CN104119575A

CN104119575A - 一种具有调节肿瘤微环境功效的党参和枸杞复合多糖及其制备方法和应用

Info

Publication number: CN104119575A
Application number: CN201410273710.1A
Authority: CN
Inventors: 马方励; 胡明华; 王培培; 梁明
Original assignee: Infinitus China Co Ltd
Current assignee: Infinitus China Co Ltd
Priority date: 2014-06-19
Filing date: 2014-06-19
Publication date: 2014-10-29

Abstract

本发明公开了一种具有调节肿瘤微环境功效的党参和枸杞复合多糖，其活性成分由党参多糖和枸杞多糖复配而成，所述党参多糖和枸杞多糖的质量份配比为党参多糖10~250、枸杞多糖5~90，该党参和枸杞复合多糖的纯度及活性高，具有调节肿瘤微环境的功效。还公开了上述党参和枸杞复合多糖的制备方法，该制备方法其工艺简单稳定高效，适合工业化生产，成本低，本发明还公开了上述党参和枸杞多糖在制备具有调节肿瘤微环境功效的保健食品中的应用。

Description

一种具有调节肿瘤微环境功效的党参和枸杞复合多糖及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于多糖技术领域，具体涉及一种具有调节肿瘤微环境功效的党参和枸杞复合多糖及其制备方法和应用。

背景技术

肿瘤复发和转移是困扰临床肿瘤治疗的具有普遍意义的难题，究其原因，在于现有治疗的目标仍然集中在肿瘤细胞本身，而忽略了其微环境的重要性。肿瘤微环境与肿瘤细胞之间是土壤与种子的关系，肿瘤恶变过程，就是肿瘤细胞与其微环境共进化的过程，其结果就是休眠肿瘤细胞的苏醒，进入快速增殖，并发生转移。因此，改善肿瘤微环境，维持肿瘤细胞的休眠状态，是目前研究的热点和重点。近年来的研究发现，多糖就具有显著地抗肿瘤活性并且对人体的毒副作用相对较小，对多糖的生物活性研究在医学领域已经成为国内外专家学者研究的热点。近年发现一些多糖及其复合物对多种疾病，如免疫紊乱、癌症、糖尿病、高血压、肝炎、血栓、肺炎、病毒等都具有显著疗效，并且参与细胞各种生命现象的调节并具有调节肿瘤微环境的作用。

党参为中国常用的传统补益药，古代以山西上党地区出产的党参为上品，具有补中益气，健脾益肺之功效。现代研究，党参含多种糖类、酚类、甾醇、挥发油、黄芩素葡萄糖甙、皂甙及微量生物碱，具有增强免疫力、扩张血管、降压、改善微循环、增强造血功能等作用。此外对化疗放疗引起的白细胞下降有提升作用。枸杞是名贵的药材和滋补品，中医很早就有“枸杞养生”的说法。《本草纲目》记载：“枸杞，补肾生精，养肝……明目安神，令人长寿。” 目前尚未有人以党参和枸杞为原料提取多糖并配制复合多糖，并用于调节肿瘤微环境及辅助抑制肿瘤保健食品方面的应用。

发明内容

本发明的第一个目的在于提供一种具有调节肿瘤微环境功效的党参和枸杞复合多糖，该党参和枸杞复合多糖以党参和枸杞为原料提取获得，获得的党参和枸杞复合多糖纯度及活性高，具有调节肿瘤微环境的功效。

本发明的第二个目的在于提供上述具有调节肿瘤微环境功效的党参和枸杞复合多糖的制备方法，该制备方法工艺简洁、高效稳定，适合工业化生产，成本低。

本发明的最后一个目的在于提供上述具有调节肿瘤微环境功效的党参和枸杞复合多糖在制备具有调节肿瘤微环境功效的保健食品中的应用。

本发明的第一个目的是通过以下技术方案来实现的：一种具有调节肿瘤微环境功效的党参和枸杞复合多糖，其活性成分由党参多糖和枸杞多糖复配而成，所述党参多糖和枸杞多糖的质量份配比为党参多糖10 ~250、枸杞多糖5~ 90。

