CN104163855A

CN104163855A - 一种卡泊芬净中间体及其盐的分离纯化方法

Info

Publication number: CN104163855A
Application number: CN201310181554.1A
Authority: CN
Inventors: 李子清; 张小娟
Original assignee: Chongqing Co Ltd Of Hui Zhi Drug Research Institute; Chongqing Shenghuaxi Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Chongqing Co Ltd Of Hui Zhi Drug Research Institute; Chongqing Shenghuaxi Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2013-05-16
Filing date: 2013-05-16
Publication date: 2014-11-26
Anticipated expiration: 2033-05-16
Also published as: CN104163855B

Abstract

本发明公开了一种卡泊芬净中间体及其盐的分离纯化方法。该方法包括下列步骤：1）将该中间体及其盐溶于溶剂1中，然后上样到阳离子交换树脂柱；2）首先用水进行洗脱，然后依次用溶剂2、溶剂3进行洗脱，收集溶剂3洗脱液中高纯度的部分，浓缩得到油状物；3）将该油状物溶于溶剂4中，采用碱水洗涤后再水洗至中性，向有机相中滴加溶剂5析出固体，由此制得高纯度目标中间体及其盐。本发明制备的中间体及其盐不含无机盐、不带色、纯度高，可以直接用于制备高纯度的卡泊芬净。

Description

一种卡泊芬净中间体及其盐的分离纯化方法

技术领域

本发明涉及医药化工技术，更具体地说涉及一种高纯度卡泊芬净中间体及其盐的分离纯化方法。

背景技术

醋酸卡泊芬净为半合成棘白菌素类化合物，具有良好的抗菌活性，适用于念珠菌病属、曲霉菌属、组织胞浆菌属、球孢子菌属和牙生菌属真菌引起的感染，同时可用于卡氏肺囊虫引起的感染。2001年2月被美国FDA批准用于曲霉菌感染的治疗。

本品中文化学名：1-[4R,5S]-5-[(2-氨乙基)氨基]-N2-（10,12）-二甲基-1-氧代十四烷基）-4-羟基-L-鸟氨酸]-5-[(3R)-3-羟基-L-鸟氨酸]-纽莫康定B0，CAS Registry Number为162808-62-0，结构式如下。

本品的制备方法披露于诸多专利及文献中，例如WO9421677、WO9624613、US5792746、US5936062、US2008319162、WO9747645、WO02083713、WO2010008493 、US2010168415、US2008319162 、WO2010064219、WO2009151341 、CN102367267、CN101792486、J. Org. Chem.1999, 64, 2411-2417以及J. Org. Chem. 2007, 72, 2335-2343等均描述了卡泊芬净及其盐的制备方法。其中起始原料、中间体或成品醋酸卡泊芬净都需要通过制备柱进行分离纯化，文献J. LIQ. CHROM. & REL. TECHNOL. 24(6), 781-789(2001) 报道的醋酸卡泊芬净及其中间体的分离纯化方法，使用了C18反相制备柱，乙腈和水的酸性溶液作为流动相，柱效不低于15000塔板数/米。

文献Journal of antibiotics,45,1853(1992)报道了一种合成卡泊芬净的起始原料纽莫康定B0的纯化方法，使用硅胶键合氨基柱，乙酸乙酯：甲醇：水作为洗脱剂，合并含量较高的收集液并旋干，用甲醇和乙酸异丙酯结晶，得到99%以上的纽莫康定B0。

采用纽莫康定B0为起始原料合成卡泊芬净的合成路线如下：

化合物3是合成卡泊芬净的重要中间体，纯度和质量直接决定着成品的质量。文献US2009291996和US2009324635报道了卡泊芬净及其盐的纯化方法，这两篇文献同时也报道了利用中压反相C18柱纯化苯硫酚取代纽莫康定铵盐（化合物3）的方法。已有文献对化合物3的纯化存在如下缺点：1）使用制备色谱系统，设备要求高；2）采用C18反相填料，流动相用量大，成本高；3）大量流动相旋干过程中产生高盐份，产品稳定性差；4）大量流动相的使用，废水产生过多。现有的技术很难实现工业化生产，因此，需要建立一种化合物3的分离纯化方法。

