CN104146998A - 5-羟基-7-甲氧基色原酮在制药中的新应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了5-羟基-7-甲氧基色原酮在制备治疗或预防心肌缺血的药物中的应用。研究发现5-羟基-7-甲氧基色原酮对心肌缺血具有显著的治疗或预防效果，其可显著增加冠脉流量、减慢心率和增加心肌收缩力，还可显著增强机体耐缺氧和缺血作用，也能明显增加机体清除超氧阴离子自由基的能力，还能减少脂质过氧化物的形成，维持机体氧化和抗氧化平衡，保证机体免受过氧化损伤，起到保护心肌细胞的作用。

Description

5-羟基-7-甲氧基色原酮在制药中的新应用

技术领域

本发明涉及医药领域，特别是涉及一种5-羟基-7-甲氧基色原酮在制药中的新应用。

背景技术

冠状动脉粥样硬化心脏病(又称冠心病，英文名称：coronary heart disease，简称CHD)，也叫缺血性心脏病。

心肌缺血是由于多种原因引起的冠状动脉狭窄，心脏的血液灌注减少，导致心肌供血不足，心脏的供氧减少，心肌能量代谢不正常，从而出现心肌代谢功能障碍和结构损伤，最终出现心肌细胞坏死及心功能异常。临床数据显示，引起心肌缺血最主要、最常见的病因是冠心病，心肌缺血是冠心病最基本的病理生理过程。

心肌缺血为发病率较高的心血管疾病，急性发作死亡率高，且反复发作易引起心率失常或者心力衰竭，随着我国人口迅速老龄化和工作节奏加快，冠心病等心脑血管疾病的发生率也逐年增多，严重威胁着人民的身心健康，甚至成为危害健康的“第一杀手”，虽然在过去几十年内，外科手术治疗、干细胞疗法使心肌缺血的治疗取得了进展，但服用药物仍然是其重要、最主要的治疗手段，也是公认的有效而安全的方法，它对延长患者的生命和改善患者的生活质量有着重要的作用。

心肌缺血的药物治疗的关键是使氧的供应与消耗重新达到平衡，其治疗手段主要可分为两类。一种是减少心肌耗氧量；另一种是改善冠脉血流量。目前临床上使用的西药主要有亚硝酸酯和硝酸酯类药物、Ca²⁺拮抗剂、钾通道激动剂、血管紧张素转换酶(ACE)抑制剂、β-受体阻滞剂、ETA受体阻滞剂、Na⁺-H⁺交换(NHE)抑制剂。

中医药在心血管疾病的预防及治疗中占据重要的地位。研究人员发现许多中药具有不同程度的抗心肌缺血作用，获得了不少有意义的成果。其中主要有皂苷类，代表药物有三七总皂苷、西洋参果总皂苷、川续断皂苷、人参皂苷、绞股蓝总苷、蒺藜皂苷；黄酮类，如葡萄籽原花青素、水飞蓟宾、槲寄生黄酮苷、天山花揪叶总黄酮、淫羊藿苷、苦碟子总黄酮、淡竹叶黄酮、黄芩总黄酮；生物碱类，如二氢石蒜碱、关附甲素、槐定碱、延胡索生物碱、川芎嗪、苦参碱；酚酸类，如白藜芦醇、丹酚酸B、芝麻酚；糖苷类，如黑木耳多糖、白藜芦醇苷、红景天苷、天麻素。

然而，虽然临床上应用的药物有多种，但由于其自身种种原因，存在各种各样的副作用。因此，寻找新的作用靶点，开发一系列全新的药物，为心肌缺血的药物治疗展开更为广阔的领域是药物研究工作努力的方向。

色原酮及其苷类化合物属于植物的次生代谢产物，其在植物中分布较广泛，多种科属中都存在该类化合物。近年来，国内外学者对色原酮及其苷类化合物的生物学功能研究越来越多，结果表明其具有抗肿瘤、抗炎、镇痛和降血压等很多有益于人类健康的生物活性，因此受到生物医学界的重视。

枫香槲寄生Viscum liquidambaricolum Hayata.系桑寄生科槲寄生属植物，该属植物主要分布于台湾及南方的一些省区，槲寄生属植物对心血管系统疾病有显著的活性。而5-羟基-7-甲氧基色原酮(5-hydroxy-7-methoxychromone，简称：HMC)，化学式如式Ⅰ所示，其可从枫香槲寄生植物中获得的(分离方法可参见杨燕军.枫香槲寄生化学成分的研究《中药材》，1998；21(1):22-23)；现有技术表明，HMC具有抗肿瘤作用。