作为本发明的一种优选的技术方案，本发明所述的党参多糖和枸杞多糖的质量份配比为党参多糖50~150、枸杞多糖20~ 80。

作为本发明的一种较佳的具体实施技术方案，本发明所述的党参多糖和枸杞多糖的质量份配比为党参多糖50、枸杞多糖50。

本发明所述的党参多糖或枸杞多糖优选通过以下方法制备获得：选取党参或枸杞为原料，采用沸水提取多次，合并提取液并浓缩得浓缩液a1，将浓缩液a1采用透析袋进行透析得透析液b1，将透析液b1浓缩后得浓缩液a2，在浓缩液a2中加入三氯乙酸水溶液进行蛋白沉淀后离心，取上清液进行中和、透析处理得透析液b2，将透析液b2浓缩得浓缩液a3，在浓缩液a3中加入乙醇水溶液进行醇沉处理，所得沉淀物即为党参多糖或枸杞多糖。

在上述党参多糖或枸杞多糖的制备过程中：采用沸水提取时，共提取1~5次，每次提取时沸水的用量为党参或枸杞原料总质量的10~20倍，每次提取时间为4~5h。

在上述党参多糖或枸杞多糖的制备过程中：所述三氯乙酸水溶液中三氯乙酸的体积百分含量为15~35%，其用量与浓缩液a2的体积相同，进行蛋白沉淀时间为3~4h。

在上述党参多糖或枸杞多糖的制备过程中：所述乙醇水溶液中乙醇的体积百分含量为70~95%，乙醇水溶液的用量为浓缩液a3总体积的2~4倍。

优选将透析液b1浓缩至原体积的1/10左右得浓缩液a2，将透析液b2浓缩至原体积的1/10左右得浓缩液a3。

透析袋的截留分子量优选为3500 Da。

本发明的第二个目的是通过以下技术方案来实现的：上述具有调节肿瘤微环境功效的党参和枸杞复合多糖的制备方法，包括以下步骤：

（1）选取党参或枸杞原料，采用沸水提取多次，合并提取液并浓缩得浓缩液a1；

（2）将浓缩液a1采用透析袋进行透析得透析液b1，将透析液b1浓缩后得浓缩液a2；

（3）在浓缩液a2中加入三氯乙酸水溶液进行蛋白沉淀后离心，取上清液进行中和、透析处理得透析液b2，将透析液b2浓缩得浓缩液a3；

（4）在浓缩液a3中加入乙醇水溶液进行醇沉处理，所得沉淀物即为党参多糖或枸杞多糖；

（5）将党参多糖和枸杞多糖按照上述计量比混匀，即制备获得党参和枸杞复合多糖。

在该党参和枸杞复合多糖的制备方法中：

步骤（1）中采用沸水提取时，共提取1~5次，每次提取时沸水的用量为党参或枸杞原料总质量的10~20倍，每次提取时间为4~5h；步骤（3）中所述三氯乙酸水溶液中三氯乙酸的体积百分含量为15~35%，其用量与浓缩液a2的体积相同，进行蛋白沉淀时间为3~4h；步骤（4）中所述乙醇水溶液中乙醇的体积百分含量为70~95%，乙醇水溶液的用量为浓缩液a3总体积的2~4倍。

步骤（2）优选将透析液b1浓缩至原体积的1/10左右得浓缩液a2，步骤（3）中优选将透析液b2浓缩至原体积的1/10左右得浓缩液a3。

步骤（2）和步骤（3）中透析袋的截留分子量优选为3500 Da。

本发明的最后一个目的是通过以下技术方案来实现的：上述具有调节肿瘤微环境功效的党参和枸杞复合多糖在制备具有调节肿瘤微环境功效的保健食品中的应用。

本发明所述保健食品的剂型可以为胶囊型、片剂、粉剂、颗粒剂或口服液等。

与现有技术相比，本发明具有如下优点：

（1）本发明中的党参和枸杞复合多糖，可以通过抑制肿瘤新生血管生成、免疫抑制及免疫负调控等多途径调节肿瘤微环境，其具有良好的抗肿瘤活性，其可以直接口服，也可以制成药剂学上所说的多种剂型，如胶囊型、片剂、粉剂、颗粒剂或口服液等，食用后具有调节肿瘤微环境以及辅助抑制肿瘤的功效；

