CN107335026B

CN107335026B - 一种治疗局灶节段性肾小球硬化的药物

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Publication number: CN107335026B
Application number: CN201611128820.4A
Authority: CN
Inventors: 贺理宇; 刘国勇
Original assignee: First Affiliated Hospital Of Changde Vocational And Technical College; Second Xiangya Hospital of Central South University
Current assignee: First Affiliated Hospital Of Changde Vocational And Technical College; Second Xiangya Hospital of Central South University
Priority date: 2016-12-09
Filing date: 2016-12-09
Publication date: 2020-09-11
Anticipated expiration: 2036-12-09
Also published as: CN107335026A

Abstract

本发明涉及医学及药物学领域，尤其涉及一种治疗局灶节段性肾小球硬化的药物。本发明药物是由虾青素和生姜结合传统中医药理论和药理学研究成果并利用现代工艺手段制备而成的口服制剂，优选胶囊剂和片剂。经药效学试验证实，本发明药物对肾小球硬化具有理想的治疗作用，且本发明药物安全性好、患者的耐受性和依从性高、治疗成本较低。

Description

一种治疗局灶节段性肾小球硬化的药物

技术领域

本发明涉及医学及药物学领域，尤其涉及一种治疗局灶节段性肾小球硬化的药物。

背景技术

局灶节段性肾小球硬化(Focal segmental glomerulosclerosis，FSGS)是指部分(局灶)肾小球和(或)肾小球部分毛细血管袢(节段)有局灶性节段性硬化或透明变性、无明显细胞增生的一类肾小球疾病，本病为多个发病机制所致的一组临床病理综合征。按照病因可分为原发性FSGS、家族性或遗传性FSGS、以及继发性FSGS。

原发性FSGS发病机制尚不清楚，不同病理类型的发病机制可能有所差异。有学者提出两种假说：一是损伤-瘢痕学说，即认为FSGS是肾小球受损后修复反应的结果，是一被动过程；另一假说是主动致病学说，即认为FSGS是肾小球固有细胞受某些致病因子的刺激后被激活，进而主导病变的形成，是一主动过程。实际上，原发性FSGS更可能是病因及发病机制不同、病理相似的一组疾病，上述两种机制可能在不同程度上都参与了病变的形成，只是在不同的亚型、病变的不同阶段发挥作用的程度大小不同而已。目前认为本病的发生发展与遗传背景、循环因子、足细胞损伤变性、高脂血症、系膜基质合成与降解失衡、病毒或毒素介导的损伤以及其他外部因素均有重要的关联。

本病见于任何年龄，以儿童及青少年为主，男性多见，男女之比为2.2:1，近年来其发生率有增高趋势。FSGS临床表现无特征性，均表现为非选择性持续性蛋白尿，大多数特发性FSGS以起病隐匿的肾病综合征为首发，10-30％的患者为非肾病性蛋白尿。成人FSGS可表现为无症状性蛋白尿可伴有镜下血尿常见，可有肉眼血尿。疾病早期就出现血压升高、肾小管功能受损和急性肾损伤，但多数患者在病程中逐渐发生。光镜下肾小球病变呈局灶性(仅累及部分肾小球)、节段性(受累肾小球的节段小叶硬化)分布是本病特征性的病理表现。

本病对各种治疗的反应均较差，治疗较为困难，多主张综合治疗。针对原发性FSGS的治疗原则包括：

(1)积极对症治疗：包括抗凝、抗血栓形成、降血压、降血脂、降蛋白尿、营养的维护与支持疗法；

(2)保护肾功能：防止或延缓肾功能损害，减慢病情进展；

(3)防治并发症：包括感染、血栓栓塞性并发症、水电解质及酸碱代谢异常、药物治疗的不良反应等；

(4)病情反复发作的肾病综合征患者，可以考虑联合糖皮质激素和免疫抑制药物治疗。

目前临床上用于本病的治疗药物主要包括：(1)糖皮质激素，如泼尼松、甲基强的松龙等，部分患者在用药5-9月后病情缓解，有效率接近60％；(2)免疫抑制剂，如环磷酰胺、苯丁酸氨芥、硫唑嘌呤、环孢素A等，与激素联用可降低复发率、延长缓解期、减少激素用量；(3)天然药物提取物，如雷公藤多苷片，不仅可用于尿检缓解后的维持治疗，巩固疗效，减少复发，对激素抵抗患者或因激素不良反应不能接受大剂量治疗者.雷公藤多苷片也能使部分患者病情缓解；(4)其他对症治疗药物：血管紧张素转化酶抑制剂或血管紧张素II受体拮抗剂等降压药，他汀类降脂药，潘生丁、肝素、尿激酶等抗凝药等。

然而，作为治疗局灶节段性肾小球硬化最为重要也最有效的手段，上述各类临床药物仍具有许多不足之处，例如：糖皮质激素不良反应严重，如肾上腺皮质功能亢进综合征(满月脸、水牛背、高血压、多毛、水肿、皮肤变薄等)、诱发或加重感染、诱发或加重溃疡病、诱发高血压和动脉粥样硬化、诱发或加重糖尿病、水盐代谢紊乱、骨质疏松、肌肉萎缩、伤口愈合延缓、诱发精神病发作和癫痫、抑制儿童生长发育、股骨头坏死等，此外，糖皮质激素药物还有明显的停药反应，长期应用可使患者产生依赖性，这些严重的不良反应将在很大程度上降低患者的耐受性和依从性；免疫抑制剂往往价格昂贵，且其单独使用时疗效不佳，此外，免疫抑制剂同样具有神经毒性、骨髓抑制、肝脏损害、胃肠道症状等不良反应；雷公藤多苷片作为一种植物药，不良反应相对较少，但其疗效不够确切，对临床症状较严重的患者治疗效果不甚理想，而且有时会导致药物性肝炎的发生，在有些情况下，甚至会加重肾脏疾病的症状，因此在很大程度上限制了其应用；其他对症治疗药物只能对某些伴发症状进行治疗和纠正，无法从根本上对FSGS发挥治疗作用。

虾青素(Astaxanthin，ATX)，又称虾红素，即3,3′-二羟基-4,4′-二酮基-β,β′-胡萝卜素，为萜烯类不饱和化合物，化学分子式为C₄₀H₅₂O₄，其分子结构中包括两个β-紫罗兰酮环和11个共轭双键。虾青素广泛存在于自然界，特别是甲壳类动物虾、蟹、鲑科鱼、藻体、酵母体内和鸟类的羽毛中含量较高，是海洋生物体内主要的类胡萝卜素之一。

天然虾青素是世界上最强的天然抗氧化剂之一，其清除自由基的能力是维生素C的6000倍、维生素E的1000倍、辅酶Q10的800倍、茶多酚的320倍。因此，虾青素可以有效清除细胞内的氧自由基，增强细胞再生能力，维持机体平衡和减少衰老细胞的堆积，由内而外保护细胞和DNA健康，从而具有保护皮肤健康、促进毛发生长、抗衰老、缓解运动疲劳、增强活力等功效。目前，国内外已有大量的研究证实了虾青素在缓解疲劳，提高免疫力，抗炎抗感染，预防肿瘤、心血管疾病、糖尿病等慢性疾病的发生发展，改善视力，延缓衰老等方面具有积极作用。

中国专利申请CN201510631886.4中公开了一种虾青素在制备预防治疗糖尿病肾病肾小球纤维化和水肿中抑制α-SMA和FN表达的药物组合物中的应用，以及一种预防和治疗糖尿病肾病肾小球纤维化和水肿的药物组合物。

生姜是姜科多年生草本植物姜(Zingiber officinale Rosc.)的新鲜根茎，生姜中除含有姜油酮、姜辣素、姜酚等生理活性物质外，还含有丰富的蛋白质、多糖、维生素、胡萝卜素和钙、铁、磷等多种微量元素，具有祛寒、祛湿、助阳、暖胃、促消化、通经络、促进血液循环、提神醒脑等多种保健功能。

中医记载生姜味辛、性微温，入脾、胃、肺经。具有解表散寒，温中止呕，温肺止咳，解毒的功效。主治脾胃虚寒，食欲减退，腹痛腹泻，恶心呕吐，胃气不和，肾虚阳痿，风寒或寒痰咳嗽，感冒风寒，恶风发热，头痛眩晕，中鱼蟹毒等病症。

现代药理研究表明，生姜还具有抗菌、抑制肿瘤、抗氧化、抗衰老、防暑降温、改善睡眠、利胆等作用，但目前尚未见到利用生姜治疗局灶节段性肾小球硬化的相关报导。

综上可以看出，由于目前针对局灶节段性肾小球硬化的各种治疗药物在使用过程中都具有很大的局限性，因此，仍有相当多的患者得不到令人满意地治疗。鉴于此，临床上急需一种组方简单、疗效确切、使用方便、安全性好、不良反应少而且治疗成本较低的新药物。

发明内容

解决的技术问题

本发明需要解决的问题是：因目前针对局灶节段性肾小球硬化的各种治疗药物在使用过程中都具有很大的局限性，例如糖皮质激素不良反应严重，易产生依赖性和停药反应，还会引起水盐代谢和糖、脂肪、蛋白质代谢紊乱、严重感染等，患者耐受性和依从性差；免疫抑制剂价格昂贵，单独使用时疗效不佳；植物药疗效不确切，对临床症状较严重的患者治疗效果不理想，有时会导致药物性肝炎的发生；其他对症治疗药物只能对某些伴发症状进行治疗和纠正，无法从根本上对FSGS发挥治疗作用。现有药物存在的上述问题使得相当多的局灶节段性肾小球硬化患者得不到有效治疗。

技术方案

本发明旨在提供一种治疗局灶节段性肾小球硬化的组方简单、疗效确切、使用方便、安全性好、不良反应少而且治疗成本较低的新药物。

本发明的治疗局灶节段性肾小球硬化的药物，其特征在于它是由下述重量份的原料制成的：

虾青素 15-25；生姜 4500-6000。

上述原料的重量份优选：

虾青素 15；生姜 4500。

上述原料的重量份还优选：

虾青素 18；生姜 5040。

上述原料的重量份还优选：

虾青素 22；生姜 5500。

上述原料的重量份还优选：

虾青素 25；生姜 6000。

优选地，本发明治疗局灶节段性肾小球硬化的药物，是经过以下步骤制得的：

(1)将新鲜生姜水漂洗，去皮后榨汁，所得榨汁液经离心后上清液利用截流分子量为300-600的超滤膜进行超滤，所得滤渣经冷冻干燥得生姜汁冻干粉；所得滤液减压浓缩至小体积后进行喷雾干燥，得生姜汁喷雾干燥粉；

(2)将虾青素与(1)步骤中制得的生姜汁冻干粉、生姜汁喷雾干燥粉混合，在搅拌机中充分混匀后即得本药物粉末。

本发明治疗局灶节段性肾小球硬化的药物可以是任何常规的口服药物剂型。

优选地，由上述步骤制得的药物粉末按本领域常规的制备胶囊剂或片剂的方法，进一步制得本药物胶囊剂或片剂。

此外，本发明还涉及一种治疗局灶节段性肾小球硬化的药物在制备治疗肾小球硬化疾病药物中的应用。

有益效果

本发明在广泛筛选、重复试验验证的基础上获得了一种治疗局灶节段性肾小球硬化的新药物。经试验，本发明药物对局灶节段性肾小球硬化具有理想的治疗作用，且本发明组方简单、质量易控、疗效确切、使用方便、安全性好、不良反应少、患者依从性和耐受性良好、而且治疗成本较低；本发明药物原料来自天然药物或日常食品，配方与剂量设计符合传统用药习惯和国家相关规定，服用安全、可靠；本发明为口服剂型，便于携带和服用，易被患者所接受。因此，本发明药物非常适合目前的临床需求，本发明的推广应用将会具有良好的市场前景并产生可观的经济及社会效益。

具体实施方式

以下通过特定的具体实例说明本发明的实施方式，本领域技术人员可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点与功效。本发明还可以通过另外不同的具体实施方式加以实施或应用，本说明书中的各项细节也可以基于不同观点与应用，在没有背离本发明的精神下进行各种修饰或改变。

在进一步描述本发明具体实施方式之前，应理解，本发明的保护范围不局限于下述特定的具体实施方案；还应当理解，本发明实施例中使用的术语是为了描述特定的具体实施方案，而不是为了限制本发明的保护范围；在本发明说明书和权利要求书中，除非文中另外明确指出，单数形式“一个”、“一”和“这个”包括复数形式。

当实施例给出数值范围时，应理解，除非本发明另有说明，每个数值范围的两个端点以及两个端点之间任何一个数值均可选用。除非另外定义，本发明中使用的所有技术和科学术语与本技术领域技术人员通常理解的意义相同。除实施例中使用的具体方法、设备、材料外，根据本技术领域的技术人员对现有技术的掌握及本发明的记载，还可以使用与本发明实施例中所述的方法、设备、材料相似或等同的现有技术的任何方法、设备和材料来实现本发明。

下文结合具体实施例和对比例对本发明药物的药理学研究进行详细说明。

实施例1

一种治疗局灶节段性肾小球硬化的药物，本药物是由下述重量份的原料制成的：

虾青素 15；生姜 4500。

制备方法如下：

(1)将新鲜生姜水漂洗，去皮后榨汁，所得榨汁液经离心后上清液利用截流分子量为600的超滤膜进行超滤，所得滤渣经冷冻干燥得生姜汁冻干粉；所得滤液减压浓缩至小体积后进行喷雾干燥，得生姜汁喷雾干燥粉；

实施例2

虾青素 18；生姜 5040。

制备方法如下：

(1)将新鲜生姜水漂洗，去皮后榨汁，所得榨汁液经离心后上清液利用截流分子量为500的超滤膜进行超滤，所得滤渣经冷冻干燥得生姜汁冻干粉；所得滤液减压浓缩至小体积后进行喷雾干燥，得生姜汁喷雾干燥粉；

实施例3

虾青素 25；生姜 6000。

制备方法如下：

(1)将新鲜生姜水漂洗，去皮后榨汁，所得榨汁液经离心后上清液利用截流分子量为300的超滤膜进行超滤，所得滤渣经冷冻干燥得生姜汁冻干粉；所得滤液减压浓缩至小体积后进行喷雾干燥，得生姜汁喷雾干燥粉；

对比例1

虾青素 18；微晶纤维素 100。

制备方法如下：

将虾青素与微晶纤维素混合，在搅拌机中充分混匀后即得本药物粉末。

对比例2

生姜 4500；微晶纤维素 500。

制备方法如下：

(2)将微晶纤维素与(1)步骤中制得的生姜汁冻干粉、生姜汁喷雾干燥粉混合，在搅拌机中充分混匀后即得本药物粉末。

对比例3

虾青素 20；生姜 10000。

制备方法如下：

对比例4

虾青素 20；生姜 2500。

制备方法如下：

对比例5

虾青素 18；生姜 5040。

制备方法如下：

(1)将新鲜生姜水漂洗，去皮后切成0.5cm长的小段，加10倍量水，浸泡0.5小时后，煎煮1小时，药液滤过，滤液备用，在相同条件下将滤渣重复煎煮2次，合并滤液，减压浓缩至小体积后进行喷雾干燥，得生姜提取液喷雾干燥粉；

(2)将虾青素与(1)步骤中制得的生姜提取液喷雾干燥粉混合，在搅拌机中充分混匀后即得本药物粉末。

药效学试验

对上述实施例和对比例中制得的药物进行药效学测试。

一、实验材料

1.受试药物：实施例1-3和对比例1-5制得的药物；

2.对照药物：雷公藤多苷片；

3.造模剂：阿霉素、生理盐水。

实验动物：

BALB/c纯系小鼠，清洁级，8～10周龄，体重20～25g，雄性，120只。

实验动物选择的理由：本试验选用BALB/c纯系小鼠是药物非临床研究中使用的标准动物，具有大量的背景数据，遗传背景清楚，对药物的反应比较稳定，个体差异较小，饲养方便，体形较小，便于试验操作，节省供试品，并且在研究相同或类似供试品时发现是合适的动物模型。

二、造模方法

原理：阿霉素是一种强效的抗肿瘤药物，对机体具有强烈的细胞毒作用，直接嵌入DNA核碱基对之间，干扰转录过程，既抑制DNA的合成又抑制RNA的合成，所以对细胞周期各阶段均有作用，为一细胞周期非特异性药物，阿霉素还可导致自由基的生成，可诱发细胞凋亡，引起肾损害形成肾小球硬化。阿霉素所致的肾小球硬化动物模型为稳定的肾小球硬化模型，具有慢性进展性肾损害的特点，与人类进行性肾脏疾病的表现非常类似。

120只小鼠禁食12小时，称取适量阿霉素溶于生理盐水中，110只小鼠每只小鼠尾静脉注射阿霉素10mg/kg体重，另10只小鼠每只尾静脉注射等量的生理盐水，在整个试验过程中无动物死亡，6周后测定各试验组小鼠的尿蛋白含量，与仅注射生理盐水组的小鼠相比，空白对照组小鼠的尿蛋白含量明显升高，证明此肾小球硬化模型造模成功。

三、供试品配制

配制时间和频率：给药当天进行供试品的配制。

受试药物配制方法：将实施例1-3药物和对比例1-5药物以水配制成浓度为25.0mg/ml的混悬液。

对照药物配制方法：将雷公藤多苷片以水配制成浓度为3.0mg/ml的混悬液。

四、试验方法

试验分组：

从经尾静脉注射阿霉素的小鼠中选择体重相近的100只小鼠，随机分为10组，即受试药物组(以实施例1-3、对比例1-5制得的药物混悬液灌胃)、对照药组(以雷公藤多苷片混悬液灌胃)、空白对照组(以生理盐水灌胃)。

给药方法：

给药途径：口服灌胃给药。

给药频次和周期：每天给药1次，连续给药6周。

给药方式与剂量：受试药物组：每日给药一次，按250mg/kg体重(0.1ml/10g体重)给药；对照药组：每日给药一次，按30mg/kg体重(0.1ml/10g体重)给药；空白对照组：每日给药一次，按0.1ml/10g体重给予生理盐水。

五、试验结果

动物活体观测指标：

一般临床观察：包括但不限于死亡情况、精神状态、行为活动、发病、呼吸、分泌物、粪便以及饮食和饮水情况等。

详细临床观察：包括但不限于精神状态、行为活动、皮肤、被毛、眼睛、耳朵、鼻、腹部、外生殖器、肛门、四肢、足和呼吸。

体重：所有动物在接收后、分组前以及连续给药42天后测定体重。

实验室指标：

血清肌酐，肌酐清除率，尿蛋白，血清白蛋白，血清胆固醇。

检测时间：连续给药42天后。

表1各试验组动物给药42天后实验室检测指标表

续表1各试验组动物给药42天后实验室检测指标表

注：“*”表示与空白组相比较P≤0.05；“**”表示与空白组相比较P≤0.01。

试验结果：从表1及续表1中各试验组动物给药42天后实验室检测各项指标结果看，各组小鼠体重指标，与空白组相比，对照药组、实施例1-3组、对比例1和对比例4组体重明显较重(P≤0.05)，其中实施例1-3组增重最为明显；血清肌酐和肌酐清除率指标，与空白组相比，除对比例2组外，其余各组具有不同程度的改善(P≤0.05)，其中实施例1-3组改善最为显著(P≤0.01)；同样，尿蛋白指标，与空白组相比，除对比例2组外，其余各组均具有不同程度的改善(P≤0.05)，其中以实施例1-3组和对比例4组改善最为显著(P≤0.01)；血清白蛋白指标，除对比例2和对比例3组外，其余各组具有不同程度的改善(P≤0.05)，其中以对照药组和实施例1-3组改善最为显著(P≤0.01)；血清胆固醇指标，与空白组相比，仅有实施例1-3组有所改善(P≤0.05)，其余各组与空白组检测值无统计学差异。综上可以看出，综合各项检测指标，实施例1-3组对小鼠症状的改善作用明显优于对照药组和各对比例组，表明其对肾脏功能的保护作用和对肾小球硬化的治疗作用最为突出。

六、试验结论

综合各项实验室检测指标结果来看，各受试药物组和对照药组对肾小球硬化引起的肾功能损害临床症状均具有一定的保护和治疗作用，相对于空白组，各试验组的各项检测指标均有不同程度的改善。与对照药组相比，实施例1-3组对血清肌酐、肌酐清除率、尿蛋白和血清胆固醇指标的改善作用更为显著，相对于空白组，实施例1-3组对上述指标的改善程度具有统计学极显著差异(P≤0.01)，而对照药组对上述指标的改善程度仅具有较显著差异(P≤0.05)，从而表明实施例1-3组对肾脏功能的保护作用和对肾小球硬化的治疗作用明显优于对照药组。与各对比例组相比，实施例1-3组对血清肌酐、肌酐清除率、尿蛋白、血清白蛋白和血清胆固醇指标的改善作用更为显著，相对于空白组，实施例1-3组对上述指标的改善程度具有统计学极显著差异(P≤0.01)，而对比例组对上述指标无改善作用或改善程度仅具有较显著差异(P≤0.05)，从而表明实施例1-3组对肾脏功能的保护作用和对肾小球硬化的治疗作用明显优于各对比例组。值得注意的是，对比例1组配方中只包含虾青素，其对各指标的改善程度均明显弱于实施例1-3组，对比例2组配方中只包含生姜，其对各指标均未表现出改善作用，由此说明当单独使用生姜时，对肾小球硬化并无治疗作用，而将生姜与虾青素组成配方后，获得了比单独使用虾青素更为理想的治疗效果，暗示着在本发明配方中，虾青素与生姜在保护肾功能和治疗肾小球硬化过程中产生了重要的协同作用，由于采用了不同原料配比或制备工艺的对比例3-5对各指标的改善作用也明显弱于实施例1-3组，进一步证明了实施例组药物的原料种类、配比及制备工艺优于各对比例组。综上，正是由于本发明药物各原料组分在保护肾功能和治疗肾小球硬化过程中能够有效地协同发挥作用，使得本发明药物最终获得了较为理想的治疗效果。

以上对本发明优选的具体实施方式和实施例作了详细说明，但是本发明并不限于上述实施方式和实施例，在本领域技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本发明构思的前提下作出各种变化。

Claims

1.一种治疗局灶节段性肾小球硬化的药物，其特征在于它是由下述重量份的原料制成的：

虾青素25；生姜6000；

所述药物经过以下步骤制得：

2.如权利要求1所述的治疗局灶节段性肾小球硬化的药物，其特征在于所制得的药物粉末按本领域常规的制备胶囊剂或片剂的方法，进一步制得本药物胶囊剂或片剂。

3.如权利要求1任一项所述的治疗局灶节段性肾小球硬化的药物在制备治疗肾小球硬化疾病药物中的应用。