CN104010697B - 胶原水解物及其用途 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及胶原水解物及其用于治疗和/或预防脂肪团的用途。

Description

胶原水解物及其用途
技术领域
本发明涉及胶原水解物及其用于治疗和/或预防脂肪团的用途。
背景技术
脂肪团涉及皮肤性质的不合需要的改变且在外观上明显地在皮肤表面中形成凹陷。受影响的几乎仅为女性，不过随着年龄增加，涉及多至80％至98％的女性。脂肪团最主要在具有显著皮下脂肪组织的区域中，即在臀部、屁股、腹部、大腿和上臂上出现。
根据最近的研究，认为脂肪团的成因是真皮和皮下结缔组织中的特定改变，特别是由连接网状真皮到位于皮下脂肪组织下的肌肉的胶原纤维形成的隔膜的收缩。这总体上引起皮肤的弹性降低。
对于脂肪团的已知治疗特别是包括物理方法，例如淋巴引流、超声波或真空，不过这些通常并没有产生成功或至少没有产生持久的成功。局部使用化妆品例如乳膏或软膏也没有能够对脂肪团实现任何病原性治疗，因为在该现象中并不直接牵涉表皮的上皮层。
已知通过口服胶原水解物，可以在人类皮肤的健康方面实现有利的效果(参见V.Zague：“A new view concerning the effects of collagen hydrolysate intake onskin properties(关于所摄入胶原水解物对皮肤性质的作用的新观点)”，在Arch.Dermatol.Res.2008(9)479中)。由于合适低分子量胶原肽的吸收能力和皮肤的良好灌注，所以口服的胶原水解物的积聚在皮肤中以特别大的程度发生，浓度在摄取之后的约12至24小时的时间内处于最大值(参见，M.Watanabe-Kamiyama等：“Absorption andeffectiveness of orally administered low molecularweight collagen hydrolysatein rats(在大鼠中经口施用的低分子量胶原水解物的吸收和有效性)”，在J.Agric.FoodChem.2010(58)835中)。
发明内容
在此背景下，本发明提出病原性治疗和/或预防脂肪团的新方法，所述方法包括使用胶原水解物。
因此，本发明的一方面涉及作为用于治疗和/或预防脂肪团的活性成分的胶原水解物。
在临床试验中也已经显示，在施用胶原水解物之后，皮肤的弹性适度增加。该作用在超过50岁的女性中特别显著。较大的皮肤弹性使得脂肪团的严重性降低。
另外，多种体外研究已经显示，通过胶原水解物刺激真皮结缔组织的细胞外基质蛋白的合成。通过皮肤细胞(皮肤成纤维细胞)形成的这些蛋白质包括胶原(特别是I型)、弹性蛋白和蛋白多糖(例如，双糖链蛋白多糖、多官能蛋白聚糖和核心蛋白聚糖)。这些蛋白质以足够量合成，决定着皮肤的细胞外基质的形成和再生，这又是对真皮性质例如弹性、回弹性和水分调控至关重要的决定性因素。
在本发明的上下文中使用的胶原水解物有利地具有相对较低的分子量。优选至少90重量％的所述胶原水解物具有小于3,500Da的分子量，更优选至少45重量％具有小于1,500Da的分子量。已经发现可以用这种分子量特别低的组分实现更显著的效果。可以例如借助于凝胶渗透色谱法，使用由确定的胶原片段制成的校准用标准，非常精确且可重现地测定所述胶原水解物的分子量分布，其受相关极限值的影响。
根据本发明使用的胶原水解物的平均分子量(质量平均摩尔质量Mw)通常在约1,700Da至约2,300Da范围内。
在本发明的一个优选的实施方式中，所述胶原水解物包含至少四种具有600Da至1,200Da的分子量的特征性肽。胶原水解物含有具有不同链长或分子量的肽，这些肽在所述胶原的蛋白质链分解时出现，其中取决于所述水解物的生产条件，这些肽的分子量分布可能显著不同。已经惊奇地发现具有上述性质的胶原水解物在合成基质蛋白质方面具有特别有利的作用，即比不含所述特征性肽的胶原水解物显示出明显更好的结果。
