CN110857310B - 一种具有光活性的多联吡啶钌配合物及其应用 - Google Patents

一种具有光活性的多联吡啶钌配合物及其应用 Download PDF

Info

Publication number
CN110857310B
CN110857310B CN201810911633.6A CN201810911633A CN110857310B CN 110857310 B CN110857310 B CN 110857310B CN 201810911633 A CN201810911633 A CN 201810911633A CN 110857310 B CN110857310 B CN 110857310B
Authority
CN
China
Prior art keywords
complex
cells
rul1
ruthenium
polypyridyl
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201810911633.6A
Other languages
English (en)
Other versions
CN110857310A (zh
Inventor
何卫江
郭子建
韩重
齐芬
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Nanjing University
Original Assignee
Nanjing University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Nanjing University filed Critical Nanjing University
Priority to CN201810911633.6A priority Critical patent/CN110857310B/zh
Publication of CN110857310A publication Critical patent/CN110857310A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN110857310B publication Critical patent/CN110857310B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F15/00—Compounds containing elements of Groups 8, 9, 10 or 18 of the Periodic Table
    • C07F15/0006—Compounds containing elements of Groups 8, 9, 10 or 18 of the Periodic Table compounds of the platinum group
    • C07F15/0046—Ruthenium compounds
    • C07F15/0053—Ruthenium compounds without a metal-carbon linkage
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
    • A61K41/0057—Photodynamic therapy with a photosensitizer, i.e. agent able to produce reactive oxygen species upon exposure to light or radiation, e.g. UV or visible light; photocleavage of nucleic acids with an agent
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明基于[Ru(bpy)3]2+为核心的多联吡啶钌配合物，通过对其配体进行修饰，合成了具有不同共轭体系的Ru(II)配合物，并研究了配体共轭结构对该类配合物单线态氧产率的影响。在对肿瘤的光动力学治疗中，本发明所述的配合物具有最大单线态氧产率，在光照下不仅具有更高的光毒性，同时细胞对配合物的摄取量也得到了提高，摄取量的提升导致了其进入细胞后可能的化学抗癌作用，进一步提高了其抗肿瘤活性。

Description

一种具有光活性的多联吡啶钌配合物及其应用
技术领域
本发明属于金属配合物领域，具体涉及一种具有光活性的多联吡啶钌配合物及其应用
背景技术
