CN104337965A - 用于药妆应用的源自油棕植物液的植物提取物 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种提取自棕榈油碾磨过程的植物液的植物提取物在用于改善皮肤健康状况的药妆混合物中的使用,其特征在于,所述药妆混合物制备成直接用于皮肤的形式或外用的皮肤病护理品及制剂,其中所述改善皮肤健康状况是由于弹性蛋白酶抑制、胶原蛋白酶抑制、抗氧活性、自由基清除、透明质酸酶抑制和消炎作用;所述酚类化合物的酪氨酸酶抑制活性提升皮肤美白。
Description
本申请是申请日为2008年4月14日、申请号为200880017954.6、发明创造名称为“用于药妆应用的源自油棕植物液的植物提取物”的中国发明申请的分案申请。
技术领域
本发明涉及具有抗氧性能的药妆混合物,并包括提取自植物材料的混合物。更具体地说,本发明涉及用于皮肤保健的提取自油棕植物液的含有酚类化合物、果酸和果糖的植物提取物。
背景技术
皮肤占据身体的最大表面区域,并充当内部器官的保护层。它是氧化应激的主要目标,并意图用作给予身体物理的和生化的保护,并具有大量的防御机制。皮肤结构相当复杂,包括数层,每一层都发挥特定的作用并执行不同的功能。
人们已经知道,缺乏适当的皮肤护理可导致各种皮肤问题,其中可能包括皮肤加速老化、皮肤不适和皮肤病。据有关研究报道,导致这些常见皮肤问题的一个主要罪魁是活性氧(reactive oxygen species)。相应地,常见的带电生物组分也可引起皮肤的氧化损伤,因为皮肤容易受此类反应影响。目前也发现,当胶原蛋白变硬并与相邻胶原纤维形成网状结构时,皮肤会发生老化,从而阻碍了胶原蛋白保持水分和膨胀,所以逐渐导致弹性减弱。这种情形也可能引起皮肤变得失水,从而使皮下脂肪垫在一段时间后消失。
除了以上所述,研究还显示,紫外辐射暴露除了引起皮肤胶原蛋白的降解 和结缔组织的改变外,还导致皮肤的一系列改变,包括起皱、皮肤松弛、色素不均、褐斑、皮革状表面。
随着来自下方脂肪垫和结缔组织给予的支撑的消失,皮肤开始松垂;它显得缺少弹性并出现皱纹。虽然皱纹、细纹和老年斑随着变老的自然原因形成,但是一种避免它们提前出现的方法就是避免阳光直晒。
另外,过多地暴露于阳光下也有助于自由基的产生。基本上,自由基是在细胞的各种代谢过程中自然产生的,并且只要在我们的体内有足够的用于处理体内产生的自由基的抗氧剂,该抗氧剂就可使得自由基在细胞中失活。然而,有时靠机体自身可能无法产生足够的抗氧剂来使全部产生的自由基失效,导致了细胞受损,进而皮肤老化。所以在这一点上,人工合成抗氧剂和/或天然抗氧剂作为日常营养补充物是至关重要的。抗氧剂可从我们的日常饮食中获得,另外常常还作为营养补充物进食。
现有防止皮肤老化的方法包括将营养添加剂、抗炎剂混合到化妆品中。US20040241254揭示了包含棕榈油并用于处理年龄相关的皮肤问题的化妆品配方。现已发现,许多富于抗氧剂的天然物质在防止皮肤老化中发挥了作用。而且具有抗氧性能的天然植物提取物代替合成抗氧剂的应用,目前发展地越来越快。
依据本发明,来源于油棕植物液的提取物具有促进皮肤健康和减缓皮肤老化的功能。
油棕植物液提取物中的主要组分是酚类、果酸、果糖和甘油。所述酚类化合物具有有助于最小化由代谢过程或环境暴露产生的体内自由基引起的破坏的抗氧性能。皮肤弹性由于弹性蛋白酶的活跃下降,弹性蛋白酶是一种分解弹性蛋白的酶。因此对弹性蛋白酶的抑制将延缓皮肤松垂。胶原蛋白和透明质酸也影响皮肤的弹性、保湿能力和柔软度。构成皮肤真皮大约90%的胶原蛋白遍布于真皮各处,从而给予皮肤适当的弹性和强度。透明质酸广泛分布于皮肤、韧带等,在皮肤细胞粘着、细胞保护、皮肤组织形成、组织保湿和柔软度保持方面均起到了一定作用。胶原蛋白和透明质酸在体内分别被胶原蛋白酶和透明质酸酶分解,导致水分损失、起皱和松垂。因此,对胶原蛋白酶和透明质酸酶 的抑制也可提升皮肤化学成分,延缓皮肤老化。
