CN104013600A - 一种包载补骨脂素的纳米结构脂质载体制剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于中药制剂学领域,公开了一种包载补骨脂素的纳米结构脂质载体制剂及其制备方法。所述制剂由补骨脂素、固体脂质、液体脂质、脂溶性乳化剂、有机溶剂、水溶性乳化剂、注射用水以及冰水组分组成,并通过高温乳化-低温固化的方法制备而成。所制备的制剂降低了补骨脂素自身毒性,提高了补骨脂素的水溶性、稳定性以及生物利用度,并且其包封率高、载体粒径小、稳定性高。另外,本发明的制备工艺简单、成本低,易于实现工业化生产,具有很好的经济效益与社会效益。
Description
技术领域
本发明属于中药制剂学领域,具体涉及一种包载补骨脂素的纳米结构脂质载体制剂及其制备方法。
背景技术
肿瘤是当今危害人类健康的主要疾患之一。肿瘤侵袭和转移是恶性肿瘤最普遍的一种生物学行为和最本质的特征,也是影响肿瘤患者生存和预后关键因素。补骨脂素(PSO)是一种天然香豆素类化合物,具有抗肿瘤、雌激素样以及多药耐药等多种药理活性,补骨脂素通过与DNA以非共价键形式在暗处结合成复合物,引起DNA损伤达到抗肿瘤的作用。但是补骨脂素水溶性差,直接口服生物利用度低,并且长期应用有一定毒性,因此需寻求一种有效的制剂,提高药物的溶解度及抗肿瘤效果,减少毒副作用,增强补骨脂素的临床应用性。
纳米结构脂质载体(NLC)是在固体脂质纳米粒(SLN)基础上发展起来的一种新型给药系统,它是以天然的或人工合成的脂质材料为载体,将药物吸附或包裹于脂质材料中制成的纳米给药体系,将与固态脂质不相溶的液体脂质加入到固体脂质中形成不完整的晶型,可以有效防止药物的泄露,将补骨脂素通过纳米结构脂质载体的包裹可以显著性提高提高补骨脂素的溶解度以及生物利用度。
发明内容
为了克服现有技术的缺点和不足,本发明的首要目的在于提供一种包载补骨脂素的纳米结构脂质载体药剂。
本发明的另一目的在于提供上述包载补骨脂素的纳米结构脂质载体药剂的制备方法。
本发明的目的通过以下技术方案实现:
一种包载补骨脂素的纳米结构脂质载体制剂,由补骨脂素、固体脂质、液体脂质、脂溶性乳化剂、有机溶剂、水溶性乳化剂、注射用水以及冰水组分组成;所述补骨脂素:固体脂质:脂溶性乳化剂:液体脂质:水溶性乳化剂重量比为(1~4):(60~180):(90~270)(13.3~45):(200~600);所述补骨脂素与有机溶剂重量体积比为(1~4):5(mg/ml);所述水溶性乳化剂与注射用水的重量体积比为(200~600):20(mg/ml)。
所述固体脂质为硬脂酸、胆固醇、棕榈酸、山嵛酸、单硬脂酸甘油酯、双硬脂酸甘油酯、豆蔻酸甘油酯、单棕榈酸甘油酯、山嵛酸甘油酯或月桂酸甘油酯中的一种以上。
所述液体脂质为辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯、棕榈酸异丙酯、肉豆蔻酸异丙酯、液体石蜡、大豆油或油酸中的一种以上。
所述脂溶性乳化剂为大豆卵磷脂或合成磷脂(注射级大豆卵磷脂,纯度95%以上,上海太伟药业有限公司)。
所述水溶性乳化剂为泊洛沙姆、聚山梨醇酯、聚氧乙烯脂肪醇醚(苄泽类)、聚氧乙烯脂肪酸酯、胆酸钠或脱氧胆酸钠中的一种以上。
所述泊洛沙姆为泊洛沙姆407,泊洛沙姆338或泊洛沙姆188;优选泊洛沙姆188。
所述聚山梨醇酯为吐温80、吐温60或吐温20;优选吐温80。
所述有机溶剂为无水乙醇。
所述冰水为注射用水,温度为0~4℃。
所述包载补骨脂素的纳米结构脂质载体制剂的制备方法,包括以下步骤:
(1)将补骨脂素、固体脂质、液体脂质以及脂溶性乳化剂依次加入有机溶剂中,加热融化,超声分散混匀,得到油相分散液;
(2)将水溶性乳化剂加入装有注射水的反应器中,搅拌溶解,得到水相溶液;
(3)在70~80℃条件下,将油相分散液注入水相溶液中搅拌乳化0.5~2h,得到乳化液;
(4)将乳化液加入冰水中搅拌固化0.5~2h,微孔滤膜过滤,得到液体包载补骨脂素的纳米结构脂质载体制剂;
或向液体包载补骨脂素的纳米结构脂质载体制剂中加入冻干保护剂溶液,通过干燥处理,得到固体包载补骨脂素的纳米结构脂质载体制剂。
