CN104001482A - 一种医用胆红素选择性灌流吸附剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

一种医用胆红素选择性灌流吸附剂及其制备方法，将用于聚合形成功能载体的各单体混合组成油相，然后与配制的分散剂水相混合均匀，用惰性气体或氮气排空反应体系中的氧气，加入引发剂在0～90℃反应；反应结束后过滤出产物；将产物加入溶剂中，加入含有双官能团的空间分子臂物质进行反应，结束后过滤出产物；得到的产物与含双官能团的偶联剂溶液混合，反应后滤出、洗涤并干燥后加入配制好的白蛋白水溶液中，或直接将得到的产物加入配制好的白蛋白水溶液中，与白蛋白水溶液混合后，在0-65℃反应，反应结束后过滤出产物，洗涤并干燥后即为吸附剂。所得吸附剂的微观分子结构和功能与目标被结合吸附的致病物质胆红素的微观分子结构和功能匹配，实现更特异性相互结合作用，增强了选择性吸附效果；具有重要的卫生意义、科学理论意义和应用前景。

Description

一种医用胆红素选择性灌流吸附剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种吸附剂，具体的说是一种医用胆红素选择性灌流吸附剂及其制备方法。

背景技术

血液净化疗法是自20世纪80年代以来出现的一种非常规临床治疗方法，其通过清除血液中的特定致病物质来实现治疗某些病症的目的，其实质是生物分离技术在医学领域的应用，其特征是通过在体外建立临时的人体血液循环支路，使血液流经吸附装置中特定的吸附/分离材料，以除去血液中的特定致病物质，净化人体的内环境，达到治疗某些疾病的目的。利用特定的医学吸附/分离材料，使血液中胆红素被选择性吸附到材料上，从而被从血液中去除，达到净化血液、迅速降低胆红素浓度的目的，是血液净化疗法中用于治疗高胆红素血症的重要疗法。

由于肝炎黄疸病人的肝脏解毒功能受损，新生儿肝脏的解毒功能未健全，新生儿病理性黄疸时在短时间内就会产生和累积大量的胆红素，远远超过新生儿肝脏的解毒功能，所以临床上单纯的药物治疗，以及蓝光照射物理治疗在治疗中、重度高胆红素血症时，实际收效甚微，甚至不适用(比如新生儿重度病理性黄疸时)。此时，不得不籍用其他非药物疗法方以能在短时间内奏效，比如施行血液净化疗法、换血法/血浆置换疗法等。

采用换血疗法/血浆置换疗法，则需要有匹配的健康的血液/血浆，但由于血源供应紧张、输血并发症和综合征、血液制品中可能存在的交叉感染如肝炎病毒、艾滋病毒等潜在风险，以及个体差异致使不能施行换血术等，使得换血疗法虽然在治疗，特别是抢救治疗时，及时、有效且高效，但存在风险性和局限性，是不得已而为之的方法。如果有其他更理想的方法，换血法将会被替代而不被优先急救使用。

采用血液净化疗法，即将高胆红素血症患者的血液通过体外循环引出体外，流经装填有特定医学吸附/分离材料的吸附装置(通常为吸附柱)，在吸附柱中，胆红素被部分吸附到医学材料上，而从血液中被去除，使得血液中的致病物质胆红素的浓度迅速地大为下降(或下降到药物治疗起效的范围之内后再行药物治疗)，为肝脏功能的恢复赢得时间，从而达到治疗的目的。由于血液净化疗法无需外来血液，不受外来血液的供应限制、是否匹配、输血并发症等的局限，又不存在血液制品潜在风险交叉感染的问题，是比换血疗法更方便、更理想、更安全、更科学的疗法，具有广阔的临床应用前景和重要的卫生意义。

