CN104271129A - 使用极光激酶抑制剂治疗癌症的方法 - Google Patents

Abstract

本发明揭示治疗各种细胞增生性病症的方法。本发明具体来说揭示通过投与极光(Aurora)A激酶的选择性抑制剂与基于紫杉烷的化学疗法(例如太平洋紫杉醇(paclitaxel)或多西他赛(docetaxel))的组合来治疗各种细胞增生性病症的方法。

Description

使用极光激酶抑制剂治疗癌症的方法

技术领域

本发明涉及治疗各种细胞增生性病症的方法。具体来说，本发明提供通过投与极光(Aurora)A激酶的选择性抑制剂与基于紫杉烷的化学疗法(例如太平洋紫杉醇(paclitaxel)或多西他赛(docetaxel))的组合来治疗各种细胞增生性病症的方法。

背景技术

癌症是美国第二最常见死亡原因且在世界范围内占全部死亡人数的八分之一。在2010年间，美国癌症学会(American Cancer Society)估计仅在美国将诊断出约1,529,560例新癌症病例，且估计有569,490名美国人将死于癌症。在2008年，估计在世界范围内诊断出12.4百万例新癌症病例，且有7.6百万人死于癌症。尽管医学进步已改良癌症存活率，但仍需要新的且更有效的治疗。

癌症的特征在于不受控的细胞繁殖。由于抗有丝分裂剂和抗微管剂在细胞分裂周期中起重要作用，因此已探索将其作为癌症疗法的靶标。调节从静止到细胞增生的转变的细胞分裂周期包含四个阶段：G1期、S期(DNA合成)、G2期和M期(有丝分裂)。未分裂细胞停留在静止期G0。抑制有丝分裂机构导致众多种结果，主要导致细胞死亡或停滞。

由于抗有丝分裂剂的效应并不仅限于癌细胞，因此这些药物在临床环境中的剂量限制性毒性通常体现在快速分裂组织中，且在抗微管剂情形下经常伴随严重的周围神经病变。因此，抗有丝分裂剂的窄治疗指数使得需要了解这些药物的作用机制以使合理研发这些疗法的机会最大化。

传统抗有丝分裂剂包括直接干扰微管动力学者，所述微管动力学对有丝分裂纺锤体组装和随后的DNA对齐和分离到子代细胞中至关重要。目前在临床环境中使用抗微管剂，例如紫杉烷。举例来说，太平洋紫杉醇和多西他赛具有相似临床活性谱，包括卵巢癌、肺癌、乳癌、膀胱癌和前列腺癌。

紫杉烷通过改变微管解聚合的动力学来稳定微管。在培养物中生长的哺乳动物细胞中，高浓度的太平洋紫杉醇使聚集的微管稳定(席夫(Schiff)和霍维茨(Horwitz)(1980)美国国家科学院院刊(Proc Natl Acad Sci USA)77：1561-1565)。在类似于临床环境中实现的暴露的较低浓度下，太平洋紫杉醇的主要效应是稳定微管，且因此降低有效纺锤体组装所需的微管的动态不稳定性。由于此降低，微管不能快速生长和收缩，且其在有丝分裂期间结合凝集染色体的能力受损。有效染色体对齐由此受影响，且此染色体对齐失败导致经由纺锤体组装检查点介导的有丝分裂延迟。

纺锤体组装检查点确保染色体在细胞分裂后期开始之前适当对齐到中期板，在后期中姊妹染色单体分离到相对极。有趣的是，在低浓度的太平洋紫杉醇下，已显示出现无效染色体对齐且未延长有丝分裂停滞，且因此太平洋紫杉醇的效应并不依赖于其诱导有丝分裂停滞或延迟的能力(陈(Chen)和霍维茨(2002)癌症研究(Cancer Res)62：1935-1938)；凯林(Kelling)等人(2003)癌症研究63：2794-2801)。

对于太平洋紫杉醇以及其类似物多西他赛来说，活体外研究已证实，即使在不出现延长有丝分裂停滞的浓度下，也存在异常DNA含量和细胞死亡(陈和霍维茨(2002)癌症研究62：1935-1938；埃尔南德斯-瓦格斯(Hernandez-Vargas)等人(2007)细胞周期(细胞Cycle)6：780-783；埃尔南德斯-瓦格斯等人(2007)细胞周期6：2662-2668)。与此发现一致，在异种移植模型中的临床前研究未能证实在有丝分裂停滞程度与肿瘤生长抑制之间存在明确联系(加恩(Gan)等人(1998)癌症化疗与药理学(Cancer Chemother Pharmacol)42：177-182；米尔若斯(Milross)等人(1996)国立癌症研究所杂志(J Natl Cancer Inst)88：1308-1314；希明(Schimming)等人(1999)癌症化疗与药理学43：165-172)，且在临床环境中已报导类似发现(西曼斯(Symmans)等人(2000)临床癌症研究(Clin Cancer Res)6：4610-4617)。

已经充分证实，抗有丝分裂化合物损害细胞执行成功分裂的能力。细胞将无法分裂且有丝分裂停滞延长，从而直接导致细胞死亡；或细胞异常分裂且DNA分配不均(加斯科因(Gascoigne)和泰勒(Taylor)(2008)癌症细胞(Cancer Cell)14：111-122；里德(Rieder)和马亚托(Maiato)(2004)发育细胞学(Dev Cell)7：637-651；威弗维尔(Weaver)和克利夫兰(Cleveland)(2005)癌症细胞8：7-12)。在此失败分裂后，细胞可继续循环或经历细胞周期停滞或死亡。此在用抗有丝分裂剂治疗后的结果多样性已显示取决于细胞类型以及所用抗有丝分裂剂的浓度(加斯科因和泰勒(2008)癌症细胞14：111-122；奥尔特(Orth)等人，(2008)分子癌症治疗学(Mol Cancer Ther)7：3480-3489；时(Shi)等人，(2008)癌症研究68：3269-3276)。

延长的有丝分裂停滞模型表明，抗肿瘤效应需要持续高浓度的药物。使用每周一次紫杉烷疗法(其与每三周一次紫杉烷疗法的时间表具有相当的功效)的发现表明，拆分所投与药物的总剂量可获得相同效应。

与太平洋紫杉醇和多西他赛相关的毒性类似，且包括作为主要剂量限制性毒性的嗜中性白血球减少症以及显著周围神经病变。事实上，在经重度预治疗的患者中通常减小剂量以减轻这些毒性的严重程度。在临床研究中，剂量减小并未减小药剂的临床反应，此表明最优生物学剂量可能低于最大耐受剂量(萨米宁(Salminen)等人(1999)临床肿瘤学杂志(J Clin Oncol)17：1127)。业内已更常使用每周投与紫杉烷，因为临床数据证实骨髓抑制降低且临床反应未减小(冈萨雷斯-安古洛(Gonzalez-Angulo)等人(2008)临床肿瘤学杂志26：1585)。在乳癌研究中，每周一次太平洋紫杉醇显示比每三周一次给药好的反应率(塞德曼(Seidman)等人，临床肿瘤学杂志26：1642(2008))。然而，每周一次太平洋紫杉醇已显示比每三周一次时间表严重的神经病变。

细胞分裂周期还涉及各种蛋白质激酶，这些激酶在癌细胞中通常过表达。例如，极光A激酶是参与若干肿瘤类型的发病机制的关键有丝分裂调节剂。极光激酶首先是在酵母(Ipl1)、爪蟾(Xenopus)(Eg2)和果蝇(Drosophila)(极光)中识别，其是有丝分裂的关键调节剂。(欧洲分子生物学组织期刊(Embo J)(1998)17，5627-5637；遗传学(Genetics)(1993)135，677-691；细胞(Cell)(1995)81，95-105；细胞科学杂志(J Cell Sci)(1998)111(Pt5)，557-572)。在人类中，极光激酶存在三种同种型，包括极光A、极光B和极光C。极光A和极光B通过有丝分裂在细胞的正常进展中发挥关键作用，而极光C的活性在很大程度上局限于减数分裂细胞。极光A和极光B在结构上密切相关。其催化结构域位于C-末端，其中二者仅相差几个氨基酸。在其非催化性N-末端结构域中差异较大。极光A与极光B在此区域中的序列差异使得其与不同蛋白质配偶体相互作用，从而使得这些激酶可在有丝分裂细胞中具有独特亚细胞定位和功能。

尽管极光B激酶和极光A激酶二者均是极光激酶家族的成员，但其在有丝分裂过程期间具有不同作用。在正常细胞有丝分裂过程中，细胞组织两极纺锤体和两个放射状微管阵列，每一阵列在一端集中到纺锤体极且在另一端与染色体相连。在姊妹染色单体即将分离到子代细胞中之前，染色体布置成直线(‘中期板’)。此组织两极有丝分裂纺锤体和完全对齐染色体的过程用于确保细胞的整套染色体在有丝分裂期间的完整性。

极光A基因(AURKA)定位于染色体20q13.2上，其在众多种肿瘤类型中通常以高发生率扩增或过表达。(欧洲分子生物学组织期刊(1998)17，3052-3065；国际癌症杂志(Int JCancer)(2006)118，357-363；细胞生物学杂志(J Cell Biol)(2003)161，267-280；分子癌症治疗学(2007)6，1851-1857；国立癌症研究所杂志(2002)94，1320-1329)。已将增加的极光A基因表达与癌症的病因学和恶化的预后相关联。(国际肿瘤学杂志(Int J Oncol)(2004)25，1631-1639；癌症研究(2007)67，10436-10444；临床癌症研究(2004)10，2065-2071；临床癌症研究(2007)13，4098-4104；国际癌症杂志(2001)92，370-373；英国癌症杂志(Br J Cancer)(2001)84，824-831；国立癌症研究所杂志(2002)94，1320-1329)。此概念已在实验模型中得到支持，从而证实极光A过表达导致致癌转化。(癌症研究(2002)62，4115-4122；分子癌症研究(Mol Cancer Res)(2009)7，678-688；肿瘤学(Oncogene)(2006)25，7148-7158；细胞研究(Cell Res)(2006)16，356-366；肿瘤学(2008)27，4305-4314；自然-遗传学(Nat Genet)(1998)20，189-193)。人们怀疑极光A激酶的过表达导致极光A与其调节配偶体的间的化学计量失衡，从而引起染色体不稳定和后续转化事件。极光A的潜在致癌作用已使得对靶向此激酶用于治疗癌症相当感兴趣。

作为有丝分裂的关键调节剂，极光A在有丝分裂启动和细胞通过有丝分裂正常进展中具有至关重要的作用。(自然评论：分子细胞生物学(Nat Rev Mol Cell Biol)(2003)4，842-854；发育生物学当代课题(Curr Top Dev Biol)(2000)49，331-42；自然评论：分子细胞生物学(2001)2(1)，21-32)。在正常细胞周期期间，极光A激酶首先在G2阶段表达，其中其定位到中心体且在中心体成熟和分离以及在细胞进入有丝分裂中发挥作用。在有丝分裂细胞中，极光A激酶主要定位到中心体和初期有丝分裂纺锤体的近端部分。在此处其与一组不同蛋白质相互作用并将其磷酸化，所述蛋白质在有丝分裂纺锤体极和纺锤体的形成、纺锤体在着丝点处到姊妹染色单体的附接、随后的染色体对齐和分离、纺锤体组装检查点和细胞质分裂中共同起作用。(细胞科学杂志(2007)120，2987-2996；细胞生物学发展趋势(Trends Cell Biol)(1999)9，454-459；自然评论：分子细胞生物学(2003)4，842-854；细胞生物学发展趋势(2005)15，241-250)。

尽管选择性抑制极光A激酶导致延迟有丝分裂启动(生物化学期刊(The Journal ofbiological chemistry)(2003)278，51786-51795)，但通常细胞尽管具有无活性极光A激酶却仍进入有丝分裂。已选择性抑制极光A激酶的细胞显示多种有丝分裂缺陷，包括异常有丝分裂纺锤体(单极或多极纺锤体)和染色体对齐过程中的缺陷。随着时间流逝，单极和多极纺锤体可分解形成两个相对纺锤体极，但这些缺陷中的一些可经由缺陷型有丝分裂立即导致细胞死亡。尽管由极光A激酶抑制所致的纺锤体缺陷可能借助活化纺锤体组装检查点而诱导有丝分裂延迟，但细胞最终以接近未处理细胞的频率分裂。(分子细胞生物学(2007)27(12)，4513-25；细胞周期(2008)7(17)，2691-704.；分子癌症治疗学(2009)8(7)，2046-56.)。此不适当的细胞分裂在由于缺少极光A激酶功能所致的对纺锤体组装检查点的缓慢作用抑制后出现。(细胞周期(2009)8(6)，876-88)。在不存在极光A激酶功能时形成的两极纺锤体通常显示染色体对齐和分离缺陷，包括中期的染色体集合缺陷、后期的落后染色体和末期桥。