癌症已经成为人类健康的第二大杀手，严重危害着人类的生命，联合国癌症署日前指出，到2030年，每年将有超过1300万人死于癌症。化疗药物、生物制剂以及靶向药物等是目前最为常用的抗癌药物。其中，化疗药物是治疗癌症的主要手段。在化疗药物中，铂类药物的临床使用率超过了50％。铂类药物的抗癌机理通常为与DNA结合，通过改变DNA的空间结构，抑制DNA的复制与转录，来阻止肿瘤细胞的增殖，但肿瘤细胞对铂类抗癌药物的自身的或者获得性的抗药性限制了该类药物的临床使用。另外，在癌症的治疗过程中，铂类抗肿瘤药物出现了严重的副作用，例如肾毒性、神经毒性、血小板减少症和嗜中性白血球减少症等。为了减少化疗药物的毒副作用，寻找新型非铂系金属抗肿瘤化合物成为了目前研究的热点。
国际上普遍认为钌配合物具有对人体正常细胞毒性低，容易被人体吸收，生物半衰期短，容易被排泄等特点，欧盟于1997年还专门成立了钌抗癌药物的研究和发展工作组(COST D8)专门加强钌抗癌药物的研究。光动力治疗指在氧气和光敏剂存在下，通过光照损伤细胞或组织的治疗方式。光动力治疗药物具有高度的选择性和组织定位性，并且由于其只在光照下对组织产生毒性，这就大幅度减少了常见化疗药物的副作用。目前有抗肿瘤活性的钌化合物按照配体的不同主要分为氨和亚胺类，多吡啶类，乙二胺四乙酸类，二甲基亚砜(DMSO)类。在已经报道的工作中，有多种钌配合物表现出了很好的抗肿瘤活性，其中某些钌配合物目前已经进入I期或II期临床阶段。由于多吡啶类钌配合物具有的独特的光物理和光化学性质，如良好的水溶性，很强的单线态氧量子产率，磷光寿命长，以及优良的光稳定性，使其成为理想的光动力治疗候选药物。
多吡啶类钌配合物在合成方面的研究很早，但早期主要研究他们在光化学、光物理和电化学方面的性质，用于抗肿瘤方面的研究很少。直到上世纪90年代，才见到mer-[Ru(terpy)Cl3]对LS/BL鼠腹水癌表现出活性的相关研究报道。加拿大阿卡迪亚大学McFarland教授报道了基于配体内三重激发态的磷光寿命超长(22-270ms)的多联吡啶钌配合物。该配合物处理对氧气浓度需求非常低的Malme-3M细胞株，在7J/cm2的白光照射下光毒性为200nM，而其暗毒性仅为62mM。目前提高多联吡啶钌类光敏剂的单线态氧产率和解决该类光敏剂的细胞摄取能力不足问题是目前该类光敏剂研究的热点。
发明内容
本发明基于[Ru(bpy)3]2+为核心的多联吡啶钌配合物，通过对其配体进行修饰，合成了具有不同共轭体系的Ru(II)配合物，并研究了配体共轭结构对该类配合物单线态氧产率的影响。在对肿瘤的光动力学治疗中，本发明所述的配合物具有最大单线态氧产率，在光照下不仅具有更高的光毒性，同时细胞对配合物的摄取量也得到了提高，摄取量的提升导致了其进入细胞后可能的化学抗癌作用，进一步提高了其抗肿瘤活性。
本发明具体技术方案如下：
一种多联吡啶钌配合物，具有如下结构：
Figure BDA0001761969840000021
上述多联吡啶钌配合物，其特征在于所述配合物可以进一步与阴离子结合，所述阴离子选自Cl-、Br-，I-，NO3 -或PF4 -。
本发明一个优选的配合物为：
Figure BDA0001761969840000022
本发明的另一目的在于提供上述的多联吡啶钌配合物在制备光敏剂中的应用。
所述多联吡啶钌配合物为光动力学疗法有关的光敏剂，进一步的，所述多联吡啶钌配合物为双光子光动力学疗法有关的光敏剂。
本发明所述的应用，所述多联吡啶钌配合物作为光敏剂应用于细胞共聚焦成像。
本发明所述的应用为所述多联吡啶钌配合物在制备抗肿瘤药物中的应用。所述肿瘤选自黑色素瘤，乳腺癌、宫颈癌、胃癌、肺癌或肝癌。
本发明所述的多联吡啶钌配合物可以采用如下方法制备而成：
氩气保护下，将二氯双(4-甲基异丙基苯基)钌(II)与配体L1置于乙醇中，继续搅拌约2h直至反应物完全溶解，溶液变为透明。之后，将2，2-联吡啶的水溶液加入反应体系中，将体系升温至回流继续反应22h。反应冷却后，阴离子置换，经过硅胶柱层析得到红色的配合物RuL1固体，产率为30％。
Figure BDA0001761969840000031
附图说明
图1配合物Ru(bpy)3 2+和RuL1的乙腈溶液在光照下引起DPBF在413nm处吸收光谱的变化。
图2 10μM配合物RuL1在不同激发波长下的双光子吸收截面。
图3不同光照条件下RuL1对MCF-7细胞的激光共聚焦成像。
图4配合物RuL1对MCF-7和B16F10细胞的体外细胞毒活性实验。
图5配合物RuL1光照后对细胞形态的影响情况。
图6配合物RuL1对MCF-7和B16F10细胞在不同条件下的体外细胞毒活性实验。
图7配合物RuL1在小鼠肝部的双光子荧光共聚焦成像图和双光子荧光共聚焦z扫描图。
具体实施方式
以下结合说明书附图对本发明创造作进一步的详细说明。
为了更好地理解本发明专利的内容，下面通过具体的实例来进一步说明本发明的技术方案。但这些实施实例并不限制本发明。
实施例1：配合物RuL1的制备
Figure BDA0001761969840000032
