CN104208112A - 从罗布麻叶中提取总黄酮的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种从罗布麻叶中提取总黄酮的方法，具体过程包含酶解提取，微滤，超滤膜除杂和大孔树脂纯化纯化和洗脱等工艺过程，与现有技术相比，本发明生产过程中只有大孔树脂洗脱工序需要乙醇，生产成本大大降低，并提高了生产的安全性；工艺过程中利用纯物理过程进行澄清、除杂、浓缩，可很大程度减轻环境污染，提高了产品质量安全；利用膜分离纯化后的提取液上大孔树脂柱进一步纯化，减小了大孔树脂被污染的程度，并大幅提高大孔树脂使用寿命，在优化的条件下，大孔树脂柱可反复使用13次以上，对黄酮的吸附量还可以保持在初次使用时吸附量的87%以上，远超一般方法所述的5～8次，所得罗布麻叶总黄酮提取物中总黄酮含量最高可达80%。
Description
技术领域
本发明涉及一种从罗布麻中提取总黄酮的方法，特别是一种从罗布麻叶中提取总黄酮的方法。
背景技术
罗布麻为夹竹桃科多年生宿根草本植物，罗布麻药用价值高， 其根、 茎、 叶、 花、 全草入药。早在本草纲目、救荒本草、中就有相关记载。1977 年罗布麻被正式录入中华人民共和国药典、能平肝安神、 清热利水， 用于治疗肝阳眩晕、心悸失眠、浮肿尿少、高血压、神经衰弱、肾炎浮肿。罗布麻不同部位有着不同的治疗功效。罗布麻叶中主要含有黄酮类物质， 这些成分能够作用于人的心血管系统、神经系统、呼吸系统， 从而起到降血压、降血脂、 抗抑郁、 镇静、 止咳平喘的功效， 除此之外， 这些成分还有抗氧化、延缓衰老、抗突变和保肝的作用。
总黄酮是罗布麻叶中的主要活性成分，主要有槲皮素、山奈酚，及其衍生物组成。罗布麻叶中黄酮类成分主要分布在叶脉维管束木质部导管壁、叶脉上下方的厚角组织、表皮细胞及外方蜡质层。特化的角质层等外围组织对提取黄酮类成分阻碍作用较大，酶解纤维素和角质层有助于黄酮类成分更好的溶出。
现在主流的从罗布麻叶中提取总黄酮的方法主要是40～85%乙醇提取，并使用絮凝剂澄清提取液、之后减压浓缩除去乙醇，更近一步的是利用大孔树脂或者聚酰胺进行进一步纯化，获得获得罗布麻叶提取物浸膏，或者粉末。
中国专利CN200410064551.0、CN 103463147 A等使用乙醇提取、减压浓缩、壳聚糖等絮凝、聚酰胺柱层析纯化提取液，获得纯度超过50%的总黄酮提取物。
上述工艺方法在罗布麻叶总黄酮的提取分离纯化上做了大量工作，但是还存在一些不足：主要在利用40～85%乙醇提取的工艺由于需要使用乙醇，从安全生产的角度需要防爆厂房，对生产设施的安全性要求较高；乙醇运输成本较高；食品级乙醇价格不菲，生产成本较高；生产过程中需要反复浓缩，显而易见能耗较高；柱层析上柱液成分复杂，生产中会大幅降低柱层析填料的使用寿命，增加生产成本；上柱液需要除去乙醇再上柱。
针对现有罗布麻叶总黄酮提取分离工艺的不足，研究开发一种节能高效、低成本的罗布麻总黄酮提供工艺十分必要。
发明内容
本发明的目的是提供一种节能高效、低成本的从罗布麻中提取总黄酮的方法，特别是一种从罗布麻叶中提取总黄酮的方法。
本发明的目的是通过以下过程实现的：将罗布麻叶粉碎后，首先以水为溶剂，加入纤维素酶等水解酶进行提取，所得提取物用微滤膜进行澄清处理，滤过液用超滤膜除杂，除杂后的液体用纳滤膜浓缩，浓缩液直接上大孔树脂柱，用水洗脱后，再用醇洗脱，洗脱液浓缩除醇，喷雾干燥，即得到本发明的高纯度罗布麻叶总黄酮提取物。具体过程如下：
酶解提取：
将罗布麻叶除杂后，粉碎至150～600μm得罗布麻叶粉，按每Kg罗布麻叶粉加入纤维素酶20000～80000U，加入水中提取，料液比为重量的1：8～1：50，在温度30～60℃，时间60～150min。
提取结束，过30～80μm滤筛，取滤液待用。所述的滤筛可以为滤袋、滤网或滤膜，或者其他能达到200～400过滤精度过滤装置，譬如板框式过滤等。
所得滤渣最好进行重复提取1～3次，重复提取只用水，不加酶，加水量为第一次加水量的30%～100%，最后合并滤液进入下一程序。
上述的罗布麻叶粉在加入纤维素酶的同时还可加入20000～80000U果胶酶，纤维素酶与果胶酶二者的比例是3：1～3：9之间。
微滤：通过微滤膜进行澄清处理，去除纤维类杂质。
将酶解提取步骤中所得提取液用0.1～ 0.5μm微滤膜过滤，所述的微滤膜可为陶瓷膜或者有机膜，优选为陶瓷膜。
过滤时调节膜后压力为1～15 bar，膜前压力为1.5～20bar，跨膜压力0.5～5bar，温度为15～60℃，膜分离取透过液。
上述的微滤过程至剩余1/3～1/5体积提取液时，再加入初始提取液体积1/3～1/5的水，继续进行膜分离至再次剩余相当于1/3～1/5体积初始提取液时，终止分离，该过程可进行1～3次。
合并上述所得透过液进入下一工序。
超滤膜除杂：通过超滤膜分离去除大分子物质。
