CN103977449B - 一种共混液体止血复合材料及其制备方法 - Google Patents

Abstract

一种共混液体止血复合材料及其制备方法，它涉及一种止血复合材料及其制备方法。本发明要解决现有固体止血材料(固态、凝胶态等)的不足，适用于固体止血材料不易操作、操作繁琐或易引起副损伤的出血点的辅助止血。本发明的材料由羧甲基纤维素钠、海藻酸钠和氯化钠溶液制成；方法为：一、将羧甲基纤维素钠和海藻酸钠加入注射用水中，升温，低速搅拌，降温后研磨，得到共混溶液；二、加入氯化钠，使其渗透压摩尔浓度在260-320mOsmol/kg，再加入注射用水至羧甲基纤维素钠的质量百分含量为0.5％-15％，海藻酸钠的质量百分含量为0.1％-1％，调节pH值至5.0-8.0，微孔滤膜过滤，灌装，蒸汽灭菌，即得。

Description

一种共混液体止血复合材料及其制备方法

技术领域

本发明属于临床止血材料技术领域，提出了一种止血复合材料及其制备方法。

背景技术

羧甲基纤维素钠(CMC)是从棉花中提取的一种高分子线性多糖，是由纤维素葡萄糖环上羟基的氢原子被羧甲基取代后的产物，是一种水溶性纤维素醚，具有无毒、良好的生物相容性、降解性、可再生性和吸湿性的特性，CMC分子在水溶液中能形成一个三维空间网状结构，在医用领域中主要作为一种新型抗粘连材料得以应用。海藻酸钠(SA)是从天然海藻中提取的一种高分子线性多糖，无毒，生物可降解且生物活性高，与人体相容性好，SA分子在水溶液中也能形成一个三维空间网状结构，在医用领域中主要作为一种新型止血、促进创面愈合材料得以应用。两种物质不仅在结构和生物学特性方面相近，其止血机理也属于同一范畴，主要相同点如下：(1)都是在自身遇到血液或渗出液时，其亲水基团吸收水分后变成凝胶状附着在血管创面，膨胀后形成凝胶层，借助物理压力止血；(2)致密的三维网状支架使大量的血小板和凝血因子聚集，局部形成血凝块，从而达到止血目的；(3)打破电离平衡，激活凝血因子。虽然两者单独使用时可以达到止血效果，但他们也同时存在自身缺陷，SA的止血作用大部分依赖于人体正常的凝血机制，对于严重创伤后凝血机制受影响者作用有限；CMC比SA具有更好的吸湿性，但容易失去稳定性。经过物理共混理论将两种原料制备成生物止血复合性材料，即发挥了两者协同作用，又能克服各自缺陷而达到更好的止血修复目的。其止血效果的提高取决于两者形成的三维网状支架结构，生物共混技术使分子间不相互反应的同时形成致密的网状结构，构成具有高吸湿性的钻石亲水空间，能够迅速吸收创面的渗血和渗液，同时为血小板聚集提供平台，促使血小板凝集，快速达到止血效果。

随着医疗水平的发展，对于如何更多的避免和减少手术带来的创伤，越来越受医疗工作者和患者的关注，微创手术也随之得到更广泛的应用，而对于此类腔镜手术，如何有效的控制体腔内毛细血管及小静脉的渗血和组织创面的渗液，也成了外科医生所关注的问题。

而目前临床使用的冲洗液只能起到物理性的冲洗作用而不能达到快速止血和辅助修复效果，在提高操作技术的同时更需要一种可降解的生物复合止血材料加以配合来降低手术的危险系数。

发明内容

本发明目的是为了解决现有止血材料容易造成术后感染，以及存在手术视野不清晰的问题，而提供了一种共混液体止血复合材料及其制备方法。

本发明的一种共混液体止血复合材料，是由羧甲基纤维素钠、海藻酸钠和氯化钠溶液制成；其中，所述的羧甲基纤维素钠与海藻酸钠的质量比为(1～30):(0.2～2)；羧甲基纤维素钠与氯化钠的质量比为(1～30):(1.6～1.8)。