步骤(1)中所述加热融化的温度为70~80℃;所述超声功率为200~400W,超声时间为2~5min。
步骤(2)中所述搅拌速度为800~1200r/min,优选1000r/min。
步骤(3)中所述油相分散液注入水相溶液的速度为1~5ml/min;所述搅拌速度为800~1200r/min,优选1000r/min。
步骤(4)中所述冰水与乳化液的体积比为1:1。
步骤(4)中所述微孔滤膜为水系滤膜,其孔径为0.22um或0.45um。
步骤(4)中所述搅拌速度为800~1200r/min,优选1000r/min。
步骤(4)中所述冻干保护剂溶液的质量百分比浓度为2~10%;
所述冻干保护剂为葡萄糖、甘露醇、蔗糖、乳糖、果糖、山梨醇、海藻糖、麦芽糖、右旋糖酐和氨基酸中的一种以上。
步骤(4)中所述干燥处理方法为喷雾干燥法或冷冻干燥法。
所述包载补骨脂素的纳米结构脂质载体制剂为口服制剂或注射制剂。
所制备的包载补骨脂素的纳米结构脂质载体制剂中载体的粒径为70~160nm。
与现有技术相比,本发明具有以下优点及有益效果:
1、本发明以固体脂质配合液体脂质材料将补骨脂素包载为纳米结构脂质载体,可以提高水难溶性药物的溶解度,提高药物的稳定性以及生物利用度,该载药系统还具有缓释、控释以及靶向作用。选择口服或者注射给药补骨脂素纳米结构脂质载体可以提高药物在血液循环中的时间,具有靶向性,药物可以直达病变部位或者组织甚至细胞,从而降低副作用,提高治疗效果。
2、采用本发明制备的补骨脂素纳米结构脂质载体显著性的提高补骨脂素的化学以及物理稳定性,制备的纳米粒粒径在100nm左右,包封率大于80%,所得制剂稳定,制备工艺简单,便于工业化生产,具有创新性和实用性。
附图说明
图1为实施例1制备的包载补骨脂素的纳米结构脂质载体制剂的TEM图;
图2为实施例1制备的包载补骨脂素的纳米结构脂质载体制剂的Zeta电位图;
图3为实施例1制备的包载补骨脂素的纳米结构脂质载体制剂的粒径分布图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述,但本发明的实施方式不限于此。
实施例1
精密称取补骨脂素2mg、单硬脂酸甘油酯115mg、大豆卵磷脂175mg、Labrasol(辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯)28.5mg放入10ml烧杯中,精密量取5ml无水乙醇倒入上述10ml烧杯中,将烧杯放入75℃水浴中加热使脂质融化,超声混匀(超声功率为300W,超声时间为4min)作为油相;精密称取500mg吐温80,将吐温80加入到25ml烧杯中,量取20ml注射用水加入到25ml烧杯中,搅拌使吐温80溶解在纯净水中,将吐温80的水溶液放入75℃水浴中加热作为水相;在1000r/min的搅拌速度下用1ml玻璃注射器将油相以2ml/min的速度注入水相中,75℃条件下搅拌乳化1h,乳化之后将乳化液倒入10ml冰水(0~4℃)中搅拌固化1h,得到补骨脂素纳米结构脂质载体分散液,过0.45um微孔滤膜(水系滤膜),装入10ml西林瓶中保存,得到液体包载补骨脂素的纳米结构脂质载体制剂。所制备的液体制剂结构表征如图1所示,性能测试如图2~3所示。
实施例2
精密称取补骨脂素2.5mg、豆蔻酸甘油酯120mg、合成磷脂180mg、Labrasol(辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯)30mg放入10ml烧杯中,精密量取5ml无水乙醇倒入上述10ml烧杯中,将烧杯放入75℃水浴中加热使脂质融化,超声混匀(超声功率为300W,超声时间为5min)作为油相;精密称取600mg吐温80,将吐温80加入到25ml烧杯中,量取20ml注射用水加入到上述25ml烧杯中,搅拌使吐温80溶解在纯净水中,将吐温80的水溶液放入75℃水浴中加热作为水相;在1000r/min的搅拌速度下用1ml玻璃注射器将有机相以2ml/min的速度注入水相中,75℃条件下搅拌乳化2h,乳化之后将乳化液倒入10ml(0~4℃)冰水中搅拌固化1h,得到补骨脂素纳米结构脂质载体分散液,过0.45um微孔滤膜(水系滤膜),装入10ml西林瓶中保存,得到液体包载补骨脂素的纳米结构脂质载体制剂。