发明内容

基于此，本发明的目的在于提供一种5-羟基-7-甲氧基色原酮在制药中的新应用。

解决上述技术问题的具体技术方案如下：

5-羟基-7-甲氧基色原酮在制备治疗或预防心肌缺血的药物中的应用。

5-羟基-7-甲氧基色原酮在制备治疗或预防冠心病引起的心肌缺血的药物中的应用。

5-羟基-7-甲氧基色原酮在制备治疗或预防缺血性心脏病的药物中的应用。

本发明所述5-羟基-7-甲氧基色原酮在制药中的新应用具有以下优点和有益效果：

本发明经发明人的大量研究和实验得出：5-羟基-7-甲氧基色原酮对心肌缺血具有显著的治疗或预防效果，其可显著增加冠脉流量、减慢心率和增加心肌收缩力，还可显著增强机体耐缺氧和缺血作用，也能明显增加机体清除超氧阴离子自由基的能力，还能减少脂质过氧化物的形成，维持机体氧化和抗氧化平衡，保证机体免受过氧化损伤，起到保护心肌细胞的作用。

具体实施方式

以下将结合具体实施例对本发明做进一步说明。

试验例1  5-羟基-7-甲氧基色原酮(HMC)对离体豚鼠心脏灌流的影响

一、实验目的

通过对比分析评价HMC对离体豚鼠心脏灌流的影响。

二、实验材料与方法

1、材料与动物

1.1 实验材料、供试品与对照品

实验动物选用体重350-400g健康封闭群豚鼠，由广东省医用实验动物中心提供。

供试品：5-羟基-7-甲氧基色原酮(5-hydroxy-7-methoxychromone,mp.114-116℃)，用95％乙醇溶解，每毫升含供试品30mg。空白溶剂对照为0.3ml/20ml(95％乙醇/纯化水)，分析纯。

阳性对照药：磷酸川芎嗪注射液，广东利民制药厂生产，每支2ml，内含磷酸川芎嗪50mg。

1.2 实验动物

动物体重和性别：350-400g健康封闭群豚鼠，雌雄各半，由广东省医学实验动物中心提供。

饲养条件：SPF级动物实验室，室温23～25℃，相对湿度40～70％，每小时换新风9次。广东省实验动物使用许可证号为SYXK(粤)2004-0021。标准饲养笼内喂养，笼内保持清洁干燥，房间定时通风消毒，自然光照。

检疫过程：新购进的动物检疫期至少一周，在检疫期间观察动物饮水、摄食和健康状况，确认动物健康无病，方能使用。

饲料：广东省医学实验动物中心提供。

饮水：纯化水灌装聚乙烯塑料瓶，供动物自由饮用，每日冲洗饮水瓶并换水一次。

2、实验方法

(1)按Langendorf法制备离体心脏模型：豚鼠于实验前禁食过夜，自由饮水。按Langendorff法制备离体心脏，放入4℃Kreb′s液，轻轻挤出心脏内的残留血液，主动脉插管并结扎固定于心脏的灌流装置，按Langendorff法恒压、恒速灌流，灌流液为改良的Kreb′s液，灌流液配方(mmol/L)：NaCl 128；KCl 4.7；CaCl₂2.2；MgCl₂0.6；NaH₂PO₄0.8；NaHCO₃12～15；葡萄糖5.6；灌流液通氧过滤30min，温度(37±0.5)℃，pH 7.4，用蛙心夹夹住心尖，并与记录仪的张力换能器相连接，记录心肌收缩幅度和心率，用小烧杯收集冠脉流量，稳定15min开始实验，测定每分钟的冠脉流量，心率及收缩幅度3次，取其平均值作为给药前的正常值。

(2)对抗垂体后叶素致离体豚鼠心脏冠脉流量的减少：豚鼠50只，随机分5组，即空白溶剂、川芎嗪、HMC三剂量组按上述方法制备离体心脏，待心脏灌流稳定15min，由容量为20ml的灌注系统中按川芎嗪药物终浓度5mg/20mL及HMC药物终浓度分别为3、6、9mg/20mL加入药物，再恒速给垂体后叶素(终浓度1.85×10^-2U/mL)，给药后分别测定0，5，10，15min的冠脉流量、心率和心肌收缩幅度。

(3)对正常离体豚鼠心脏冠脉流量的影响：分组及方法同上(2)，用灌流液充氧，恒温，恒压灌流，待心脏各项指标稳定后，由容量为20ml的灌注系统中按川芎嗪药物终浓度5mg/20mL及HMC药物终浓度分别为3、6、9mg/20mL加入药物，记录给药20min内冠脉流量，心率和心肌收缩幅度的变化，取给药10min内各项指标增加或减少的最大值，用T检验比较组间差异显著性。

三、实验结果：

1、5-羟基-7-甲氧基色原酮(HMC)对抗垂体后叶素引起的冠脉流量、心率、心肌收缩力及正常离体豚鼠心脏冠脉流量的影响结果

HMC对抗垂体后叶素引起的冠脉流量、心率和心肌收缩力的影响结果参见表1-表3，从表1-表3中可知：5-羟基-7-甲氧基色原酮3mg、6mg和9mg剂量组均能对抗垂体后叶素所致的离体豚鼠冠脉流量减少、心率加快和心肌收缩力减弱；