发明内容

本发明主要解决了制备卡泊芬净的工艺过程中化合物3纯化困难、设备要求高、“三废”量大、制造成本高等问题。

本发明的目的是提供一种醋酸卡泊芬净中间体—化合物3的分离纯化方法。根据文献J. Org. Chem. 2007, 72, 2335-2343制备化合物3，然后过离子交换柱的方法分离纯化，使工艺简便、纯化效率高、易于工业化。

本发明采用了下列技术方案：

本发明提供了一种醋酸卡泊芬净中间体的分离纯化方法，包括如下步骤：

1）取卡泊芬净中间体-化合物3溶于溶剂1中，上样到阳离子交换树脂柱；

2）首先用水洗脱，再依次用溶剂2、溶剂3洗脱，收集溶剂3洗脱液中纯度99%以上的部分；

3）将收集的含高纯度化合物3的洗脱液真空旋干，将残留物溶于溶剂4中，依次用5%碱水洗涤、水洗至中性，往有机相中滴加溶剂5使析出固体，制得高纯度化合物3。

本发明所使用的化合物3采用文献J. Org. Chem. 2007, 72, 2335-2343所述的方法制备，该文献方法的相关内容并入本发明的说明书中。

步骤1）所使用的阳离子交换树脂选自强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂、弱酸性苯乙烯系阳离子交换树脂、弱酸性丙烯酸系阳离子交换树脂、弱酸性酚醛系系阳离子交换树脂、大孔强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂、大孔弱酸性苯乙烯系阳离子交换树脂、大孔弱酸性丙烯酸系阳离子交换树脂，如Dowex 509HCRW-20、Amberlite IR-120、Lewatit S100 KY-2、Diaion SK-1B、Duolite C2、Tehua IRC007、Ionresin 001、 Amberlite IRA118、Ionresin 004TehuaI IRC 004 、Amberlite 200、TehuaBQC811、Lewatit SP120、Dowex MSCL、Diaion PLK228、Duolite ES264、Amberlite IRC-84、 Amberlite IRC-50、Ionresin IR-102等。优选使用大孔强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂，更优选使用Amberlite 200树脂。

步骤1）的上样方法包括湿法上样和干法上样，湿法上样时用溶剂1溶解后直接上样，干法上样时用溶剂1溶解，加入5-10倍量的阳离子离子交换树脂拌匀，旋干后上样，优选湿法上样。

步骤1）中所使用的溶剂1选自甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、THF、二氧六环、DMF、DMSO、NMP、HMPA等中的一种或它们的混合溶剂，优选甲醇。

步骤2）中使用水洗脱无机盐和强极性的氨基酸等降解杂质，PH值控制在6-7之间。

步骤2）中所述溶剂2选自水、甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、丙酮、四氢呋喃、乙腈、二氧六环中的一种或它们的混合溶剂，优选甲醇和水的混合溶剂，更优选20-60%（体积比）甲醇水溶液，最优选45%（体积比）甲醇水溶液。

步骤2）中所述溶剂3选自甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、丙酮、乙腈、四氢呋喃、二氧六环中的任意一种与水配制的碱性溶液，碱性溶液PH值控制在9-10，优选甲醇和水混合溶剂，甲醇的体积百分数为20%-80%，优选30%甲醇水溶液，调节PH值的碱选自三乙胺、氨水，优选氨水调节PH值至9-10。

步骤3）中所述溶剂4选自正丁醇、异丁醇、乙酸丁酯，乙酸正丁酯或乙酸异丁酯中的一种或它们的混合溶剂，优选正丁醇；洗涤用的5%碱水中的碱选自碱金属或碱土金属的氢氧化物或碳酸盐，如氢氧化物、碳酸盐，如氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸铯等，优选5%的碳酸钠水溶液。