上一步骤中的滤过液用1000～10000D的超滤膜除去提取液中的大分子物质，此步骤中的膜可为有机膜或者陶瓷膜。优选的为陶瓷膜。过滤时调节膜后压力为5～30 bar，膜前压力为5～35bar，跨膜压力0～8bar，提取液温度为15～60℃，膜分离，过滤至剩余1/3～1/5体积提取液时，再加入初始提取液体积1/3～1/5的水，继续进行膜分离至再次剩余相当于1/3～1/5体积初始提取液时，终止分离。截留液弃去，滤过液进入下一工序。
纯化：用大孔树脂纯化。
选用的大孔树脂可为KX-28、KX-38、D101、AB-8、HPD400、HPD600、XDA-6、ADS-17等。大孔树脂填装要求径高比为1：6～1：15，滤过液中总黄酮含量与填料用量（充分用水浸泡后的体积）的使用量比例为每6～20mg总黄酮使用1mL填料。按需装填完树脂柱后，按照1～3柱床体积/h的速度循环上样，即树脂柱流出液直接进入上样料液桶再次上样，紫外检测器在340～380nm波长在线检测，至流出液的紫外吸收强度不再发生变化为止，此时为上样终点。
洗脱：静置0.5～24h后开始洗脱：初始洗脱液pH值5～7的水，洗脱速度1～3倍柱床体积/h，洗脱液用量为1～4倍柱床体积；之后用10～30%乙醇洗脱，洗脱速度1～3倍柱床体积/h，洗脱液用量为1～3倍柱床体积；继续用50～95%乙醇洗脱，洗脱速度1～3倍柱床体积/h，洗脱液用量为1～3倍柱床体积，以该部分洗脱液作为收集目标，收集完毕后，减压浓缩，干燥，得本发明的罗布麻叶总黄酮提取物。
与现有技术相比，本发明的优点在于：提取液中加入水解酶，酶解叶片组织，条件温和，能够够呛较大程度地提高总黄酮的提取率；特别是生产过程中只有大孔树脂洗脱工序需要用到乙醇，生产成本大大降低，并提高了生产的安全性；工艺过程中利用纯物理过程进行澄清、除杂、浓缩，可很大程度减轻环境污染，提高了产品质量安全；利用膜分离纯化后的提取液上大孔树脂柱进一步纯化，减小了大孔树脂被污染的程度，并大幅提高大孔树脂使用寿命，在优化的条件下，大孔树脂柱可反复使用13次以上时，对黄酮的吸附量还可以保持在初次使用时吸附量的87%以上，远超一般方法所述的5～8次，所得罗布麻叶总黄酮提取物中总黄酮含量最高可达80%。
具体实施方式
实施例1：罗布麻叶除杂后，粉碎过60目筛，称取100kg，加入纤维素酶6000000U，加入已调节pH值为5的水2500kg提取，温度50℃，时间90min。第一次提取结束，用48μm滤袋过滤，取滤液待用。残渣进行第二次提取，第二次提取加水2000kg，不加酶，温度50℃，时间60min。第二次提取结束，用30～80μm滤袋过滤，合并2次滤液。上一步骤中合并的提取液用0.3μm陶瓷膜过滤，过滤时调节膜后压力为2 bar，膜前压力为2.2bar，跨膜压力0.2bar，提取液温度为室温，进行膜分离，过滤至剩余1000kg提取液时，再加入1000kg水，继续进行膜分离至再次剩余约1000kg液体时，终止分离。截留液弃去，滤过液进入下一工序。上一步骤中的滤过液用10000D的陶瓷膜除去提取液中的大分子物质，过滤时调节膜后压力为5bar，膜前压力为6bar，跨膜压力1bar，提取液温度为室温，膜分离，过滤至剩余1000kg提取液时，再加入初始提取液体积1000kg的水，继续进行膜分离至再次剩余相当于1000kg提取液时，终止分离。截留液弃去，滤过液进入下一工序。选用HPD600大孔树脂，充分溶胀并冲洗至无醇味，量取1800L大孔树脂，填装径高比为1：10，按需装填完树脂柱后，按照1.5柱床体积/h的速度循环上样，即树脂柱流出液直接进入上样料液桶再次上样，紫外检测器在360nm波长在线检测，至流出液的紫外吸收强度不再发生变化为止，此时为上样终点。静置2h后开始洗脱。初始洗脱液为pH值6的水，洗脱速度2倍柱床体积/h，洗脱液用量为6倍柱床体积；之后用10%乙醇洗脱，洗脱速度3倍柱床体积/h，洗脱液用量为2倍柱床体积；继续用70%乙醇洗脱，洗脱速度3倍柱床体积/h，洗脱液用量为2.5倍柱床体积，以该部分洗脱液作为收集目标，收集完毕后，减压浓缩，干燥，得35.4%总黄酮含量的罗布麻叶总黄酮提取物。
实施例2：罗布麻叶除杂后，粉碎过40目筛，称取100kg，加入纤维素酶3000000U， 果胶酶6000000U，加入已调节pH值为5的水，1500kg提取，温度60℃，时间90min。第一次提取结束，用38μm滤袋过滤，取滤液待用。残渣进行第二次提取，第二次提取加水1000kg，不加酶，温度50℃，时间60min。第二次提取结束，用30～80μm滤袋过滤，合并2次滤液。上一步骤中合并的提取液用0.1μm陶瓷膜过滤，过滤时调节膜后压力为6bar，膜前压力为7bar，跨膜压力1bar，提取液温度为室温，进行膜分离，过滤至剩余700kg提取液时，再加入700kg水，继续进行膜分离至再次剩余约700kg液体时，终止分离。截留液弃去，滤过液进入下一工序。上一步骤中的滤过液用5000D的有机膜除去提取液中的大分子物质，过滤时调节膜后压力为10bar，膜前压力为12bar，跨膜压力2bar，提取液温度为60℃，膜分离，过滤至剩余700kg提取液时，再加入初始提取液体积700kg的水，继续进行膜分离至再次剩余700kg提取液时，终止分离。截留液弃去，滤过液进入下一工序。选用XDA-6大孔树脂，充分溶胀并冲洗至无醇味，量取2000L大孔树脂，填装径高比为1：10，按需装填完树脂柱后，按照1.5柱床体积/h的速度循环上样，即树脂柱流出液直接进入上样料液桶再次上样，紫外检测器在360nm波长在线检测，至流出液的紫外吸收强度不再发生变化为止，此时为上样终点。静置2h后开始洗脱。初始洗脱液为pH值6的水，洗脱速度2倍柱床体积/h，洗脱液用量为2倍柱床体积；之后用30%乙醇洗脱，洗脱速度3倍柱床体积/h，洗脱液用量为2倍柱床体积；继续用70%乙醇洗脱，洗脱速度3倍柱床体积/h，洗脱液用量为2.5倍柱床体积，以该部分洗脱液作为收集目标，收集完毕后，减压浓缩，干燥，得78.2%总黄酮含量的罗布麻叶总黄酮提取物。
