CN104001184B

CN104001184B - 高分子阿霉素键合药及其制备方法

Info

Publication number: CN104001184B
Application number: CN201410283678.5A
Authority: CN
Inventors: 丁建勋; 孙殿奎; 庄秀丽; 陈学思
Original assignee: Changchun Institute of Applied Chemistry of CAS
Current assignee: Changchun Institute of Applied Chemistry of CAS
Priority date: 2014-06-23
Filing date: 2014-06-23
Publication date: 2017-08-25
Anticipated expiration: 2034-06-23
Also published as: CN104001184A

Abstract

本发明提供一种高分子阿霉素键合药，具有式(I)或式(II)结构。其制备方法为：将顺‑乌头酸酐与阿霉素盐酸盐在催化剂作用下于有机溶剂中发生氨解反应，得到具有式(III)结构的阿霉素衍生物；将所述具有式(III)结构的阿霉素衍生物与聚乙二醇或聚乙二醇单甲醚反应，得到高分子阿霉素键合药。所述高分子阿霉素键合药同时具有酰胺键和羧基，因此使其具有pH响应性，在肿瘤组织或细胞内部的pH值下可以快速释放阿霉素，从而增强疗效。而且，所述高分子阿霉素键合药同时具有亲水基团和疏水基团，可以通过增强的渗透和滞留效应实现药物在肿瘤部位的聚集。所述键合药还具有良好的生物相容性，制备方法简单，有利于键合药的有效利用。

Description

高分子阿霉素键合药及其制备方法

技术领域

本发明涉及高分子化合物领域，特别涉及高分子阿霉素键合药及其制备方法。

背景技术

阿霉素，又名1,4-羟基柔红霉素，1,4-羟基正红霉素，多索荣比星，羟基红比霉素，是一种细胞周期非特异性药且对S期作用最强，对M、G1和G2期也有作用，其作用机制是嵌入DNA分子，破坏核酸结构和一直大分子的合成。阿霉素被广泛用于临床，主要用于治疗肝癌、肺癌、急性白血病、胃癌、食道癌、恶性淋巴癌、膀胱癌、骨肉瘤、宫颈癌、睾丸癌、甲状腺癌、神经母细胞癌和软骨组织瘤等。目前，在临床上，阿霉素的主要给药途径是静脉滴注，然而静脉给药后阿霉素会迅速分布全身，由于对肿瘤组织缺少靶向性，能达到肿瘤部位并发挥疗效的阿霉素比例很低，致使生物利用度不高，药效低下，需要多次给药，从而对身体的正常组织和器官造成巨大的毒副作用。

为解决临床上存在的问题，阿霉素新剂型的开发一直是研究者关注的热点。其中，纳米尺度的药物传输系统，如脂质体，聚合物纳米颗粒，胶束等发展较为迅速。其中，由两亲性嵌段共聚物或接枝共聚物自组装成的胶束成为药物载体的研究重点。胶束包载药物的方式主要分为两种，一种是物理包载，一种是化学键合。相对于物理包载，化学键合由于能够提供更稳定的药物包载方式、更持续的药物释放和更长的药物释放时间而获得了广泛的研究。

公开号为101234205A的中国专利公开了一种具有靶向功能的高分子阿霉素键合药，由两种聚乙二醇-聚乳酸嵌段共聚物混合组装而成，第一种聚乙二醇-聚乳酸嵌段共聚物的聚乳酸链端接有阿霉素，第二种聚乙二醇-聚乳酸嵌段共聚物的聚乙二醇链端接有乳糖，该键合药物中，阿霉素受聚乙二醇和聚乳酸的双重保护，具有缓释功能；乳糖具有靶向功能，能够实现阿霉素的靶向输送，因此，该阿霉素键合药能够在肿瘤组织内缓释。但是，上述两种键合药存在连结的化学键过于稳定、载药量低、阿霉素的释放缺乏智能性等问题。Biomaterials(Vol.31，p1360-1371，2010)公开了一种在聚酰胺-胺树枝状高分子的表面氨基上键合聚乙二醇单甲醚和顺-3-羧基戊烯二酸酐修饰的羧基化阿霉素而得到的高分子阿霉素键合药，该键合药在肿瘤组织和细胞的酸性条件下可以快速释放，从而实现药物释放的智能性，但是该键合药所使用的载体材料为聚酰胺-胺树枝状高分子，其制备过程繁琐、生物相容性差，不利于键合药的实际应用。

