CN104069173B - 治疗肝脏疾病的药物组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗肝脏疾病的药物组合物，是由红参8～10份、红蚂蚁8～12份、水蛭8～12份、万年蒿10～14份、苏子油12～16份、松伞蘑22～28份、鸭肉220～280份按重量份经过乙醇提取、水提取、高温高压煮制、烘干、粉碎过程而制成。适用于治疗酒精肝、脂肪肝、药物性和化学性肝损伤、肝腹水、肝硬化等肝脏疾病的药物组合物,该药物无毒性、无副作用、易于吸收。本发明还公开了一种上述药物组合物的制备方法。

Description

治疗肝脏疾病的药物组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及中药制剂领域，具体是指一种治疗肝脏疾病的药物组合物及其制备方法。

背景技术

肝病是我国的常见病多发病，在我国由于病毒性肝炎的广泛传播、长期大量饮酒的现象并不少见，致使肝硬化成为常见疾病和主要死亡病因之一。目前，我国大约有6000多万肝炎患者，其中200多万肝炎患者发展为肝硬化，全国每年约有十多万人死于肝硬化疾病，近年来其发病率和死亡率呈上升趋势。

肝硬化是由各种病因所致的肝脏慢性、进行性的弥漫性改变，使肝脏受损并逐渐发生变形、质地变硬的慢性肝病的后期阶段，是长期肝细胞坏死继发肝硬化的结果。肝硬化发病源以病毒性肝炎所致的肝硬化最常见，还有酒精性、脂肪性、寄生虫性、中毒性、胆汁性、循环障碍（心源性）性、营养不良性、代谢性及隐源性等诸多病因引起肝硬化。肝硬化的产生机制是肝细胞坏死→炎症→再生→纤维化→肝硬化。其临床表现为早期（代偿期）肝硬化和晚期（失代偿期）肝硬化。早期肝硬化患者可能无任何不适的感觉，或仅有轻微的不适感，因此患者容易忽视，而晚期肝硬化患者具有典型的临床表现，表现为肝功能损害、门脉高压、肝脏的变化及出现并发症，如消化道出血、肝性脑病、继发感染、功能性肾衰（肝肾综合征）、原发性肝癌等.肝硬化在国内外医疗界一直是个治疗难题，目前尚无特效药，主要是补充维生素、保护肝细胞及中药治疗。一个由法国专家蒂埃里·包纳教授领导的国际小组研究发现，由丙型肝炎引起的肝硬化并非绝对不可逆转，通过坚持合理的药物治疗，患者肝脏的纤维化部分均能有所缩小。据悉，这一研究小组还将对由乙型肝炎以及自身免疫功能缺陷引起的肝硬化进行治疗研究，以确定这些因素引起的肝硬化是否也可逆转。然而，对由于酗酒引起的肝硬化，专家们认为，由于酗酒者很难完全戒酒，因此，上述治疗方法对由此引起的肝硬化效果并不明显。祖国医学对慢性肝病的诊治有独特的见解，中西医结合治疗，往往能收到较好的效果。美国功勋教授汉斯·帕伯博士早在二十年前就曾预言：根治肝病的希望在中医药上。这并非言过其实，因为从治疗理论上，中医提出的“肝脾肾同治”观点已经解决了这一问题。自20世纪70年代中期开始，中医药防治肝硬化及抗肝纤维化的研究吸引了国内外学者。从中药方剂的临床治疗研究到单味中药及其提取物抗纤维化机制的研究都取得了显著成绩。已发现中医药在抗肝纤维化治疗中具有明显优势。中药采取辨病与辨证相结合、多途径、多层次整体调控，治疗肝纤维化取得了不少进展。但是目前在治疗肝硬化临床方面还不能令人满意，因此肝硬化难治性已经成为医学界普遍关注的问题。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有技术之不足而提供一种适用于治疗酒精肝、脂肪肝、药物性和化学性肝损伤、肝腹水、肝硬化等肝脏疾病的药物组合物,该药物无毒性、无副作用、易于吸收。

本发明的另一目的是提供一种上述药物组合物的制备方法。

为实现上述目的而提供的技术方案为：

一种治疗肝脏疾病的药物组合物，是由下列原料按重量份，红参、红蚂蚁、万年蒿经过乙醇提取，松伞蘑经过水提取，水蛭、鸭肉和苏子油经高温高压煮制，混合后经烘干、粉碎过程而制成：

