CN104307052A - 医用可注射防粘连凝胶及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种医用可注射防粘连凝胶及其制备方法。以天然高分子或合成高分子与交联剂为原料，按照交联剂与大分子聚合物的质量比为0.01~1:1。分别配制大分子聚合物和交联剂的磷酸盐缓冲液，并装入双联注射装置的两支注射针管中，推挤双联注射装置将两溶液在注射针头中混合，并成凝胶。将具有防粘连功效的天然或合成高分子溶液与交联剂经双联注射装置推注至创面部位，迅速填满神经或肌腱等组织周围的缝隙，并在较短时间内原位形成性状柔软的凝胶。该凝胶不受体位影响，可承受周围组织的压力且自身无压迫作用。由于凝胶被交联剂交联，其降解时间较长，可以完全阻止手术创面在慢性炎症期产生的粘连，并最终在体内被降解或吸收。本发明具有广泛应用。

Description

医用可注射防粘连凝胶及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种医用可注射防粘连凝胶及其制备方法。该医用可注射防粘连凝胶结合了防粘连膜与防粘连液的优点，将具有防粘连功效的天然或合成高分子溶液与化学交联剂经双联注射装置推注至创面部位，最初状态可流动的液体，迅速填满神经或肌腱等组织周围的缝隙，并在较短时间内原位形成性状柔软的凝胶。该凝胶不受体位影响，可承受周围组织的压力且自身无压迫作用。此外，由于凝胶被交联剂交联，其降解时间较长，可以完全阻止手术创面在慢性炎症期产生的粘连，并最终在体内被降解或吸收。本发明中的防粘连凝胶可广泛应用于神经外科，普外科，骨科，胸心外科，泌尿外科，妇产科等科室的手术后，人体神经，肌腱，关节，内脏器官等与周围组织间粘连的防治。本发明具有操作简单，成胶时间短，凝胶的热稳定性较好且机械强度较高，生物相容性好等优点。

背景技术

粘连是结缔组织的纤维带与相邻组织或器官发生了联结而形成的异常结构。一般情况下，在外科手术之后容易发生组织粘连，该过程既是外科领域常见的临床现象，也是患者在愈合的过程中的必经过程。粘连的发生主要具有以下原因：（1）由于局部缺血而引起的炎症；（2）手术中所引起的创伤；（3）身体中存在异物；（4）出血处和伤口暴露处的细菌感染。目前，国外有两种途径可用于防止术后的组织粘连，其一为依据生理或者药理机制的质量方法，通过药物减轻炎症反应与溶解纤维蛋白；其二为通过医疗器械的物理阻隔作用防止粘连的形成。其中，通过医疗器械的方法物理阻隔以防止粘连形成为本发明的主要内容所涉及的领域。

在医疗器械防粘连领域，目前主要有两种产品：一种为防粘连膜，另一种为防粘连液。其中，防粘连膜为一种具有适度柔韧性，可以将患处与周围组织物理性隔离的膜材料，其在组织的愈合过程中可以起到防止粘连形成的作用，并且在术后一段时间内可在体内自行降解或被吸收，具有良好的组织相容性。这类防粘连膜主要由天然或合成的高分子材料制备而成，其主要产品有：透明质酸与纤维素及其衍生物，代表产品：Intergel^®，INTERCEED^® 等；壳聚糖及其衍生物，代表产品：百菲米^®；聚乳酸类膜材料，包括聚乳酸（PLA）与乳酸-乙醇酸共聚物（PLGA），代表产品：DKFILM^®，诺奇^®；聚乙二醇与聚酯（PBT）共聚物，代表产品：Polyactive^®；以及一些共聚物膜材料等。这些膜材料的优点在于具有一定的机械强度与抗张强度，植入后可在创面部位有效的抑制粘连的形成，并且可以根据创面部位的愈合时间选择体内降解时间与其相适应的膜材料，但其缺点在于由于膜材料已预先制成，厚度不可改变，在某些复杂的创面部位与组织的契合度较低，而导致防粘连的效果有所下降，并且某些部位需要缝合固定防粘连膜，增加二次粘合的风险（刘曦，岳卫华等，医用可吸收防粘连膜产品的研究进展及基本要求，医疗装备，2014，第四期）。