特别是借助于MALDI质谱，可以确定所述胶原水解物的特征性肽的存在，其中所述特征性肽在质谱上表现为峰。优选地，用借助于MALDI测定的质谱发现的分子量分布中，所述至少四种特征性肽具有与其周围强度相比较至少两倍、更优选至少四倍的强度。
在本发明的一个优选的实施方式中，所述胶原水解物包含620Da至690Da的肽、790Da至860Da的肽、980Da至1,050Da的肽和1,175Da至1,245Da的肽。所述胶原水解物还可以具有1,500Da至3,500Da的特征性肽。
优选地，所述胶原水解物具有12重量％或更高的羟基脯氨酸含量。通过脯氨酸的后转译羟基化形成的氨基酸羟基脯氨酸仅出现在胶原中，使得在所述胶原水解物中高比例的羟基脯氨酸为广泛缺乏的其它结缔组织蛋白(例如，弹性蛋白和蛋白多糖)提供了度量，取决于生产方法，这些结缔组织蛋白的片段也可以以特定量包含在胶原水解物中。
有利的是，通过明胶的酶促水解生产所述胶原水解物。明胶包括变性的胶原，且借助于本领域普通技术人员已知的多种方法从多种动物物种的结缔组织或骨骼获得。在本发明的上下文中，作为胶原水解物用原料使用的明胶优选从特别是猪或牛的哺乳动物的皮肤中提取，不过也并不排除使用来自家禽的明胶。猪明胶、特别是猪皮明胶特别优选地作为原料。
通常借助于内切蛋白酶实施所述明胶的酶促水解且在本发明的情况下优选按次序使用多种内切蛋白酶(即，至少两种不同的内切蛋白酶)，由此相应地影响所得胶原水解物的氨基酸分布，且增加所述水解物的积极作用。
根据本发明的一个优选的实施方式，通过至少两种具有不同特异性的内切蛋白酶的连续作用生成所述胶原水解物，所述至少两种内切蛋白酶特别是至少两种不同的金属蛋白酶和/或丝氨酸蛋白酶，即在特定氨基酸之前或之后分解胶原分子的氨基酸序列的蛋白酶。有利地，所述金属蛋白酶和/或丝氨酸蛋白酶是如下的酶，该酶来自微生物枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、米曲霉和蜂蜜曲霉。
借助于选择合适的内切蛋白酶，不仅可以获得所述胶原水解物的特征性分子量分布，而且可以影响在所述水解物中获得的肽末端处的氨基酸的类型。在这方面，优选例如所述胶原水解物的至少50％的N-端氨基酸为疏水氨基酸，特别是丙氨酸、亮氨酸和异亮氨酸。
根据本发明的一个优选的实施方式，所述胶原水解物被提供成肠道施用，特别是口服形式。与局部施用的情况相比，在口服时，经血液循环实现所述胶原水解物向作用部位，即特别是皮肤成纤维细胞的更有效的传输。另外，该施用形式通常对于使用者明显更容易。
因为胶原水解物从在食品法规下批准的原料中提取，所以其可以在本发明的上下文中优选作为营养增补剂使用，以治疗和/或预防脂肪团。这样的营养增补剂可被确定为“营养品”或“口服美妆品”。
可以以几乎任何形式提供所述营养增补剂，所述形式例如为片剂、胶囊、糖衣丸、锭剂、药袋或凝胶或溶液(例如，在单安瓿中或在饮料中)。
可选地，所述胶原水解物可以包含在食品或高档食品项中，例如包含在糖果中或在用于制作饮料的速溶粉中。所述水解物因此可以在没有另外施力的情况下在正常营养的情况下(作为“功能性食品”)被使用者消耗。在这方面，特别有利的是所述胶原水解物基本没有味道。
有利的是，提供约1.5g至5g、优选约2g至3g、更优选约2.3g至2.7g的所述胶原水解物的每日摄入量。已经发现，通过口服该量的水解物，能够实现显著的效果，不能通过增加该日剂量而大幅增强该效果。
在根据本发明使用时，所述胶原水解物可以与对健康且特别是对皮肤健康具有有利作用的其它活性成分、尤其与具有抗氧化作用的活性成分组合。这样的活性成分优选选自维生素，特别是维生素C和E，矿物，ω-3脂肪酸，ω-6脂肪酸，ω-9脂肪酸，生物素，叶黄素，番茄红素，咖啡因，葡糖胺，软骨素，透明质酸，叶酸，氨基酸，泛醌-10，超氧化物歧化酶和得自蔷薇果、防臭木或绿茶的植物提取物。