发明内容

本发明解决的技术问题在于提供一种高分子阿霉素键合药及其制备方法，所述高分子阿霉素键合药制备过程简单，生物相容性好并且具有pH值响应性。

本发明公开了一种高分子阿霉素键合药，具有式(I)或式(II)结构：

其中，n为聚合度，10≤n≤150；

m为聚合度，10≤m≤50。

本发明公开了一种具有式(I)或式(II)结构的高分子阿霉素键合药的制备方法，包括以下步骤：

(A)将顺-乌头酸酐与阿霉素盐酸盐在催化剂作用下于有机溶剂中发生氨解反应，得到具有式(III)结构的阿霉素衍生物；

(B)将所述具有式(III)结构的阿霉素衍生物与聚乙二醇或聚乙二醇单甲醚反应，得到具有式(I)或式(II)结构的高分子阿霉素键合药；

其中，n为聚合度，10≤n≤150；

m为聚合度，10≤m≤50。

优选的，所述步骤(B)中，所述反应后还包括透析。

优选的，所述步骤(B)中，所述透析的pH值为6～8。

优选的，所述步骤(A)中，所述阿霉素盐酸盐与顺-乌头酸酐的摩尔比为1：(0.7～3)。

优选的，所述步骤(B)中，所述聚乙二醇或聚乙二醇单甲醚与具有式(III)结构的阿霉素衍生物的摩尔比为1：(0.5～2)。

优选的，所述步骤(B)中，所述聚乙二醇的数均分子量为500～5000，所述聚乙二醇单甲醚的数均分子量为500～2000。

优选的，所述步骤(A)中，所述反应温度为10～50℃，所述反应时间为8～48小时。

优选的，所述步骤(B)中，所述反应液温度为15～45℃，所述反应时间为12～108小时。

与现有技术相比，本发明的高分子阿霉素键合药，具有式(I)或式(II)结构。所述高分子阿霉素键合药同时具有酰胺键和羧基，因此使其具有pH响应性，在肿瘤组织或细胞内部的pH值下可以快速释放阿霉素，从而增强疗效。而且，所述高分子阿霉素键合药同时具有亲水基团和疏水基团，可以通过增强的渗透和滞留效应实现药物在肿瘤部位的聚集。

本发明高分子阿霉素键合药的制备方法为：将顺-乌头酸酐、阿霉素盐酸盐与三乙胺按在催化剂作用下于有机溶剂中发生氨解反应，得到具有式(III)结构的阿霉素衍生物；将所述具有式(III)结构的阿霉素衍生物与聚乙二醇或聚乙二醇单甲醚反应，得到高分子阿霉素键合药。本发明采用顺乌头酸酐、聚乙二醇或聚乙二醇单甲醚等可降解的有机物为原料，因此得到的键合药具有良好的生物相容性，而且制备方法简单，有利于键合药的有效利用。

附图说明

图1为实施例1制备的高分子阿霉素键合药的核磁共振图谱；

图2为实施例1制备的高分子阿霉素键合药在不同pH条件下的释放曲线图；

图3为实施例1制备的高分子阿霉素键合药的MTT图；

图4为实施例25～27制备的高分子阿霉素键合药的核磁共振图谱；

图5为实施例27制备的高分子阿霉素键合药在不同pH条件下的释放曲线图；

图6为实施例27制备的高分子阿霉素键合药的MTT图。

具体实施方式

为了进一步理解本发明，下面结合实施例对本发明优选实施方案进行描述，但是应当理解，这些描述只是为进一步说明本发明的特征和优点，而不是对本发明权利要求的限制。

本发明实施例公开了一种高分子阿霉素键合药，具有式(I)或式(II)结构：

其中，n为聚合度，10≤n≤150，优选为30≤n≤100；

m为聚合度，10≤m≤50，优选为20≤m≤40。

本发明公开了一种具有式(I)和式(II)结构的高分子阿霉素键合药的制备方法，包括以下步骤：

其中，n为聚合度，优选为30≤n≤100；

m为聚合度，10≤m≤50，优选为20≤m≤40。

在本发明中，首先将顺-乌头酸酐与阿霉素盐酸盐在催化剂作用下于有机溶剂中发生氨解反应，得到具有式(III)结构的阿霉素衍生物。本发明对所述阿霉素·盐酸盐的来源没有特殊限制，市场上购买即可。