实施例3：罗布麻叶除杂后，粉碎过100目筛，称取50kg，加入纤维素酶4000000U， 果胶酶1500000U，加入已调节pH值为5.5的水，500kg提取，温度55℃，时间120min。第一次提取结束，用30μm滤袋过滤，取滤液待用。残渣进行第二次提取，第二次提取加水500kg，不加酶，温度50℃，时间60min。第二次提取结束，用30～80μm滤袋过滤，合并2次滤液。上一步骤中合并的提取液用0.5μm陶瓷膜过滤，过滤时调节膜后压力为6bar，膜前压力为7bar，跨膜压力1bar，提取液温度为室温，进行膜分离，过滤至剩余300kg提取液时，再加入300kg水，继续进行膜分离至再次剩余约300kg液体时，终止分离。截留液弃去，滤过液进入下一工序。上一步骤中的滤过液用10000D的有机膜除去提取液中的大分子物质，过滤时调节膜后压力为3bar，膜前压力为3.5bar，跨膜压力0.5bar，提取液温度为40℃，膜分离，过滤至剩余300kg提取液时，再加入150kg的水，继续进行膜分离至再次剩余150kg提取液时，终止分离。截留液弃去，滤过液进入下一工序。选用XDA-6大孔树脂，充分溶胀并冲洗至无醇味，量取1000L大孔树脂，填装径高比为1：15，按需装填完树脂柱后，按照2柱床体积/h的速度循环上样，即树脂柱流出液直接进入上样料液桶再次上样，紫外检测器在350nm波长在线检测，至流出液的紫外吸收强度不再发生变化为止，此时为上样终点。静置0.5h后开始洗脱。初始洗脱液为pH值6的水，洗脱速度1倍柱床体积/h，洗脱液用量为3倍柱床体积；之后用30%乙醇洗脱，洗脱速度3倍柱床体积/h，洗脱液用量为2倍柱床体积；继续用95%乙醇洗脱，洗脱速度3倍柱床体积/h，洗脱液用量为2.5倍柱床体积，以该部分洗脱液作为收集目标，收集完毕后，减压浓缩，干燥，得70%总黄酮含量的罗布麻叶总黄酮提取物。
实施例4：将罗布麻叶除杂后，粉碎至300μm得罗布麻叶粉，按每Kg罗布麻叶粉加入纤维素酶50000U，同时加入20000U果胶酶，按料液比1：10加水，在温度50℃下提取90min，过38μm滤袋取滤液，将滤渣最好进行重复提取2次，重复提取按罗布麻叶粉8倍量加水，最后合并滤液进入下一程序。将酶解提取步骤中所得提取液用0.3μm微滤膜过滤，所述的微滤膜为陶瓷膜，过滤时调节膜后压力为5bar，膜前压力为10bar，温度为40℃，取透过液，微滤过程至剩余1/4体积提取液时，再加入初始提取液体积1/4的水，继续进行膜分离至再次剩余相当于1/3～1/5体积初始提取液时，终止分离，该过程可进行3次，合并上述透过液用7000D的超滤膜除去提取液中的大分子物质，此步骤中的膜为有机膜，过滤时调节膜后压力为5 bar，膜前压力为8bar，提取液温度为30℃，过滤至剩余1/3体积提取液时，再加入初始提取液体积1/3的水，继续进行膜分离至再次剩余相当于1/5体积初始提取液时，终止分离。截留液弃去，滤过液进入下一工序。选用的大孔树脂KX-28，大孔树脂填装径高比为1：10，按照1～3柱床体积/h的速度循环上样，即树脂柱流出液直接进入上样料液桶再次上样，紫外检测器在370nm波长在线检测，至流出液的紫外吸收强度不再发生变化为止，此时为上样终点。静置12h后开始洗脱：初始洗脱液pH值5.5的水，洗脱速度3倍柱床体积/h，洗脱液用量为3倍柱床体积；之后用15%乙醇洗脱，洗脱速度1～3倍柱床体积/h，洗脱液用量为1～3倍柱床体积；继续用65%乙醇洗脱，洗脱速度2倍柱床体积/h，洗脱液用量为3倍柱床体积，以该部分洗脱液作为收集目标，收集完毕后，60℃下减压浓缩，干燥至含水量小于或等于12%，得本发明的罗布麻叶总黄酮提取物。