与染色体分离缺陷一致，经极光A激酶的选择性抑制剂MLN8054处理的细胞发生随时间而增强的非整倍性。在经由缺陷型有丝分裂反复继代后，经MLN8054处理的细胞通常将经历衰老，即具有独特形态学特征的不可逆生长停滞。(分子癌症研究(2010)8(3)，373-84)。在一些细胞系中，MLN8054处理的细胞退出有丝分裂并活化p53依赖性有丝分裂后G1检查点，其随后诱导p21和Bax，从而导致G1停滞且随后诱导细胞凋亡。(分子癌症治疗学(Mol.Cancer Ther)(2009)8(7)，2046-56)。一些细胞也可退出有丝分裂而不发生细胞质分裂。这些细胞进入细胞周期的G1期且正常DNA含量倍增，且因此称作G1四倍体细胞。最后，一些细胞可分裂，但却伴随严重的染色体分裂缺陷(分子细胞生物学(2007)27(12)，4513-25)。在后两种结果中，异常有丝分裂导致引起细胞死亡或停滞的有害的非整倍性。或者，这些细胞中的一部分可耐受这些最终结果并再次进入细胞周期，因为已证实非整倍性是肿瘤细胞生长的抑制剂也是其促进剂。

考虑到参与驱动细胞周期的蛋白质激酶的重要性，如果可研发出靶向这些激酶的更有效治疗方案将是有益的。具体来说，与抗有丝分裂剂组合的治疗方案可有助于患有细胞增生性病症的患者，且甚至有可能降低复发率或克服有时在这些患者中观察到的对特定抗癌剂的抗性。

药物耐受性和副作用的盛行率在编制用于治疗细胞增生性病症的剂量和时间表选择中是重要考虑因素。举例来说，需要使用导致严重不良事件(例如嗜中性白血球减少症)的治疗剂(例如紫杉烷)的治疗可由于患者顺应性不足或由于无法向患者投与有效治疗剂量而无效。类似地，在较长时段中产生活性成份的较高有效浓度的治疗可提供增加的治疗功效。因此，业内需要新颖癌症治疗方案(包括组合疗法)，其避免或改善因毒性导致的严重副作用，同时通过实现改良的暴露功效来提供增加的治疗功效。

附图说明

图1显示阿立塞替(alisertib)与太平洋紫杉醇的组合在NCI-H69小细胞肺癌肿瘤模型中的抗肿瘤活性(平均肿瘤体积随时间的变化)。

图2显示阿立塞替与太平洋紫杉醇的组合在NCI-H82小细胞肺癌肿瘤模型中的抗肿瘤活性(平均肿瘤体积随时间的变化)。

图3显示阿立塞替与太平洋紫杉醇的组合在CTG-0166原发性小细胞肺癌肿瘤模型中的抗肿瘤活性(平均肿瘤体积随时间的变化)。

具体实施方式

1.一般说明

如上文所论述，业内仍需要提供用于治疗癌症的替代性疗法，尤其那些避免或改善现有疗法的严重副作用者。尽管极光A激酶的选择性抑制剂与紫杉烷的组合已显示加性和协同性抗肿瘤活性，但嗜中性白血球减少症仍是常见剂量限制性毒性。

本发明者已发现，将标准每周太平洋紫杉醇剂量从约80mg/m²降低到约60mg/m²允许实现显著较高的阿立塞替(MLN8237)剂量，且具有可接受的耐受性特征而不损失功效。约10mg BID(每天两次)的阿立塞替剂量是可与约80mg/m²太平洋紫杉醇的标准每周剂量组合实现的最大耐受剂量。意外的是，在将每周太平洋紫杉醇剂量降低到约60mg/m²时，可耐受高达约40mg BID的更高的阿立塞替剂量与太平洋紫杉醇的组合。

因此，本发明涉及治疗细胞增生性病症的方法，其包含向有需要的患者投与极光A激酶的选择性抑制剂且同时或依序投与紫杉烷(例如太平洋紫杉醇或多西他赛)，其中每一药剂的量在组合使用时是治疗有效的。

2.定义

如本文所用，术语“细胞增生性病症”和“癌症”是指以以下为特征的细胞病症：不受控制或失调的细胞增生、降低的细胞分化、侵入周围组织和/或在异位位点建立新生长的不适当能力。术语“细胞增生性病症”和“癌症”包括(但不限于)实体肿瘤和血源性肿瘤。术语“细胞增生性病症”和“癌症”涵盖皮肤、组织、器官、骨、软骨、血液和血管的疾病。术语“细胞增生性病症”和“癌症”进一步涵盖原发性和转移性癌症。如本文所用，术语“细胞增生性病症”包括(但不限于)癌性过度增生性病症(例如，脑癌、肺癌、鳞状细胞癌、膀胱癌、胃癌、胰脏癌、乳癌、头癌、颈癌、肾脏癌症、肝癌、肾癌、卵巢癌、前列腺癌、结肠直肠癌、结肠癌、表皮样癌、食道癌、睾丸癌、妇科癌症或甲状腺癌、急性骨髓性白血病、多发性骨髓瘤、间皮瘤、非小细胞肺癌(NSCLC)、神经母细胞瘤和急性淋巴细胞性白血病(ALL))；非癌性过度增生性病症(例如，皮肤的良性增生(例如，牛皮癣)、再狭窄和良性前列腺肥大(BPH))；和与血管发生或血管生成相关的疾病(例如，肿瘤血管生成、血管瘤、神经胶质瘤、黑色素瘤、卡波西氏肉瘤(Kaposi’s sarcoma)和卵巢癌、乳癌、肺癌、胰脏癌、前列腺癌、结肠癌和表皮样癌)。

如本文所用，术语“患者”意指动物，优选地哺乳动物，且最优选地人类。在一些实施例中，患者在根据本发明方法开始治疗之前已经药剂(例如，极光A激酶选择性抑制剂或紫杉烷)治疗。在一些实施例中，患者是具有发生或经历增生性病症复发的风险的患者。

表述“治疗有效的”和“治疗效应”是指包括(但不限于)对本文所论述的增生性病症的症状的治疗或改善的益处。应了解，药剂的治疗有效量或提供治疗效应所需的量将视预期应用(活体外或活体内)或所治疗的个体和疾病状况(例如，待治疗病况的严重性、特定抑制剂、投与途径以及个别患者的年龄、体重、一般健康情况和反应)而变化，其可由所属领域的技术人员容易地确定。举例来说，与一定量的紫杉烷组合的极光A激酶的选择性抑制剂的量如果足以实现治疗或改善本文所论述增生性病症的症状，那么是治疗有效的。

表述“预防有效的”和“预防效应”是指包括(但不限于)对本文所论述增生性病症的症状的预防的益处。应了解，药剂的预防有效量或提供预防效应所需的量将视预期应用(活体外或活体内)或所预防个体和疾病状况(例如，待预防病况的严重性、特定抑制剂、投与途径以及个别患者的年龄、体重、一般健康情况和反应)而变化，其可由所属领域的技术人员容易地确定。举例来说，与一定量的紫杉烷组合的极光A激酶的选择性抑制剂的量如果足以实现本文所论述增生性病症的症状的预防，那么是预防有效的。

如本文所用，术语“极光A激酶”是指参与有丝分裂进展的丝氨酸/苏氨酸激酶。极光A激酶还称作AIK、ARK1、AURA、BTAK、STK6、STK7、STK15、极光2、MGC34538和AURKA。众多种在细胞分裂中发挥作用的细胞蛋白质是极光A激酶的磷酸化底物，包括(但不限于)p53、TPX-2、XIEg5(在爪蟾中)和D-TACC(在果蝇中)。极光A激酶本身也是自身磷酸化(例如在Thr288)的底物。优选地，极光A激酶是人类极光A激酶。

术语“极光A激酶的抑制剂”或“极光A激酶抑制剂”用于表示能与极光A激酶相互作用并抑制其酶活性的化合物。抑制极光A激酶酶活性意指降低极光A激酶磷酸化底物肽或蛋白质的能力。在不同实施例中，极光A激酶活性的所述降低是至少约75％、至少约90％、至少约95％或至少约99％。在不同实施例中，降低极光A激酶酶活性所需极光A激酶抑制剂的浓度低于约1μM、低于约500nM、低于约100nM或低于约50nM。优选地，抑制极光A激酶酶活性所需浓度低于抑制极光B激酶酶活性所需的抑制剂浓度。在各种实施例中，降低极光A激酶酶活性所需极光A激酶抑制剂的浓度是降低极光B激酶酶活性所需抑制剂浓度的至多约2分之一、至多约5分之一、至多约10分之一、至多约20分之一、至多约50分之一、至多约100分之一、至多约500分之一或至多约1000分之一。

抑制极光A和抑制极光B产生显著不同的细胞表现型。(国家科学院院刊(2007)104：4106；分子癌症治疗学(2009)8(7)，2046-56；生物化学杂志(Chem Biol.)(2008)15(6)552-62)。举例来说，在不存在极光B抑制时抑制极光A导致有丝分裂指数增加，如通过量化丝氨酸10上的磷酸化组蛋白H3(pHisH3)所测量。pHisH3是极光B在生理学系统(例如完整细胞)中的唯一底物。与之相比，抑制极光B或双重抑制极光A和极光B使pHisH3减少。因此，如本文所用，术语“极光A激酶的选择性抑制剂”或“选择性极光A激酶抑制剂”是指在有效抗肿瘤浓度下展现极光A激酶抑制剂表现型的抑制剂。在一些实施例中，在以血浆中的游离部分调节浓度(C_ave)等效于以最大耐受剂量(MTD)在人类血浆中实现的游离部分调节浓度的剂量投与小鼠时，选择性极光A激酶抑制剂引起瞬时有丝分裂延迟，如通过量化pHisH3所测量。如本文所用，“游离部分调节浓度”是指游离药物(未结合蛋白质)的血浆浓度。

如本文所用，术语“紫杉烷”是指一类由紫杉属(Taxus(红豆杉))植物产生的二萜。紫杉烷的实例包括(但不限于)太平洋紫杉醇多西他赛和(太平洋紫杉醇注射剂)。

如本文所用，术语“组合”是指在治疗同一患者的同一疾病或病况中使用选择性极光A激酶抑制剂和紫杉烷二者。如下文进一步描述，除非明确指明，否则术语“组合”不限制投与选择性极光A激酶抑制剂或紫杉烷的定时。

如本文所用，术语“约(about)”意指大约(approximately)、在......的附近(in the regionof)、大概(roughly)或大约(around)。在术语“约”结合数值范围使用时，其通过将边界扩展到高于和低于所述数值来修饰此范围。通常，本文使用术语“约”将数值修饰为高于和低于所述数值10％的变化。

如本文所用，术语“包含”意指“包括(但不限于)”。

如本文所用，术语“脂肪族”或“脂肪族基团”意指经取代或未经取代的直链、具支链或环状C_1-12烃，其完全饱和或其含有一或多个不饱和单元但其不为芳香族。举例来说，适宜脂肪族基团包括经取代或未经取代的直链、具支链或环状烷基、烯基、炔基和其杂合体，例如(环烷基)烷基、(环烯基)烷基或(环烷基)烯基。

单独或作为更大部分中的一部分使用的术语“环脂肪族”是指具有3元到约14元的饱和或部分不饱和环状脂肪族环系统，其中所述脂肪族环系统任选经取代。在一些实施例中，环脂肪族是具有3-8个或3-6个环碳原子的单环烃。非限制性实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环庚基、环庚烯基、环辛基、环辛烯基和环辛二烯基。在一些实施例中，环脂肪族是具有6-12个、6-10个或6-8个环碳原子的桥接或稠合二环烃，其中所述二环环系统中的任一个别环具有3-8个成员。

在一些实施例中，环脂肪族环上的两个相邻取代基连同中间环原子一起形成具有0-3个选自由O、N和S组成的群组的环杂原子的任选经取代的稠合5元到6元芳香族环或3元到8元非芳香族环。因此，术语“环脂肪族”包括稠合到一或多个芳基、杂芳基或杂环基环的脂肪族环。非限制性实例包括二氢茚基、5，6，7，8-四氢喹喏啉基、十氢萘基或四氢萘基，其中所述基团或附接点位于脂肪族环上。术语“环脂肪族”可与术语“碳环(carbocycle)”、“碳环基(carbocyclyl)”、“碳环(carbocyclo)”或“碳环(carbocyclic)”互换使用。

单独或作为更大部分中的一部分使用的术语“芳基”和“芳-”(例如“芳烷基”、“芳烷氧基”或“芳氧基烷基”)是指包含1到3个环的C₆到C₁₄芳香族烃，每一环任选经取代。优选地，芳基是C_6-10芳基。芳基包括(但不限于)苯基、萘基和蒽基。在一些实施例中，芳基环上的两个相邻取代基连同中间环原子一起形成具有0-3个选自由O、N和S组成的群组的环杂原子的任选经取代的稠合5元到6元芳香族环或4元到8元非芳香族环。因此，如本文所用，术语“芳基”包括芳香族环稠合到一或多个杂芳基、环脂肪族或杂环基环的基团，其中所述基团或附接点位于芳香族环上。所述稠合环系统的非限制性实例包括吲哚基、异吲哚基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、二苯并呋喃基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、喹啉基、异喹啉基、噌啉基、酞嗪基、喹唑啉基、喹喏啉基、咔唑基、吖啶基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩恶嗪基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基、芴基、二氢茚基、菲啶基、四氢萘基、吲哚啉基、吩恶嗪基、苯并二恶烷基和苯并间二氧杂环戊烯基。芳基可为单环、二环、三环或多环，优选为单环、二环或三环，更优选为单环或二环。术语“芳基”可与术语“芳基”、“芳基部分”和“芳基环”互换使用。