另一种防粘连产品为防粘连液，其代表产品为手术防粘连液（赛必妥^®），其主要成分为医用几丁糖（即壳聚糖），主要原理为通过几丁糖的大分子聚合物链的强制阻隔作用而达到防止粘连形成的目的。该产品的优点在于其为液体，推注后可迅速填满创面部位，具有良好的阻隔效果；但其缺点在于几丁糖的降解时间较短，正常情况下一周之内即可被人体吸收，因此其在一些愈合时间较短的部位具有良好的效果，但在某些愈合时间较长，尤其是有较长慢性炎症存在的创面部位，其防粘连的效果不理想；并且几丁糖溶液的抗压能力差，受体位影响较大，不适用于神经及其周围组织，肌腱等部位的粘连防治。

以神经外科领域为例，椎板切除术和周围神经损伤修复术都是针对周围神经病变时的常见术式。椎板切除术后在椎板缺损处可形成瘢痕组织，其可与硬膜及神经根周围粘连，最终压迫、牵拉神经根而引起腰腿疼痛。周围神经损伤修复术后损伤神经由于修复机制启动后也极易产生与周围肌肉和组织的粘连，影响术后神经所支配肢体的功能恢复，最终产生功能障碍和局部疼痛。术后神经周围粘连的产生不仅影响了手术的预期效果，也为再次手术增加了风险和困难。为了预防术后神经周围瘢痕粘连的产生，从其发生机制出发，考虑机体对创伤的修复大致分为急性炎症期和慢性炎症期两个阶段，急性炎症多发生在受创后一周到二周之间，慢性炎症期从二周开始一直持续到两个月或以上。同样的，在肌腱手术，腹（盆）腔手术等普外科，骨科，胸心外科，泌尿外科，妇产科等手术之后也会发生类似的情况。这样就需要一种具有良好组织相容性、可将患处与其周边组织物理隔离、具有适度柔软性、有抗炎止血效果、并于术后可在生物体内降解的防粘连材料。目前的防粘连膜材料虽然具有较长降解时间，但其自动粘附力差，无法全方位和创面贴合，需通过缝合固定保证其使用效果，无法达到预期的防粘连效果；而防粘连液的降解时间较短，通常情况下在创伤的急性炎症期过后材料就完全被体内吸收，无法阻止创面在慢性炎症期内发生的粘连，因此也达不到预期的防粘连效果。

综上所述，防粘连膜与防粘连液在神经及其周围组织，肌腱等部位的防粘连效果较差。因此，本发明中的医用可注射防粘连凝胶结合了防粘连膜与防粘连液的优点，经双联注射装置推注至创面部位时为可流动的液体，迅速填满神经或肌腱等组织周围的缝隙，并在较短时间内原位形成性状柔软的凝胶。该凝胶不受体位影响，可承受周围组织的压力且自身无压迫作用。此外，由于凝胶被交联剂交联，其降解时间较长，可以完全阻止手术创面在慢性炎症期产生的粘连，并最终在体内被降解或吸收。本发明中的防粘连凝胶可广泛应用于神经外科，普外科，骨科，胸心外科，泌尿外科，妇产科等科室的手术后，人体神经，肌腱，关节，内脏器官等与周围组织间粘连的防治。

发明内容

本发明的目的在于提供一种医用可注射防粘连凝胶（以下简称凝胶）及其制备方法。将具有防粘连功效的天然或合成高分子溶液与化学交联剂通过双联注射装置混合后推注至创面部位，可原位形成医用可注射防粘连凝胶。该方法使用双联注射装置为成胶设备，包含两支装有不同溶液的注射器，两支注射器的其中一支为具有防粘连功效的大分子聚合物水溶液，另一支为可与该大分子聚合物发生化学交联反应的小分子或大分子交联剂。通过双联注射装置将大分子聚合物溶液与交联剂混合后，混合液初期为液体状态，迅速填满创面中的缝隙，随着化学交联反应的进行，混合溶液发生凝胶化，最终形成不可流动且具有一定机械强度的凝胶。该医用可注射防粘连凝胶不会对神经造成压迫，不受体位影响且可承受组织间的压迫，其降解时间较长，完全可以阻止创面在慢性炎症期所引起的粘连，且最终在体内被降解或吸收。