在压力反应管中加入5-溴邻菲罗啉(300mg，1.16mmol)，4-乙炔基苯酚(274mg，2.32mmol)，四三苯基膦钯(134mg，0.12mmol)，正丙胺(25mL)，加热至80℃反应两天，反应结束后减压蒸去溶剂，柱层析(二氯甲烷：甲醇＝30:1)并在甲醇中重结晶得到配体L1(浅黄色固体，192mg，56％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6):δ10.07(s，1H)，9.22(dd，J＝4.3，1.7Hz，1H)，9.11(dd，J＝4.3，1.7Hz，1H)，8.84(dd，J＝8.2，1.7Hz，1H)，8.50(dd，J＝8.2，1.6Hz，1H)，8.31(s，1H)，7.91(dd，J＝8.2，4.3Hz，1H)，7.80(dd，J＝8.1，4.3Hz，1H)，7.60(d，J＝8.6Hz，2H)，6.89(d，J＝8.7Hz，2H).13C NMR(101MHz，DMSO-d6):δ158.60，150.58，150.41，145.34，145.21，136.06，134.29，133.43，130.21，127.96，127.58，123.86，123.77，119.22，115.88，111.87，96.01，84.01。
Figure BDA0001761969840000041
氩气保护下，将二氯双(4-甲基异丙基苯基)钌(II)(74mg，0.12mmol)与配体L1(71mg，0.24mmol)置于乙醇(5mL)中，继续搅拌约2h直至反应物完全溶解，溶液变为透明。之后，将2，2-联吡啶的水溶液(75mg，0.48mmol)加入反应体系中，将体系升温至回流继续反应22h。反应冷却后，阴离子置换，经过硅胶柱层析得到红色的配合物RuL1固体，产率为30％。1H NMR(400MHz，CD3CN):δ9.01(dd，1H，J＝8.4，1.1Hz)，8.82(s，1H)，8.60–8.50(m，5H)，8.42(s，1H)，8.17–8.06(m，4H)，8.05–7.96(m，2H)，7.89–7.79(m，3H)，7.73(dd，1H，J＝8.3，5.3Hz)，7.65–7.53(m，4H)，7.50–7.42(m，2H)，7.27-7.21(m，2H)，7.01–6.93(m，2H).13C NMR(75MHz，CD3CN)δ159.56，158.15，157.87，153.85，153.59，152.91，148.59，148.03，138.78，138.66，137.24，136.36，134.72，131.64，131.53，128.43，128.31，127.33，125.19，125.11，123.10，116.83，113.49，99.18，83.53.
实施例2配合物RuL1单线态氧产率的测定
(1)配制DPBF的DMSO溶液，浓度为10mM作为母液避光保存；(2)配制探针RuL1的乙腈溶液，浓度为1mM。参照标准物Ru(bpy)3 2+用同样的溶剂配制相同的浓度；(3)分别取一定量DPBF母液，探针溶液配制成含DPBF浓度为10μM和探针浓度为10μM(其中探针在450nm处吸光度在0.1-0.3之间)；(4)根据探针的紫外吸收波长选择波长为450nm的激光器，测定特定时间的紫外吸收；(5)共光照100s，每光照10s记录溶液产生的紫外曲线，作图。
1,3-二苯基异苯并呋喃(DPBF)作为一种高效的单线态氧捕获剂，它的分子结构本身存在一个连续的共轭体系，在415nm处有强吸收。当DPBF与单线态氧发生如下反应的时候，共轭体系被破坏，从而使得415nm的吸收有明显的下降，其反应如下所示：
Figure BDA0001761969840000051
根据以下所述公式可以得到单线态氧效率：
Figure BDA0001761969840000052
公式中ΦΔ(1O2)代表单线态氧产率，上标“S”和“R”分别代表样品和标准物质。S代表由纵坐标为DPBF随着光照时间的延长在415nm处紫外吸收值的变化，横坐标为检测时间所得直线的斜率。F代表样品溶液在光照后的光吸收量。F由公式F＝1-10-OD(OD值为样品在激发波长处的吸光度值)计算得到。标准物质Ru(bpy)3 2+在空气平衡的乙腈中单线态产率为0.56。
结果如图1所示(图a为Ru(bpy)3 2+，图b为RuL1)。通过公式计算得出RuL1的单线态氧产生效率为0.81。配合物RuL1具有较大的单线态氧量子产率，这可能与苯酚乙炔基的引入使配体的共轭变大而引起激发态的变化有关，而对照原型配合物Ru(bpy3 2+中1,10-邻菲罗啉引入引起的共轭体系的少量扩大并未引起单线态产率的明显上升。
实施例3配合物RuL1双光子吸收截面的测定
