CN104255447A - 一种柳兰的快速繁殖方法 - Google Patents
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Abstract
本发明研究了一种柳兰诱变育种的快速繁殖方法，包括无菌外植体的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的诱变育种、愈伤组织的分化、生根诱导等步骤，本发明方法所制备的柳兰可以提高突变频率，得到丰富的变异体，增加选择机会，缩短育种周期，为选育新品种提供丰富的材料。
Description
技术领域
本发明涉及柳兰诱变育种的快繁方法，属于植物技术领域。
背景技术
柳兰，Epilobium angustifolium Linn.柳叶菜科，多年生草本，高约1—1.3米。茎直立，通常不分枝。叶互生，披针形，总状花序顶生，伸长，花序轴被短柔毛，苞片线形，长1—2厘米，花大，两性，红紫色。根、茎、叶、花、果均含鞣质，分布于我国西南、西北、华北至东北；北温带广布，北美洲、欧洲至日本，自然生于海拔较高的林缘、林间、山坡草地、河岸草丛及火烧或采伐迹地。耐寒。喜凉爽、湿润气候及湿润、肥沃、排水良好的土壤。稍耐阴。畏炎热、干旱的环境。柳兰全草70%丙酮提取物中分得9个鞣质类及其他酚性化合物，分别鉴定为3-氧-没食子酰基-D-葡萄糖、1，6-二-氧-没食子酰基-β-D-吡喃型葡萄糖、1-氧-没食子酰基-4，6-六羟基联苯甲酰基-β-D-吡喃型葡萄糖、水杨梅丁素、英国栎鞣花酸、特里马素、虾子花素、绿原酸、没食子酸。根状茎或全草入药，有小毒，能调经活血、消肿止痛，主治月经不调、骨折、关节扭伤。柳兰繁殖采用种子繁殖，也可分株和扦插繁殖，诱变育种可以提高突变频率，得到丰富的变异体，增加选择机会，缩短育种周期，为选育新品种提供丰富的材料。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供柳兰诱变育种的快速繁殖方法，提高突变频率，得到丰富的变异体，增加选择机会，缩短育种周期，为选育新品种提供丰富的材料。
为解决上述技术问题，本发明采用下列技术方案：
取柳兰花瓣，在流水冲洗3min，表面无污垢，超净工作台上次氯酸钠处理4min，无菌水冲洗5遍，吸水纸吸去表面水分，灭菌处理过的柳兰花瓣接入培养基配方为B5+NAA1mg/L+IBA2mg/L+50mg/LVC诱导培养基中进行愈伤组织诱导培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，暗室培养，温度25℃，诱导出来的愈伤组织做60Co-γ射线10-30Gy处理，加入分化培养基B5+NAA0.1-0.2mg/L+6-BA1-2mg/L中诱导分化，获得新品种植株。
采用本发明制备的柳兰新品种植株，生长速度快，药用次生代谢物含量高，能耗少，污染小。
下面将结合具体实施方式对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施方式
实施例1
取柳兰花瓣，在流水冲洗3min，表面无污垢，超净工作台上次氯酸钠处理4min，无菌水冲洗5遍，吸水纸吸去表面水分，灭菌处理过的柳兰花瓣接入培养基配方为B5+NAA1mg/L+IBA2mg/L+50mg/LVC诱导培养基中进行愈伤组织诱导培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，暗室培养，温度25℃，诱导出来的愈伤组织做60Co-γ射线10Gy处理，加入分化培养基B5+NAA0.1mg/L+6-BA1mg/L中诱导分化，获得新品种植株，诱变率75%。
实施例2
取柳兰花瓣，在流水冲洗3min，表面无污垢，超净工作台上次氯酸钠处理4min，无菌水冲洗5遍，吸水纸吸去表面水分，灭菌处理过的柳兰花瓣接入培养基配方为B5+NAA1mg/L+IBA2mg/L+50mg/LVC诱导培养基中进行愈伤组织诱导培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，暗室培养，温度25℃，诱导出来的愈伤组织做60Co-γ射线30Gy处理，加入分化培养基B5+NAA0.2mg/L+6-BA2mg/L中诱导分化，获得新品种植株，诱变率77%。
实施例3
取柳兰花瓣，在流水冲洗3min，表面无污垢，超净工作台上次氯酸钠处理4min，无菌水冲洗5遍，吸水纸吸去表面水分，灭菌处理过的柳兰花瓣接入培养基配方为B5+NAA1mg/L+IBA2mg/L+50mg/LVC诱导培养基中进行愈伤组织诱导培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，暗室培养，温度25℃，诱导出来的愈伤组织做60Co-γ射线20Gy处理，加入分化培养基B5+NAA0.1mg/L+6-BA2mg/L中诱导分化，获得新品种植株，诱变率79%。
Claims (4)
1. 一种柳兰诱变育种的快速繁殖方法，包括无菌外植体的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的诱变育种、生根诱导，其主要步骤如下：
（1）取柳兰的花瓣芽，在超净工作台上进行消毒处理；
（2）取步骤（1）灭菌处理过的柳兰花瓣接入培养基配方为B5+NAA1mg/L+IBA2mg/L+50mg/LVC诱导培养基中进行愈伤组织诱导培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，暗室培养，温度25℃；
（3）取步骤（2）诱导出来的愈伤组织做60Co-γ射线10-30Gy处理；
（4）取步骤（3）诱导出来的愈伤组织加入分化培养基B5+NAA0.1-0.2mg/L+6-BA1-2mg/L中诱导分化。
2. 按照权利要求1所述的一种柳兰诱变育种的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（1）中所述诱导愈伤组织的外植体选择为柳兰的花瓣，花瓣是诱导愈伤组织的好材料。
3. 按照权利要求1所述的一种柳兰诱变育种的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（1）柳兰无菌花瓣的获得为，取柳兰花瓣，在流水冲洗3min，表面无污垢，超净工作台上次氯酸钠处理4min，无菌水冲洗5遍，吸水纸吸去表面水分。
4. 按照权利要求1所述的一种柳兰诱变育种的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（3）诱变育种选择60Co-γ射线能促进染色体结构发生显著变化，花期株型和花色，叶绿素含量、光合速率和次生代谢物含量等指标均发生了变化。
Priority Applications (1)
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| CN201410463157.8A CN104255447A (zh) | 2014-09-12 | 2014-09-12 | 一种柳兰的快速繁殖方法 |
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| CN104255447A true CN104255447A (zh) | 2015-01-07 |
Family
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Country Status (1)
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| CN (1) | CN104255447A (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105993932A (zh) * | 2016-06-07 | 2016-10-12 | 中国林业科学研究院林业研究所 | 树兰蒴果60Co-γ射线辐射诱变方法 |
| CN109892193A (zh) * | 2017-12-11 | 2019-06-18 | 锡林郭勒职业学院 | 一种野生柳兰人工培育方法 |
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2014
- 2014-09-12 CN CN201410463157.8A patent/CN104255447A/zh active Pending
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| CN105993932A (zh) * | 2016-06-07 | 2016-10-12 | 中国林业科学研究院林业研究所 | 树兰蒴果60Co-γ射线辐射诱变方法 |
| CN109892193A (zh) * | 2017-12-11 | 2019-06-18 | 锡林郭勒职业学院 | 一种野生柳兰人工培育方法 |
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Legal Events
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| PB01 | Publication | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
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