实施例5：将罗布麻叶除杂后，粉碎至400μm得罗布麻叶粉，按每Kg罗布麻叶粉加入纤维素酶60000U，同时加入30000U果胶酶，按料液比1：20加水，在温度40℃下提取60min。提取结束，过75μm滤网，取滤液待用。将滤渣重复提取2次，重复提取按罗布麻叶粉重量的10倍加水，最后合并滤液进入下一程序。将酶解提取步骤中所得提取液用0.5μm有机膜过滤，过滤时调节膜后压力为1 bar，膜前压力为3bar，温度为20℃，膜分离取透过液。当上述的微滤过程至剩余1/5体积提取液时，再加入初始提取液体积1/3的水，继续进行膜分离至再次剩余相当于1/5体积初始提取液时，终止分离。合并上述透过液用8000D的超滤膜除去提取液中的大分子物质，此步骤中的膜为有机膜，过滤时调节膜后压力为5 bar，膜前压力为12bar，提取液温度为40℃，膜分离，过滤至剩余1/4体积提取液时，再加入初始提取液体积1/3的水，继续进行膜分离至再次剩余相当于1/5体积初始提取液时，终止分离。截留液弃去，滤过液进入下一工序。选用的大孔树脂为KX-38，填装径高比为1：15，按照3柱床体积/h的速度循环上样，即树脂柱流出液直接进入上样料液桶再次上样，紫外检测器在360nm波长在线检测，至流出液的紫外吸收强度不再发生变化为止，此时为上样终点。静置5h后开始洗脱：初始洗脱液pH值7的水，洗脱速度3倍柱床体积/h，洗脱液用量为3倍柱床体积；之后用30%乙醇洗脱，洗脱速度3倍柱床体积/h，洗脱液用量为3倍柱床体积；继续用85%乙醇洗脱，洗脱速度3倍柱床体积/h，洗脱液用量为3倍柱床体积，以该部分洗脱液作为收集目标，收集完毕后，70℃下减压浓缩，干燥至含水量低于8%，得本发明的罗布麻叶总黄酮提取物。
实施例6：将罗布麻叶除杂后，粉碎至250μm得罗布麻叶粉，按每Kg罗布麻叶粉加入纤维素酶50000U，同时加入80000U果胶酶，按料液比1：30加水，在温度60℃下提取100min。提取结束，过44μm滤袋，取滤液待用。将滤渣重复提取3次，重复提取按罗布麻叶粉重量的15倍加水，最后合并滤液进入下一程序。将酶解提取步骤中所得提取液用0.5μm陶瓷膜，过滤时调节膜后压力为15 bar，膜前压力为20bar，温度为15℃，膜分离取透过液，上述的微滤过程至剩余1/5体积提取液时，再加入初始提取液体积1/4的水，继续进行膜分离至再次剩余相当于1/4体积初始提取液时，终止分离，该过程进行3次。合并上述透过液用5000D的超滤膜除去提取液中的大分子物质，此步骤中的膜为有机膜，过滤时调节膜后压力为20 bar，膜前压力为28bar，温度为15℃，过滤至剩余1/5体积提取液时，再加入初始提取液体积1/3的水，继续进行膜分离至再次剩余相当于1/5体积初始提取液时，终止分离。截留液弃去，滤过液进入下一工序。选用大孔树脂D101大孔树脂填装径高比为1：12，按照2柱床体积/h的速度循环上样，即树脂柱流出液直接进入上样料液桶再次上样，紫外检测器在380nm波长在线检测，至流出液的紫外吸收强度不再发生变化为止，此时为上样终点。静置12h后开始洗脱：初始洗脱液pH值6的水，洗脱速度2倍柱床体积/h，洗脱液用量为3倍柱床体积；之后用20%乙醇洗脱，洗脱速度1～3倍柱床体积/h，洗脱液用量为3倍柱床体积；继续用50%乙醇洗脱，洗脱速度3倍柱床体积/h，洗脱液用量为3倍柱床体积，以该部分洗脱液作为收集目标，收集完毕后，60℃下减压浓缩，干燥至含水量低于10%，得本发明的罗布麻叶总黄酮提取物。
实施例7：将罗布麻叶除杂后，粉碎至380μm得罗布麻叶粉，按每Kg罗布麻叶粉加入纤维素酶80000U，按料液比1：20加水，在温度60℃下提取，时间60min，过38μm滤膜，取滤液待用。将滤渣重复提取1～3次，重复提取按罗布麻叶粉重量的10倍加水，最后合并滤液进入下一程序。将酶解提取步骤中所得提取液用0.4μm陶瓷膜过滤，过滤时调节膜后压力为15 bar，膜前压力为20bar，取透过液。上述的微滤过程至剩余1/3体积提取液时，再加入初始提取液体积1/3的水，继续进行膜分离，该过程可进行1～3次，最后一次剩余相当于1/5体积初始提取液时，终止分离，合并上述透过液用2000D的陶瓷膜除去提取液中的大分子物质，过滤时调节膜后压力为20 bar，膜前压力为25bar，提取液温度为60℃，过滤至剩余1/3体积提取液时，再加入初始提取液体积1/3的水，继续进行膜分离至再次剩余相当于1/3体积初始提取液时，再加入初始提取液体积1/3的水，继续进行膜分离至再次剩余相当于1/5体积初始提取液时，终止分离。截留液弃去，滤过液进入下一工序。选用的大孔树脂为AB-8，大孔树脂填装径高比为1：6～1：15，按照1～3柱床体积/h的速度循环上样，即树脂柱流出液直接进入上样料液桶再次上样，紫外检测器在340nm波长在线检测，至流出液的紫外吸收强度不再发生变化为止，此时为上样终点。静置24h后开始洗脱：初始洗脱液pH值6的水，洗脱速度2倍柱床体积/h，洗脱液用量为2倍柱床体积；之后用10%乙醇洗脱，洗脱速度1倍柱床体积/h，洗脱液用量为3倍柱床体积；继续用70%乙醇洗脱，洗脱速度1倍柱床体积/h，洗脱液用量为3倍柱床体积，以该部分洗脱液作为收集目标，收集完毕后，60℃下减压浓缩，干燥至含水量10%以下，得本发明的罗布麻叶总黄酮提取物。