所述油棕植物液提取物中的酚类化合物显著地抑制了弹性蛋白酶的活性。所述植物液提取物也具有抑制胶原蛋白酶和透明质酸酶活性的功能。另外,所述提取物具有与皮肤美白有关的酪氨酸酶抑制活性。
因此,本发明的主要目的是提供一种基于从油棕植物液得到的酚类化合物的混合物,所述混合物在促进皮肤健康并减轻皮肤问题上作用显著。
发明内容
本发明涉及一种药妆混合物,包含提取自棕榈油碾磨过程的植物液的酚类化合物,所述混合物能改善皮肤健康状况。
本发明进一步涉及处理或减少皮肤皱纹和细纹的方法,包括将有效量的来自所述混合物的生物活性酚类及其它化合物应用到皮肤上。
本发明的详细说明
本发明的目的在于,提出从油棕碾磨过程获得的油棕植物液的植物提取物的药妆应用,其可用于提升皮肤健康状况和延缓皮肤老化。相应地,本发明还涉及从油棕榨油过程中提取油棕植物液的抗氧剂的提取方法。油棕的加工过程产生了大量的富含酚类化合物、果酸、果糖和甘油的植物液,所述的酚类化合物、果酸、果糖和甘油可以利用EP1398311中简要公开的膜过滤技术进一步地富集。
所述提取物含有酚类化合物、果酸、果糖和甘油,它们在抑制皮肤老化上具有很好的整体效应。所述酚类通过多种机制延缓皮肤衰老,包括但不限于弹性蛋白酶抑制、胶原蛋白酶抑制、抗氧活性、自由基清除、透明质酸酶抑制和消炎作用。所述酚类化合物的酪氨酸酶抑制活性提升皮肤美白。炎症过程生成可导致疤和皱纹的微小疤痕。油棕酚类化合物的消炎功能可以缓和、保护和复原肤色及皮肤完整性。油棕酚类化合物的抗菌性能在防止皮肤感染和提高药妆的稳定性进而增长保质期方面发挥了作用。局部使用的润肤品用于滋养和调和皮肤,油棕植物液提取物中的甘油和糖通过水合作用支撑皮肤结构。果酸用于 通过增强表皮剥落改善皮肤结构,并且在油棕植物液提取物中还有类似的酸存在。
附图说明
图1示出了油棕酚类的弹性蛋白酶抑制分析;
图2示出了油棕酚类提取物对氧化的有力抑制。
具体实施方式
结合实施例对依据本发明的药妆的制备进行了详细描述。但是,本发明不限于这些实施例。
在实施例中,发明人从来自棕榈油碾磨过程中的油棕植物液中离析出了包含酚类化合物、果酸、果糖和甘油的植物提取物,并且制备含有这些提取物的配方(操作实例)和不含有这些油棕酚类提取物的混合物(对照例)。
本发明着重研究包含酚类化合物的药妆混合物,所述的酚类化合物是强抗氧剂,且可防止皮肤老化。
本发明也对含有如增白和去皱化妆品成分的合成物质的药妆混合物进行了说明,其中的所述天然化合物与合成物质二者形成协同促进作用。
用于本发明的油棕植物液的生物活性提取物可通过任意能够从植物液中提取酚类化合物的方法制备,如利用标准提取工艺或在美国专利4,232,122、美国专利申请US2003031740和WO/2006/090953中公开的技术。这些提取方法包括但不限于使用乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯和丁醇。
除了提取物的直接利用外,利用油棕酚类化合物的不同组分也是可行的。组成提取物的有效量或有效部分依赖于提取物的纯度。例如,如果使用纯度大约为10%的含有酚类的粗提取物,提取物的使用通常在混合物重量大约0.01~20%的浓度范围内。纯度越高,达到相同的效果使用的百分比例越小。假设有大体上纯的酚类提取物,例如包含至少80%活性酚类的提取物,使用水平应在混合物重量的大约0.01~8%之间。
大体上酚类纯的提取物可以任何适于局部应用的形式生产。这些形式包括 溶液、胶体分散系、水包油或油包水悬浮液、乳霜、凝胶、搽剂、凝胶、粉末、泡沫、摩丝等,用于不同载体形式的药妆的方法是本领域公知的,可在任何标准化妆品文献中找到。
大体上纯的酚类提取物也可以任何适于口服的形式生产。这些形式包括液体和粉末。
化妆品的类型并不具体限定,可以是,例如,个人护理产品如护肤霜、搽剂、润肤水、面霜、清洁剂;化妆品如口红和粉底;或护发产品。所述化妆品可不受限制用于任何形式。用于外用的皮肤制剂可以是,例如,药膏或各种皮肤病制剂。
