CN104225169B - 一种抑菌、抗炎的妇科外用制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种妇科外用制剂及其制备方法，它主要是由中药原料苦参，蜘蛛香，龙血竭，艾片制成，剂型包括妇科外用的所有剂型，如：软胶囊，栓剂，片剂，胶囊剂等。同时，本发明公开了妇科外用制剂的制备方法：苦参加6～10倍量65%乙醇水浴回流提取1～3次，每次1.5h，滤液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.05（60℃），干燥，粉碎成细粉，备用；取蜘蛛香粉碎，过120目筛，采用CO₂超临界萃取挥发油，得挥发油，备用；分别取龙血竭和艾片，粉碎成细粉过100目筛，加入到蜘蛛香挥发油中混匀，加入上述细粉中，搅匀，加入药用剂型添加辅料制成阴道用制剂。所得制剂具有疗效确切，安全方便、副作用小的特点。本发明为市场增加了新的治疗药品，为医患双方提供了更广泛的选择。

Description

一种抑菌、抗炎的妇科外用制剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种抑菌、抗炎的妇科外用制剂及其制备方法，属于医药制剂技术领域。

背景技术

世界卫生组织调查报告显示，全世界的妇科病患者十分普遍，平均有83％的已婚女性一生中至少都患有或曾经患有不同程度的妇科病，中国妇女则高达90％，平均每3分钟就有一个新增病例。我国城市妇女已婚女性妇科常见病患病率顺序依次为生殖道感染42.9％、月经紊乱34.5％(未绝经者)和痛经15.5％(未绝经者)、盆腔肿物3.9％、子宫脱垂1.1％。生殖道感染是导致女性慢性重大妇科病的“罪魁祸首”，是严重危害女性健康的“隐型杀手”，是女性健康的最大敌人。

生殖道感染(阴道炎)是最为常见发病率最高的妇科疾病，主要为细菌或寄生虫的浸入感染或阴道内菌群失调所致，主要包括滴虫性阴道炎、念珠菌性阴道炎、细菌性阴道炎，其在阴道感染病例中所占比率分别为13％～25％、10％～30％和40％～50％。女性感染妇科炎症后根据不同的炎症和感染程度会出现不同特征的症状，大致表现为外阴瘙痒、白带异常、尿频、尿急、尿痛、性交疼痛、下腹坠胀、经期疼痛、月经不调等等。

抗生素的内服和外用虽能暂时杀灭细菌和寄生虫，但常引起阴道内菌群失调而致久治难愈。传统中药是中医思想指导下的药物应用，讲究辨证论治和整体性，且多为复方制剂，着重扶正祛邪，不仅强调抑制或杀灭致病菌，更强调维持阴道微生态平衡，旨在从根本上解决阴道炎的发病原因，减少疾病复发率，此外，几千年来的临床证明，细菌较少对中药产生耐药性，因此，中药治疗阴道炎具有很好的发展前景，符合现代医药发展的需要。如保妇康栓，主要成分为莪术油，对各种阴道炎的治疗效果都比较好。

贵州的苗族医生对妇科用药的治疗也有较多的保密配方，并且贵州的道地药材资源非常丰富，疗效尤其独到之处，最重要的是苗药的安全性好。

本发明提高一种疗效确切、安全方便、副作用小的纯中药妇科外用制剂，该制剂具有清热解毒，散寒除湿，活血化瘀，敛疮生肌之功。适用于湿热下注，瘀血遏阻所致的阴道炎、子宫颈炎、宫颈糜烂等。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种疗效确切、安全方便、副作用小的妇科外用中药制剂，同时提供该中药制剂的制备方法。

发明人基于上述的背景，对苗医保密配方进行研究，结合中医理论和西医用药特点进行了合理的组方筛分调整，得出了本发明的技术方案，具体如下：

按照重量份计算，治疗抑菌、抗炎的妇科外用制剂主要是由中药苦参300～600份，蜘蛛香100～300份，龙血竭10～100，艾片1～30份，制备而成。

优选的，1000个剂量单位它主要是由苦参1400g，蜘蛛香600g，龙血竭60g，艾片6g制备而成。

以上组成中，重量是以生药计算的，该组成可制成单位计量的药物制剂1000剂，所述1000剂指，制成的成品药物制剂，如制成软胶囊剂1000粒，栓剂1000粒，片剂1000片，胶囊1000粒。

