CN104352538A - 银杏内酯组合物在制备预防/治疗青光眼药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了银杏内酯组合物在制备预防/治疗青光眼药物中的应用。本发明中的银杏内酯组合物由银杏总内酯作为活性成分与药用辅料组成。所述银杏总内酯主要包括银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C和白果内酯成分，经HPLC-ELSD检测，总内酯含量为80.0％～99.9％。本发明所述银杏内酯组合物经疗效和安全性检测，结果显示具有降低眼压，扩张血管、增加血流量、改善视神经供血等作用，可用于制备预防/治疗青光眼疾病的药物，为临床提供了新的治疗青光眼疾病的中药，有较大的临床应用价值，有较好的社会效益。

Description

银杏内酯组合物在制备预防/治疗青光眼药物中的应用

技术领域

本发明涉及药物组合物，具体涉及中药提取物组合物，尤其涉及一以银杏叶为原料，提取纯化精制而得到的银杏内酯组合物及其制备与应用。

背景技术

青光眼包括先天性青光眼、原发性青光眼、继发性青光眼和混合型青光眼。是眼科的一种常见病，对视力危害极大，也是最常见的致盲眼病之一，青光眼常见眼内压增高且伴有角膜周围充血，瞳孔散大、视力急剧减退、头痛、呕吐等症状。青光眼眼压超过眼球内组织，尤其是视网膜所能承受的限度时，则会带来眼睛功能性病变，给广大患者带来极大的痛苦。青光眼的临床表现较为隐蔽，进行缓慢，早期一般没什么症状，但一旦视神经发生萎缩，将不能恢复，即使以后治疗成功，也仅停留在保持现状的程度，很难恢复到原有水平。因此，青光眼属于临床上的一种疑难杂症。药物治疗效果不明显。中医药治疗青光眼主要以活血化瘀、益气、健脾、利水、祛风、滋补肝肾等诸法为主，与西药相比，有其独到之处，可以提高患者的视觉功能，提高视神经的兴奋性，使部分尚未造成不可逆损害的视神经恢复功能。现在还没有治疗青光眼特别有效的中药。银杏叶在中医界使用已经有几千年的历史了，其中所含的内酯成分，属于萜类化合物，是银杏叶中的主要活性成分，银杏内酯是血小板活化因子强有力的拮抗剂，具有抗血小板聚集、抗血栓、防治动脉粥样硬化、抗炎症和抗过敏等作用。银杏内酯的成分能明显扩张血管，有其扩张微循环，增加视网膜和脉络膜的血液供应，改善视功能。

发明内容

本发明的目的是提供研究银杏内酯组合物在制备预防/治疗青光眼药物中的应用。

本发明提供了一种银杏内酯组合物在制备预防/治疗青光眼药物中的应用。

本发明所述药物是由银杏总内酯作为活性成分与药用辅料按常规方法制成的药物组合物。可以制成片剂、胶囊剂等口服制剂，也可以制成针剂、冻干粉针剂等注射制剂，还可以制成贴剂等。

本发明所述的银杏总内酯中总内酯含量为80.0％～99.5％。

所述银杏总内酯包含银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C和白果内酯成分。

本发明所述的银杏总内酯从银杏叶中提取得到，将银杏叶经粉碎、醇提、大孔树脂过柱、浓缩、乙酸乙酯萃取、重结晶等步骤制得银杏内酯组合物，采用HPLC-ELSD检测，制备和检测方法均为中药常规方法(本发明实施例1和实施例2提供了制备和检测方法)。

本发明的另一目的是提供了所述银杏内酯组合物在制备预防/治疗青光眼疾病中的应用。

所述青光眼疾病包括先天性青光眼、原发性青光眼、继发性青光眼和混合型青光眼等。

为进一步考察本发明银杏内酯组合物的临床疗效和安全性，选择了90例青光眼患者对本发明药物治疗青光眼的疗效进行了临床观察。90例患者均为医院门诊患者，服药前眼压均在24mmHg以上，经诊断，其中包括各种先天性青光眼、原发性青光眼、继发性青光眼和混合型青光眼等。用本发明药物治疗这90例青光眼患者，结果显效86例，显效率为95.6％，好转2例，好转率为2.1％，无效1例，总有效率为97.7％。

治疗剂量，将银杏内酯组合物结晶研磨成粉末，填充在4#胶囊里，10mg/粒，建议成人服用剂量，每次1粒，每日2次，4周为一个疗程。

以上结果说明本发明的银杏内酯组合物，具有降低眼压，扩张血管、增加血流量、改善视神经供血等作用。因此，本发明银杏内酯组合物可用于制备预防/治疗青光眼疾病。

本发明提供的银杏内酯组合物，制备方法简便，宜于工业化生产。本发明所述银杏内酯组合物经疗效和安全性检测，结果显示具有降低眼压，扩张血管、增加血流量、改善视神经供血等作用，可用于预防/治疗青光眼疾病，为临床提供了新的治疗青光眼疾病的中药，有较大的临床应用价值，有较好的社会效益。