本发明的混合物可用于预防及处理皮肤中弹性蛋白酶的活性或弹性蛋白水平的减少导致的问题。例如,所述混合物具有改善老化皮肤硬度和弹性及减少细纹和皱纹的作用。所述混合物也可用于皮肤美白。而且,本发明的混合物具有一系列的治疗应用,如促进创伤愈合。所述混合物也可以用于改善皮肤状况,如硬皮病。
油棕中酚类化合物的含量
100μl的油棕提取物与0.2ml的福林-乔卡梯奥试剂(西格玛)、2ml的水和1ml的15%的Na2CO3混合,并在室温下温育2h后,在波长为765nm处测量其吸光度。标准曲线利用不同浓度的没食子酸(GAE)绘制,总的酚酸含量用没食子酸当量(GAE)表示。
下述非何限制性实施例对本发明的药妆及方法进行了说明。
实施例
除非特别指明,在以下实施例中,所述油棕酚类提取物是不含溶剂的粗提取物。
弹性蛋白酶抑制活性
弹性蛋白是皮肤结缔组织中的硬蛋白,皮肤弹性主要由其负责。在炎症和皮肤老化过程中,弹性蛋白分解为可溶性的多肽,真皮中弹性蛋白的量减少。弹性蛋白酶负责弹性蛋白的降解。因此,抑制弹性蛋白酶的活性可帮助维持皮 肤蛋白水平和弹性。故进行分析实验测定油棕酚类提取物对弹性蛋白酶的抑制。通过测量由胰弹性蛋白酶作用于底物N-琥珀酰-丙胺酸-丙胺酸-丙胺酸-p-硝基苯胺产生的4-硝基苯胺(4-nitoanilide)肽段的量,利用分光光度法评估弹性蛋白酶的活性。N-琥珀酰-丙胺酸-丙胺酸-丙胺酸-p-硝基苯胺西格玛)和其它用于测试的物质在37℃下预先温育,并通过酶(猪胰弹性蛋白酶,罗氏)的加入启始反应。被释放的游离4-硝基苯胺的量在30分钟后通过测定波长为410nm处的吸光度来测量。0.2M的pH为8.0的Tris-HCl缓冲液用作阴性对照。分析基质中最终浓度为20ng/ml的弹性蛋白酶抑制剂作为阳性对照。油棕提取物在分析基质中的最终浓度为4~20%,相当于60~300ppm的没食子酸当量(GAE)。下图显示了得到的结果。阴性对照的吸光度最大。对弹性蛋白酶活性的抑制产生较少的4-硝基苯胺和相应地较小的吸光度。油棕酚类显示出对弹性蛋白酶活性显著的剂量依赖式的抑制功能。所述油棕酚类提取物表现出大约13%的抑制效应,而代表快速色谱纯化后的纯化滤液3和纯化滤液4分别表现出了大约92%和98%的抑制效应。可以看出,油棕酚类抑制了弹性蛋白的降解,并转化为对皮肤的有益效果,如弹性的维持和随之而来的抗老化效应。
胶原蛋白酶抑制分析
胶原蛋白酶(酶EC 3.4.24.3,5μg)单独或与提取物一起加入到含有PZ肽(0.5mg)的0.1M的Tris缓冲液(pH7.4)中,使总体积为1.7ml,PZ肽是胶原蛋白酶的底物。混合物在37℃水浴中温育30min,然后加入1ml的25mM的柠檬酸溶液终止酶反应。加入5ml的乙酸乙酯混合后,利用紫外分光光度计在波长为320nm处测量有机层的吸光度。胶原蛋白酶抑制由以下公式计算:
胶原蛋白酶抑制百分比=[(Ac-As)/Ac]×100,其中,Ac表示(含有胶原蛋白酶的对照的吸光度-不含胶原蛋白酶的对照的吸光度),as表示(含有胶原蛋白酶的样品的吸光度-不含胶原蛋白酶的样品的吸光度)。
与对照相比,油棕提取物表现出显著的胶原蛋白酶抑制活性。
透明质酸(HAase)抑制分析
HAase溶液(7900单位/ml的0.1M的醋酸缓冲液,pH 3.5)与100μl的样品混合后,在37℃的水浴温育器中温育20min。加入HAase催化剂(0.1ml的12.5mM的CaCl2)后再温育20min。为启始HAase反应,加入250μl含透明质酸底物(1.2mg/ml)的0.1M醋酸缓冲液(pH 3.5)后,在37℃的水浴温育器中温育40min。为终止HAase反应,加入0.1ml的0.4N的NaOH溶液和0.1ml的0.4M的四硼酸钾溶液,然后在沸水中加热3min。待完全冷却后,加入3ml的DMAB试剂(4g r-二甲基氨基苯甲醛(demethylaminobenaldehyde)、350ml冰醋酸和50ml的10M HCl)到反应物中,并在37℃水浴器中温育20min。利用紫外分光光度计在波长为585nm处进测量HAase反应产物4-乙酰氨基葡萄糖(4-acetylglucosamine)。HAase抑制活性用相比对照的减少表示;