以上组成是按重量作为配比的，在生产时可按照相应的比例增大或减少，但各组之间的生药材重量配比的比例不变。

以上重量配比的比例是经过科学筛选得到的，随着苦参提取物的出膏率不同和蜘蛛香挥发油的提取率不同，可以相应调整组成的量的配比，增加或减少不超过100％，药效不变。

本发明的中药制剂，是通过将上述配方组成的中药原料经过提取或其他方式加工，制成药物活性物质，随后，以不同的活性物质为原料，需要时加入药物可接受的载体，按照制剂学的常规技术制成的。所述活性物质可以通过分别采取不同的提取中药原料得到，也可以通过其他方式得到，如：通过粉碎、研磨、过筛、水提、醇提、超临界CO₂萃取等方法得到。这些活性物质可以是浸膏形式的物质，可以是干浸膏也可以是流浸膏，根据制剂的不同需要决定制成不同的浓度。

本发明的药物制剂中的药物活性物质，其在制剂中所占重量百分比可以使0.1-99.9％，其余为药物可接受的载体，中药物活性物质与可接受的载体最佳配比为1:1-6。本发明的药物制剂，以单位剂量形式存在，所述单位剂量形式是指制剂的单位，如栓剂的每粒栓，软胶囊和胶囊的每粒胶囊，片剂的每片，单位剂量中，含有活性物质的量为10-800mg，优选的是200-600mg。

本发明的药物制剂可以是妇科外用的任何剂型，这些剂型包括：软胶囊，栓剂，片剂，胶囊剂，优选的是软胶囊，特别是阴道软胶囊。

本发明的药物制剂，特别是阴道软胶囊的用法用量为：阴道给药。与月经干净2～3天后开始用药，一次1粒，一日1次，10天为一疗程。

本发明的制剂制备方法，包括如下步骤：

(1)醇提：取苦参药材65％乙醇低温回流提取1-3次，合并提取液，浓缩，干燥得浸膏粉备用。

(2)挥发油提取：取蜘蛛香药材，采用超临界CO₂萃取，得挥发油备用。

(3)粉碎：分别取龙血竭药材和艾片药材，粉碎，100目过筛后备用。

(4)成型工艺：取苦参提取物(1)、蜘蛛香挥发油(2)、龙血竭和艾片药材(3)加入可接受的载体辅料适量，制备软胶囊、栓剂、片剂或胶囊剂。

本申请人进行了一系列实验来选择本发明提供的妇科外用制剂的制备工艺及组分配比，保证科学、合理、可行。

实验例1：体外抑菌实验

目的：通过选取了4种常用指示菌：金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus、枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis、大肠杆菌Escherichia coli和白色念珠菌Candidaalbicans采用固体培养基连续稀释法对苦参、蜘蛛香和龙血竭等三味中药进行体外抑菌作用研究，揭示本发明的处方的合理性和有效性。

1实验部分

1.1仪器、试药与菌种

恒温培养箱303A-4(武汉精华科教仪器有限公司)；超净工作台SW-CJ-1F(苏净集团安泰公司)；压力蒸汽灭菌器YXQ-SG46-280SA(上海博讯实业有限公司医疗设备厂)；干燥箱202AV-2(武汉精华科教仪器有限公司)；手提式高速中药粉碎机DFT-2000(温州市大德中医机械有限公司)；超临界流体萃取仪(北京化工集团)。营养琼脂培养基、沙保氏培养基(上海盛思生化科技有限公司)；二甲基亚砜DMSO(天津科密欧化学试剂有限公司)；龙血竭(西双版纳版纳药业有限责任公司)。金黄色葡萄球菌(ATCC25112)、枯草芽孢杆菌(由贵阳医学院微生物教研室分离检定)、大肠杆菌(ATCC25922)、白色念珠菌(ATCC10231)。

