CN104039339B - 肽类化合物作为神经递质分泌抑制剂 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种式(I)所示结构的肽类化合物。所述肽类化合物通过抑制神经递质的分泌和肌肉收缩来治疗皱纹和脸部不对称。

Description

肽类化合物作为神经递质分泌抑制剂
相关申请的交叉引用
本专利申请要求于2011年11月7日提交的美国临时专利申请号61/556,538的优先权，该临时专利申请的公开内容以引用方式并入于此。
技术领域
本发明涉及肽类化合物，具体是一种通过抑制神经递质的分泌和肌肉收缩来治疗皱纹的肽类化合物。
背景技术
除皱的抗衰老的产品具有广阔的市场前景，因为很多顾客希望可以保持皮肤年轻光滑。由于运用化妆品可以有效地治疗脸部的表情线皱纹，从而吸引了众多的顾客和化妆品研发人员的开发新产品的强烈兴趣。
表情线皱纹是面部皮肤的典型皱纹，过多的表情线皱纹是影响年轻面孔外观的主要问题。表情线的形成与表情肌有关，该类肌肉在微笑、眯眼睛和皱眉等活动时对皮肤施加了很大的牵扯力，从而造成表情线皱纹过多。面部肌肉的所有活动都是由某些神经递质(例如乙酰胆碱)控制的，有些物质是可以抑制神经递质的释放。将这些物质应用于一些化妆品中，就可以起到抗皱作用，阻止过多的表情线皱纹产生。
肉毒杆菌毒素A就是这样一类被常用来抑制乙酰胆碱分泌，阻止表情线皱纹产生的活性成分。该类化合物的作用机理是附着在控制乙酰胆碱分泌的神经元蛋白SNAP-25上，抑制分泌乙酰胆碱。但是使用肉毒杆菌毒素A来治疗和美容非常昂贵，并且需要反复注射，而且可能引起顾客的自身免疫反应。
在相关专利中已经对该项研究进行报道，U.S.Pat.No.6,169,074中Montal等人，报道了多肽的组合物调节络合物的神经肌肉功能；在U.S.Pat.No.6,866,856中Lu等人，阐述了柠檬苦素类似物(柑橘类的水果生物碱提取物)在肌肉上调节乙酰胆碱的分泌；授权给贝尔弗的美国专利7566464讲解了一种可以改进人脸的表情纹表象的皮肤保健组分，该组分包括一种桂圆菊提取物，基于所谓的加强真皮与抑制和表情纹有关肌肉之间的协同，该提取物能迅速放松已收缩的肌肉并抑制面部表情肌的功效。
再进一步，在U.S.Pat.No.7,015,192中Blanes等人发现从SNAP-25蛋白中衍生的N末端多肽能够在SNARE络合物中抑制乙酰胆碱的分泌，主要的化合物分子式六肽它的生物活性可以与肉毒杆菌毒素A媲美，但却无风险，无需注射，低成本。
外用化妆品试剂中有效成分的皮肤渗透率和渗透深度直接决定该有效成分的剂量。由于多肽是以两性离子形式存在，不宜渗透皮肤，因而降低了它们的有效性。因此，对多肽的结构进行改造，使改造后的多肽有较高的皮肤细胞渗透能力，成为解决这一问题的主要策略。
因此，有必要寻找一种以非带电形式作用于皮肤的多肽类化合物，通过抑制神经递质的分泌和肌肉收缩，以达到治疗皱纹的目的。
发明内容
根据本发明的一个方面：提供一种具有式(Ⅰ)结构特征的多肽类化合物或者其药学和化妆品上可接受的盐或代谢物或其前药分子：
其中R1任选自C1-C6烷基；R2和R3任选自：氢，R11，-CH2OC(O)R12，或-CH2OC(O)OR13；R4,R5,R6和R7任选自：氢，-C(O)OR11，-CH2OC(O)R12，-CH2OC(O)OR11，或–C(O)OCH2OC(O)R12；R11任选自C2-C10烷基；R12任选自C1-C10烷基；R13任选自C2-C10烷基；并且R4,R5,R6和R7至少一个不是氢。
在其中一个实施例中，式(Ⅰ)中所述R1为甲基。
在其中一个实施例中，式(Ⅰ)中所述R1为甲基，R2和R3为氢。
在其中一个实施例中，式(Ⅰ)中所述R1选自甲基；R2和R3为R11。
在其中一个实施例中，式(Ⅰ)中R4,R5,R6和R7由-C(O)OR11，-CH2OC(O)R12，-CH2OC(O)OR11，和C(O)OCH2OC(O)R12组成的组中选出。
在其中一个实施例中，式(Ⅰ)中R4和R5由-C(O)OR11，-CH2OC(O)R12，-CH2OC(O)OR11，和C(O)OCH2OC(O)R12组成的组中选出。
在其中一个实施例中，式(Ⅰ)中R6和R7由-C(O)OR11，-CH2OC(O)R12，-CH2OC(O)OR11，和C(O)OCH2OC(O)R12组成的组中选出。
在其中一个实施例中，式(Ⅰ)中R4和R5由-C(O)OR11，-CH2OC(O)R12，-CH2OC(O)OR11，和C(O)OCH2OC(O)R12组成的组中选出，R2？R3为氢。
在其中一个实施例中，式(Ⅰ)中R6和R7由-C(O)OR11，-CH2OC(O)R12，-CH2OC(O)OR11，和C(O)OCH2OC(O)R12组成的组中选出，R2？R3为R11。
在其中一个实施例中，式(Ⅰ)中R6和R7由-C(O)OR11，-CH2OC(O)R12，-CH2OC(O)OR11，和C(O)OCH2OC(O)R12组成的组中选出，R2和R3为氢。
在其中一个实施例中，式(Ⅰ)中R6和R7由-C(O)OR11，-CH2OC(O)R12，-CH2OC(O)OR11，和C(O)OCH2OC(O)R12组成的组中选出，R2和R3为R11。
根据本发明的一个方面：还提供一种化妆品组合物，所述化妆品组合物包括具有式(Ⅰ)结构的多肽类化合物以及美容上可接受的佐剂，使用一定有效量的所述妆品组合物可以用于治疗面部皱纹或面部不对称。
在其中一个实施例中，所述化妆品组合物可进一步包含至少一种安全且有效量的护肤活性物质，所述护肤活性物质选自抗氧化剂、抗炎剂、皮下基质前体、皮肤循环促进剂、维生素、保湿剂、皮肤软化剂、防皱剂、增白剂、植物类皮下基质促进剂、抗胆碱能类多肽、防晒剂、金属蛋白酶抑制剂和促愈剂中的一种或几种。
在其中一个实施例中，所述化妆品组合物可进一步包含可接受的惰性基质，所述可接受的惰性基质选自凝胶剂，洗剂，霜剂，血清，糊剂，填料和透皮贴剂的中的一种或多种。
在其中一个实施例中，所述护肤活性物质可能是一种抗氧化抗炎剂，所述抗氧化抗炎剂可以从包括番茄红素和绿茶提取物组中选出。
在其中一个实施例中，所述护肤活性物质可以是保湿抗炎促愈剂，保湿抗炎促愈剂可以从含有尿囊素的组分中选出。
在其中一个实施例中，所述护肤活性物质可为水解小麦蛋白。
在其中一个实施例中，所述护肤活性物质可以是胶原蛋白的真皮层基质物质，所述胶原蛋白的真皮层基质物质从含有海洋胶原蛋白的组分中选出。
根据本发明的另一个方面，还提供一种制备式(I)所示化合物的方法，该方法可以包括下述步骤：1)制备氨基酸保护剂；2)使用树脂或与树脂连接的肽与所述氨基酸保护剂进行联接，3)从所述树脂上释放所述化合物。
经过对下面附图及技术技术方案的详细说明，本发明进一步的形式、实施例、特征、优点、效果和优点会更清楚地体现出来。
附图说明
图1-3是本发明实验6的HPLC曲线；
图4-7是本发明实验7的HPLC曲线；
图8-10是本发明实验8的HPLC曲线。
在继续进行详细的描述之前，应当理解的是，以下的详细描述仅仅是示例性的，不是用来限定本发明或本申请及其用途。在这方面，应进一步理解为，所描述的实施例不限于将式(Ⅰ)中的化合物，仅和这里所述的特定类型的化妆组分一起使用。
因此，虽然为了便于说明本发明的技术方案，在一些实施例中进行了详细说明，但可以理解，它还可以各种其它实施例及其等同方式来实现。
具体实施方式
本发明专利是关于在皮肤渗透最适宜的条件下，运用多肽类化合物抑制乙酰胆碱的分泌，还包含该类化合物安全有效剂量的化妆品配方，主要用于治疗面部皱纹。
式I多肽类化合物或者其药学和化妆品上可接受的盐或代谢物或其前体或衍生物如下：
R1任选自C1-C6烷基；R2和R3任选自氢，R11，-CH2OC(O)R12，-CH2OC(O)OR13；R4,R5,R6和R7任选自氢，-C(O)OR11，-CH2OC(O)R12，-CH2OC(O)OR11，–C(O)OCH2OC(O)R12；其中R11任选自C2-C10烷基；R12任选自C1-C10烷基；R13任选自C2-C10烷基；并且R4,R5,R6和R7至少一个不是氢。
这里所用术语具有下面所示的含义。
本发明中所有氨基酸的缩写都严格按照IUPAC的命名规则。例如，Gly意指NH2-CH2-C(O)OH，Gly-意指NH2-CH2-C(O)-，Gly意指-NH-CH2-C(O)OH和-Gly-意指-NH-CH2-C(O)-。Ac-意指(CH3-C(O)-
所用的术语“氢”意指单一氢原子，氢自由基附着在碳原子或氧原子上形成化合物。本发明所用术语“烷基”意指包括具有特定碳原子数目的支链的和直链的饱和脂肪烃基。例如，“C1-C5烷”中“C1-C5”的定义包括以直链或支链排列的具有1、2、3、4或5个碳原子的基团。例如，“C1-C5烷基”具体包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、戊基等。
所用的术语“烷氧基”代表通过氧桥连接的指明数目的碳原子的环状的或非环状的烷基。因此“烷氧基”包括上述烷基和环烷基的定义。所用的术语“Ac-”意指(CH3-C(O)-)；所用的术语“acyl”意指-C(O)R，该处的R是芳基或脂肪族基团；所用的术语“alkoxy”意指-O-R，该处的R是烷基，也就是甲基、乙基、丙基、丁基和戊基；所用的术语“Bu-t”意指t-butyl，也就是叔丁基；所用的术语“Boc”意指t-butyloxycarbonyl，也就是叔丁氧羰基；所用的术语“Fmoc”意指fluorenylmethyloxycarbonyl，也就是芴甲氧羰基。
所用的术语“包含”意指没有固定限度，即包括所指的组分，但并不排除其它元素。
所用的术语“添加的护肤活性物质”意指从抗氧化剂、抗炎剂、皮下基质前体、皮肤循环促进剂、维生素、保湿剂、皮肤软化剂、防皱剂、增白剂、植物类皮下基质促进剂、抗胆碱能类多肽、防晒剂、金属蛋白酶抑制剂和促愈剂中挑选的皮肤活性成分中选出的，以安全有效剂量添加到化妆品配方中。添加的根据是为提高化妆品配方的最终疗效。添加的护肤活性成分的分类是按照作用方式决定，不排除有的活性成分具有多种作用机理。添加的护肤活性成分包括但并不限于：海洋胶原蛋白、尿囊素、水解麦类蛋白、绿茶提取物、Centellaasiatica、维生素B5、番茄红素、超氧(化)物歧化酶、透明质酸；还包含其它活性成分：维生素K、Juglansregia种子提取物、Fagussylvatica茎提取物、水仙花提取物、百合花提取物、酵母提取物和卵磷脂。
所用的术语“药学和化妆品上可接受的盐”意指化妆品上应用的，即包含生成的金属盐，也包含通过添加自由酸或碱，只要是药学上可以接受的即可，采用方便的方法运用无机或有机的酸碱反应生成。
化合物主要用于治疗和去除皱纹，化妆品的配方可以包含最少一种活性化合物和最少一种化妆品上可以接受的添加物质。可添加的活性物质从抗氧化剂、抗炎剂、皮下基质前体、皮肤循环促进剂、维生素、保湿剂、皮肤软化剂、防皱剂、增白剂、植物类皮下基质促进剂、抗胆碱能类多肽、防晒剂、金属蛋白酶抑制剂和促愈剂中挑选的皮肤活性成分中选出。
化妆品配方还包含一种可接受的基质成分，所述可接受的基质成分从凝胶、乳液、乳霜、糨糊、填装物和透皮剂组成的组中选出。。化合物需要一种介质，用于连接化合物和人体。需要添加的活性成分有效剂量是由多种因素决定的，包括年龄和接受治疗的人的整体状况、皱纹的严重程度、使用的方法和频率和所选的化合物。化合物以合适的形式使用，包含固体、液体或半固体。
除在文献中已知的或在实验程序中例证的标准方法外，可采用如下列方案中显示的反应制备本发明化合物。因此，下列说明性方案是为说明的目的而不是局限于所列化合物或任何特定的取代基。方案中显示的取代基数目并不必需符合权利要求中所用的数目，且为清楚起见，显示单取代基连接到在上文中式I的定义下允许有多取代基的化合物上。所采用的溶剂要能够溶解原料和反应试剂，溶剂的溶解能力会影响反应的进程，这主要取决于反应条件，包括温度、压力以及周围的气体情况。原料都是商品化的或能够被合成的。在必要的情况下，保护基的方法可以被采用，比如有超过一个基团存在，可以用于保护不参与反应的基团。保护基可能已经在反应前体中存在，用于保护不参与非预期的二级反应。保护基的应用方法都参照标准的出版物，例如J.F.W.McOmie,ProtectiveGroupsinOrganicChemistry,PlenumPress,LondonandNewYork(1973)；T.W.GreeneandP.G.M.Wuts,ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis,3rdedition,JohnWileyandSons(1999)；E.GrossandJ.MeienhoferThePeptides,Volume3,AcademicPress,LondonandNewYork(1981)；H.Weyl,MethodenderOrganischenChemie(MethodsofOrganicChemistry),4thedition,Volume15/1,GeorgThiemeVerlag,Stuttgart(1974)；H.-D.JakubkeandH.Jescheit,Peptide,Protein(AminoAcids,Peptides,Proteins),VerlagChemie,Weinheim,DeerfieldBeach,andBasel(1982)；andinJochenLehmann,ChemiederKohlenhydrate:MonosaccharideundDerivate(ChemistryofCarbohydrates:MonosaccharidesandDerivatives),GeorgThiemeVerlag,Stuttgart(1974)。
其它的合成方法和合成前体都是化学研究者的常识。合成方法参照R.Larock,ComprehensiveOrganicTransformations,VCHPublishers(1989)；L.FieserandM.Fieser,FieserandFieser'sReagentsforOrganicSynthesis,JohnWileyandSons(1994)；A.KatritzkyandA.Pozharski,HandbookofHeterocyclicChemistry,2ndedition(2001)andL.Paquette,editor,EncyclopediaofReagentsforOrganicSynthesis,JohnWileyandSons(1995)andsubsequenteditions等书。化合物可以通过传统的固相合成法采用Fmoc和Boc的保护下，在Rink-amideresins上完成。化合物也可以通过传统的液相合成法完成，要特别采用多个保护基来完成各个偶联反应。
所示式(I)中化合物可以通过固相合成法和液相合成法来完成。
方案1
式(I)中化合物可采用在Fmoc保护下，通过固相合成法在Rink-amideresins上合成的，具体过程见方案1。所需的合成原料都是市售或者本领域技术人员根据文献描述的方法人工合成得到，偶联和去保护的反应条件都根据反应试剂选择。每个反应的进程都应用合适的分析方法进行跟踪。最后的去保护步骤包括一般的去保护，但不包括从Rink-amideresin上切分。最终产物的纯化是通过制备HPLC来完成，也可采用其它一般纯化方法。
式(I)中化合物可采用一般的液相合成方法完成，具体步骤见方案2。PG1,PG4,andPG5都是非常合适的保护基。虽然方案2的合成中采用了特殊的偶联方法和去保护方法，但其它方法也可以采用。
方案2
方案3
一种特殊的实施例-化合物A的合成方法可按照方案3的合成路线进行合成。虽然合成中采用了特殊的偶联方法和去保护方法，但其它方法也可以采用。
方案4
方案4所示反应式提供了另一种特殊的式(I)中化合物合成方法，其中R2和R3是同一个基团选自R11，-CH2OC(O)R12，或-CH2OC(O)OR13，而R4,R5,R6和R7是同一个基团选自-C(O)OR11,-CH2OC(O)R12。从改造相应的多肽类似物开始，第一步可能是运用R2的酯化反应，第二步是运用同一个R4来保护氨基，最后获得化合物B。具体反应都列于反应式中，不再作具体描述。
1HNMR图谱：
除有另外说明，所有的1HNMR图谱都是在VarianseriesMercury300,400MHz仪器或BrukerseriesAV300,400MHz仪器上侧得，所有的氢都以ppm表示，以四甲基硅(TMS)或其它的试剂作为相应溶剂的内标。
HPLC条件：
条件A：
分析柱：BostonCrestODS,4.6×250mm,5μm
溶剂A：0.1％三氟醋酸/乙氰
溶剂B：0.1％三氟醋酸/水
梯度：
流速：1.0mL/min
波长：220nm
体积：20μL
条件B：
分析柱：VYDAC-C18,4.6×250mm,5μm
溶剂A：0.1％三氟醋酸/乙氰
溶剂B：0.1％三氟醋酸/水
梯度：
流速：1.0mL/min
波长：220nm
体积：5μL
条件C：
分析柱：120A-C18,4.6×250mm,5μm
溶剂A：0.1％三氟醋酸/乙氰
溶剂B：0.1％三氟醋酸/水
梯度：
流速：1.0mL/min
波长：215nm
体积：20μL
条件D：
分析柱：Nova-PakC18,3.9×150mm
溶剂A：0.1％三氟醋酸/乙氰
溶剂B：0.1％三氟醋酸/水
梯度：
流速：1.0mL/min
波长：220nm
体积：20μL
HEK293细胞分析：
人体胚胎肾细胞293(HEK293)可在悬浮液中培养。收集HEK293细胞后，在分析前用PBS缓冲液清洗细胞三次。
多肽类化合物的储存原液可以用DMSO或PBS缓冲液配成。其它溶液或溶剂也可以用于溶解多肽类化合物，用于细胞分析。
分析步骤：
1、将1.0×106HEK293细胞与100μLPBS缓冲液混合；
2、加入10μL储存在DMSO或PBS液体中的多肽类化合物，使溶液的最终浓度为原溶液的十分之一；
3、在37℃下，将得到的混合物分别进行培养3,5,10,20,或30分钟；
4、通过离心将细胞移走；
5、收集大约20μL上清液，运用HPLC系统(125solventmodule,SystemGold,Beckman,CA,USA)进行分析，反相HPLC柱为3.9×150Nova-PakC18,Waters,MA,USA，多肽峰可在220nm(DiodeArrayDetectormodule168,Beckman,CA,USA)下检测到。
式(I)所示化合物的合成方法已经在方案1-4中列出，化合物也可能采用其它方法合成。以下通过具体实施例对本发明做进一步的阐述。
实施例1
化合物1Ac-Glu(OMe)-Glu(OMe)-Met-Gln-Arg-Arg-NH2的合成方法具体如下：
方法A:
步骤1：甲醇盐酸的制备
在搅拌下，(800μL)乙酰氯滴加到(5.0mL)甲醇。滴加完毕，再继续在室温下搅拌5分钟。
步骤2：:Ac-Glu(OMe)-Glu(OMe)-Met-Gln-Arg-Arg-NH2的制备
向(90mg)化合物2,Ac-Glu-Glu-Met-Gln-Arg-Arg-NH2的甲醇溶液中，加入第一步骤得到的(1.0mL)甲醇盐酸。滴加完毕，再继续在室温下搅拌2小时。在室温下冷冻干燥，得到(90mg)白色无定型的化合物1，Ac-Glu(OMe)-Glu(OMe)-Met-Gln-Arg-Arg-NH2，MSm/z918[M+1]。
方法B：
此外，化合物1,Ac-Glu(OMe)-Glu(OMe)-Met-Gln-Arg-Arg-NH2可根据方案1合成。通过HPLC条件A分析，上述两中方法所产生的化合物1的保留时间是大约10.2分钟，产品的纯度为大约98.8％，MSm/z918[M+1]。
化合物1如果通过HPLC条件B分析的，产品的保留时间是大约14.7分钟，产品的纯度是大约91.6％，MSm/z918[M+1]。
实施例2
化合物3Ac-Glu(OMe)-Glu(OMe)-Met-Gln-Arg(Boc)2-Arg(Boc)2-NH2的合成方法：
化合物3Ac-Glu(OMe)-Glu(OMe)-Met-Gln-Arg(Boc)2-Arg(Boc)2-NH2是白色无定型化合物，根据方案1合成。当通过HPLC条件C分析时，产品的保留时间是大约28.4分钟，产品的纯度大约为97.1％，MSm/z1319[M+1]。
实施例3
化合物4Ac-Glu(OBu-t)-Glu(OBu-t)-Met-Gln-Arg(Boc)2-Arg(Boc)2-NH2的合成方法：
白色无定型的化合物4,Ac-Glu(OBu-t)-Glu(OBu-t)-Met-Gln-Arg(Boc)2-Arg(Boc)2-NH2,是通过方案1合成的，MSm/z1402[M+1]。
实施例4
化合物5Ac-Glu(OMe)-Glu(OMe)-Met-Gln-Arg(Ac)2-Arg(Ac)2-NH2的合成方法：
白色无定型的化合物5,Ac-Glu(OMe)-Glu(OMe)-Met-Gln-Arg(Ac)2-Arg(Ac)2-NH2,是从化合物1中合成的，按照方案4中提供的方法。酰化反应的条件是化合物1在5％的乙酸酐和6％二甲基吡啶在作用下，在DMF中反应30分钟。反应粗产品通过制备HPLC纯化，MSm/z1086[M+1]。
实施例5
化合物6Ac-Glu(OPr-i)-Glu(OPr-i)-Met-Gln-Arg-Arg-NH2的合成方法：
化合物6是按照实施例1中的方法合成的，相关试剂和反应前体进行变动，MSm/z974[M+1]。
实施例6
化合物2的生物代谢评价：
将化合物2用PBS缓冲液溶解，制备溶度为1mg/ml的原液1。取20μL原液用HPLC条件D进行分析，所得结果见图1。化合物2的HPLC保留时间是大约7.7分钟。
将10μL化合物2的原液1与1.0×106HEK293细胞混合10分钟，参见以上细胞分析方法。运用HPLC条件D进行分析所得结果见图.2-3，图3是图2放大版。
根据图2-3可以看出，在与HEK293细胞混合后，化合物2降解成至少2个片段，保留时间分别是大约6.3分钟和大约8.9分钟，
实施例7
化合物3生物降解的评价：
制备化合物3的DMSO原液2(1mg/mL)，取10μL化合物3的原液2与1.0×106HEK293细胞一起培养5分钟，详细步骤参见以上HEK293细胞分析步骤。运用HPLC条件D测得的结果见图4-5，图5是图4的放大版。
从图4-5可以看出，在与HEK293细胞一起培养5分钟后，化合物3不完全代谢降解。部分化合物3仍然可见，其HPLC保留时间是18.5分钟。降解的化合物3产生两个明显的降解片段，其HPLC保留时间分别是大约6.3分钟和大约8.9分钟。显然化合物3的降解产物与化合物2的降解产物一致，而且化合物3在HEK293作用下并没有产生明显化合物2的中间体。可能的原因是，化合物2降解成两个片段的速率要比化合物3降解成化合物2快。
按照以上描述的HEK293细胞试验步骤，将10μL化合物3的原液与1.0×106HEK293细胞培养进一步至10分钟。运用HPLC方法D进行分析，所得结果见图6-7，图7是图6的放大版。
从图6-7可以看出，在化合物3与HEK293细胞混合10分钟后，化合物3完全降解。其代谢产物降解成两个大的片段，保留时间分别为大约6.3分钟和大约8.9分钟。
根据以上结果可以得出结论，化合物3与化合物2按照同样的模式进行降解。
实施例8
化合物1的生物降解评价：
制备化合物1的PBS原液3(1mg/mL)。将原液1(10μL)和原液3(10μL)混合，并运用HPLC方法D进行分析。分析结果见图8，化合物1的保留时间是10.2分钟而化合物2的保留时间是7.7分钟。
按照以上描述的HEK293细胞试验步骤，将10μL原液3与1.0×106HEK293细胞一起混合3分钟，分析结果见图9。在与HEK293细胞培养3分钟后，化合物1降解为化合物2并产生至少一个新片断，保留时间大约为7.0分钟。
按照以上描述的HEK293细胞试验步骤，将10μL原液3与1.0×106HEK293细胞混合一起至30分钟，分析结果见图10。
在与HEK293细胞混合30分钟后，化合物1完全降解为至少一个新片断，保留时间大约为7.0分钟。在30分钟反应中，没有化合物2被检测到。
通过比较实验6和8的实验结果，可以看出化合物2与化合物1的降解方式并不相同。

Claims (16)

1.具有式(Ⅰ)结构特征的化合物：
或者其药学和化妆品上可接受的盐或代谢物或其前药分子，
其中R1为甲基；
R2和R3任选自：
氢，
R11，
-CH2OC(O)R12，或
-CH2OC(O)OR13；
R4,R5,R6和R7任选自：
氢，
-C(O)OR11，
-CH2OC(O)R12，
-CH2OC(O)OR11，或
–C(O)OCH2OC(O)R12；
R11任选自C2-C10烷基；R12任选自C1-C10烷基；R13任选自C2-C10烷基；并且R4,R5,R6和R7至少一个不是氢。
2.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于：所述R2和R3为氢。
3.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于：所述R2和R3为R11。
4.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于：所述R4，R5，R6和R7选自-C(O)OR11，-CH2OC(O)R12，-CH2OC(O)OR11和–C(O)OCH2OC(O)R12。
5.根据权利要求3所述的化合物，其特征在于：所述R4和R5至少一个选自-C(O)OR11，-CH2OC(O)R12，-CH2OC(O)OR11和–C(O)OCH2OC(O)R12。
6.根据权利要求3所述的化合物，其特征在于：所述R6和R7至少一个选自-C(O)OR11，-CH2OC(O)R12，-CH2OC(O)OR11和–C(O)OCH2OC(O)R12。
7.根据权利要求4所述的化合物，其特征在于：所述R2和R3为氢。
8.根据权利要求4所述的化合物，其特征在于：所述R2和R3为R11。
9.一种含有式(I)化合物和可以接受化妆品上的附加成分的化妆品组合物，其中式(I)化合物加入的有效剂量可治疗面部皱纹和脸部不对称；
其中R1为甲基；
R2和R3任选自：
氢，
R11，
-CH2OC(O)R12，或
-CH2OC(O)OR13；
R4,R5,R6和R7任选自：
氢，
-C(O)OR11，
-CH2OC(O)R12，
-CH2OC(O)OR11，或
–C(O)OCH2OC(O)R12；
R11任选自C2-C10烷基；R12任选自C1-C10烷基；R13任选自C2-C10烷基；并且R4,R5,R6和R7至少一个不是氢。
10.根据权利要求9所述的化妆品组合物，其特征在于：还包括至少一种皮肤活性成分，所述皮肤活性成分从抗氧化剂、抗炎剂、皮下基质前体、皮肤循环促进剂、维生素、保湿剂、皮肤软化剂、防皱剂、增白剂、植物类皮下基质促进剂、抗胆碱能类多肽、防晒剂、金属蛋白酶抑制剂和促愈剂的组中选出。
11.根据权利要求9所述的化妆品组合物，其特征在于：还包括可接受的基质成分，所述可接受的基质成分从凝胶、乳液、乳霜、糨糊、填装物和透皮剂组成的组中选出。
12.根据权利要求10所述的化妆品组合物，其特征在于：所述皮肤活性成分是一种抗氧化剂，该抗氧化剂从含有番茄红素和绿茶提取物的组分中选出。
13.根据权利要求10所述的化妆品组合物，其特征在于：所述皮肤活性成分是一种保湿剂，该保湿剂从含有尿囊素的组分中选出；
14.根据权利要求10所述的化妆品组合物，其特征在于：所述皮肤活性成分是皮下基质前体，所述胶皮下基质前体从含有海洋胶原蛋白的组分中选出。
15.一种制备式(I)所示化合物的方法：
其中R1为甲基；
R2和R3任选自：
氢，
R11，
-CH2OC(O)R12，或
-CH2OC(O)OR13；
R4,R5,R6和R7任选自：
氢，
-C(O)OR11，
-CH2OC(O)R12，
-CH2OC(O)OR11，或
–C(O)OCH2OC(O)R12；
R11任选自C2-C10烷基；R12任选自C1-C10烷基；R13任选自C2-C10烷基；并且R4,R5,R6和R7至少一个不是氢；该方法包括如下步骤：
1)制备氨基酸保护剂；
2)使用树脂或与树脂连接的肽与所述氨基酸保护剂进行联接；
3)从所述树脂上释放所述化合物。
16.根据权利要求15所述的方法，其特征在于：还包括对该化合物进行纯化的工序。
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