步骤3）中所述溶剂5选自乙腈、乙酸乙酯、正己烷、石油醚、苯、甲苯、甲醇水溶液、乙醇水溶液、丙酮水溶液中的一种或几种混合溶剂，优选乙腈。

和现有技术相比，本发明具有如下有益技术效果：① 利用化合物3带有氨基和环己肽结构，可以被大孔阳离子交换树脂有效吸附，并且采用碱性溶剂可以将其解吸附的特性，大大提高了分离纯化效率；②将化合物3用阳离子交换树脂吸附，通过水洗脱和有机溶剂洗脱，有效去除了无机和有机杂质；③ 与现有工艺相比，该工艺具有操作简便、纯化效率高、成本低、三废量少等优点。

具体实施方式

下面通过实施例来进一步描述本发明的技术方案，对于本领域的普通技术人员而言，下列实施例不构成对本发明的保护范围的限制。

实施例1：

量取Amberlite 200树脂100ml装柱，加纯化水浸泡过夜，1%盐酸500ml活化树脂，最后用纯化水500ml平衡柱子。

称取化合物3粗品1g（纯度72%），溶于10ml甲醇中，上样。

依次用纯化水300ml冲洗，然后用45%甲醇300ml冲洗，流速为5-7ml/min，再用经氨水调PH值9-10的30%甲醇溶液洗脱，收集纯度超过99%的洗脱液，于旋转蒸发仪中减压浓缩至干。

油状物中加入正丁醇20ml搅拌溶解，5%碳酸钠水溶液20ml洗两次，水洗至中性，水浴温度控制在50℃以下减压旋去大部分正丁醇，剩余5ml左右时，加入乙腈10ml，降温至0-10℃保温搅拌0.5小时，抽滤，得固体0.52g，收率72%（收率按照粗品折干折纯计算，其他实施例同样），纯度99.7%。

实施例2：

量取Diaion SK-1B树脂50ml装柱，加纯化水浸泡过夜。1%盐酸500ml活化树脂，最后用纯化水500ml平衡柱子。

称取化合物3粗品0.5g（纯度72%），溶于5ml甲醇中，上样。

依次用纯化水150ml冲洗，然后用60%甲醇150ml冲洗，流速为5ml/min，再用经氨水调PH值9-10的80%甲醇溶液洗脱，收集纯度超过99%的洗脱液，于旋转蒸发仪中减压浓缩至干。

油状物中加入正丁醇10ml搅拌溶解，5%碳酸钠水溶液10ml洗两次，水洗至中性，水浴温度控制在50℃以下减压旋去大部分正丁醇，剩余5ml 左右时，加入乙腈10ml，降温至0-10℃保温搅拌0.5小时，抽滤，得固体0.22g，收率61%，纯度99.5%。

实施例3：

量取Amberlite IRC-50树脂100ml装柱，加纯化水浸泡过夜。1%盐酸500ml活化树脂，最后用纯化水500ml平衡柱子。

称取化合物3粗品1g（纯度72%），溶于10ml甲醇中，上样。

依次用纯化水300ml冲洗，然后用20%甲醇300ml冲洗，流速为5ml/min，

再用经氨水调PH值9-10的20%甲醇溶液洗脱，收集纯度超过99%的洗脱液，于旋转蒸发仪中减压浓缩至干。

油状物中加入乙酸异丁酯20ml搅拌溶解，5%碳酸钠水溶液20ml洗两次，水洗至中性，水浴温度控制在50℃以下减压旋去大部分乙酸异丁酯，剩余5ml左右时，加入乙腈10ml，降温至0-10℃保温搅拌0.5小时，抽滤，得固体0.48g，收率66%，纯度99.4%。

实施例4：

量取Amberlite 200树脂100ml装柱，加纯化水浸泡过夜。1%盐酸500ml活化树脂，最后用纯化水500ml平衡柱子。

称取化合物3粗品1g（纯度72%），溶于10ml甲醇中，上样。

依次用纯化水300ml冲洗，然后用50%甲醇300ml冲洗，流速为5ml/min；再用经氨水调PH值9-10的30%甲醇溶液500ml洗脱，收集纯度超过99%的洗脱液，于旋转蒸发仪中减压浓缩至干。