本发明的一种共混液体止血复合材料的制备方法，是按照以下步骤进行的：

一、取新制的注射用水5L，备用；

二、将羧甲基纤维素钠和海藻酸钠加入到步骤一的注射用水中，得混合液；将混合液置于密闭自动控温搅拌容器中，控温在50～80℃，在转速低于1000rpm的条件下，搅拌混合30～60min，降至室温后得共混溶液；

三、向步骤二共混溶液中加入氯化钠，使溶液渗透压摩尔浓度范围控制在260～320mOsmol/kg，室温状态下搅拌30～60min，然后加入步骤一得到的注射用水至羧甲基纤维素钠的质量百分含量为0.5％～15％且海藻酸钠的质量百分含量为0.1％～1％，调节溶液pH值至5.0～8.0，然后经微孔滤膜过滤，灌装，蒸汽灭菌后，即得共混液体止血复合材料。

本发明包含以下有益效果：

本发明的羧甲基纤维素钠的含量在0.5％-15％之间，海藻酸钠含量为0.1％-1％，在这范围内SA和CMC的微观结构处于最佳的相容状态，使内部的三维网状结构更牢固，更稳定，提高了血小板的附着面积，因此能够满足不同部位对防止渗血和渗出的要求。

与同类产品的比较：

表1共混液体止血复合材料与可吸收固体止血材料的比较

注：固体止血材料包含纱布、绫、粉、固体膜、海绵，凝胶等。

表2可吸收止血材料临床使用对比表

本发明制得的共混液体止血复合材料，通过生物共混技术使两种原料保持各自的分子结构的同时，形成致密的三维网状支架，具有钻石形亲水空间和大量亲水基团的三维网状支架，使产品具有高吸湿性，能够迅速地吸收创面的渗血和渗液，形成分子海绵，压迫封堵创面，同时为血小板聚集提供框架，起到辅助止血作用。三维网状支架及粘性特质可以在创面形成生物保护膜，有效地隔离细菌、病毒的介入，防止因术后的渗血、渗出导致的局部感染，减少或避免了抗生素的使用。单纯的物理手段达到了抑菌、防感染的目的，避免了溶菌酶只能在酸性条件下起作用，且加入溶菌酶后会产生过敏反应，减少了加入溶菌酶导致的生产工艺的复杂化，并且降低了生产成本。

本发明提出一种新型共混液体止血复合材料的制备方法，有效地弥补了现有固体止血材料(固态、凝胶态等)的不足，适用于固体止血材料不易操作、操作繁琐或易引起副损伤的出血点的辅助止血；也可与固体止血材料联合使用，增加止血效果。具体可适用于弥漫性渗血的止血；操作面狭小、深部出血创面止血；狭窄体腔的止血；较大创面止血；腔镜手术的止血等手术。高效抑制局部组织病原菌感染并帮助创面修复愈合缩短康复周期。而且该生物复合材料为透明液态等渗溶液，使用方便，可清晰医生手术视野。此外本发明具有可吸收降解机制，对机体无毒、副作用，使用安全可靠。

具体实施方式

本发明技术方案不局限于以下所列举具体实施方式，还包括各具体实施方式间的任意组合。

具体实施方式一：本实施方式的一种共混液体止血复合材料，是由羧甲基纤维素钠、海藻酸钠和氯化钠溶液制成；其中，所述的羧甲基纤维素钠与海藻酸钠的质量比为(1～30):(0.2～2)；羧甲基纤维素钠与氯化钠的质量比为(1～30):(1.6～1.8)。

具体实施方式二：本实施方式与具体实施方式一不同的是：所述的羧甲基纤维素钠与海藻酸钠的质量比为(1～25):(0.5～1.8)；羧甲基纤维素钠与氯化钠的质量比为(1～25):(1.6～1.8)。其它与具体实施方式一相同。

