例1～4：

制剂例1

硬胶囊剂

取10mg Pana-002、80mg乳糖、70mg微晶纤维素和1mg硬脂酸镁，混合，通过60目筛后，将这些粉末装入3号明胶胶囊制成胶囊剂。

制剂例2

片剂

取10mg Pana-002、75mg乳糖、24mg微晶纤维素和1mg硬脂酸镁，通过压片机压片，制成1片110mg的片剂。

根据需要可以对该片剂进行包衣。

制剂例3

溶液剂

取10mg Pana-002、蔗糖12mg、苯甲酸钠0.2mg，加入注射用水10ml，用0.1N盐酸调节pH至约6，经0.22μm滤膜过滤，装入玻璃瓶，121℃高压灭菌10min，即得。

制剂例4

注射液

取10mg Pana-002，加入生理盐水100ml，用0.1N盐酸调节pH至约6，经0.22μm滤膜过滤，装入玻璃瓶，121℃高压灭菌15min，即得。

Claims

1.一种治疗慢性心衰药物及其药学上可接受的盐，其化合物结构式为：

2.权利要求1所述的西格列汀衍生物，“烷基”指具有一个到指定数目碳原子的直连或支链饱和烃基，例如甲基、乙基、异丙基、正丙基、正丁基、正戊基、正庚基、十二烷基、十八烷基等；“芳基”指从芳香烃去除一个或多个氢原子所衍生的有机基团，优选的芳基在芳烃中有6-12个碳原子作为环碳原子；“芳烷基”指衍生自芳基烷的有机基团，其中烷基氢原子被上述定义的芳基取代；“萜类”指的是具有(C₅H₈)_n通式以及其含氧和不同饱和程度的衍生物,可以看成是由异戊二烯或异戊烷以各种方式连结而成的一类化合物。

3.一种治疗慢性心衰药物及其药学上可接受的盐，其化合物结构式为：

。

4.根据权利要求1所述化合物，其特征是：以权利要求1所述的化合物作为有效药物成分，优选一种或多种赋形剂或载体的混合物，用于治疗高血压、慢性心衰、高血压脑病等的药物组合物。

5.一种权利要求3所述化合物的制备方法，其特征是：取1当量的Sacubitril和1当量的缬沙坦，加入10倍量DMF使溶解；取1当量人参二醇，1倍量的DCC和0.15倍量的DMAP，加入10倍量DMF，搅拌10分钟后，将上述Sacubitril和缬沙坦溶液加入至反应液中，室温搅拌24小时，HPLC监测反应，反应完成后，将反应液过滤，滤液加入5倍量硅胶炒干，置于预先填装的30倍量硅胶柱上，以二氯甲烷-甲醇（95:5）→二氯甲烷-甲醇（80:20）梯度洗脱，收集含有目标产物的流分（TLC监测），减压蒸干，用丙酮-乙酸乙酯混合物重结晶，即得。