实施例8：将罗布麻叶除杂后，粉碎至420μm得罗布麻叶粉，按每Kg罗布麻叶粉加入纤维素酶50000U，同时加入50000U果胶酶，按料液比1：50加水，在温度60℃下提取，时间150min，过75μm滤膜，取滤液进入用0.3μm陶瓷膜过滤，过滤时调节膜后压力为5 bar，膜前压力为10bar，取透过液。上述过程至剩余1/4体积提取液时，再加入初始提取液体积1/3的水，继续进行膜分离至再次剩余相当于1/4体积初始提取液时，终止分离，该过程进行3次。合并上述透过液用6000D的陶瓷膜除去提取液中的大分子物质，过滤时调节膜后压力为8 bar，膜前压力为15bar，提取液温度为50℃，过滤至剩余1/4体积提取液时，再加入初始提取液体积1/3的水，继续进行膜分离至再次剩余相当于1/5体积初始提取液时，终止分离。截留液弃去，滤过液进入下一工序。选用的大孔树脂为HPD400，大孔树脂填装径高比为1：6，按照1柱床体积/h的速度循环上样，即树脂柱流出液直接进入上样料液桶再次上样，紫外检测器在350nm波长在线检测，至流出液的紫外吸收强度不再发生变化为止，静置12h后开始洗脱：初始洗脱液pH值6的水，洗脱速度2倍柱床体积/h，洗脱液用量为4倍柱床体积；之后用15%乙醇洗脱，洗脱速度1倍柱床体积/h，洗脱液用量为2倍柱床体积；继续用90%乙醇洗脱，洗脱速度1倍柱床体积/h，洗脱液用量为2倍柱床体积，以该部分洗脱液作为收集目标，收集完毕后，50℃下减压浓缩，干燥至含水量13%以下，得本发明的罗布麻叶总黄酮提取物。
实施例9：将罗布麻叶除杂后，粉碎至500μm得罗布麻叶粉，按每Kg罗布麻叶粉加入纤维素酶20000U，同时加入60000U果胶酶，按料液比1：30加水，在温度40℃下提取，时间90min，过80μm滤网，取滤液，将滤渣重复提取1～3次，重复提取按罗布麻叶粉重量的15倍加水，最后合并滤液进入下一程序。将酶解提取步骤中所得提取液用0.1μm陶瓷膜过滤，调节膜后压力为10 bar，膜前压力为150bar，温度为30℃，膜分离取透过液。上述的微滤过程至剩余1/5体积提取液时，再加入初始提取液体积1/4的水，继续进行膜分离至再次剩余相当于1/5体积初始提取液时，终止分离，合并上述透过液用4000D的陶瓷膜除去提取液中的大分子物质，过滤时调节膜后压力为5 bar，膜前压力为13bar，提取液温度为50℃，过滤至剩余1/5体积提取液时，再加入初始提取液体积1/3的水，继续进行膜分离至再次剩余相当于1/5体积初始提取液时，终止分离，滤过液进入下一工序，选用的大孔树脂为HPD600，大孔树脂填装径高比为1：10，按照3柱床体积/h的速度循环上样，紫外检测器在350nm波长在线检测，至流出液的紫外吸收强度不再发生变化为止，此时为上样终点。静置6h后开始洗脱：初始洗脱液pH值6的水，洗脱速度1倍柱床体积/h，洗脱液用量为4倍柱床体积；之后用30%乙醇洗脱，洗脱速度1倍柱床体积/h，洗脱液用量为3倍柱床体积；继续用95%乙醇洗脱，洗脱速度1倍柱床体积/h，洗脱液用量为3倍柱床体积，以该部分洗脱液作为收集目标，收集完毕后，85℃下减压浓缩，干燥至含水量10%以下，得本发明的罗布麻叶总黄酮提取物。
实施例10：将罗布麻叶除杂后，粉碎至180μm得罗布麻叶粉，按每Kg罗布麻叶粉加入纤维素酶50000U，同时加入50000U果胶酶，按料液比1：20加水，在温度50℃下提取100min。过75μm滤膜，取滤液，将滤渣重复提取3次，重复提取按罗布麻叶粉重量的20倍加水，最后合并滤液进入下一程序。将酶解提取步骤中所得提取液用0.4μm陶瓷膜或者有机膜过滤，调节膜后压力为15 bar，膜前压力为18bar，温度为30℃，膜分离取透过液。上述的微滤过程至剩余1/3体积提取液时，再加入初始提取液体积1/3的水，该过程重复进行3次，最后一次剩余相当于1/5体积初始提取液时，终止分离，合并上述透过液用3000D的有机膜除去提取液中的大分子物质，过滤时调节膜后压力为10 bar，膜前压力为18bar，提取液温度为25℃，过滤至剩余1/5体积提取液时，再加入初始提取液体积1/3的水，继续进行膜分离至再次剩余相当于1/5体积初始提取液时，终止分离，滤过液进入下一工序。选用的大孔树脂为XDA-6，大孔树脂填装径高比为1：15，按照2柱床体积/h的速度循环上样，紫外检测器在370nm波长在线检测，至流出液的紫外吸收强度不再发生变化为止，此时为上样终点。静置15h后开始洗脱：初始洗脱液pH值6.5的水，洗脱速度1倍柱床体积/h，洗脱液用量为4倍柱床体积；之后用20%乙醇洗脱，洗脱速度1倍柱床体积/h，洗脱液用量为3倍柱床体积；继续用85%乙醇洗脱，洗脱速度1倍柱床体积/h，洗脱液用量为3倍柱床体积，以该部分洗脱液作为收集目标，收集完毕后，60℃gh 减压浓缩，干燥至含水量8%以下，得本发明的罗布麻叶总黄酮提取物。
实施例11：将罗布麻叶除杂后，粉碎至178μm得罗布麻叶粉，按每Kg罗布麻叶粉加入纤维素酶30000U，同时加入60000U果胶酶，按料液比1：15加水，在温度60℃下提取，时间80min。提取结束，过44μm滤袋，取滤液待用。将滤渣重复提取2次，重复提取按罗布麻叶粉重量的10倍加水，最后合并滤液进入下一程序。将酶解提取步骤中所得提取液用0.1μm陶瓷膜或者有机膜过滤，调节膜后压力为10 bar，膜前压力为15bar，温度为60℃，膜分离取透过液。上述的微滤过程至剩余1/5体积提取液时，再加入初始提取液体积1/4的水，该过程重复进行3次后，继续进行膜分离至剩余相当于1/5体积初始提取液时，终止分离，合并上述透过液用1000D的有机膜或者陶瓷膜除去提取液中的大分子物质，过滤时调节膜后压力为30 bar，膜前压力为33bar，提取液温度为50℃，过滤至剩余1/5体积提取液时，再加入初始提取液体积1/3的水，继续进行膜分离至再次剩余相当于1/5体积初始提取液时，终止分离。