实施例3
精密称取补骨脂素2.5mg、单棕榈酸甘油酯120mg、大豆卵磷脂180mg、油酸30mg放入10ml烧杯中,精密量取5ml无水乙醇倒入上述10ml烧杯中,将烧杯放入75℃水浴中加热使脂质融化,超声混匀(超声功率为300W,超声时间为4min)作为油相;精密称取200mg吐温80,将吐温80加入到25ml烧杯中,量取20ml注射用水加入到上述25ml烧杯中,搅拌使吐温80溶解在纯净水中,将吐温80的水溶液放入75℃水浴中加热作为水相;在1000r/min的搅拌速度下用1ml玻璃注射器将有机相以2ml/min的速度注入水相中,75℃条件下搅拌乳化1h左右,乳化之后将乳化液倒入10ml(0~4℃)冰水中搅拌固化1h(搅拌速度为1000r/min),得到补骨脂素纳米结构脂质载体分散液,过0.45um微孔滤膜,装入10ml西林瓶中保存,得到液体包载补骨脂素的纳米结构脂质载体制剂。
实施例4
精密称取补骨脂素4mg、双硬脂酸甘油酯180mg、合成磷脂270mg、液体石蜡45mg放入10ml烧杯中,精密量取5ml无水乙醇倒入上述10ml烧杯中,将烧杯放入75℃水浴中加热使脂质融化,超声混匀(超声功率为200W,超声时间为5min)作为油相;精密称取400mg吐温80,将吐温80加入到25ml烧杯中,量取20ml注射用水加入到上述25ml烧杯中,搅拌使吐温80溶解在纯净水中,将吐温80的水溶液放入75℃水浴中加热作为水相;在1000r/min的搅拌速度下用1ml玻璃注射器将有机相以2ml/min的速度注入水相中,75℃条件下搅拌乳化1h,乳化之后将乳化液倒入10ml(0~4℃)冰水中搅拌固化0.5h,得到补骨脂素纳米结构脂质载体分散液,过0.45um微孔滤膜,装入10ml西林瓶中保存,得到液体包载补骨脂素的纳米结构脂质载体制剂。
实施例5
精密称取补骨脂素2.5mg、硬脂酸120mg、大豆卵磷脂180mg、肉豆蔻酸异丙酯13.3mg放入10ml烧杯中,精密量取5ml无水乙醇倒入上述10ml烧杯中,将烧杯放入75℃水浴中加热使脂质融化,超声混匀(超声功率为200W,超声时间为5min)作为油相;精密称取400mg吐温80,将吐温80加入到25ml烧杯中,量取20ml注射用水加入到上述25ml烧杯中,搅拌使吐温80溶解在纯净水中,将吐温80的水溶液放入75℃水浴中加热作为水相;在1000r/min的搅拌速度下用1ml玻璃注射器将有机相以2ml/min的速度注入水相中,75℃条件下搅拌乳化1h左右,乳化之后将乳化液倒入10ml(0~4℃)冰水中搅拌固化2h,得到补骨脂素纳米结构脂质载体分散液,过0.45um微孔滤膜,装入10ml西林瓶中保存,得到液体包载补骨脂素的纳米结构脂质载体制剂。
实施例6
精密称取补骨脂素1mg、山嵛酸甘油酯120mg、大豆卵磷脂180mg、Labrasol(辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯)30.0mg放入10ml烧杯中,精密量取5ml无水乙醇倒入上述10ml烧杯中,将烧杯放入75℃水浴中加热使脂质融化,超声混匀(超声功率为200W,超声时间为5min)作为油相;精密称取400mg泊洛沙姆188,将泊洛沙姆188加入到25ml烧杯中,量取20ml注射用水加入到上述25ml烧杯中,搅拌使泊洛沙姆188溶解在纯净水中,将泊洛沙姆188的水溶液放入75℃水浴中加热作为水相;在1000r/min的搅拌速度下用1ml玻璃注射器将有机相以2ml/min的速度注入水相中,75℃条件下搅拌乳化1h,乳化之后将乳化液倒入10ml(0~4℃)冰水中搅拌固化1h,得到补骨脂素纳米结构脂质载体分散液,过0.45um微孔滤膜,装入10ml西林瓶中保存,得到液体包载补骨脂素的纳米结构脂质载体制剂。
实施例7