在本发明的一个优选的实施方式中，所述胶原水解物的服用被提供成治疗和/或预防特别是超过50岁的女性且通常是绝经后期女性的脂肪团。在通常受脂肪团严重影响的该年龄组中，如由如下所述的临床试验所显示的，效果特别显著。
本发明还涉及治疗和/或预防患者的脂肪团的方法，所述方法包括特别是以口服形式施用胶原水解物至患者。
已经关于根据本发明的用途，特别是在所述胶原水解物的性质和施用剂量方面，描述了所述方法的优选实施方式。
本发明还涉及胶原水解物用于治疗和/或预防如下伸展疤痕的用途，该伸展疤痕处于特别是在孕妇中出现的所谓的妊娠伸展疤痕(妊娠纹)的形式。这些条纹的成因是由皮肤的严重拉伸引起的皮下结缔组织中的细小撕裂。类似于脂肪团，所述撕裂的出现也可以通过在施用胶原水解物的情况下增加皮肤弹性来抵消。
本发明的又一方面涉及胶原水解物用于治疗和/或预防由于由褥疮溃疡引起的压力产生的皮肤局部损伤、例如出现褥疮的用途。这涉及经受外部压力的皮肤，其不利作用可以通过增加皮肤的弹性来减少。附图说明
现在将基于以下实施例并参考附图更详细地描述本发明的这种优点和其它优点，附图显示：
图1A至1C：关于对I型胶原、双糖链蛋白多糖或多功能蛋白聚糖的合成的刺激的图示；
图2A和图2B：关于在无毛小鼠中皮肤水分增加的图示；
图3：关于对CE蛋白的合成的刺激的图示；
图4A至4C：多种胶原水解物的MALDI质谱；及
图5A和图5B：关于对I型胶原、核心蛋白聚糖和多功能蛋白聚糖的合成的刺激的图示。
具体实施方式
实施例：
1.胶原水解物的生成和性质
为了生成用于本发明用途的胶原水解物，将浓度为20重量％至40重量％的猪皮明胶(A型，200g至250g Bloom)(干燥材料)的水溶液用作原料。通过微生物来源的两种不同的内切蛋白酶在50℃至60℃下连续作用120分钟至180分钟来酶促水解该明胶，其中使用来自枯草芽孢杆菌或来自解淀粉芽孢杆菌的内切蛋白酶作为第一酶，且使用来自地衣芽孢杆菌的内切蛋白酶作为第二酶。随后，使所述酶热失活且将溶液喷雾干燥。
可以借助于凝胶渗透色谱法使用以下参数测定所得胶原水解物的分子量分布：
静止相：TSK2000SW XL(Tosoh Bioscience GmbH(日本东曹股份有限公司))
流动相：0.4mol/l磷酸二氢钠，pH5.3
流速：0.5ml/分钟
校准用标准：确定的胶原-I型片段(弗赖伯格，FILK)
检测：UV检测器Knauer K-2501，在214nm下
该测定产生该胶原水解物(在下文中称作低分子水解物)的分子量分布，如在下表1中所陈述的。出于比较目的，在表1中，还显示用相同方法测定的市售胶原水解物的分子量分布(在下文中称作高分子水解物)：
表1
分子量范围 低分子水解物 高分子水解物
>7,500Da <5重量％ <10重量％
3,500～7,500Da 约12～18重量％ 约25～35重量％
1,500～3,500Da 约25～31重量％ 约29～35重量％
500～1,500Da 约40～46重量％ 约24～30重量％
<500Da 约5～10重量％ 约2～5重量％
该低分子水解物的羟基脯氨酸含量为约12重量％至13重量％，且在用氯胺-T氧化并用对二甲基氨基苯甲醛转化之后，可以光度学地测定。该水解物的高于50％的N-端氨基酸为疏水氨基酸，特别是丙氨酸、亮氨酸和异亮氨酸。
2.关于胶原水解物对脂肪团的功效的临床试验
根据实施例1生成的用于治疗和/或预防脂肪团的低分子胶原水解物的功效，在双盲随机化安慰剂对照的试验中进行研究。试验受试者为69位年龄在35.3岁和55.4岁之间的健康女性，将她们分成三组，每组23位受试者。68位受试者成功地完成了该试验。