本发明中提供的医用可注射防粘连凝胶是以天然高分子或合成高分子与交联剂为原料按照交联剂与天然高分子或合成高分子（大分子聚合物）质量比为0.01~1:1，使用双联混合组件制备，具体工艺：分别配制大分子聚合物和交联剂的磷酸盐缓冲液（PBS），并装入由双联混合组件构成的双联注射装置的两支注射针管中，推挤双联注射装置将两溶液在注射针头中混合并成凝胶，推挤时间5-90秒。

天然高分子包括：壳聚糖及其水溶性衍生物、透明质酸、纤维素及其水溶性衍生物、海藻酸及其盐类、右旋糖酐及其改性衍生物、淀粉及其改性衍生物、胶原蛋白与明胶等天然存在的大分子聚合物；

合成高分子包括：合成聚氨基酸及其改性衍生物、聚乙二醇及其水溶性衍生物等可降解合成高分子。聚合物分子量范围为10kDa~3000kDa，其中壳聚糖脱乙酰度为65%~99%，水溶性纤维素衍生物（如羟丙基甲基纤维素，羧甲基纤维素等）取代度范围为50%~200%。

交联剂包括：二元或多元醛酮类化合物（包括缩醛酮或半缩醛酮类），二元或多元胺类化合物，二元或多元烯烃类化合物，二元或多元羧酸类化合物，二元或多元环氧类化合物，二元或多元硫醇类化合物，二元或多元N-羟基丁二酰亚胺（NHS）活性酯类化合物，以及同时具有上述七种官能团中任意两种或多种的化合物（例如京尼平）等化合物交联剂。

可选地，所述的大分子聚合物为壳聚糖及其水溶性衍生物、氧化羧甲基纤维素和八臂PEG-NHS活性酯。所述的交联剂为戊二醛、赖氨酸、三赖氨酸（即赖氨酸的三聚产物）。

可选地，成凝胶推挤时间10-30秒。

参照中国专利CN103937014A（简军，李睿智等；壳聚糖双网络快速响应型可注射水凝胶及其制备方法）中的方法，本发明亦可将医用可注射防粘连凝胶制备成双网络快速响应性凝胶，通过物理交联与化学交联的双重作用，调节凝胶的成胶时间，增强凝胶的机械强度，以达到预期的防粘连效果。

本发明所述的双联注射装置包括：1）双联架、2）双联架上的两支注射针管和配合的双联混合组件，其中双联混合组件的组成：双联三通、圆锥接头、旋接件、喷射混合嘴、预混腔、喷嘴塞、直插式圆锥接头与注射针；双联三通尾端与喷射混合嘴间的旋接件连接；喷射混合嘴由旋接件、前端预混腔、中间的喷嘴塞及尾部的直插式圆锥接头组成；喷射混合嘴的预混腔内环为圆椎体，其中内环圆锥体底部与喷嘴塞开孔及直插式圆锥接头的内环倒椎体形成空间组合；喷射混合嘴通过尾端的直插式圆锥接头与注射针连接；双联三通与双联架上的两支注射针管配合使用。

使用双联混合组件适用于两种不同粘度溶液或相同粘度溶液的充分混合。用该组件可使高粘度的大分子聚合物溶液与低粘度物理化学交联剂在短时间内充分混合均匀，提高了凝胶的防粘连效果，使用该组件无需其他动力装置进行搅拌混合，操作简便，便于临床使用。

本发明中医用可注射防粘连凝胶从混合时起的最短成胶时间10s，最长成胶时间为90s，具体成胶过程可参照中国专利CN103937014A（简军，李睿智等；壳聚糖双网络快速响应型可注射水凝胶及其制备方法）中的成胶过程。

本发明中的医用可注射防粘连凝胶通过细胞毒性实验验证其安全性，通过动物实验验证其有效性，详见发明专利附图。

本发明提供的一种医用可注射防粘连凝胶的制备方法包括以下步骤：

1）配置具有防粘连功效的大分子聚合物水溶液：将大分子聚合物溶解于pH=7.0~7.4的磷酸盐缓冲液（PBS）中，得到质量浓度为1~200 mg/mL的大分子聚合物溶液；

