CN104013698A - 一种具有辅助降血脂功能的纳豆山楂胶囊及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种具有辅助降血脂功能的纳豆山楂胶囊及其制备方法，由内容物和囊壳组成，所述的内容物的原料以重量份计包括：纳豆冻干粉5-10、山楂提取物4-8、葛根提取物1-5、川芎提取物1-5、黑木耳提取物1-5、微晶纤维素0.1-0.5；所述的内容物中还添加有硬脂酸镁和二氧化硅，硬脂酸镁的加入量为内容物总重量的0.5-1.5％，二氧化硅的加入量为内容物总重量的0.5-1.5％。与现有技术相比，本发明具有生产工艺简单，成本低、吸收效果好等优点。

Description

一种具有辅助降血脂功能的纳豆山楂胶囊及其制备方法
技术领域
本发明涉及保健品技术领域，尤其是涉及一种具有辅助降血脂功能的纳豆山楂胶囊及其制备方法。
背景技术
在“三高”症状中，高血脂往往被忽略，很多人可能说起高血脂来头头是道，但是对于什么是高血脂以及高血脂有什么危害却所知甚少。通常高血脂症是指血液中一种或多种脂质或脂蛋白如胆固醇、甘油三酯的含量超过高限。高血脂症的形成需要有一个较长的过程，初期多数没有临床症状，这也是很多人不重视早期诊断和早期治疗的重要原因。由于这些对血管的损害过程大都是隐匿、渐进的，因此高脂血症又被称为“无声杀手”。
流行病学的统计表明，目前高血脂症人群快速增长，年龄分布也进一步提前。对1514例高职称职业人群血清生化检查及肝脏B超检查结果进行比较分析。结果：本组人群中，高血脂471例(31.11％)，脂肪肝432例(28.53％)，其中，高血脂并脂肪肝358例，正常血脂74例(7.10％)，高血脂者明显高于血脂正常者。在对某市921名体检者中，高血压现患率为21.61％、高血脂为51.36％。一大型健康体检中心数据显示，几乎每五个体检的中青年人中就有一人血脂超标。都市白领生活节奏快，工作压力大，饮食不规律，缺乏运动，约40％的人都是高血脂。
研究表明，高脂血症的年轻化，除遗传因素外，与年轻人不健康的工作方式(工作压力过大、长期静坐、精神紧张、焦虑等)、不健康的生活方式(少动、长期熬夜等)和不合理的饮食习惯(过量食用高脂肪食物、酗酒、吸烟等)等因素有关。饮食营养不平衡如饱和脂肪酸摄入过多，微量元素及维生素摄入不足，再加上吸烟、喝酒等不良饮食和生活习惯导致血液粘稠、血脂高；工作忙碌，使得身体锻炼越来越少，体质减弱；而且精神高度紧张或过度焦虑，往往会引起或者加重高脂血症的发展。
高血脂症是导致脑出血、脑梗塞、冠心病等心脑血管的重要危险因素。流行病学调查和实验研究证明，膳食成分与血脂水平关系密切，通过膳食摄取大量的饱和脂肪酸、单糖类物质、胆固醇等，极易产生高脂血症，引起动脉粥样硬化，最终诱发心血管疾病。因此，控制高脂血症，降低胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白，提高高密度脂蛋白，对预防因高脂血症引起的心脑血管疾病有重要意义。
目前，从国家食品药品监督管理局网站上查询已批准的具有辅助降血脂功能的保健食品共有312条，原料采用蜂胶、中草药、茶叶、红曲、卵磷脂、鱼油、纳豆等原料制成的保健食品，本产品选用纳豆冻干粉、山楂提取物、葛根提取物、川芎提取物、黑木耳提取物为功效原料、以微晶纤维素、硬脂酸镁、二氧化硅为辅料制成以硬胶囊为剂型的保健食品。硬胶囊具有食用方便，无不良口感，卫生，便于携带、生产工艺简单，成本低的特点。适于日常居家食用的同时，更适合人们外出度假、旅游时食用。
发明内容
本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种具有辅助降血脂功能的纳豆山楂胶囊及其制备方法。
本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：一种具有辅助降血脂功能的纳豆山楂胶囊，由内容物和囊壳组成，其特征在于，所述的内容物的原料以重量份计包括：纳豆冻干粉5-10、山楂提取物4-8、葛根提取物1-5、川芎提取物1-5、黑木耳提取物1-5、微晶纤维素0.1-0.5；所述的内容物中还添加有硬脂酸镁和二氧化硅，硬脂酸镁的加入量为内容物总重量的0.5-1.5％，二氧化硅的加入量为内容物总重量的0.5-1.5％。