目前，临床上采用换血疗法治疗高胆红素血症，虽然有效，但存在明显的不足和风险，属于不得以而为之的急救措施；采用血液净化之血液灌流疗法，其关键是医学安全性高且医学疗效高的胆红素吸附/分离材料。由于人体血液体系的复杂性，目前临床上使用的商品化胆红素医学吸附/分离材料的实际效率低下(据统计报道在5%-30%)，离期望达到换血疗法的效率指标30%-60%，甚至如有可能更高达如70%以上的临床使用效率还很有大很大的差距。因此，发明更高效又兼具医学安全性的胆红素医学吸附/分离材料具有重要的意义。

科学研究已表明：高胆红素血症的发生是由体内的肝脏解毒功能不足，体内胆红素产生过量而又无法及时代谢排泄蓄积而致。如果能及时快速地将过量的胆红素去除，则可降低血液中胆红素的浓度，使得病症得以减轻或者痊愈，有效保护肝脏，为肝脏的功能恢复赢得时间。微观物质之间的相互吸引或结合作用有范德华力作用、静电作用、氢键作用、相似相容作用(如亲油性跟亲油性的相容)、亲和作用(如钥匙-锁的契合作用、抗原-抗体的亲和作用等)。胆红素分子结构已被确证，其分子结构中含有亲水基团/区域、疏水基团/区域、含有呈正电性的胺基和呈负电性的羧基，白蛋白是其天然的运载物质。

发明内容

本发明目的是为解决上述技术问题的不足，提供一种医用胆红素选择性灌流吸附剂及其制备方法，该方法简单，所制备的医用胆红素选择性灌流吸附剂，活性高，选择性吸附效果好，可以制备出系列的、不同等级的医学吸附剂，满足临床不同效果要求和患者层次的需求。

本发明为解决上述技术问题所采用的技术方案是：一种医用胆红素选择性灌流吸附剂，其成分包括功能载体和功能配基，所述功能载体为以丙烯酸为母体的单体、通过静电或氢键作用吸附胆红素的功能单体和通过相似相容原理吸附胆红素的功能单体聚合而成的高聚物；所述的功能配基为白蛋白、白蛋白衍生物和类白蛋白中的一种或两种以上；所述的功能配基通过偶联剂偶联固定在功能载体上，且功能载体和功能配基之间通过偶联剂和/或空间分子臂进行空间分隔；所述通过静电或氢键作用吸附胆红素的功能单体为含有羰基、羟基、胺基、酯基或醚基功能基团的单体；所述的通过相似相容原理吸附胆红素的功能单体为含疏水烷烃或芳烃的单体。

所述功能载体，每克功能载体上偶联固定至少30mg功能配基。

所述的以丙烯酸为母体的单体为甲基丙烯酸缩水甘油酯、甲基丙烯酸、甲基丙烯酸钠、丙烯酸、丙烯酸钠、甲基丙烯酸异辛酯、甲基丙烯酸月桂酸酯、甲基丙烯酸硬脂酸酯或甲基丙烯酸羟乙酯等。

所述的空间分子臂为至少有两端分别含有二胺、二醇、二醛、二巯、二酸、二环氧或二异氰的分子。

一种医用胆红素选择性灌流吸附剂的制备方法，其具体制备步骤为：

步骤一、将用于聚合形成功能载体的各单体混合组成油相，然后与配制的分散剂水相混合均匀，用惰性气体或氮气排空反应体系中的氧气，加入引发剂，在搅拌的作用下，于0-90℃反应1-16h；反应结束后过滤出产物，洗涤并干燥后备用；

步骤二、将步骤一的产物加入溶剂中，加入含有双官能团的空间分子臂物质，在0-95℃中反应1-24h，反应结束后过滤出产物，洗涤并干燥后备用；

步骤三、将步骤二得到的产物与含双官能团的偶联剂溶液混合，并于0-65℃反应10min-10h后滤出、洗涤并干燥后加入配置好的白蛋白水溶液中，或直接将步骤二得到的产物加入配制好的白蛋白水溶液中，与白蛋白水溶液混合后，在0-65℃反应10min-10h，反应结束后过滤出产物，洗涤并干燥后即得到医用胆红素选择性灌流吸附剂。