2）配置交联剂水溶液：交联剂与大分子聚合物质量比为0.01~1:1。按照上述计量配比将交联剂溶解于pH=7.0~7.4的PBS缓冲液中，其中PBS缓冲液的加入体积应与大分子聚合物溶液的体积相等；NHS活性酯大分子聚合物对应的交联剂应选用pH=9~12的PBS缓冲溶液配制，在等体积条件下，NHS活性酯与其对应交联剂溶液的pH值之和应为14~14.4，即混合后混合液pH值应为7.0~7.4。

3）将大分子聚合物溶液（A管）与交联剂溶液（B管）装入双联注射装置中，通过推挤双联注射装置将A管溶液与B管溶液相混合，推挤时间最短为5s，最长为30s。并参照中国专利CN103937014A（简军，李睿智等；壳聚糖双网络快速响应型可注射水凝胶及其制备方法）的方法检测凝胶的成胶时间。

本发明提供一种医用可注射防粘连凝胶的细胞毒性检测方法，具体方案如下：

1）细胞悬液制备：将正常传代培养的L-929细胞，经0.25%胰酶消化制成浓度为1×10-4/mL的细胞悬液，接种于96孔板，每孔200µL，每组6孔，与5%二氧化碳培养箱内37℃培养24h。

2）浸提液交换：细胞培养24h后，舍弃原培养液，空白组用浸提介质交换，阴性对照组用浸提比例为6 cm²/mL高密度聚乙烯浸提液交换，阳性对照组用含5%二甲基亚砜的浸提介质交换，凝胶样品组用浸提液进行交换。置5%二氧化碳培养箱内37℃，分别培养24，48和72h。

3）吸光度测定：更换培养液后，分别取培养24h，48h与72h的孔板，每孔加入40µL 5g/L四唑盐（MTT）溶液继续培养4h后弃去孔内液体，加入150µL二甲基亚砜，与振荡器上振荡10min，在酶标仪（芬兰雷勃公司，MK3）570nm与630nm处测定个孔吸光度，按照下式计算相对增值率（RGR）：

RGR= [A_570nm-A_630nm）/（A_{0 570nm}-A_{0 630nm}）] × 100%

A：凝胶组（阴性，阳性组）吸光度；A₀：空白对照组吸光度。

本发明提供一种医用可注射凝胶防粘连效果的动物实验检验方法：实验大鼠行椎板切除术，暴露神经根并钝性破坏神经外膜，推注2~50mL混合液包裹神经根，90~120s后确保原位形成凝胶后行创面缝合，观察凝胶对损伤神经根防粘连效果，持续观察期为8周。

本发明医用可注射防粘连凝胶结合了防粘连膜与防粘连液的优点，将具有防粘连功效的天然或合成高分子溶液与化学交联剂经双联注射装置推注至创面部位，最初状态可流动的液体，迅速填满神经或肌腱等组织周围的缝隙，并在较短时间内原位形成性状柔软的凝胶。该凝胶不受体位影响，可承受周围组织的压力且自身无压迫作用。此外，由于凝胶被交联剂交联，其降解时间较长，可以完全阻止手术创面在慢性炎症期产生的粘连，并最终在体内被降解或吸收。本发明中的防粘连凝胶可广泛应用于神经外科，普外科，骨科，胸心外科，泌尿外科，妇产科等科室的手术后，人体神经，肌腱，关节，内脏器官等与周围组织间粘连的防治。本发明具有操作简单，成胶时间短，凝胶的热稳定性较好且机械强度较高，生物相容性好等优点。

附图说明

图1：对照组（医用几丁糖手术防粘连液组）术前（左图）以及术后（右图）8周解剖图对比。

图2：可注射凝胶组术前（左图）与术后（右图）8周解剖图对比。

图3：对照组（左图）与可注射凝胶组（右图）粘连效果对比（马氏染色）。

图4：双联混合组件结构总图；图5：双联三通示意图；图6：喷射混合嘴内部结构示意图；图7：双联架、两支注射器与双联混合组件构成的双联注射装置示意图。

具体实施方式

以下通过实施例对本发明作进一步的详细说明，这并不限制本发明的保护范围。

实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件以及手册中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件；所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

如图所示：双联混合组件11与双联架8和两支注射器9、10构成双联注射装置，双联架8、双联架上的两支注射器9、10。与双联架8上的两支注射器9、10配合使用的双联三通1，与双联三通1经由圆锥接头及旋接件4方式连接的喷射混合嘴2，与喷射混合嘴2尾端的直插式圆锥接头7相连接的注射针3。双联三通1尾端与喷射混合嘴2间的旋接件4连接。具体为：

双联三通1可与双联架8上的两支注射器9、10连接，双元溶液首先经两支注射器9、10推入双联三通1的交叉通道，然后进入喷射混合嘴2内部进行混合，最后经注射针3推出至应用部位。

双联三通1末端为旋接件4可与喷射混合嘴前端的旋接件4配合使用，固定喷射混合嘴2，防止因阻力增加而致使喷射混合嘴2与双联三通1脱开。喷射混合嘴2由位于前端与双联三通连接的旋接件4，呈倒椎形的预混腔5，倒锥形空间底部的喷嘴塞 6及位于末端的直插式圆锥接头7组成。喷射混合嘴还可以按功能划分为与双联三通连接的旋接件4，旋涡预混段L1，喷射段L2，与注射针连接收集喷射液段L3组成。双联三通1中的双孔道呈交叉式汇入喷射混合嘴2的预混腔5，预混腔5内环为上大下小的倒椎体结构，经交叉汇腔道挤出的溶液在预混腔5内形成较慢的圆周旋转，但在倒椎体的空间结中圆周旋转加速进而形成旋涡，两种溶液进行初步预混。喷嘴塞6孔道出口与直插式圆锥接头7的较大的内环倒椎体结构相连，高压高速溶液在喷嘴塞6孔道末端因空间突然增大而达到喷射效果且形成较小液滴，液滴在直插式圆锥接头7的倒椎体空间内汇集混合，液滴汇集混合液最终经由注射针3到达应用部位。

上述的双联混合组件11与双联架8和两支注射器9、10构成双联注射装置。

实施例1：壳聚糖-甘油磷酸钠-戊二醛双网络快速响应凝胶的制备（参照中国专利CN103937014A）

称取壳聚糖粉末2.5g（脱乙酰度98%，分子量100kDa），溶解于50mL 0.1mol/L的盐酸溶液中，得到质量分数为5%的壳聚糖溶液。取出9mL该溶液，于0℃的冰水浴中滴加1mL质量分数为50%的甘油磷酸钠溶液（其中β-甘油磷酸钠占甘油磷酸钠固体粉末的90%），滴加完全后，此时溶液pH值为7.2左右，溶液放置于4℃的环境下保存，此溶液作为A液。称取0.02g的戊二醛（与A液中壳聚糖的质量比为0.04:1）溶解于10mL的注射用水中，此溶液作为B液。

将部分A液与B液分别对应地装入A管与B管中，其中A管与B管装液量均为2mL，且A管与B管的长度相同。再将AB管安装在无菌双联注射装置（上海米沙瓦医科工业有限公司，3mL）上，同时将A液与B液推出混合，推注时间为10s，推出混合液后参照中国专利CN103937014A的方法检测凝胶的成胶时间。经检测，凝胶的成胶时间在50s左右。

实施例2：氧化羧甲基纤维素与懒氨酸可注射凝胶的制备

称取氧化羧甲基纤维素粉末5.0g（氧化度20%，分子量100kDa），溶解于50mL pH=7.2的PBS缓冲溶液中，得到质量分数为10%的氧化羧甲基纤维素溶液，从中取出2mL作为A液。称取0.02g的赖氨酸（与A液中氧化羧甲基纤维素的质量比为0.1:1）溶解于2mL的pH=7.2的PBS缓冲液中，此溶液作为B液。

将A液与B液分别对应地装入A管与B管中，其中A管与B管装液量均为2mL，且A管与B管的长度相同。再将AB管安装在无菌双联注射装置上，同时将A液与B液推出混合，推注时间为10s，推出混合液后参照中国专利CN103937014A的方法检测凝胶的成胶时间。经检测，凝胶的成胶时间在30s左右。

实施例3：PEG-NHS活性酯与三赖氨酸可注射凝胶的制备

称取八臂PEG-NHS活性酯2.0g（NHS取代度95%，单臂分子量10kDa），溶解于50mL pH=3.0的PBS缓冲溶液中，得到质量分数为4%的八臂PEG-NHS活性酯，从中取出2mL作为A液。称取0.01g的三赖氨酸（与A液中八臂PEG-NHS活性酯的质量比为0.125:1）溶解于2mL的pH=11.2的PBS缓冲液中，此溶液作为B液。

将A液与B液分别对应地装入A管与B管中，其中A管与B管装液量均为2mL，且A管与B管的长度相同。再将AB管安装在无菌双联注射装置上，同时将A液与B液推出混合，推注时间为10s，推出混合液后参照中国专利CN103937014A的方法检测凝胶的成胶时间。经检测，凝胶的成胶时间在10s左右。

实施例4：可注射凝胶的细胞毒性检测

本实施例中的凝胶采用实施例1中所制备得到的壳聚糖-甘油磷酸钠-戊二醛双网络快速响应凝胶。

将正常传代培养的L-929细胞，经0.25%胰酶消化制成浓度为1×10-4/mL的细胞悬液，接种于96孔板，每孔200µL，每组6孔，与5%二氧化碳培养箱内37℃培养24h。细胞培养24h后，舍弃原培养液，空白组用浸提介质交换，阴性对照组用浸提比例为6cm²/mL高密度聚乙烯浸提液交换，阳性对照组用含5%二甲基亚砜的浸提介质交换，凝胶样品组用浸提液进行交换。置5%二氧化碳培养箱内37℃，分别培养24，48和72h。更换培养液后，分别取培养24h，48h与72h的孔板，每孔加入40µL 5g/L四唑盐（MTT）溶液继续培养4h后弃去孔内液体，加入150µL二甲基亚砜，与振荡器上振荡10min，在酶标仪（芬兰雷勃公司，MK3）570nm与630nm处测定个孔吸光度，按照下式计算相对增值率（RGR）：

RGR= [A_570nm-A_630nm）/（A_{0 570nm}-A_{0 630nm}）] × 100%

A：凝胶组（阴性，阳性组）吸光度；A₀：空白对照组吸光度。

检测结果：在本实验条件下，阴性与阳性对照出现预期的效果，用凝胶样品浸提液培养L-929小鼠成纤维细胞24h，48h，72h的相对增值率分别为：106.5%，110.6%，101.0%。该凝胶所体现的细胞毒性反应均为0级。

实施例5：可注射凝胶的动物实验效果检测

本实施例中的凝胶采用实施例1中所制备得到的壳聚糖-甘油磷酸钠-戊二醛双网络快速响应凝胶。

对大鼠进行椎板切除术，暴露神经根并钝性破坏神经外膜，推注4mL混合液包裹神经根，90s后确定原位形成凝胶后进行创面缝合，观察凝胶对损伤神经根防粘连效果，观察期为术后8周。同时，对照组选取医用几丁糖手术防粘连液（赛必妥^®）作为对照样品，观察8周后损伤神经根的防粘连效果。详细结果见附图1，2，3。

通过对比图1与图2，对照组术后8周神经根附近粘连情况要高于可注射凝胶组。通过对创面部位的马氏染色,可见右侧的可注射凝胶组神经根附近组织的胶原增生明显低于左侧的对照组。说明可注射凝胶对神经根附近组织的创伤具有明显防止粘连产生的效果。

Claims (10)

1.一种医用可注射防粘连凝胶，其特征在于：它是以天然高分子或可生物降解的合成高分子与交联剂为原料，按照交联剂与天然高分子或可生物降解的合成高分子质量比为0.01~1:1，使用双联注射装置制备，具体工艺：分别配制大分子聚合物和交联剂的磷酸盐缓冲液（PBS），并装入由双联混合组件构成的双联注射装置的两支注射针管中，推挤双联注射装置将两溶液在注射针头中混合并成凝胶，推挤时间5-90秒；

天然高分子包括：壳聚糖及其水溶性衍生物、透明质酸、纤维素及其水溶性衍生物、海藻酸及其盐类、右旋糖酐及其改性衍生物、淀粉及其改性衍生物、胶原蛋白与明胶等天然存在的大分子聚合物；

合成高分子包括：合成聚氨基酸及其改性衍生物、聚乙二醇及其水溶性衍生物；

交联剂包括：二元或多元醛酮类化合物，包括缩醛酮或半缩醛酮类；二元或多元胺类化合物；二元或多元烯烃类化合物；二元或多元羧酸类化合物；二元或多元环氧类化合物；二元或多元硫醇类化合物；二元或多元N-羟基丁二酰亚胺（NHS）活性酯类化合物；以及同时具有上述七种官能团中任意两种或多种的化合物。

2.按照权利要求1中所述的医用可注射防粘连凝胶，其特征在于：所述的大分子聚合物为壳聚糖及其水溶性衍生物、氧化羧甲基纤维素和八臂PEG-NHS活性酯。

3.按照权利要求1中所述的医用可注射防粘连凝胶，其特征在于：所述的交联剂为戊二醛、赖氨酸、三赖氨酸。

4.按照权利要求1中所述的医用可注射防粘连凝胶，其特征在于：所述的成凝胶推挤时间10-30秒。

5.按照权利要求2中所述的医用可注射防粘连凝胶，其特征在于：聚合物分子量范围为10kDa~3000kDa，其中壳聚糖脱乙酰度为65%~99%；羧甲基纤维素取代度范围为50%~200%。

6.权利要求1所述的医用可注射防粘连凝胶的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

1）配制具有防粘连功效的大分子聚合物水溶液：将大分子聚合物溶解于pH=7.0~7.4的磷酸盐缓冲液（PBS）中，得到质量浓度为1~200 mg/mL的大分子聚合物溶液；

2）配制交联剂水溶液：交联剂与大分子聚合物质量比为0.01~1:1；按照上述计量配比将交联剂溶解于pH=7.0~7.4的PBS缓冲液中，其中PBS缓冲液的加入体积应与大分子聚合物溶液的体积相等；

3）将大分子聚合物溶液与交联剂溶液装入双联注射装置中，通过推挤双联注射装置将两溶液相混合，推挤时间最短为5-90s，并参照中国专利CN103937014A的方法检测凝胶的成胶时间。

7.按照权利要求6中所述的制备方法，其特征在于：所述的大分子聚合物选自：壳聚糖，脱乙酰度98%，分子量100kDa；氧化羧甲基纤维素，氧化度20%，分子量100kDa；八臂PEG-NHS活性酯，NHS取代度95%，单臂分子量10kDa。

8.按照权利要求6中所述的制备方法，其特征在于：所述的交联剂选自：戊二醛、赖氨酸、三赖氨酸。

9.一种权利要求1所述的医用可注射防粘连凝胶的细胞毒性检测方法，具体方案如下：

1）细胞悬液制备：将正常传代培养的L-929细胞，经0.25%胰酶消化制成浓度为1×10-4/mL的细胞悬液，接种于96孔板，每孔200µL，每组6孔，与5%二氧化碳培养箱内37℃培养24h；

2）浸提液交换：细胞培养24h后，舍弃原培养液，空白组用浸提介质交换，阴性对照组用浸提比例为6 cm²/mL高密度聚乙烯浸提液交换，阳性对照组用含5%二甲基亚砜的浸提介质交换，凝胶样品组用浸提液进行交换；置5%二氧化碳培养箱内37℃，分别培养24，48和72h；

3）吸光度测定：更换培养液后，分别取培养24h，48h与72h的孔板，每孔加入40µL 5g/L四唑盐溶液继续培养4h后弃去孔内液体，加入150µL二甲基亚砜，与振荡器上振荡10min，在酶标仪570nm与630nm处测定个孔吸光度，按照下式计算相对增值率：

RGR= [A_570nm-A_630nm）/（A_{0 570nm}-A_{0 630nm}）] × 100%

A：凝胶组：阴性与阳性组的吸光度；A₀：空白对照组吸光度。

10.一种权利要求1所述的医用可注射防粘连凝胶制备使用的双联注射装置。