所述的内容物的原料以重量份计为：纳豆冻干粉6.6、山楂提取物5.25、葛根提取物3.75、川芎提取物3.24、黑木耳提取物3、微晶纤维素0.168；所述的内容物中还添加有硬脂酸镁和二氧化硅，硬脂酸镁的加入量为内容物总重量的1％，二氧化硅的加入量为内容物总重量的1％。
一种具有辅助降血脂功能的纳豆山楂胶囊的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)按重量份称取过筛后的山楂提取物、葛根提取物、川芎提取物、黑木耳提取物、微晶纤维素混合，制软材，制粒，干燥、整粒，得到混合物a；
(2)按重量份称取过筛后的纳豆冻干粉、二氧化硅、硬脂酸镁混合，得到混合物b；
(3)将混合物a和混合物b在混合机中搅拌混合20分钟，然后灌装在硬胶囊中，抛光即得产品。
步骤(1)所述的过筛的粒径为：80目标准筛。
步骤(1)所述的制软材的具体步骤为：按重量份称取过筛后的山楂提取物、葛根提取物、川芎提取物、黑木耳提取物、微晶纤维素混合，加入95％的乙醇得软材。
步骤(1)所述的制粒是在双螺杆挤出机中挤出造粒，所得粒径为20目标准筛。
步骤(1)所述的干燥的温度为55-60℃，所述的整粒是指：将干燥好的物料通过40目标准筛。
步骤(2)所述的过筛的粒径为：60目标准筛。
步骤(3)所述的灌装内容物控制在380mg-420mg之间，经抛光至胶囊表面无粉末即可。
本发明产品由纳豆冻干粉、山楂提取物、葛根提取物、川芎提取物、黑木耳提取物为功效原料、以微晶纤维素、硬脂酸镁、二氧化硅为辅料，且山楂、葛根、川芎为《卫生部关于进一步规范保健食品原料管理的通知》(卫法监发[2002]51号)公布的《可用于保健食品的物品名单》、《即是食品又是药品的物品名单》中的药品；纳豆是一种传统大豆发酵食品，黑木耳作为普通食品可以食用。现代药理研究证明，上述原料具有辅助降血脂的功能，且上述原料提取物的质量标准符合企标附录B。辅料微晶纤维素作为填充剂，硬脂酸镁、二氧化硅作为助流剂，且上述辅料为GB2760中允许使用的原料，其质量标准符合企标附录C。
本发明所选用原料的功效作用、用量及对人体安全性的影响：
1、纳豆冻干粉
纳豆是一种传统大豆发酵食品，距今已有2000多年的历史，它制作简单，风味独特，价格低廉。纳豆以大豆为原料，经纳豆芽孢杆菌发酵而成具有很高的营养价值，每100克纳豆中含蛋白质31.2g、脂肪19.9g、碳水化合物22.8g、钙331mg、铁13.7mg大量研究证实纳豆的多种保健功能与人类的健康有着密切的关系，经常食用可起到强身健体、预防疾病的作用。段智变等在《纳豆冻干粉对实验性高脂血症的作用研究》中通过建立实验性高血脂症兔模型，观察纳豆冻干粉对机体抗氧化及血脂水平的影响。结果表明。模型建立第8周时，纳豆冻干粉组TC、TG、LDL-C、MDA、AL值分别比模型组降低了39.88％(p＜0.05)、44.54％(p＜0.05)、48.84％(P＜0.05)、48.25％(p＜0.01)、70.20％，而HDL-C、SOD值分别提高了75.81％(p＜0.01)、38.32％(p＜0.01)，结论表明纳豆冻干粉可降低血脂水平。通过升高HDL-C、降低LDL-C调节脂质代谢，具有抗脂质过氧化作用，可预防动脉粥样硬化的形成。韩彦彬等在《纳豆胶囊对高脂血症模型大鼠血脂调节作用的研究》中了解纳豆胶囊对高脂血症模型大鼠血脂水平的影响，本实验以高脂饲料喂饲大鼠建立高脂大鼠模型，同时分别以235、470、940mg/kg BW(分别相当于人体推荐用量的5、10、20倍剂量的纳豆胶囊给高脂血症模型大鼠连续灌胃30d，于试验终末采血测定TC、TG、HDL-C含量。结果表明，该纳豆胶囊能降低高脂模型大鼠的血清总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)含量，升高其血清高密度脂蛋白胆固醇HDL-C)含量，对大鼠的体重增长无明显影响，提示该样品具有辅助降血脂功能作用。从而延缓或减轻动脉粥样硬化的发生和发展。杨庆等在《纳豆胶囊毒性和对大鼠血脂调节作用》中，人体每日推荐剂量2.7g/人，进行急性经口毒性试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、Ames试验及辅助降血脂功能试验，结果采用两阶段毒性实验方法和保健食品功能学评价程序和检验方法2003辅助调节血脂方法。结果小鼠急性经口毒性试验属实际无毒级，小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、Ames试验，结果为阴性。并具有降血脂的作用。