（2）本发明中的党参和枸杞复合多糖以富含活性多糖的中草药为主料，利用各种多糖成分合理组合、配合共用，通过多种途径调节肿瘤微环境以及辅助抑制肿瘤，对亚健康保健具有良好的效果；

（3）本发明中的党参和枸杞复合多糖的制备方法，其工艺简单稳定高效，适合工业化生产，成本低。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步说明，但不以任何形式限制本发明。

以下实施例中采用的各原料，如无特殊说明，均为市售产品。

第一部分党参和枸杞复合多糖及其制备方法

实施例1

本实施例中的党参和枸杞复合多糖，其活性成分由党参多糖和枸杞多糖复配而成，其中党参多糖和枸杞多糖的质量份配比为党参多糖10、枸杞多糖90。

上述党参和枸杞复合多糖通过以下方法制备获得：

（1）制备党参多糖：选取党参药材3kg，加入水30L，加热煮沸提取，共提取3次，每次提取5小时，合并提取液并浓缩至约5L得浓缩液a1，将浓缩液a1采用透析袋（截留分子量为3500 Da，同下）和对流水进行透析大约2天后得透析液b1，将透析液b1浓缩至原体积的1/10左右得浓缩液a2，下同，在浓缩液a2中加入等体积的三氯乙酸水溶液进行蛋白沉淀后离心，其中三氯乙酸水溶液中三氯乙酸的体积百分含量为30%，温度为4℃，去蛋白时间约为3~4h，除去蛋白沉淀取上清液采用氢氧化钠水溶液（其中氢氧化钠的质量百分含量约为10%）中和至中性得中性上清液，将中性上清液进行透析大约2天后得透析液b2（截留分子量为3500 Da，同下），将透析液b2浓缩至大约3L得浓缩液a3，在浓缩液a3中边搅拌边加入乙醇水溶液进行醇沉处理，其中乙醇水溶液中乙醇的体积百分含量为85%，用量约为浓缩液a3的3倍，静置过夜，离心收集沉淀，沉淀分别用无水乙醇脱水1次，丙酮脱水2次，40℃真空干燥，所得沉淀物即为党参多糖；

（2）制备枸杞多糖，枸杞多糖的制备方法同党参多糖；

（3）将党参多糖和枸杞多糖按照党参多糖10、枸杞多糖90的质量份配比混匀，即制备获得党参和枸杞复合多糖。

实施例2

本实施例中的党参和枸杞复合多糖，其活性成分由党参多糖和枸杞多糖复配而成，其中党参多糖和枸杞多糖的质量份配比为党参多糖250、枸杞多糖5。

上述党参和枸杞复合多糖通过以下方法制备获得：

（1）制备党参多糖：选取党参药材3kg，加入水60L，加热煮沸提取，共提取3次，每次提取4小时，合并提取液并浓缩至约5L得浓缩液a1，将浓缩液a1采用透析袋和对流水进行透析大约2天后得透析液b1，将透析液b1浓缩后得浓缩液a2，在浓缩液a2中加入等体积的三氯乙酸水溶液进行蛋白沉淀后离心，其中三氯乙酸水溶液中三氯乙酸的体积百分含量为15%，温度为4℃，去蛋白时间约为3~4h，除去蛋白沉淀取上清液采用氢氧化钠水溶液（其中氢氧化钠的质量百分含量约为10%）中和至中性得中性上清液，将中性上清液进行透析大约2天后得透析液b2，将透析液b2浓缩至大约3L得浓缩液a3，在浓缩液a3中边搅拌边加入乙醇水溶液进行醇沉处理，其中乙醇水溶液中乙醇的体积百分含量为70%，用量约为浓缩液a3的3倍，静置过夜，离心收集沉淀，沉淀分别用无水乙醇脱水1次，丙酮脱水2次，40℃真空干燥，所得沉淀物即为党参多糖；