配合物RuL1的双光子吸收截面采用双光子诱导荧光法进行测定，配置成DMSO的溶液，罗丹明为参比，用二次水配成的溶液，在激发下测量其荧光光谱。按照以下公式计算双光子吸收截面：
Figure BDA0001761969840000061
其中，S代表积分荧光强度，φ表示量子产率，η为实验装置的总的荧光收集效率，这里可用溶液的折光率代替，C为所测样品的浓度，δ为双光子吸收截面；下标s和r，分别代表所测样品和参比溶液。
结果如图2所示。双光子吸收截面是表征双光子吸收材料双光子吸收能力的主要物理量，双光子吸收截面越大，说明该化合物的双光子吸收能力越强，越适合于双光子材料的设计。通过配合物RuL1在pH 7.4的缓冲溶液里从730nm到930nm(间隔20nm)的双光子吸收截面数据，发现配合物RuL1双光子最大吸收截面位于850nm处，为111.66 GM。探针的双光子吸收截面值较大，这也证明了配合物RuL1双光子吸收性能优异，在设计新型的双光子磷光探针以及应用于双光子光动力学疗法等方面具有很大的潜力。
实施例4配合物RuL1的细胞成像研究
细胞培养
人乳腺癌细胞MCF-7细胞在含有10％胎牛血清(FBS)的RPMI-1640培养基中培养，并加入100U/mL青霉素及50U/mL链霉素。细胞培养箱内环境为37℃，5％CO2，饱和湿度。氧浓度为0％和10％的细胞培养条件使用厌氧产气袋和微需氧产气袋(日本Mitsubishi GasChemical公司)来营造。为了保持细胞的活性，所有实验细胞均处于液氮中复苏后二个月内。
小鼠皮肤黑色素瘤细胞B16F10细胞在含有10％胎牛血清(FBS)的RPMI-1640培养基中培养，并加入100U/mL青霉素及50U/mL链霉素。细胞培养箱内环境为37℃，5％CO2，饱和湿度。为了保持细胞的活性，所有实验细胞均处于液氮中复苏后二个月内。
配合物RuL1的细胞共聚焦成像试验在激光共聚焦显微镜下进行，采用MCF-7细胞作为造影的模型。
在黑暗条件下先将MCF-7细胞与10μM配合物RuL1进行共孵育4h，以此时为0点进行激光共聚焦实验。对于另一组实验，将MCF-7细胞与10μM配合物RuL1在黑暗下共孵育4h后，选用450nm激光器对细胞进行辐照处理，进一步观察探针在细胞中的造影情况。对细胞进行光照功率密度选择为30J/cm2，光照时间为300s。照射后继续孵育4h，并在不同时间点(照射后0h，2h，4h)进行共聚焦实验。
实验结果如图3所示，图3中Dark：MCF-7细胞经10μM配合物RuL1孵育4h后，继续孵育不同时间(0h，2h，4h)后的激光共聚焦成像；Light：MCF-7细胞经10μM配合物RuL1孵育4h后的激光共聚焦成像，450nm辐照300s(30J/cm2)，继续孵育不同时间(0h，2h，4h)后的激光共聚焦成像。激发波长，488nm，扫描通道550nm-700nm，图中标尺，20μm。由图3可以看出，在配合物与细胞继续孵育的4h内，细胞内并未出现明显磷光，证明配合物RuL1较难进入细胞。这可能因为RuL1极性较大，并且带正电荷，而细胞膜本身带负电荷，探针可以与细胞膜形成较强的静电作用，不易通过细胞的脂质双分子层膜。而在照射2h后发现细胞内有较强的磷光信号，这证明了光照细胞有助于配合物RuL1的进入。并且随着细胞孵育时间的延长，细胞内磷光强度继续增强，说明了探针可以大量地进入细胞。发现探针进入细胞后，基本遍布于细胞的全部细胞器(包括细胞核)，这说明配合物具有进入细胞核的能力，进而可以与靶点DNA作用，进一步发挥该配合物的抗肿瘤性能。同时，从图中可以看出，经光照后，细胞形态相较于未光照组发生明显变化，并出现很多的凋亡小泡，这说明配合物RuL1具有光动力治疗能力。
实施例5配合物RuL1对体外细胞的毒活性实验
对配合物在体外细胞中光照和非光照条件下的细胞毒活性进行了研究。该研究采用标准MTT[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide]法，选择人乳腺癌细胞系MCF-7和小鼠黑色素瘤细胞系B16F10两种细胞进行测试的。将两种细胞分别种在96孔板中(每孔约5000个细胞)在37℃，5％CO2条件下培养24h，待细胞贴壁后，换成含有不同浓度配合物RuL1的RPMI-1640培养液培养24h。其中，光照条件下RuL1的毒活性是在探针与细胞共孵育4h后使用450nm激光器光照(30J/cm2,300s)，继续孵育20小时结束。
实验结果如图4所示，图4a为配合物RuL1对MCF-7细胞的体外细胞毒活性，图4b为配合物RuL1对B16F10细胞的体外细胞毒活性。结果显示在暗毒性测试中，MCF-7和B16F10细胞与配合物RuL1共孵育24h进行活性测试，其对两种细胞株的毒性均较小，半数抑制浓度(IC50)值分别为21.33μM和15.02μM，说明RuL1具有较好的生物相容性。光毒性实验中，细胞与不同浓度配合物共孵育4h后接受450nm激光光照300s(30J/cm2)，黑暗处继续孵育至24h，对两种细胞的IC50值分别降低到1.75μM和1.32μM，分别降低了12.2倍和11.4倍，这表明了配合物RuL1对两种肿瘤细胞均表现了良好的光动力治疗活性。