具体实施方式三：本实施方式与具体实施方式一或二不同的是：所述的羧甲基纤维素钠与海藻酸钠的质量比为(1～20):(0.5～1.5)；羧甲基纤维素钠与氯化钠的质量比为(1～25):(1.6～1.8)。其它与具体实施方式一或二相同。

具体实施方式四：本实施方式与具体实施方式一至三之一不同的是：所述的羧甲基纤维素钠与海藻酸钠的质量比为(1～15):(0.5～1.0)；羧甲基纤维素钠与氯化钠的质量比为(1～15):(1.6～1.7)。其它与具体实施方式一至三之一相同。

具体实施方式五：本实施方式与具体实施方式一至四之一不同的是：所述的羧甲基纤维素钠与海藻酸钠的质量比为(1～10):(0.5～0.8)；羧甲基纤维素钠与氯化钠的质量比为(1～10):(1.6～1.7)。其它与具体实施方式一至四之一相同。

具体实施方式六：本实施方式与具体实施方式一至五之一不同的是：所述的羧甲基纤维素钠与海藻酸钠的质量比为(1～5):(0.5～0.7)；羧甲基纤维素钠与氯化钠的质量比为(1～5):(1.6～1.7)。其它与具体实施方式一至五之一相同。

具体实施方式七：本实施方式的一种共混液体止血复合材料的制备方法，是按照以下步骤进行的：

一、取新制的注射用水5L，备用；

二、将羧甲基纤维素钠和海藻酸钠加入到步骤一的注射用水中，得混合液；将混合液置于密闭自动控温搅拌容器中，控温在50～80℃，在转速低于1000rpm的条件下，搅拌混合30～60min，降至室温后得共混溶液；

三、向步骤二共混溶液中加入氯化钠，使溶液渗透压摩尔浓度范围控制在260～320mOsmol/kg，室温状态下搅拌30～60min，然后加入步骤一得到的注射用水至羧甲基纤维素钠的质量百分含量为0.5％～15％且海藻酸钠的质量百分含量为0.1％～1％，调节溶液pH值至5.0～8.0，然后经微孔滤膜过滤，灌装，蒸汽灭菌后，即得共混液体止血复合材料。

本领域技术人员能够依据本市实施方式步骤三所述的羧甲基纤维素钠的质量百分含量为1％～15％，得出步骤二中羧甲基纤维素钠的加入量，同理，依据海藻酸钠的质量百分含量为0.1％～0.5％，能够得出步骤二中海藻酸钠的加入量。

具体实施方式八：本实施方式与具体实施方式七不同的是：步骤二中所述的密闭自动控温搅拌容器的材质为陶瓷、玻璃或不锈钢材质。其它与具体实施方式七相同。

具体实施方式九：本实施方式与具体实施方式七或八不同的是：步骤二中所述的将混合液密闭自动控温搅拌容器中，控温至60℃，在转速低于1000rpm的条件下，搅拌混合液30min。其它与具体实施方式七或八相同。

具体实施方式十：本实施方式与具体实施方式七至九之一不同的是：步骤三中所述的蒸汽灭菌条件为在115℃温度、F₀值大于8灭菌时间30min。其它与具体实施方式七至九之一相同。