1.2方法与结果

1.2.1药物的配制将龙血竭粉碎过100目筛，称取5g用60％DMSO溶解并定容至50ml；苦参粉碎，用60％的乙醇回流提取，微波真空干燥，称取浸膏粉5g用60％DMSO溶解并定容至50ml；蜘蛛香粉碎，超临界萃取(萃取压力12Mpa,萃取温度45℃,分离温度35℃,萃取时间1h)，称取萃取物5g用60％DMSO溶解并定容至50mL，此时药物的浓度为100mg·mL^-1。

1.2.2含药培养基的配制无菌操作下按照二倍稀释法将药物稀释成100,50,25,12.5,6.25,3.125,1.5625mg·mL^-1的浓度梯度，同法稀释60％的DMSO空白溶剂做阴性对照。取7个直径60mm的无菌平皿编号后按顺序分别加入配好的药物0.5mL，同法处理阴性对照。营养琼脂培养基经121℃灭菌20min，稍微放冷至60℃左右，用无菌刻度吸管取4.5mL到一份加好药的平皿中，轻摇使药液和琼脂充分混匀，放置，冷却，该含药平皿将接种金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌这三种菌，先做好标记。白色念珠菌须用沙保氏培养基培养，将沙保氏培养基经115℃灭菌20min，然后按照上述方法制备含药培养基。

1.2.3菌悬液的制备采用直接菌落法制备菌悬液，无菌操作下将金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌分别划线接种于营养琼脂斜面培养基上，将白色念珠菌划线接种于沙氏斜面培养基上，37℃培养24h。将各个菌用接种环挑取适量到无菌生理盐水中，校正到浓度相当于0.5麦氏标准比浊管，用无菌生理盐水稀释100倍备用，此时菌液为1.5×10⁶CFU·mL^-1。

1.2.4最低抑菌浓度MIC无菌操作下用接种环取配制好的菌悬液一环，按照标记将各个细菌均匀涂在含药营养琼脂平皿的圆圈内，白色念珠菌涂在含药沙保氏平皿的圆圈内，同法处理阴性对照。将平皿倒置放入37℃培养箱中培养24h，观察细菌在不同浓度药物平皿上的生长情况，以抑制细菌生长的平皿所含药物浓度测得MIC。结果见表1。表中的药物浓度为每个平皿中药物与培养基混合后的有效浓度。结果表明：龙血竭和苦参提取物对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的抑制作用较好，对大肠杆菌和白色念珠菌有一定的抑制作用但效果不是很好；蜘蛛香对这四种微生物均较敏感。

表1三种中药提取物的最小抑菌浓度(mg·mL^-1)

－表示没有MIC值

1.2.5最低杀菌浓度MBC将MIC测定中未生长细菌的琼脂用镊子小心取下来，反过来涂于营养琼脂平板上，做好标记，37℃培养24h，观察结果，以仍无细菌生长的管内的药物浓度为该药的最小杀菌浓度。结果见表2。表中的药物浓度为每个平皿中药物与培养基混合后的有效浓度。结果表明：龙血竭对金黄色葡萄球菌有杀灭作用；蜘蛛香提取物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌有杀灭作用；苦参提取物在现有的浓度下对各个菌没有杀灭作用。

表2三种中药提取物的最小杀菌浓度(mg·mL^-1)

－表示没测到MBC值

实验例2：体外联合抑菌实验

1.1仪器、试药与菌种同实验例1，

1.2方法

1.2.1苦参提取物和龙血竭的联合后MIC值的测定

按照棋盘格法进行实验，将两种药物分别稀释成100,50,25,12.5,6.25,3.125mg·mL^-1的浓度梯度，苦参提取物0.5mL，龙血竭药0.5mL，培养基4mL，摇匀，放冷，接种细菌。37℃恒温培养24h，观察记录，以最佳组合时无菌生长的最高药物稀释度作为最低抑菌浓度。(其中金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和大肠杆菌用营养琼脂培养基，白色念珠菌用沙保氏培养基。)

1.2.2龙血竭和蜘蛛香挥发油联合后MIC值的测定

按照棋盘格法进行实验，对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌联合抑菌实验中将龙血竭A和蜘蛛香按照稀释法进行配制浓度分别为:

A:12.5,6.25,3.125,1.5625,0.78125,0.390625mg·mL^-1

B:12.5,6.25,3.125,1.5625,0.78125,0.390625mg·mL^-1

在对大肠杆菌和白色念珠菌联合抑菌实验中龙血竭A和蜘蛛香按照稀释法进行配制浓度分别为:

A：100,50,25,12.5,6.25,3.125mg·mL^-1

B：100,50,25,12.5,6.25,3.125mg·mL^-1

A药0.5ml，B药0.5ml，培养基4ml，摇匀，放冷，接种相对应的细菌。37℃恒温培养24h，观察记录，以最佳组合时无菌生长的最高药物稀释度作为最低抑菌浓度。(其中金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和大肠杆菌用营养琼脂培养基，白色念珠菌用沙保氏培养基。)

1.2.3FIC值计算与判断

当FIC指数≤0.75时表示有协同作用；0.75＜FIC指数≤1时表示有累加作用；1＜FIC指数≤2时表示无关；FIC指数＞2时表示拮抗。

1.3结果

1.3.1苦参提取物和龙血竭的联合

龙血竭和苦参提取物对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌具有非常良好的抗菌活性，两者联合后呈现协同作用；龙血竭和苦参提取物对白色念珠菌的抗菌活性较差，但两者联合后呈现累加作用；龙血竭和苦参提取物对大肠杆菌本来在实验浓度范围内没有抗菌作用，但两者联合后出现抗菌作用。龙血竭和苦参提取物单用及联合的MIC值及FIC指数见表3

表3龙血竭和苦参提取物单用及联合的MIC值及FIC指数

注：“－”表示在此条件下没有测到MIC值

Note:“－”means the MIC was not detected in this condition

1.3.2龙血竭和蜘蛛香挥发油的联合

龙血竭和蜘蛛香提取物的MIC值及两者联合后的FIC指数见表4：龙血竭和蜘蛛香对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌具有非常良好的抗菌活性，两者联合后呈现协同作用；龙血竭和蜘蛛香对白色念珠菌的抗菌活性较差，但两者联合后呈现协同作用；龙血竭对大肠杆菌本来没有抗菌作用，但与蜘蛛香联合后出现抗菌作用且蜘蛛香的抗菌效果有所提高。

表4龙血竭和蜘蛛香单用及联合的MIC值及FIC指数

实验例3：抗炎作用

1实验材料

1.1药品与试剂 本发明的制剂(阴道栓剂)，大肠杆菌，金黄色葡萄球菌和淋球菌为由贵阳医学院微生物教研室分离检定

1.2动物 豚鼠，雌性，体重(300±10)g，购自贵阳医学院动物实验中心。

2方法与结果

2.1动物模型建立及分组 用金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、淋球菌分别感染豚鼠阴道建立动物模型：向豚鼠阴道分别注入大肠杆菌(1.8×10⁹CFU·mL^-1)，金黄色葡萄球菌(1.8×10⁹CFU·mL^-1)和淋球菌(7×10⁷～8×10⁹CFU·mL^-1)，每种细菌注入量均为0.025mL/100g，5d后取豚鼠阴道分泌物作细菌培养检查，将培养细菌阳性的感染模型豚鼠随机分为4组。其中3组为本发明制剂的低、中、高3个剂量组(A₁，A₂，A₃组，给药剂量分别为人体计量的10倍，20倍和30倍)，另一组为基质组(B组，阴性对照组)。每组动物20只，各组动物给药1次/d，连续5d。

2.2观察指标

病原体转阴率：于停药后第1天和第4天取豚鼠阴道分泌物进行涂片及细菌培养鉴定，2次鉴定病原体均为阴性定为转阴，计算转阴率(细菌清除率)。

阴道病变治愈程度：于停药第5天将豚鼠活杀，解剖取阴道标本进行肉眼观察。对阴道炎症标本按充血、水肿、出血3项基本指标进行评分。0分(正常)为无充血、水肿、出血；1分(轻度)为阴道黏膜尚平滑，轻度充血；2分(中度)为阴道黏膜较平滑，中度充血，可见点状出血点；3分(重度)为阴道黏膜光滑，重度充血，可见多量出血点，组织轻度水肿。各组记分后，再计算治愈率。治愈率(％)＝(基质组炎症分值-各组炎症分值)/基质组炎症分值×100％。结果见表5和表6。