具体实施方式：

下面结合实施例对本发明作进一步的说明，下述该实施例仅用于说明本发明而对本发明没有限制。

实施例1银杏总内酯制备

将银杏叶(所用原料银杏叶通过市售得到)60℃干燥处理，至水分含量小于5％，粉碎机粉碎，取银杏叶粉末10kg，加入40L的80％乙醇，浸没叶子，加热至60℃回流提取4小时，收集提取液，再以70％乙醇补足提取液至40L，60℃回流提取4小时，收集提取液；2次提取液合并后静置24小时，弃沉渣，取上清经50℃减压浓缩，待提取液浓缩至5L时，过大孔树脂柱D101，首先用30％的乙醇溶液洗脱除杂，共洗脱3BV，洗脱速度1BV/h，再用60％乙醇以同样流速洗脱树脂，收集2BV至10BV的60％的洗脱液，洗脱液于45℃减压浓缩至无醇；浓缩液经乙酸乙酯萃取3次，乙酸乙酯使用量分别为1000ml，1000ml，800ml。合并萃取液，萃取液于45℃减压浓缩至约1g/ml的浸膏，加入500ml 80％乙醇，70℃加热至溶解，4℃冰箱静置24h析晶，析出晶体后，抽滤，得到银杏总内酯的粗品，将得到的银杏叶总内酯粗品用500ml的80％乙醇重结晶1次，温度4℃，静置时间24h。析出结晶，抽滤，母液合并，结晶于80℃烘干，最终得到银杏叶总内酯晶体。经HPLC-ELSD检测银杏总内酯中内酯含量达99.1％。

参考《中国药典2010年版》银杏叶提取物中内酯的检测方法，具体色谱条件为：

色谱柱：Hypersil ODS柱；

流动相：正丙醇-四氢呋喃-水(1：33：66)；

柱温：30℃；

流速：1.0ml/min；

计算方法：采用外标法，以银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C、白果内酯四个成分的含量之和作为总内酯含量。

服用方法：将银杏内酯组合物结晶研磨成粉末，填充在4#胶囊里，10mg/粒，建议成人服用剂量，每次10mg，每日2次，4周为一个疗程。

说明：1BV/h指流速，即1倍柱体积每小时。

实施例2银杏叶总内酯制备

将银杏叶(所用原料银杏叶通过市售得到)60℃干燥处理，至水分含量小于5％，粉碎机粉碎，取银杏叶粉末5kg，加入20L的80％乙醇，浸没叶子，加热至60℃回流提取4小时，收集提取液，再以70％乙醇补足提取液至40L，60℃回流提取4小时，收集提取液；2次提取液合并后静置24小时，弃沉渣，取上清经50℃减压浓缩，待提取液浓缩至5L时，过大孔树脂柱D101，首先用30％的乙醇溶液洗脱除杂，共洗脱3BV，洗脱速度1BV/h，再用60％乙醇以同样流速洗脱树脂，收集2BV至10BV的60％的洗脱液，洗脱液于45℃减压浓缩至无醇；浓缩液经乙酸乙酯萃取3次，乙酸乙酯使用量分别为500ml，500ml，300ml。合并萃取液，萃取液于45℃减压浓缩至约1g/ml的浸膏，加入300ml 80％乙醇，70℃加热至溶解，4℃冰箱静置24h析晶，析出晶体后，抽滤，得到银杏叶总内酯的粗品，将得到的银杏叶总内酯粗品用300ml的80％乙醇重结晶1次，温度4℃，静置时间24h。析出结晶，抽滤，母液合并，结晶于80℃烘干，最终得到银杏叶总内酯晶体。经HPLC-ELSD检测银杏叶总内酯中内酯含量达98.9％。

参考《中国药典2010年版》银杏叶提取物中内酯的检测方法，具体色谱条件为：

色谱柱：Hypersil ODS柱；

流动相：正丙醇-四氢呋喃-水(1：33：66)；

柱温：30℃；

流速：1.0ml/min；

计算方法：采用外标法，以银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C、白果内酯四个成分的含量之和作为总内酯含量。

服用方法：将银杏内酯组合物结晶研磨成粉末，填充在4#胶囊里，10mg/粒，建议成人服用剂量，每次10mg，每日2次，4周为一个疗程。

实施例3

实施例1制得银杏叶总内酯10g，粉碎成100目细粉，加入乳糖100g，混合均匀，沸腾制粒，颗粒中加入微粉硅胶3g，硬脂酸镁2g，混合均匀，装2#胶囊，制成1000粒，用于预防或治疗青光眼，使用方法：口服，每次一粒，每日2次。

实施例4

实施例1制得银杏叶总内酯20g，乳糖10g，全部粉碎成80目细粉，混合均匀，加入50％乙醇溶液搅拌制粒，颗粒干燥后，过100目筛网整粒，加入微粉硅胶0.5g，硬脂酸镁1g，混合均匀，压片既得，制成1000粒，用于预防或治疗青光眼，使用方法：口服，每次一片，每日1次。

实施例5

实施例1制得银杏叶总内酯20g，蔗糖11g，糊精9g，全部粉碎成80目细粉，首先将蔗糖和糊精充分混合，然后将银杏内酯组合物充分溶散在50％乙醇溶液中，加入蔗糖和糊精中搅拌制粒，制粒完成后于60℃干燥4小时，干燥后整粒，过20～40目筛，分装于铝箔袋中，每袋装0.04g，用于预防或治疗青光眼，使用方法：口服，每次1袋温水冲服，每日1次。

实施例6

实施例1制得银杏叶总内酯10g，吐温-8010g，苯甲酸钠10g，柠檬香精5g，纽甜1g，适量纯化水，搅拌使溶解，最后以纯化水定容至10L，过滤除菌，分装成10mL/瓶。用于预防或治疗青光眼，使用方法：口服，1-2支/天。

实施例7

实施例1制得银杏叶总内酯10g，聚乙二醇(6000)20g，在70℃油浴中搅拌熔融；再称取羧甲基淀粉钠5g，吐温-800.2g，叔丁基-4-羟基苯甲醚0.05g加入搅拌均匀，温度维持在70℃；调整滴头与冷却液放入距离，温度维持在65℃，调整二甲硅油冷却液上层温度45℃和下层温度1℃，料液滴入冷凝液中成丸，制成约1000丸，离心甩去二甲硅油，收集滴丸，即成品。用于预防或治疗青光眼，使用方法：口服，每次1丸，每天1-2次。

实施例8

实施例1制得银杏叶总内酯10g，加入注射用水800mL，吐温805g，搅拌使溶解，过滤除菌，加入注射用水200mL，分装成1mL/瓶。用于预防或治疗青光眼，使用方法：注射用生理盐水5mL肌注，1支/天。

实施例9

实施例1制得银杏叶总内酯5g，加入注射用水800mL，吐温805g，搅拌使溶解，边搅拌边加入乳糖100g，过滤除菌，加入注射用水200mL，分装成1mL/瓶，冷冻干燥。用于预防或治疗青光眼，使用方法：注射用生理盐水250mL稀释，静脉滴注，1-2支/天。

实施例10本发明中的银杏内酯组合物于2007年至2008年治疗90例青光眼患者，临床报告如下：

1、一般资料

90例患者，服药前眼压均在24mmHg以上。

2、诊断标准

青光眼：病理性眼压升高、眼压在24mmHg以上，视乳头凹陷、视神经萎缩、视野缺损、视力下降.眼局部混合性充血、角膜水肿、瞳孔呈椭圆形散大且带绿色外观。前房甚浅前房角闭塞，眼球坚硬如石。伴有头痛、眼痛、恶心呕吐。

3、治疗方法

服用本发明银杏内酯组合物(实施例1制备)，每次10mg，每日2次，4周为一个疗程。

4、疗效评定标准

显效：眼压控制在21mmHg以下，主症和伴随症都消失；

有效：眼压控制在21mmHg以下，主症消失，伴随症减轻；

无效：眼压无变化，伴随症状没有改变。

5、治疗结果

在上述的治疗中，用本发明银杏内酯组合物治疗各种青光眼患者90例青光眼患者，结果显效86例，显效率为95.6％，好转2例，好转率为2.1％，无效1例，总有效率为97.7％。

6、典型病例

6.1丁某某，女，60岁，患急性闭角型青光眼，手术治疗后，眼压仍偏高，眼疼痛不消失，服用了本发明治疗青光眼的银杏内酯组合物，三个疗程后，眼压正常，视力提高到0.8，继续服用三个疗程，诸症消失，视力提高到1.0，病获痊愈。

6.2李某某，男，52岁，患原发性开角型青光眼多年，眼压达25mmHg，眼球胀痛。服用了本发明治疗青光眼的银杏内酯组合物，三个疗程后，眼压降低，眼球胀痛消失，至今未复发。

6.3张某某，女，49岁，患闭角型青光眼3年。服用了本发明治疗青光眼的银杏内酯组合物，一个疗程后，诸症缓解，继续服用二个疗程，症状消失，眼压降低。

6.4姜某某，女，43岁，患原发性开角型青光眼多年，眼球憋胀疼痛，视物模糊。服用了本发明治疗青光眼的银杏内酯组合物，二个疗程后，眼球胀痛消失，视野和视力都有所改善。

6.5王某某，男，47岁，患原病理性眼压升高，头痛、心烦、失眠。服用了本发明治疗青光眼的银杏内酯组合物，二个疗程后，眼压降低，头痛、失眠等症状也得以缓解。

Claims (6)

1.银杏内酯组合物在制备预防/治疗青光眼药物中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用为在治疗先天性青光眼、原发性青光眼、继发性青光眼/混合型青光眼疾病的中的应用。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述银杏内酯组合物由银杏总内酯作为活性成分与药用辅料组成。

4.根据权利要求3所述的银杏内酯组合物，其特征在于，所述银杏总内酯包含银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C和白果内酯成分。

5.根据权利要求3所述的银杏内酯组合物，其特征在于，所述银杏总内酯中总内酯含量为80.0％～99.5％。

6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述银杏内酯组合物为片剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸剂、口服液或注射液。