透明质酸酶抑制百分比=[(Ac-As)/Ac]×100,其中,Ac和As分别是对照和样品的吸光度。对照用1%的DMSO溶液代替提取物。
油棕提取物具有显著的HAase抑制活性。
消炎活性
消炎活性采用凯曼环氧化酶(COX)抑制剂检测分析试剂盒(目录No.560101))按照制造商的说明书进行测量。采用此试剂盒,观察到了弱的COX活性。
抗氧活性分析
采用了多种方法确定抗氧活性,其中两种如下所述:
自由基清除活性分析
分析原理
DPPH·的自由基形式呈现出紫色,在波长为515nm处有最大吸收。抗氧剂如某些酚类化合物,能够清除DPPH·自由基,从而使紫色的色饱和度降低,这可以通过分光光度法测量。
自由基清除分析
将DPPH·的储备液用水稀释到0.025mg/ml,并使最终溶液中含有50%的甲醇。制备浓度为300ppm(300μg/ml)的没食子酸,用于测试的物质制备成浓度为300ppm GAE的水溶液。
在盛有975μl的DPPH·溶液的试管中加入25μl样品。使用分光光度法每隔0.1min测定在波长为515nm处的吸光度,连续监测2min。对照用水代替样品,并采用相同的处理方式。空白含有50%的甲醇代替DPPH·,并用水代替样品。测试值要减掉空白值。
DPPH·在任意特定吸光度处的浓度均可利用下面的公式从DPPH·标准曲线中计算得到:
Y=aX+b
其中,Y=吸光度(波长为515nm处)
X=DPPH·的浓度(Dg/ml)
a=线性回归系数
b=y-截距
因为标准曲线经过原点,所以b=0。整理公式:
残留DPPH·的百分比(%DPPH· rem)采用下面的公式计算:
其中,[DPPH·]t=DPPH·在时间为t时的浓度(μg/ml)
[DPPH·]0=DPPH·的初始浓度(μg/ml)
绘制残留的DPPH·百分比随时间变化的图,并依此推算半衰期(t1/2),半衰期是指DPPH·的浓度减少到初始浓度的50%时所需要的时间。
与对照相比,油棕提取物表现出了显著的清除功能(方差分析,F=74.314,p<0.001)。油棕提取物的半衰期为:0.64min或更少。在酚类的此浓度下少于0.7min的半衰期(如t1/2定义所示,要清除50%的初始DPPH·自由基)表明,酚类化合物因其清除自由基的高效快速,可以对机体和皮肤施加有益的效果。
采用β-胡萝卜素-亚油酸的分析
分析原理
亚油酸(多不饱和脂肪酸)和β-胡萝卜素对热、光和空气敏感。当双键全部被氧化时,β-胡萝卜素(黄色)变为无色。氧化程度可通过黄色的色饱和度的下降反映出来,这可通过分光光度法监测。β-胡萝卜素自发氧化,但是速度非常慢。亚油酸在热、空气和光存在的条件下很容易氧化为过氧化物形式,在过氧化物形成的过程中产生自由基(过氧自由基、烷氧基自由基、氢氧自由基),当自由基存在时,加速了β-胡萝卜素的氧化。在抗氧剂存在时,如某些酚类化合物,自由基的形成受阻,因此减慢了β-胡萝卜素的脱色过程。
分析过程
油棕酚类提取物在睡制备成浓度为5,000pm GAE的溶液。没食子酸制备成浓度为5,000ppm的水溶液。
给2瓶100ml水中充入压缩空气(购自Malaysian Oxygen Berhad,马来西亚)5min作氧处理。
将2.0mg的β-胡萝卜素溶于10ml氯仿中制备β-胡萝卜素溶液,用吸液枪吸取2ml上述溶液加入到250ml的圆底烧瓶中。在40℃的真空中利用旋转蒸发仪(型号461,购自Buchi Laboratorium-Technik AG Postfach,瑞士)和抽吸泵(型号SUQ3,购自Heto Lab Equipment A/S,丹麦)去除氯仿。向圆底烧瓶中加入40mg亚油酸、400mg吐温40和100ml经氧处理的水。同时制备不含β-胡萝卜素的相似的乳液。烧瓶剧烈振荡5min。