表5各组病原体转阴率比较

注：与B组比较，^*P＜0.01

表6各组阴道病变治愈率比较

注：与B组比较，^*P＜0.01

从表5和表6可以看出本发明的制剂的3个剂量组均有显著疗效。

具体实施方式

实施例1

处方：苦参1400g、蜘蛛香600g、龙血竭60g，艾片6g。

制法：以上4味，苦参，加8倍量65％乙醇水浴回流提取1次，提取时间为1.5h，滤液回收乙醇，浓缩至60℃时的相对密度为1.05，干燥，粉碎成细粉，备用；取蜘蛛香粉碎，过120目筛，采用CO₂超临界萃取挥发油，萃取压力为30MPa，萃取温度为60℃，萃取时间45min，得挥发油，备用；分别取龙血竭和艾片，粉碎成细粉过100目筛，备用。

取苦参提取物，蜘蛛香挥发油，龙血竭，艾片，混匀，加入凡士林和液体石蜡适量，制成软胶囊1000粒。

实施例2

处方：苦参1400g、蜘蛛香600g、龙血竭60g，艾片6g。

制法：以上4味，苦参，加8倍量65％乙醇水浴回流提取1次，提取时间为1.5h，滤液回收乙醇，浓缩至60℃时的相对密度为1.05，干燥，粉碎成细粉，备用；取蜘蛛香粉碎，过120目筛，采用CO₂超临界萃取挥发油，萃取压力为30MPa，萃取温度为60℃，萃取时间45min，得挥发油，备用；分别取龙血竭和艾片，粉碎成细粉过100目筛，备用。

取苦参提取物，蜘蛛香挥发油，龙血竭，艾片，混匀，加入混合脂肪酸甘油酯适量，制成栓剂1000枚。

Claims (8)

1.一种抑菌、抗炎的妇科外用制剂，其特征在于：按照重量份计算，它的原料药为：苦参300～600份、蜘蛛香100～300份、龙血竭10～100、艾片1～30份， 所述制剂的制备方法包括以下步骤：

苦参，加6～10倍量65％乙醇水浴回流提取1～3次，每次1.5h，滤液回收乙醇，浓缩至60℃时的相对密度为1.05，干燥，粉碎成细粉，备用；取蜘蛛香粉碎，过120目筛，采用CO₂超临界萃取挥发油，萃取压力为30MPa，萃取温度为60℃，萃取30～60min，得挥发油，备用；分别取龙血竭和艾片，粉碎成细粉过100目筛，加入到蜘蛛香挥发油中混匀，加入上述细粉中，搅匀。

2.按权利要求1所述抑菌、抗炎的妇科外用制剂，其特征在于：按照重量计算，它的原料药为：苦参140份、蜘蛛香60份、龙血竭6份、艾片0.6份。

3.权利要求1或2所述抑菌、抗炎的妇科外用制剂，其特征在于，所述妇科外用制剂是适合妇科外用的各种剂型。

4.权利要求3所述抑菌、抗炎的妇科外用制剂，其特征在于，所述妇科外用制剂是软胶囊剂和栓剂。

5.权利要求4所述抑菌、抗炎的妇科外用制剂，其特征在于，所述妇科外用制剂是阴道软胶囊剂和阴道栓剂。

6.权利要求1所述抑菌、抗炎的妇科外用制剂，其特征在于，所述妇科外用制剂其中还包括药物可接受的载体。

7.权利要求1所述抑菌、抗炎的妇科外用制剂在制备抑菌、抗炎的妇科外用药物中的应用。

8.权利要求1所述抑菌、抗炎的妇科外用制剂，其特征在于：所述提取物和细粉为药物活性物质，按药用剂型添加辅料制成阴道用制剂。