实施例6配合物RuL1光照后对细胞形态的影响
将5μM配合物RuL1与MCF-7孵育4h后，用450nm激光器对其进行光照(30J/cm2，300s)，在40倍荧光显微镜明场下观察细胞形态的变化。
实验结果如图5所示，由图可以看出，配合物RuL1光照后，相对于对照组细胞，其形态发生明显变化，细胞明显变圆，这是细胞发生凋亡的证明。而对于对照组细胞形态在光照后并未发生明显改变，细胞存活状态良好。配合物及对照配合物光照下对肿瘤细胞的损伤能力明显不同，这可能是由于配合物RuL1具有明显较高的单线态氧量子产率，而使其表现出了优异的光动力治疗能力。
实施例7配合物RuL1对MCF-7和B16F10细胞在不同条件下的体外细胞毒活性测试
由实施例6的研究可知，配合物RuL1在黑暗培养条件下进入细胞较为困难，同时，只有相对较高的单线态氧产率才能在光照下对细胞造成损伤并引起细胞对配合物的大量摄取。这样的过程在配合物对体外培养的肿瘤细胞(MCF-7和B16F10)的毒活性实验中也得到了体现。
在96孔板中种植细胞，采用顺铂及四种配合物在不同条件下对细胞进行毒活性实验：
1.细胞与不同浓度顺铂(0.5，1，2，5，10，20μM)黑暗下共同孵育24h。
2.细胞与不同浓度顺铂(0.5，1，2，5，10，20μM)黑暗下共同孵育4h后，进行光照(30J/cm2，300s)，黑暗下继续孵育20h。
3.细胞与不同浓度配合物(RuL1，0.5，1，2，5，10，20μM)共同孵育4h后，进行光照(30J/cm2，300s)后，黑暗下继续孵育20h。
4.细胞与不同浓度配合物(RuL1，0.5，1，2，5，10，20μM)共同孵育4h后，更换新鲜不含配合物培养基，进行光照(30J/cm2，300s)后，黑暗下继续孵育20h。
5.细胞与不同浓度配合物(RuL1，0.5，1，2，5，10，20μM)共同孵育4h后，进行光照(30J/cm2，300s)后，更换新鲜不含配合物培养基黑暗下继续孵育20h。
6.细胞与不同浓度配合物(RuL1，0.5，1，2，5，10，20μM)黑暗下共同孵育24h。
实验结果如图6所示(a为MCF-7细胞，b为B16F10细胞)。在配合物RuL1与两种肿瘤细胞共孵育4h后，移除配合物进行光照，继续孵育，并未造成细胞明显凋亡，IC50值分别为30μM(MCF-7)和32μM(B16F10)，这说明RuL1光照下产生的单线态氧对提高配合物的毒活性起了关键作用。另外，由实施例4得知，光照可以使细胞对RuL1的摄取量明显增加，在毒活实验中，将细胞进行光照后立即移除配合物，防止细胞对RuL1的进一步摄取，继续孵育至24h，对于MCF-7细胞，其IC50值为7.5μM，对B16F10，IC50值为6.3μM，其细胞毒性较未更换培养基值(1.75μM和1.32μM)升高，这表明RuL1进入细胞后可能通过化学抗癌过程进一步发挥了其抗肿瘤作用。
实施例8配合物RuL1的组织双光子成像研究
使用小鼠肝部组织来验证配合物RuL1的双光子造影能力，使用的激光器为波长可调谐超快脉冲红外激光器MaiTai HP DeepSee-OL:690nm-1040nm，使用波长为850nm脉宽小于70fs，成像系统为徕卡双光子共聚焦显微镜(LeiTCS SP8-MaiTai MP)，20倍物镜观察成像。
在深度造影之前对小鼠肝部进行如下处理：取出小鼠的肝脏之后用二次水将血水洗净后浸泡在4％的多聚甲醛溶液固定过夜，再用PBS溶液清洗几次，用10μM的RuL1溶液4℃过夜孵化后将肝脏表面多余的探针用PBS溶液洗净之后将切片用1％的琼脂糖凝胶固定在载玻片上进行造影成像。
由配合物RuL1在溶液中的双光子吸收截面结果可知其最大双光子吸收截面位于850nm处，为111.66GM。考察配合物RuL1在活体组织内的双光子荧光显微成像。活体组织取自一只10周左右大的老鼠的肝组织切片。在850nm激发波长下，使用双光子共焦显微镜观察老鼠肝部组织的双光子荧光显微成像。测试方法为：将老鼠的肝脏部位厚度为10μm的切片放在配合物RuL1的水溶液(10μM)中，并在37℃和5％CO2条件下孵育40min，然后用PBS溶液冲洗三遍后，进行双光子荧光显微成像实验。在假定一个平面下，沿着z轴方向，观察了探针在不同深度的区域的双光子荧光成像图。
实验结果如图7所示，a为配合物RuL1在小鼠肝部的双光子荧光共聚焦成像图，b为配合物RuL1对小鼠肝部的双光子荧光共聚焦z扫描图。结果表明在组织深度测试中发现配合物RuL1可以深度扩散到组织150μm深度的位置，可以在深度范围30-150μm内清晰成像，可以对组织进行双光子荧光成像。

Claims (9)