精密称取补骨脂素2mg、山嵛酸甘油酯120mg、大豆卵磷脂180mg、Labrasol(辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯)30.0mg放入10ml烧杯中,精密量取5ml无水乙醇倒入上述10ml烧杯中,将烧杯放入75℃水浴中加热使脂质融化,超声混匀(超声功率为300W,超声时间为3min)作为油相;精密称取400mg泊洛沙姆188,将泊洛沙姆188加入到25ml烧杯中,量取20ml注射用水加入到上述25ml烧杯中,搅拌使吐温80溶解在纯净水中,将吐温80的水溶液放入75℃水浴中加热作为水相;在1200r/min的搅拌速度下用1ml玻璃注射器将油相以1ml/min的速度注入水相中,70℃条件下搅拌乳化2h,乳化之后将乳化液倒入10ml(0~4℃)冰水中搅拌固化1h,得到补骨脂素纳米结构脂质载体分散液,过0.45um微孔滤膜,得到液体包载补骨脂素的纳米结构脂质载体制剂;将冻干保护剂溶液(质量浓度为5%的葡萄糖溶液)加入液体制剂中,通过冷冻干燥法制备固体包载补骨脂素的纳米结构脂质载体制剂。
实施例8
精密称取补骨脂素2.5mg、单硬脂酸甘油酯60mg、大豆卵磷脂90mg、Labrasol(辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯)15mg放入10ml烧杯中,精密量取5ml无水乙醇倒入上述10ml烧杯中,将烧杯放入75℃水浴中加热使脂质融化,超声混匀(超声功率为200W,超声时间为5min)作为油相;精密称取200mg吐温80,将吐温80加入到25ml烧杯中,量取20ml注射用水加入到上述25ml烧杯中,搅拌使吐温80溶解在纯净水中,将吐温80的水溶液放入75℃水浴中加热作为水相;在800r/min的搅拌速度下用1ml玻璃注射器将有机相以2ml/min的速度注入水相中,75℃条件下搅拌乳化1h左右,乳化之后将乳化液倒入10ml0-4℃冰水中固化0.5h,得到补骨脂素纳米结构脂质载体分散液,过0.45um微孔滤膜,得到液体包载补骨脂素的纳米结构脂质载体制剂;将冻干保护剂溶液(质量浓度为5%的甘露醇溶液)加入液体制剂中,通过冷冻干燥法制备固体包载补骨脂素的纳米结构脂质载体制剂。
实施例9
精密称取补骨脂素2.5mg、单硬脂酸甘油酯60mg、大豆卵磷脂90mg、Labrasol(辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯)15mg放入10ml烧杯中,精密量取5ml无水乙醇倒入上述10ml烧杯中,将烧杯放入70℃水浴中加热使脂质融化,超声混匀(超声功率为300W,超声时间为5min)作为油相;精密称取200mg吐温80,将吐温80加入到25ml烧杯中,量取20ml注射用水加入到上述25ml烧杯中,搅拌使吐温80溶解在纯净水中,将吐温80的水溶液放入70℃水浴中加热作为水相;在800r/min的搅拌速度下用1ml玻璃注射器将有机相以5ml/min的速度注入水相中,70℃条件下搅拌乳化1h,乳化之后将乳化液倒入10ml(0~4℃)冰水中固化0.5h,得到补骨脂素纳米结构脂质载体分散液,过0.45um微孔滤膜,装入10ml西林瓶中保存,得到液体包载补骨脂素的纳米结构脂质载体制剂。
取实施例1中所述的纳米结构脂质载体进行结构表征和性能测试:
1、结构表征(TEM图):将液体包载补骨脂素的纳米结构脂质载体,加水稀释,然后滴加在覆盖碳膜的铜网上,用2%磷钨酸染色,在透射电镜下观察纳米粒形态并拍摄TEM照片,结果如图1所示。从图中可以看出,包载补骨脂素的纳米结构脂质载体呈圆整形态粒子,分布均匀,无聚集和粘连。
2、Zeta电位与粒径测定:将液体包载补骨脂素的纳米结构脂质载体用水稀释,用激光粒度分析仪测定纳米粒的Zeta电位与粒径。结果如图2,3所示。从图中可知,载体粒径95.5nm,PDI0.248,Zeta电位-18.7mv。
3、包封率测定:采用离心超滤法测定纳米结构脂质载体的包封率:取液体包载补骨脂素的纳米结构脂质载体,用甲醇破乳,HPLC法测定药物总量(w1),另取0.5ml置于超滤管中,12000r/min离心20min,HPLC法测定超滤管外管中游离药物含量(w2):包封率=(w1-w2)/w1。色谱条件PhenomenexC18色谱柱(250×4.6mm,4μm);流动相乙腈:水(55:45);检测波长245nm;流速1.0mL/min;柱温25℃;进样量20ul。