HMC正常离体豚鼠心脏冠脉流量的影响结果参见表4，从表4中可知：对正常离体豚鼠心脏具有增加冠脉流量、减慢心率和增加心肌收缩力的作用，给药后冠脉流量增加中、高剂量组与川芎嗪组无显著性差异，收缩幅度低中、高剂量组与川芎嗪组有显著性差异，心率减慢中、高剂量组与川芎嗪组对比无显著性差异，说明5-羟基-7-甲氧基色原酮具有增加冠脉流量、减慢心率和增加心肌收缩力的作用。

表1 HMC对抗垂体后叶素引起的冠脉流量的减少结果表(x±s,n＝10)

*与空白组比较P<0.05，#与川芎嗪比较P<0.05。

表2 HMC对抗垂体后叶素引起的心率的影响结果表(x±s,n＝10)

*与空白组比较P<0.05，#与川芎嗪比较P<0.05。

表3 HMC对抗垂体后叶素减弱心肌收缩力的作用结果表(x±s,n＝10)

*与空白组比较P<0.05，#与川芎嗪比较P<0.05。

表4 HMC对正常离体琢鼠心脏的作用结果表(x±s,n＝10)

*与空白组比较P<0.05，#与川芎嗪比较P<0.05。

试验例2  5-羟基-7-甲氧基色原酮(HMC)对缺氧、心肌缺血的预防作用

的研究

一、实验目的

通过分析评价HMC对缺氧、心肌缺血的预防效果。

二、实验材料与方法

1、材料与动物

1.1 实验材料、供试品与对照品

供试品及对照品同试验例1，检测试剂盒购于南京建成生物工程研究所。

1.2 实验动物

动物体重和性别：健康SD大白鼠60只，雄性，体重(250±20)g，健康雄性小鼠体重(20±2)g，由广东省医学实验动物中心提供。

饲养条件、检疫过程、饲料、饮水同上。

2、实验方法

2.1 HMC对垂体后叶素诱发大鼠心肌缺血的保护作用

雄性大鼠随机分为六组：正常对照组，给予等容积的1％羧甲基纤维素钠(1％CMC)、模型组，给予等容积的1％羧甲基纤维素钠、川芎嗪组(20mg/kg)，HMC组(10mg/kg、20mg/kg、30mg/kg)，选取对垂体后叶素敏感的50只用于模型组，川芎嗪组和HMC组。各组均以1ml/100g灌胃(正常组及模型组以1％羧甲基纤维素钠灌胃)，灌胃7天，第7天给药1h后以20％乌拉坦(5mg/kg)麻醉。正常组舌下静脉注射生理盐水，其余5组注射垂体后叶素1U/kg，1h后腹主动脉取血，3000r/min离心15min，分离血清，按试剂盒说明书操作，测定血清中SOD、MDA、LDH含量。

2.2HMC对完全封闭小鼠存活时间的影响

HMC对完全密闭小鼠存活时间的影响:选取健康雄性小鼠50只，体重(20±2)g，随机分为5组：HMC高、中、低剂量组30mg/kg、20mg/kg、10mg/kg、阴性对照组(1％CMC溶液)、川芎嗪组(20mg/kg)作为阳性药组。灌胃给药后1h，将各组小鼠分别放入盛5g碱石灰的250ml广口瓶内，用凡士林涂抹瓶口，以呼吸停止为指标，观察小鼠因缺氧而死亡的时间。

三、实验结果

1、HMC对垂体后叶素诱发大鼠心肌缺血的保护作用结果

结果参见表5，从表5可知：模型组大鼠血清LDH同对照组比较差异显著(P<0.05)，HMC中、高剂量组同模型组比较，LDH均显著降低(P<0.05)。模型组SOD同正常对照组比较有显著差异(P<0.05)，HMC低、中、高剂量组SOD同模型组比较也有显著差异(P<0.05)。模型组MDA同正常对照组比较有显著差异(P0.05)，HMC低、中、高剂量组MDA同模型组比较也有显著差异。该结果表明：HMC有显著增强机体耐缺血作用，能明显增加清除超氧阴离子自由基的能力，减少脂质过氧化物的形成，维持机体氧化和抗氧化平衡，保证机体免受过氧化损伤，起到保护心肌细胞的作用。

表5 各组大鼠LDH、MDA、SOD的比较(x±s,n＝10)

*与模型组比较P<0.05，#与对照组比较P<0.05。

2、HMC对完全封闭小鼠存活时间的影响结果

结果参见表6，从表6可知：HMC中、高剂量给药组和川芎嗪组存活时间均长于对照组，有显著差异(P<0.05)，HMC低剂量组无差异(P>0.05)。说明HMC有显著增强机体耐缺氧作用。

表6 羟基-7-甲氧基色原酮(HMC)对小鼠耐缺氧的影响(x±s,n＝10)

*与对照组比较P<0.05。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (3)

1.5-羟基-7-甲氧基色原酮在制备治疗或预防心肌缺血的药物中的应用。

2.5-羟基-7-甲氧基色原酮在制备治疗或预防冠心病引起的心肌缺血的药物中的应用。

3.5-羟基-7-甲氧基色原酮在制备治疗或预防缺血性心脏病的药物中的应用。