红参8～10份 红蚂蚁8～12份 水蛭8～12份 万年蒿10～14份

苏子油12～16份 松伞蘑22～28份 鸭肉220～280份。

所述的治疗肝脏疾病的药物组合物，其原料优选以下重量份而制成：

红参9份 红蚂蚁9份 水蛭11份 万年蒿13份

苏子油15份 松伞蘑25份 鸭肉250份。

一种如上所述的治疗肝脏疾病的药物组合物的制备方法，包括以下步骤：

a、红参、红蚂蚁、万年蒿用乙醇回流提取，制得浓缩提取液，备用；

b、松伞蘑采用水回流提取，制得松伞蘑浓缩提取液，备用；

c、苏子油、水蛭、鸭肉混合用高压锅高温煮0.5小时至2小时；

d、将上述3个步骤所得物混合用100度高温烘干0.5小时后，再经65度烘干48小时，最后烘干后粉碎。

本发明中的红参Panax ginseng C.A.Mey：甘、微苦、微温。归心、肺、脾经。大补元气，补脾益肺，生津，安神。全面增强机体的免疫功能，活性成份是皂甙和多糖。人参皂甙能防止血液凝固，促进纤维蛋白溶解，降低血液的流动性，改善组织灌溉。可增强肝脏解毒功能，抑制肝中RNA及糖含量的降低。所含的齐墩果酸对急性肝炎有较好的退黄、降低谷丙转氨酶的作用，人参多糖对慢性肝炎患者有一定降低循环免疫复合物，恢复T淋巴细胞功能的作用。

水蛭Hirudo nipponica Whitman：性味归经咸苦，平，有毒。肝、膀胱经。主治月经闭止、症瘕腹痛、蓄血、损伤淤血作痛、痈肿丹毒等症。1、抗凝血作用：水蛭水提取物0.45g/kg灌胃后4h及连续灌胃7天，对ADP诱导大鼠血小板聚集均有显著地抑制作用，且能降低全血比粘度盒血浆比粘度，缩短红细胞电泳时间；体外法试验，水蛭水提取物200mg/ml、100mg/ml及50mg/ml对健康人血小板聚集也有显著地抑制作用。水蛭素是凝血酶抑制剂，每毫克水蛭素含10~400抗凝血酶单位的活性；水蛭素对细胞内毒素引起的大鼠血栓形成有预防作用，并能减少大鼠的死亡率；水蛭素还能对抗凝血酶所致的离体蛙心收缩力增强作用。2.改善微循环：水蛭注射液2g/kg静脉注射，能促进实验性家兔急性脑出血的血肿吸收，减轻脑组织周围炎症反应及水肿，缓解颅内压升高，改善局部循环，有利于神经功能的恢复；对兔耳局部的实验性血肿也有促进吸收作用。

红蚂蚁Tetramorium sp：补肾益精；通经活络；解毒消肿。具有明显的抗炎、平喘、镇静、护肝、阵痛作用。尤其是对风湿病，类风湿关节炎，缺锌引起的婴儿发育不良，中老年过早衰老症具有良好效果。并具有一定的抗癌作用。

万年蒿Artemisia sacrorum Ledeb：苦、辛，平。肝、肾二经。功能主治：清热解毒，凉血止痛，利湿退黄。用于肝炎，阑尾炎，小儿惊风，阴虚潮热；外用治创伤初学。

松伞蘑（血红铆钉菇）[Chroogomphis rutillus (schaeff.:Fr.)O.K.Miller]：别名：蘑菇蕈。味甘，性平。归经：入胃、肝经。功能：健胃，消食，平肝。食欲不振、消化不良以及慢性肝炎有治疗作用。松伞蘑的有效成分蘑菇多糖等多糖类成分可增强T淋巴细胞功能，从而提高机体抵御各种疾病的免疫功能，能抑制癌细胞的生长含有的毒蛋白，能有效地阻止癌细胞的蛋白合成。还可以通便排毒，对肝性脑病（即肝性昏迷常因肠部的毒性代谢产物未被肝解毒和清除，进入血脑屏障而引起大脑功能紊乱）有治疗作用。其含有丰富的蛋白质、氨基酸、糖类、矿物质和维生素类营养物质。蘑菇的氨基酸组成比较全面，谷物中一般所缺乏的赖氨酸，在蘑菇中含量极其丰富。亮氨酸的含量也很丰富，这对促进记忆，增进智力有益，尤其适合婴幼儿和老年人食用。松伞蘑含有蘑菇多糖、β-葡聚糖、维生素B2、维生素C、维生素E、维生素D、膳食纤维和硒等多种具有抗癌作用的物质。蘑菇多糖还具有诱发干扰素，提高NK细胞活性以及抗辐射等功效。

鸭肉 Anas Platyrhynchus var．domestica：甘、微咸，性偏凉，入脾、胃、肺及肾经，具有“滋五脏之阴，清虚劳之热，补血行水，养胃生津，止咳息惊”等功效。鸭肉含蛋白质，脂肪，碳水化合物，各种维生素及矿物质等，人们经常食用除能补充人体必需的多种营养成分外，还可祛除暑热，保健强身，对患有痨热骨蒸，食少便干，水肿，盗汗，咽干口渴，以及男子遗精，女子经血少，癌病人身体虚弱，低烧等病症者尤为适宜。

苏子油（紫苏籽油）Fructus Perillae: 苏子油中含α-亚麻酸达60.2%，亚油酸达12.6%，是目前发现的α-亚麻酸含量最高的油料作物之一，还含有10多种人体必须氨基酸。

本发明药物属朝药制剂，对药物性肝损伤、病毒性肝炎、酒精中毒、营养障碍、免疫紊乱等引起的肝硬化有治疗作用。鸭肉、松伞蘑含有多种维生素和多种矿物质、微量元素，对治疗酒精性脂肪肝有较好的作用。对由免疫紊乱的自身免疫系统疾病引起的肝炎肝硬化，鸭肉中的卵磷脂，是强有力的乳化剂，能使胆固醇和脂肪颗粒变得极细，顺利通过血管壁而被细胞充分利用，减少血液中的胆固醇。且卵磷脂消化后可释放出胆碱，进入血液中进而合成已酰胆碱，是神经递质的主要物质，可提高脑功能。蘑菇多糖能增强人体的免疫功能，对癌的生成有抑制作用。同时松伞蘑、鸭肉营养丰富，对治疗由营养障碍引起的肝硬化有效。人参与鸭肉、松伞蘑共用，全面增强机体的免疫功能，可增强肝脏解毒功能，抑制肝中RNA及糖含量的降低，对治疗由酒精中毒引起的肝硬化和肝性脑病（即肝性昏迷因肠部的毒性代谢产物未被肝解毒和清除，进入血脑屏障而引起大脑功能紊乱）有治疗作用。人参所含对慢性肝炎患者有一定降低循环免疫复合物，恢复T淋巴细胞功能的作用并能增强免疫系统中单核巨噬细胞的吞噬功能，对部分免疫应答也呈双向调节作用。由此可治疗由免疫系统疾病引起的肝炎肝硬化。万年蒿有抗炎作用，对肝炎有一定治疗作用。水蛭与红蚂蚁同用可活血行气，可疏肝解郁。水蛭素抗血凝作用，增强红蚂蚁的活血作用。临床上将肝硬化分为代偿期和失代偿期，失代偿期有门静脉高压症的临床表现，并发症常为上消化道出血。苏子油有降低血压的作用。鸭肉能降低胆固醇的效用有防治动脉硬化的作用，同时鸭肉有润肠作用，辅佐人参排毒。万年蒿有造血作用和降血脂与保肝、抗脂肪肝作用，并对肝脏变性和坏死有明显减轻的作用，具有抗肝损伤的作用。苏子油所含的亚麻酸和亚油酸有调节人体生理机能的作用。此方药物性多甘，甘能补、能缓、能和、既有补益、调和药性、和中的作用。部分药物苦辛，苦可泄，增强排毒之功，辛可行气，活血，与疏肝解郁一致，多入肝经，主治肝脏疾病。

本发明药功效可清除脏器淤血，增强肝主质血流和微循环；增强机体免疫力，提高肝细胞膜对毒素的抵制作用，抑制病毒复制；提高血管壁弹性，降低渗透性；补充人体所需氨基酸、不饱和脂肪酸、维生素、微量元素、植物性多糖及其它生物活性物质的不足；分解和吸收纤维蛋白，抑制肝结缔组织纤维化；修复肝细胞，软化肝脏等，并具有显著的治疗功效。本发明无毒性、无副作用、易于吸收。

附图说明

图1为本发明所述药物组合物对硫代乙酰胺致大鼠肝纤维化的作用――病理组织切片, α－平滑肌免疫组化染色图。

图2为本发明所述药物组合物对胆道结扎(BDL)大鼠致肝纤维化的作用――病理组织切片, α－平滑肌免疫组化染色图。

图3为本发明所述药物组合物对乙醇诱导的小鼠急性肝损伤的影响――SZGK对ethanol诱导的小鼠血清中ALT酶的活性具有明显的抑制作用。

图4为本发明所述药物组合物对乙醇诱导的小鼠急性肝损伤的影响――SZGK对ethanol诱导的小鼠血清中AST酶的活性具有明显的抑制作用。

图5为本发明所述药物组合物对乙醇所致小鼠急性肝损伤小鼠血清TNF-α结果的影响。

图6为本发明所述药物组合物对乙醇所致小鼠急性肝损伤小鼠血清TG结果的影响。

图7为本发明动物实验病理组织学观察中通过HE染色结果观察图。

具体实施方式

实施例1

一种治疗肝脏疾病的药物组合物，是由下列原料按重量份配比：

红参9份 红蚂蚁9份 水蛭11份 万年蒿13份

苏子油15份 松伞蘑25份 鸭肉250份。

上述治疗肝脏疾病的药物组合物的制备方法，包括以下步骤：

a、红参、红蚂蚁、万年蒿混合用8倍量60%乙醇浸泡2小时回流提取，每次提取1小时，提取3次合并制得浓缩提取液，备用；

b、松伞蘑粉碎用15倍水浸泡2.5小时后回流提取，第一次提取1.5小时，第二次加10倍水提取1小时，合并制得松伞蘑浓缩提取液，备用；

c、苏子油、水蛭、鸭肉混合用高压锅高温煮0.5小时至2小时；

d、将上述3个步骤所得物混合经100度高温烘干0.5小时后，再用65度烘干48小时，然后粉碎，得到半成品；

e、然后制剂，剂型可以为丸剂、胶囊或颗粒，最后包装。

实施例2

一种治疗肝脏疾病的药物组合物，是由下列原料按重量份配比：

红参8份、 红蚂蚁8份、水蛭8份、万年蒿10份、苏子油12份 松伞蘑22份、鸭肉220份。

制备方法同实施例1。

实施例3

一种治疗肝脏疾病的药物组合物，是由下列原料按重量份配比：

红参10份、红蚂蚁10份、水蛭12份、万年蒿14份、苏子油16份、松伞蘑28份、鸭肉280份。

制备方法同实施例1。

实施例4

一种治疗肝脏疾病的药物组合物，是由下列原料按重量份配比：

红参8份、红蚂蚁8份、水蛭8份、万年蒿14份、苏子油16份、松伞蘑22份、鸭肉280份。

制备方法同实施例1。

实施例5

一种治疗肝脏疾病的药物组合物，是由下列原料按重量份配比：

红参10份、红蚂蚁8份、水蛭12份、万年蒿10份、苏子油16份、松伞蘑28份、鸭肉220份。

制备方法同实施例1。

实施例6

一种治疗肝脏疾病的药物组合物，是由下列原料按重量份配比：

红参8份、红蚂蚁10份、水蛭12份、万年蒿10份、苏子油16份、松伞蘑28份、鸭肉280份。

制备方法同实施例1。

实施例7

一种治疗肝脏疾病的药物组合物，是由下列原料按重量份配比：

红参10份、红蚂蚁8份、水蛭8份、万年蒿14份、苏子油16份、松伞蘑22份、鸭肉220份。

制备方法同实施例1。

实施例8

一种治疗肝脏疾病的药物组合物，是由下列原料按重量份配比：

红参8份、红蚂蚁10份、水蛭8份、万年蒿10份、苏子油16份、松伞蘑28份、鸭肉220份。

制备方法同实施例1。

实施例9

一种治疗肝脏疾病的药物组合物，是由下列原料按重量份配比：

红参10份、红蚂蚁8份、水蛭12份、万年蒿14份、苏子油16份、松伞蘑22份、鸭肉280份。

制备方法同实施例1。

实施例10

一种治疗肝脏疾病的药物组合物，是由下列原料按重量份配比：

红参9份、红蚂蚁9份、水蛭11份、万年蒿11份、苏子油13份、松伞蘑23份、鸭肉250份。

制备方法同实施例1。

本发明药物组合物的中药制剂服用方法：第一周：一日3次，一次1包，每包重9克，饭前30分钟用温开水送服；第二周及以后：一日3次，一次1~2包。服用三个月为一个疗程。

本发明药物组合物的临床实验以实施例1为标准进行分析。

本发明药物组合物在以下也称为“参蛭肝康丸”或“SZGK”。

一、动物实验报告

性能测试实验

本发明所述药物组合物对硫代乙酰胺致大鼠肝纤维化的作用（本试验由延边大学药学院完成）。

试验方法

健康Wistar雄性大鼠90只，体重180±20g，随机分成9组，正常组、模型组、给药低剂量组25mg/kg、给药中剂量组50 mg/kg 、给药高剂量组150 mg/kg、阳性对照水飞蓟素100mg/kg（SIL）组。除正常组外，其余各组均采用腹腔注射硫代乙酰胺200 mg/kg体重致大鼠肝纤维化模型，每周两次，连续4周。同时试验第一天开始SIL、给药治疗组给与相应剂量灌胃，每日一次。正常组和模型组每日给予相同的生理盐水灌胃。给药4周末，所有动物禁食，不禁水，24小时后，心脏取血，离心，分离血清，测血清学指标。再取肝组织标本，分别用10%甲醛固定液固定，石蜡包埋，作α平滑肌免疫组化染色，光镜检查。

试验结果

大鼠肝功能的变化:随着大鼠试验性肝纤维化模型建立，大鼠肝功能发生明显改变，ALT、AST含量逐渐升高，治疗组与模型组相比均显著低于模型组，其中给药高剂量组150mg/kg与阳性对照组(SIL)比较，效果相等。

大鼠肝组织羟脯氨酸(Hyp)及细胞外基质中血清透明质酸(HA)和层粘连蛋白(LN)功能的变化: 随着大鼠试验性肝纤维化模型的建立，模型组Hyp、HA、LN含量与正常组比较明显升高，治疗组与模型组相比均显著低于模型组，其中给本发明所述药物组合物(SZGK)高剂量组150 mg/kg与阳性对照组比较，效果相等。

病理组织切片, α－平滑肌免疫组化染色图,如图1。

A: 正常组、B: TAA 模型组、C: TAA+SZGK (150mg/kg/day,p.o.)、D: TAA+阳性对照组 (100mg/kg/day,p.o.).

结果分析：TAA对大鼠肝脏有明显的毒性作用，表现为广泛的细胞浊肿变性，明显的脂肪变性并有典型的点状坏死；汇管区有急慢性炎细胞浸润；汇管区内胶原纤维沉积；纤维结缔组织明显增生,纤维间隔变粗,并有典型假小叶形成.正常组肝组织完好，肝小叶清晰，肝细胞完整，细胞核正常。本发明所述药物组合物(SZGK)大剂量组肝组织纤维结缔组织增生程度减轻,纤维间隔变细,假小叶形成不明显。

本发明所述药物组合物对胆道结扎(BDL)大鼠致肝纤维化的作用（本试验由延边大学药学院完成）。

实验方法：

健康Wistar雄性大鼠90只，体重220±20g，随机分成9组，假手术组、胆道结扎模型组、胆道结扎+ 药低剂量25mg/kg治疗组、胆道结扎+ 药中剂量50mg/kg 治疗组、胆道结扎+药高剂量150mg/kg治疗组、胆道结扎+阳性对照水飞蓟素100 mg/kg（SIL）。SZGK、 SIL治疗组给与相应剂量灌胃，每日一次。正常组和模型组每日给予相同的生理盐水灌胃。给药4周末，所有动物禁食，不禁水，24小时后，心脏取血，离心，分离血清，测血清学指标。再取肝组织标本，分别用10%甲醛固定液固定，石蜡包埋，作HE﹑天朗红星染色﹑α平滑肌免疫组化染色，光镜检查。

实验结果：

大鼠肝功能的变化: 随着大鼠试验性肝纤维化模型建立，大鼠肝功能发生明显改变，ALT、AST含量逐渐升高，治疗组与模型组相比均显著低于模型组，其中大剂量组SZGK150 mg/kg与阳性对照组比较，效果相等。

大鼠肝组织羟脯氨酸(Hyp)及细胞外基质中血清透明质酸(HA)和层粘连蛋白(LN)功能的变化: 随着大鼠试验性肝纤维化模型的建立，模型组Hyp、HA、LN含量与正常组比较明显升高，治疗组与模型组相比均显著低于模型组，其中大剂量组SZGK 150 mg/kg与阳性对照组比较，效果相等。

病理组织切片, α－平滑肌免疫组化染色图，如图2。

A: 正常组、B: TAA 模型组、C: TAA+SZGK (150mg/kg/day, p.o.)、D: TAA+阳性对照组 (100mg/kg/day,p.o.).

结果：胆道结扎模型组表现为胆管明显增生，明显的脂肪变性并有典型的点状坏死；汇管区有急慢性炎细胞浸润；汇管区内胶原纤维沉积；纤维结缔组织明显增生,纤维间隔变粗,胆管区形成大量的假小叶.假手术组肝组织完好，肝细胞完整，胆管无增生。SZGK大剂量组肝组织纤维结缔组织增生程度减轻,纤维间隔变细,假小叶形成不明显。

本发明所述药物组合物对乙醇诱导的小鼠急性肝损伤的影响（本试验由延边大学药学院完成）。

饲养管理:清洁级雄性昆明种小鼠120只，体重20-22g，在室温25℃,湿度50%,适应性饲养,饲养方式采用立体笼式饲养，给予标准饲料，自由饮水，12小时黑暗，12小时光照^[17]。

实验方法:将60只小鼠随机分成6组，即normal组，ethanol模型组，silymary阳性对照组,本发明药物组合物(SZGK)150mg/kg组,本发明药物组合物(SZGK)100mg/kg组, 本发明药物组合物(SZGK) 50mg/kg组，每组10只。阳性对照组水飞蓟素100mg/kg，均灌胃给药，正常组灌胃给予同等热量的麦芽糖溶液。每隔12小时给药一次，连续给药3次，末次给药4h后颈动脉取血，分离肝脏，脱颈椎处死，收集血清，肝脏存放于-80℃，备用。

统计学处理:实验数据采用Graphpad prism program5.0 (Graphpad software,Inc,san Diego, USA)，测定值均为mean+SD, 用单因素方差分析（One-way ANOVA ）和Turkey^,s多因素t检验进行数据比较。

实验结果:本发明所述药物组合物(SZGK)对乙醇所致小鼠急性肝损伤小鼠血清ALT 、AST的影响。

各给药组给予乙醇后，血清中转氨酶ALT、AST活性明显升高，与Normal组比较有显著性差异（P<0.001），说明ethanol造成了严重的肝损伤，提示造模成功; 在三君肝康的不同剂量组和silymary阳性对照组转氨酶活性明显下降，与模型组比较有显著性差异（P<0.001）。说明本发明所述药物组合物(SZGK)对ethanol诱导的小鼠血清中ALT、AST酶的活性具有明显的抑制作用。结果见图3和图4。

本发明所述药物组合物(SZGK)对乙醇所致小鼠急性肝损伤小鼠血清TNF-α、TG结果的影响（本试验由延边大学药学院完成）。

在给予ethanol以后，ethanol组小鼠肝组织中的TNF-а以及TG活性明显升高，与正常组比较有显著性差异(P<0.001); 给与SZGK以后，各给药组TNF-а以及TG活性受到抑制，与模型组比较有显著性差异(P<0.001)。说明SZGK可明显抑制由ethanol诱导产生的TNF-а、TG的活性。结果见图5和图6。

图5血浆TNF-α（一）和图6TG（B）水平4 h酒精灌胃后的最终。这些小鼠接受乙醇（5克/公斤体重）灌胃，每天12小时，共3个剂量（EtOH；n = 10）。对照组小鼠接受等热量麦芽糖溶液（对照；n = 10）。在szgk-50 /乙醇（szgk-50 +乙醇；n = 10），szgk-100 /乙醇（szgk-100 +乙醇；n = 10），szgk-150 /乙醇（szgk-150 +乙醇；n = 10）和水飞蓟素/乙醇（SIL +乙醇；n = 10）组，小鼠分别给予不同剂量的szgk（5，10或30毫克/公斤，PO）、水飞蓟素（100毫克/公斤，PO）前1h乙醇。对照组小鼠注射。结果表示为平均±扫描电镜资料以单因子变异数分析–后跟Tukey多重比较试验分析了克莱默。）*。P＜0.05，P＜0.01××，×××P＜0.001significantly不同于EtOH组。

病理组织学观察:通过HE染色结果观察，正常组的肝组织完好，肝细胞完整，细胞核正常；EtOH组表现为肝小叶结构大部分破坏，肝细胞呈弥漫性坏死，细胞核固缩或消失，有大量炎性细胞浸润；EtOH+SZGK50组肝索排列接近正常，部分肝细胞体积增大，中央静脉及汇管区清晰可见,但与模型组比较有一定的效果；EtOH+SZGK100组细胞结构较完整，坏死性区域与EtOH组相比有所减少；EtOH+SZGK150组细胞结构较完整，排列较紧密；EtOH+silymarin组肝细胞完整，部分肝细胞增大，与正常组接近。结果见图7。

近年来我国酒精性肝损伤的发病率逐年增加，人群中检出率为4.34%。本发明结果表明能有效地降低大剂量一乙醇所致的小鼠的死亡率，提示SZGK具有保肝作用。当肝细胞受到损伤的时候细胞质内的乳酸脱氢酶、AST和ALT就会释放出来，其在血液中的浓度就会升高。实验结果表明本发明所述药物组合物(SZGK)能够明显抑制乙醇肝毒性引起的小鼠血清中AST、ALT浓度的升高，且成剂量依赖关系。本次实验结果表明SZGK够有效抑制乙醇引起的肝脏中GSH含量的下降。在肝细胞损伤过程中核转录因子NF-KB与肿瘤坏死因子(TNF-a)起着极其重要的作用。当外界刺激肝细胞时，不同种类的促进炎症反应因子会被巨嗜细胞释放出来，这其中就包括TNF-a,IL-1与IL-6。其中TNF-a主要由单核－巨噬细胞分泌，是一种促进肝细胞凋亡的重要因子，与免疫性和化学性肝损伤有着极其密切的关系。首先，TNF-a可以通过感染肝细胞来达到肝细胞凋亡的目的。其次静止状态中的核转录因子NF-KB可以被TNF-a所激活。核转录因子NF-KB是一种核因子，它具有转录激活的功能，是一类特殊的蛋白质，可以和其他的蛋白组成具有特定序列的同源或者异源二聚体，能启动或增强这些基因的转录，并参与到基因的转录过程当中，在静息状态的细胞中，没有激活的NF-KB和其抑制蛋白结合位于细胞质中，当其受到TNF-a刺激后，核因子NF-KB抑制蛋白发生磷酸化并降解，NF-KB被活化，易位到核内，这时基因的转录就被启动或增强，来参与到肝细胞凋亡的过程中去。在急性肝损伤的疾病中，肝脏NF-KB的活化起着重要的作用。本次实验中治疗组小鼠血清中TNF- a 的浓度明显低于模型组，而且成剂量依赖关系，说明本发明所述药物组合物(SZGK)对乙醇引起的肝损伤具有保护作用。总的来说，参蛭肝康丸对酒精引起的小鼠急性肝毒性有很好的预防作用。

通过本项目的研究探明了本发明所述药物组合物(SZGK)抗肝纤维化的作用机制和作用靶点，从器官、细胞和分子水平进行多层次的深入研究，搞清了本发明所述药物组合物(SZGK)的抗肝纤维化机制，并从分子水平揭示了其抗肝纤维化作用的关键环节。该研究对研发有效、安全的抗肝纤维化新药，及分析认识该药的开发前景和将来临床合理应用等提供了重要的理论依据。

综合上述，本发明的药物组合物对肝纤维化的肝功能有显著地保护作用，能够有效预防和治疗肝纤维化的作用，对于其密切相关的酒精肝、脂肪肝、酒精性肝损伤、药物性肝损伤及肝硬化也具有预防和治疗功效。

本实施例的用途仅用于说明本发明而非意欲限制本发明的保护范围。此外，在阅读了本发明的技术内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动、修改和/或变型，所有的这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的保护范围之内。

二、临床病例

【病例1】张某某，男性，59岁。长期大量饮酒，自诉乏力，腹胀，十分虚弱，疲倦，肝区疼痛，消化不良，多次入住医院，病情反反复复，诊断结果：酒精型肝硬化（晚期）、活动性、腹水、肝功能失常代偿期。来我处就诊，面黄肌瘦，外院超声显示：肝脏明显缩小，腹水，多项血清学检测指标明显异常。