2、山楂提取物
山楂酸、甘、微温。归脾、胃、肝经。具有消食健胃、行气散瘀、化浊降脂的功能。现代药理研究表明，山楂具有辅助降血脂的功能。肖婷等在《山楂对高血脂大鼠模型血脂水平的影响》中探讨山楂对高血脂大鼠血脂及血管的保护作用的影响，方法：实验分为正常对照组、高血脂模型组、辛伐他丁组、山楂低剂量组、山楂中剂量组、山楂高剂量组，给予相应药物30天后，腹主动脉取血及取主动脉血管，分别检测血清总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白及血管过氧歧化酶活性、丙二醛含量。结果：山楂各剂量组均能显著降低血清总胆固醇、甘油三酯含量，升高血管丙二醛活性，降低血管MDA含量。结论：山楂既能有效降低实验性高血脂大鼠模型的血清总胆固醇、甘油三酯水平，又可对血管有保护作用。谷建人在山楂及其复方制剂的降血脂作用和制剂研究进展》中综述了近年来山植及其复方制剂的降血脂作用和药物制剂研究的概况。在临床应用中朱光在对消法代表方《丹溪心法》中保丸的论述中，认为山碴善消肉食油腻之积，并有散瘀之功，对降脂具有很好疗效。王肖铭认为在参芪活血汤治疗心绞痛的过程中，有高脂血症者应加山碴。黄丽萍用降脂饮治疗高脂血症31例，认为山碴有降低TC和TG的作用。曹武韬等用脂肝灵治疗脂肪肝，疗效优于西药组，并认为山碴有促进脂肪在肝中氧化降解的作用。冠心宁片(每片含山里红原生药3.1g)日服3次，每次5片，治疗高胆固醇血症患者104例，1个半月后，77例胆固醇降至正常，15例下降20mg％，1例上升；高TG血症患者21例，服药1个半月后，17例TG降至正常；高β-脂蛋白血症患者59例，服药后从平均473mg％降至361.8mg％。汪祥康等在高脂血症的分型和冠心病相关研究中认为，血脂水平高低与冠心病各种症状呈正相关，控制血脂浓度就能控制心绞痛发作，对防止心肌梗塞具有重要意义。郑抑明治疗脑血栓形成89例，认为山碴含总黄酮类、解脂酶等，有降血脂、扩血管及改善心肌与脑细胞代谢的作用。王良在复方中药治疗高脂血症用药规律的探讨中，筛选出中药复方47种进行分类，对出现较高频率的中药进行量化处理，排出17种中药，其中山植为第1位，认为在治高脂血症组方时山楂应作为首选。高莹等在《山楂及山楂黄酮提取物调节大鼠血脂的效果研究》中观察了山楂黄酮和山楂汁对高脂血症大鼠血清脂质和肝脏脂水平的影响。大鼠高脂饲料含有1％胆固醇、10％猪油、10％蛋黄粉和79％基础饲料。结果显示第五周末实验结束时，山楂黄酮和山楂汁使高脂血症大鼠血清甘油三酯、肝脏甘油三酯明显降低(P＜0.05)，山楂黄酮和山楂汁使肝脏胆固醇明显降低(P＜0.05)，但两种受试物都未降低血清胆固醇。本研究提示山楂和山楂黄酮对高脂血症大鼠的甘油三酯代谢具有良好的改善作用，而对胆固醇代谢的影响有待进一步研究。
3、葛根提取物
葛根甘、辛、凉。归脾、胃、肺经。具有解肌退热、生津止渴、透疹、升阳止泻，通经活络，解酒毒的功能。现代药理研究表明，葛根具有辅助降血脂的功能。刘亚明[8]等在《复方葛根胶囊对实验性糖尿病、高脂血症模型血糖和血脂作用的实验研究》中研究由中药葛根提取物葛根素和酵母生物提取物葡萄糖耐量因子组成的复方葛根胶囊对实验性糖尿病小鼠和高脂血症大鼠的降糖、降脂作用。方法：采用四氧嘧啶复制糖尿病小鼠模型和高脂饲料复制高血脂大鼠模型，分别观察复方葛根胶囊对其空腹血糖、糖耐量和高脂血症大鼠血脂水平的影响。结果：复方葛根胶囊能显著降低四氧嘧啶所致的小鼠高血糖水平和改善四氧嘧啶性糖尿病小鼠的糖耐量，同时该药有显著降低TG、TC，提高HDL-C、HDL/TC的作用。结论：复方葛根胶囊有明显的降糖和降脂作用。郑友丽在《葛根降脂汤治疗高脂血症临床观察》中为观察自拟葛根降脂汤治疗高脂血症的临床疗效，将182例患者随机分为治疗组130例(用葛根降脂汤治疗)和对照组52例(用脂必妥治疗)。结果：治疗组在临床疗效、降脂疗效以及血脂指标改善方面均优于对照组(P＜0.05)；治疗前后患者舌质、舌苔比较，治疗组有较明显的改善，与对照组治疗后比较，P＜0.05。提示：葛根降脂汤可有效用于高脂血症的治疗。穆亚东等在《葛根、山楂、制首乌的提取物降血脂作用的研究》中观察葛根、山楂、制首乌的提取物合用对实验性高血脂症大鼠的降血脂作用效果。方法：用高脂饲料喂养大白鼠造成大鼠高血脂模型，连续25d给予葛根、山楂、制首乌的提取物，观察其对高血脂大鼠TC，TG，HD-C的影响，并和加入珍珠粉的药物组进行对照。结果：葛根、山楂、制首乌的纯提物对血脂(TC，TG)含量有明显降低作用，对HDL-C有显著升高作用。加入珍珠粉的组和没加的组降血脂作用没有显著差别。结论：葛根、山楂、制首乌的提取物对实验性高血脂症大鼠有很好的降血脂作用。
