CN104291892A - 一种防治烟草黑胫病母土及其制备与使用方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种防治烟草黑胫病母土，该防治烟草黑胫病母土包括1质量份的复合生防菌微生物有机肥料、1~2质量份的秸秆颗粒和1~2质量份的土壤颗粒。本发明还公开了所述防治烟草黑胫病母土的制备和使用方法。所述制备方法为先制备复合生防菌微生物有机肥，再将复合生防菌微生物有机肥、秸秆颗粒和土壤颗粒按比例混合均匀，干燥后即得所述的防治烟草黑胫病母土。所述使用方法为所述母土用大田栽培土稀释50~100倍替换病株土补苗，或者作为假植苗营养土、填塘土、压膜土、烟株周围培土防治烟草黑胫病。本发明能在比较感病的根系形成有效的防护层，阻止病菌的侵染，并改良根系土壤结构，增加有机质，增强根系活力，促进烟株生长，达到病害全程控制的目的。

Description

一种防治烟草黑胫病母土及其制备与使用方法
技术领域
本发明属于植物病害防治技术领域，具体涉及一种防治烟草黑胫病母土及其制备与使用方法。
背景技术
烟草黑胫病（tobacco black shank）是烟草生产中一种主要病害。目前，已经开发出一些芽孢杆菌、木霉菌为主的生防制剂，并在生产中推广应用，但对于种植感病品种的烟草防治效果较差。中国发明专利ZL 200910233578.0采用有机肥载菌的方法增强了烟草黑胫病生防菌在土壤中的存活，然而由于其用量少、与生产技术措施结合不紧密导致防效不稳定。因此，对于烟草黑胫病的生物防治有必要改进有机肥载菌途径和使用方法，以期达到更有效的防治效果。
为此，研制开发一种防治烟草黑胫病母土及其制备与使用方法。
发明内容
本发明的第一目的在于提供一种防治烟草黑胫病母土；第二目的在于提供防治烟草黑胫病母土的制备方法；第三目的在于提供提供防治烟草黑胫病母土的使用方法。
本发明第一目的是这样实现的，所述的防治烟草黑胫病母土包括包括1质量份的复合生防菌微生物有机肥料、1~2质量份的秸秆颗粒和1~2质量份的土壤颗粒。
本发明第二目的是这样实现的，所述的防治烟草黑胫病母土的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
A、制备复合生防菌微生物有机肥；
B、将复合生防菌微生物有机肥、秸秆颗粒和土壤颗粒按比例混合均匀，室温下堆捂5~7天，堆捂过程中间断翻堆，将堆捂温度控制在40℃以下；
C、堆捂后，在40℃以下晾干或烘干至含水量小于15%；
D、检测复合生防菌数量，复合生防菌数量达107个/g以上，即得所述的防治烟草黑胫病母土。
本发明的第三目的是这样实现的，所述的防治烟草黑胫病母土的使用方法，其特征在于所述母土用大田栽培土稀释50~100倍替换病株土补苗，或者作为假植苗营养土、填塘土、压膜土、烟株周围培土防治烟草黑胫病。
本发明相对于现有技术，具有以下优点及效果：
（1）防治烟草黑胫病母土是一种以复合生防菌为优势微生物种群的母土，适合于生防菌存活、繁殖，维持稳定种群数量。母土采用高接种量，能让复合生防菌中的芽孢杆菌迅速占领不经灭菌的秸秆颗粒，同时利用芽孢杆菌高温发酵的特性，可进一步杀灭大多数不耐高温的腐生菌和病菌，芽孢杆菌的种群优势更明显。同样高接种量接种木霉，利用木霉与芽孢杆菌营养差异，形成共存2种生防菌的优势复合群体。而且这种母土中的有机质处于半腐熟、与土壤兼容性好。
（2）防治烟草黑胫病母土应用效果明显，当施用田间时，复合生防菌利用母土中的营养成分可以在比较长的时间生存与繁殖、并维持优势微生物种群，能在比较感病的根系、根胫部形成有效的防护层，杀灭病菌、减少病菌的数量，阻止病菌的侵染，同时改良烟株根系土壤结构，增加土壤有机质，增强根系活力，促进烟株生长，达到病害全程控制的目的。
具体实施方式
下面对本发明作进一步说明，但不以任何方式对本发明加以限制，基于本发明教导所作的任何变换，均落入本发明保护范围。
本发明所述的防治烟草黑胫病母土，包括1质量份的复合生防菌微生物有机肥料、1~2质量份的秸秆颗粒和1~2质量份的土壤颗粒。
其中，所述的复合生防菌微生物有机肥料是由秸秆和家畜粪便或圈肥经对烟草黑胫病有拮抗作用的复合生防菌发酵、除臭和无害化半腐熟后加工而成。对烟草黑胫病具有拮抗作用复合生防菌为芽孢杆菌和木霉，分别选用地衣芽孢杆菌GP13菌株（中国发明专利 ZL 200810233500.4）和哈茨木霉 TR13菌株（中国发明专利 ZL 200910094285.9）。所述秸秆颗粒以由禾本科或/和豆科作物的秸秆晒干后粉碎得来的为佳。所述的土壤颗粒为过2mm土壤筛的非耕作土、沙壤土、水稻土。
本发明所述的防治烟草黑胫病母土的制备方法为：一种根据权利要求1～5任一所述的防治烟草黑胫病母土的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
A、制备复合生防菌微生物有机肥；
B、将复合生防菌微生物有机肥、秸秆颗粒和土壤颗粒按比例混合均匀，室温下堆捂5~7天，堆捂过程中间断翻堆，将堆捂温度控制在40℃以下；
C、堆捂后，在40℃以下晾干或烘干至含水量小于15%；
D、检测复合生防菌数量，复合生防菌数量达107个/g以上，即得所述的防治烟草黑胫病母土。
其中，所述的制备复合生防菌微生物有机肥包括如下步骤：
（1）生防菌培养：
将芽孢杆菌接种到黄豆粉液体培养基中，在30℃、150 r/min、通气量1:1.5的条件下发酵36~48h，到得含菌量为109个/mL 芽孢杆菌接种液；
将木霉菌株通过液固两相一步法培养，得到含菌量为108个/g的木霉接种颗粒；
（2）秸秆吸附发酵：
按体积比（1~1.5）:1，将芽孢杆菌接种液与长度为3~5mm的秸秆颗粒混合均匀，用灭菌水或未发酵的干燥秸秆颗粒调节混合物含水量至55%~65%，堆捂发酵5~7天，发酵期间温度超过55℃时翻堆； 
（3）与家畜粪便或圈肥混合发酵：
按体积比1: （1~1.5），将发酵后的秸秆颗粒与家畜粪便或圈肥混合均匀，用用灭菌水或未发酵的干燥秸秆颗粒调节含水量至55%~65%，堆捂发酵7~10天，形成厩肥，发酵期间温度超过55℃时翻堆；
（4）厩肥二次发酵：
按体积比1: （1~1.5），将木霉接种颗粒与厩肥混合，堆捂发酵，堆捂厚度15~30cm，在30℃以下，相对湿度为85%~90%的条件下发酵5~7天，即得到所述的复合生防菌微生物有机肥。
本发明所述的防治烟草黑胫病母土的使用方法为用大田栽培土稀释50~100倍替换病株土补苗，或者作为假植苗营养土、填塘土、压膜土、烟株周围培土防治烟草黑胫病。
实施例1：制备复合生防菌微生物有机肥
将地衣芽孢杆菌GP13菌株接种到黄豆粉液体培养基（大豆粉30g、蔗糖 15g、磷酸氢二钾5g、磷酸二氢钾 1.5g、酵母粉 1g、硫酸镁 0.5 g、氯化铁0.1 g、碳酸钙磷0.1g、自来水1000mL、花生油0.1％、消泡剂0.01％、pH自然。）中，在30℃、150 r/min、通气量1:1.5的条件下发酵36~48h，到得含菌量为109个/mL GP13接种液。
将哈茨木霉 TR13菌株通过液固两相一步法培养（中国发明专利 ZL 200910094285.9），得到含孢量为108个/g的TR13接种颗粒；
按体积比1.25:1，将GP13接种液与长度为3~5mm的大麦秸秆颗粒混合均匀，调节含水量至55%~65%，堆捂发酵5~7天，发酵期间温度超过55℃时翻堆。
按体积比1:1，将发酵后的大麦秸秆颗粒与家畜粪便混合均匀，用未发酵的干燥秸秆颗粒调节含水量至55%~65%，堆捂发酵7~10天，形成厩肥，发酵期间温度超过55℃时翻堆。
按体积比1:1，将TR13接种颗粒与厩肥混合均匀，堆捂发酵，堆捂厚度15~30cm，在30℃以下，相对湿度为85%~90%的条件下发酵5~7天，即得到复合生防菌微生物有机肥。
实施例2：制备防治烟草黑胫病母土
将实施例1得到的复合生防菌微生物有机肥、秸秆颗粒和土壤颗粒按质量比1:1.5:1.5混合均匀，室温下堆捂5~7天，堆捂过程中间断翻堆，将堆捂温度控制在40℃以下；堆捂后，在40℃以下晾干或烘干至含水量小于15%；最后，检测复合生防菌数量，复合生防菌数量达107个/g以上，即得所述的防治烟草黑胫病母土。
实施例3：烟草黑胫病防治试验
烟草黑胫病防治试验采用温室盆栽方式进行，盆栽主要的土壤是烟草连作土，历年烟草黑胫病发病率在60%以上，栽培的烟草成苗品种为红花大金元，采用漂浮育苗方式育成，各盆栽处理如下：
CK：烟草连作土；处理A：健康水稻土；处理B：实施例2所得到的母土；处理C：半腐熟的大麦秸秆颗粒；处理D：TR13木霉颗粒剂（中国发明专利 ZL 200910094285.9）；处理E：GP13可湿性粉剂（中国发明专利 ZL 200810233500.4）；处理F：半腐熟的厩肥；处理G：58%甲霜灵锰锌，共8个处理。每处理6个重复，每重复栽烟5盆。每盆装连作烟草土9kg，打塘。
其中，处理CK、处理E和G在塘中直接填入0.5kg烟草连作土。处理E和G浇定根水后，分别浇施稀释500倍药剂进行烟草黑胫病的防治，中耕培土（在烟株表层土上加入0.5kg烟草连作土）后，再分别以同样稀释液浇施1次，处理CK浇清水。其他处理颗粒用烟草连作土稀释50倍，分别在塘中填入0.5kg各处理稀释土壤，中耕培土再分别对应加入各处理同样稀释土壤0.5kg。按优质烟栽培进行水肥和其他病虫害防治管理，培土后开始观察发病情况，待对照（即处理CK ）发病率达60%以上时，按GB/T 23222—2008方法调查发病情况，统计发病率、病情指数，按GB/T 23222—2008方法计算相对防治效果。
病害调查时，同时调查各处理的最大叶长宽、茎围、株高等农艺性状。另外，取各处理根际土样按常规土壤微生物分离方法，分别涂布于牛肉膏蛋白胨、高氏一号和马丁氏培养基上培养，测定土壤中细菌、放线菌和真菌的数量。
试验结果如表1～3所示。结果表明，防病母土的施用（处理B），可以很好地防治病害，其效果达到了化学药剂58%甲霜灵锰锌（处理G）相同的效果，防治效果达84.6%（表1），而且可明显促进烟株生长（表2），显著增加烟草根际微生物的数量（表3），增强了根系活力。