始于在该试验开始之前的6周，不容许使用皮肤学治疗，且受试者在试验期间不改变她们的生活和营养习惯，也不接受任何另外的营养增补剂或维生素制剂或者将她们的皮肤暴露于强烈的UV辐射。对前臂的手掌侧不使用化妆制剂，在此处将研究胶原水解物对皮肤性质的作用。
在这三组之中，经8周的时间，第一组每日接受2.5g胶原水解物(早上)，第二组每日接受5g胶原水解物(早上和下午各2.5g)，而第三组接受安慰剂。对于口服，可将水解物溶解于水或冷饮(除了牛奶之外)中。
在首次摄取之前，在4周之后和在8周之后，在受试者的左上臂的手掌侧上测量皮肤的以下参数：
-用SEM测量皮肤弹性
(三次测量的平均值)
-用装置测量经表皮损失的水分(TEWL)
(三次测量的平均值)
-用CM825测量皮肤水分含量
(十次测量的平均值)
所有测量都在气候控制的房间中在21.5℃(±1℃)的温度和50％(±5％)的相对空气湿度下适应环境30分钟之后进行。
在用胶原水解物治疗的组中在4周之后和在8周之后所有三种参数均显著增加。在下表2中给出在8周之后测量的值，特别是作为与给予安慰剂的组相比较增加的百分数而给出：
表2
参数 2.5g水解物/日 5g水解物/日
皮肤弹性 约7％ 约9％
TEWL 约11％ 约14％
皮肤水分 约6％ 约7％
皮肤弹性增加表明口服胶原水解物用于治疗和/或预防脂肪团的有效性。TEWL和皮肤水分的改善是水解物对皮肤健康的另外有利的作用，且特别是引起表皮屏障功能的提高。
检验按年龄组来区分的皮肤弹性增加，产生在表3中列出的结果，其中将不到50岁的女性(平均年龄44.1岁)与超过50岁的女性(平均年龄53.0岁)相比较：
表3
皮肤弹性 2.5g水解物/日 5g水解物/日
不到50岁的女性 约3％ 约5％
超过50岁的女性 约14％ 约15％
在此值得注意的是，50岁以上的女性的皮肤弹性特别显著地改善，因此这些女性代表胶原水解物的根据本发明使用的优选目标群体。
在完成8周施用期之后再测量皮肤弹性4周。在8周之后测量到仍然保持92％至98％的增加，表明着胶原水解物的更长的持久效果。
3.对体外合成胞外基质蛋白的刺激
用人类皮肤成纤维细胞(皮肤细胞)体外研究对胶原(I型)和蛋白聚糖双糖链蛋白多糖和多功能蛋白聚糖的合成的刺激。对于该目的，将细胞用0.5mg/ml低分子水解物或高分子水解物培育24小时，然后借助于实时PCR测定胶原RNA、双糖链蛋白多糖RNA和多功能蛋白聚糖RNA的表达并半定量评价(相对于没有水解物的对照物)。
I型胶原的结果作为柱状图示于图1A中，双糖链蛋白多糖的结果作为柱状图示于图1B中且多功能蛋白聚糖的结果作为柱状图示于图1C中，各图示显示至少18次测量的平均值。在横坐标上表示相对于对照物(＝1)的RNA表达。在每种情况下左侧实心柱代表对照物，而中间阴影柱代表高分子水解物，且右侧虚线柱为低分子水解物。
很明显，两种胶原水解物都刺激所有三种基质蛋白的合成，不过在每种情况下，低分子水解物表现出比高分子水解物更强的积极作用。对于除弹性蛋白之外主要引起皮肤回弹性和弹性的胶原，和对于在皮肤水分调控中起重要作用的多功能蛋白聚糖，特别明显地表现低分子水解物的增强作用。
除了根据本发明治疗和/或预防脂肪团之外，胶原水解物对不同基质蛋白的这些刺激性质，还提供了关于例如牛皮癣的疾病的起始点，在这些疾病中皮肤的正常功能受到损害。
4.在动物研究中增加皮肤的水分含量
使用无毛小鼠直接研究胶原水解物对皮肤水分的影响。无毛小鼠代表常用于皮肤学研究且自其获得的知识原则上可应用到人类皮肤的建立的模型系统(参见，例如T.Fujimura等，J.Dermatol.Sci.2000(24)105-111和Y.Nishimori等，J.Invest.Dermatol.2001(117)1458-1463)。
对动物每日用150μg胶原水解物/kg体重喂饲3周的时间，而同时对照组接受BSA。同时，所有动物给予18mJ/cm2皮肤表面的每周UV-B辐射剂量，由此使皮肤水分被不利地影响。