酒精型肝硬化治疗前后超声和实验室指标

该患者治疗过程为半年，刚开始间断小剂量服用利尿剂，中途一直未加其他任何药物。肝脏形态及血清学指标变化情况跟踪如上表。该患者治疗一个月后，各种不适症状逐渐改善，治疗结束后观察3个月后，正常上班，现一切正常，本病例由延边武警医院提供。

【病例2】费某某，女，49岁。有明确乙肝病史18年，自诉全身乏力，困倦，肝区疼痛，腹胀，严重消化不良，全身皮肤瘙痒，到地方多处治疗过，无明显效果，诊断结果：乙型肝炎，肝硬化（晚期），肝腹水。来我处就诊，患者神情恍惚，面黄肌瘦，外院超声示：肝脏明显缩小，血清学多项检测指标明显异常。

乙型肝炎型肝硬化治疗前、后超声和实验室指标

该换治疗过程为10个月，4个月后逐渐停用利尿剂，一直未输白蛋白，未加其他任何药物。肝脏形态及血清学指标变化情况跟踪在上表。该患两个月不适症状逐渐改善，现生活能完全自理，先乙肝PCR高于正常值，现只服拉咪呋啶，以抑制乙肝病毒，本病例由延边武警医院提供。

【病例3】朴某某，男，30岁。有明确乙肝病史8年，时有乏力，消化不良，余无不适症状。2008年2月单位组织体检时，超声提示：肝硬化，感明显缩小，诊断结果：慢性乙型肝炎，肝硬化。来我处就诊，观患者及其消瘦，外院超声示：肝脏明显缩小，血清学多项检测指标明显异常。

乙型肝炎型肝硬化治疗前、后超声和实验室指标

该患治疗8个月，不适症状于一个月后好转，治疗过程中未用其他药物。现正常上班，消化良好，体胖，精力充沛，肝形态及血清学指标见上表，本病例由延边武警医院提供。

【病例4】刘某某，男，61岁。长期大量饮酒，自诉乏力，腹胀，肝区疼痛，消化不良，多次入院驻地医院，病情反反复复，诊断结果：慢性酒精中毒，酒精型脂肪肝。来我处就诊，外院超声显示：肝肿大，血清学检测多项指标严重超常。

脂肪肝治疗前、后超声和实验室指标

该患治疗过程为4个月，两周后不适症状逐渐好转。治疗过程中，一直未用其他药物。观察至现在一直未有不适反映。肝形态及血清学指标如上表，本病例由延边武警医院提供。

【病例5】吴某某，男，61岁，有明确乙肝病史30余年，自诉1年来全身乏力，腹胀，右上腹疼痛，严重消化不良，多次入住驻地医院诊断为：活动性乙型肝炎，早期肝硬化。来我处就诊，观患者困倦，消瘦，外院超声显示：符合早期肝硬化改变，血清学检测部分异常。

乙型肝炎型肝硬化治疗前、后超声和实验室指标

该患者治疗过程为7个月，不适症状于两个月后逐渐改善，治疗过程中未用其他药物。现在外地打工，肝形态及血清指标见上表，本病例由延边武警医院提供。

Claims (3)

1.一种治疗肝脏疾病的药物组合物，其特征是由下列原料按重量份，红参、红蚂蚁、万年蒿经过乙醇提取，松伞蘑经过水提取，水蛭、鸭肉和苏子油经高温高压煮制0.5小时至2小时，混合后经100度高温烘干0.5小时后，再经65度烘干48小时，最后烘干后粉碎过程而制成：

红参8～10份 　　红蚂蚁8～12份 　 水蛭8～12份 　万年蒿10～14份

苏子油12～16份 　 松伞蘑22～28份 　鸭肉220～280份。

2.一种如权利要求1所述的治疗肝脏疾病的药物组合物，其特征是由下列原料按重量份而制成：

红参9份 红蚂蚁9份 水蛭11份 万年蒿13份

苏子油15份 松伞蘑25份 鸭肉250份。

3.一种如权利要求1所述的治疗肝脏疾病的药物组合物的制备方法，包括以下步骤：

a、红参、红蚂蚁、万年蒿用乙醇回流提取，制得浓缩提取液，备用；

b、松伞蘑采用水回流提取，制得松伞蘑浓缩提取液，备用；

c、苏子油、水蛭、鸭肉混合用高压锅高温煮0.5小时至2小时；

d、将上述3个步骤所得物混合用100度高温烘干0.5小时后，再经65度烘干48小时，最后烘干后粉碎。