（2）制备枸杞多糖，枸杞多糖的制备方法同党参多糖；

（3）将党参多糖和枸杞多糖按照党参多糖250、枸杞多糖5的质量份配比混匀，即制备获得党参和枸杞复合多糖。

实施例3

本实施例中的党参和枸杞复合多糖，由党参多糖和枸杞多糖复配而成，其中党参多糖和枸杞多糖的质量份配比为党参多糖50、枸杞多糖80。

上述党参和枸杞复合多糖通过以下方法制备获得：

（1）制备党参多糖：选取党参药材3kg，加入水30L，加热煮沸提取，共提取3次，每次提取5小时，合并提取液并浓缩至约5L得浓缩液a1，将浓缩液a1采用透析袋和对流水进行透析大约2天后得透析液b1，将透析液b1浓缩后得浓缩液a2，在浓缩液a2中加入等体积的三氯乙酸水溶液进行蛋白沉淀后离心，其中三氯乙酸水溶液中三氯乙酸的体积百分含量为35%，温度为4℃，去蛋白时间约为3~4h，除去蛋白沉淀取上清液采用氢氧化钠水溶液（其中氢氧化钠的质量百分含量约为10%）中和至中性得中性上清液，将中性上清液进行透析大约2天后得透析液b2，将透析液b2浓缩至大约3L得浓缩液a3，在浓缩液a3中边搅拌边加入乙醇水溶液进行醇沉处理，其中乙醇水溶液中乙醇的体积百分含量为80%，用量约为浓缩液a3的3倍，静置过夜，离心收集沉淀，沉淀分别用无水乙醇脱水1次，丙酮脱水2次，40℃真空干燥，所得沉淀物即为党参多糖；

（2）制备枸杞多糖，枸杞多糖的制备方法同党参多糖；

（3）将党参多糖和枸杞多糖按照党参多糖50、枸杞多糖80的质量份配比混匀，即制备获得党参和枸杞复合多糖。

实施例4

本实施例中的党参和枸杞复合多糖，其活性成分由党参多糖和枸杞多糖复配而成，其中党参多糖和枸杞多糖的质量份配比为党参多糖150、枸杞多糖20。

上述党参和枸杞复合多糖通过以下方法制备获得：

（1）制备党参多糖：选取党参药材3kg，加入水60L，加热煮沸提取，共提取5次，每次提取4小时，合并提取液并浓缩至约5L得浓缩液a1，将浓缩液a1采用透析袋）和对流水进行透析大约2天后得透析液b1，将透析液b1浓缩后得浓缩液a2，在浓缩液a2中加入等体积的三氯乙酸水溶液进行蛋白沉淀后离心，其中三氯乙酸水溶液中三氯乙酸的体积百分含量为20%，温度为4℃，去蛋白时间约为3~4h，除去蛋白沉淀取上清液采用氢氧化钠水溶液（其中氢氧化钠的质量百分含量约为10%）中和至中性得中性上清液，将中性上清液进行透析大约2天后得透析液b2，将透析液b2浓缩至大约3L得浓缩液a3，在浓缩液a3中边搅拌边加入乙醇水溶液进行醇沉处理，其中乙醇水溶液中乙醇的体积百分含量为80%，用量约为浓缩液a3的4倍，静置过夜，离心收集沉淀，沉淀分别用无水乙醇脱水1次，丙酮脱水2次，40℃真空干燥，所得沉淀物即为党参多糖；

（2）制备枸杞多糖，枸杞多糖的制备方法同党参多糖；

（3）将党参多糖和枸杞多糖按照党参多糖150、枸杞多糖20的质量份配比混匀，即制备获得党参和枸杞复合多糖。

实施例5

本实施例中的党参和枸杞复合多糖，其活性成分由党参多糖和枸杞多糖复配而成，其中党参多糖和枸杞多糖的质量份比为党参多糖50、枸杞多糖25。

上述党参和枸杞复合多糖通过以下方法制备获得：

（1）制备党参多糖：选取党参药材3kg，加入水40L，加热煮沸提取，共提取5次，每次提取5小时，合并提取液并浓缩至约5L得浓缩液a1，将浓缩液a1采用透析袋和对流水进行透析大约2天后得透析液b1，将透析液b1浓缩后得浓缩液a2，在浓缩液a2中加入等体积的三氯乙酸水溶液进行蛋白沉淀后离心，其中三氯乙酸水溶液中三氯乙酸的体积百分含量为35%，温度为4℃，去蛋白时间约为3~4h，除去蛋白沉淀取上清液采用氢氧化钠水溶液（其中氢氧化钠的质量百分含量约为10%）中和至中性得中性上清液，将中性上清液进行透析大约2天后得透析液b2，将透析液b2浓缩至大约3L得浓缩液a3，在浓缩液a3中边搅拌边加入乙醇水溶液进行醇沉处理，其中乙醇水溶液中乙醇的体积百分含量为95%，用量约为浓缩液a3的3倍，静置过夜，离心收集沉淀，沉淀分别用无水乙醇脱水1次，丙酮脱水2次，40℃真空干燥，所得沉淀物即为党参多糖；

（2）制备枸杞多糖，枸杞多糖的制备方法同党参多糖；

（3）将党参多糖和枸杞多糖按照党参多糖50、枸杞多糖25的质量份配比混匀，即制备获得党参和枸杞复合多糖。

实施例6

本实施例中的党参和枸杞复合多糖，其活性成分由党参多糖和枸杞多糖复配而成，其中党参多糖和枸杞多糖的质量份配比为党参多糖100、枸杞多糖50；

上述党参和枸杞复合多糖通过以下方法制备获得：

（1）制备党参多糖：选取党参药材3kg，加入水50L，加热煮沸提取，共提取5次，每次提取4小时，合并提取液并浓缩至约5L得浓缩液a1，将浓缩液a1采用透析袋和对流水进行透析大约2天后得透析液b1，将透析液b1浓缩后得浓缩液a2，在浓缩液a2中加入等体积的三氯乙酸水溶液进行蛋白沉淀后离心，其中三氯乙酸水溶液中三氯乙酸的体积百分含量为20%，温度为4℃，去蛋白时间约为3~4h，除去蛋白沉淀取上清液采用氢氧化钠水溶液（其中氢氧化钠的质量百分含量约为10%）中和至中性得中性上清液，将中性上清液进行透析大约2天后得透析液b2，将透析液b2浓缩至大约3L得浓缩液a3，在浓缩液a3中边搅拌边加入乙醇水溶液进行醇沉处理，其中乙醇水溶液中乙醇的体积百分含量为80%，用量约为浓缩液a3的3倍，静置过夜，离心收集沉淀，沉淀分别用无水乙醇脱水1次，丙酮脱水2次，40℃真空干燥，所得沉淀物即为党参多糖。