在1周之后和在3周之后用Corneometer CM825(生产商Courage &Khazaka)测量水分含量。此处的测量原理基于由于结合到上皮层中的水的介电常数而引起的测量电容器的电容改变，其与大部分其它物质的介电常数明显不同。
在1周之后的测量结果作为柱状图示于图2A中，且在3周之后的测量结果作为柱状图示于图2B中，各图示显示7次测量的平均值和标准误差。在横坐标上表示相对于对照物(＝1)的皮肤水分含量。在每种情况下左侧实心柱代表对照物，而中间阴影柱代表高分子水解物，且右侧虚线柱为低分子水解物。
很明显，与高分子水解物相比，低分子水解物使皮肤水分的增加程度在1周之后以及在3周之后都更大。
5.对体外CE蛋白的合成的刺激
所谓的“角质化包膜”蛋白在皮肤防止病原微生物和有毒物质进入的屏障功能中起重要作用。CE蛋白内皮蛋白、兜甲蛋白和丝聚合蛋白的合成，在先前已经用150μg胶原水解物/kg体重/日(如上所述)喂饲5周的无毛小鼠中进行测定。在从皮肤提取蛋白质之后用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白质印迹法用特异性抗体，进行这些蛋白质相对于对照组(用BSA喂饲)的定量。
结果作为柱状图示于图3中，图示显示7次测量的平均值和标准误差。在横坐标上表示相对于对照物(＝1)在用低分子水解物喂饲之后CE蛋白的量。左侧柱代表内皮蛋白，中间柱代表兜甲蛋白且右侧柱代表丝聚合蛋白。
很明显，所研究的所有三种CE蛋白的合成都通过口服胶原水解物而受到刺激，且在内皮蛋白的情形下，实际上被刺激超过三倍。
6.使用MALDI-MS分析分子量分布
将根据实施例1生成的具有约2,000Da的平均分子量的低分子胶原水解物(在下文中，称作水解物A)，与具有约2,100Da的平均分子量(在下文中称作水解物B)和具有约2,900Da的平均分子量(在下文中称作水解物C)的两种市售胶原水解物进行比较。
借助于MALDI质谱(MALDI-MS)分析这三种水解物的精确分子量分布。对于该目的，将样品在0.1％三氟乙酸中调节到10μg/μl的最终浓度，然后使用μC18材料纯化。用HCCA基质在MALDI靶材上制备样品，使用Ultraflex-III-TOF/TOF质谱仪(生产商：BrukerDaltonics)测定质谱。
图4A至4C显示胶原水解物A、B和C的相应质谱或分子量分布，其中在纵坐标上表示分子量或质量数且在横坐标上表示强度。这三种光谱的比较显示，水解物A包含按照表4的以下特征性肽，与它们周围的峰相比较，相关峰具有二至四倍的强度。
表4
约656Da
约825Da
约1,014Da
约1,211Da
约1,927Da
约2,410Da
约3,433Da
特别地，在这两种市售水解物B和C中没有相应的在600Da至1,500Da的这四种肽，因此它们特别是水解物A的特征性肽。
7.对体外胞外基质蛋白的合成的激发
在人类皮肤成纤维细胞(皮肤细胞)中体外研究对胶原(I型)和蛋白聚糖核心蛋白聚糖和多功能蛋白聚糖的合成的刺激。对于该目的，将细胞用0.5mg/ml水解物A、B和C中的每种分别培育24小时，然后借助于实时PCR测定胶原RNA、核心蛋白聚糖RNA和多功能蛋白聚糖RNA的表达并半定量评价。核心蛋白聚糖在皮肤中形成胶原纤维方面起重要作用。
水解物B的结果作为柱状图示于图5A中且水解物C的结果作为柱状图示于图5B中，横坐标代表相对于水解物A的RNA表达(＝1)分别在市售水解物B和C中的RNA表达。左侧柱代表I型胶原，中间柱代表核心蛋白聚糖且右侧柱代表多功能蛋白聚糖。在每种情况下，显示至少7次测量的平均值以及标准误差。
有趣地，数据显示，对于所有三种基质蛋白，与水解物A相比较，在用分子量仅略高的水解物B和C的情况下，都出现明显较小的RNA合成刺激。水解物A的特征性肽因此在其有利效果方面看起来发挥决定性的作用。
8.用于营养(增补)产品的实施例配方