截留液弃去，滤过液进入下一工序。选用的大孔树脂为ADS-17，大孔树脂填装径高比为1：12，按照2柱床体积/h的速度循环上样，紫外检测器在360nm波长在线检测，至流出液的紫外吸收强度不再发生变化为止，此时为上样终点。静置3h后开始洗脱：初始洗脱液pH值5.8的水，洗脱速度2倍柱床体积/h，洗脱液用量为4倍柱床体积；之后用30%乙醇洗脱，洗脱速度2倍柱床体积/h，洗脱液用量为3倍柱床体积；继续用70%乙醇洗脱，洗脱速度1倍柱床体积/h，洗脱液用量为3倍柱床体积，以该部分洗脱液作为收集目标，收集完毕后，50℃下减压浓缩，干燥至含水量9%以下，得本发明的罗布麻叶总黄酮提取物。
实施例12：将罗布麻叶除杂后，粉碎至300μm得罗布麻叶粉，按每Kg罗布麻叶粉加入纤维素酶20000U，同时加入40000U果胶酶，按料液比1：30加水，在温度60℃下提取，时间150min，过30～80μm滤袋取滤液，将滤渣重复提取1次，重复提取按罗布麻叶粉重量的30倍加水，合并滤液进入下一程序。将酶解提取步骤中所得提取液用0.15μm陶瓷膜或者有机膜过滤，调节膜后压力为8 bar，膜前压力为10bar，温度为60℃，膜分离取透过液。上述的微滤过程至剩余1/3体积提取液时，再加入初始提取液体积1/3的水，该过程重复进行3次后，继续进行膜分离至再次剩余相当于1/5体积初始提取液时，终止分离，合并上述透过液用3000D的有机膜或者陶瓷膜除去提取液中的大分子物质，过滤时调节膜后压力为5 bar，膜前压力为10bar，提取液温度为60℃，过滤至剩余1/3体积提取液时，再加入初始提取液体积1/3的水，继续进行膜分离至再次剩余相当于1/5体积初始提取液时，终止分离。截留液弃去，滤过液进入下一工序。选用的大孔树脂为ADS-17，大孔树脂填装径高比为1：12，按照1柱床体积/h的速度循环上样，紫外检测器在360nm波长在线检测，至流出液的紫外吸收强度不再发生变化为止，此时为上样终点。静置10h后开始洗脱：初始洗脱液pH值6的水，洗脱速度1倍柱床体积/h，洗脱液用量为3倍柱床体积；之后用20%乙醇洗脱，洗脱速度1倍柱床体积/h，洗脱液用量为3倍柱床体积；继续用65%乙醇洗脱，洗脱速度1倍柱床体积/h，洗脱液用量为3倍柱床体积，以该部分洗脱液作为收集目标，收集完毕后，60℃下减压浓缩，干燥动态含水量13%以下，得本发明的罗布麻叶总黄酮提取物。
实施例13：将罗布麻叶除杂后，粉碎至150μm得罗布麻叶粉，按每Kg罗布麻叶粉加入纤维素酶30000U，同时加入60000U果胶酶，按料液比1：30加水，在温度60℃下提取，时间120min。提取结束，过75μm滤袋取滤液，将滤渣重复提取3次，重复提取按罗布麻叶粉重量的10倍加水，最后合并滤液进入下一程序。将酶解提取步骤中所得提取液用0.2μm陶瓷膜或者有机膜过滤，调节膜后压力为10bar，膜前压力为15bar，温度为55℃，膜分离取透过液。上述的微滤过程至剩余1/5体积提取液时，再加入初始提取液体积1/3的水，继续进行膜分离至再次剩余相当于1/5体积初始提取液时，终止分离，合并上述透过液用2000D的有机膜或者陶瓷膜除去提取液中的大分子物质，过滤时调节膜后压力为30 bar，膜前压力为35bar，提取液温度为60℃，过滤至剩余1/5体积提取液时，再加入初始提取液体积1/3的水，继续进行膜分离至再次剩余相当于1/5体积初始提取液时，终止分离，滤过液进入下一工序，选用的大孔树脂为ADS-17，大孔树脂填装径高比为1：10，按照2柱床体积/h的速度循环上样，紫外检测器在360nm波长在线检测，至流出液的紫外吸收强度不再发生变化为止，此时为上样终点。静置15h后开始洗脱：初始洗脱液pH值6.2的水，洗脱速度1.5倍柱床体积/h，洗脱液用量为4倍柱床体积；之后用25%乙醇洗脱，洗脱速度2倍柱床体积/h，洗脱液用量为3倍柱床体积；继续用70%乙醇洗脱，洗脱速度1倍柱床体积/h，洗脱液用量为3倍柱床体积，以该部分洗脱液作为收集目标，收集完毕后，55℃下减压浓缩，干燥至含水量12%以下，得本发明的罗布麻叶总黄酮提取物。
实施例14：将罗布麻叶除杂后，粉碎至180μm得罗布麻叶粉，按每Kg罗布麻叶粉加入纤维素酶80000U，同时加入80000U果胶酶，按料液比1：40加水，在温度60℃下提取，时间120min。提取结束，过75μm滤网取滤液，将滤渣重复提取2次，重复提取按罗布麻叶粉重量的20倍加水，最后合并滤液进入下一程序。将酶解提取步骤中所得提取液用0.25μm陶瓷膜或者有机膜过滤，调节膜后压力为8 bar，膜前压力为10bar，温度为50℃，膜分离取透过液。上述过程至剩余1/4体积提取液时，再加入初始提取液体积1/3的水，继续进行膜分离至再次剩余相当于1/5体积初始提取液时，终止分离，合并上述透过液用2000D的有机膜或者陶瓷膜除去提取液中的大分子物质，过滤时调节膜后压力为20bar，膜前压力为33bar，提取液温度为60℃，膜分离，过滤至剩余1/5体积提取液时，再加入初始提取液体积1/3的水，继续进行膜分离至再次剩余相当于1/5体积初始提取液时，终止分离。