（2）制备枸杞多糖，枸杞多糖的制备方法同党参多糖；

（3）将党参多糖和枸杞多糖按照党参多糖100、枸杞多糖50的质量份配比混匀，即制备获得党参和枸杞复合多糖。

实施例7

党参多糖和枸杞多糖的制备方法同实施例1，分别取党参多糖 5g、枸杞多糖5 g，以（1:1）比例混合均匀，得复合多糖组分P1。

实施例8

党参多糖和枸杞多糖的制备方法同实施例1，分别取党参多糖 1g、枸杞多糖5 g，以（1:5）比例混合均匀，得复合多糖组分P2。

实施例9

党参多糖和枸杞多糖的制备方法同实施例1，分别取党参多糖 10g、枸杞多糖5 g，以（2:1）比例混合均匀，得复合多糖组分P3。

实施例10

以上述实施例1-9中提供的复合多糖为主要功效成分制备保健食品，通过常规工艺，可以制成药剂学上所说的多种剂型，如胶囊剂、片剂、粉剂、颗粒或口服液等。

第二部分多糖及复合多糖辅助抑制肿瘤活性实验

实施例11复合多糖可抑制BMP2诱导的带有BRE报告基因的荧光素酶的活性

C2C12细胞株购自中科院细胞库，C2C12- pGF1-BRE细胞株由中国科学院上海药物研究所丁侃实验室构建，保存于液氮中。C2C12- pGF1-BRE细胞用含10 % Gibco胎牛血清DMEM 培养基培养，置于37℃饱和湿度、含5% CO₂的恒温箱中培养，以1×10⁴细胞/孔的密度接种于96孔板内，每孔100 μL 。贴壁24 h后吸去60 μL培养基，加配置好相应浓度的多糖样品（P1、P2、P3）50 μL，终浓度分别为0.5 mg/mL、0.1 mg/mL、0.02 mg/mL，10 μLBMP2调整至终浓度200 ng/mL。同时设空白组和BMP2组对照。给药16 h后吸去培养基，加20 μL Reporter Lysis 1X Buffer，将溶解的细胞裂解液20 μL转移至白板，加入40 μL luciferase底物，于3分钟内读板，读取RLU值。采用SPSS 统计软件进行统计学处理。数据均以均数±标准差(.x ±s) 表示，两组间比较采用独立样本t 检验，多组间比较采用单因素方差分析。

实施例12 复合多糖对NF-кB报告基因的荧光素酶的活性

THP-1细胞株购自中科院细胞库，THP-1/pGF1-NF-кB细胞株由中国科学院上海药物研究所丁侃实验室构建，保存于液氮中。THP-1/pGF1-NF-кB细胞用含10%胎牛血清RPMI-1640培养基培养。置于37 ℃饱和湿度、含5% CO₂的恒温箱中培养，以5×10⁴细胞/孔的密度接种于96孔板内，每孔50 μL容积。加入受试样品（P1、P2、P3）50 μL，终浓度分别为0.5 mg/mL、0.1 mg/mL、0.02 mg/mL，同时设立空白组和LPS对照组。加入LPS溶液10 μL，终浓度为1 μg/mL，置于37 ℃饱和湿度、含5% CO₂的恒温箱中培养过夜。培养过夜后，每空加入100 μLBright-Glo^TM Luciferase Assay System底物，于酶标仪读板，读取RLU值。

采用SPSS 统计软件进行统计学处理。数据均以均数±标准差(.x ±s) 表示，两组间比较采用独立样本t 检验，多组间比较采用单因素方差分析。

实施例13复合多糖可抑制前列腺癌成纤维细胞的生长

前列腺癌相关成纤维细胞（CAF）由南开大学生命科学院惠赠。细胞接种于96孔板，细胞密度为1×10⁴/孔。将多糖复合物（P1、P2、P3）溶于DMEM+/+培养基中，使其浓度为1.0 mg/mL。培养8天，采用CCK检测试剂盒（北京庄盟生物公司）测定细胞生长状态。每种多糖样本量为3。

统计学分析计量数据多组间比较采用方差分析，首先对数据进行方差齐性检验，计算Levene统计值，若方差齐，则进行组间多重比较，方法为LSD和Dennett，若方差不齐，则采用校正方法Dennett。统计软件为SPSS17.0，显著性水平为α=0.05。

实施例14复合多糖可抑制结肠癌成纤维细胞的生长

结肠癌相关成纤维细胞（CAF）由南开大学生命科学院惠赠。细胞接种于96孔板，细胞密度为1×10⁴/孔。将多糖复合物（P1、P2、P3）溶于DMEM+/+培养基中，使其浓度为1.0 mg/mL。培养8天，采用CCK检测试剂盒（北京庄盟生物公司）测定细胞生长状态。每种多糖样本量为3。

将党参多糖及枸杞多糖按照不同比例配制成复合多糖，该复合多糖调节肿瘤微环境生物活性测定结果见表1、表2和表3。结果表明，将党参多糖与枸杞多糖按照3种不同比例配制成的复合多糖同时具有抑制血管生成、免疫抑制及免疫负调节生物活性。党参多糖及枸杞多糖单用虽有一定生物活性，但两种多糖合用，进行有效优化，从而得出最佳比例并进行组合搭配，当党参多糖及枸杞多糖的质量比为1:1，抗前列腺癌及抗结肠癌肿瘤活性效果相对较好，通过配伍发挥了药物间的相辅相成作用，可明显提高疗效。