4、川芎提取物
川芎辛、温。归肝、胆心包经。具有活血行气，祛风止痛功能。现代药理研究表明，川芎具有辅助降血脂的功能。高光伟等在《加味川芎都梁丸对高脂大鼠的药理作用》观察加味川芎都梁丸对高脂大鼠的作用。方法：建立高脂血症大鼠模型，测定灌服加味川芎都梁丸混悬液后高脂大鼠血清中血脂及血液流变学的变化，并测量正常大鼠给予该药后的血栓形成量，均设对照组。结果：给药后高脂大鼠TC、TG、LDL含量均显著降低，HDL/TC上升，血液黏度(比)显著下降，血栓形成量显著减少。结论：加味川芎都梁丸具有显著降低血脂，降低血液黏度，对抗血栓形成的作用。孙胜枚等在《川芎对飞机噪声致小鼠血脂变化的影响》通过观察飞机噪声对小鼠血胆固醇和血甘油三醋含量的影响，研究噪声与血脂和动脉硬化形成的关系，同时观察服川芎液后受飞机噪声作用小鼠血脂含量的变化以寻找一种增强机体抗噪声能力防噪声对血脂和心血管系统不利影响的物质，结果川芎具有对抗由噪声引起血脂升高的作用，增加机体抗噪声能力，消除其对心血.管系统的不利影响。
5、黑木耳提取物
黑木耳属担子菌亚门，担子菌纲，木耳目，木耳科，木耳属，别名为木耳，黑木耳，细木耳。它是一种食药兼用菌，也是我国的传统食品和出口贸易食品，具药食两用价值，有滋补强壮、扶正固本之功效。周国华等在《黑木耳多糖的提取、纯化及降血脂作用的研究》中采用不同浓度黑木耳多糖对高脂模型小鼠进行试验，研究黑木耳多糖对高脂模型小鼠甘油三酯(TG)，总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)和低密度脂蛋白(LDL-C)的影响。结果表明，黑木耳多糖组小鼠的血清甘油三酯(TG)，总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白(LDL-C)均不同程度低于高脂模型组，而高密度脂蛋白(HDL-C)却极其显著高于高脂模型组，提示黑木耳多糖确具显著的降血脂作用。王朋等在《黑木耳降血脂抗血栓的临床研究中》选择了50名临床高脂血症病人，血清总胆固醉(TC)在6.50mMol/l，β脂蛋白(β-LP)在6.00g/L以上，病人分为两组，第一组30名，每日15克干黑木耳服用一个月，第二组20名，每日5克干黑木耳服用一个半月.均将黑木耳泡开后蒸煮作菜吃.观察期间不服任何降脂和抗凝药。结果发现血脂显若降低，血栓形成显着减轻，血小板聚集率降低更显著。由此说明，黑木耳确有降血脂，抗血栓形成和抑侧血小板聚集等多种作用。韩春然等在黑木耳多糖的提取、纯化及降血脂作用的研究》中以复合酶法对黑木耳多糖进行了提取，并以柱层析法对其进行了纯化，以纯化的黑木耳多糖喂饲大鼠，考察了其降血脂的功能。通过试验得到两种黑木耳多糖，即APE I和APE II，各剂量的APE I对大鼠体重没有显著影响；100mg/kg体重及以上的APE I可以显著降低高脂大鼠血清的TG、TC、LDL-C水平，提高其HDL-C水平；200mg/kg体重的黑木耳多糖对高脂大鼠血清的TG、TC、LDL-C和HDL-C的影响与70mg/kg体重的脂必妥的效果没有显著差异，并能够显著提高高脂血症大鼠的HDL-C/TC水平。黑木耳多糖(APE I)具有降血脂功能，对高脂血症的发生有一定的预防作用，同时对冠心病和动脉粥样硬化也有一定的预防作用。
与现有技术相比，本发明选用硬胶囊，硬胶囊制剂可掩盖原料不适滋味和气味，外观整洁美观，容易吞服，硬胶囊剂与片剂、丸剂不同，制备时可不加压力，所以在肠胃道中崩解释放快，吸收效果好，服用方便、卫生，便于携带、贮存期长，而且生产工艺简单，成本低。因此本产品选择硬胶囊制剂。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。
实施例1
一、配方：
具有辅助降血脂功能的纳豆山楂胶囊，由内容物和囊壳组成，所述的内容物的原料以重量份计包括：纳豆冻干粉6.6、山楂提取物5.25、葛根提取物3.75、川芎提取物3.24、黑木耳提取物3、微晶纤维素0.168：所述的内容物中还添加有硬脂酸镁和二氧化硅，硬脂酸镁的加入量为内容物总重量的1％，二氧化硅的加入量为内容物总重量的1％。
二、制备方法：
上述纳豆山楂胶囊的制备方法，包括以下步骤：
(1)按重量份称取经80目标准筛过筛后的山楂提取物、葛根提取物、川芎提取物、黑木耳提取物、微晶纤维素混合，制加入95％的乙醇得软材，在双螺杆挤出机中挤出造粒，所得粒径为20目标准筛，干燥、整粒，得到混合物a；
(2)按重量份称取过60目标准筛后的纳豆冻干粉、二氧化硅、硬脂酸镁混合，得到混合物b；
(3)将混合物a和混合物b在混合机中搅拌混合20分钟，然后灌装、内容物控制在380mg-420mg之间，经抛光至胶囊表面无粉末即可。
三、性能
每日食用纳豆冻干粉0.66g，具有辅助降血脂的保健功能，且是安全的；每日食用山楂提取物0.525g，山楂提取物提取比例10比1，折合山楂生药量5.25g，中华人民共和国药典推荐山楂每日用量9-12g，因此本品具有辅助降血脂的保健功能，且是安全的。每日食用葛根提取物0.375g，葛根提取物提取比例10比1，折合葛根生药量3.75g，中华人民共和国药典推荐葛根每日用量10-15g，因此本品具有辅助降血脂的保健功能，且是安全的。每日食用川芎提取物0.324g，川芎提取物提取比例10比1，折合川芎生药量3.24g，中华人民共和国药典推荐川芎每日用量3-10g，因此本品具有辅助降血脂的保健功能，且是安全的。每日食用黑木耳提取物0.3g，黑木耳提取物提取比例10比1，折合干黑木耳3g，因此本品具有辅助降血脂的保健功能，且是安全的。
微晶纤维素：作为填充剂。GB2760中规定可在各类食品中按生产需要适量使用。本产品用量28g/1000粒。
二氧化硅、硬脂酸镁为助流剂、润滑剂。加入上述辅料可使胶囊内容物具有良好的流动性，保证药粉快速地填入胶囊，并保证装量差异的稳定性。
影响硬胶囊剂填充的正常操作和装量准确性的主要因素为填充物的流动性，而评价流动性最简单的方法以休止角来表示。休止角越小，说明摩擦力越小，流动性越好，越易于填充胶囊。一般休止角α≤40°时可以满足胶囊填充生产过程中流动性的需求。添加或不添加上述硬脂酸镁和二氧化硅测定休止角，结果如下：
组别 配方中用量(二氧化硅、硬脂酸镁) 休止角α值 流动性
一组 内容物 46.7 不好
二组 1％二氧化硅+内容物 42.3° 不好
三组 1％硬脂酸镁+内容物 41.5° 不好
四组 1％二氧化硅+1％硬脂酸镁+内容物 37.2° 好
由上述实验结果可知，配方中加入1％的二氧化硅和1％的硬脂酸镁，其休止角α小于40°，物料的流动性好，可以满足药粉快速地填入胶囊，并保证装量差异的稳定性。
为验证以上实验结果，用胶囊充填机连续填充30分钟，随机取样3次，检测装量差异，每次抽样10粒，检测装量差异，结果如下：
由上述结果可知，装量稳定。
确定本产品标志性成分为总皂苷：将原料在混合机中混合，混合时间设定10分钟、20分钟、30分钟，分别取样3次，每次100g，测定标志性成分总皂甙含量指标，结果如下：
从上述RSD指标结果看，混合20分钟和混合30分钟，RSD值接近，为了节约能源，确定混合时间为20分钟，即能达到混合均有的目的。
四、动物实验
1材料和方法
1.1样品：由上海春芝堂生物制品有限公司提供，人口服推荐剂量为每日3次，每次2粒，成人体重按60kg计算，折合剂量0.04g/kg.bw。
1.2实验动物及环境条件：SPF级雄性SD大鼠40只及饲料由长沙市开福区东创实验动物科技服务部提供，实验动物生产许可证号为SCXK(湘)2009-0012。实验条件为屏障环境，实验期间实验环境温度22℃～24℃，湿度52％～56％。实验动物使用许可证号为SYXK(湘)2010～0010。
1.3主要仪器、器材与试剂：OLYMPUS AU400全自动生化分析仪等；胆固醉(CHOL)、甘油三酷(TG)试剂盒购自上海复星长征医学科学有限公司；高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)试剂盒购自宁波美康生物科技有限公司。
1.4高脂饲料：78.8％基础饲料，1％胆固醇，10％蛋黄粉，10％猪油，0.2％胆盐。
1.5实验方法：
1.5.1剂量设计：设低、中、高剂量分别为0.20g/kg.bw、0.40g/kg.bw、1.20g/kg.bw(分别相当于人体推荐量的5、10、30倍)，受试物配制时分别取春芝堂牌纳豆山植胶囊内容物4.00g、8.00g、24.00g加蒸馏水至200ml，分别给予受试动物灌胃，每日一次，灌胃体积为1.0ml/100g.bw，连续30天，对照组给予等体积蒸馏水。
1.5.2动物分组：以基础饲料喂饲大鼠观察一周后，禁食16小时，取尾血，用OLYMPUSAU400全自动生化分析仪测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酷(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)，根据Tc水平兼顾TG将动物随机分为4组：高脂对照组和低、中、高三个受试物组。自正式试验开始，各组动物换用高脂饲料，同时按1.5.1剂量设计给各组受试动物灌胃。
1.5.3指标测定：每周称体重一次，于实验结束禁食16小时，拔眼球采血测定血清TC、TG、HDL-C。
1.6数据处理
数据用Excel2003，Spssl1.0软件进行统计分析。先对数据进行方差齐性检验，若方差齐，采用单因素方差分析进行总体比较，发现差异再用Dunnett法进行多个剂量组与一个对照组均数间的两两比较。若方差不齐，则对原始数据进行适当的变量转换，满足方差齐性检验后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到方差齐的目的，改用秩和检验进行统计，发现总体比较有差异，则采用不要求方差齐性的Tamhane’sTZ检验进行两两比较。
1.7结果判定
1.7.1，辅助降血脂功能结果判定：在血清总胆固醇、甘油三酷、高密度脂蛋白胆固醇检测中，血清总胆固醇、甘油三酷二项指标阳性，可判定该受试样品辅助降血脂功能动物实验结果阳性。
1.7.2辅助降低甘油三醋结果判定：①甘油三酷二个剂量组结果阳性；②甘油三醋一个剂量组结果阳性，同时高密度脂蛋白胆固醇显著高于对照组，可判定该受试样品辅助降低甘油三醋动物实验结果阳性。
1.7.3辅助降低血清总胆固醇结果判定：①血清总胆固醇二个剂量组结果阳性；②血清总胆固醇一个剂量组结果阳性，同时高密度脂蛋白胆固醇显著高于对照组，可判定该受试样品辅助降低血清总胆固醇动物实验结果阳性。
2.结果
2.1样品对大鼠体重的影响
表1样品对大鼠体重的影响(g)
见表1：实验前后受试物组动物体重及实验期间体重增长与高脂对照组比较，差异无显著性(P＞0.05)。
2.2样品对大鼠血清TC、TG、HDL-C的影响
表2实验前后各组大鼠血清TC水平
表3实验前后各组大鼠血清TG水平
表4实验前后各组大鼠血清HDL-C
见表2～4，实验后，高脂对照组血清TC、TG均明显升高，与实验前比较，差异具有显著性(P＜0.05)，表明造模成功。高剂量组可显著降低大鼠血清甘油三酯水平和总胆固醇水平，与高脂对照组比较，差异具有显著性(P＜0.05)，各剂量对大鼠血清高密度脂蛋白胆固醇水平无显著影响(P＞0.05)。
3小结
本实验室条件下，以0.20g/kg.bw、0.40g/kg.bw、1.20g/kg.bw剂量的春芝堂牌纳豆山植胶囊内容物给SD大鼠灌胃30天，与高脂对照组比较，1.20g/kg.bw剂量可显著降低饲高脂饲料大鼠血清甘油三醋水平和总胆固醇水平(P＜0.05)。提示送检样品对动物具有辅助降血脂功能。
五、人体实验
1材料和方法
1.1样品
春芝堂牌纳豆山碴胶囊1号、2号均由上海春芝堂生物制品有限公司提供，者外观、口味基本相同，其中一个为春芝堂牌纳豆山植胶囊，另一个为安慰剂。体口服推荐剂量为每日3次，每次2粒。
1.2受试者选择
1.2.1纳入标准：受试者性别不限，年龄18-65岁。半年内采血两次，两次血清总胆固醇均≥5.2mmol/L或血清甘油三酯≥1.65mmol/L，单纯血脂异常，无明显脑、心、肝、肺、肾、血液疾患，无长期服药史，自愿受试保证配合。
1.2.2受试者排除标准：妊娠或哺乳期妇女，对保健食品过敏者：合并有心、肝、肾和造血系统等严重疾病患者；短期内服用与受试功能有关的物品，影响到对结果判断者；不符合纳入标准，未按规定食用受试样品，无法判定功效或资料不全影响功效或安全性判定者。
1.3实验设计与分组
采用自身和组间两种对照设计。按受试者血脂水平随机分为春芝堂牌纳豆山植胶囊试食组和安慰剂对照组，尽可能考虑影响结果的主要因素如年龄、性别、饮食等，进行均衡性检验，以保证组间的可比性。按双盲法进行试食试验。
1.4试验方法
受试者每天按推荐剂量服用样品，连续服用45天。试验期间不改变原来的饮食习惯，正常饮食。
2观察指标
各项观察指标于试食试验开始及结束时各测定一次。
2.1安全性指标
2.1.1一般体格检查：试验前详细询问并了解受试者的精神、睡眠、饮食、大小便等情况，测量试验前后体重、血压、心率变化。
2.1.2血常规：红细胞计数、白细胞计数及分类、血红蛋白含量测定等。
2.1.3尿常规：pH值、白细胞、尿糖等。
2.1.4大便常规。
2.1.5腹部B超、心电图、X线胸部透视检查(试验开始前测定一次)。
2.1.6血生化指标检查：血清总蛋白(TP)、白蛋白(A LB)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、尿酸(UA)、尿素氮(BUN)、肌醉(Cr)、血糖(GLU)等测定。
2.1.7不良反应观察。
2.2功效指标：血清总胆固醇(CHOL)、甘油三醋(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)。
3.结果判定
3.1CHOL降低＞10％；TG降低＞15％；HDL-C上升＞0.104mmol/L：各功效观察指标试验前后自身比较和试食后组间比较均有统计学意义，方可判定该指标阳性；
3.2血清总胆固醇、甘油三脂二项指标阳性，高密度脂蛋白胆固醇不显著低于对照组，可判定受试样品具有辅助降血脂功能作用；血清总胆固醇、甘油三脂二项指标中一项阳性，高密度脂蛋白胆固醇不显著低于对照组，可判定受试样品具有辅助降低血清总胆固醇或辅助降低甘油三脂作用。
4.统计学处理
结果用均数±标准差表示，自身配对资料采用配对t检验，试食组和对照组之间在方差齐的前提下，均数比较采用成组t检验，否则进行变量转化，满足方差齐后采用t检验，如果方差仍然不齐，采用秩和检验。
5.结果
双盲法观察结束揭晓：服食1号者为安慰剂，服食2号者为春芝堂牌纳豆山植胶囊。
5.1安全性观察
5.1.1一般情况：对照组52例，试食组52例。试食前后，受试者精神、睡眠、饮食、大小便状况未见异常；对照组：男/女为22/30，年龄为51.63士9.24岁；试食组：男/女为22/30，年龄为51.87士8.52岁。
5.1.2腹部B超、心电图、X线胸部透视检测：均在正常范围。
5.1.3体重、血压、心率、尿常规、大便常规、血常规指标变化情况
见表1，试食样品前、后试食组及对照组体重、血压、心率未见明显异常改变，尿常规、大便常规及血常规均在正常范围内。
表1试食试验前后体重、血压、心率、尿常规、大便常规及血常规变化情况
5.1.4试食试验前后血生化指标变化情况见表2。试食样品前、后试食组及对照组血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、肌酐(Cr)、血糖(GLU)、尿酸(UA)、尿素氮(BUN)均在正常范围内。
表2试食试验前后血生化指标变化情况
5.1.5试食期间未见明显不良反应。
5.2功效观察
见表3、4、5。半年内采血两次，分别为试食前1和试食前2血脂数据，以日期靠近服用受试样品的试食前2血脂水平进行分组及统计处理。试验前对照组和试食组血清CHOL、TG水平比较，差异无显著性(P＞0.05)，提示两组之间具有可比性。试食组试食后CHOL、TG与试食前及对照组试食后比较，差异均有显著性(P＜0.05)。试食前后HDL-C水平未见明显改变(P＞0.05)
表3试食试验前血清CHOL、TG、HDL-C水平
表4试食试验后血清CHOL、TG、HDL-C水平
表5试食前后血清CHOL、TG、HDL-C变化情况
指标 对照组 试食组
TG降低率(％) 1.10 17.41
CHOL降低率(％) 1.02 10.70
HDL-C升高值(mmol/L) 0.02 0.09
5.3脱失率
经过45天试验后，对照组有0例受试者因间断服用受试品无法判断效果被筛除；试食组有0例受试者因间断服用受试品无法判断效果被筛除。最后有效试验人群对照组52例，试食组52例。见表6。
表6试验脱失率
组别 对照组 试食组
试食前 52 52
脱失数 0 0
脱失率 0.00％ 0.00％
6.小结
采用自身对照及组间对照法，选择符合试验条件的自愿受试者服用受试物45天后，结果表明：服用春芝堂牌纳豆山植胶囊试食组试食后CHOL、TG与试食前比较分别下降10.70％、17.41％；试食后试食组CHOL、TG与试食前及对照组试食后比较，差异有显著性(P＜0.05)；试食后试食组HDL-C与对照组比较差异无显著性(P＞0.05)。试食期间未见明显不良反应。根据《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)评价标准，提示受试样品具有辅助降血脂功能作用。
实施例2
一种具有辅助降血脂功能的纳豆山楂胶囊，由内容物和囊壳组成，所述的内容物的原料以重量份计包括：纳豆冻干粉5、山楂提取物4、葛根提取物1、川芎提取物1、黑木耳提取物1、微晶纤维素0.1；所述的内容物中还添加有硬脂酸镁和二氧化硅，硬脂酸镁的加入量为内容物总重量的0.5％，二氧化硅的加入量为内容物总重量的0.5％。其余同实施例1。
实施例3
一种具有辅助降血脂功能的纳豆山楂胶囊，由内容物和囊壳组成，所述的内容物的原料以重量份计包括：纳豆冻干粉10、山楂提取物8、葛根提取物5、川芎提取物5、黑木耳提取物5、微晶纤维素0.5；所述的内容物中还添加有硬脂酸镁和二氧化硅，硬脂酸镁的加入量为内容物总重量的1.5％，二氧化硅的加入量为内容物总重量的1.5％。其余同实施例1。

Claims (9)

1.一种具有辅助降血脂功能的纳豆山楂胶囊，由内容物和囊壳组成，其特征在于，所述的内容物的原料以重量份计包括：纳豆冻干粉5-10、山楂提取物4-8、葛根提取物1-5、川芎提取物1-5、黑木耳提取物1-5、微晶纤维素0.1-0.5；所述的内容物中还添加有硬脂酸镁和二氧化硅，硬脂酸镁的加入量为内容物总重量的0.5-1.5％，二氧化硅的加入量为内容物总重量的0.5-1.5％。
2.根据权利要求1所述的一种具有辅助降血脂功能的纳豆山楂胶囊，其特征在于，所述的内容物的原料以重量份计为：纳豆冻干粉6.6、山楂提取物5.25、葛根提取物3.75、川芎提取物3.24、黑木耳提取物3、微晶纤维素0.168；所述的内容物中还添加有硬脂酸镁和二氧化硅，硬脂酸镁的加入量为内容物总重量的1％，二氧化硅的加入量为内容物总重量的1％。
3.一种如权利要求1-2任一所述具有辅助降血脂功能的纳豆山楂胶囊的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)按重量份称取过筛后的山楂提取物、葛根提取物、川芎提取物、黑木耳提取物、微晶纤维素混合，制软材，制粒，干燥、整粒，得到混合物a；
(2)按重量份称取过筛后的纳豆冻干粉、二氧化硅、硬脂酸镁混合，得到混合物b；
(3)将混合物a和混合物b在混合机中搅拌混合20分钟，然后灌装在硬胶囊中，抛光即得产品。
4.根据权利要求3所述的一种具有辅助降血脂功能的纳豆山楂胶囊的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述的过筛的粒径为：80目标准筛。
5.根据权利要求3所述的一种具有辅助降血脂功能的纳豆山楂胶囊的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述的制软材的具体步骤为：按重量份称取过筛后的山楂提取物、葛根提取物、川芎提取物、黑木耳提取物、微晶纤维素混合，加入95％的乙醇得软材。
6.根据权利要求3所述的一种具有辅助降血脂功能的纳豆山楂胶囊的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述的制粒是在双螺杆挤出机中挤出造粒，所得粒径为20目标准筛。
7.根据权利要求3所述的一种具有辅助降血脂功能的纳豆山楂胶囊的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述的干燥的温度为55-60℃，所述的整粒是指：将干燥好的物料通过40目标准筛。
8.根据权利要求3所述的一种具有辅助降血脂功能的纳豆山楂胶囊的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述的过筛的粒径为：60目标准筛。
9.根据权利要求3所述的一种具有辅助降血脂功能的纳豆山楂胶囊的制备方法，其特征在于，步骤(3)所述的灌装内容物控制在380mg-420mg之间，经抛光至胶囊表面无粉末即可。
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