所述分散剂水相为醇解度1%-100%的聚乙烯醇，其水溶液的浓度为0.01%-30%。

所述分散剂水相的加入量为油相的50%-500%。

所述的引发剂为过氧类、偶氮类或氧化还原类自由基引发剂。

所述引发剂的加入量为油相质量的0.05%-5%。

所述的干燥，为真空干燥、减压干燥、常规热风干燥、冷冻真空干燥、风干等，干燥温度从－80℃-65℃恰当选用。

有益效果是：

1、本发明医用胆红素选择性灌流吸附剂，所选用的载体材料的微观分子结构和功能要能与胆红素的微观分子结构和功能匹配；胆红素分子中含有亲水性基团和区域，则根据相似相容原理，吸附剂载体的分子结构中要含有亲水性基团和区域；胆红素分子中含有疏水性基团和区域，则根据相似相容原理，吸附剂载体的分子结构中要含有疏水性基团和区域；)胆红素分子中含有呈正电性的基团，则根据静电作用异性相吸原理，吸附剂载体的分子结构中要含有呈负电性的基团；胆红素分子中含有呈负电性的基团，则根据静电作用异性相吸原理，吸附剂载体的分子结构中要含有呈正电性的基团；根据静电作用和氢键作用原理，载体分子结构中要含有羧基、羟基、胺基等功能基团；根据范德华力原理，载体分子要有一定分子量，不能太小，质量越大，范德华力也相应增大，增强相互之间的吸引力。根据亲和作用原理，将胆红素的内源性亲和配基（白蛋白或类白蛋白或白蛋白衍生物）以化学共价键方式牢固地固定到载体上；为保持亲和配基的生物活性，需要在载体中引入特定的分子臂，以削弱空间位阻效应；为提高吸附剂对胆红素的医用效果，要将物质之间微观的多种相互结合作用原理综合起来发挥多维协同效应，避免因单一作用而致实际医用效果不理想或低下。

2、本发明医用胆红素选择性灌流吸附剂的制备，选择由单体聚合而成为的高聚物作为功能载体材料，原料来源广泛和易得，原料成分易于调整和恰当组合，高聚物的分子量可控；选择由多种单体聚合而成的高聚物作为载体材料，可以便利地调节载体材料的亲水性、疏水性、含有功能基团的数量和种类，进而可调节固载功能配基的数量；采用共价键结合方式固定功能配基白蛋白，使得在实际的临床应用时不会因血液流动而致脱落导致失效，使功能配基跟致病物质胆红素的亲和结合作用得以保持；被固定到载体上的功能配基要更好地发挥其选择性吸附胆红素的功能，则需降低该配基的空间位阻效应，这还需要通过在配基和载体之间再连接上一种中间分子，起“空间分子臂”的作用，目的是起到降低配基的空间位阻效应、增强配基的空间自由度，保持其生物活性，更好地发挥功能。

3、本发明医用胆红素选择性灌流吸附剂，该吸附剂的微观分子结构和功能与目标被结合吸附的致病物质胆红素的微观分子结构和功能匹配，实现更特异性相互结合作用，增强了选择性吸附效果；此吸附剂的功能载体、分子臂、偶联剂等成分能够允许便利地调节和配伍，可以制备出系列的、不同等级的医学吸附剂，满足临床不同效果要求和患者层次的需求。以上的优势在临床治疗上将表现为胆红素灌流吸附剂医学制品的临床治疗效果得以增强，具有重要的卫生意义、科学理论意义和应用前景。

具体实施方式

以下实施例可使本专业技术人员全面理解本发明，但不以任何方式限制本发明；

实施示例1

以聚乙烯醇-1799为水溶液相，甲基丙烯酸缩水甘油酯、苯乙烯、丙烯酸钠、甲基丙烯酸异辛酯为复合单体油相，以偶氮二异丁氰为引发剂，以己二胺为功能分子臂，以戊二醛为功能分子臂兼偶联剂，以人白蛋白为功能配基为例：

称取6g 聚乙烯醇-1799，加入含80ml蒸馏水的三口烧瓶中，于90℃下慢速搅拌2小时，以使聚乙烯醇充分溶解，然后冷却至室温，制得聚乙烯醇水溶液即水相。然后于一烧杯中，称取24g甲基丙烯酸缩水甘油酯、1.5g丙烯酸钠、1.5g苯乙烯、3g甲基丙烯酸异辛酯，将物料磁力混合搅拌均匀，即为油相，然后加入上述烧瓶中。然后在慢速搅拌下，边匀化反应体系，边通入氮气以排空反应体系中的氧气。搅拌匀化排空半小时后，加入引发剂偶氮二异丁氰0.15g，然后在氮气氛围中，让反应体系在边搅拌下在75℃中反应8个小时。反应结束后，将反应体系倒入盛有清水的烧杯中，搅拌洗涤，然后真空过滤，将滤饼反复用清水清洗几次，重复真空抽滤洗涤2-3次，然后再用无水乙醇清洗2-3次，最后将滤饼在60℃下热风干燥，得到中间产物A，即基本载体。

然后称取中间产物A 20g,加入三口烧瓶中，加入30ml水和30ml二氧六环，加入0.05g己二胺，加入少许氢氧化钠，在85℃中反应3h。反应结束后，将反应体系真空抽滤，然后将滤饼倒入盛有清水的烧杯中，搅拌洗涤，然后真空过滤，将滤饼反复用清水清洗几次直至洗涤液呈中性为止，重复真空抽滤洗涤，最后将滤饼在60℃下热风干燥，得到中间产物B，即接枝了分子臂的改性载体。

然后取30ml水，加入1 ml 50%的戊二醛水溶液，滴加1滴冰乙酸，混合均匀。升温至45℃，然后称取中间产物B 20g，边搅拌边分步逐渐加入到水溶液中，加入完毕之后继续搅拌反应半小时。反应结束后，将反应体系真空抽滤，然后将滤饼倒入盛有清水的烧杯中，搅拌洗涤，然后真空过滤，将滤饼反复用清水清洗几次直至洗涤液无戊二醛味为止，重复真空抽滤洗涤，最后将滤饼在50℃下热风干燥，得到中间产物C，即接枝了分子臂兼偶联剂的改性载体。

然后取30ml水，加入2g人白蛋白冻干粉，搅拌溶解得到白蛋白水溶液。然后称取20g中间产物C，边搅拌边分散逐步加入到水溶液中，最后在41℃下反应30min，得到医用胆红素选择性灌流吸附剂。

实施示例2

 以聚乙烯醇-1799为水溶液相，甲基丙烯酸缩水甘油酯、苯乙烯、丙烯酸钠、甲基丙烯酸异辛酯为复合单体油相，以偶氮二异丁氰为引发剂，以己二胺为功能分子臂，以戊二醛为功能分子臂兼偶联剂，以牛白蛋白为功能配基为例：

称取4g 聚乙烯醇-1799，加入含80ml蒸馏水的三口烧瓶中，于90℃下慢速搅拌2小时，以使聚乙烯醇充分溶解，然后冷却至室温，制得聚乙烯醇水溶液即水相。然后于一烧杯中，称取24g甲基丙烯酸缩水甘油酯、1.5g丙烯酸钠、1.5g苯乙烯、3g甲基丙烯酸异辛酯，将物料磁力混合搅拌均匀，即为油相，然后加入上述烧瓶中。然后在慢速搅拌下，边匀化反应体系，边通入氮气以排空反应体系中的氧气。搅拌匀化排空半小时后，加入引发剂偶氮二异丁氰0.15g，然后在氮气氛围中，让反应体系在边搅拌下在75℃中反应8个小时。反应结束后，将反应体系倒入盛有清水的烧杯中，搅拌洗涤，然后真空过滤，将滤饼反复用清水清洗几次，重复真空抽滤洗涤2-3次，然后再用无水乙醇清洗2-3次，最后将滤饼在60℃下热风干燥，得到中间产物A，即基本载体。