1.一种多联吡啶钌配合物，其特征在于具有如下结构：
Figure DEST_PATH_IMAGE001
。
2.如权利要求1所述的多联吡啶钌配合物，其特征在于所述配合物与阴离子结合。
3.如权利要求 1 所述的多联吡啶钌配合物，其特征在于所述阴离子选自所述阴离子选自Cl-、Br-，I-，NO3 -或PF4 -。
4.如权利要求 1-3 任一项所述的多联吡啶钌配合物在制备光敏剂中的应用。
5.如权利要求 4 所述的应用，其特征在于所述多联吡啶钌配合物为光动力学疗法有关的光敏剂。
6.如权利要求 5 所述的应用，其特征在于所述多联吡啶钌配合物为双光子光动力学疗法有关的光敏剂。
7.如权利要求 4 所述的应用，其特征在于所述多联吡啶钌配合物作为光敏剂应用于细胞共聚焦成像。
8.如权利要求 4 所述的应用，其特征在于所述多联吡啶钌配合物在制备抗肿瘤药物中的应用。
9.如权利要求 8 所述的应用，其特征在于所述肿瘤选自黑色素瘤，乳腺癌、宫颈癌、胃癌、肺癌或肝癌。
CN201810911633.6A 2018-08-12 2018-08-12 一种具有光活性的多联吡啶钌配合物及其应用 Active CN110857310B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810911633.6A CN110857310B (zh) 2018-08-12 2018-08-12 一种具有光活性的多联吡啶钌配合物及其应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810911633.6A CN110857310B (zh) 2018-08-12 2018-08-12 一种具有光活性的多联吡啶钌配合物及其应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN110857310A CN110857310A (zh) 2020-03-03
CN110857310B true CN110857310B (zh) 2021-05-28

Family

ID=69635795

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201810911633.6A Active CN110857310B (zh) 2018-08-12 2018-08-12 一种具有光活性的多联吡啶钌配合物及其应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110857310B (zh)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114411193B (zh) * 2022-03-28 2022-06-10 苏州科技大学 单线态氧的电化学制备系统及制备方法
WO2024105603A1 (en) 2022-11-18 2024-05-23 Università Degli Studi Di Firenze A ruthenium (ii) polypyridyl complex as a photo-sensitiser in photodynamic therapy, and a procedure for making said ruthenium (ii) polypyridyl complex
CN115960090B (zh) * 2022-12-30 2024-03-29 中山大学 一种罗丹明b修饰吡啶配体的制备方法及其光催化抗菌应用

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103483388A (zh) * 2013-09-05 2014-01-01 中山大学 具有抗肿瘤活性的Norharman-钌(II)多吡啶配合物
CN103599127A (zh) * 2013-10-16 2014-02-26 中山大学 一种钌配合物在制备抗肿瘤药物中的应用
CN105601676B (zh) * 2016-01-29 2018-05-29 广东药科大学 一种钌配合物及其应用
CN108570076A (zh) * 2018-05-04 2018-09-25 广东药科大学 一种含炔基的钌配合物及其合成方法与应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN110857310A (zh) 2020-03-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
An et al. An unexpected strategy to alleviate hypoxia limitation of photodynamic therapy by biotinylation of photosensitizers