具体实施方式十一：本实施方式与具体实施方式七至十之一不同的是：步骤三中所述的室温状态下搅拌60min。其它与具体实施方式七至十之一相同。

具体实施方式十二：本实施方式与具体实施方式七至十一之一不同的是：步骤三中所述的羧甲基纤维素钠的质量百分含量为1％～10％。其它与具体实施方式七至十一之一相同。

具体实施方式十三：本实施方式与具体实施方式七至十二之一不同的是：步骤三中所述的羧甲基纤维素钠的质量百分含量为1％～5％。其它与具体实施方式七至十二之一相同。

具体实施方式十四：本实施方式与具体实施方式七至十三之一不同的是：步骤三中所述的海藻酸钠的质量百分含量为0.1％～0.4％。其它与具体实施方式七至十三之一相同。

具体实施方式十五：本实施方式与具体实施方式七至十四之一不同的是：步骤三中所述的海藻酸钠的质量百分含量为0.1％～0.3％。其它与具体实施方式七至十四之一相同。

具体实施方式十六：本实施方式与具体实施方式七至十五之一不同的是：步骤三中所述的海藻酸钠的质量百分含量为0.1％～0.2％。其它与具体实施方式七至十五之一相同。

具体实施方式十七：本实施方式与具体实施方式七至十六之一不同的是：步骤三中所述的溶液渗透压摩尔浓度范围控制在260～300mOsmol/kg。其它与具体实施方式七至十六之一相同。

具体实施方式十八：本实施方式与具体实施方式七至十七之一不同的是：步骤三中所述的溶液渗透压摩尔浓度范围控制在260～290mOsmol/kg。其它与具体实施方式七至十七之一相同。

具体实施方式十九：本实施方式与具体实施方式七至十八之一不同的是：步骤三中所述的溶液渗透压摩尔浓度范围控制在260～270mOsmol/kg。其它与具体实施方式七至十八之一相同。

具体实施方式二十：本实施方式与具体实施方式七至十九之一不同的是：步骤三中所述的pH是采用0.1mol/L的磷酸二氢钠溶液进行调节的。其它与具体实施方式七至十九之一相同。

具体实施方式二十一：本实施方式与具体实施方式七至二十之一不同的是：步骤三中所述的pH值至6.0～8.0。其它与具体实施方式四至七至二十之一相同。

具体实施方式二十二：本实施方式与具体实施方式七至二十一之一不同的是：步骤三中所述的pH值至6.0。其它与具体实施方式七至二十一之一相同。

具体实施方式二十三：本实施方式与具体实施方式七至二十二之一不同的是：步骤三中所述的氯化钠为质量百分含量为0.8％～0.9％的氯化钠溶液。其它与具体实施方式七至二十二之一相同。

本发明不局限于上述最佳实施方式，任何人在本发明的启示下都可得出其他各种形式的产品，但不论在其形状或结构上作任何变化，凡是具有与本申请相同或相近似的技术方案，均落在本发明的保护范围之内。

通过以下实施例验证本发明的有益效果：

实施例一

本实施例的一种共混液体止血复合材料的制备方法，是按照以下步骤进行的：

一、取新制的注射用水5L，备用；

二、按表3比例分别称取无菌羧甲基纤维素钠(CMC)和无菌海藻酸钠(SA)共混于自动控温搅拌容器中，加入0.8L的步骤一所述注射用水，使其膨胀且初步溶解10分钟，控温在60℃，并控制转速低于1000rpm，搅拌30分钟后自然降至室温，获得澄明度较高的共混溶液；

三、将氯化钠溶解于步骤二所述的共混溶液中，在混合液均匀搅拌状态下缓慢流加，用SMC308型渗透压摩尔浓度测试仪测定混合液渗透压，使混合液渗透压摩尔浓度范围控制在260～320mOsmol/kg，再室温下搅拌30～60分钟使混合液充分相溶，采用0.1mol/L的磷酸二氢钠溶液调节pH值至5.0～8.0；

四、向混合液加入步骤一所述注射用水至全量1L，用NDJ-8S旋装式粘度计测定混合液黏度，符合标准后经微孔滤膜过滤，灌装，在温度为115℃、F₀值大于8的条件下，灭菌30min后，得到羧甲基纤维素钠-海藻酸钠共混溶液，即为止血复合材料。

表3羧甲基纤维素钠和海藻酸钠投放工艺要求

序号	投放比例	粘度	pH值	渗透压
					A	20：1	6mm2/s	5.82	285mOsmol/kg
B	10：1	8mm2/s	5.90	290mOsmol/kg
					C	5：1	12mm2/s	6.01	298mOsmol/kg
D	4：1	20mm2/s	6.05	292mOsmol/kg

其中，本实施例的工艺要求分析如下：

(1)搅拌速度：羧甲基纤维素钠和海藻酸钠遇水后形成混悬液，不易溶解，需借助机械搅拌使液体充分混合以缩短溶解时间，但两相在初混时由于分子形成的新三维结构与水分子形成的氢键没有达到平衡，此时转速过大，其相应的剪切力会破坏新的三维结构而使混合液降解，降低溶液黏度，三维结构中分子内氢键与水分子形成分子外氢键达到平衡后，混合液对剪切力要求下降，由此，初始混合需低速搅拌，当溶液大部分溶解后可适当提高转速，但是直径3分米的搅拌罐的转速不超过1000rpm。

(2)搅拌温度：温度对物质的溶解度影响很大，温度有利于克服羧甲基纤维素钠或海藻酸钠各自分子间氢键缔合，从而减少单一成分分子间缠结而有助于两相充分相溶，但是温度过高会破坏自身化学键的稳定性，温度需设定为合理范围内的最高有效温度，经实验证明60℃最佳，当温度超过80℃时，黏性降低尤为明显。

(3)搅拌时间：羧甲基纤维素钠和海藻酸钠初混时需要机械搅拌帮助悬浮颗粒溶解于溶剂中，但是当两种溶质的新三维结构中分子内氢键与水分子形成的分子外氢键达到平衡后，混合液形成均匀的稳定相不需要机械搅拌而耗费能源，而且搅拌时间过长，外界气温及现场环境的影响存在许多不确定因素，确定搅拌时间为30-60分钟。

(4)投加浓度：投加浓度会直接影响混合液的互溶时间，浓度过高，两相分散过程缓慢而产生胶体保护现象，浓度与混合效果呈反比例关系，实验证明，当羧甲基纤维素钠含量在1％-10％，海藻酸钠含量在0.1％-0.5％之间，溶液能够达到充分混合，且浓度和止血时间达到最佳。

本实施例制备的止血复合材料与现有材料止血性能比较见表4所示：

表4与固体止血材料性能的对比

由表2可知，本实施例制备的止血复合材料的性能要优于上述现有材料的止血性能。

实施例二

小鼠尾部创伤止血实验：

目的：动物实验用以考察实施例一制备的止血复合材料辅助止血的效果；

实验组：实施例一制备的止血复合材料；

对照组：分别以0.9％生理盐水(空白对照组)、羧甲基纤维素钠和海藻酸钠作为对照组。

方法：第一组(空白对照组)：0.9％生理盐水；第二组：羧甲基纤维素钠溶液；第三组：海藻酸钠溶液；第四组(实验组)：实施例一制备的止血复合材料；

实验用健康成年小鼠共40只，体重为20±2g，雌雄各半随机分为四组：对照组和实验组，每组10只；使用戊巴比妥钠(30mg)腹腔注射麻醉，麻醉成功后将其置于固定器中进行剪尾实验以对比四组小鼠的止血时间，剪尾长度约1cm，第一组使用0.9％生理盐水，其余三组分别使用各自成分溶液的脱脂棉缠绕，轻度压迫并记录出血起始时刻(终止时刻为伤口停止出血时刻)，整个实验过程中每隔10秒擦拭小鼠尾部渗出血液至伤口无血液流出。

结果：第二组和第三组小鼠尾部的平均出血时间分别比对照组缩短30％和35％，第四组的平均出血时间比第三组缩短30％，该实验充分证明了羧甲基纤维素钠和海藻酸钠共混溶液—共混液体止血复合材料的止血效果明显优于各自单独成分的样品和空白对照组，差异显著具有统计学意义。(P<0.01)。

实施例三

家兔背部创伤止血实验

目的：动物实验用以考察可吸收共混液体止血复合材料辅助止血的效果，并与生理盐水以及羧甲基纤维素钠或海藻酸钠单独成分样品进行比较：

实验组：实施例一制备的止血复合材料；

对照组：分别以0.9％生理盐水(空白对照组)、羧甲基纤维素钠和海藻酸钠作为对照组。

方法：实验用健康成年家兔4只，体重2.5±0.2kg，雌雄各半，对照组和实验组的实验操作基于一只动物体完成。使用3％戊巴比妥钠(30mg/kg)于兔耳缘静脉缓慢注射，麻醉成功后将其置于固定器中进行创伤止血实验以对比四组成分的辅助止血时间。将动物背部备皮并用1.0％碘伏溶液消毒，覆盖无菌铺巾后，沿脊柱两侧对称性各剪8个圆形切口，直径约1.0cm，深度先至皮肤全层，然后仔细分离至筋膜层，避开皮下组织中大血管。左侧上部两个切口为对照组，使用0.9％生理盐水脱脂棉覆盖，轻度压迫并记录出血起始时刻(终止时刻为伤口停止渗血时刻)，下部以及右侧六个切口为实验组分别使用羧甲基纤维素钠溶液，海藻酸钠溶液以及制备而成的共混液体脱脂棉覆盖，轻度压迫并记录出血起始时刻(终止时刻为伤口停止渗血时刻)，整个实验过程中每隔10秒擦拭伤口渗出血液至伤口无血液流出，四只家兔的止血实验过程相同，出血时间取四组实验平均值。

结果：由羧甲基纤维素钠溶液和海藻酸钠溶液单成分脱脂棉覆盖的伤口出血时间比0.9％生理盐水缩短28％；由制备的两者共混液体脱脂棉覆盖的伤口出血时间分别比羧甲基纤维素钠溶液和海藻酸钠溶液单成分脱脂棉缩短30％和32％。充分证明了羧甲基纤维素钠和海藻酸钠共混液体止血复合材料的止血效果明显优于各自单独成分样品和传统生理盐水。差异显著(P<0.01)。

实施例四

家兔胰脏渗血的止血动物实验研究

目的：用以考察实施例一制备的止血复合材料辅助止血的效果；

方法：用新西兰兔作为实验对象，将20只健康成年新西兰兔分成观察组和对照组，观察组10例在手术中使用实施例一制备的止血复合材料止渗血；对照组10例在手术过程中使用固体可吸收性止血纱布止渗血。

结果：实验观察组的平均止血时间为3分钟，对照组的平均止血时间为3分钟，两组止渗血效果无明显统计学差异(P>0.05)，且安全无副反应发生。结论共混液体止血复合材料在手术创面渗血止血应用方面安全有效，是一种较理想的创伤止血材料。

(1)材料与方法

1)实验动物及主要实验材料

健康新西兰兔，雌雄各半，体重2.5～3.0kg，由哈尔滨医科大学动物实验中心提供；共混液体止血复合材料(实施例一制备的止血复合材料)，可吸收性止血纱布(商品名：泰绫，北京泰科斯曼科技发展有限公司)。

2)方法

选取20只健康兔，体重2.5～3.0Kg。按雌雄各半的原则将家兔随机分成观察组10只，对照组10只。按30mg/kg体重于兔耳缘静脉缓慢注入3％异戊巴比妥钠进行麻醉，将动物腹部剪毛并用碘伏溶液消毒铺巾后，沿左侧肋缘下切口，长约5.0cm，深度先至皮肤全层，将皮肤与消毒纱垫边缘缝合，然后仔细避开皮下组织层中较大的血管，切开腹肌至腹膜层，提取腹膜，确认没有腹腔内脏器附着后，剪开腹膜，进入腹腔。为使整个胰腔得到充分显露，多采用上腹部弧形切口，从右侧第11肋骨尖前方至左侧11肋尖的前方，切开腹部肌层，切断镰状韧带和肝圆韧带，藉自动牵开器将切口上缘向上牵起，使胰脏得到充分显露。胰脏充分显露后，小心分离并且模拟胰脏尾部切除手术，制造渗血模型。

