CN104388415A - 一种木瓜蛋白酶粗酶制剂及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属于生物技术领域，本发明公开的一种木瓜蛋白酶粗酶制剂及其制备方法，木瓜蛋白酶粗酶制剂是由按重量百分比的下列组分所组成：木瓜浆97～99.7％、醋酸锌0.1～1％、维生素C0.1～1％、亚硫酸钠0.1～1％。采用本发明的方法制备的木瓜蛋白酶粗酶制剂，酶活力稳定性高，酶活力回收率高达90％以上，另外，本发明的制备方法具有设备投入少、易于扩大产能的特点。

Description

一种木瓜蛋白酶粗酶制剂及其制备方法
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体涉及的是一种木瓜蛋白酶粗酶制剂及其制备方法。
背景技术
木瓜蛋白酶是存在于木瓜植株的果、茎、叶的蛋白酶(未成熟的木瓜中含量最高)，其活性中心含有巯基(－SH)，广泛用于医药、食品、化妆品、纺织、饲料、皮革等行业。由于性价比低,纯化的木瓜蛋白酶对绝大多数工业用途来说没有多大的意义，目前市售的木瓜蛋白酶主要有木瓜蛋白酶粗酶和木瓜蛋白酶精酶。
现有技术中有关木瓜蛋白酶粗酶的制备方法，通常是在木瓜浆中添加保护酶活力中心的巯基的保护剂亚硫酸钠或亚硫酸氢钠，搅拌均匀后，在55℃左右的温度下直接烘干，即得木瓜蛋白酶粗酶产品，此方法烘干过程中酶活力损失30％以上；而木瓜蛋白酶精酶则是将木瓜浆中的乳白色不溶物去除，然后再超滤浓缩，最后冷冻干燥所得的木瓜蛋白酶精酶产品，所得产品溶解性好。但是冷冻干燥需要冷冻干燥机，该设备价格高，且耗能、耗时，产能也不易提高，此外，此方法去除乳白色不溶物、超滤浓缩和冻干过程中酶活力的损失合计也达到30％以上。
发明内容
为了克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种木瓜蛋白酶粗酶制剂及其制备方法，其制备方法是通过加入能够高效保护木瓜蛋白酶活力的保护剂，提高酶的空间构象的稳定性,减少酶活力的损失，达到提高木瓜蛋白酶的比活力，提高产品质量的目的。
本发明的目的通过如下技术方案实现：
一种木瓜蛋白酶粗酶制剂，其特征在于，按重量百分比由下列组分所组成：
优选的是，所述木瓜浆为当天采集的新鲜木瓜浆。
优选的是，所述醋酸锌、维生素C、亚硫酸钠为食品级或药品级。
另外，本发明还提供了该木瓜蛋白酶粗酶制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)在新鲜木瓜浆中依次加入由醋酸锌、维生素C、亚硫酸钠组成的酶活力保护剂，搅拌均匀；
(2)加入弱酸调pH值为4～6，烘干，粉碎，即得到木瓜蛋白酶粗酶粉剂。
优选的是，所述烘干的温度为50～55℃。
进一步优选的是，所述烘干的温度为52℃。
优选的是，所述弱酸为柠檬酸。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
1、本发明的木瓜蛋白酶粗酶制剂酶活力稳定性高，酶活力回收率高达90％以上，产品质量好。
2、本发明的木瓜蛋白酶粗酶制剂的制备方法设备投入少、易于扩大产能。
具体实施方式
下面结合具体实施例，对本发明作进一步详细的阐述，但本发明的实施方式并不局限于实施例表示的范围。
实施例1：
在当天采集的993g新鲜木瓜浆中分别加入1g醋酸锌、5g维生素C、1g亚硫酸钠，于室温(26℃)下搅拌(100r/min)15分钟，待所加入的酶活力保护剂全部溶解，用柠檬酸溶液(2mol/L)调pH至5.5，于50℃条件下烘干，得到小颗粒的木瓜蛋白酶，粉碎后得到酶粉制剂，酶活力达102万单位/克。
