CN104230998B - 一种线粒体靶向的铱-n-杂环卡宾配合物及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种线粒体靶向的铱‑N‑杂环卡宾配合物，结构式如式（I）、（II）或（III）所示：，其中，式（I）、（II）和（III）所示化合物分别命名为配合物Ir‑1、配合物Ir‑2、配合物Ir‑3。本发明对此类铱‑N‑杂环卡宾配合物的线粒体靶向性和抗癌活性进行了研究，结果显示，其能够快速进入细胞并特异性靶向癌细胞的线粒体，具有优异的抗肿瘤活性和肿瘤细胞光毒性，可以作为一种潜在的线粒体抗肿瘤药物和光动力治疗药物。
Description
技术领域
本发明属于药物化学领域。更具体地，涉及一种线粒体靶向的铱-N-杂环卡宾配合物及其制备方法和应用。
背景技术
铂类药物在癌症的治疗中取得了令人瞩目的成就，但是仍然没能充分解决与顺铂类似的许多缺点，其严重的副作用和耐药性，限制了铂类药物在临床上的适用范围。因此，寻找具有不同作用机理的新型金属抗癌药物，以改良或补充现有铂类药物的性能是当前的研究热点。由于传统的金属抗肿瘤药物大多以双链DNA作为作用靶点，因此很难打破铂类药物的种种限制。
线粒体是细胞内重要细胞器，参与细胞内三羧酸循环、脂肪酸代谢、氧化磷酸化等多项重要的生理和生化过程。近年来研究表明，线粒体是介导细胞凋亡的重要细胞器。线粒体中的一系列代谢过程与细胞凋亡密切相关。因此线粒体可以作为抗肿瘤药物的靶点，通过诱导细胞凋亡的途径杀死肿瘤癌细胞，可以克服铂类药物的耐药性和遗传毒性。目前，基于线粒体的抗肿瘤药物研究已成为热点，因而设计合成具有线粒体特异性靶向及抗肿瘤活性的药物具有广阔的应用前景。目前已报道的以线粒体凋亡途径为靶点的抗肿瘤药物大都是小分子化合物和反义核酸，但是这些小分子化合物存在水溶性低等缺陷。
N-杂环卡宾（NHC）是一种电中性的分子，其中心碳原子为二价，最外层只有六个电子，其金属配合物在催化领域得到了广泛应用。随着对N-杂环卡宾化合物研究的不断深入，研究人员发现NHC金属配合物不仅具有高效催化活性，同时也表现出非常好的生理活性，具有广泛的医学应用前景。
目前，越来越多的具有抗肿瘤活性的N-杂环卡宾金属配合物被报道，可以作为肿瘤潜在的治疗药物。本发明人前期研究工作报道了一种银和金-N-杂环卡宾配合物，该N-杂环卡宾配合物能够实现线粒体靶向抗肿瘤作用，相比传统的抗肿瘤药物，具有明显的特点和优势，如肿瘤细胞选择性，细胞器靶向（包括线粒体、溶酶体、内质网等）和酶抑制活性（包括硫氧还蛋白酶、雌激素受体、环氧化酶等）。因此，N-杂环卡宾金属配合物作为抗肿瘤药物的研究正在引起人们越来越多的关注。但是，研究显示不同金属的N-杂环卡宾配合物，其功能活性具有很大的差别，其抗肿瘤机制也因金属中心的不同而不同，如银配合物是通过线粒体介导的caspase（含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶）非依赖途径诱导癌细胞凋亡，而金配合物是通线粒体介导的caspase依赖途径诱导癌细胞凋亡。
因此，进一步探索不同的N-杂环卡宾金属配合物，以及其更多的功效和作用，对于抗肿瘤的研究具有非常重要的意义。
发明内容
本发明要解决的技术问题是克服现有线粒体靶向抗肿瘤药物的缺陷和不足，提供一种具有线粒体特异性靶向抗肿瘤功能的铱-N-杂环卡宾配合物。
本发明另一目的是提供上述铱-N-杂环卡宾配合物的制备方法。
本发明再一目的是提供上述铱-N-杂环卡宾配合物的应用。
本发明上述目的通过以下技术方案实现：
一种线粒体靶向的铱-N-杂环卡宾配合物，结构式如式（I）、（II）或（III）所示：
其中，式（I）、（II）和（III）所示化合物分别命名为配合物Ir-1、配合物Ir-2、配合物Ir-3。
如上所述铱-N-杂环卡宾配合物也可命名为[Ir(ppy)2L]Cl，其中ppy为2-苯基吡啶。当L为1,1’-亚甲基-3,3’-二甲基二咪唑时，即为式（I）所示的配合物Ir-1；
当L为1,1’-亚甲基-3,3’-二乙基二咪唑时，即为式（II）所示的配合物Ir-2；
当L为1,1’-亚甲基-3,3’-二丁基二咪唑时，即为式（III）所示的配合物Ir-3。
本发明还提供了一种上述线粒体靶向的铱-N-杂环卡宾配合物的制备方法，包括如下步骤：
S1.制备配体L，所述配体L为1,1’-亚甲基-3,3’-二甲基二咪唑、1,1’-亚甲基-3,3’-二乙基二咪唑或1,1’-亚甲基-3,3’-二丁基二咪唑；
S2.将化学计量比为1:2.1:2.1的铱二聚物前体Ir[(ppy)2]2Cl、配体L和氧化银（Ag2O）混合，在95 ℃的第一溶剂中反应12 h；其中，ppy为2-苯基吡啶；
S3.反应结束后冷却至室温，硅藻土过滤，得黄色清液，浓缩至2 mL，加入30 mL第二溶剂，有黄色固体析出，过滤，干燥，即得配合物[Ir(ppy)2L]Cl；
优选地，S1所述制备配体L的方法为：
S11.将化学计量比为1:3的二氯甲烷和1-甲基咪唑或1-乙基咪唑或1-丁基咪唑加入到反应瓶中，在75 ℃密闭容器中反应24 h；
S12.反应结束后冷却至室温，旋蒸干溶剂后，用2 mL甲醇溶解，加入到30 mL四氢呋喃中于室温搅拌2 h；
S13.生成的白色固体经过过滤、四氢呋喃洗涤、真空干燥，得到配体L。
优选地，S2所述第一溶剂为二氯甲烷；S3所述第二溶剂为无水乙醚。
上述铱-N-杂环卡宾配合物的制备方法的化学反应可用下列反应式表达：
利用上述制备方法制备得到的线粒体靶向的铱-N-杂环卡宾配合物也在本发明的保护范围之内。
另外，本发明还提供上述线粒体靶向的铱-N-杂环卡宾配合物在制备线粒体靶向性药物中的应用，以及上述线粒体靶向的铱-N-杂环卡宾配合物在制备抗肿瘤药物中的应用。
优选地，所述抗肿瘤药物具有线粒体靶向性；所述肿瘤为肝癌、宫颈癌、肺癌或乳腺癌。更优选地，所述肺癌为对顺铂具有耐药性的肺癌。
同时，本发明还提供上述铱-N-杂环卡宾配合物在制备肿瘤光动力治疗药物中的应用。优选地，所述的肿瘤为宫颈癌或肺癌。更优选地，所述肺癌为对顺铂具有耐药性的肺癌。
不同金属中心的N-杂环卡宾金属配合物的性质和作用具有很大的差别，其抗肿瘤机理也有明显的区别。本发明人前期研究工作报道了一种银和金-N-杂环卡宾配合物，该N-杂环卡宾配合物能够实现线粒体靶向抗肿瘤作用，但是其抗肿瘤机制因金属中心的不同而不同，其中银配合物是通过线粒体介导的caspase非依赖途径诱导癌细胞凋亡，而金配合物是通线粒体介导的caspase依赖途径诱导癌细胞凋亡。
本发明通过大量的研究和探索，进一步制备了一种铱-N-杂环卡宾配合物，并对其线粒体靶向性和抗肿瘤活性进行了研究，结果显示，该铱-N-杂环卡宾配合物具有优异的线粒体靶向性和抗肿瘤活性，且抗肿瘤活性远远优于之前报道的金-N-杂环卡宾配合物和银-N-杂环卡宾配合物；其作用机制是线粒体介导的caspase依赖诱导癌细胞凋亡。
另外研究发现，该铱-N-杂环卡宾配合物对肿瘤细胞（癌细胞）具有非常强的光毒性，因此具有非常优异的癌细胞光动力治疗活性。
本发明具有以下有益效果：
本发明公开了一种线粒体靶向的铱-N-杂环卡宾配合物，此类铱-N-杂环卡宾配合物的线粒体不仅能够快速进入细胞并特异性靶向癌细胞的线粒体，能够激活细胞内的caspase-3/7活性，通过caspase途径诱导细胞凋亡；还具有优异的抗肿瘤活性，同样条件下，其抗肿瘤活性是顺铂的3～10倍，能够跨越顺铂的耐药机制，可以作为一种潜在的线粒体抗肿瘤药物；且抗肿瘤活性远远优于之前报道的金-N-杂环卡宾配合物和银-N-杂环卡宾配合物。
同时，该铱-N-杂环卡宾配合物对肿瘤细胞具有很强的光毒性，具有优秀的肿瘤细胞光动力治疗活性，对A549R细胞中的抗肿瘤活性提高3488倍，可以作为一种潜在的光动力治疗药物。
另外，本发明所述的具有线粒体靶向抗肿瘤活性的化合物金属配合物铱-N-杂环卡宾，对细胞周期没有明显影响，因此其靶点不是DNA，没有遗传毒性。同时该铱-N-杂环卡宾配合物包含金属离子，其本身带电荷，相对于传统的有机小分子来说，增加了一定的水溶性，而且金属配合物具有多配位构型，可以进行不同配体的修饰。
附图说明
图1是实施例2中铱-N-杂环卡宾配合物和线粒体探针对HeLa细胞的共定位图。
图2为本发明所得铱-N-杂环卡宾配合物（配合物Ir-1，Ir-2 和Ir-3）对肿瘤细胞株周期的影响。
图3为本发明所得铱-N-杂环卡宾配合物（配合物Ir-1，Ir-2 和Ir-3）细胞内的caspase-3/7的激活作用。
具体实施方式
以下结合说明书附图和具体实施例来进一步说明本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。
除非特别说明，本发明所用试剂和材料均为市购。
实施例1
1、制备配合物Ir-1
（1）制备配体L1：
将二氯甲烷（1.699 g，20 mmol）和1-甲基咪唑（4.926 g，60 mmol）加入到反应瓶中，然后在75℃密闭容器中反应24 h后，反应结束后冷却至室温，旋蒸干溶剂后，用少量甲醇溶解，加入到大量四氢呋喃中于室温搅拌2 h，有大量白色固体生成，过滤，四氢呋喃洗涤，真空干燥，得到白色固体得到配体2.123 g，产率为42.6%。
1H NMR (300 MHz，DMSO) δ 9.86 (s，2H)，8.27 (s，2H)，7.79 (s，2H)，6.89 (s，2H)，3.88 (s，6H)。13C NMR (75 MHz，DMSO) δ 138.69，124.60，122.53，57.99，36.66。
ESI-MS：理论值： m/z 177.2 [M-Cl-H]+ 和 89.1 [M-2Cl]+；实验值：m/z [M-Cl-H]+ 177.1 和 89.0 [M-2Cl]+。
元素分析： C9H14Cl2N4（分子量249.14），理论值： C, 43.39; H, 5.66; N, 22.49；实验值：C, 43.15; H, 5.43; N, 22.66。
（2）制备配合物Ir-1：
将Ir[(ppy)2]2Cl2（75 mg，0.07 mmol）、配体L1（37 mg，0.15 mmol）和氧化银（35mg，0.15 mmol）在二氯甲烷中于95℃反应12 h，反应结束后冷却至室温，硅藻土过滤得黄色清液，浓缩至2 mL左右，加入大量无水乙醚，有大量黄色固体析出，过滤，干燥即得配合物85mg，产率为84.7%。
1H NMR (500 MHz，DMSO) δ 8.24 (s，2H), 8.23 (s，2H)，8.00 – 7.93 (m，2H)，7.80 (d, J = 7.3 Hz，2H)，7.59 (s，2H)，7.34 (d，J = 1.9 Hz，2H)，7.24 – 7.17 (m,2H)，6.87 – 6.81 (m，2H)，6.74 (td，J = 7.4，1.1 Hz, 2H)，6.19 (dd，J = 7.5，0.7 Hz，2H)，6.12 (s，2H)，3.49 (dd，J = 13.2，7.0 Hz，2H)，3.38 – 3.33 (m，2H), 0.23 (s，6H).13C NMR (126 MHz，DMSO) δ 169.20，163.23，153.53，144.99，138.01，131.63，128.89，124.99，124.33，123.81，122.06，121.60，120.50，62.29，37.03。
ESI-MS：理论值：m/z 677.2 [M-Cl]+；实验值：m/z 677.0 [M-Cl]+。
元素分析：Ir C31H28ClN61.5CH2Cl20.5H2O（分子量848.67）：理论值C，46.00； H，3.80；N，9.90；实验值：C，45.63；H，3.62；N，9.95。
2、制备配合物Ir-2
（1）制备配体L2：
将二氯甲烷（1.699 g，20 mmol）和1-乙基咪唑（5.768 g，60 mmol）加入到反应瓶中，然后在75 ℃密闭容器中反应24 h后，反应结束后冷却至室温，旋蒸干溶剂后，用少量甲醇溶解，加入到大量四氢呋喃中于室温搅拌2 h，有大量白色固体生成，过滤，四氢呋喃洗涤，真空干燥，得到白色固体得到配体2.483 g，产率为44.8%。
1H NMR (300 MHz，DMSO) δ 10.02 (s，2H)，8.30 (d，J = 1.8 Hz，2H)，7.91 (s，2H)，6.85 (s，2H)，4.23 (q，J = 7.3 Hz, 4H)，1.43 (s，6H)。13C NMR (75MHz，DMSO) δ137.96，122.92，122.44，58.06，45.17，15.10。
ESI-MS：理论值：m/z 206.3 [M-Cl-H]+和103.1 [M-2Cl]+；实验值： m/z [M-Cl-H]+ 205.6和102.7 [M-2Cl]+。
元素分析：C11H18Cl2N4（分子量277.19）：理论值C，47.66；H，6.55；N，20.21；实验值：C，47.35；H, 6.73；N，20.04。
（2）制备配合物Ir-2：
将Ir[(ppy)2]2Cl2（75 mg，0.07 mmol），配体L2（41 mg，0.15 mmol）和氧化银（35mg，0.15 mmol）在二氯甲烷中于95℃反应12 h，反应结束后冷却至室温，硅藻土过滤得黄色清液，浓缩至2 mL左右，加入大量无水乙醚，有大量黄色固体析出，过滤，干燥即得配合物100 mg，产率为96.2%。
1H NMR (500 MHz，DMSO) δ 8.24 (s，2H)，8.23 (s，2H)，8.01 – 7.93 (m，2H)，7.80 (d，J = 7.3 Hz，2H)，7.59 (s，2H)，7.34 (d，J = 1.9 Hz, 2H)，7.24 – 7.18 (m,2H)，6.88 – 6.81 (m, 2H)，6.74 (td，J = 7.4，1.1 Hz，2H)，6.19 (dd，J = 7.5，0.7 Hz，2H)，6.12 (s，2H)，3.49 (dd，J = 13.2，7.0 Hz, 2H)，0.23 (t，J = 7.1 Hz, 6H)。13C NMR(126 MHz，DMSO) δ 169.12，163.03，162.56，153.50，144.91，137.99，131.21，129.32，124.89，123.80，123.01，122.14，121.56，120.70，62.23，44.03，15.81。
ESI-MS：理论值：m/z 703.2 [M-Cl]+； 实验值：m/z 702.9 [M-Cl]+。
元素分析：Ir C33H32ClN6CH2Cl20.5H2O（分子量834.26）：理论值： C，48.95；H,4.23；N，10.07；实验值：C，48.64；H，4.11；N，10.16。
3、制备配合物Ir-3
（1）制备配体L3：
将二氯甲烷（1.699 g，20 mmol）和1-丁基咪唑（7.451 g，60 mmol）加入到反应瓶中，然后在75 ℃密闭容器中反应24 h后，反应结束后冷却至室温，旋蒸干溶剂后，用少量甲醇溶解，加入到大量四氢呋喃中于室温搅拌2h，有大量白色固体生成，过滤，四氢呋喃洗涤，真空干燥，得到白色固体得到配体3.093 g，产率为46.4%。
1H NMR (300 MHz，DMSO) δ 10.10 (s，2H)，8.37 (s，2H)，7.92 (s，2H)，6.89 (s，2H)，4.21 (t，J = 7.2 Hz, 4H)，1.88 – 1.68 (m，4H)，1.26 (dq，J = 14.5，7.4 Hz, 4H)，0.89 (t，J = 7.3 Hz，6H). 13C NMR (75MHz，DMSO) δ 138.29，123.41，122.74，57.86，49.49，31.46，19.22，13.72。
ESI-MS：理论值：m/z 262.4 [M-Cl-H]+ 和131.2 [M-2Cl]+。实验值：m/z [M-Cl-H]+ 260.9和130.9 [M-2Cl]+。
元素分析：C15H26Cl2N4（分子量332.15）理论值：C，54.05；H，7.86；N，16.81；实验值：C，54.35；H，7.80；N，16.6。
（2）制备配合物Ir-3：
将Ir[(ppy)2]2Cl2（75 mg，0.07 mmol），配体L3（50 mg，0.15 mmol）和氧化银（35mg，0.15 mmol）在二氯甲烷中于95℃反应12 h，反应结束后冷却至室温，硅藻土过滤得黄色清液，浓缩至2 mL左右，加入大量无水乙醚，有大量黄色固体析出，过滤，干燥即得配合物108 mg，产率为96.9%。
1H NMR (500 MHz，DMSO) δ 8.23 (d，J = 8.1 Hz，2H)，8.21 (d，J = 5.6 Hz，2H), 8.01 – 7.93 (m，2H)，7.80 (d，J = 7.5 Hz，2H)，7.59 (d，J = 1.9 Hz，2H)，7.34(d，J = 1.9 Hz, 2H)，7.25 – 7.17 (m, 2H)，6.88 – 6.81 (m，2H)，6.72 (td，J = 7.5，1.0 Hz, 2H)，6.18 (d，J = 7.0 Hz，2H)，6.12 (s，2H)，3.37 (dd，J = 12.3，5.4 Hz, 2H)，3.27 – 3.18 (m，2H)，0.94 (ddd，J = 16.5，11.2，5.6 Hz，2H)，0.73 – 0.59 (m，4H)，0.54(t，J = 7.2 Hz, 6H)，0.18 – 0.07 (m，2H)。13C NMR (126 MHz，DMSO) δ 169.10，163.16，162.68，153.50，144.86，137.93，131.11，129.35，124.94，123.74，122.85，122.49，121.40，120.69，62.22，48.83，33.32，19.62，13.86。
ESI-MS：理论值：m/z 759.3 [M-Cl]+；实验值：m/z 759.0 [M-Cl]+。
元素分析：Ir C37H40ClN6CH2Cl20.5H2O（分子量890.36）：理论值：C, 51.26；H，4.87；N，9.44；实验值：C，50.96；H，4.82；N，10.08。
实施例2铱-N-杂环卡宾配合物线粒体靶向及诱导线粒体肿胀实验
1、通过激光共聚焦荧光显微镜测定本发明制备的铱-N-杂环卡宾配合物的线粒体靶向性和线粒体肿胀跟踪，测定方法如下：
将细胞用0.25%胰蛋白酶消化成单细胞悬液，采用血球计数板进行活细胞数记录，按照每孔约20万细胞接种于共聚焦培养皿中，培养24 h后，再分别加入线粒体探针Mito-tracker Red（购自Invitrogen公司）和20 μM铱-N-杂环卡宾配合物，于37 ℃，在含5%（体积浓度）CO2的培养箱中共孵育30 min。然后吸取弃去旧培养基，用磷酸盐缓冲液（PBS）洗涤2次，加入1 mL PBS，立即于激光共聚焦显微镜下观察。
2、观察结果，铱-N-杂环卡宾配合物和线粒体探针对HeLa细胞的共定位情况如如附图1所示。结果表明，铱配合物的荧光与线粒体探针的荧光重叠率达到88%左右，并且线粒体出现肿胀现象，说明该铱-N-杂环卡宾配合物主要富集在线粒体中并且通过线粒体途径诱导细胞死亡。其中a图为明场照片，b图为配合物405纳米激发通道照片，c图为线粒体探针543纳米激发通道照片，d图为a、b、c合并图片。
实施例3铱-N-杂环卡宾配合物抗肿瘤活性及对肿瘤细胞的光毒性
1、本实施例对本发明制备的铱-N-杂环卡宾配合物抗肿瘤活性进行评价，以药物cisplatin为对照，分组情况如下：
对照组：药物cisplatin（顺铂）；实验组：铱-N-杂环卡宾配合物。
2、细胞毒性采用四唑盐（MTT）比色法测定，具体测定方法如下：
将细胞用质量体积比为0.25%的胰蛋白酶消化成单细胞悬液，采用血球计数板进行活细胞数记录，调整活细胞浓度为5×104/mL，接种于96孔培养板，每孔160 μL，培养24 h后，再分别加入不同浓度药物，置37 ℃，在含5%（体积浓度）CO2的培养箱中孵育48 h，于结束前4 h加入MTT 20 μL/孔，4 h后弃上清液，加入DMSO 150 μL /孔，振荡10分钟左右，酶标仪测定OD值，波长设置为595 nm，按下列公式计算存活率，同时作图并求得半数杀伤浓度（IC50），评价药物的细胞毒性。
存活率%=加药孔平均OD值/对照孔平均OD值×100%。
受试细胞株分别为HepG2（人肝癌细胞株），HeLa（人宫颈癌细胞株），A549（人肺癌细胞株），A549R（耐顺铂人肺癌细胞株），MCF-7（人乳腺癌细胞株）和LO2（人正常细胞株）。
结果显示，本发明所得配合物Ir-1，Ir-2 和Ir-3对多种肿瘤细胞株增殖的IC50值如表1所示：
表1 铱-N-杂环卡宾配合物对各种癌细胞的IC50值
3、本发明还研究了铱-N-杂环卡宾配合物对肿瘤细胞的光毒性
光毒性实验过程与细胞毒性实验过程类似，区别在于在光毒性实验过程中，加入不同浓度药物12 h后，将细胞于20 mW/cm2 、365 nm下光照10分钟，后续处理与细胞毒性实验完全一致。
结果显示，本发明所得配合物Ir-1，Ir-2 和Ir-3对多种肿瘤细胞株增殖的光毒性如表2所示：
表2 铱-N-杂环卡宾配合物对各种癌细胞的光毒性
实施例4
本实施例对本发明制备的铱-N-杂环卡宾配合物发挥线粒体靶向抗肿瘤作用的机制进行解释。
通过流式细胞仪测定本发明制备的铱-N-杂环卡宾配合物对肿瘤细胞的细胞周期、诱导细胞凋亡能力及caspase 3/7活性的影响。
1、细胞周期通过碘化丙啶（PI）染色法测定，具体测定方法如下：
将细胞接种于60 mm的培养皿（Corning公司的培养皿）中，培养24h后，在经过12h、24 h、36 h和48 h的药物共孵育后，分别收集细胞，并以没有加入药物处理的细胞作为对照组，观察药物对细胞周期的影响。
处理完的细胞用胰酶消化收集，用PBS洗涤两次，再用100 μL PBS重悬，在漩涡器上缓慢加入2 mL 4 ℃预冷的70%乙醇。将细胞置于-20 ℃固定过夜，离心收集细胞，用PBS洗涤两次，用500 μL含有10 mg/mL RNAase的PI（50 μg/mL）重悬，30min后将细胞悬液用400目尼龙膜过滤，收集于流式管中，用流式细胞仪（FACSCaliburTM，Becton Dickinson，NJ，USA）进行检测，每个样品获取10000个细胞进行分析，数据用ModFit LT 2.0软件分析。
结果显示，本发明所得配合物Ir-1，Ir-2 和Ir-3对肿瘤细胞株的周期没有明显影响（结果如附图2所示），因此其靶点不是DNA，没有遗传毒性。
2、细胞内caspase-3/7活性测定
将HeLa细胞接种于96孔白板中，药物处理12h后，用Caspase-Glo® 3/7 Assay试剂盒测定（购自Promega公司），按照说明书的方法测定caspase-3/7的活性。
结果显示，本发明所得配合物Ir-1，Ir-2 和Ir-3 能激活细胞内的caspase-3/7，从而通过caspase途径诱导细胞凋亡，其结果如附图3所示。
Claims (9)
1.一种线粒体靶向的铱-N-杂环卡宾配合物，其特征在于，其结构式如式（I）、（II）或（III）所示：
。
2.一种权利要求1所述线粒体靶向的铱-N-杂环卡宾配合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1.制备配体L，所述配体L为1,1’-亚甲基-3,3’-二甲基二咪唑、1,1’-亚甲基-3,3’-二乙基二咪唑或1,1’-亚甲基-3,3’-二丁基二咪唑；
S2.将化学计量比为1：2.1：2.1的铱二聚物前体Ir[(ppy)2]2Cl、配体L和氧化银混合，在95℃的第一溶剂中反应12 h；其中，ppy为2-苯基吡啶；
S3.冷却至室温，硅藻土过滤，得黄色清液，浓缩至2 mL，加入30mL第二溶剂，有黄色固体析出，过滤，干燥，即得配合物；
其中，S2所述第一溶剂为二氯甲烷；S3所述第二溶剂为无水乙醚。
3.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，S1所述制备配体L的方法为：
S11.将化学计量比为1:3的二氯甲烷和1-甲基咪唑或1-乙基咪唑或1-丁基咪唑，在75℃密闭容器中反应24 h；
S12.冷却至室温，旋蒸干溶剂后，用2 mL甲醇溶解，加入到30 mL四氢呋喃中，室温搅拌2 h；
S13.生成的白色固体经过过滤、四氢呋喃洗涤、真空干燥，得到配体L。
4.权利要求1所述线粒体靶向的铱-N-杂环卡宾配合物在制备线粒体靶向性药物中的应用。
5.权利要求1所述线粒体靶向的铱-N-杂环卡宾配合物在制备抗肿瘤药物中的应用。
6.根据权利要求5所述应用，其特征在于，所述抗肿瘤药物具有线粒体靶向性；所述肿瘤为肝癌、宫颈癌、肺癌或乳腺癌。
7.权利要求1所述铱-N-杂环卡宾配合物在制备肿瘤光动力治疗药物中的应用。
8.根据权利要求7所述应用，其特征在于，所述的肿瘤为宫颈癌或肺癌。
9.根据权利要求6或8所述应用，其特征在于，所述肺癌为对顺铂具有耐药性的肺癌。
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