从肉眼可见创面出现渗血开始，观察组和对照组分别使用共混液体止血复合材料冲洗和可吸收性止血纱布敷伤口，同时用秒表记录止血时间。

3)统计学处理方法

实验数据均采用SPSS13.0软件处理，以表示，组间差异采用单因素方差分析，P>0.05为无明显统计学差异，P<0.05为具有显著性差异。

(2)结果

1)止血时间

两种材料的止血效果(见表5)，从表1可见共混液体止血复合材料的平均止血时间为3分钟，其中有2只兔为弥漫性渗血，均在3分钟内完成止血；可吸收性止血纱布的平均止血时间为3分钟，其中有3只为弥漫性渗血，2只在3分钟内完成止血，1只在5分钟内完成止血。实验观察组与对照组新西兰兔胰脏渗血平均止血时间无明显统计学差异(P>0.05)。

表5两种止血材料的时间比较

2)不良反应

两组新西兰兔在整个手术过程中未出现明显不良反应，未见明显异常。

(3)讨论

共混液体止血复合材料为羧甲基纤维素钠和海藻酸钠通过高分子生物共混技术制成，两种大分子以氢键作用相互交联，形成致密的三维网状支架结构，为血小板的粘附聚集提供框架，加速纤维蛋白网的形成；具有粘性特质，粘附在组织创面，减缓血液流速，起到机械封堵和压迫的作用。

从实验结果来看，共混液体止血复合材料与纱布在止血时间上虽无明显差异，但在操作过程中却体现了明显的优点。在组织剥离显露胰脏的过程中出现了弥漫性渗血，观察组2例和对照组3例。共混液体止血复合材料操作简便，直接冲洗可完全覆盖出血部位，术野清晰，2例渗血均在3分钟内完成了止血；而纱布的夹取和按压操作相对复杂，覆盖不均匀，对于胰脏切除底部狭小间隙的出血纱布很难送到位置，而且遮挡术野，有2例弥漫性渗血白兔在3分钟内完成了止血，另外1例用时达5分钟，由于借助了器械施加止血，纱布在吸湿后粘连组织表面和镊子，对胰脏和脾脏造成了一定操作性损伤。

共混液体止血复合材料是国内首次研发的液体生物止血材料，由于其具有良好的流动性，可全面均匀覆盖，操作更简便。解决了弥漫性渗血，创面较大、凹凸不平的手术的止血；克服了固体止血材料对操作面狭小、深部出血创面难以止血的缺陷；操作简便，更利于镜下手术中止血操作。具有一定粘附性，能效附着于创面，但不会像纱布一样过度粘连组织和手术器械。而且应用流体材料止血对于脆弱组织能够避免过度压迫或操作性副损伤，如脾、肝、肺及脑部的手术；此外，共混液体止血复合材料是无色或微黄色澄清的液体，不遮挡术野，止血效果可直视。

由于动物实验及实验对象数量的局限性，对共混液体止血复合材料在实际临床以及其它类型手术止血的应用有待进一步探讨。

实施例五

临床实验：

临床一般材料(病种、病例总数和病例选择)：

1、病例选择：选择手术及外伤创面需要清洗的患者。

2、受试者入选情况见表6所示：

表6受试者入选情况

组别	入组数量(例)	排除数量(例)	剔除数量(例)	脱落数量(例)	符合方案数量(例)
						实验组	34	0	2	0	32
对照组	35	0	2	0	33

3、人口学及其他基线特征、依从性情况见表7：

表7人口学及其他基线特征、依从性情况

临床试验方法(包括必要时对照组设置)：

1、总体设计：参照《医疗器械的临床试验规定》的要求，本次试验为开放、平行、对照的方式进行，试验组和对照组按照1：1的比例进行。

2、病例的选择与分配：根据实施例一制备的止血复合材料的特点及使用范围谨慎选择患者和病种，患者选择18-80岁；病种选择手术及外伤创面需要清洗的患者。

3、样本量：共66例(实验组33例对照组33例)

4、使用时间：1次

5、试验方法：

实验组：实施例一制备的止血复合材料；

对照组：湖南馨航瑞康生物科技有限责任公司生产的“壳聚糖生物护伤抗菌喷膜剂”规格型号：20ml/瓶，生产批号：20121101，生产注册证号：湘食药监械(准)字2012第2640065号。

试验方案经伦理委员会讨论通过。受试前，研究者已向受试者告知试验方案的有关内容，受试者签署知情同意书。

临床试验目的：

按照医疗器械产品临床试验的方案要求，针对实施例一制备的止血材料和“壳聚糖生物护伤抗菌喷膜剂”，进行了临床实验观察，清洗创面是否方便；对毛细血管和小静脉出血是否有辅助止血功能；是否形成生物保护膜，使用的安全性等进行统计对比分析。

本次临床验证中未出现任何不良反应和副作用，试验产品安全性评价为安全(1级)。

临床试验效果分析：

表8综合评价表

通过实验组和对照组的统计对比分析，该实验组和对照组产品人口学及其他基线特征、依从性情况经统计学比较，P＞0.05，无统计学意义，具有可比性；实验组和对照组的各项观察指标经统计学比较，P>0.05，无统计学意义。

临床实验结论：

实施例一制备的止血材料清洗创面方便；对毛细血管和小静脉出血有辅助止血功能；能形成生物保护膜，与对照组相似，P＞0.05，具有统计学意义。临床验证中没有发生不良事件和可疑不良事件，产品的安全性评价(1级)。符合临床使用要求，本次临床试验合格，可以用于临床。

Claims (5)

1.一种共混液体止血复合材料的制备方法，其特征在于它是由羧甲基纤维素钠、海藻酸钠和氯化钠溶液制成；其中，所述的羧甲基纤维素钠与海藻酸钠的质量比为(1～20):(0.5～1.5)；羧甲基纤维素钠与氯化钠的质量比为(1～25):(1.6～1.8)：所述的共混液体止血复合材料，按照以下步骤进行的：

一、取新制的注射用水5L，备用；

二、将羧甲基纤维素钠和海藻酸钠加入到步骤一的注射用水中，得混合液；将混合液置于密闭自动控温搅拌容器中，控温在50～80℃，在转速低于1000rpm的条件下，搅拌混合30～60min，降至室温后得共混溶液；

三、向步骤二共混溶液中加入氯化钠，使溶液渗透压摩尔浓度范围控制在270～300mOsmol/kg，室温状态下搅拌30～60min，然后加入步骤一得到的注射用水至羧甲基纤维素钠的质量百分含量为1％～15％且海藻酸钠的质量百分含量为0.1％～0.5％，调节溶液pH值至5.0～8.0，然后经微孔滤膜过滤，灌装，蒸汽灭菌后，即得共混液体止血复合材料；所述的pH是采用0.1mol/L的磷酸二氢钠溶液进行调节的。

2.根据权利要求1所述的一种共混液体止血复合材料的制备方法，其特征在于步骤二中所述的密闭自动控温搅拌容器的材质为陶瓷、玻璃或不锈钢材质。

3.根据权利要求1所述的一种共混液体止血复合材料的制备方法，其特征在于步骤二中所述的将混合液置于密闭自动控温搅拌容器中，控温在60℃，在转速低于1000rpm的条件下，搅拌混合液30min。

4.根据权利要求1所述的一种共混液体止血复合材料的制备方法，其特征在于步骤三中所述的室温状态下搅拌60min。

5.根据权利要求1所述的一种共混液体止血复合材料的制备方法，其特征在于步骤三中所述的pH值至6.0～8.0。