对照实验：在当天采集的999g新鲜木瓜浆中加入1g亚硫酸钠，于室温(26℃)下搅拌(100r/min)15分钟，待所加入的亚硫酸钠全部溶解，用柠檬酸溶液(2mol/L)调pH至5.5，于50℃条件下烘干，得到小颗粒的木瓜蛋白酶，粉碎后得到酶粉制剂，酶活力为76万单位/克。
实施例2：
在当天采集的991.8g新鲜木瓜浆中分别加入1.2g醋酸锌、6g维生素C、1g亚硫酸钠，于室温(28℃)下搅拌(100r/min)20分钟，待所加入的酶活力保护剂全部溶解，用柠檬酸溶液(2mol/L)调pH至5.8，于55℃条件下烘干，得到小颗粒的木瓜蛋白酶，粉碎后得到酶粉制剂，酶活力达98万单位/克。
对照实验：在当天采集的999g新鲜木瓜浆中加入1g亚硫酸氢钠，于室温(28℃)下搅拌(100r/min)20分钟，待所加入的亚硫酸氢钠全部溶解，用柠檬酸溶液(2mol/L)调pH至5.8，于55℃条件下烘干，得到小颗粒的木瓜蛋白酶，粉碎后得到酶粉制剂，酶活力为70万单位/克。
实施例3：
在当天采集的998.2克新鲜木瓜浆中分别加入1.5g醋酸锌、6g维生素C、1g亚硫酸钠，于室温(26℃)下搅拌(100r/min)20分钟，待所加入的酶活力保护剂全部溶解，用柠檬酸溶液(2mol/L)调pH至6.0，于52℃条件下烘干，得到小颗粒的木瓜蛋白酶，粉碎后得到酶粉制剂，酶活力达99万单位/克。
对照实验：在当天采集的999g新鲜木瓜浆中加入1g亚硫酸钠，于室温(26℃)下搅拌(100r/min)20分钟，待所加入的亚硫酸钠全部溶解，用柠檬酸溶液(2mol/L)调pH至6.0，于52℃条件下烘干，得到小颗粒的木瓜蛋白酶，粉碎后得到酶粉制剂，酶活力为75万单位/克。
表1本方法制备木瓜蛋白酶制剂的酶活力
从表1可以看出，经本发明的方法制备出的木瓜蛋白酶粗酶制剂，酶活力回收率高，酶活力均比对照组高30％以上。
前述对本发明的具体示例性实施方案的描述是为了说明和例证的目的。这些描述并非想将本发明限定为所公开的精确形式，并且很显然，根据上述教导，可以进行很多改变和变化。对示例性实施例进行选择和描述的目的在于解释本发明的特定原理及其实际应用，从而使得本领域的技术人员能够实现并利用本发明的各种不同的示例性实施方案以及各种不同的选择和改变。本发明的范围意在由权利要求书及其等同形式所限定。

Claims (7)

1.一种木瓜蛋白酶粗酶制剂，其特征在于，按重量百分比由下列组分所组成：
2.根据权利要求1所述的木瓜蛋白酶粗酶制剂，其特征在于，所述木瓜浆为当天采集的新鲜木瓜浆。
3.根据权利要求1所述的木瓜蛋白酶粗酶制剂，其特征在于，所述醋酸锌、维生素C、亚硫酸钠为食品级或药品级。
4.一种如权利要求1～3任一所述木瓜蛋白酶粗酶制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)在新鲜木瓜浆中依次加入由醋酸锌、维生素C、亚硫酸钠组成的酶活力保护剂，搅拌均匀；
(2)加入弱酸调pH值为4～6，烘干，粉碎，即得到木瓜蛋白酶粗酶粉剂。
5.根据权利要求4所述的木瓜蛋白酶的生产方法，其特征在于，所述烘干的温度为50～55℃。
6.根据权利要求5所述的木瓜蛋白酶的生产方法，其特征在于，所述烘干的温度为52℃。
7.根据权利要求4所述的木瓜蛋白酶的生产方法，其特征在于，所述弱酸为柠檬酸。
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