综上实验证明该多糖复合物可通过抑制肿瘤新生血管生成、免疫抑制及免疫负调控等多途径发挥潜在的抗肿瘤活性。

表1 3种不同配比复合多糖可抑制BMP2诱导的带有BRE报告基因的荧光素酶的活性

表2. 3种不同配比复合多糖能抑制带有NF-кB报告基因的荧光素酶的活性

表3. 3种不同配比复合多糖能抑制前列腺癌成纤维细胞的生长

表4. 3种不同配比复合多糖能抑制结肠癌成纤维细胞的生长

上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围。

Claims

1.一种具有调节肿瘤微环境功效的党参和枸杞复合多糖，其特征是：其活性成分由党参多糖和枸杞多糖复配而成，所述党参多糖和枸杞多糖的质量份配比为党参多糖10~250 、枸杞多糖5~ 90。

2.根据权利要求1所述的具有调节肿瘤微环境功效的党参和枸杞复合多糖，其特征是：所述的党参多糖和枸杞多糖的质量份配比为党参多糖50~150、枸杞多糖20~ 80。

3.根据权利要求2所述的具有调节肿瘤微环境功效的党参和枸杞复合多糖，其特征是：所述的党参多糖和枸杞多糖的质量份配比为党参多糖50、枸杞多糖50。

4.根据权利要求1、2或3所述的具有调节肿瘤微环境功效的党参和枸杞复合多糖，其特征是：所述的党参多糖或枸杞多糖通过以下方法制备获得：选取党参或枸杞为原料，采用沸水提取多次，合并提取液并浓缩得浓缩液a1，将浓缩液a1采用透析袋进行透析得透析液b1，将透析液b1浓缩后得浓缩液a2，在浓缩液a2中加入三氯乙酸水溶液进行蛋白沉淀后离心，取上清液进行中和、透析处理得透析液b2，将透析液b2浓缩得浓缩液a3，在浓缩液a3中加入乙醇水溶液进行醇沉处理，所得沉淀物经干燥处理即得党参多糖或枸杞多糖。

5.根据权利要求4所述的具有调节肿瘤微环境功效的党参和枸杞复合多糖，其特征是：采用沸水提取时，共提取1~5次，每次提取时沸水的用量为党参或枸杞原料总质量的10~20倍，每次提取时间为4~5h。

6.根据权利要求4所述的具有调节肿瘤微环境功效的党参和枸杞复合多糖，其特征是：所述三氯乙酸水溶液中三氯乙酸的体积百分含量为15~35%，其用量与浓缩液a2的体积相同，进行蛋白沉淀时间为3~4h。

7.根据权利要求4所述的具有调节肿瘤微环境功效的党参和枸杞复合多糖，其特征是：所述乙醇水溶液中乙醇的体积百分含量为70~95%，乙醇水溶液的用量为浓缩液a3总体积的2~4倍。

8.权利要求1、2或3所述的具有调节肿瘤微环境功效的党参和枸杞复合多糖的制备方法，其特征是包括以下步骤：

9.权利要求8所述的具有调节肿瘤微环境功效的党参和枸杞复合多糖的制备方法，其特征是：步骤（1）中采用沸水提取时，共提取1~5次，每次提取时沸水的用量为党参或枸杞原料总质量的10~20倍，每次提取时间为4~5h；步骤（3）中所述三氯乙酸水溶液中三氯乙酸的体积百分含量为15~35%，其用量与浓缩液a2的体积相同，进行蛋白沉淀时间为3~4h；步骤（4）中所述乙醇水溶液中乙醇的体积百分含量为70~95%，乙醇水溶液的用量为浓缩液a3总体积的2~4倍。

10.权利要求1、2或3所述的具有调节肿瘤微环境功效的党参和枸杞复合多糖在制备具有调节肿瘤微环境功效的保健食品中的应用。