截留液弃去，滤过液进入下一工序。选用的大孔树脂为HPD400，大孔树脂填装径高比为1：8，按照1柱床体积/h的速度循环上样，紫外检测器在360nm波长在线检测，至流出液的紫外吸收强度不再发生变化为止，此时为上样终点。静置8h后开始洗脱：初始洗脱液pH值6的水，洗脱速度1倍柱床体积/h，洗脱液用量为3倍柱床体积；之后用30%乙醇洗脱，洗脱速度1倍柱床体积/h，洗脱液用量为3倍柱床体积；继续用85%乙醇洗脱，洗脱速度1倍柱床体积/h，洗脱液用量为3倍柱床体积，以该部分洗脱液作为收集目标，收集完毕后，70℃下减压浓缩，干燥至含水量12以下，得本发明的罗布麻叶总黄酮提取物。
实施例15：将罗布麻叶除杂后，粉碎至500μm得罗布麻叶粉，按每Kg罗布麻叶粉加入纤维素酶30000U，同时加入50000U果胶酶，按料液比1：20加水，在温度60℃下提取，时间150min，过44μm滤袋，将滤渣重复提取2次，重复提取按罗布麻叶粉重量的20倍加水，最后合并滤液进入下一程序。取滤液进入用0.35μm陶瓷膜过滤，过滤时调节膜后压力为5 bar，膜前压力为10bar，取透过液。上述过程至剩余1/4体积提取液时，再加入初始提取液体积1/3的水，继续进行膜分离至再次剩余相当于1/4体积初始提取液时，终止分离，该过程进行3次。合并上述透过液用3000D的陶瓷膜除去提取液中的大分子物质，过滤时调节膜后压力为8 bar，膜前压力为15bar，提取液温度为50℃，过滤至剩余1/4体积提取液时，再加入初始提取液体积1/3的水，继续进行膜分离至再次剩余相当于1/5体积初始提取液时，终止分离。截留液弃去，滤过液进入下一工序。选用的大孔树脂为HPD400，大孔树脂填装径高比为1：10，按照1柱床体积/h的速度循环上样，即树脂柱流出液直接进入上样料液桶再次上样，紫外检测器在360nm波长在线检测，至流出液的紫外吸收强度不再发生变化为止，静置12h后开始洗脱：初始洗脱液pH值6的水，洗脱速度2倍柱床体积/h，洗脱液用量为4倍柱床体积；之后用15%乙醇洗脱，洗脱速度1倍柱床体积/h，洗脱液用量为2倍柱床体积；继续用90%乙醇洗脱，洗脱速度1倍柱床体积/h，洗脱液用量为2倍柱床体积，以该部分洗脱液作为收集目标，收集完毕后，75℃下减压浓缩，干燥至含水量13%以下，得本发明的罗布麻叶总黄酮提取物。
Claims (8)
1.一种从罗布麻叶中提取总黄酮的方法，其特征在于包含以下过程：
酶解提取：将罗布麻叶除杂后，粉碎至150～600μm得罗布麻叶粉，按每Kg罗布麻叶粉加入纤维素酶20000～80000U，加入水中提取，料液比为重量的1：8～1：50，在温度30～60℃，时间60～150min后，过30～80μm滤筛，取滤液待用，所述的滤筛为滤袋、滤网或滤膜中的一种；
微滤：通过微滤进行澄清处理，去除纤维类杂质，将酶解所得提取液用0.1～ 0.5μm微滤膜过滤，此处的微滤膜为陶瓷膜或者有机膜中的一种；
超滤：通过超滤膜分离去除大分子物质，用1000～10000D的超滤膜除去提取液中的大分子物质，所述的超滤膜为有机膜或者陶瓷膜中的一种；
纯化：用大孔树脂纯化，所述的大孔树脂为KX-28、KX-38、D101、AB-8、HPD400、HPD600、XDA-6、ADS-17中的一种，大孔树脂填装径高比为1：6～1：15，装填完树脂柱后，按照1～3柱床体积/h的速度循环上样，即树脂柱流出液直接进入上样料液桶再次上样，紫外检测器在340～380nm波长在线检测，至流出液的紫外吸收强度不再发生变化为上样终点；
洗脱：静置0.5～24h后进行洗脱，将所得洗脱液减压浓缩、干燥，得本发明的罗布麻叶总黄酮提取物。
2.根据权利要求1所述的从罗布麻叶中提取总黄酮的方法，其特征在于：所述酶解提取中，按每Kg罗布麻叶粉加入20000～80000U的果胶酶，所述纤维素酶与果胶酶二者的比例是3：1～3：9。
3.根据权利要求1所述的从罗布麻叶中提取总黄酮的方法，其特征在于：所述滤渣进行重复提取1～3次，重复提取加水量为第一次加水量的30%～100%，不加酶，温度30～60℃，时间60～150min，用30～80μm滤袋过滤，重复提取结束，合并所得滤液进入下一程序。
4.根据权利要求1所述的从罗布麻叶中提取总黄酮的方法，其特征在于：所述微滤中，调节膜后压力为1～15 bar，膜前压力为1.5～20bar，跨膜压力0.5～5bar，提取液温度为15～60℃。
5.根据权利要求4所述的从罗布麻叶中提取总黄酮的方法，其特征在于：所述微滤中，过滤至剩余1/3～1/5体积提取液时，再加入初始提取液体积1/3～1/5的水，继续进行膜分离至再次剩余相当于1/3～1/5体积初始提取液时，终止分离，该过程进行1～3次。