本发明对所述酸酐的来源没有特殊限制，市场上购买即可。所述阿霉素盐酸盐与顺-乌头酸酐摩尔比优选为1：(0.7～3)，更优选为1：(0.8～2)，最优选为1：(1～1.5)。所述氨解反应在避光、无水条件下进行。所述氨解反应的催化剂优选为三乙胺。所述氨解反应的温度优选为10℃～50℃，更优选为15℃～45℃，最优选为25℃～30℃；所述氨解反应的时间优选为8h～48h，更优选为16h～36h，最优选为24h～30h。反应结束后，将得到的反应物倒入乙酸乙酯稀释、饱和氯化钠洗涤、无水硫酸钠干燥、抽滤、抽干，得到具有式(III)结构的阿霉素衍生物。

得到所述具有式(III)结构的阿霉素衍生物后，将所述具有式(III)结构的阿霉素衍生物与聚乙二醇或聚乙二醇单甲醚反应。

所述聚乙二醇的结构式为：其中，n为聚合度，10≤n≤150；所述聚乙二醇的数均分子量优选为500～5000。

所述聚乙二醇单甲醚的结构式为：其中，m为聚合度，10≤m≤50。所述聚乙二醇单甲醚的数均分子量优选为500～2000。本发明对所述聚乙二醇或聚乙二醇单甲醚的来源没有特殊限制，市场上购买即可。所述有机溶剂优选为N,N-二甲基甲酰胺。

所述反应的催化剂优选为1-乙基-(二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和4-二甲氨基吡啶。所述聚乙二醇或聚乙二醇单甲醚与具有式(III)结构的阿霉素衍生物的摩尔比优选为1：(0.5～2)，更优选为1：(0.8～1.8)，最优选为1：(1～1.5)。所述聚乙二醇或聚乙二醇单甲醚、具有式(III)结构的阿霉素衍生物、1-乙基-(二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和4-二甲氨基吡啶的摩尔比优选为1：(0.5～2)：(1～4)：(0.05～0.5)；更优选为1：(0.8～1.8)：(1～3)：(0.05～0.3)；最优选为1；(1～1.5)：(1.5～2.5)：(0.08～0.15)；所述反应优选的在搅拌条件下进行，所述时间优选为12h～108h，更优选为24h～96h，最优选为48h～72h；所述反应温度优选为15℃～45℃，更优选为20℃～40℃，更优选为25℃～35℃。

所述反应结束后，优选的将得到的反应产物用截留分子量为3500Dalton的透析袋透析，冻干后即得到具有式(I)和式(II)结构的高分子阿霉素键合药。所述透析的pH值优选为5～8。所述透析的时间优选为20～30小时，更优选为22～25小时。

对所述高分子阿霉素键合药在pH值分别为5.5、6.8和7.4时进行药物释放，结果表明，本发明提供的高分子阿霉素键合药具有pH响应性，键合药中阿霉素在肿瘤组织pH条件下可以快速释放，从而增强药效。

为了进一步理解本发明，下面结合实施例对本发明提供的高分子阿霉素键合药及其制备方法进行说明，本发明的保护范围不受以下实施例的限制。

以下各实施例中，反应产率＝实际得到的产物质量/理论得到的产物质量×100％。

实施例1

称取100.0mg(0.0017mol)阿霉素·盐酸盐、29.34mg(0.0019mol)顺-乌头酸酐、和0.17mg(0.0017mol)三乙胺投入干燥反应瓶中，加入10mL无水N，N-二甲基甲酰胺溶解，在25℃条件下避光反应24h，反应结束后，将得到的反应混合液倒入100mL的乙酸乙酯中，用饱和氯化钠水溶液洗涤、干燥、过滤、抽干后得到阿霉素衍生物。

称取80.00mg(0.1067mol)聚乙二醇(数均分子量为750)和56.05mg(0.08mol)所述阿霉素衍生物混合，加入40.91mg(0.2134mol)1-乙基-(二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和1.304mg(0.01067mol)4-二甲氨基吡啶，在反应瓶中再加入10mL二甲基亚砜(DMSO)溶解混合反应物，搅拌子搅拌条件下避光反应72h，反应结束后，将得到的反应物用截留分子量为3500Dalton的透析袋透析24h，冻干，得到高分子阿霉素键合药。

所述高分子阿霉素键合药进行核磁共振分析，具体参见图1，图1为实施例1制备的高分子阿霉素键合物的核磁共振图谱。结果表明，均具有式(I)结构。

图2为实施例1制备的高分子阿霉素键合物在不同pH条件下的释放曲线图；图2中，曲线A为高分子阿霉素键合药在37℃pH5.5的PBS缓冲液中，随时间变化的累计释放率；曲线B为高分子阿霉素键合药在37℃pH6.8的PBS缓冲液中，随时间变化的累计释放率、曲线C为高分子阿霉素键合药在37℃pH7.4的PBS缓冲液中，随时间变化的累计释放率。

图3为实施例1制备的高分子阿霉素键合药的MTT图。图3中，曲线B为不同浓度的阿霉素对于细胞的存活率；曲线A为不同浓度的实施例1制备的高分子阿霉素键合药对于细胞的存活率。

实施例2

称取100.00mg(0.1333mol)聚乙二醇和56.05mg(0.08mol)所述阿霉素衍生物混合，加入51.11mg(0.2666mol)1-乙基-(二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和1.6285mg(0.01333mol)4-二甲氨基吡啶，在反应瓶中加入10mL二甲基亚砜(DMSO)溶解混合反应物，搅拌子搅拌条件下避光反应72h，反应结束后，将得到的反应物用截留分子量为3500Dalton的透析袋透析24h，冻干，得到高分子阿霉素键合药。

所述高分子阿霉素键合药进行核磁共振分析，结果表明，均具有式(I)结构。

实施例3

称取100.0mg(0.0017mol)阿霉素·盐酸盐、29.34mg(0.001870mol)顺-乌头酸酐、和0.17mg(0.0017mol)三乙胺投入干燥反应瓶中，加入10mL无水N，N-二甲基甲酰胺溶解，在25℃条件下避光反应24h，反应结束后，将得到的反应混合液倒入100mL的乙酸乙酯中，用饱和氯化钠水溶液洗涤、干燥、过滤、抽干后得到阿霉素衍生物。

称取120.00mg(0.1600mol)聚乙二醇和56.05mg(0.08mol)所述阿霉素衍生物混合，加入61.34mg(0.3200mol)1-乙基-(二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和1.952mg(0.01600mol)4-二甲氨基吡啶，在反应瓶中加入10mL二甲基亚砜(DMSO)溶解混合反应物，搅拌子搅拌条件下避光反应72h，反应结束后，将得到的反应物用截留分子量为3500Dalton的透析袋透析24h，冻干，得到高分子阿霉素键合药。

实施例4

称取100.0mg(0.0017mol)阿霉素·盐酸盐与21.74mg(0.0017mol)顺乌头酸酐和0.17mg(0.0017mol)三乙胺置于干燥反应瓶中，加入10mL无水N，N-二甲基甲酰胺溶液，在25℃，搅拌子搅拌条件下避光反应24h，反应结束后，将得到的反应物倒入100mL乙酸乙酯中稀释，用饱和氯化钠水溶液洗涤、干燥、过滤、抽干得到阿霉素衍生物。

实施例5

称取100.0mg(0.0017mol)阿霉素·盐酸盐，32.61mg(0.00255mol)顺乌头酸酐和0.2580mg(0.00255mol)三乙胺置于干燥反应瓶中，加入10mL无水N，N-二甲基甲酰胺溶液，在25℃，搅拌子搅拌条件下避光反应24h，反应结束后，将得到的反应物倒入100mL乙酸乙酯中稀释，用饱和氯化钠水溶液洗涤、干燥、过滤、抽干得到阿霉素衍生物。

实施例6

称取100.0mg(0.0017mol)阿霉素·盐酸盐，29.34mg(0.00187mol)顺乌头酸酐和0.1892mg(0.00187mol)三乙胺置于干燥反应瓶中，加入10mL无水N，N-二甲基甲酰胺溶液，在25℃，搅拌子搅拌条件下避光反应24h，反应结束后，将得到的反应物倒入100mL乙酸乙酯中稀释，用饱和氯化钠水溶液洗涤、干燥、过滤、抽干得到阿霉素衍生物。

实施例7

称取100.0mg(0.0017mol)阿霉素·盐酸盐、29.34mg(0.00187mol)顺-乌头酸酐、和0.17mg(0.0017mol)三乙胺投入干燥反应瓶中，加入10mL无水N，N-二甲基甲酰胺溶解，在25℃条件下避光反应24h，反应结束后，将得到的反应混合液倒入100mL的乙酸乙酯中，用饱和氯化钠水溶液洗涤、干燥、过滤、抽干后得到阿霉素衍生物。

实施例8～11

分别称取4份100.00mg(0.1333mol)聚乙二醇至于圆底烧瓶中，另外称取实施例4～7制备的阿霉素衍生物103mg(1.373mol)置于圆底烧瓶中，在51.11mg(0.2666mol)1-乙基-(二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和1.6285mg(0.01333mol)4-二甲氨基吡啶条件下，加入10mL二甲基亚砜溶解混合反应物搅拌子搅拌条件下避光在不同温度下反应24h。反应结束后，将得到的反应物用截留分子量为3500Dalton的透析袋透析24h，冻干，得到高分子阿霉素键合药。

表1本实施例8～11制备高分子阿霉素键合药的反应条件及反应产率

表1中，i：j为所述聚乙二醇或聚乙二醇单甲醚与实施例4～7制备的阿霉素衍生物的摩尔比。

实施例12～15

分别称取4份100.00mg(0.1333mol)聚乙二醇至于圆底烧瓶中，另外称取实施例4～7制备的阿霉素衍生物103mg(1.373mol)置于圆底烧瓶中，在51.11mg(0.2666mol)1-乙基-(二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和1.6285mg(0.01333mol)4-二甲氨基吡啶条件下，加入10mL二甲基亚砜溶解混合反应物搅拌子搅拌条件下避光在25℃下分别反应12h、24h、48h、72h。反应结束后，将得到的反应物用截留分子量为3500Dalton的透析袋透析24h，冻干，得到高分子阿霉素键合药。

表2本实施例12～15制备高分子阿霉素键合药的反应条件及反应产率

表2中，i：j为所述聚乙二醇与实施例4～7制备的阿霉素衍生物的摩尔比。

实施例16～19

分别称取4份100.00mg(0.1333mol)聚乙二醇至于圆底烧瓶中，另外称取实施例4～7制备的阿霉素衍生物103mg(1.373mol)置于圆底烧瓶中，在51.11mg(0.2666mol)1-乙基-(二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和1.6285mg(0.01333mol)4-二甲氨基吡啶条件下，加入10mL二甲基亚砜溶解混合反应物搅拌子搅拌条件下避光在25℃下反应24h。反应结束后，将得到的反应物用截留分子量为3500Dalton的透析袋分别透析12h、24h、48h、72h，冻干，得到高分子阿霉素键合药。

表3本实施例16～19制备高分子阿霉素键合药的反应条件及反应产率

表3中，i：j为所述聚乙二醇与实施例4～7制备的阿霉素衍生物的摩尔比。

实施例20～24

分别取5份不同聚合度的聚乙二醇置于圆底烧瓶中，实施例4制备的阿霉素衍生物103mg(1.373mol)置于圆底烧瓶中，在51.11mg(0.2666mol)1-乙基-(二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和1.6285mg(0.01333mol)4-二甲氨基吡啶条件下，加入10mL二甲基亚砜溶解混合反应物搅拌子搅拌条件下避光25℃反应72h。反应结束后，将得到的反应物用截留分子量为3500Dalton的透析袋透析24h冻干，得到高分子阿霉素键合药。

表4本实施例20～24制备高分子阿霉素键合药的反应条件及反应产率

表4中，i：j为所述聚乙二醇与实施例4～7制备的阿霉素衍生物的摩尔比。

实施例25

称取100.0mg(0.0017mol)阿霉素·盐酸盐、29.34mg(0.00187mol)顺-乌头酸酐和17.45mg(0.0017mol)三乙胺投入干燥反应瓶中，加入10mL无水N,N-二甲基甲酰胺溶解，在25℃条件下避光反应24h，反应结束后，将得到的反应混合液倒入100mL的乙酸乙酯中，用饱和氯化钠水溶液洗涤、干燥、过滤、抽干后得到阿霉素衍生物。

称取80.00mg(0.1067mol)聚乙二醇单甲醚(数均分子量为750)与112.09mg(0.15996mol)所述阿霉素衍生物混合，加入40.91mg(0.2134mol)1-乙基-(二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和1.3035mg(0.01067mol)4-二甲氨基吡啶，在反应瓶中加入10mL二甲基亚砜(DMSO)溶解混合反应物，搅拌子搅拌条件下避光反应72h，反应结束后，将得到的反应物用截留分子量为3500Dalton的透析袋透析24h，冻干，得到高分子阿霉素键合药。

所述高分子阿霉素键合药进行核磁共振分析，具体参见图4，图4为实施例25～27制备的高分子阿霉素键合药的核磁共振图谱。结果表明，均具有式(II)结构。

实施例26

称取100.00mg(0.1333mol)聚乙二醇单甲醚(数均分子量为750)，与112.09mg(0.15996mol)所述阿霉素衍生物混合，加入51.11mg(0.2666mol)1-乙基-(二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和1.6285mg(0.01333mol)4-二甲氨基吡啶，在反应瓶中加入10mL二甲基亚砜(DMSO)溶解混合反应物，搅拌子搅拌条件下避光反应72h，反应结束后，将得到的反应物用截留分子量为3500Dalton的透析袋透析24h，冻干，得到高分子阿霉素键合药。

实施例27

称取120.00mg(0.1600mol)聚乙二醇单甲醚(数均分子量为750)，与120.00mg(0.1600mol)所述阿霉素衍生物混合，加入61.34mg(0.3200mol)1-乙基-(二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和1.952mg(0.01600mol)4-二甲氨基吡啶，在反应瓶中加入10mL二甲基亚砜(DMSO)溶解混合反应物，搅拌子搅拌条件下避光反应72h，反应结束后，将得到的反应物用截留分子量为3500Dalton的透析袋透析24h，冻干，得到高分子阿霉素键合药。

所述高分子阿霉素键合药进行核磁共振分析，具体参见图4，图4为实施例25～27制备的高分子阿霉素键合药的核磁共振图谱。结果表明，均具有式(II)结构。图4中的曲线a、b分别是实施例25～27制备的高分子阿霉素键合药的核磁共振图谱。

图5为实施例27制备的高分子阿霉素键合药在不同pH条件下的释放曲线图；图5中，A曲线为实施例27制备的高分子阿霉素键合药在37℃pH5.5的PBS缓冲液中，随时间变化的累计释放率；B曲线为实施例27制备的高分子阿霉素键合药在37℃pH6.8的PBS缓冲液中，随时间变化的累计释放率，C曲线为实施例27制备的高分子阿霉素键合药在37℃pH6.8的PBS缓冲液中，随时间变化的累计释放率。

图6为实施例27制备的高分子阿霉素键合药的MTT图。图6中，曲线B为不同浓度的阿霉素对于细胞的存活率；曲线A为不同浓度的实施例27制备的高分子阿霉素键合药对于细胞的存活率。

实施例28～31

分别称取4份100.00mg(0.1333mol)聚乙二醇单甲醚至于圆底烧瓶中，另外称取实施例4～7制备的阿霉素衍生物103mg(1.373mol)置于圆底烧瓶中，在51.11mg(0.2666mol)1-乙基-(二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和1.63mg(0.01333mol)4-二甲氨基吡啶条件下，加入10mL二甲基亚砜溶解混合反应物搅拌子搅拌条件下避光在不同温度下反应24h。反应结束后，将得到的反应物用截留分子量为3500Dalton的透析袋透析24h，冻干，得到高分子阿霉素键合药。

表5本实施例28～31制备高分子阿霉素键合药的反应条件及反应产率

表5中，i：j为所述聚乙二醇单甲醚与实施例4～7制备的阿霉素衍生物的摩尔比。

实施例32～35

分别称取4份100.00mg(0.1333mol)聚乙二醇单甲醚至于圆底烧瓶中，另外称取实施例4～7制备的阿霉素衍生物103mg(1.373mol)置于圆底烧瓶中，在51.11mg(0.2666mol)1-乙基-(二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和1.6285mg(0.01333mol)4-二甲氨基吡啶条件下，加入10mL二甲基亚砜溶解混合反应物搅拌子搅拌条件下避光在25℃下分别反应12h、24h、48h、72h。反应结束后，将得到的反应物用截留分子量为3500Dalton的透析袋透析24h，冻干，得到高分子阿霉素键合物。

表6本实施例32～35制备高分子阿霉素键合药的反应条件及反应产率

表6中，i：j为所述聚乙二醇单甲醚与实施例4～7制备的阿霉素衍生药的摩尔比。

实施例36～39

分别称取4份100.00mg(0.1333mol)聚乙二醇单甲醚至于圆底烧瓶中，另外称取实施例4～7制备的阿霉素衍生物103mg(1.373mol)置于圆底烧瓶中，在51.11mg(0.2666mol)1-乙基-(二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和1.6285mg(0.01333mol)4-二甲氨基吡啶条件下，加入10mL二甲基亚砜溶解混合反应物搅拌子搅拌条件下避光在25℃下反应24h。反应结束后，将得到的反应物用截留分子量为3500Dalton的透析袋分别透析12h、24h、48h、72h，冻干，得到高分子阿霉素键合药。

表7本实施例36～39制备高分子阿霉素键合药的反应条件及反应产率

表7中，i：j为所述聚乙二醇单甲醚与实施例4～7制备的阿霉素衍生药的摩尔比。

实施例40～44

分别取5份不同聚合度的聚乙二醇单甲醚置于圆底烧瓶中，实施例4制备的阿霉素衍生物103mg(1.373mol)置于圆底烧瓶中，在51.11mg(0.2666mol)1-乙基-(二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和1.6285mg(0.01333mol)4-二甲氨基吡啶条件下，加入10mL二甲基亚砜溶解混合反应物搅拌子搅拌条件下避光25℃反应72h。反应结束后，将得到的反应物用截留分子量为3500Dalton的透析袋透析24h冻干，得到高分子阿霉素键合药。

表8本实施例40～44制备高分子阿霉素键合药的反应条件及反应产率

表8中，i：j为所述聚乙二醇单甲醚与实施例4～7制备的阿霉素衍生物的摩尔比。

以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。

对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。

Claims

1.一种高分子阿霉素键合药，具有式(I)或式(II)结构：

其中，n为聚合度，10≤n≤150；

m为聚合度，10≤m≤50；

所述高分子阿霉素键合药的制备方法，包括以下步骤：

(B)将所述具有式(III)结构的阿霉素衍生物、1-乙基-(二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和4-二甲氨基吡啶与聚乙二醇或聚乙二醇单甲醚反应，得到具有式(I)或式(II)结构的高分子阿霉素键合药；

2.根据权利要求1所述的高分子阿霉素键合药，其特征在于，所述步骤(B)中，所述反应后还包括透析。

3.根据权利要求2所述的高分子阿霉素键合药，其特征在于，所述步骤(B)中，所述透析的pH值为6～8。

4.根据权利要求1所述的高分子阿霉素键合药，其特征在于，所述步骤(A)中，所述阿霉素盐酸盐与顺-乌头酸酐的摩尔比为1：(0.7～3)。

5.根据权利要求1所述的高分子阿霉素键合药，其特征在于，所述步骤(B)中，所述聚乙二醇或聚乙二醇单甲醚与具有式(III)结构的阿霉素衍生物的摩尔比为1：(0.5～2)。

6.根据权利要求1所述的高分子阿霉素键合药，其特征在于，所述步骤(B)中，所述聚乙二醇的数均分子量为500～5000，所述聚乙二醇单甲醚的数均分子量为500～2000。

7.根据权利要求1所述的高分子阿霉素键合药，其特征在于，所述步骤(A)中，所述反应温度为10～50℃，所述反应时间为8～48小时。

8.根据权利要求1所述的高分子阿霉素键合药，其特征在于，所述步骤(B)中，所述反应液温度为15～45℃，所述反应时间为12～108小时。