油状物中加入乙酸正丁酯 20ml搅拌溶解，5%碳酸钠水溶液20ml洗两次，水洗至中性，水浴温度控制在50℃以下减压旋去大部分乙酸正丁酯，剩余5ml左右时，加入乙腈10ml，降温至0-10℃保温搅拌0.5小时，抽滤，得固体0.52g，收率72%，纯度99.5。

实施例5-15：

实施例5-10列举了改变阳离子交换树脂和各步骤溶剂对质量和收率的影响，数据统计如下（收率按照粗品折干折纯计算）：

Claims

1.一种卡泊芬净中间体及其盐的分离纯化方法，依照该法制备的中间体及其盐纯度高达99％以上，可以直接用于制备高纯度的卡泊芬净，该方法包括下列步骤：

3）将收集的含高纯度化合物3的洗脱液减压蒸馏旋干，残留物溶于溶剂4中，依次用5%碱水洗涤、水洗至中性，往有机相中滴加溶剂5使析出固体，制得高纯度化合物3。

2.如权利要求1所述的分离纯化方法，其特征在于：步骤1）所使用的阳离子交换树脂选自强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂、弱酸性苯乙烯系阳离子交换树脂、弱酸性丙烯酸系阳离子交换树脂、弱酸性酚醛系阳离子交换树脂、大孔强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂、大孔弱酸性苯乙烯系阳离子交换树脂、大孔弱酸性丙烯酸系阳离子交换树脂，如Dowex 509HCRW-20、Amberlite IR-120、Lewatit S100 KY-2、Diaion SK-1B、Duolite C2、Tehua IRC007、Ionresin 001、 Amberlite IRA118、Ionresin 004TehuaI IRC 004 、Amberlite 200、TehuaBQC811、Lewatit SP120、Dowex MSCL、Diaion PLK228、Duolite ES264、Amberlite IRC-84、 Amberlite IRC-50、Ionresin IR-102等。

3.优选使用大孔强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂，更优选使用Amberlite 200树脂。

4.如权利要求1所述的分离纯化方法，其特征在于：在步骤1）中，上样方法包括湿法上样和干法上样，湿法上样时用溶剂1溶解后直接上样，干法上样时用溶剂1溶解，加入5-10倍量的阳离子离子交换树脂拌匀，真空旋干后上样，优选湿法上样。

5.如权利要求1所述的分离纯化方法，其特征在于：在步骤1）中所使用的溶剂1选自甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、THF、二氧六环、DMF、DMSO、NMP、HMPA等中的一种或它们的混合溶剂，优选甲醇；

如权利要求1所述的分离纯化方法，其特征在于：步骤2）中所述溶剂2选自水、甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、丙酮、四氢呋喃、乙腈、二氧六环中的一种或它们的混合溶剂，优选甲醇和水的混合溶剂，更优选20-60%（体积比）甲醇水溶液，最优选45%（体积比）甲醇水溶液。

6.如权利要求1所述的分离纯化方法，其特征在于：在步骤2）中所述溶剂3选自甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、丙酮、乙腈、四氢呋喃中的任意一种与水配制的碱性溶液，碱性溶液PH值控制在9-10，优选甲醇和水混合溶剂，甲醇的体积百分数为20%-80%，优选30%甲醇水溶液，调节PH值的碱选自三乙胺、氨水，优选氨水调节PH值至9-10。

7.如权利要求1所述的分离纯化方法，其特征在于：在步骤3）中所述溶剂4选自正丁醇、异丁醇、乙酸丁酯，乙酸正丁酯或乙酸异丁酯中的一种或它们的混合溶剂，优选正丁醇；洗涤用的5%碱水中的碱选自碱金属或碱土金属的氢氧化物、碳酸盐，如氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸铯等，优选5%的碳酸钠水溶液。

8.如权利要求1所述的分离纯化方法，其特征在于：步骤3）中所述溶剂5选自乙腈、乙酸乙酯、正己烷、石油醚、苯、甲苯、甲醇水溶液、乙醇水溶液、丙酮水溶液中的一种或几种混合溶剂，优选乙腈。