CN104255453A - 一种甜叶菊组培苗的保存方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公布了一种甜叶菊组培苗的保存方法，其做法是利用一种以草炭 + 珍珠岩混合物为基质的培养基，代替传统的琼脂基质，作为甜叶菊组培苗的保存培养基，并在其中加入含有各种营养物质和植物激素的营养液，在这种保存培养基上培养甜叶菊。本方法可以大大延缓其甜叶菊组培苗的生长，达到长时间保存甜叶菊组培苗的目的。本发明与现有的植物组培苗保存技术相比，优势在于，采用正常甜叶菊组织培养的温度保存菊苗，花费少，成本低，效果好。
Description
技术领域
一种甜叶菊组培苗的保存方法，涉及甜叶菊组织培养技术领域，更具体的说是一种延缓甜叶菊组培苗的生长进程，对其进行长期保存的方法。
背景技术
甜叶菊的组织培养是进行甜叶菊快速繁殖、遗传诱变等生产和科研工作的重要手段。但由于快繁生产和科学研究都有一定的阶段性，其间不可避免地会有一定时间的停滞阶段。例如生产单位按照客户的需要完成了订单需要的苗量，而新的订单还无法预期；或科研单位对甜叶菊某方面的研究已经完成或告一段落，在一定的时间内不必再繁殖菊苗。此时甜叶菊的组织培养单位就会面临组培苗保存的问题：如何让组培的菊苗缓慢地生长，通过缓慢的生长，延长组培苗在瓶中的生长时间，减少继代的操作，既节约人工和材料。由于甜叶菊的组培苗生长的特别快，一般生根苗30天左右就能长满一瓶，如果不进行继代培养，苗体就会逐渐老化，最后死亡，使组培材料丢失。此时如果出现市场需要，临时从外植体进行转化培养可能远水不解近渴，错失市场良机。但如果对菊苗进行继代保存，就会增加人力、物力的消耗，造成浪费。为了解决上述问题，有人采用低温培养的方法进行甜叶菊组培苗的保存，将甜叶菊的组培苗在10℃下进行培养，通过低温的环境，延缓菊苗的生长，可以使甜叶菊组培苗的生长周期延长。但是低温培养需要一定的设施条件，也会增加电力的消耗。所以发明出一种能够在正常甜叶菊组织培养温度条件下保存甜叶菊组织培养苗的技术是业界所期待的。
发明内容
本发明的目的在于提供一种在正常甜叶菊组织培养温度下进行甜叶菊组培苗保存的方法，以减少甜叶菊组培苗保存培养的操作成本。
本发明是这样实现的：
1.一种甜叶菊组培苗的保存方法，其配方是：
（1）基质：基质采用草炭和珍珠岩1:1的混合物；
（2）营养液：营养液中大量元素、微量元素和铁盐的浓度均按照1/2MS培养基的要求配制，有机成分的浓度为MS培养基的2倍，另加0.4mg/L NAA和30g/L 蔗糖；
（3）用量：用250ml的组织培养瓶，每瓶加混合基质50ml，营养液40ml。
操作步骤：
（1）基质的制备：将草炭与珍珠岩按照1:1的重量份放在一起并混合均匀；
（2）配制营养液；
（3）装瓶：在组培瓶中加入基质和营养液；
（4）灭菌：用高压蒸汽灭菌器进行灭菌；
（5）接种：灭菌后待组培瓶冷却，向基质中接种，每瓶接入1-5个单节茎段（最好为1个）；
（6）培养：将组培瓶放入组培室中按照正常的甜叶菊组织培养条件进行培养：温度25±1℃，光照强度约1500lx（光源为40 W日光灯），光照时间12 h/d。
本发明的有益效果：
采用本发明的方案保存培养基保存甜叶菊的组培苗，可以在正常的甜叶菊组织培养温度下，大大延长组培苗的保存时间，省工省料，节约费用。当出现甜叶菊快繁需求时，可以立即从保存培养基中取出菊苗，回到琼脂培养基中进行快繁培养；如果没有快繁需求，单位可以利用本发明的方法进行材料的长期保存，生长周期长，继代间隔时间长。本培养基的应用可以提高相关企业及科研单位的战略机动性，减支增收。
具体实施方式：
1. 一种甜叶菊组培苗的保存方法的配方：
（1）基质：基质采用草炭和珍珠岩1:1的混合物；
（2）营养液：营养液中大量元素、微量元素和铁盐的浓度均按照1/2MS培养基的要求配制，有机成分的浓度为MS培养基的2倍，另加0.4mg/L NAA和30g/L 蔗糖；
（3）用量：用250ml的组织培养瓶，每瓶加混合基质50ml，营养液40ml。
操作步骤：
（1）基质的制备：将草炭与珍珠岩按照1:1的重量份放在一起并混合均匀；
（2）配制营养液；
（3）装瓶：在组培瓶中加入基质和营养液；
（4）灭菌：用高压蒸汽灭菌器进行灭菌；
（5）接种：灭菌后待组培瓶冷却，向基质中接种，每瓶接入5个单节茎段，加盖；
（6）培养：将组培瓶放入组培室中按照正常的甜叶菊组织培养条件进行培养：温度25±1℃，光照强度约1500lx（光源为40 W日光灯），光照时间12 h/d。
试验情况：
试验于2013年10月9日在安徽科技学院植物组织培养实验室进行。按照上述配方及操作步骤接种甜叶菊组培苗的单节茎段，以1/2MS的琼脂培养基培养基为对照；每处理接种20瓶，每瓶接种5株。
生长调查：从表1可见，在本发明的保存培养基中，甜叶菊的组织培养苗生长明显变慢，从接种到长满瓶和从接种到半数苗死亡的时间都明显较对照大为增加，有效地延长了甜叶菊组培苗的保存时间。
表1.两种培养基甜叶菊组培苗生长情况表
如果将每瓶接种的菊花苗由5株减少到1株，由于培养基内营养更加充足，可以使瓶内的菊苗保持更长的时间。
Claims (2)
1.一种甜叶菊组培苗的保存方法，其特征在于，它包括培养基的配方和操作步骤：
（1）培养基的配方：
①基质：基质为草炭和珍珠岩1:1的混合物；
②营养液：营养液中大量元素、微量元素和铁盐的浓度均按照1/2MS培养基的要求配制，有机成分的浓度为MS培养基的2倍，另加0.4mg/L NAA和30g/L 蔗糖；
③用量：用250ml的组织培养瓶，每瓶加混合基质50ml，营养液40ml；
（2）操作步骤：
①基质的制备：将草炭与珍珠岩按照1:1的重量份放在一起并混合均匀；
②配制营养液；
③装瓶：在组培瓶中加入基质和营养液；
④灭菌：用高压蒸汽灭菌器进行灭菌；
⑤接种：灭菌后待组培瓶冷却，向基质中接种，每瓶接入1-5个单节茎段，加盖；
⑥培养：将组培瓶放入组培室中按照正常的甜叶菊组织培养条件进行培养：温度25±1℃，光照强度约1500lx，光源为40 W日光灯，光照时间12 h/d。
2.根据权利要求1所述的所述的一种甜叶菊组培苗的保存方法，其特征在于，所述的每瓶接入的甜叶菊单节茎段数为1个。
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