用吸液枪吸取100μl和200μl样品分别加入不同的试管,用甲醇调节至最终体积为200μl。对照用水代替样品,并作相同处理。空白中含有样品和乳液,但不含有β-胡萝卜素。测试值要减去空白值。
用分光光度法测量含有β-胡萝卜素的乳液在波长为470nm处的吸光度。这个吸光度作为零时吸光度。测试后马上加入4.8ml的乳液到含有样品的试管中。分析基质中酚类化合物的最终浓度为100和200ppm GAE。随后将样品置于50℃的水浴中2h,并每隔30min测量一次吸光度。
残留β-胡萝卜素的百分比按如下计算:
残留百分比:
其中,ODt=时间为t的吸光度;
OD0=初始吸光度。
如图2所示,油棕酚类提取物表现出对氧化的有力抑制。
不同样品对β-胡萝卜素氧化的抑制
线条显示残留□-胡萝卜素随时间变化的百分比:对照(×___×),100ppm的没食子酸(□___□)、200ppm的没食子酸(■ ■);及油棕提取物为100ppmGAE(△___△)和200ppm GAE
当然,本发明的混合物可制备成化妆保养品或皮肤病护理品的形式,例如,包括但不限于凝胶、汤剂、乳霜或粉末;个人护理产品,如护肤霜、搽剂、润肤水、面霜、和清洁剂;化妆品,如口红和粉底;或护发产品。化妆品不受限制用于任何形式。用于外用的皮肤制剂可以是,例如,药膏或各种皮肤病制剂。
应当理解,如在此公开和描述的那样,本发明不仅可以以各自组合的方式应用,也可以在不偏离本发明意图的范围内以单一形式应用。
Claims (10)
1.提取自棕榈油碾磨过程的植物液的植物提取物在用于改善皮肤健康状况的药妆混合物中的使用,其特征在于,所述药妆混合物制备成直接用于皮肤的形式或外用的皮肤病护理品及制剂,其中所述改善皮肤健康状况是由于弹性蛋白酶抑制、胶原蛋白酶抑制、抗氧活性、自由基清除、透明质酸酶抑制和消炎作用。
2.根据权利要求1所述的使用,其特征在于,所述植物提取物富含酚类化合物、果酸、果糖和甘油。
3.根据权利要求2所述的使用,其特征在于,所述酚类化合物通过弹性蛋白酶抑制、胶原蛋白酶抑制、抗氧活性、自由基清除、透明质酸酶抑制和消炎作用延缓皮肤衰老;所述酚类化合物的酪氨酸酶抑制活性提升皮肤美白;所述酚类化合物的消炎功能缓和、保护和复原肤色及皮肤完整性;所述酚类化合物的抗菌性防止皮肤感染和提高药妆混合物的稳定性。
4.根据权利要求2所述的使用,其特征在于,所述甘油和果糖通过水合作用支撑皮肤结构。
5.根据权利要求2所述的使用,其特征在于,所述果酸用于通过增强表皮剥落改善皮肤结构。
6.根据权利要求1-5中任意一项权利要求所述的使用,所述药妆混合物富含抗氧剂。
7.根据权利要求6所述的使用,其特征在于,所述药妆混合物制备成药浴品、凝胶、粉末、汤剂和药膏的形式。
8.提取自棕榈油碾磨过程的植物液的酚类化合物在用于改善皮肤健康状况的药妆混合物中的使用,其特征在于,所述药妆混合物制备成直接用于皮肤的形式或外用的皮肤病护理品及制剂;所述改善皮肤健康状况是由于弹性蛋白酶抑制、胶原蛋白酶抑制、抗氧活性、自由基清除、透明质酸酶抑制和消炎作用;所述酚类化合物的酪氨酸酶抑制活性提升皮肤美白。
9.根据权利要求8所述的使用,其特征在于,所述酚类化合物通过弹性蛋白酶抑制、胶原蛋白酶抑制、抗氧活性、自由基清除、透明质酸酶抑制和消炎作用延缓皮肤衰老;所述酚类化合物的酪氨酸酶抑制活性提升皮肤美白;所述酚类化合物的消炎功能可以缓和、保护和复原肤色及皮肤完整性;所述酚类化合物的抗菌性能防止皮肤感染和提高药妆混合物的稳定性。
10.根据权利要求9所述的使用,其特征在于,所述药妆混合物制备成药浴品、凝胶、粉末、汤剂和药膏的形式。
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