然后称取中间产物A 20g,加入三口烧瓶中，加入30ml水和30ml二氧六环，加入0.05g己二胺，加入少许氢氧化钠，在85℃中反应3h。反应结束后，将反应体系真空抽滤，然后将滤饼倒入盛有清水的烧杯中，搅拌洗涤，然后真空过滤，将滤饼反复用清水清洗几次直至洗涤液呈中性为止，重复真空抽滤洗涤，最后将滤饼在60℃下热风干燥，得到中间产物B，即接枝了分子臂的改性载体。

然后取30ml水，加入1 ml 50%的戊二醛水溶液，滴加1滴冰乙酸，混合均匀。升温至45℃，然后称取中间产物B 20g，边搅拌边分步逐渐加入到水溶液中，加入完毕之后继续搅拌反应半小时。反应结束后，将反应体系真空抽滤，然后将滤饼倒入盛有清水的烧杯中，搅拌洗涤，然后真空过滤，将滤饼反复用清水清洗几次直至洗涤液无戊二醛味为止，重复真空抽滤洗涤，最后将滤饼在50℃下热风干燥，得到中间产物C，即接枝了分子臂兼偶联剂的改性载体。

然后取30ml水，加入3g牛白蛋白冻干粉，搅拌溶解得到白蛋白水溶液。然后称取20g中间产物C，边搅拌边分散逐步加入到水溶液中，最后在41℃下反应30min，得到医用胆红素选择性灌流吸附剂。

实施示例3

以聚乙烯醇-1780为水溶液相，甲基丙烯酸缩水甘油酯、苯乙烯、丙烯酸钠、甲基丙烯酸异辛酯为复合单体油相，以偶氮二异丁氰为引发剂，以己二胺为功能分子臂，以戊二醛为功能分子臂兼偶联剂，以人白蛋白为功能配基为例：

称取10g 聚乙烯醇-1780，加入含80ml蒸馏水的三口烧瓶中，于85℃下慢速搅拌2小时，以使聚乙烯醇充分溶解，然后冷却至室温，制得聚乙烯醇水溶液即水相。然后于一烧杯中，称取24g甲基丙烯酸缩水甘油酯、1.5g丙烯酸钠、1.5g苯乙烯、3g甲基丙烯酸异辛酯，将物料磁力混合搅拌均匀，即为油相，然后加入上述烧瓶中。然后在慢速搅拌下，边匀化反应体系，边通入氮气以排空反应体系中的氧气。搅拌匀化排空半小时后，加入引发剂偶氮二异丁氰0.15g，然后在氮气氛围中，让反应体系在边搅拌下在75℃中反应8个小时。反应结束后，将反应体系倒入盛有清水的烧杯中，搅拌洗涤，然后真空过滤，将滤饼反复用清水清洗几次，重复真空抽滤洗涤2-3次，然后再用无水乙醇清洗2-3次，最后将滤饼在60℃下热风干燥，得到中间产物A，即基本载体。

然后称取中间产物A 20g,加入三口烧瓶中，加入30ml水和30ml二氧六环，加入0.05g己二胺，加入少许氢氧化钠，在85℃中反应3h。反应结束后，将反应体系真空抽滤，然后将滤饼倒入盛有清水的烧杯中，搅拌洗涤，然后真空过滤，将滤饼反复用清水清洗几次直至洗涤液呈中性为止，重复真空抽滤洗涤，最后将滤饼在60℃下热风干燥，得到中间产物B，即接枝了分子臂的改性载体。

然后取30ml水，加入1 ml 50%的戊二醛水溶液，滴加1滴冰乙酸，混合均匀。升温至45℃，然后称取中间产物B 20g，边搅拌边分步逐渐加入到水溶液中，加入完毕之后继续搅拌反应半小时。反应结束后，将反应体系真空抽滤，然后将滤饼倒入盛有清水的烧杯中，搅拌洗涤，然后真空过滤，将滤饼反复用清水清洗几次直至洗涤液无戊二醛味为止，重复真空抽滤洗涤，最后将滤饼在50℃下热风干燥，得到中间产物C，即接枝了分子臂兼偶联剂的改性载体。

然后取30ml水，加入2g人白蛋白冻干粉，搅拌溶解得到白蛋白水溶液。然后称取20g中间产物C，边搅拌边分散逐步加入到水溶液中，最后在41℃下反应30min，得到医用胆红素选择性灌流吸附剂。

实施示例4

以聚乙烯醇-1799为水溶液相，甲基丙烯酸缩水甘油酯、苯乙烯、丙烯酸钠、甲基丙烯酸硬脂酸酯为复合单体油相，以偶氮二异丁氰为引发剂，以己二胺为功能分子臂，以戊二醛为功能分子臂兼偶联剂，以人白蛋白为功能配基为例：

称取2g 聚乙烯醇-1799，加入含80ml蒸馏水的三口烧瓶中，于90℃下慢速搅拌2小时，以使聚乙烯醇充分溶解，然后冷却至室温，制得聚乙烯醇水溶液即水相。然后于一烧杯中，称取22g甲基丙烯酸缩水甘油酯、1.5g丙烯酸钠、1.5g苯乙烯、5g甲基丙烯酸硬脂酸酯，将物料磁力混合搅拌均匀，即为油相，然后加入上述烧瓶中。然后在慢速搅拌下，边匀化反应体系，边通入氮气以排空反应体系中的氧气。搅拌匀化排空半小时后，加入引发剂偶氮二异丁氰0.15g，然后在氮气氛围中，让反应体系在边搅拌下在75℃中反应9个小时。反应结束后，将反应体系倒入盛有清水的烧杯中，搅拌洗涤，然后真空过滤，将滤饼反复用清水清洗几次，重复真空抽滤洗涤2-3次，然后再用无水乙醇清洗2-3次，最后将滤饼在60℃下热风干燥，得到中间产物A，即基本载体。

然后称取中间产物A 20g,加入三口烧瓶中，加入30ml水和30ml二氧六环，加入0.05g己二胺，加入少许氢氧化钠，在85℃中反应3h。反应结束后，将反应体系真空抽滤，然后将滤饼倒入盛有清水的烧杯中，搅拌洗涤，然后真空过滤，将滤饼反复用清水清洗几次直至洗涤液呈中性为止，重复真空抽滤洗涤，最后将滤饼在60℃下热风干燥，得到中间产物B，即接枝了分子臂的改性载体。

然后取30ml水，加入1ml 50%的戊二醛水溶液，滴加1滴冰乙酸，混合均匀。升温至45℃，然后称取中间产物B 20g，边搅拌边分步逐渐加入到水溶液中，加入完毕之后继续搅拌反应半小时。反应结束后，将反应体系真空抽滤，然后将滤饼倒入盛有清水的烧杯中，搅拌洗涤，然后真空过滤，将滤饼反复用清水清洗几次直至洗涤液无戊二醛味为止，重复真空抽滤洗涤，最后将滤饼在50℃下热风干燥，得到中间产物C，即接枝了分子臂兼偶联剂的改性载体。

然后取30ml水，加入2g人白蛋白冻干粉，搅拌溶解得到白蛋白水溶液。然后称取20g中间产物C，边搅拌边分散逐步加入到水溶液中，最后在41℃下反应30min，得到医用胆红素选择性灌流吸附剂。

实施示例5

以聚乙烯醇-1799为水溶液相，甲基丙烯酸缩水甘油酯、苯乙烯、丙烯酸钠、甲基丙烯酸硬脂酸酯为复合单体油相，以过氧化二苯甲酰为引发剂，以1,12-二氨基十二胺为功能分子臂，以戊二醛为功能分子臂兼偶联剂，以鱼白蛋白为功能配基为例：

称取3g 聚乙烯醇-1799，加入含80ml蒸馏水的三口烧瓶中，于90℃下慢速搅拌2小时，以使聚乙烯醇充分溶解，然后冷却至室温，制得聚乙烯醇水溶液即水相。然后于一烧杯中，称取24g甲基丙烯酸缩水甘油酯、1.5g丙烯酸钠、1.5g苯乙烯、5g甲基丙烯酸硬脂酸酯，将物料磁力混合搅拌均匀，即为油相，然后加入上述烧瓶中。然后在慢速搅拌下，边匀化反应体系，边通入氮气以排空反应体系中的氧气。搅拌匀化排空半小时后，加入引发剂过氧化二苯甲酰0.15g，然后在氮气氛围中，让反应体系在边搅拌下在75℃中反应10个小时。反应结束后，将反应体系倒入盛有清水的烧杯中，搅拌洗涤，然后真空过滤，将滤饼反复用清水清洗几次，重复真空抽滤洗涤2-3次，然后再用无水乙醇清洗2-3次，最后将滤饼在60℃下热风干燥，得到中间产物A，即基本载体。

然后称取中间产物A 20g,加入三口烧瓶中，加入30ml水和30ml二氧六环，加入0.05g 1,12-二氨基十二胺，加入少许氢氧化钠，在85℃中反应6h。反应结束后，将反应体系真空抽滤，然后将滤饼倒入盛有清水的烧杯中，搅拌洗涤，然后真空过滤，将滤饼反复用清水清洗几次直至洗涤液呈中性为止，重复真空抽滤洗涤，最后将滤饼在60℃下热风干燥，得到中间产物B，即接枝了分子臂的改性载体。

然后取30ml水，加入1 ml 50%的戊二醛水溶液，滴加1滴冰乙酸，混合均匀。升温至45℃，然后称取中间产物B 20g，边搅拌边分步逐渐加入到水溶液中，加入完毕之后继续搅拌反应半小时。反应结束后，将反应体系真空抽滤，然后将滤饼倒入盛有清水的烧杯中，搅拌洗涤，然后真空过滤，将滤饼反复用清水清洗几次直至洗涤液无戊二醛味为止，重复真空抽滤洗涤，最后将滤饼在50℃下热风干燥，得到中间产物C，即接枝了分子臂兼偶联剂的改性载体。

然后取30ml水，加入2g鱼白蛋白冻干粉，搅拌溶解得到白蛋白水溶液。然后称取20g中间产物C，边搅拌边分散逐步加入到水溶液中，最后在41℃下反应30min，得到医用胆红素选择性灌流吸附剂。

实施示例6

功能配基白蛋白固载量的检测：采用考马斯亮蓝法，检测中间产物C与白蛋白水溶液反应前后白蛋白水溶液中白蛋白浓度的变化值，白蛋白浓度的变化差值与初始体积的乘积，得到固载到中间产物C中的总量，然后除以中间产物的质量，得到每克吸附剂固载白蛋白的量，检测结果为每g吸附剂固载白蛋白的量不少于60mg。

相关实验：

实验一功能配基白蛋白固定在载体上的稳定性试验

取吸附剂100g，装入吸附柱中，用400mL 37℃的PBS溶液循环地动态流经吸附柱，循环4h后，结束循环，取最终的循环液用紫外分光光度计进行全波长扫描，然后观察在白蛋白紫外特征吸收峰280nm附近是否有明显的紫外吸收峰出现。检测结果观察不到明显的紫外吸收峰存在，此表明固定化的牢固性。

实验二吸附胆红素效率试验

取该吸附剂10克装入吸附柱中。取400mL抗凝全血，然后注入新配的胆红素溶液，以配成高胆红素血液，然后立即用胆红素浓度分析仪测试全血中的胆红素初始浓度。然后在恒温37℃下，在医用蠕动泵的驱动下，使血液循环经过吸附柱2h，最后测试全血中的胆红素的终末浓度。结果表明该全血中的胆红素的实际浓度下降了38%以上。

Claims (9)

1.一种医用胆红素选择性灌流吸附剂, 其特征在于：其成分包括功能载体和功能配基，所述功能载体为以丙烯酸为母体的单体、通过静电或氢键作用吸附胆红素的功能单体和通过相似相容原理吸附胆红素的功能单体复合聚合而成的高聚物；所述的功能配基为白蛋白、白蛋白衍生物和类白蛋白中的一种或两种以上；所述的功能配基通过偶联剂偶联固定在功能载体上，且功能载体和功能配基之间通过偶联剂和/或空间分子臂进行空间分隔；所述通过静电或氢键作用吸附胆红素的功能单体为含有羰基、羟基、胺基、酯基或醚基功能基团的单体；所述的通过相似相容原理吸附胆红素的功能单体为含疏水烷烃或芳烃的单体。

2.如权利要求1所述的一种医用胆红素选择性灌流吸附剂, 其特征在于：每克功能载体上偶联固定至少30mg功能配基。

3.如权利要求1所述的一种医用胆红素选择性灌流吸附剂, 其特征在于：所述的以丙烯酸为母体的单体为甲基丙烯酸缩水甘油酯、甲基丙烯酸、甲基丙烯酸钠、丙烯酸、丙烯酸钠、甲基丙烯酸异辛酯、甲基丙烯酸月桂酸酯、甲基丙烯酸硬脂酸酯或甲基丙烯酸羟乙酯。

4.如权利要求1所述的一种医用胆红素选择性灌流吸附剂, 其特征在于：所述的空间分子臂为至少有两端分别含有二胺、二醇、二醛、二巯、二酸、二环氧或二异氰的分子。

5.如权利要求1所述医用胆红素选择性灌流吸附剂的制备方法，其特征在于：制备步骤为：

步骤一、将用于聚合形成功能载体的各单体混合组成油相，然后与配制的分散剂水相混合均匀，用惰性气体或氮气排空反应体系中的氧气，加入引发剂，在搅拌的作用下，于0-90℃反应1-16h；反应结束后过滤出产物，洗涤并干燥后备用；

步骤二、将步骤一的产物加入溶剂中，加入含有双官能团的空间分子臂物质，在0-95℃中反应1-24h，反应结束后过滤出产物，洗涤并干燥后备用；

步骤三、将步骤二得到的产物与含双官能团的偶联剂溶液混合，并于0-65℃反应10min-10h后滤出、洗涤并干燥后加入配制好的白蛋白水溶液中，或直接将步骤二得到的产物加入配制好的白蛋白水溶液中，与白蛋白水溶液混合后，在0-65℃反应10min-10h，反应结束后过滤出产物，洗涤并干燥后即得到医用胆红素选择性灌流吸附剂。

6.如权利要求5所述的医用胆红素选择性灌流吸附剂的制备方法，其特征在于：所述分散剂水相为醇解度1%-100%的聚乙烯醇，其水溶液的浓度为0.01%-30%。

7.如权利要求5所述的医用胆红素选择性灌流吸附剂的制备方法，其特征在于：所述分散剂水相的加入量为油相的50%-500%。

8.如权利要求5所述的医用胆红素选择性灌流吸附剂的制备方法，其特征在于：所述的引发剂为过氧类、偶氮类或氧化还原类自由基引发剂。

9.如权利要求5所述的医用胆红素选择性灌流吸附剂的制备方法，其特征在于：所述引发剂的加入量为油相质量的0.05%-5%。