6.根据权利要求1～5任一项所述的从罗布麻叶中提取总黄酮的方法，其特征在于：所述超滤中，过滤时调节膜后压力为5～30 bar，膜前压力为5～35bar，并且跨膜压力＞0≤8bar，提取液温度为15～60℃，膜分离，过滤至剩余1/3～1/5体积提取液时，再加入初始提取液体积1/3～1/5的水，继续进行膜分离至再次剩余相当于1/3～1/5体积初始提取液时，终止分离，滤过液进入下一工序。
7.根据权利要求1～5任一项所述的从罗布麻叶中提取总黄酮的方法，其特征在于：所述纯化中的洗脱：初始洗脱液pH值5～7的水，洗脱速度1～3倍柱床体积/h，洗脱液用量为1～4倍柱床体积；之后用10～30%乙醇洗脱，洗脱速度1～3倍柱床体积/h，洗脱液用量为1～3倍柱床体积；继续用50～95%乙醇洗脱，洗脱速度1～3倍柱床体积/h，洗脱液用量为1～3倍柱床体积，以该部分洗脱液作为收集目标，收集完毕后，进入减压浓缩，干燥。
8.根据权利要求6任一项所述的从罗布麻叶中提取总黄酮的方法，其特征在于：所述纯化中的洗脱：初始洗脱液pH值5～7的水，洗脱速度1～3倍柱床体积/h，洗脱液用量为1～4倍柱床体积；之后用10～30%乙醇洗脱，洗脱速度1～3倍柱床体积/h，洗脱液用量为1～3倍柱床体积；继续用50～95%乙醇洗脱，洗脱速度1～3倍柱床体积/h，洗脱液用量为1～3倍柱床体积，以该部分洗脱液作为收集目标，收集完毕后，进入减压浓缩，干燥。
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Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105942435A (zh) * | 2016-05-03 | 2016-09-21 | 王胜 | 一种含罗布麻提取物的植物盐及其制备方法 |
| CN109430482A (zh) * | 2018-12-11 | 2019-03-08 | 南京益唯森生物科技有限公司 | 一种降压调脂的有机茶及其制备方法与应用 |
| CN114606287A (zh) * | 2022-04-22 | 2022-06-10 | 乔金星 | 用于罗布麻叶提高多糖、黄酮提取量的方法及其发酵罐 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20020090403A1 (en) * | 2000-11-01 | 2002-07-11 | Sansei Nishibe | Antidepressant |
| CN102836201A (zh) * | 2011-06-21 | 2012-12-26 | 徐州工程学院 | 一种鸡骨草总黄酮的制备方法 |
| CN102935100A (zh) * | 2012-11-30 | 2013-02-20 | 中国人民解放军兰州军区乌鲁木齐总医院 | 一种大花罗布麻叶总黄酮的制备方法和用途 |
| CN102948758A (zh) * | 2012-11-26 | 2013-03-06 | 陕西科技大学 | 一种从荞麦麸皮中提取荞麦黄酮的方法 |
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Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20020090403A1 (en) * | 2000-11-01 | 2002-07-11 | Sansei Nishibe | Antidepressant |
| CN102836201A (zh) * | 2011-06-21 | 2012-12-26 | 徐州工程学院 | 一种鸡骨草总黄酮的制备方法 |
| CN102948758A (zh) * | 2012-11-26 | 2013-03-06 | 陕西科技大学 | 一种从荞麦麸皮中提取荞麦黄酮的方法 |
| CN102935100A (zh) * | 2012-11-30 | 2013-02-20 | 中国人民解放军兰州军区乌鲁木齐总医院 | 一种大花罗布麻叶总黄酮的制备方法和用途 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 唐德智: "黄酮类化合物的提取、分离、纯化研究进展", 《海峡药学》 * |
| 韩爱霞等: "罗布麻叶总黄酮类化合物的酶解-溶剂提取工艺研究", 《安徽农业科学》 * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105942435A (zh) * | 2016-05-03 | 2016-09-21 | 王胜 | 一种含罗布麻提取物的植物盐及其制备方法 |
| CN109430482A (zh) * | 2018-12-11 | 2019-03-08 | 南京益唯森生物科技有限公司 | 一种降压调脂的有机茶及其制备方法与应用 |
| CN114606287A (zh) * | 2022-04-22 | 2022-06-10 | 乔金星 | 用于罗布麻叶提高多糖、黄酮提取量的方法及其发酵罐 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |