CN104292203A - 一种异香豆素类化合物及其制备方法和应用 - Google Patents

一种异香豆素类化合物及其制备方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种异香豆素类化合物及其制备方法和应用，所述的异香豆素类化合物是从樟科植物毛叶三条筋( Linderacaudata (Nees)Hook.F.)中分离得到，命名为毛叶异香豆素A，英文名为caudacoumarinA，其分子式为C16H18O5，具有下述结构：；所述的异香豆素类化合物的制备方法，是以樟科植物毛叶三条筋为原料，经浸膏提取、有机溶剂提取、MCI脱色、硅胶柱层析、高压液相色谱分离步骤。所述的应用为该异香豆素类化合物在制备抗花叶病毒药物中的应用。经半叶法测试，毛叶异香豆素A表现出良好的抗烟草花叶病毒活性；本发明中的异香豆素类化合物结构简单，活性好，可作为抗烟草花叶病毒的先导化合物，有较好的应用前景。

Description

一种异香豆素类化合物及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于植物有效成分提取分离技术领域，具体涉及一种樟科植物毛叶三条筋中异香豆素类化合物及其制备方法和应用。
背景技术
傣药毛叶三条筋Undera Caudata，为樟科(肠班aceae) 山胡椒属 (hndera) 植物，别名香面叶，黄脉山胡椒、朴香根、芽三英 (傣名)，为云南西双版纳州傣族人民常用的植物药，生于海拔700 - 2300 m的山坡、灌木、疏林中，资源丰富，收载于《中药大辞典》。具有止血生肌，除风通血止痛，接骨续筋等功效。异香豆素是一些天然产物的基本结构，广泛分布于自然界中，种类繁多。人们曾用多种方法对此类化合物进行了合成。特别是最近发现其衍生物具有抗菌、消炎、抗癌、抑制蛋白酶和除草等生理和生物活性。由于有明显的抗癌活性，对此类化合物研究更加活跃。为了研究这类化合物的构效关系，寻找有实用价值的抗癌药物人们对此类化合物还进行了大量的生物活性研究。本发明从傣药毛叶三条筋中分离得到了一种具有抗烟草花叶病毒活性的异香豆素类化合物，该化合物至今尚未见到相关报道。
发明内容
本发明的第一目的是提供一种异香豆素类化合物；第二目的在于提供所述异香豆素类化合物的制备方法；第三目的在于提供所述异香豆素类化合物在制备抗烟草花叶病毒药物中的应用。
本发明的第一目的是这样实现的，所述的异香豆素类化合物是从干燥的樟科植物毛叶三条筋 (Lindera caudata) 中分离得到，命名为毛叶异香豆素A，英文名为caudacoumarin A，其分子式为C16H18O5，具有下述结构：
本发明的第二目的是这样实现的，所述的异香豆素类化合物的制备方法，其特征在于以干燥的樟科植物毛叶三条筋 (Lindera caudata) 为原料，经浸膏提取、有机溶剂提取、MCI脱色、硅胶柱层析、高压液相色谱分离步骤而得到的，具体为：
A、浸膏提取：将樟科植物毛叶三条筋 (Lindera caudata) 粉碎到20~40目，用有机溶剂超声提取2~5次，每次30~60分钟，提取液合并，过滤，减压浓缩提取液，静置，滤除沉淀物，浓缩成浸膏a；
B、有机溶剂萃取：浸膏a中加入重量比1~2倍量的水，用与水等体积的有机溶剂萃取3~5次，合并有机溶剂萃取相，减压浓缩成浸膏b；
C、MCI脱色：浸膏b用重量比3~5倍量的甲醇水溶解，上MCI柱，用80%-90%甲醇水洗脱，合并有机溶剂萃取相，减压浓缩成浸膏c;
D、硅胶柱一次层析：浸膏c用重量比6~10倍量的160~200目硅胶装柱进行硅胶柱层析；以体积配比为1:0~0:1的氯仿-甲醇溶液进行梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，经TLC监测，合并相同的部分；
E、硅胶柱二次层析：D步骤洗脱液的9:1部分进一步用重量比6~10倍量的160~200目硅胶装柱进行硅胶柱层析；以体积配比为1:0~0:1的石油醚-丙酮溶液进行梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，经TLC监测，合并相同的部分；
F、高压液相色谱分离：E步骤洗脱液的7:3部分进一步用高压液相色谱分离纯化即得所述的异香豆素类化合物。
以上述方法制备的异香豆素类化合物的结构是通过以下方法测定出来的：
本发明所述的异香豆素类化合物为黄色胶状物，紫外光谱（溶剂为甲醇），λ max (logε）：210 (4.08)、270 (3.75)、295 (3.52)、335 (3.64) nm； 红外光谱（溴化钾压片）νmax： 3428、3062、2935、2864、1735、1668、1615、1562、1498、1382、1210、1132、1080、865、752 cm-1；高分辨质谱（HRESIMS）显示本发明化合物准分子离子峰 m/z 313.1057 [M+Na]+ (计算值为313.1052)，结合13C 和1H NMR谱（图1和图2，碳谱氢谱数据归属见表1）给出其分子式为C16H18O5。从1H NMR（CDCl3，400 MHz）和13C NMR（CDCl3，100 MHz）中显示16个碳信号和18个氢信号。这些信号为典型的3-羟甲基异香豆素骨架信号，这提示该化合物是一个异香豆素类化合物。HMBC谱中观测到H-9 (δ H 4.38) 和C-3 (δ C 155.9)、C-4 (δ C 106.1)；H-4 (δ H 6.44) 和C-3 (δ C 155.9)、C-9 (δ C 62.0)、C-4a (δ C 129.8)、C-5 (δ C 132.2)、C-8a (δ C 121.9) 的相关也证实该化合物为3-羟甲基异香豆素。除该母体外，化合物中还有1个异戊烯基、1个甲氧基及1个酚羟基信号。通过甲氧基氢 (δ H 3.84) 和C-6 (δ C 157.9) 的HMBC 可证实甲氧基取代在C-6位。异戊烯基取代在C-5位由 H-1′ (δ H 3.40) 和 C-4a (δ C 129.8)、C-5 (δ C 132.2)、C-6 (δ C 157.9)，以及 H-2′ (δ H 5.27) 和 C-5 (δ C 132.2) 的HMBC相关得到证实。此外，酚羟基取代在C-7 也可由酚羟基 (δ H 9.10) 和C-6 (δ C 157.9)、C-7 (δ C 146.4)、C-8 (δ C 115.1) 的HMBC相关得到确定。因此，该异香豆素类化合物结构得以确定，并命名为毛叶异香豆素A，英文名caudacoumarin A。
表1 化合物的1H和13C NMR数据（溶剂为CDCl3）(100 和400 MHz)
No. 13C 1H
1 161.4 s  
3 155.9 s  
4 106.1 d 6.44 s
4a 129.8 s  
5 132.2 s  
6 157.9 s  
7 146.4 s  
8 115.1 d 7.40 s
8a 121.9 s  
9 62.0 t 4.38 s
1′ 26.9 t 3.40 (d) 7.2
2′ 122.9 d 5.27 (t) 7.2
3′ 133.3 s 6.80 (d) 8.5
4′ 17.3 q 1.54 s
5′ 25.4 q 1.72 s
6-OMe 61.0 q 3.84 s
Ar-OH   9.10 s
本发明的第三目的是这样实现的，即将所述异香豆素类化合物应用于抗烟草花叶病药物中的制备。
本发明化合物是首次被分离出来的，通过核磁共振和质谱测定方法确定了为异香豆素类化合物，并表征了其具体结构。经对抗烟草花叶病毒的实验，其相对抑制率达到42.6%，具有很好的抗烟草花叶病毒活性，超过阳性对照品南宁霉素的相对抑制率(30.6%)。以上结果揭示了本发明的化合物在制备抗烟草花叶病毒药物中有良好的应用前景。本发明化合物结构简单活性好，可作为抗烟草花叶病毒药物的先导性化合物。
附图说明
图1为化合物毛叶异香豆素A的核磁共振碳谱 (13C NMR)；
图2为化合物毛叶异香豆素A的核磁共振氢谱 (1H NMR)；
图3为化合物毛叶异香豆素A的HSQC相关谱 (HSQC)；
图4为化合物毛叶异香豆素A的HMBC相关谱 (HMBC)；
图5为化合物毛叶异香豆素A的主要HMBC相关图。
具体实施方式
下面结合附图对本发明作进一步的说明，但不以任何方式对本发明加以限制，基于本发明教导所作的任何变换或改进，均落入本发明的保护范围。
本发明所述的异香豆素类化合物是从樟科植物毛叶三条筋 (Lindera caudata) 中分离得到，命名为毛叶异香豆素A，英文名为caudacoumarin A，其分子式为C16H18O5，具有下述结构：
本发明所述的异香豆素类化合物的制备方法，是以干燥的樟科植物毛叶三条筋 (Lindera caudata) 为原料，经浸膏提取、有机溶剂提取、MCI脱色、硅胶柱层析、高压液相色谱分离步骤而得到的，具体为：
A、浸膏提取：将樟科植物毛叶三条筋 (Lindera caudata) 的粉碎到20~40目，用有机溶剂超声提取2~5次，每次30~60分钟，提取液合并，过滤，减压浓缩提取液，静置，滤除沉淀物，浓缩成浸膏a；
B、有机溶剂萃取：浸膏a中加入重量比1~2倍量的水，用与水等体积的有机溶剂萃取3~5次，合并有机溶剂萃取相，减压浓缩成浸膏b；
C、MCI脱色：浸膏b用重量比3~5倍量的甲醇水溶解，上MCI柱，用80%-90%甲醇水洗脱，合并有机溶剂萃取相，减压浓缩成浸膏c;
D、硅胶柱一次层析：浸膏c用重量比6~10倍量的160~200目硅胶装柱进行硅胶柱层析；以体积配比为1:0~0:1的氯仿-甲醇溶液进行梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，经TLC监测，合并相同的部分；
E、硅胶柱二次层析：D步骤洗脱液的9:1部分进一步用重量比6~10倍量的160~200目硅胶装柱进行硅胶柱层析；以体积配比为1:0~0:1的石油醚-丙酮溶液进行梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，经TLC监测，合并相同的部分；
F、高压液相色谱分离：E步骤洗脱液的7:3部分进一步用高压液相色谱分离纯化即得所述的异香豆素类化合物。
所述A步骤中的有机溶剂为70~100% 的丙酮、乙醇、甲醇中的任意一种。 
所述B步骤中的有机溶剂为乙酸乙酯、氯仿、乙醚、石油醚、苯中的任意一种。
所述C步骤中的甲醇水体积配比为8:2、8.5:1.5和9:1。
所述D步骤中浸膏c在经硅胶柱层析前，用重量比1.5~3倍量的甲醇或者丙酮溶解，然后用浸膏重0.8~1.2倍的80~100目硅胶拌样。
所述D步骤中氯仿-甲醇溶液体积配比为20:1、9:1、8:2、7:3、6:4、5:5。
所述E步骤中石油醚-丙酮溶液体积配比为9:1、8:2、7:3、6:4、5:5。
所述F步骤中高压液相色谱分离纯化是以30~60%的甲醇为流动相，流速10~20 ml/min，21.2 mm × 250 mm，5μm 的Zorbax PrepHT GF反相制备柱为固定相，紫外检测器检测波长为254 nm，每次进样45~60μL，收集20~35 min的色谱峰，多次累加后蒸干。
本发明所述的异香豆素类化合物在制备抗烟草花叶病毒药物中的应用。
本发明所述的植物不受地区和品种限制，均可以实现本发明。
实施例1
取干燥的樟科植物毛叶三条筋 1.5 kg，粗粉碎至40目，用70%的丙酮超声提取4次，每次60 min，提取液合并；提取液过滤，减压浓缩至体积的1/4；静置，滤除沉淀物，浓缩成120g浸膏a；在浸膏a中加入240 g水，用与水等体积的氯仿萃取5次，合并萃取相，减压浓缩成50 g浸膏b；浸膏b用MCI装柱，在浸膏b中加入100 g的80%甲醇水溶解，然后上柱，用90%甲醇水1至4升洗脱，收集洗脱液，减压浓缩得到30g浸膏c；浸膏c用200目硅胶160 g装柱，在浸膏c中加入60 g的丙酮溶解，然后加入100目硅胶60 g拌样，拌样后上柱；用体积比分别为20:1、9:1、8:2、7:3、6:4、5:5的氯仿-甲醇混合有机溶剂梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，经TLC监测，合并相同的部分，得到6个部分，其中，体积比9:1的氯仿-甲醇混合有机溶剂的洗脱液得第二部分样品2.5 g，再重复硅胶柱层析，用体积比分别为9:1、8:2、7:3、6:4、5:5的石油醚-丙酮混合有机溶剂梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，经TLC监测，合并相同的部分，得到7个部分，其中第3部分，即7:3部分约860 mg, 再以44%的甲醇为流动相，流速10 ml/min，21.2×250mm，5μm 的Zorbax PrepHT GF反相制备柱为固定相，紫外检测器检测波长为254 nm，每次进样48μL，收集26.7 min的色谱峰，多次累加后蒸干，即得所述的异香豆素类化合物毛叶异香豆素A。
实施例2
干燥的樟科植物毛叶三条筋 3 kg，粗粉碎至20目，用100%的乙醇超声提取5次，每次30min，提取液合并；提取液过滤，减压浓缩至体积的1/4；静置，滤除沉淀物，浓缩成240 g浸膏a；在浸膏a中加入360 g水，用与水等体积的乙酸乙酯萃取3次，合并萃取相，减压浓缩成100 g浸膏b；浸膏b用MCI装柱，在浸膏b中加入150 g的80%甲醇水溶解，然后上柱，用90%甲醇水2至6升洗脱，收集洗脱液，减压浓缩得到60 g浸膏c；浸膏c用200目硅胶320 g装柱，在浸膏c中加入120g的丙酮溶解，然后加入100目硅胶120 g拌样，拌样后上柱；用体积比分别为20:1、9:1、8:2、7:3、6:4、5:5的氯仿-甲醇混合有机溶剂梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，经TLC监测，合并相同的部分，得到6个部分，其中，体积比9:1的氯仿-甲醇混合有机溶剂的洗脱液得第二部分样品5 g，再重复硅胶柱层析，用体积比分别为9:1、8:2、7:3、6:4、5:5的石油醚-丙酮混合有机溶剂梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，经TLC监测，合并相同的部分，得到7个部分，其中第3部分，即7:2部分约1.6 g, 再以44%的甲醇为流动相，流速10 ml/min，21.2×250 mm，5μm 的Zorbax PrepHT GF反相制备柱为固定相，紫外检测器检测波长为254 nm，每次进样48 μL，收集26.7 min的色谱峰，多次累加后蒸干，即得所述的异香豆素类化合物毛叶异香豆素A。
实施例3
取干燥的樟科植物毛叶三条筋 1.5 kg，粗粉碎至40目，用80%的甲醇超声提取4次，每次50 min，提取液合并；提取液过滤，减压浓缩至体积的1/4；静置，滤除沉淀物，浓缩成150 g浸膏a；在浸膏a中加入300 g水，用与水等体积的氯仿萃取5次，合并萃取相，减压浓缩成60 g浸膏b；浸膏b用MCI装柱，在浸膏b中加入100 g的80%甲醇水溶解，然后上柱，用90%甲醇水1至4升洗脱，收集洗脱液，减压浓缩得到35 g浸膏c；浸膏c用200目硅胶160 g装柱，在浸膏c中加入70 g的甲醇溶解，然后加入100目硅胶60 g拌样，拌样后上柱；用体积比分别为20:1、9:1、8:2、7:3、6:4、5:5的氯仿-甲醇混合有机溶剂梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，经TLC监测，合并相同的部分，得到6个部分，其中，体积比9:1的氯仿-甲醇混合有机溶剂的洗脱液得第二部分样品3.2 g，再重复硅胶柱层析，用体积比分别为9:1、8:2、7:3、6:4、5:5的石油醚-丙酮混合有机溶剂梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，经TLC监测，合并相同的部分，得到7个部分，其中第3部分，即7:3部分约860 mg, 再以48%的甲醇为流动相，流速10 ml/min，21.2×250 mm，5μm 的Zorbax PrepHT GF反相制备柱为固定相，紫外检测器检测波长为254 nm，每次进样48μL，收集26.7 min的色谱峰，多次累加后蒸干，即得所述的异香豆素类化合物毛叶异香豆素A。
实施例4
取实施例1制备的化合物毛叶异香豆素A，为黄色胶状物。
测定方法为：用核磁共振，结合其它波谱技术鉴定结构。紫外光谱（溶剂为甲醇），λ max (logε）：210 (4.08)、270 (3.75)、295 (3.52)、335 (3.64) nm； 红外光谱（溴化钾压片）νmax：3428、3062、2935、2864、1735、1668、1615、1562、1498、1382、1210、1132、1080、865、752 cm-1；高分辨质谱（HRESIMS）显示本发明化合物准分子离子峰m/z 313.1057 [M+Na]+ (计算值为313.1052)，结合13C 和1H NMR谱（图1和图2，碳谱氢谱数据归属见表1）给出其分子式为C16H18O5。从1H NMR（CDCl3，400 MHz）和13C NMR（CDCl3，100 MHz）中显示16个碳信号和18个氢信号。这些信号为典型的3-羟甲基异香豆素骨架信号，这提示该化合物是一个异香豆素类化合物。HMBC谱中观测到H-9 (δ H 4.38)和C-3 (δ C 155.9)、C-4 (δ C 106.1)；H-4 (δ H 6.44)和C-3 (δ C 155.9)、C-9 (δ C 62.0)、C-4a (δ C 129.8)、C-5 (δ C 132.2)、C-8a (δ C 121.9)的相关也证实该化合物为3-羟甲基异香豆素。除该母体外，化合物中还有1个异戊烯基、1个甲氧基及1个酚羟基信号。通过甲氧基氢 (δ H 3.84) 和C-6 (δ C 157.9) 的HMBC 可证实甲氧基取代在C-6位。异戊烯基取代在C-5位由 H-1′ (δ H 3.40) 和C-4a (δ C 129.8)、C-5 (δ C 132.2)、C-6 (δ C 157.9)，以及 H-2′ (δ H 5.27)和 C-5 (δ C 132.2) 的HMBC相关得到证实。此外，酚羟基取代在C-7 也可由 酚羟基 (δ H 9.10) 和C-6 (δ C 157.9)、C-7 (δ C 146.4)、C-8 (δ C 115.1)的HMBC相关得到确定。因此，该异香豆素类化合物结构得以确定，并命名为毛叶异香豆素A，英文名caudacoumarin A。
实施例5
取实施例2制备的化合物，为黄色胶状物，测定方法与实施例4相同，确认实施例2制备的化合物为所述的异香豆素类化合物毛叶异香豆素A。 
实施例6
取实施例3制备的化合物，为黄色胶状物，测定方法与实施例4相同，确认实施例3制备的化合物为所述的异香豆素类化合物毛叶异香豆素A。
实施例7
取实施例1~3制备的任一异香豆素类化合物进行抗烟草花叶病毒活性试验，试验情况如下：
采用半叶法，在药剂的质量浓度均为50 mg/L时对本发明化合物进行抗烟草花叶病毒活性测定。在5～6龄烤烟的植株上，选取适用于测试的叶片(叶行正常，无病无虫)，先将叶片均匀撒上细金刚砂，用毛笔将备用的烟草花叶病毒源(3.0×10-3)均匀抹在撒有金刚砂的叶片上，待所有中选的叶片接毒结束后，立即放在盛有药液的培养皿中处理20 min，取出，擦去叶片上水珠和药液，将两个半叶复原排放在铺有卫生纸保湿的玻璃缸中，并盖上玻璃盖，控温(23 ± 2)℃，放在温室自然光照射，2～3 d即可见枯斑．每个处理都设另一半叶为对照，另外设有1组为商品宁南霉素的处理作为对比，按下公式计算相对抑制率。
XI％=(CK-T)／CK×100％
X：相对抑制率(％)，CK：浸泡于清水中半片接毒叶的枯斑数(个)，T浸泡于药液中半片接毒叶的枯斑数(个)。
结果明本化合物的相对抑制率为42.6%，超过对照宁南霉素的相对抑制率30.6%，说明化合物有很好的抗烟草花叶病毒活性。

Claims (10)

1.一种异香豆素类化合物，其特征在于所述化合物是从樟科植物毛叶三条筋 (Lindera caudata) 中分离得到，命名为毛叶异香豆素A，英文名为caudacoumarin A，其分子式为C16H18O5，具有下述结构：
。
2.一种权利要求1所述的异香豆素类化合物的制备方法，其特征在于以樟科植物毛叶三条筋 (Lindera caudata) 为原料，经浸膏提取、有机溶剂萃取、MCI脱色、硅胶柱层析、高压液相色谱分离步骤，具体为：
A、浸膏提取：将樟科植物毛叶三条筋 (Lindera caudata) 粉碎到20~40目，用有机溶剂超声提取2~5次，每次30~60分钟，提取液合并，过滤，减压浓缩提取液，静置，滤除沉淀物，浓缩成浸膏a；
B、有机溶剂萃取：浸膏a中加入重量比1~2倍量的水，用与水等体积的有机溶剂萃取3~5次，合并有机溶剂萃取相，减压浓缩成浸膏b；
C、MCI脱色：浸膏b用重量比3~5倍量的甲醇水溶解，上MCI柱，用80%-90%甲醇-水洗脱，合并有机溶剂萃取相，减压浓缩成浸膏c;
D、硅胶柱一次层析：浸膏c用重量比6~10倍量的160~200目硅胶装柱进行硅胶柱层析；以体积配比为1:0~0:1的氯仿-甲醇溶液进行梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，经TLC监测，合并相同的部分；
E、硅胶柱二次层析：D步骤洗脱液的9:1部分进一步用重量比6~10倍量的160~200目硅胶装柱进行硅胶柱层析；以体积配比为1:0~0:1的石油醚-丙酮溶液进行梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，经TLC监测，合并相同的部分；
F、高压液相色谱分离：E步骤洗脱液的7:3部分进一步用高压液相色谱分离纯化即得所述的异香豆素类化合物。
3.根据权利要求2所述的异香豆素类化合物的制备方法，其特征在于所述A步骤中的有机溶剂为70~100%的丙酮、乙醇、甲醇中的任意一种。
4.根据权利要求2所述的异香豆素类类化合物的制备方法，其特征在于所述B步骤中的有机溶剂为乙酸乙酯、氯仿、乙醚、石油醚、苯中的任意一种。
5.根据权利要求2所述的异香豆素类类化合物的制备方法，其特征在于所述C步骤中的甲醇-水体积配比为8:2、8.5:1.5和9:1。
6.根据权利要求2所述的异香豆素类化合物的制备方法，其特征在于所述D步骤中浸膏c在经硅胶柱层析前，用重量比1.5~3倍量的甲醇或者丙酮溶解，然后用浸膏重0.8~1.2倍的80~100目硅胶拌样。
7.根据权利要求2所述的异香豆素类化合物的制备方法，其特征在于所述D步骤中氯仿-甲醇溶液体积配比为20:1、9:1、8:2、7:3、6:4、5:5。
8.据权利要求2所述的异香豆素类化合物的制备方法，其特征在于所述E步骤中石油醚-丙酮溶液体积配比为9:1、8:2、7:3、6:4、5:5。
9.根据权利要求2所述的异香豆素类化合物的制备方法，其特征在于所述F步骤中高压液相色谱分离纯化是以30~60%的甲醇为流动相，流速10~20 ml/min，21.2 mm × 250 mm，5μm 的Zorbax PrepHT GF反相制备柱为固定相，紫外检测器检测波长为254 nm，每次进样45~60 μL，收集20~35 min的色谱峰，多次累加后蒸干。
10.一种权利要求1所述的异香豆素类化合物在制备抗烟草花叶病毒药物中的应用。
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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105348193A (zh) * 2015-12-16 2016-02-24 云南民族大学 一种异喹啉生物碱类化合物及其制备方法和应用
CN105481818A (zh) * 2015-11-20 2016-04-13 云南中烟工业有限责任公司 一种增香保润异香豆素类化合物及其制备方法和用途
CN106083801A (zh) * 2016-06-28 2016-11-09 陈建峰 一种3，5‑双(羟甲基)‑6‑甲氧基‑1h‑异苯并吡喃‑1‑酮的制备方法
CN113461704A (zh) * 2021-06-02 2021-10-01 中国医学科学院药用植物研究所 一种单萜骈香豆素类化合物、制备方法及其应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103304530A (zh) * 2013-06-19 2013-09-18 云南烟草科学研究院 一种香豆素类化合物及其制备方法和应用
CN103524472A (zh) * 2013-10-23 2014-01-22 云南烟草科学研究院 一种酚类化合物及其制备方法和应用

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103304530A (zh) * 2013-06-19 2013-09-18 云南烟草科学研究院 一种香豆素类化合物及其制备方法和应用
CN103524472A (zh) * 2013-10-23 2014-01-22 云南烟草科学研究院 一种酚类化合物及其制备方法和应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
彭霞 等: "傣药毛叶三条筋化学成分研究", 《中国民族医药杂志》, 30 November 2011 (2011-11-30) *

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105481818A (zh) * 2015-11-20 2016-04-13 云南中烟工业有限责任公司 一种增香保润异香豆素类化合物及其制备方法和用途
CN105481818B (zh) * 2015-11-20 2018-10-26 云南中烟工业有限责任公司 一种增香保润异香豆素类化合物及其制备方法和用途
CN105348193A (zh) * 2015-12-16 2016-02-24 云南民族大学 一种异喹啉生物碱类化合物及其制备方法和应用
CN106083801A (zh) * 2016-06-28 2016-11-09 陈建峰 一种3，5‑双(羟甲基)‑6‑甲氧基‑1h‑异苯并吡喃‑1‑酮的制备方法
CN113461704A (zh) * 2021-06-02 2021-10-01 中国医学科学院药用植物研究所 一种单萜骈香豆素类化合物、制备方法及其应用

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