测试结果:测得固体脂质纳米粒混悬液的包封率为84.1%。
上述实施例为本发明较佳的实施方式,但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制,其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化,均应为等效的置换方式,都包含在本发明的保护范围之内。
Claims (9)
1.一种包载补骨脂素的纳米结构脂质载体制剂,其特征在于:由补骨脂素、固体脂质、液体脂质、脂溶性乳化剂、有机溶剂、水溶性乳化剂、注射用水以及冰水组分组成;
所述补骨脂素:固体脂质:脂溶性乳化剂:液体脂质:水溶性乳化剂重量比为(1~4):(60~180):(90~270)(13.3~45):(200~600);所述补骨脂素与有机溶剂用量关系为每5ml的有机溶剂溶有1~4mg的补骨脂素;所述水溶性乳化剂与注射用水的用量关系为每20ml的注射用水溶有200~600mg水溶性乳化剂。
2.根据权利要求1所述包载补骨脂素的纳米结构脂质载体制剂,其特征在于:所述固体脂质为硬脂酸、胆固醇、棕榈酸、山嵛酸、单硬脂酸甘油酯、双硬脂酸甘油酯、豆蔻酸甘油酯、单棕榈酸甘油酯、山嵛酸甘油酯或月桂酸甘油酯中的一种以上;
所述液体脂质为辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯、棕榈酸异丙酯、肉豆蔻酸异丙酯、液体石蜡、大豆油或油酸中的一种以上。
3.根据权利要求1所述包载补骨脂素的纳米结构脂质载体制剂,其特征在于:所述脂溶性乳化剂为大豆卵磷脂或合成磷脂;
所述水溶性乳化剂为泊洛沙姆、聚山梨醇酯、聚氧乙烯脂肪醇醚、聚氧乙烯脂肪酸酯、胆酸钠或脱氧胆酸钠中的一种以上;
所述有机溶剂为无水乙醇。
4.根据权利要求3所述包载补骨脂素的纳米结构脂质载体制剂,其特征在于:所述泊洛沙姆为泊洛沙姆407,泊洛沙姆338或泊洛沙姆188;
所述聚山梨醇酯为吐温80、吐温60或吐温20。
5.根据权利要求1所述包载补骨脂素的纳米结构脂质载体制剂,其特征在于:所述包载补骨脂素的纳米结构脂质载体制剂中载体的粒径为70~160nm。
6.根据权利要求1所述包载补骨脂素的纳米结构脂质载体制剂的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:
(1)将补骨脂素、固体脂质、液体脂质以及脂溶性乳化剂依次加入有机溶剂中,加热融化,超声分散混匀,得到油相分散液;
(2)将水溶性乳化剂加入装有注射水的反应器中,搅拌溶解,得到水相溶液;
(3)在70~80℃条件下,将油相分散液注入水相溶液中搅拌乳化0.5~2h,得到乳化液;
(4)将乳化液加入冰水中搅拌固化0.5~2h,微孔滤膜过滤,得到液体包载补骨脂素的纳米结构脂质载体制剂;
或向液体包载补骨脂素的纳米结构脂质载体制剂中加入冻干保护剂溶液,通过干燥处理,得到固体包载补骨脂素的纳米结构脂质载体制剂。
7.根据权利要求6所述包载补骨脂素的纳米结构脂质载体制剂的制备方法,其特征在于:步骤(1)中所述加热融化的温度为70~80℃;所述超声功率为200~400W,超声时间为2~5min;
步骤(2)中所述搅拌速度为800~1200r/min;
步骤(3)中所述油相分散液注入水相溶液的速度为1~5ml/min;所述搅拌速度为800~1200r/min。
8.根据权利要求6所述包载补骨脂素的纳米结构脂质载体制剂的制备方法,其特征在于:步骤(4)中所述冰水与乳化液的体积比为1:1;
步骤(4)中所述微孔滤膜为水系滤膜,其孔径为0.22um或0.45um。
9.根据权利要求6所述包载补骨脂素的纳米结构脂质载体制剂的制备方法,其特征在于:步骤(4)中所述冻干保护剂溶液的质量百分比浓度为2~10%;
所述冻干保护剂为葡萄糖、甘露醇、蔗糖、乳糖、果糖、山梨醇、海藻糖、麦芽糖、右旋糖酐或氨基酸中的一种以上;
步骤(4)中所述干燥处理方法为喷雾干燥法或冷冻干燥法。
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