Zhou et al. Enhancing the ROS generation ability of a rhodamine-decorated iridium (III) complex by ligand regulation for endoplasmic reticulum-targeted photodynamic therapy
Hess et al. Evaluation of the medicinal potential of two ruthenium (II) polypyridine complexes as one‐and two‐photon photodynamic therapy photosensitizers
Liu et al. Ruthenium (II) polypyridyl complexes as mitochondria-targeted two-photon photodynamic anticancer agents
Li et al. A biomimetic theranostic O2-meter for cancer targeted photodynamic therapy and phosphorescence imaging
CN110857310B (zh) 一种具有光活性的多联吡啶钌配合物及其应用
US20110212955A1 (en) Rosamine derivatives as agents for the treatment of cancer
CN114213419B (zh) 一种兼具荧光成像和i型光动力/光热杀伤癌细胞活性的荧光探针及其制备方法和应用
CN111875603B (zh) 一种β-咔啉吡啶鎓盐荧光探针及其制备方法与应用
CN112142721B (zh) 一种可靶向线粒体的近红外二区噻喃盐荧光化合物及其制备方法与应用
Roy et al. Increased lipophilicity of halogenated ruthenium (II) polypyridyl complexes leads to decreased phototoxicity in vitro when used as photosensitizers for photodynamic therapy
CN104327156B (zh) 二氢卟吩类光、声敏剂及其制备方法与应用
CN115385851B (zh) 具有不对称二乙腈基结构的近红外聚集诱导发光型超高效光敏剂、制备方法及应用
BR112020000103A2 (pt) composto médico
Pan et al. Near-infrared AIE-active phosphorescent iridium (III) complex for mitochondria-targeted photodynamic therapy
Dorairaj et al. Binding mode transformation and biological activity on the Ru (II)-DMSO complexes bearing heterocyclic pyrazolyl ligands
Chen et al. Synthesis, DNA binding, photo-induced DNA cleavage and cytotoxicity studies of europium (III) complexes
TWI687231B (zh) 用於膀胱癌成像及光動力療法的多重模式生物探針
CN104230998B (zh) 一种线粒体靶向的铱-n-杂环卡宾配合物及其制备方法和应用
CN111171060B (zh) 含吡啶的氟硼二吡咯及其季铵盐类光敏剂与制备方法和用途
US20220409727A1 (en) Metal Complexes Bearing Bisstyryl-Bipyridine Ligand and Their Use as Photosensitizer Agent in One and Two-Photon Photodynamic Therapy
CN111675920B (zh) Pcps及其在制备抗肿瘤药物中的应用
CN110818739B (zh) 一种对肿瘤微环境pH/乏氧协同响应的金属铱配合物及其应用
CN114181253A (zh) 一种基于氟硼二吡咯的线粒体靶向型光敏剂的制备及应用
CN110857311B (zh) 一种具有肿瘤乏氧传感及光活性的环金属铱配合物及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant