CN104017037A

CN104017037A - 一种井冈霉素原粉的制备方法

Info

Publication number: CN104017037A
Application number: CN201410200276.4A
Authority: CN
Inventors: 李青; 刘华梅; 杨克华; 刘荷梅; 程治国; 周莉; 邹维
Original assignee: WUHAN KERNEL BIO-TECH Co Ltd
Current assignee: WUHAN KERNEL BIO-TECH Co Ltd
Priority date: 2014-05-13
Filing date: 2014-05-13
Publication date: 2014-09-03
Anticipated expiration: 2034-05-13
Also published as: CN104017037B

Abstract

本发明公开了一种井冈霉素的制备方法：将井冈霉素发酵液高速离心去除菌丝体，离心液先用孔径为1-10μm的陶瓷微滤膜过滤，然后向滤液中按重量加入纳米二氧化硅，纳米氧化铝，热塑性丙烯酸树脂、HLB值为15-20的表面活性剂，搅拌10-30分钟，并将滤液调节pH至7.5-8.5，用截留分子量为10000-20000道尔顿的中空纤维超滤膜过滤，收集滤液，活性炭脱色后，浓缩、干燥即得。本发明能制得井冈霉素A和井冈霉素B含量高的井冈霉素原粉，同时超滤效率高，超滤膜使用寿命长，另外还具有步骤简单，生产周期短、效率高等特点。

Description

一种井冈霉素原粉的制备方法

技术领域

本发明涉及一种井冈霉素原粉的制备方法。

背景技术

井冈霉素是一种高效、安全的农用抗生素，主要用于预防水稻和小麦纹枯病，它是由吸水链霉菌井冈变种发酵制备而成。井冈霉素由A、B、C、D、E、F等组分组成，其中A组分活性最强，A、B同时存在有增效作用，而C、D、E、F等组分几无作用。

目前国内生产的井冈霉素原粉一般没有经过分离提纯，只是将发酵液进行简单过滤处理，这种方法生产的井冈霉素杂质含量高，颜色深，有效成分含量低，井冈霉素A的含量一般低于30％，只能制备低端农用产品。CN101497636A的中国专利公开了一种井冈霉素A原粉的制备方法，该方法包括过滤、离子交换、树脂吸附等步骤，最后得到75％以上含量的井冈霉素A。该方法步骤多，生产周期长，成本大，难以推广。

膜分离技术是一项新兴的高效分离技术，超滤技术是其中的一种，其基本原理是利用膜孔选择性筛分性能，以分离、提纯和浓缩物质。在超滤过程中，由于被截留的杂质如氨基酸、蛋白、多糖及大分子无机物在膜表面上不断积累，会产生浓差极化现象，当膜面杂质浓度达到某一极限时即生成凝胶层，使膜的通透性急剧下降，这使得超滤的应用受到极大程度地限制。

发明内容

本发明的目的是针对上述缺陷，提供一种步骤少、效率高、操作简单且井冈霉素A含量高的井冈霉素原粉制备方法。

上述目的是通过以下技术方案实现的：

一种井冈霉素原粉的制备方法，该方法是：将井冈霉素发酵液高速离心去除菌丝体，离心液先用孔径为1-10μm的陶瓷微滤膜过滤，然后向滤液中按重量加入0.1-0.5％的纳米二氧化硅，0.3-0.8％的纳米氧化铝，0.5-1％的热塑性丙烯酸树脂、0.1-0.5％的HLB值为15-20的表面活性剂，搅拌10-30分钟，并将滤液调节pH至7.5-8.5，用截留分子量为10000-20000道尔顿的中空纤维超滤膜过滤，收集滤液，活性炭脱色后，浓缩、干燥即得。

优选的，所述HLB值为15-20的表面活性剂为吐温20。

进一步优选的，所述高速离心的转速为10000-12000转/分。

再进一步优选的，所述中空纤维超滤膜过滤的进液口压力为0.3-0.5MPa，出液口压力为0.1-0.3MPa，流速为0.5-0.8m/s。

本发明中所使用的纳米二氧化硅颗粒粒径在7-40纳米之间，具有极其蓬松的结构，分子之间具有巨大的空隙，其比表面积在70-400m/g之间，具有极强的抗流变性与触变性功能，在本发明中用于吸附杂质和防沉淀。

纳米氧化铝具有比表面较大、孔隙率高、粒度分布均匀、分散效果好等特点，在本发明中用于吸附杂质和防沉淀。

热塑性丙烯酸树脂属于凝胶树脂，其在水中分散后，形成在水中溶胀，但实质上不溶于水的凝胶溶液。它不仅能用于吸附溶液中的杂质，还能改变溶液的流变性，使溶液更容易通过超滤膜。

HLB值为15-20的表面活性剂用于改善溶液的流变性，使其更容易通过超滤膜。

本发明的有益效果是：

1)本发明通过大量试验选择出10000-20000道尔顿的中空纤维超滤膜，通过该孔径的超滤膜正好能最大限度地除去井冈霉素发酵液中的氨基酸、蛋白、多糖及大分子无机物等杂质，获得井冈霉素A含量大于60％的井冈霉素原粉。

2)本发明获得的井冈霉素原粉中井冈霉素B的含量大于15％，明显高于CN101497636A的专利方法，该效果是意料不到的。由于该效果，导致产品的增效作用更强。

3)本发明克服了现有技术中超滤膜易堵塞导致超滤效率低，超滤膜使用寿命短等技术障碍，本发明中的超滤膜每小时可过滤150～200L料液，可连续过滤10小时以上。

4)本发明步骤简单，生产周期短，效率高。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明进行详细说明。

实施例1

一种井冈霉素原粉的制备方法，该方法是：将井冈霉素发酵液用12000转/分的转速高速离心去除菌丝体，离心液先用孔径为5μm的陶瓷微滤膜过滤，然后向滤液中按重量加入0.2％的纳米二氧化硅，0.5％的纳米氧化铝，0.8％的热塑性丙烯酸树脂、0.2％的吐温20，搅拌30分钟，并将滤液调节pH至8，用截留分子量为15000道尔顿的中空纤维超滤膜过滤，进液口压力为0.4MPa，出液口压力为0.2MPa，流速为0.6m/s，收集滤液，活性炭脱色后，减压浓缩、真空干燥，即得。

按CN103175906A的方法检测，本实施例得到的井冈霉素原粉中井冈霉素A含量为63.5％，井冈霉素B含量为15.7％，而CN101497636A中的井冈霉素A含量为76.7％，井冈霉素B含量仅为3.3％。从发酵液开始制备1Kg井冈霉素原粉，本实施例总共需要25小时，而CN101497636A总共需要3天。

另外，与用孔径为5μm的陶瓷微滤膜过滤后，滤液不进行处理就直接用截留分子量为15000道尔顿的中空纤维超滤膜过滤相比，本发明中的超滤膜可连续过滤15小时，而滤液未经处理的超滤膜仅能连续过滤2小时，且每小时仅能过滤45L。

实施例2

一种井冈霉素的制备方法，该方法是：将井冈霉素发酵液用10000转/分的转速高速离心去除菌丝体，离心液先用孔径为1μm的陶瓷微滤膜过滤，然后向滤液中按重量加入0.1％的纳米二氧化硅，0.8％的纳米氧化铝，0.5％的热塑性丙烯酸树脂、0.1％的吐温20，搅拌10分钟，并将滤液调节pH至8.5，用截留分子量为20000道尔顿的中空纤维超滤膜过滤，进液口压力为0.3MPa，出液口压力为0.1MPa，流速为0.5m/s，收集滤液，活性炭脱色后，减压浓缩、真空干燥，即得。

按CN103175906A的方法检测，本实施例得到的井冈霉素原粉中井冈霉素A含量为60.8％，井冈霉素B含量为15.1％。

实施例3

一种井冈霉素的制备方法，该方法是：将井冈霉素发酵液用12000转/分的转速高速离心去除菌丝体，离心液先用孔径为10μm的陶瓷微滤膜过滤，然后向滤液中按重量加入0.5％的纳米二氧化硅，0.3％的纳米氧化铝，1％的热塑性丙烯酸树脂、0.5％的吐温20，搅拌15分钟，并将滤液调节pH至7.5，用截留分子量为10000道尔顿的中空纤维超滤膜过滤，进液口压力为0.5MPa，出液口压力为0.3MPa，流速为0.8m/s，收集滤液，活性炭脱色后，减压浓缩、真空干燥，即得。

按CN103175906A的方法检测，本实施例得到的井冈霉素原粉中井冈霉素A含量为58.4％，井冈霉素B含量为16.2％。

Claims

1.一种井冈霉素原粉的制备方法，其特征在于：将井冈霉素发酵液高速离心去除菌丝体，离心液先用孔径为1-10μm的陶瓷微滤膜过滤，然后向滤液中按重量加入0.1-0.5％的纳米二氧化硅，0.3-0.8％的纳米氧化铝，0.5-1％的热塑性丙烯酸树脂、0.1-0.5％的HLB值为15-20的表面活性剂，搅拌10-30分钟，并将滤液调节pH至7.5-8.5，用截留分子量为10000-20000道尔顿的中空纤维超滤膜过滤，收集滤液，活性炭脱色后，浓缩、干燥即得。

2.根据权利要求1所述的井冈霉素原粉的制备方法，其特征在于：所述HLB值为15-20的表面活性剂为吐温20。

3.根据权利要求1所述的井冈霉素原粉的制备方法，其特征在于：所述高速离心的转速为10000-12000转/分。

4.根据权利要求1所述的井冈霉素原粉的制备方法，其特征在于：所述中空纤维超滤膜过滤的进液口压力为0.3-0.5MPa，出液口压力为0.1-0.3MPa，流速为0.5-0.8m/s。