“芳烷基”或“芳基烷基”包含共价附接到烷基的芳基，此二者中的任一者独立地任选经取代。优选地，芳烷基是C_6-10芳基(C_1-6)烷基、C_6-10芳基(C_1-4)烷基或C_6-10芳基(C_1-3)烷基，包括(但不限于)苄基、苯乙基和萘基甲基。

单独或作为更大部分中的一部分使用的术语“杂芳基”和“杂芳-”(例如，杂芳烷基或“杂芳烷氧基”)是指具有5到14个环原子、优选5、6、9或10个环原子的基团；其具有6、10或14个以环状阵列共享的π电子，且除碳原子外具有1到4个杂原子。术语“杂原子”是指氮、氧或硫，且包括氮或硫的任何氧化形式以及碱性氮的任何季铵化形式。杂芳基包括(但不限于)噻吩基、呋喃基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、恶唑基、异恶唑基、恶二唑基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吲嗪基、嘌呤基、萘啶基和蝶啶基。在一些实施例中，杂芳基上的两个相邻取代基连同中间环原子一起形成具有0-3个选自由O、N和S组成的群组的环杂原子的任选经取代的稠合5元到6元芳香族环或4元到8元非芳香族环。因此本文所用，术语“杂芳基”和“杂芳-”亦包括杂芳香族环稠合到一或多个芳基、环脂肪族或杂环基环的基团，其中所述基团或附接点位于杂芳香族环上。非限制性实例包括吲哚基、异吲哚基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、二苯并呋喃基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、喹啉基、异喹啉基、噌啉基、酞嗪基、喹唑啉基、喹喏啉基、4H-喹嗪基、咔唑基、吖啶基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩恶嗪基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基和吡啶并[2，3-b]-1，4-恶嗪-3(4H)-酮。杂芳基可为单环、二环、三环或多环，优选为单环、二环或三环，更优选为单环或二环。术语“杂芳基”可与术语“杂芳基环”、“杂芳基”或“杂芳香族”互换使用，所述术语中的任一者包括任选经取代的环。术语“杂芳烷基”是指经杂芳基取代的烷基，其中烷基和杂芳基部分独立地任选经取代。

如本文所用，术语“杂环”、“杂环基”、“杂环基团”和“杂环环”可互换使用且是指稳定3元到7元单环或稠合7元到10元或桥接6元到10元二环杂环部分，其饱和或部分不饱和且除碳原子外具有一或多个、优选到4个如上文所定义的杂原子。在提及杂环的环原子使用时，术语“氮”包括经取代的氮。作为实例，在具有1-3个选自氧、硫或氮的杂原子的杂环基环中，氮可为N(如在3，4-二氢-2H-吡咯基中)、NH(如在吡咯烷基中)或⁺NR(如在N-经取代吡咯烷基中)。杂环环可在产生稳定结构的任一杂原子或碳原子处附接到其侧基，且任一环原子可任选经取代。所述饱和或部分不饱和杂环基团的实例包括(但不限于)四氢呋喃基、四氢噻吩基、吡咯烷基、吡咯烷酮基、哌啶基、吡咯啉基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基、十氢喹啉基、恶唑烷基、哌嗪基、二恶烷基、二氧戊环基、二氮呯基、氧氮呯基、硫氮呯基、吗啉基和奎宁环基。

在一些实施例中，杂环环上的两个相邻取代基连同中间环原子一起形成具有0-3个选自由O、N和S组成的群组的环杂原子的任选经取代的稠合5元到6元芳香族环或3元到8元非芳香族环。因此，术语“杂环”、“杂环基”、“杂环基环”、“杂环基”、“杂环部分”和“杂环基团”在本文中可互换使用且包括杂环基环稠合到一或多个芳基、杂芳基或环脂肪族环的基团，例如吲哚啉基、3H-吲哚基、色满基、菲啶基或四氢喹啉基，其中所述基团或附接点位于杂环基环上。杂环基可为单环、二环、三环或多环，优选为单环、二环或三环，更优选为单环或二环。术语“杂环基烷基”是指经杂环基取代的烷基，其中烷基和杂环基部分独立地任选经取代。

如本文所用，术语“部分不饱和”是指在环原子之间包括至少一个双键或三键的环部分。术语“部分不饱和”打算涵盖具有多个不饱和位点的环，但不打算包括如本文所定义的芳基或杂芳基部分。

术语“卤代脂肪族”、“卤代烷基”、“卤代烯基”和“卤代烷氧基”是指任选地经一或多个卤素原子取代的脂肪族基团、烷基、烯基或烷氧基。如本文所用，术语“卤素”或“卤基”意指F、Cl、Br或I。术语“氟代脂肪族”是指卤素为氟的卤代脂肪族。

术语“亚烷基”是指二价烷基。“亚烷基链”是聚亚甲基，即-(CH₂)_n-，其中n是正整数，优选1到6、1到4、1到3、1到2或2到3。经取代亚烷基链是一或多个亚甲基氢原子经取代基替代的聚亚甲基。适宜取代基包括下文针对经取代脂肪族基团描述的那些。亚烷基链也可在一或多个位置经脂肪族基团或经取代脂肪族基团取代。

如本文所用，术语“经取代”意指指定部分的氢基经特定取代基的基团替代，前提是取代产生稳定或化学上可行的化合物。本文所用片语“一或多个取代基”是指取代基的数目等于1到基于可用键结位点的数目可能的最大取代基数目，前提是满足上述稳定性和化学可行性条件。除非另外指明，否则任选经取代的基团可在基团的每一可取代位置具有取代基，且取代基可相同或不同。

芳基(包括芳烷基、芳烷氧基、芳氧基烷基等中的芳基部分)或杂芳基(包括杂芳烷基和杂芳烷氧基等中的杂芳基部分)可含有一或多个取代基。芳基或杂芳基的不饱和碳原子上的适宜取代基的实例包括-卤基、-NO₂、-CN、-R*、-C(R*)＝C(R*)₂、-C≡C-R*、-OR*、-SR^o、-S(O)R^o、-SO₂R^o、-SO₃R^o、-SO₂N(R⁺)₂、-N(R⁺)₂、-NR⁺C(O)R*、-NR⁺C(O)N(R⁺)₂、-NR⁺CO₂R^o、-O-CO₂R*、-OC(O)N(R⁺)₂、-O-C(O)R*、-CO₂R*、-C(O)-C(O)R*、-C(O)R*、-C(O)N(R⁺)₂、-C(O)N(R⁺)C(＝NR⁺)-N(R⁺)₂、-N(R⁺)C(＝NR⁺)-N(R⁺)-C(O)R*、-C(＝NR⁺)-N(R⁺)₂、-C(＝NR⁺)-OR*、-N(R⁺)-N(R⁺)₂、-N(R⁺)C(＝NR⁺)-N(R⁺)₂、-NR⁺SO₂R^o、-NR⁺SO₂N(R⁺)₂、-P(O)(R*)₂、-P(O)(OR*)₂、-O-P(O)-OR*和-P(O)(NR⁺)-N(R⁺)₂；或两个相邻取代基连同其中间原子一起形成具有0-3个选自由N、O和S组成的群组的环原子的5-6元不饱和或部分不饱和环。

芳基(包括芳烷基、芳烷氧基、芳氧基烷基等中的芳基部分)或杂芳基(包括杂芳烷基和杂芳烷氧基等中的杂芳基部分)可含有一或多个取代基。芳基或杂芳基的不饱和碳原子上的适宜取代基的实例包括-卤基、-NO₂、-CN、-R*、-C(R*)＝C(R*)₂、-C≡C-R*、-OR*、-SR^o、-S(O)R^o、-SO₂R^o、-SO₃R^o、-SO₂N(R⁺)₂、-N(R⁺)₂、-NR⁺C(O)R*、-NR⁺C(O)N(R⁺)₂、-NR⁺CO₂R^o、-O-CO₂R*、-OC(O)N(R⁺)₂、-O-C(O)R*、-CO₂R*、-C(O)-C(O)R*、-C(O)R*、-C(O)N(R⁺)₂、-C(O)N(R⁺)C(＝NR⁺)-N(R⁺)₂、-N(R⁺)C(＝NR⁺)-N(R⁺)-C(O)R*、-C(＝NR⁺)-N(R⁺)₂、-C(＝NR⁺)-OR*、-N(R⁺)-N(R⁺)₂、-N(R⁺)C(＝NR⁺)-N(R⁺)₂、-NR⁺SO₂R^o、-NR⁺SO₂N(R⁺)₂、-P(O)(R*)₂、-P(O)(OR*)₂、-O-P(O)-OR*和-P(O)(NR⁺)-N(R⁺)₂；或两个相邻取代基连同其中间原子一起形成具有0-3个选自由N、O和S组成的群组的环原子的5-6元不饱和或部分不饱和环。

每一R⁺独立地为氢或任选经取代的脂肪族基团、芳基、杂芳基或杂环基，或同一氮原子上的两个R⁺连同所述氮原子一起形成除所述氮原子外具有0-2个选自N、O和S的环杂原子的5-8元芳香族或非芳香族环。每一R*独立地为氢或任选经取代的脂肪族基团、芳基、杂芳基或杂环基。每一R^o是任选经取代的脂肪族或芳基。

脂肪族基团或非芳香族杂环可经一或多个取代基取代。脂肪族基团或非芳香族杂环的饱和碳上的适宜取代基的实例包括(但不限于)上文针对芳基或杂芳基的不饱和碳列示的那些和以下：＝O、＝S、＝C(R*)₂、＝N-N(R*)₂、＝N-OR*、＝N-NHC(O)R*、＝N-NHCO₂R^o、＝N-NHSO₂R^o或＝N-R*，其中每一R*和R^o如上文所定义。

非芳香族杂环的氮原子上的适宜取代基包括-R*、-N(R*)₂、-C(O)R*、-CO₂R*、-C(O)-C(O)R*、-C(O)CH₂C(O)R*、-SO₂R*、-SO₂N(R*)₂、-C(＝S)N(R*)₂、-C(＝NH)-N(R*)₂和-NR*SO₂R*；其中每一R*如上文所定义。

除非另有说明，否则本文所绘示结构打算包括不同之处仅在于存在一或多个同位素富集原子的化合物。举例来说，具有本发明结构但氢原子经氘或氚替代或碳原子经¹³C或¹⁴C富集碳替代的化合物在本发明范围内。

所属领域的技术人员应了解，本文所述的某些化合物可以互变异构形式存在，所述化合物的所有所述互变异构形式均在本发明范围内。除非另有说明，否则本文所绘示结构也打算包括所述结构的所有立体化学形式；即每一不对称中心的R和S构型。因此，本发明化合物的单一立体化学异构物以及镜像异构和非镜像异构混合物在本发明范围内。

3.具体实施方式

极光A激酶的选择性抑制剂

在本发明的方法、医药组合物和试剂盒中可使用任何能选择性抑制极光A激酶酶活性的分子。在一些实施例中，选择性极光A激酶抑制剂是小分子量化合物。具体来说，极光A激酶的选择性抑制剂包括本文所述的化合物以及诸如以下中所揭示的化合物：美国公开案第2008/0045501号、美国专利第7,572,784号、WO05/111039、WO08/021038、美国专利第7,718,648号、WO08/063525、美国公开案第2008/0167292号、美国专利第8,026,246号、WO10/134965、美国公开案第2010/0310651号、WO11/014248、美国公开案第2011/0039826号和美国公开案第2011/0245234号，每一者以全文引用的方式并入本文中；4-{[9-氯-7-(2-氟-6-甲氧基苯基)-5H-嘧啶并[5，4-d][2]苯并氮呯-2-基]氨基}-2-甲氧基苯甲酸钠、KW-2449(日本共和(Kyowa))、ENMD-2076(英创远达公司(EntreMed))和MK-5108(威泰克斯(Vertex)/默克公司(Merck))。这些化合物中任一者的溶剂化和水合形式也适用于本发明的方法、医药组合物和试剂盒中。所述化合物中任一者的医药上可接受的盐和所述盐的溶剂化和水合形式也适用于本发明的方法、医药组合物和试剂盒中。这些选择性极光A激酶抑制剂可以有机合成领域的技术人员熟知的多种方式来制备，包括(但不限于)本文所提及的参考文献中详细描述的合成方法。

可在活体外或活体内分析极光A激酶抑制剂的选择性结合和/或抑制极光A激酶的能力。活体外分析包括用以测定对极光A激酶磷酸化底物蛋白或肽的能力的选择性抑制的分析。替代性活体外分析量化化合物选择性结合极光A激酶的能力。选择性抑制剂结合可通过在结合之前对抑制剂进行放射性标记、分离抑制剂/极光A激酶复合物和测定所结合放射性标记的量来测量。或者，选择性抑制剂结合可通过运行竞争性实验来测定，其中将新抑制剂与结合到已知放射性配体的极光A激酶一起培育。也可分析化合物影响由极光A激酶活性介导的细胞或生理学功能的能力。为评价对极光A激酶相对于极光B激酶的选择性，也可使用类似于上文针对极光A激酶所述的分析的分析在活体外和活体内分析抑制剂选择性结合和/或抑制极光B激酶的能力。可在活体外和活体内通过对pHisH3的免疫荧光检测来分析抑制剂在不存在极光B激酶抑制时抑制极光A激酶的能力。(国家科学院院刊(2007)104，4106)。对这些活性中每一者的分析均是业内已知的。

在一些实施例中，选择性极光A激酶抑制剂表示为式(V)：

或其医药上可接受的盐；

其中：

R^a选自由以下组成的群组：C_1-3脂肪族、C_1-3氟代脂肪族、-R¹、-T-R¹、-R²和-T-R²；

T是任选地经氟取代的C_1-3亚烷基链；

R¹是任选经取代的芳基、杂芳基或杂环基；

R²选自由以下组成的群组：卤基、-C≡C-R³、-CH＝CH-R³、-N(R⁴)₂和-OR⁵；

R³是氢或任选经取代的脂肪族基团、芳基、杂芳基或杂环基；

每一R⁴独立地为氢或任选经取代的脂肪族基团、芳基、杂芳基或杂环基；或同一氮原子上的两个R⁴连同所述氮原子一起形成除氮原子外具有0-2个选自N、O和S的环杂原子的任选经取代的5元到6元杂芳基或4元到8元杂环基环；

R⁵是氢或任选经取代的脂肪族基团、芳基、杂芳基或杂环基；且

R^b选自由以下组成的群组：氟、氯、-CH₃、-CF₃、-OH、-OCH₃、-OCF₃、-OCH₂CH₃和-OCH₂CF₃。

在一些实施例中，R¹是任选地经一个或两个独立选自由以下组成的群组的取代基取代的5元或6元芳基、杂芳基或杂环基环：卤基、C_1-3脂肪族和C_1-3氟代脂肪族。在某些实施例中，R¹是任选地经一个或两个独立选自由以下组成的群组的取代基取代的苯基、呋喃基、吡咯烷基或噻吩基环：卤基、C_1-3脂肪族和C_1-3氟代脂肪族。

在一些实施例中，R³是氢、C_1-3脂肪族、C_1-3氟代脂肪族或-CH₂-OCH₃。

在一些实施例中，R⁵是氢、C_1-3脂肪族或C_1-3氟代脂肪族。

在某些实施例中，R^a是卤基、C_1-3脂肪族、C_1-3氟代脂肪族、-OH、-O(C_1-3脂肪族)、-O(C_1-3氟代脂肪族)、-C≡C-R³、-CH＝CH-R³或任选经取代的吡咯烷基、噻吩基、呋喃基或苯基环，其中R³是氢、C_1-3脂肪族、C_1-3氟代脂肪族或-CH₂-OCH₃。在某些特定实施例中，R^a选自由以下组成的群组：氯、氟、C_1-3脂肪族、C_1-3氟代脂肪族、-OCH₃、-OCF₃、-C≡C-H、-C≡C-CH₃、-C≡C-CH₂OCH₃、-CH＝CH₂、-CH＝CHCH₃、N-甲基吡咯烷基、噻吩基、甲基噻吩基、呋喃基、甲基呋喃基、苯基、氟苯基和甲苯基。

表1提供式(V)化合物的具体实例的化学名称。

表1.式(V)化合物的实例

在一个实施例中，式(V)化合物是4-{[9-氯-7-(2-氟-6-甲氧基苯基)-5H-嘧啶并[5，4-d][2]苯并氮呯-2-基]氨基}-2-甲氧基苯甲酸(阿立塞替(MLN8237))或其医药上可接受的盐。在另一个实施例中，式(V)化合物是4-{[9-氯-7-(2-氟-6-甲氧基苯基)-5H-嘧啶并[5，4-d][2]苯并氮呯-2-基]氨基}-2-甲氧基苯甲酸钠。在另一个实施例中，式(V)化合物是4-{[9-氯-7-(2-氟-6-甲氧基苯基)-5H-嘧啶并[5，4-d][2]苯并氮呯-2-基]氨基}-2-甲氧基苯甲酸钠单水合物。在另一个实施例中，式(V)化合物是4-{[9-氯-7-(2-氟-6-甲氧基苯基)-5H-嘧啶并[5，4-d][2]苯并氮呯-2-基]氨基}-2-甲氧基苯甲酸钠多晶形式2，如美国公开案第2008/0167292号、美国专利第8,026,246号和美国公开案第2011/0245234号中所述，每一文献均以全文引用的方式并入本文中。

如本文所用，术语“医药上可接受的盐”是指那些在正确医学判断范围内适用于接触人类和低等动物组织而不会产生过度毒性、刺激、过敏反应等且具有相称的合理效益/风险比的盐。“医药上可接受的盐”意指本发明化合物的任何无毒性盐或酯盐，其在投与接受者后能直接或间接提供本发明化合物或其抑制活性代谢物或残余物。如本文所用，术语“其抑制活性代谢物或残余物”意指其代谢物或残余物也是极光A激酶的选择性抑制剂。

如果在医药组合物中使用极光A激酶的选择性抑制剂的医药上可接受的盐，那么所述盐优选衍生自无机或有机酸或碱。适宜盐的综述参见(例如)贝尔赫(Berge)等人，医药科学杂志(J.Pharm.Sci.)66：1-19(1977)和雷明顿：药学科学和实践(Remington：TheScience and Practice of Pharmacy)，第20版，编辑A.热纳罗(A.Gennaro)，利平科特威廉姆斯·威尔金斯(Lippincott Williams&Wilkins)，2000。

适宜酸加成盐的非限制性实例包括以下：乙酸盐、己二酸盐、藻酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、柠檬酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、环戊烷丙酸盐、双葡萄糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、富马酸盐、葡庚酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、已酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙磺酸盐、乳酸盐、马来酸盐、甲烷磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、草酸盐、双羟萘酸盐、果胶酯酸盐、过硫酸盐、3-苯基-丙酸盐、苦味酸盐、特戊酸盐、丙酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐和十一烷酸盐。

适宜碱加成盐包括(但不限于)铵盐、碱金属盐(例如钠盐和钾盐)、碱土金属盐(例如钙盐和镁盐)、与有机碱形成的盐(例如二环己基胺、N-甲基-D-葡萄糖胺、叔丁基胺、乙二胺、乙醇胺和胆碱)和与氨基酸(例如精氨酸、赖氨酸等)形成的盐。

此外，碱性含氮基团可用诸如以下等试剂季铵化：低碳烷基卤化物，例如甲基、乙基、丙基和丁基的氯化物、溴化物和碘化物；硫酸二烷基酯，例如硫酸二甲酯、硫酸二乙酯、硫酸二丁酯和硫酸二戊酯；长链卤化物，例如癸基、月桂基、肉豆蔻基和硬脂基的氯化物、溴化物和碘化物；芳烷基卤化物，例如苄基溴和苯乙基溴；和其它试剂。由此获得水或油可溶或可分散的产物。

极光A激酶的选择性抑制剂与紫杉烷的组合的剂量和投与

极光A激酶的选择性抑制剂的治疗有效量或适宜剂量取决于许多因素，包括待治疗病况的严重性、特定抑制剂、投与途径以及个别患者的年龄、体重、一般健康状况和反应。在某些实施例中，适宜剂量水平是实现有效暴露者，如通过增加的皮肤有丝分裂指数、或肿瘤有丝分裂细胞中降低的染色体对齐和纺锤体双极性、或癌症患者中有效暴露的其它标准量度所测量。在某些实施例中，适宜剂量水平是实现治疗反应者，如通过肿瘤消退、或疾病进展的其它标准量度、无进展存活或总体存活所测量。在其它实施例中，适宜剂量水平是实现此治疗反应且还使与治疗剂投与相关的任何副作用降至最低者。

极光A激酶的选择性抑制剂的呈单一或分次或多次剂量的适宜日剂量一般可在作为单一药剂的最大耐受剂量的约10％到约100％范围内。在某些实施例中，适宜剂量为作为单一药剂的最大耐受剂量的约15％到约100％。在一些其它实施例中，适宜剂量为作为单一药剂的最大耐受剂量的约25％到约90％。在一些其它实施例中，适宜剂量为作为单一药剂的最大耐受剂量的约30％到约80％。在一些其它实施例中，适宜剂量为作为单一药剂的最大耐受剂量的约40％到约75％。在一些其它实施例中，适宜剂量为作为单一药剂的最大耐受剂量的约45％到约60％。在其它实施例中，适宜剂量为作为单一药剂的最大耐受剂量的约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约100％、约105％或约110％。

阿立塞替的呈单一或分次或多次剂量的适宜日剂量一般可在每天约20mg到约120mg范围内。阿立塞替的呈单一或分次或多次剂量的其它适宜日剂量一般可在每天约40mg到约80mg范围内。阿立塞替的呈单一或分次或多次剂量的其它适宜日剂量一般可在每天约60mg到约80mg范围内。在某些实施例中，适宜剂量为每天两次约10mg到每天两次约40mg。在一些其它实施例中，适宜剂量为每天两次约20mg到每天两次约40mg。在一些其它实施例中，适宜剂量为每天两次约30mg到每天两次约50mg。在一些其它实施例中，适宜剂量为每天两次约30mg到每天两次约40mg。在一些其它实施例中，适宜剂量为每天两次约40mg到每天两次约50mg。在其它实施例中，适宜剂量为每天约20mg、约25mg、约30mg、约35mg、约40mg、约45mg、约50mg、约55mg、约60mg、约65mg、约70mg、约75mg、约80mg、约85mg、每天约90mg、每天约95mg、每天约100mg、每天约105mg、每天约110mg、每天约115mg或每天约120mg。在某些其它实施例中，适宜剂量为约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约35mg、约40mg、约45mg、约50mg、约55mg或约60mg，每天两次。

应了解，极光A激酶的选择性抑制剂的适宜剂量可在白天或夜晚的任何时间服用。在一些实施例中，极光A激酶的选择性抑制剂的适宜剂量是在早晨服用。在一些其它实施例中，极光A激酶的选择性抑制剂的适宜剂量是在晚上服用。在一些其它实施例中，极光A激酶的选择性抑制剂的适宜剂量是在早晨和晚上服用。应了解，极光A激酶的选择性抑制剂的适宜剂量可与食物一起或不与食物一起服用。在一些实施例中，极光A激酶的选择性抑制剂的适宜剂量是用餐时服用。在一些实施例中，极光A激酶的选择性抑制剂的适宜剂量是空腹服用。

太平洋紫杉醇的呈单一或分次或多次剂量的适宜每周剂量一般可在每周约40mg/m²到约80mg/m²范围内。太平洋紫杉醇的呈单一或分次或多次剂量的其它适宜每周剂量一般可在每周约50mg/m²到约75mg/m²范围内。太平洋紫杉醇的呈单一或分次或多次剂量的其它适宜每周剂量一般可在每周约50mg/m²到约70mg/m²或每周约60mg/m²到约70mg/m²的范围内。在其它实施例中，适宜每周剂量为每周约40mg/m²、约45mg/m²、约50mg/m²、约55mg/m²、约60mg/m²、约65mg/m²、约70mg/m²或约75mg/m²。

另外，应了解，可投与这些治疗剂中任一者的频率可为在以下时段中一次或一次以上：约2天、约3天、约4天、约5天、约6天、约7天、约8天、约9天、约10天、约20天、约28天、约1周、约2周、约3周、约4周、约1个月、约每2个月、约每3个月、约每4个月、约每5个月、约每6个月、约每7个月、约每8个月、约每9个月、约每10个月、约每11个月、约每年、约每2年、约每3年、约每4年或约每5年。

举例来说，可在特定时段内每天、每周、每两周或每个月投与药剂。在一些实施例中，可在三天时段内每天投与一定量的选择性极光A激酶抑制剂。或者，可在特定时段内每天、每周、每两周或每个月投与药剂，之后是非治疗的特定时段。在一些实施例中，可在三天内每天投与一定量的选择性极光A激酶抑制剂，之后四天不投与，之后在三天内每天投与，之后再四天不投与，之后在三天内每天投与，之后再四天不投与。在一些实施例中，可在三周时段内每周投与一定量的紫杉烷。

在一些实施例中，将选择性极光A激酶抑制剂和紫杉烷周期性投与患者。周期疗法涉及在一段时间内投与第一药剂(例如，第一预防性或治疗性药剂)，之后在一段时间内投与第二药剂和/或第三药剂(例如，第二和/或第三预防性或治疗性药剂)且重复此依序投与。周期疗法可降低对一或多种疗法的抗性的发生，避免或降低一种疗法的副作用和/或改良治疗的功效。

在一些实施例中，在投与药剂的治疗时段后是特定持续时间的非治疗时段，在此期间不向患者投与治疗剂。在此非治疗时段后可是一系列在相同或不同时间长度内的相同或不同频率的后续治疗和非治疗时段。在一些实施例中，治疗与非治疗时段交替。应理解，周期疗法中的治疗时段可继续直到患者实现完全反应或部分反应为止，此时可停止治疗。或者，周期疗法中的治疗时段可继续直到患者实现完全反应或部分反应为止，此时治疗时段可继续进行特定周期数。在一些实施例中，不论患者反应如何，治疗时段的长度可为特定周期数。在一些其它实施例中，治疗时段的长度可继续直到患者复发为止。

举例来说，可每天两次投与一定量的选择性极光A激酶抑制剂达3天，之后11天不治疗，之后3天每天两次投与。在一些实施例中，治疗与非治疗时段交替。在其它实施例中，在投与第一量的极光A激酶的选择性抑制剂的第一治疗时段后可为投与相同或不同量的极光A激酶的相同或不同选择性抑制剂的另一治疗时段。在第二治疗时段后可为其它治疗时段。在治疗和非治疗时段期间，可向患者投与一或多种其它治疗剂。