下文给出了用于所述胶原水解物的本发明用途的一些实施例配方，不过这些配方自然可以以多种方式进行变更：
Kapsetten(营养增补剂)
甘油 53.67重量％
胶原水解物 21.95重量％
明胶 10.08重量％
瓜耳胶 6.00重量％
卵磷脂 5.00重量％
柠檬酸 2.00重量％
调味剂(卡西斯(Cassis)) 0.50重量％
橙油 0.50重量％
安赛蜜K 0.30重量％
巧克力(Schokolade)
可可块 51.0重量％
蔗糖 22.4重量％
可可脂 16.6重量％
胶原水解物 10.0重量％
饮料
水 63.00重量％
芦荟浓缩物 31.00重量％
胶原水解物 4.00重量％
蔗糖 1.50重量％
柠檬酸 0.26重量％
调味剂和
着色剂 0.24重量％
三氯蔗糖 0.0031重量％

Claims (16)

1.胶原水解物作为制备用于治疗和/或预防脂肪团的活性成分的用途，其中所述胶原水解物的平均分子量在1,700Da至2,300Da的范围内，从哺乳动物的皮肤或从家禽中提取的明胶用作所述胶原水解物的原料，所述胶原水解物包含至少四种具有600Da至1,200Da的分子量的特征性肽，并且至少45重量％的所述胶原水解物具有小于1,500Da的分子量。
2.根据权利要求1所述的用途，其中在借助于MALDI质谱发现的分子量分布中，所述至少四种特征性肽具有与其周围强度相比至少两倍的强度。
3.根据权利要求1或2所述的用途，所述胶原水解物包含620Da至690Da的肽、790Da至860Da的肽、980Da至1,050Da的肽和1,175Da至1,245Da的肽。
4.根据权利要求1或2所述的用途，所述胶原水解物还包含具有1,500Da至3,500Da的分子量的特征性肽。
5.根据权利要求1或2所述的用途，所述胶原水解物具有12重量％或更高的羟基脯氨酸含量。
6.根据权利要求1或2所述的用途，其中通过明胶的酶促水解生产所述胶原水解物。
7.根据权利要求6所述的用途，所述明胶为猪明胶。
8.根据权利要求6所述的用途，其中经由具有不同特异性的至少两种内切蛋白酶的连续作用生成所述胶原水解物。
9.根据权利要求8所述的用途，其中所述至少两种内切蛋白酶选自至少两种不同的金属蛋白酶和/或丝氨酸蛋白酶，并且其中所述金属蛋白酶和/或丝氨酸蛋白酶选自如下的酶，该酶来自微生物枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、米曲霉和蜂蜜曲霉。
10.根据权利要求1或2所述的用途，其中所述胶原水解物的至少50％的N-端氨基酸为疏水氨基酸。
11.根据权利要求1或2所述的用途，其中所述胶原水解物被提供成肠道使用。
12.根据权利要求11所述的用途，其中所述胶原水解物为营养增补剂。
13.根据权利要求11所述的用途，其中提供1.5g至5g的所述胶原水解物的每日摄入量。
14.根据权利要求1或2所述的用途，其中所述胶原水解物与一种或多种另外的活性成分相组合，所述活性成分选自维生素、矿物、ω-3脂肪酸、ω-6脂肪酸、ω-9脂肪酸、生物素、叶黄素、番茄红素、咖啡因、葡糖胺、软骨素、透明质酸、叶酸、氨基酸、泛醌-10、超氧化物歧化酶和来自蔷薇果、防臭木或绿茶的植物提取物。
15.根据权利要求1或2所述的用途，其中所述胶原水解物被提供成施用至超过50岁的女性。
16.胶原水解物作为制备用于治疗和/或预防伸展疤痕的活性成分的用途，其中所述胶原水解物的平均分子量在1,700Da至2,300Da的范围内，从哺乳动物的皮肤或从家禽中提取的明胶用作所述胶原水解物的原料，所述胶原水解物包含至少四种具有600Da至1,200Da的分子量的特征性肽，并且至少45重量％的所述胶原水解物具有小于1,500Da的分子量。
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