表1 不同盆栽处理防治效果比较
注：同一列中，不同小写字母表示不同处理间存在显著差异（P<0.05）；不同大写字母表示不同处理间存在极显著差异（P<0.01）。
表2 不同盆栽处理烟株的农艺性状比较
表3 不同盆栽处理烟株根际微生物比较

Claims (9)

1.一种防治烟草黑胫病母土，其特征在于包括1质量份的复合生防菌微生物有机肥料、1~2质量份的秸秆颗粒和1~2质量份的土壤颗粒。
2.根据权利要求1所述的防治烟草黑胫病母土，其特征在于所述的复合生防菌微生物有机肥料是由秸秆和家畜粪便或圈肥经对烟草黑胫病有拮抗作用的复合生防菌发酵、除臭和无害化半腐熟后加工而成。
3.根据权利要求2所述的防治烟草黑胫病母土，其特征在于所述的对烟草黑胫病具有拮抗作用复合生防菌为芽孢杆菌和木霉。
4.根据权利要求3所述的防治烟草黑胫病母土，其特征在于所述芽孢杆菌为地衣芽孢杆菌GP13菌株，所述的木霉为哈茨木霉TR13菌株。
5.根据权利要求1所述的防治烟草黑胫病母土，其特征在于所述的秸秆颗粒由禾本科或/和豆科作物的秸秆晒干后粉碎得到。
6.根据权利要求1所述的防治烟草黑胫病母土，其特征在于所述的土壤颗粒为过2mm土壤筛的非耕作土、沙壤土、水稻土。
7.一种根据权利要求1～5任一所述的防治烟草黑胫病母土的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
A、制备复合生防菌微生物有机肥；
B、将复合生防菌微生物有机肥、秸秆颗粒和土壤颗粒按比例混合均匀，室温下堆捂5~7天，堆捂过程中间断翻堆，将堆捂温度控制在40℃以下；
C、堆捂后，在40℃以下晾干或烘干至含水量小于15%；
D、检测复合生防菌数量，复合生防菌数量达107个/g以上，即得所述的防治烟草黑胫病母土。
8.根据权利要求7所述的防治烟草黑胫病母土的制备方法，其特征在于所述的制备复合生防菌微生物有机肥包括如下步骤：
（1）生防菌培养：
将芽孢杆菌接种到黄豆粉液体培养基中，在30℃、150 r/min、通气量1:1.5的条件下发酵36~48h，到得含菌量为109个/mL 芽孢杆菌接种液；
将木霉菌株通过液固两相一步法培养，得到含菌量为108个/g的木霉接种颗粒；
（2）秸秆吸附发酵：
按体积比1~1.5:1，将芽孢杆菌接种液与长度为3~5mm的秸秆颗粒混合均匀，用灭菌水或未发酵的干燥秸秆颗粒调节混合物含水量至55%~65%，堆捂发酵5~7天，发酵期间温度超过55℃时翻堆； 
（3）与家畜粪便或圈肥混合发酵：
按体积比1: 1~1.5，将发酵后的秸秆颗粒与家畜粪便或圈肥混合均匀，用灭菌水或未发酵的干燥秸秆颗粒调节含水量至55%~65%，堆捂发酵7~10天，形成厩肥，发酵期间温度超过55℃时翻堆；
（4）厩肥二次发酵：
按体积比1: 1~1.5，将木霉接种颗粒与厩肥混合，堆捂发酵，堆捂厚度15~30cm，在30℃以下，相对湿度为85%~90%的条件下发酵5~7天，即得到所述的复合生防菌微生物有机肥。
9.一种权利要求1~6任一所述的防治烟草黑胫病母土的使用方法，其特征在于所述母土用大田栽培土稀释50~100倍替换病株土补苗，或者作为假植苗营养土、填塘土、压膜土、烟株周围培土防治烟草黑胫病。
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