CN104056285A - 一种用于肺部磁共振成像乳剂的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种肺部磁共振成像乳剂的制备方法，其具体步骤：(1)在水中加入一定量的马根维显溶液，搅拌后，加入二棕榈酰磷脂酰胆碱，mPEG-DSPE，磷脂，表面活性剂，助表面活性剂，稳定剂；(2)在室温下磁力搅拌至无明显块状物，得到乳液；（3）在所得的乳液中加入肺泡铺展剂，继续搅拌，得到混合液；(4)将所得混合液用匀浆机间歇搅拌，再静置离心去除沉淀，即得到含有马根维显的乳剂。本发明制备的肺部磁共振成像乳剂，可通过肺部给药的方式进入人体，避免了注射给药带来的诸多不便，能够满足许多临床应用的需求。

Description

一种用于肺部磁共振成像乳剂的制备方法

技术领域

本发明涉及纳米材料的制备领域，具体地，涉及一种用于肺部磁共振成像乳剂的制备方法。

背景技术

肺部是机体的开放性器官，作为蛋白多肽类药物的给药部位具有以下优点：具有较大的吸收面积，全肺大约有3-5亿个肺泡，每个肺泡直径约250μm，总面积可达75-140m²；肺泡-毛细血管间(可分为5层：肺表面活性物质、肺泡上皮、间质组织、毛细血管内皮组织和毛细血管基底膜)厚度仅为0.5mm，比一般上皮细胞膜和黏膜的厚度少一个数量级，使大分子药物可快速通过；丰富的血容量，成人可达204-314mL/m²，约为体循环的10％，且绝大部分肺泡与周围毛细血管密切衔接，衔接面积约70m²，为体表面积的40倍；细胞内外的生物酶活性低，肺部给药避免了肝脏首过效应。因此，肺部是蛋白多肽类药物局部给药发挥全身性作用的有效途径之一。

肺泡表面活性物质(PS)是存在于正常肺泡内表面的一种能减弱肺泡表面张力的物质。这是一种以磷脂为主要成分的脂质和表面活性蛋白混合物，在肺泡表面具有独特的铺展功能和动态表面张力。吸气时，PS抵达肺泡表面，迅速在肺泡表面铺展，在亲水蛋白SP-A、疏水蛋白SP-B和Ca²⁺的协同作用下，PS在肺泡内转化为管髓体。疏水蛋白SP-B和SP-C促进磷脂吸附于肺泡气液界面，加速处于液相中的磷脂混合物在界面上构成磷脂单分子层。当呼气时，随着表面膜而积的缩小，肺表面活性物质中的磷脂会聚，不饱和磷脂的脂链“树叉式”弯曲，双键发生相互碰撞、挤压倾入液相而失活：DPPC含有直链脂肪酸，会聚时不易被挤出表面，可相对稳定的留存于液相中。由于压缩的表面膜上富含DPPC，使气液界面的表面张力大幅度下降，从而使肺泡内压稳定，防止呼吸末期肺泡萎陷。此外，还具有免疫调节和器官保护的特性，可用于治疗肺部疾病。在临床上，PS己被用于治疗各类肺部疾病或原发性疾病继发所引起的急性进行性呼吸衰竭。近年来，有研究利用PS降低肺泡表面张力的性质，将PS作为药物的载体用于治疗肺炎或作为基因转染的载体。例如，PS作为药物载体可以快速的分布到肺泡表面，提高疗效(Kukowska-Latallo,J.F.；Chen,C.L.；Eichman,J.；Bielinsha.A.U.；Baker,J.R.Enhancement of dendrimer-mediated transfection using synthetic lung surfactant exosurfneonatal in vitro.Biochem.Biophys.Res.Commun.1999,264(1),253-261.)。因此，PS不仅自身可以作为治疗药物，发挥稳定气道，降低肺泡表面张力，免疫调节的作用，同时也可以作为肺部给药的药物载体，载送药物或DNA起到局部和全身作用。但是，到目前为止，未见PS应用于造影剂方面的制备。

发明内容

针对现有技术中的缺陷，本发明的目的是提供一种用于肺部磁共振成像乳剂的制备方法，该方法通过乳化技术，制备出一种能通过肺部给药，实现肺部成像的乳剂。该技术制备方法简单，所得的产物稳定性好，能满足临床应用的需求。

为实现这样的目的，在本发明的技术方案中，以临床常用磁共振造影剂——马根维显为基础，以人工肺表面活性剂——二棕榈酰磷脂酰胆碱为主要成分，通过添加磷脂、表面活性剂、助表面活性剂、稳定剂、肺泡铺展剂等，通过高速乳化技术，制备含有马根维显的乳剂。同时，以聚乙二醇来修饰该乳剂，使得乳剂具有长循环性，最终实现对肺部疾病的成像功能。

本发明的方法包括如下步骤：

a.在质量份数为2000份的水中，加入1000～10000份的马根维显溶液，搅拌后，加入50～200份的二棕榈酰磷脂酰胆碱，5～40份的甲氧基聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(mPEG-DSPE)，20～80份磷脂，10～50份表面活性剂，10～50份助表面活性剂，10～50份稳定剂；

b.在室温下磁力搅拌，搅拌至无明显块状物；

c.在b所得的乳液中加入质量份数为50～200份的肺泡铺展剂，继续搅拌；

d.将c所得混合液用匀浆机间歇搅拌，再静置离心去除沉淀，即得到含有马根维显的乳剂。

优选地，上述的磷脂为大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂、氢化卵磷脂、氢化大豆磷脂酰胆碱、氢化蛋磷脂酰胆碱、二月桂酰磷脂酰胆碱、二肉豆寇酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱、1-肉豆寇酰-2-棕榈酰磷脂酰胆碱、1-棕榈酰-2-硬脂酰磷脂酰胆碱、1-硬脂酰-2-棕榈酰磷脂酰胆碱、1-棕榈酰-2-油酰磷脂酰胆碱、1-硬脂酰-2-亚油酰磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰胆碱中的至少一种。

优选地，上述的表面活性剂为透明质酸(HA)、十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)、十二烷基三甲基溴化铵(DTAB)、双十八烷基二甲基溴化铵(DODMAB)、十二烷基硫酸钠(SDS)、十二烷基磺酸钠(SDS)、四丁酚醛(Tyl)、十二烷基苯磺酸钠(SDBS)、聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X-100)、聚氧乙烯山梨醇酐单油酸酯(Tu-80)、山梨醇酐单硬脂酸酯(Span60)、椰油脂肪酸二乙醇酰胺(6501)、脂肪醇聚氧乙烯醚(AEO-9)、月桂醇聚氧乙烯醚(Brij-35)、聚氧乙烯80-聚氧丙烯30-聚氧乙烯80(Pluronic F68)、聚氧乙烯100-聚氧丙烯70-聚氧乙烯100(Pluronic F127)、聚氧乙烯20-聚氧丙烯70-聚氧乙烯20(Pluronic P123)中的一种。

优选地，上述的助表面活性剂为单元醇或多元醇，如丙三醇、正丁醇、正己醇、正辛醇、丁二醇、十二醇、十六醇中的至少一种。

优选地，上述的稳定剂为司班80、司班60、吐温80、生育酚中的至少一种。

优选地，上述的肺泡铺展剂为全氟环醚(FC-77)、全氟辛基溴(PFOB)、全氟萘烷(PFD)、全氟甲基环已基哌啶(PFMHP)、全氟三丙胺(FC-3283)中的一种。

优选地，上述步骤b中，室温下磁力搅拌时间为40分钟以上，更好的，为40～80分钟。

优选地，上述步骤c中，室温下磁力搅拌时间为20分钟以上，更好的，为20～40分钟。

优选地，上述步骤d中，匀浆机间歇搅拌至少1小时以上，更好的，为1～3小时；搅拌速率600r/min～1000r/min。

与现有技术相比，本发明具有如下的有益效果：

本发明的优点在于技术制备方法简单，所得的产物稳定性好，制备的乳剂具有稳定气道，降低肺泡表面张力，免疫调节的作用，并且使磁共振造影剂通过肺部给药的方式进入人体，避免了注射给药带来的诸多不便，能满足许多临床应用的需求。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。以下实施例将有助于本领域的技术人员进一步理解本发明，但不以任何形式限制本发明。应当指出的是，对本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进。这些都属于本发明的保护范围。

实施例1

a.在质量份数为2000份的水中，加入1000份马根维显溶液，搅拌后，加入50份二棕榈酰磷脂酰胆碱，5份mPEG2000-DSPE，20份蛋黄卵磷脂，10份四丁酚醛，10份十六醇，10份甘油；

b.在室温下磁力搅拌40分钟，搅拌至无明显块状物；

c.在b所得的乳液中加入质量份数为50份的FC-77，继续搅拌40分钟；

d.将c所得混合液用匀浆机间歇搅拌1小时，搅拌速率600r/min～1000r/min，再静置离心去除沉淀，即可得到含有马根维显的乳剂。

检测结果：稀释后进行磁共振检测，信号强度为5680；其表面张力约为36mN/m。

实施例2

a.在质量份数为2000份的水中，加入2000份马根维显溶液，搅拌后，加入80份二棕榈酰磷脂酰胆碱，10份mPEG4000-DSPE，40份蛋黄卵磷脂，20份透明质酸，20份正己醇，20份甘油；

b.在室温下磁力搅拌80分钟，搅拌至无明显块状物；

c.在b所得的乳液中加入质量份数为80份的FC-77，继续搅拌40分钟；

d.将c所得混合液用匀浆机间歇搅拌3小时，搅拌速率600r/min～1000r/min，再静置离心去除沉淀，即可得到含有马根维显的乳剂。

检测结果：稀释后进行磁共振检测，信号强度为5376；其表面张力约为33mN/m。

实施例3

a.在质量份数为2000份的水中，加入4000份马根维显溶液，搅拌后，加入120份二棕榈酰磷脂酰胆碱，20份mPEG4000-DSPE，50份二油酰磷脂酰胆碱，30份透明质酸，30份正己醇，30份甘油；

b.在室温下磁力搅拌60分钟，搅拌至无明显块状物；

c.在b所得的乳液中加入质量份数为120份的FC-77，继续搅拌30分钟；

d.将c所得混合液用匀浆机间歇搅拌2小时，搅拌速率600r/min～1000r/min，再静置离心去除沉淀，即可得到含有马根维显的乳剂。

检测结果：该乳剂具有稳定气道，降低肺泡表面张力，免疫调节的作用，稀释后进行磁共振检测，信号强度为5049；其表面张力约为32mN/m。

实施例4

a.在质量份数为2000份的水中，加入8000份马根维显溶液，搅拌后，加入160份二棕榈酰磷脂酰胆碱，30份mPEG2000-DSPE，60份大豆卵磷脂，40份四丁酚醛，40份正辛醇，40份甘油；

b.在室温下磁力搅拌50分钟，搅拌至无明显块状物；

c.在b所得的乳液中加入质量份数为160份的PFOB，继续搅拌25分钟；

d.将c所得混合液用匀浆机间歇搅拌1.5小时，搅拌速率600r/min～1000r/min，再静置离心去除沉淀，即可得到含有马根维显的乳剂。

检测结果：稀释后进行磁共振检测，信号强度为4934；其表面张力约为29mN/m。

实施例5

a.在质量份数为2000份的水中，加入10000份马根维显溶液，搅拌后，加入200份二棕榈酰磷脂酰胆碱，40份mPEG4000-DSPE，80份大豆卵磷脂，50份透明质酸，50份十二醇，50份甘油；

b.在室温下磁力搅拌70分钟，搅拌至无明显块状物；

c.在b所得的乳液中加入质量份数为200份的PFOB，继续搅拌35分钟；

d.将c所得混合液用匀浆机间歇搅拌2.5小时，搅拌速率800r/min，再静置离心去除沉淀，即可得到含有马根维显的乳剂。

检测结果：稀释后进行磁共振检测，信号强度为4409；其表面张力约为30mN/m。

以上对本发明的具体实施例进行了描述。需要理解的是，本发明并不局限于上述特定实施方式，本领域技术人员可以在权利要求的范围内做出各种变形或修改，这并不影响本发明的实质内容。

Claims (10)

1.一种用于肺部磁共振成像乳剂的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤：

a.在质量份数为2000份的水中，加入1000～10000份的马根维显溶液，搅拌后，加入50～200份的二棕榈酰磷脂酰胆碱，5～40份的甲氧基聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺，20～80份磷脂，10～50份表面活性剂，10～50份助表面活性剂，10～50份稳定剂；

b.在室温下磁力搅拌，搅拌至无明显块状物；

c.在b所得的乳液中加入质量份数为50～200份的肺泡铺展剂，继续搅拌；

d.将c所得混合液用匀浆机间歇搅拌，再静置离心去除沉淀，即得到含有马根维显的乳剂。

2.根据权利要求1所述的一种用于肺部磁共振成像乳剂的制备方法，其特征在于所述的磷脂为大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂、氢化卵磷脂、氢化大豆磷脂酰胆碱、氢化蛋磷脂酰胆碱、二月桂酰磷脂酰胆碱、二肉豆寇酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱、1-肉豆寇酰-2-棕榈酰磷脂酰胆碱、1-棕榈酰-2-硬脂酰磷脂酰胆碱、1-硬脂酰-2-棕榈酰磷脂酰胆碱、1-棕榈酰-2-油酰磷脂酰胆碱、1-硬脂酰-2-亚油酰磷脂酰胆碱或二油酰磷脂酰胆碱中的至少一种。

3.根据权利要求1所述的一种用于肺部磁共振成像乳剂的制备方法，其特征在于所述的表面活性剂为透明质酸HA、十六烷基三甲基溴化铵CTAB、十二烷基三甲基溴化铵DTAB、双十八烷基二甲基溴化铵DODMAB、十二烷基硫酸钠SDS、十二烷基磺酸钠SDS、四丁酚醛Tyl、十二烷基苯磺酸钠SDBS、聚乙二醇辛基苯基醚Triton X-100、聚氧乙烯山梨醇酐单油酸酯Tu-80、山梨醇酐单硬脂酸酯Span60、椰油脂肪酸二乙醇酰胺6501、脂肪醇聚氧乙烯醚AEO-9、月桂醇聚氧乙烯醚Brij-35、聚氧乙烯80-聚氧丙烯30-聚氧乙烯80、聚氧乙烯100-聚氧丙烯70-聚氧乙烯100、聚氧乙烯20-聚氧丙烯70-聚氧乙烯20中的一种。

4.根据权利要求1所述的一种用于肺部磁共振成像乳剂的制备方法，其特征在于所述的助表面活性剂为单元醇或多元醇。

5.根据权利要求4所述的一种用于肺部磁共振成像乳剂的制备方法，其特征在于所述的助表面活性剂为丙三醇、正丁醇、正己醇、正辛醇、丁二醇、十二醇、十六醇中的至少一种。

6.根据权利要求1所述的一种用于肺部磁共振成像乳剂的制备方法，其特征在于所述的稳定剂为司班80、司班60、吐温80、生育酚中的至少一种。

7.根据权利要求1所述的一种用于肺部磁共振成像乳剂的制备方法，其特征在于所述的肺泡铺展剂为全氟环醚FC-77、全氟辛基溴PFOB、全氟萘烷PFD、全氟甲基环已基哌啶PFMHP、全氟三丙胺FC-3283中的一种。

8.根据权利要求1-7任一项所述的一种用于肺部磁共振成像乳剂的制备方法，其特征在于上述步骤b中，室温下磁力搅拌时间为40分钟以上。

9.根据权利要求1-7任一项所述的一种用于肺部磁共振成像乳剂的制备方法，其特征在于上述步骤c中，室温下磁力搅拌时间为20分钟以上。

10.根据权利要求1-7任一项所述的一种用于肺部磁共振成像乳剂的制备方法，其特征在于上述步骤d中，匀浆机间歇搅拌至少1小时以上。