在一个实施例中，按28天投药时间表投与，其中按时间表每天两次投与选择性极光A激酶抑制剂达3天，之后4天不投与，每周重复持续三周；同时每周一次投与第一剂量的太平洋紫杉醇，每周重复持续3周(每天两次选择性极光A激酶抑制剂是在28天时间表的第1天、第2天、第3天、第8天、第9天、第10天、第15天、第16天和第17天给予；且每周太平洋紫杉醇是在第1天、第8天和第15天给予)。在一些实施例中，用于本文所述选择性极光A激酶抑制剂的投药时间表是用于投与阿立塞替的投药时间表。

在另一个实施例中，按28天投药时间表投与，其中按时间表每天两次投与选择性极光A激酶抑制剂达2天，之后5天不投与，每周重复持续三周；同时每周一次投与第一剂量的太平洋紫杉醇，每周重复持续3周(每天两次选择性极光A激酶抑制剂是在28天时间表的第1天、第2天、第8天、第9天、第15天和第16天给予；且每周太平洋紫杉醇的在第1天、第8天和第15天给予)。在一些实施例中，用于本文所述选择性极光A激酶抑制剂的投药时间表是用于投与阿立塞替的投药时间表。

在一个实施例中，按28天投药时间表投与，其中按时间表每天两次投与选择性极光A激酶抑制剂达3天，之后4天不投与，每周重复持续两周；同时每周一次投与第一剂量的太平洋紫杉醇，每周重复持续3周(每天两次选择性极光A激酶抑制剂是在28天时间表的第1天、第2天、第3天、第8天、第9天和第10天给予；且每周太平洋紫杉醇是在第1天、第8天和第15天给予)。在一些实施例中，用于本文所述选择性极光A激酶抑制剂的投药时间表是用于投与阿立塞替的投药时间表。

在另一个实施例中，按28天投药时间表投与，其中按时间表每天两次投与选择性极光A激酶抑制剂达3天，之后11天不投与，重复一次；同时每周一次投与第一和第三剂量的太平洋紫杉醇，每周重复持续3周(每天两次选择性极光A激酶抑制剂是在28天时间表的第1天、第2天、第3天、第15天、第16天和第17天给予；且每周太平洋紫杉醇是在第1天、第8天和第15天给予)。在一些实施例中，用于本文所述选择性极光A激酶抑制剂的投药时间表是用于投与阿立塞替的投药时间表。

极光A激酶的选择性抑制剂可通过所属领域的技术人员已知的任一方法来投与。举例来说，极光A激酶的选择性抑制剂可以组合物形式来投与，在一个实施例中以极光A激酶的选择性抑制剂与医药上可接受的载剂(例如本文所述的那些)的组合物来投与。优选地，医药组合物适于经口投与。在一些实施例中，医药组合物是用于经口投与的片剂，例如肠包衣片剂。这些片剂描述于美国公开案第2010/0310651号中，其是以全文引用的方式并入本文中。在一些其它实施例中，医药组合物是用于经口投与的液体剂型。此些液体剂型描述于美国公开案第2011/0039826号中，其是以引用的方式并入本文中。在某些实施例中，这些组合物任选地进一步包含一或多种其它治疗剂。

紫杉烷(例如，太平洋紫杉醇或多西他赛)可通过所属领域的技术人员已知的任一方法来投与。举例来说，紫杉烷可以组合物形式来投与，在一个实施例中以紫杉烷与医药上可接受的载剂(例如本文所述的彼等)的医药组合物投与。在一些实施例中，医药组合物是液体剂型，其可经由静脉内途径、例如静脉内注射或静脉内输注来投与。在一个实施例中，太平洋紫杉醇是经由静脉内注射来投与。在另一个实施例中，是经由静脉内注射来投与。所述医药组合物描述于美国专利第6096331号和美国专利第6506405号中。

如本文所用，术语“医药上可接受的载剂”是指与接受个体、优选地哺乳动物、更优选地人类相容且适于将活性剂递送到靶标位点而不终止所述药剂的活性的材料。与载剂相关的毒性或不良效应(如果存在)优选与活性剂的既定应用的合理风险/效益比相称。

术语“载剂”、“佐剂”或“媒剂”在本文中可互换使用，且包括适于所需特定剂型的任一和所有溶剂、稀释剂和其它液体媒剂、分散或悬浮助剂、表面活性剂、等渗剂、增稠或乳化剂、防腐剂、固体粘合剂、润滑剂等。雷明顿：药学科学和实践(第20版，编辑A.热纳罗，利平科特威廉姆斯·威尔金斯，2000)揭示用于调配医药上可接受的组合物的各种载剂以及其已知制备技术。除非任一常规载剂介质均因(例如)产生任何不期望生物效应或以有害方式与医药上可接受的组合物中的任何其它组份相互作用而与本发明化合物不相容，否则其使用涵盖于本发明范围内。可用作医药上可接受的载剂的材料的一些实例包括(但不限于)离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂、血清蛋白(例如人血清白蛋白)、缓冲物质(例如磷酸氢二钠、磷酸氢钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾、氢氧化镁和氢氧化铝)、甘氨酸、山梨酸或山梨酸钾、饱和植物脂肪酸的部分甘油酯混合物、水、无热原水、盐或电解质(例如硫酸鱼精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠和锌盐)、胶质氧化硅、三硅酸镁、聚乙烯基吡咯烷酮、聚丙烯酸酯、蜡、聚乙烯-聚氧丙烯-嵌段聚合物、羊毛脂、糖(例如乳糖、葡萄糖、蔗糖、淀粉(例如玉米淀粉和马铃薯淀粉)、纤维素和其衍生物(例如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和乙酸纤维素))、黄蓍胶粉；麦芽、明胶、滑石粉、赋形剂(例如可可脂和栓剂蜡)、油(例如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油)、二醇(例如丙二醇和聚乙二醇)、酯(例如油酸乙酯和月桂酸乙酯)、琼脂、海藻酸、等渗盐水、林格氏溶液(Ringer′s solution)、醇(例如乙醇、异丙醇、十六烷基醇和甘油)、环糊精、润滑剂(例如月桂基硫酸钠和硬脂酸镁)、石油烃(例如矿物油和矿脂)。根据调配者的判断，着色剂、释放剂、涂布剂、甜味剂、矫味剂和加香剂、防腐剂和抗氧化剂也可存于组合物中。

本发明的医药组合物可通过此项技术熟知的方法来制造，尤其例如常规造粒、混合、溶解、囊封、冻干或乳化过程。组合物可以多种形式来制造，包括颗粒、沉淀物或微粒、粉剂(包括冷冻干燥、旋转干燥或喷雾干燥的粉剂、非晶形粉剂)、片剂、胶囊、糖浆、栓剂、注射液、乳液、酏剂、悬浮液或溶液。调配物可任选地含有适于所需特定剂型的溶剂、稀释剂和其它液体媒剂、分散或悬浮助剂、表面活性剂、pH调节剂、等渗剂、增稠或乳化剂、稳定剂和防腐剂、固体粘合剂、润滑剂等。

根据优选实施例，本发明的组合物经调配用于医药投与哺乳动物、优选人类。本发明的所述医药组合物可以以下方式投与：经口、不经肠、通过吸入喷雾、经局部、经直肠、经鼻、经颊、经阴道或经由植入贮存器。如本文所用，术语“不经肠”包括皮下、静脉内、肌内、关节内、滑膜内、胸骨内、鞘内、肝内、病灶内和颅内注射或输注技术。优选地，组合物经口、静脉内或皮下投与。本发明调配物可设计为短效、快速释放或长效。此外，组合物可以局部而非全身性方式投与，例如在肿瘤位点投与(例如，通过注射)。

用于经口投与的液体剂型包括(但不限于)医药上可接受的乳液、微乳液、溶液、悬浮液、糖浆和酏剂。除活性化合物外，液体剂型可含有此项技术中常用的惰性稀释剂(例如水或其它溶剂)、增溶剂和乳化剂，例如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1，3-丁二醇、环糊精、二甲基甲酰胺、油(尤其棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢糠醇、聚乙二醇和山梨醇酐脂肪酸酯和其混合物。除惰性稀释剂外，经口组合物也可包括佐剂，例如润湿剂、乳化和悬浮剂、甜味剂、矫味剂和加香剂。

可注射制剂(例如无菌可注射水性或油性悬浮液)可根据已知技术使用适宜分散或润湿剂和悬浮剂来调配。无菌可注射制剂也可为存于无毒不经肠可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液、悬浮液或乳液，例如存于1，3-丁二醇中的溶液。可采用的可接受媒剂和溶剂尤其是水、林格氏溶液、U.S.P.和等渗氯化钠溶液。此外，常采用无菌不挥发性油作为溶剂或悬浮介质。出于此目的，可采用任何温和不挥发性油，包括合成单甘油酯或二甘油酯。此外，在可注射制剂中可使用诸如油酸等脂肪酸。可注射调配物可通过(例如)经由细菌截留过滤器过滤或通过纳入灭菌剂来灭菌，所述灭菌剂呈无菌固体组合物形式且可在使用前溶解或分散于无菌水或其它无菌可注射介质中。经调配用于不经肠投与的组合物可通过浓注注射或通过定时推送来注射，或可通过连续输注来投与。

为延长本发明化合物的效应，通常希望减慢来自皮下或肌内注射的化合物的吸收。此可通过使用具有较差水溶性的结晶或非晶形材料的液体悬浮液来实现。因此化合物的吸收速率取决于其溶解速率，而溶解速率进而可取决于晶体大小和结晶形式。或者，不经肠投与化合物的延迟吸收是通过将化合物溶解或悬浮于油媒剂中来实现。通过在生物可降解聚合物(例如聚乳酸-聚甘醇酸)中形成化合物的微囊基质来制备可注射储积形式。视化合物对聚合物的比率和所用特定聚合物的性质而定，可控制化合物的释放速率。其它生物可降解聚合物的实例包含聚(原酸酯)和聚(酸酐)。储积可注射调配物也可通过使化合物陷获于与身体组织相容的脂质体或微乳液中来制备。

用于直肠或阴道投与的组合物优选为栓剂，其可通过将本发明化合物与适宜无刺激性赋形剂或载剂(例如可可脂、聚乙二醇或栓剂蜡)混合在一起来制备，所述赋形剂或载剂在环境温度下为固体但在体温下为液体且因此其在直肠或阴道腔中融化并释放活性化合物。

用于经口投与的固体剂型包括胶囊、片剂、丸剂、粉剂和颗粒。在所述固体剂型中，将活性化合物与至少一种医药上可接受的惰性赋形剂或载剂(例如柠檬酸钠或磷酸二钙)和/或以下物质混合：a)填充剂或增量剂，例如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸，b)粘合剂，例如羧甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶，c)保湿剂，例如甘油，d)崩解剂，例如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠，e)溶液阻滞剂，例如石蜡，f)吸收促进剂，例如季铵化合物，g)润湿剂，例如鲸蜡醇和甘油单硬脂酸酯，h)吸收剂，例如高岭土(kaolin)和膨润土，和i)润滑剂，例如滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂基硫酸钠和其混合物。在胶囊、片剂和丸剂的情形下，剂型也可包含缓冲剂，例如磷酸盐或碳酸盐。

在使用诸如乳糖(lactose或milk sugar)以及高分子量聚乙二醇等赋形剂的软质和硬质填充明胶胶囊中，也可采用相似类型的固体组合物作为填充剂。片剂、糖衣锭、胶囊、丸剂和颗粒的固体剂型可制备有包衣和外壳，例如肠溶包衣和医药调配领域熟知的其它包衣。其可任选地含有遮光剂且也可为任选地以延迟方式仅或优先在肠道的某一部分中释放活性成份的组合物。可使用的包埋组合物的实例包括聚合物质和蜡。在使用诸如乳糖(lactose或milk sugar)以及高分子量聚乙二醇等赋形剂的软质和硬质填充明胶胶囊中，也可采用相似类型的固体组合物作为填充剂。

活性化合物也可呈具有一或多种上述赋形剂的微囊封形式。片剂、糖衣锭、胶囊、丸剂和颗粒的固体剂型可制备有包衣和外壳，例如肠溶包衣、释放控制包衣和医药调配领域熟知的其它包衣。在所述固体剂型中，可将活性化合物与至少一种惰性稀释剂(例如蔗糖、乳糖或淀粉)混合。所述剂型也可如同正常实践一般包含除惰性稀释剂外的其它物质，例如压锭润滑剂和其它压锭助剂，例如硬脂酸镁和微晶纤维素。在胶囊、片剂和丸剂的情形下，剂型也可包含缓冲剂。其可任选地含有遮光剂且也可为任选地以延迟方式仅或优先在肠道的某一部分中释放活性成份的组合物。可使用的包埋组合物的实例包括聚合物质和蜡。

用于局部或经皮投与本发明化合物的剂型包含软膏剂、糊剂、乳膏剂、洗剂、凝胶、粉剂、溶液、喷雾剂、吸入剂或贴片。可在无菌条件下将活性组份与医药上可接受的载剂和可能需要的任一所需防腐剂或缓冲剂混合。眼用调配物、滴耳剂和滴眼剂也在本发明的范围内。另外，本发明涵盖使用经皮贴片，其具有将化合物受控递送到身体的其它优点。所述剂型可通过将化合物溶于或分散于适当介质中来制备。也可使用吸收促进剂来增加化合物的跨皮肤通量。可通过提供速率控制膜或通过将化合物分散于聚合物基质或凝胶中来控制速率。

用于本发明方法中的组合物可以易于投与和均匀给药的单位剂型来调配。本文所用表述“单位剂型”是指药剂适于待治疗患者的物理离散单位。然而，应理解，本发明化合物和组合物的总日用量将由主治医师在合理医学判断范围内决定。用于不经肠投与的单位剂型可存在于安瓿或多剂量容器中。

本发明还涉及用于治疗增生性疾病的试剂盒和其它制品。在一个实施例中，所提供试剂盒包含如本文所述的极光A激酶的选择性抑制剂或其医药上可接受的盐；如本文所述的紫杉烷或其医药上可接受的盐；和说明书。试剂盒可任选地另外包括一或多种如本文所述的额外治疗剂。说明书可指示所用试剂盒针对的疾病状态、储存信息、投药信息和/或关于如何投与极光A激酶的选择性抑制剂、紫杉烷和/或其它治疗剂的说明。试剂盒也可包含包装材料。包装材料可包含用于容纳试剂盒内容物的容器。试剂盒也可任选地包含其它组件，例如用于投与试剂盒内容物的注射器。试剂盒可包含呈单剂量或多剂量形式的极光A激酶的选择性抑制剂、紫杉烷和/或其它治疗剂。

在另一个实施例中，所提供制品包含极光A激酶的选择性抑制剂或其医药上可接受的盐；紫杉烷或其医药上可接受的盐；和包装材料。制品可任选地另外包括一或多种其它治疗剂。包装材料可包含用于容纳制品内容物的容器。容器可任选地包含指示所用物件针对的疾病状态、储存信息、投药信息和/或关于如何投与极光A激酶的选择性抑制剂、紫杉烷和/或其它治疗剂的说明书的标签。物件也可任选地包含其它组件，例如用于投与组合物的注射器。物件可包含呈单剂量或多剂量形式的极光A激酶的选择性抑制剂、紫杉烷和/或其它治疗剂。

众多种治疗剂在与本发明的极光A激酶的选择性抑制剂与紫杉烷的组合组合时可具有治疗相关的加性益处。包含本发明的极光A激酶的选择性抑制剂与紫杉烷和一或多种其它治疗剂的组合的组合疗法可用于(例如)：1)增强本发明方法和/或一或多种其它治疗剂的治疗效应；2)减少本发明方法和/或一或多种其它治疗剂展现的副作用；和/或3)降低本发明的极光A激酶的选择性抑制剂和紫杉烷和/或一或多种其它治疗剂的有效剂量。

在一些实施例中，本发明方法包含投与极光A激酶的选择性抑制剂与紫杉烷和其它治疗剂的组合，其中每一药剂的量在组合使用时是治疗有效量。

在某些实施例中，极光A激酶的选择性抑制剂与紫杉烷的组合与顺铂(cisplatin)或多柔比星(doxorubicin)同时或依序投与。应了解，组合疗法包括同时或依序投与治疗剂。或者，可将治疗剂组合为一种投与患者的组合物。

可与本发明的极光A激酶的选择性抑制剂与紫杉烷的组合组合使用的治疗剂的实例包括(但不限于)抗增生剂、抗癌剂、烷基化剂、抗生素剂、抗代谢剂、激素试剂、植物源试剂和生物试剂。下文出于说明而非出于限制性目的列示上述其它治疗剂种类中一些种类的实例，这些实例并非无所不包。下文许多实例可列示于多个抗癌剂种类中，且不以任何方式限制于其所列示的种类。

烷基化剂是能用烷基取代氢离子的多官能化合物。烷基化剂的实例包括(但不限于)二氯乙胺(氮芥，例如苯丁酸氮芥(chlorambucil)、环磷酰胺、异环磷酰胺(ifosfamide)、甲二氯二乙胺(mechlorethamine)、美法仑(melphalan)、尿嘧啶氮芥)、氮丙啶(例如，塞替哌(thiotepa))、烷基酮磺酸酯(例如白消安(busulfan))、亚硝基脲(例如，卡莫司汀(carmustine)、洛莫司汀(lomustine)、链脲佐菌素(streptozocin))、非经典烷基化剂(六甲蜜胺(altretamine)、达卡巴嗪(dacarbazine)和丙卡巴肼(procarbazine))、铂化合物(卡铂(carboplatin)和顺铂)。所述化合物与磷酸根、胺基、羟基、硫氢基、羧基和咪唑基团反应。在生理条件下，这些药物离子化并产生带正电荷的离子，所述离子附接到敏感核酸和蛋白质上，从而导致细胞周期停滞和/或细胞死亡。包括本发明抑制剂和烷基化剂的组合疗法可对癌症具有治疗协同效应且减小与这些化学治疗剂相关的副作用。

抗生素剂是一组以类似于抗生素的方式作为天然产物的修饰形式产生的药物。抗生素剂的实例包括(但不限于)蒽环类抗生素(例如多柔比星、柔红霉素(daunorubicin)、表柔比星(epirubicin)、伊达比星(idarubicin)和蒽二酮)、丝裂霉素C(mitomycin C)、博来霉素(bleomycin)、放线菌素D(dactinomycin)、普卡霉素(plicatomycin)。这些抗生素剂通过靶向不同细胞组份来干扰细胞生长。举例来说，通常相信蒽环类抗生素干扰在转录活性DNA区域中的DNA拓朴异构酶II的作用，此导致DNA链断裂。通常相信，博来霉素螯合铁且形成活化络合物，其随后与DNA碱基结合，从而导致链断裂和细胞死亡。包括本发明抑制剂和抗生素剂的组合疗法可对癌症具有治疗协同效应且减小与这些化学治疗剂相关的副作用。

抗代谢剂是一组干扰对癌细胞的生理和增生至关重要的代谢过程的药物。增生活跃的癌细胞需要不断合成大量核酸、蛋白质、脂质和其它关键细胞成份。多种抗代谢物抑制嘌呤或嘧啶核苷的合成或抑制DNA复制酶。一些抗代谢物还干扰核糖核苷和RNA的合成和/或还干扰氨基酸代谢和蛋白质合成。通过干扰关键细胞成份的合成，抗代谢物可延迟或停滞癌细胞的生长。抗代谢剂的实例包括(但不限于)氟尿嘧啶(5-FU)、氟尿苷(5-FUdR)、氨甲蝶呤、甲酰四氢叶酸(leucovorin)、羟基脲、硫鸟嘌呤(6-TG)、巯嘌呤(6-MP)、阿糖胞苷(cytarabine)、喷司他汀(pentostatin)、磷酸氟达拉滨(fludarabine phosphate)、克拉屈滨(cladribine，2-CDA)、天冬酰胺酶和吉西他滨(gemcitabine)。包括本发明抑制剂和抗代谢剂的组合疗法可对癌症具有治疗协同效应且减小与这些化学治疗剂相关的副作用。

激素试剂是一组调节其靶器官的生长和发育的药物。大多数激素试剂是性类固醇和其衍生物和其类似物，例如雌激素、雄激素和黄体素。这些激素试剂可用作性类固醇的受体拮抗剂以下调受体表达和关键基因的转录。所述等激素试剂的实例是合成雌激素(例如乙烯雌酚(diethylstibestrol))、抗雌激素(例如它莫西芬(tamoxifen)、托瑞米芬(toremifene)、氟甲睾酚(fluoxymesterol)和雷洛昔芬(raloxifene))、抗雄激素(比卡鲁胺(bicalutamide)、尼鲁特米(nilutamide)和氟他米特(flutamide))、芳香酶抑制剂(例如，氨鲁米特(aminoglutethimide)、阿那曲唑(anastrozole)和四唑)、酮康唑(ketoconazole)、乙酸戈舍瑞林(goserelin acetate)、亮丙瑞林(leuprolide)、乙酸甲地孕酮(megestrol acetate)和米非司酮(mifepristone)。包括本发明抑制剂和激素试剂的组合疗法可对癌症具有治疗协同效应且减小与这些化学治疗剂相关的副作用。

植物源试剂是一组源自植物的药物或基于药剂的分子结构经修饰的药物。植物源试剂的实例包括(但不限于)长春花生物碱(vinca alkaloid)(例如，长春新碱(vincristine)、长春碱(vinblastine)、长春地辛(vindesine)、长春利定(vinzolidine)和长春瑞滨(vinorelbine))和鬼臼毒素(podophyllotoxin)(例如，依托泊苷(etoposide，VP-16)和替尼泊苷(teniposide，VM-26))。这些植物源试剂一般用作抗有丝分裂剂，其结合微管蛋白并抑制有丝分裂。相信诸如依托泊苷等鬼臼毒素通过与拓朴异构酶II相互作用来干扰DNA合成，从而导致DNA链断裂。包括本发明抑制剂和植物源试剂的组合疗法可对癌症具有治疗协同效应且减小与这些化学治疗剂相关的副作用。

生物试剂是一组在单独或与化学疗法和/或放射疗法组合使用时引发癌症/肿瘤消退的生物分子。生物试剂的实例包括(但不限于)免疫调节蛋白(例如细胞因子)、针对肿瘤抗原的单株抗体、肿瘤抑制基因和癌症疫苗。包括本发明抑制剂和生物试剂的组合疗法可对癌症具有治疗协同效应，增强患者对致瘤信号的免疫反应，且减小与此化学治疗剂相关的可能的副作用。

细胞因子具有显著免疫调节活性。一些细胞因子(例如白介素-2(IL-2，阿地白介素(aldesleukin))和干扰素)已显示抗肿瘤活性且已批准用于治疗患有转移性肾细胞癌和转移性恶性黑色素瘤的患者。IL-2是对T细胞介导的免疫反应至关重要的T细胞生长因子。人们相信，IL-2对一些患者的选择性抗肿瘤效应是细胞介导的区分自我与非我的免疫反应的结果。可结合本发明抑制剂使用的白介素的实例包括(但不限于)白介素2(IL-2)和白介素4(IL-4)、白介素12(IL-12)。

干扰素包括23种以上具有重叠活性的相关亚型，所有IFN亚型均在本发明范围内。IFN已显示抵抗多种实体瘤和血液恶性病的活性，后者似乎尤其敏感。

可结合本发明抑制剂使用的其它细胞因子包括那些对造血作用和免疫功能发挥显著效应的细胞因子。所述细胞因子的实例包括(但不限于)红细胞生成素、粒细胞-CSF(非尔司亭(filgrastin))和粒细胞、巨噬细胞-CSF(沙格司亭(sargramostim))。这些细胞因子可结合本发明抑制剂用于降低化学疗法诱导的髓细胞生成性毒性。

除细胞因子以外的其它免疫调节剂也可结合本发明抑制剂用于抑制异常细胞生长。这些免疫调节剂的实例包括(但不限于)卡介苗(bacillus Calmette-Guerin)、左旋咪唑(levamisole)和奥曲肽(octreotide，一种模拟天然激素生长抑素(somatostatin)的效应的长效八肽)。

针对肿瘤抗原的单株抗体是针对肿瘤表达的抗原、优选肿瘤特异性抗原引发的抗体。举例来说，单株抗体(曲妥珠单抗(Trastruzumab))是针对在一些乳房肿瘤(包括转移性乳癌)中过表达的人类表皮生长因子受体2(HER2)产生。HER2蛋白的过表达与更具侵略性的疾病和临床中较差预后相关。使用作为单一药剂用于治疗患有过表达HER2蛋白的转移性乳癌的患者。包括本发明抑制剂和的组合疗法可对肿瘤、尤其转移性癌症具有治疗协同效应。

针对肿瘤抗原的单株抗体的另一实例是(利妥昔单抗(Rituximab))，其是针对淋巴瘤细胞上的CD20产生且选择性消除正常和恶性CD20⁺前B细胞和成熟B细胞。使用作为单一药剂用于治疗患有复发性或难治性低级或滤泡CD20+B细胞非霍奇金氏淋巴瘤(non-Hodgkin’s lymphoma)的患者。包括本发明抑制剂和的组合疗法可不仅对淋巴瘤具有治疗协同效应，且对其它形式或类型的恶性肿瘤也具有治疗协同效应。

肿瘤抑制基因是用于抑制细胞生长和分裂周期、由此预防发生肿瘤形成的基因。肿瘤抑制基因的突变使细胞忽略抑制信号网络中的一或多个组份，从而战胜细胞周期检查点并引起较高速率的受控细胞生长(即，癌症)。肿瘤抑制基因的实例包括(但不限于)DPC-4、NF-1、NF-2、RB、p53、WT1、BRCA1和BRCA2。

DPC-4参与胰脏癌且参与抑制细胞分裂的细胞质路径。NF-1编码抑制Ras(细胞质抑制蛋白)的蛋白质。NF-1参与神经系统的神经纤维瘤和嗜铬细胞瘤以及骨髓性白血病。NF-2编码参与神经系统的脑膜瘤、神经鞘瘤(schwannoma)和室管膜瘤的核蛋白。RB编码pRB蛋白，pRB蛋白是作为细胞周期主要抑制剂的核蛋白。RB参与视网膜胚细胞瘤以及骨癌、膀胱癌、小细胞肺癌和乳癌。P53编码调节细胞分裂且可诱导细胞凋亡的p53蛋白。在众多种癌症中发现p53突变和/或无活性。WT1参与肾脏的威尔姆氏瘤(Wilmstumor)。BRCA1参与乳癌和卵巢癌，且BRCA2参与乳癌。肿瘤抑制基因可转移到肿瘤细胞中，在其中其发挥其肿瘤抑制功能。包括本发明抑制剂和肿瘤抑制剂的组合疗法可对患有各种形式的癌症的患者具有治疗协同效应。

癌症疫苗是一组诱导身体对肿瘤的特异性免疫反应的药剂。大多数正在研究和研发和处于临床试验中的癌症疫苗是肿瘤相关抗原(TAA)。TAA是在肿瘤细胞上存在且在正常细胞上相对不存在或消失的结构(即蛋白质、酶或碳水化合物)。由于对于肿瘤细胞来说相当独特，TAA为免疫系统提供识别并造成其破坏的靶标。TAA的实例包括(但不限于)神经节苷脂(GM2)、前列腺特异性抗原(PSA)、α-胎蛋白(AFP)、胚性癌抗原(CEA)(由结肠癌和其它腺癌产生，例如乳癌、肺癌、胃癌和胰脏癌)、黑色素瘤相关抗原(MART-1、gp100、MAGE1，3酪氨酸酶)、乳头状瘤病毒E6和E7片段、自体肿瘤细胞和同种异体肿瘤细胞的完整细胞或部分/裂解物。

可使用佐剂来增强对TAA的免疫反应。佐剂的实例包括(但不限于)卡介苗(BCG)、内毒素脂多糖、钥孔虫戚血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin，GKLH)、白介素-2(IL-2)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和环磷酰胺(cytoxan，一种据信在以低剂量给予时可降低肿瘤诱导抑制的化学治疗剂)。

在某些实施例中，一或多种其它治疗选自辐射、化学疗法、免疫疗法或其它靶向抗癌疗法。

待使用极光A激酶的选择性抑制剂或其组合治疗的癌症

本发明提供治疗细胞增生性病症的新颖方法。如本文所用，术语“细胞增生性病症”包括(但不限于)癌性过度增生性病症(例如，脑癌、肺癌、鳞状细胞癌、膀胱癌、胃癌、胰脏癌、乳癌、头癌、颈癌、肾脏癌症、肝癌、肾癌、卵巢癌、前列腺癌、结肠直肠癌、结肠癌、表皮样癌、食道癌、睾丸癌、妇科癌症或甲状腺癌、急性骨髓性白血病、多发性骨髓瘤、间皮瘤、非小细胞肺癌(NSCLC)、小细胞肺癌(SCLC)、神经母细胞瘤和急性淋巴细胞性白血病(ALL))；非癌性过度增生性病症(例如，皮肤的良性增生(例如，牛皮癣)、再狭窄和良性前列腺肥大(BPH))；和与血管发生或血管生成相关的疾病(例如，肿瘤血管生成、血管瘤、神经胶质瘤、黑色素瘤、卡波西氏肉瘤和卵巢癌、乳癌、肺癌、胰脏癌、前列腺癌、结肠癌和表皮样癌)。细胞增生性病症进一步涵盖原发性和转移性癌症。

具体来说，所述化合物可用于治疗个体的癌症，包括(但不限于)肺癌和支气管癌，包括非小细胞肺癌(NSCLC)、鳞状肺癌、细支气管肺泡癌(BAC)、肺腺癌和小细胞肺癌(SCLC)；前列腺癌，包括雄激素依赖性和雄激素非依赖性前列腺癌；乳癌，包括转移性乳癌；胰脏癌；结肠和直肠癌；甲状腺癌；肝和肝内胆管癌；肝细胞癌；胃癌；子宫内膜癌；黑色素瘤；肾癌；和肾盂癌、膀胱癌；子宫体癌；子宫颈癌；卵巢癌，包括渐进性上皮癌或原发性腹膜癌；多发性骨髓瘤；食道癌；急性髓性白血病(AML)；慢性髓性白血病(CML)，包括加速期CML和CML急变期(CML-BP)；淋巴细胞性白血病；骨髓性白血病；急性淋巴细胞性白血病(ALL)；慢性淋巴细胞性白血病(CLL)；霍奇金氏病(HD)；非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)，包括滤泡性淋巴瘤和套细胞淋巴瘤；B细胞淋巴瘤癌，包括弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)；T细胞淋巴瘤；多发性骨髓瘤(MM)；淀粉样变性；华氏巨球蛋白血症(Waldenstrom′s macroglobulinemia)；骨髓发育不良综合症(MDS)，包括顽固性贫血(RA)、顽固性贫血伴环形铁粒幼细胞增多(RARS)、顽固性贫血伴过多芽细胞(RAEB)和转化型RAEB(RAEB-T)；和骨髓增生综合症；脑癌，包括神经胶质瘤/神经胶母细胞瘤、退行性寡树突胶质细胞瘤和成人退行性星状细胞瘤；神经内分泌癌，包括转移性神经内分泌肿瘤；头颈癌，包括(例如)头颈鳞状细胞癌和鼻咽癌；口腔癌；和咽癌；小肠癌；骨癌；软组织肉瘤；和绒毛结肠腺瘤。

在一个实施例中，可通过极光A激酶选择性抑制剂与紫杉烷的组合治疗的疾病或病症包括(但不限于)卵巢癌、乳癌、前列腺癌、胃癌、头颈癌、膀胱癌、肺癌、上皮性卵巢癌、输卵管癌、原发性腹膜癌及AIDS相关性卡波西氏肉瘤。在另一个实施例中，可通过极光A激酶选择性抑制剂与紫杉烷的组合治疗的疾病或病症包括(但不限于)卵巢癌、乳癌、肺癌及AIDS相关性卡波西氏肉瘤。在另一个实施例中，可通过极光A激酶选择性抑制剂与紫杉烷的组合治疗的疾病或病症是卵巢癌、上皮性卵巢癌、输卵管癌或原发性腹膜癌。在另一个实施例中，可通过极光A激酶选择性抑制剂与紫杉烷的组合治疗的疾病或病症包括(但不限于)小细胞肺癌。

测定极光A激酶的选择性抑制剂与太平洋紫杉醇的组合的效应：

优选地，本发明方法引起对所接触细胞的细胞增生的抑制。片语“抑制细胞增生”用于表示极光A激酶的选择性抑制剂和/或紫杉烷与未接触抑制剂的细胞相比抑制所接触细胞的细胞数和细胞生长的能力。可通过使用细胞计数器或细胞活力分析(例如BrdU、MTT、XTT或WST分析)计数细胞并比较所接触细胞与未接触细胞的生长大小对细胞增生作出评价。在细胞处于生长实体(例如，实体肿瘤或器官)中的情况下，则可通过(例如)使用卡尺或非侵入性成像(例如MRI和PET)测量生长来对此一细胞增生作出评价。

优选地，与极光A激酶的选择性抑制剂和紫杉烷接触的细胞的生长与未接触细胞的生长相比迟滞至少约50％。在不同实施例中，接触细胞的细胞增生与未接触细胞相比抑制至少约75％、至少约90％或至少约95％。在一些实施例中，短语“抑制细胞增生”包括与未接触细胞相比减少接触细胞的数目。因此，抑制接触细胞的细胞增生的极光A激酶的选择性抑制剂和/或紫杉烷可诱导接触细胞经历生长迟滞，经历生长停滞，经历程序性细胞死亡(即，细胞凋亡)，或经历坏死性细胞死亡。

4.实验程序

在下文所述实例中，阿立塞替(MLN8237)是指钠盐，即4-{[9-氯-7-(2-氟-6-甲氧基苯基)-5H-嘧啶并[5，4-d][2]苯并氮呯-2-基]氨基}-2-甲氧基苯甲酸钠单水合物。

实例1：在乳癌小鼠模型中对阿立塞替投与与太平洋紫杉醇投与的组合的活体内功效研究.

实验程序

肿瘤细胞培养和原发性人类肿瘤.MDA-MB-231细胞是从ATCC获得且将其在补充有热灭活10％FBS和1％L-谷酰胺酸的DMEM培养基中培养。将MDA-MB-231细胞(2×10^²)原位注射到裸小鼠的乳房脂肪垫中。活体内功效研究.使用每天一次时间表(QD)向带有异种移植肿瘤(MDA-MB-231，n＝10只动物/组)的裸小鼠经口(PO)给予媒剂或阿立塞替(10mg/kg、20mg/kg)达21天。按每周一次时间表(QW)静脉内(IV)投与太平洋紫杉醇(5mg/kg、10mg/kg、20mg/kg和30mg/kg)，总计投药三次。使用游标卡尺测量肿瘤生长，且使用下式来计算肿瘤生长抑制(TGI)：TGI＝(Δ对照-Δ经治疗)*100/Δ对照。肿瘤生长延迟(TGD)是每一治疗组相对于媒剂治疗组达到1000mm³的平均肿瘤体积的时间(天)。成对治疗组之间肿瘤生长的统计学显著性使用线性混合效应回归模型来评价。这些模型解释每一动物均在多个时间点进行测量的事实。拟合每一对比的分离模型，且使用来自所述模型的预测值来计算每一治疗组的曲线下面积(AUC)。然后计算相对于参照组的AUC降低百分比(dAUC)。

结果

表1说明阿立塞替与太平洋紫杉醇的组合在原位乳癌活体内异种移植模型中显示加性和协同性抗肿瘤活性。此外，在中断治疗后相对于单一药剂出现显著肿瘤生长延迟。

表1

^a原位乳癌模型是在裸小鼠中生长且每天用经口投与的阿立塞替治疗达21天，且每周一次静脉内给予太平洋紫杉醇

^b肿瘤生长抑制(TGI)＝(Δ经治疗/Δ对照)×100/Δ对照，其是在治疗最后一天计算

^c协同作用分析是基于第0天到第20天的曲线下面积(AUC)值

^d2次研究的平均值

活体内数据的统计学分析

对于MDA-MB-231模型，分析第0天到第20天的测量值。所有肿瘤体积值在log₁₀转化之前均增加1。比较各治疗组的这些值以评价随时间的趋势差异是否在统计学上显著。为比较成对治疗组，使用最大似然法将以下混合效应线性回归模型拟合到数据：

Y_ijk-Y_i0k＝Y_i0k+治疗_i+天_j+天_j ²+(治疗*天)_ij+(治疗*天²)_ij+e_ijk

其中Y_ijk是i^th治疗中k^th动物在j^th时间点的log₁₀肿瘤值，Y_i0k是i^th治疗中k^th动物的第0天log₁₀肿瘤值，天_j是以中位数为中心的时间点且作为连续变量进行处理，且e_ijk是残差。使用空间幂律(spatial power law)协方差矩阵来解释随时间对同一动物的重复测量。如果相互作用项以及天_j ²项在统计学上不显著，则将其移除。

使用似然比测试来评价给定的一对治疗组是否展现统计学上显著的差异。比较完整模型与无任何治疗项的模型(缩减模型)的-2对数似然比且使用卡方(Chi-squared)测试来测试这些值的差异。测试的自由度计算为完整模型的自由度与缩减模型的自由度之间的差值。

除了统计学显著性外，建立每一治疗的效应量值的量度。自上述模型获得对数肿瘤值的预测差值(Y_ijk-Y_i0k)对时间以计算每一治疗组的平均曲线下面积(AUC)值。然后如下计算dAUC值：

对于协同作用分析，使用所观察到的对数肿瘤值的差异来计算每只动物的AUC值。在治疗组中的动物从研究移除时，所有后续时间点均采用最后观察到的肿瘤值。治疗A和B的组合的协同作用分数定义为

100*(平均(AUC_AB)-平均(AUC_A)-平均(AUC_B)+平均(AUC_ctl))/平均(AUC_ctl)

其中AUC_AB、AUC_A、AUC_B和AUC_ctl分别为组合组、A组、B组和对照组中的动物的AUC值。协同作用分数的标准误差是基于动物的间的AUC值差异来计算。使用双侧t-测试来确定协同作用分数与零是否有显著差异。如果P值低于0.05，且协同作用分数小于零，那么此组合视为具有协同性。如果P值高于0.05，那么此组合视为具有加性。

实例2：半机械嗜中性白血球减少症模型

由于嗜中性白血球减少症是紫杉烷和阿立塞替的常见剂量限制性毒性，因此研发半机械模型以预测血浆PK对绝对嗜中性白血球计数(ANC)的时程，从而帮助选择阿立塞替与太平洋紫杉醇的组合的剂量和时间表。此模型解释药剂暴露与ANC的间的时间延迟，因为药剂影响祖细胞而非直接影响嗜中性白血球。

使用此模型来使用来自经多日给予阿立塞替和/或紫杉烷治疗的小鼠或大鼠的PK和ANC数据描述嗜中性白血球减少症。为构筑此模型，向啮齿类动物投与多西他赛和阿立塞替或此两种药剂的组合，且在投药前和端视投与时间表而定的预定天数对ANC进行定量。大鼠接受多西他赛(在第1天静脉内投与3.5mg/kg到10mg/kg)和阿立塞替(以QD×3、7或14经口投与5mg/kg到35mg/kg)或此两种药剂的组合。在投药前和在第1天、第2天、第4天、第6天、第8天、第11天、第14天和第17天对ANC进行定量。

使用分室PK模型来描述时间依赖性药物浓度且使用半机械模型来描述嗜中性白血球减少症，如弗里贝里(Friberg)等人(弗里贝里等人，临床肿瘤学杂志2002；20(24)：4713-21)所述。阿立塞替人类PK值是根据黑猩猩PK值和人类系统推出，且紫杉烷药物相关参数是从公开来源和来自啮齿类动物和人类CFU-GM细胞系的活体外数据获得。使用血浆蛋白质结合和CFU-GM IC₅₀的差异来校正人类-啮齿类动物种间差异。通过用太平洋紫杉醇的公开值替代药物相关参数(PK和斜率)将此模型从多西他赛扩展到太平洋紫杉醇。

此临床前模型预测，减小每周太平洋紫杉醇剂量将允许实现较高可耐受阿立塞替剂量。此预测在下文实例3中描述的剂量递增研究中得以证实。此模型还预测，跳过给予阿立塞替的第二周将进一步减轻嗜中性白血球减少症，从而在第1周期后在经受机械毒性的患者中允许额外阿立塞替剂量递增或剂量修改。

实例3：剂量递增研究

表2描述对阿立塞替和太平洋紫杉醇在复发性卵巢癌患者中的安全性和抗肿瘤活性的临床评估。在此临床研究中，按28天时间表经BID给予阿立塞替达3天/4天不给予，同时给予第一剂量的QW×3太平洋紫杉醇。已确定，在每周以80mg/m²给予太平洋紫杉醇时，可耐受10mg BID阿立塞替(例如视为安全剂量)，而在每周以60mg/m²给予太平洋紫杉醇时，可耐受40mg BID阿立塞替。

表2

^a剂量限制性毒性包括胃肠毒性(腹泻、恶心、呕吐)和口腔粘膜炎

^b剂量限制性毒性包括嗜中性白血球减少症并发发热。

^c剂量限制性毒性包括瞌睡/意识错乱、嗜中性白血球减少症和口腔粘膜炎。

实例4：暴露-功效模型

研发暴露-功效模型以预测阿立塞替与太平洋紫杉醇的哪一种组合产生最大抗肿瘤功效。比较阿立塞替和太平洋紫杉醇暴露与肿瘤生长抑制的等效线图是在带有肿瘤的小鼠中自活体内功效研究生成，如实例1中所述。通过校正两种药剂的血浆蛋白结合和最大耐受暴露的小鼠-人类差异将来自实例3中所述剂量递增研究的阿立塞替和太平洋紫杉醇在临床上达成的暴露映射到等效线图上。这些数据显示，80mg/m²和60mg/m²太平洋紫杉醇将产生类似程度的功效，此与在一些癌症适应症中的临床观察一致。预测在剂量递增研究中以60mg/m²太平洋紫杉醇达到的较高阿立塞替剂量(40mg BID)产生大于10mg BID阿立塞替与80mg/m²太平洋紫杉醇的功效。

实例5：小细胞肺癌的活体内肿瘤模型

在免疫受损小鼠中生长的人类SCLC的多种模型中测试阿立塞替与太平洋紫杉醇的组合的抗肿瘤活性。本文呈现的数据显示，在SCLC异种移植模型中，阿立塞替与太平洋紫杉醇的组合具有加性抗肿瘤益处。

NCI-H69.

程序.NCI-H69是已确立的小细胞肺癌细胞系。参见例如A.W.唐(A.W.Tong)等人，癌症研究.1984年11月；44(11)：4987-92。在所有组(每组含有10只雌性免疫受损nu/nu小鼠)中用NCI-H69肿瘤碎片进行皮下肿瘤植入后，在肿瘤达到约200mm³时开始治疗。在按QID×21-Q8H×2时间表经口投与的20mg/kg的剂量下和在按QID×21时间表的20mg/kg和10mg/kg剂量下测试MLN8237。在按Q7D×3时间表静脉内投与的30mg/kg和15mg/kg的剂量下测试太平洋紫杉醇。按QD×21治疗时间表将每一太平洋紫杉醇剂量与每一MLN8237剂量组合。在组合治疗组中，首先将MLN8237投与动物，之后立即投与太平洋紫杉醇。一个组用作媒剂治疗对照组，其按QID×21时间表接受使用MLN8237媒剂的经口治疗。

概述.在SCLC细胞系异种移植NCI-H69中，10mg/kg QD的阿立塞替和每周两次(QW)15mg/kg的太平洋紫杉醇显著提高抗肿瘤活性，且20mg/kg QD的阿立塞替和15mg/kg QW的太平洋紫杉醇即使在终止治疗后也产生持续治愈。参见图1(BID＝每天两次；IV＝静脉内；MLN8237＝阿立塞替；PO＝经口；QD＝每天一次。用阿立塞替(PO，QD或BID)、太平洋紫杉醇(IV，QW)或二者的组合以所示剂量将带有肿瘤的小鼠治疗21天。每周两次测量肿瘤。条棒代表平均值的标准误差。阴影区域指示21天治疗时段。在此模型中，阿立塞替和太平洋紫杉醇在其20mg/kg BID和30mg/kg QD的单一药剂最大耐受剂量下在小鼠中分别产生延长消退和持续治愈。

NCI-H82.

程序.NCI-H82是已确立的小细胞肺癌细胞系。参见例如Y.仲西(Y.Nakanishi)等人，实验细胞生物学(Exp Cell Biol.)1988；56(1-2)：74-85.在所有组(每组含有10只雌性免疫受损nu/nu小鼠)中用NCI-H82肿瘤碎片进行皮下肿瘤植入后，在肿瘤达到约200mm³时开始治疗。在按QID×21-Q8H×2时间表经口投与的20mg/kg的剂量下和在按QID×21时间表的20mg/kg和10mg/kg剂量下测试MLN8237。在按Q7D×3时间表静脉内投与的30mg/kg和15mg/kg的剂量下测试太平洋紫杉醇。按QD×21治疗时间表将每一太平洋紫杉醇剂量与每一MLN8237剂量组合。在组合治疗组中，首先将MLN8237投与动物，之后立即投与太平洋紫杉醇。一个组用作媒剂治疗对照组，其按QID×21时间表接受使用MLN8237媒剂的经口治疗。

概述.在SCLC细胞系异种移植NCI-H82中测试阿立塞替与太平洋紫杉醇的组合的抗肿瘤活性。呈单一药剂的10mg/kg QD的阿立塞替和15mg/kg QW的太平洋紫杉醇无抗肿瘤活性，但在组合时相对于单一药剂提高抗肿瘤活性。参见图2(BID＝每天两次；IV＝静脉内；MLN8237＝阿立塞替；PO＝经口；QD＝每天一次。用阿立塞替(PO，QD或BID)、太平洋紫杉醇(IV，QW)或二者的组合以所示剂量将带有肿瘤的小鼠治疗21天。每周两次测量肿瘤。条棒代表平均值的标准误差。阴影区域指示21天治疗时段。在使用20mg/kg QD的阿立塞替和30mg/kg QW的太平洋紫杉醇时，抗肿瘤活性相对于单一药剂且相对于20mg/kg BID的阿立塞替单一药剂最大耐受剂量也出现适度提高。

CTG-0166.

程序.CTG-0166是小细胞肺癌细胞系(冠军肿瘤学公司(Champions Oncology)，马里兰州巴尔的摩(Baltimore，MD)，www.championsoncology.com)。在所有组(每组含有8只雌性免疫受损nu/nu小鼠)中用CTG-0166肿瘤碎片进行皮下肿瘤植入后，在肿瘤达到介于180mm³与250mm³之间时开始治疗。在按QID×21时间表经口投与的20mg/kg剂量下测试MLN8237，在按Q7D×3时间表静脉内投与的15mg/kg剂量下测试太平洋紫杉醇，且在按QD×5时间表静脉内投与的1.5mg/kg剂量下测试拓扑替康(topotecan)。在组合治疗组中，首先将MLN8237投与动物，之后立即投与太平洋紫杉醇。一个组用作媒剂治疗对照组，其按QID×21时间表接受使用MLN8237媒剂的经口治疗。

概述.在人类原发性SCLC模型CTG-0166中，20mg/kg QD的阿立塞替与15mg/kgQW的太平洋紫杉醇的组合使抗肿瘤活性相对于个别单一剂量略有提高。参见图3(BID＝每天两次；IV＝静脉内；MLN8237＝阿立塞替；PO＝经口；QD＝每天一次。用阿立塞替(PO，QD)、太平洋紫杉醇(IV，QW)或二者的组合以所示剂量将带有肿瘤的小鼠治疗21天。包括拓扑替康(IV，Q5D)作为对照。每周两次测量肿瘤。条棒代表平均值的标准误差。阴影区域指示21天治疗时段。在此模型中，拓扑替康还以其1.5mg/kg Q5D的单一剂量最大耐受剂量进行测试。

除非另有说明，否则本文所用所有技术和科学术语均具有与熟习本发明所属领域技术者通常所理解相同的含义。尽管在本发明的实践或测试中可使用任何与本文所述的方法和材料类似或等效者，但在本文中描述优选方法、装置和材料。本文所提及的所有出版物均以全文引用的方式并入本文中，以实现描述并揭示出版物中所报导的可结合本发明使用的材料和方法的目的。

Claims (29)

1.一种阿立塞替与太平洋紫杉醇组合用于治疗有需要的个体的细胞增生性病症的用途，其中按28天投药时间表向所述个体投与每天两次剂量的阿立塞替与每周一次剂量的太平洋紫杉醇的组合，其中

阿立塞替的所述所投与每天两次剂量为约30mg到约50mg，且是在所述28天时间表的第1到3天、第8到10天和第15到17天投与；且

太平洋紫杉醇的所述所投与每周一次剂量为约50mg/m²到约70mg/m²，且是在所述28天时间表的第1天、第8天和第15天投与。

2.根据权利要求1所述的用途，其中阿立塞替的所述投与与太平洋紫杉醇的所述投与同时进行。

3.根据权利要求1所述的用途，其中阿立塞替的所述每天两次剂量为约40mg到约50mg。

4.根据权利要求1所述的用途，其中阿立塞替的所述每天两次剂量为约30mg到约40mg。

5.根据权利要求1所述的用途，其中阿立塞替的所述每天两次剂量为约35mg。

6.根据权利要求1所述的用途，其中阿立塞替的所述每天两次剂量为约40mg。

7.根据权利要求1所述的用途，其中阿立塞替的所述每天两次剂量为约45mg。

8.根据权利要求1所述的用途，其中太平洋紫杉醇的所述每周一次剂量为约60mg/m²到约70mg/m²。

9.根据权利要求1所述的用途，其中太平洋紫杉醇的所述每周一次剂量为约60mg/m²。

10.根据权利要求1到9中任一权利要求所述的用途，其中所述细胞增生性病症是癌症。

11.根据权利要求10所述的用途，其中所述癌症是卵巢癌、乳癌、前列腺癌、胃癌、头颈癌、膀胱癌、肺癌、胰脏癌或AIDS相关性卡波西氏肉瘤。

12.根据权利要求10所述的用途，其中所述癌症是卵巢癌、乳癌、肺癌或AIDS相关性卡波西氏肉瘤。

13.根据权利要求10所述的用途，其中所述癌症是卵巢癌。

14.根据权利要求10所述的用途，其中所述癌症是小细胞肺癌。

15.一种阿立塞替的用途，其用于制造用于治疗有需要的个体的细胞增生性病症的医药，其中所述医药与太平洋紫杉醇组合使用，根据此按28天投药时间表向所述个体投与每天两次的所述医药与每周一次剂量的太平洋紫杉醇的组合，其中

所述每天两次投与的医药包含约30mg到约50mg阿立塞替，且是在所述28天时间表的第1到3天、第8到10天和第15到17天投与；且

太平洋紫杉醇的所述所投与每周一次剂量为约50mg/m²到约70mg/m²，且是在所述28天时间表的第1天、第8天和第15天投与。

16.根据权利要求15所述的用途，其中所述医药的所述投与与太平洋紫杉醇的所述投与同时进行。

17.根据权利要求15所述的用途，其中所述每天两次投与的医药包含约40mg到约50mg阿立塞替。

18.根据权利要求15所述的用途，其中所述每天两次投与的医药包含约30mg到约40mg阿立塞替。

19.根据权利要求15所述的用途，其中所述每天两次投与的医药包含约35mg阿立塞替。

20.根据权利要求15所述的用途，其中所述每天两次投与的医药包含约40mg阿立塞替。

21.根据权利要求15所述的用途，其中所述每天两次投与的医药包含约45mg阿立塞替。

22.根据权利要求15所述的用途，其中太平洋紫杉醇的所述每周一次剂量为约60mg/m²到约70mg/m²。

23.根据权利要求15所述的用途，其中太平洋紫杉醇的所述每周一次剂量为约60mg/m²。

24.根据权利要求15到23中任一权利要求所述的用途，其中所述细胞增生性病症是癌症。

25.根据权利要求24所述的用途，其中所述癌症是卵巢癌、乳癌、前列腺癌、胃癌、头颈癌、膀胱癌、肺癌、胰脏癌或AIDS相关性卡波西氏肉瘤。

26.根据权利要求24所述的用途，其中所述癌症是卵巢癌、乳癌、肺癌或AIDS相关性卡波西氏肉瘤。

27.根据权利要求24所述的用途，其中所述癌症是卵巢癌。

28.根据权利要求24所述的用途，其中所述癌症是小细胞肺癌。

29.一种试剂盒，其包含阿立塞替或其医药上可接受的盐；太平洋紫杉醇或其医药上可接受的盐；和用于投与所述阿立塞替或其医药上可接受的盐与所述太平洋紫杉醇或其医药上可接受的盐的组合的说明书。