CN103966235A - 茄子花青素合成相关基因SmMYB1及其重组表达载体和在培育紫色番茄中的应用 - Google Patents
茄子花青素合成相关基因SmMYB1及其重组表达载体和在培育紫色番茄中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103966235A CN103966235A CN201410230344.1A CN201410230344A CN103966235A CN 103966235 A CN103966235 A CN 103966235A CN 201410230344 A CN201410230344 A CN 201410230344A CN 103966235 A CN103966235 A CN 103966235A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- smmyb1
- expression vector
- recombinant expression
- gene
- tomato
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明公开了茄子花青素合成相关基因SmMYB1及其重组表达载体和在培育紫色番茄中的应用，茄子花青素合成相关基因SmMYB1的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示，将该基因构建为重组表达载体然后通过农杆菌介导转化番茄，获得转基因番茄，获得转基因番茄的花瓣，柱头，花药，果实，根，茎及叶片表型为紫色，可以作为观赏植物栽培，并且转基因番茄的果实中花色苷含量较高，可以降低罹患癌症和心血管疾病的风险，具有很好的观赏和食用价值。
Description
技术领域
本发明属于基因工程技术领域，涉及茄子花青素合成相关基因SmMYB1和含有该基因的重组表达载体，还涉及该基因在培育紫色番茄中的应用和方法。
背景技术
番茄作为一种世界范围内广泛栽培的农作物，其果实一直是广受大众所喜爱的蔬菜和水果。花色苷作为一种广泛存在于植物体内的水溶性类黄酮类色素，越来越多的研究证明花色苷不仅在植物应对不良环境(紫外照射、低温、干旱及病原菌入侵)时发挥积极作用，同时花色苷也对人类大量的慢性疾病(心血管病和肿瘤)的治疗有一定的帮助作用。大量资料证实，规律性的食用花色苷含量较高的食物对于人体的保健有着重要的价值。番茄作为一种在人们餐桌上出现频率较高的水果或蔬菜，自然栽培的番茄果实中的花色苷含量却微乎其微。通过基因工程的方法，我们将调控茄子果实花色苷合成的转录因子异源表达于与番茄中，获得了紫色的番茄植株及果实。番茄果实的色泽一直是育种工作者关注的重要问题，我们通过异源表达外源基因的方法，不仅改变了整个番茄植株的颜色，同时还改变了果实的颜色。传统的育种方法周期长、耗资多且效果不稳定。近年来，随着基因工程的迅速发展和转基因技术的日益完善，基因工程技术在培育优良作物品种方面显示了极大的潜力。基因工程技术势必会越来越广泛的应用于番茄品种的改良和育种当中。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的之一在于提供茄子花青素合成相关基因SmMYB1；本发明的目的之二在于提供含有茄子花青素合成相关基因SmMYB1的重组表达载体；本发明的目的之三载体提供含有重组表达载体的微生物转化体；本发明的目的之四在于提供茄子花青素合成相关基因SmMYB1在培育紫色番茄品种中的应用；本发明的目的之五在于提供茄子花青素合成相关基因SmMYB1在提高番茄果实中花色苷中的应用；本发明的目的之六在于提供培育紫色番茄品种的方法。
为实现上述发明目的，本发明提供如下技术方案：
1.茄子花青素合成相关基因SmMYB1，其核苷酸序列如SEQ ID No.3所示。
2.含有权利要求1所述茄子花青素合成相关基因SmMYB1的重组表达载体。
优选的，所述重组表达载体是在pBI121载体的Sac I和Xba I酶切位点之间连入如SEQ ID No.3所示核苷酸序列。
3.含有所述重组表达载体的微生物转化体。
优选的，所述微生物转化体为根癌农杆菌LBA4404，也可以选择其他的农杆菌。
4.所述茄子花青素合成相关基因SmMYB1在培育紫色番茄品种中的应用。
5.所述茄子花青素合成相关基因SmMYB1在提高番茄果实花色苷含量中的应用。
6.培育紫色番茄品种的方法，包括如下步骤：
a.构建含如SEQ ID No.3所示核苷酸序列的重组表达载体，然后转化微生物转化体，制得工程菌；
b.将步骤a所得工程菌转化番茄外植体，然后在含30g/L的蔗糖、1mg/L吲哚乙酸、1.75mg/L玉米素、pH为5.8的MS固体培养基中于25±2℃、黑暗下共培养48小时；再转入含有30g/L的蔗糖、1.0mg/L吲哚乙酸、1.75mg/L玉米素、500mg/L羧苄青霉素和50mg/L卡那霉素、pH为5.8的MS固体培养基中，在25±2℃、光周期16h/d、光照强度1000-2000lx条件下培养至长出再生芽；待芽长至2-3cm时切下再生芽，转入含有30g/L的蔗糖、250mg/L羧苄青霉素和50mg/L卡那霉素、pH为5.8的MS固体培养基中，在25±2℃、光周期16h/d、光照强度1000-2000lx条件下培养至生根，即得紫色番茄品种。
优选的，所述重组表达载体的的构建方法为：用SEQ ID No.4和SEQ ID No.5所示序列为引物克隆携带酶切位点的茄子花青素合成相关基因SmMYB1，将Sac I和Xba I酶切后再与经同样双酶切的pBI121载体连接。
优选的，所述转化微生物转化体的方法如下：将根癌农杆菌LBA4404、含有游动质粒Prk2013的大肠杆菌和含有重组表达载体的大肠杆菌DH5α单菌落依次重叠均匀涂在pH7.2的YEB固体培养基中央直径为1cm的圆圈中，28±2℃黑暗条件下倒置培养至长出菌团，用接种环挑取菌团，在含有50mg/L利福平、500mg/L链霉素和50mg/L卡那霉素、pH7.2的YEB固体培养基中划线，然后在28±2℃黑暗条件下倒置培养2-2.5天至长出单菌落，挑取单菌落，用含有50mg/L利福平、500mg/L链霉素、50mg/L卡那霉素、pH7.2的YEB液体培养基在28±2℃、黑暗、200rpm条件下摇床培养至菌液OD600为1.8-2.0，提取质粒，用Sac I和Xba I进行双酶切鉴定，阳性克隆为微生物转化体。
本发明的有益效果在于：本发明获得了茄子花青素合成相关基因SmMYB1，并将茄子花青素合成相关基因SmMYB1的编码区重组表达载体，将该载体转入番茄后所得转基因番茄阳性植株中SmMYB1基因较非转基因植株有显著的表达，且整个番茄植株呈现紫色和紫色的番 茄果实；与传统育种方法通过杂交等方法相比，本发明采用基因工程技术，高效并可稳定遗传地增加了番茄植株的花色苷含量，为番茄的品种改良作出了积极的探索，也为观赏植物的花色育种提供了参考和借鉴，具有良好的市场前景和经济价值。
附图说明
为了使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本发明作进一步的详细描述，其中：
图1为茄子SmMYB1基因扩增产物的琼脂糖凝胶电泳分析图，其中M为DNA分子量标准(Maker)。
图2为番茄转基因组织培养过程(A：番茄愈伤组织分化；B：番茄抗性植株的产生)。
图3为PCR检测NPTII报告基因在转基因番茄植株中的表达(M为Maker，CK-为阴性对照，CK+为阳性对照，CK-为空白对照，1-4为转基因番茄植株)。
图4为SmMYB1基因在转基因番茄阳性植株中的表达量(WT为非转基因番茄，T#1,2,3,4为不同的转基因番茄阳性株系)。
图5为转基因番茄阳性植株表型。
图6为转基因番茄成熟果实表型。
图7为检测转基因番茄花色苷含量结果。
具体实施方式
以下将结合附图对本发明优选实施例进行详细的描述。优选实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，例如分子克隆实验指南(第双版，J.萨姆布鲁克等著，黄培堂等译，科学出版社，2002年)中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。
本发明实施例中使用的番茄品种为“Solanum lycopersicon Mill.cv.Ailsa Craig”，为本实验室留种。pGEM-T Easy载体为Promega公司产品，pBI121载体、大肠杆菌DH5α、含有游动质粒pRK2013的大肠杆菌“协助”菌(简称helper)和根癌农杆菌LBA4404由本实验室保存；RNA提取试剂盒、RNA PCR Kit(AMV)Ver.3.0试剂盒、DNA提取试剂盒Universal Genomic DNA Extraction Kit Ver.3.0、连接试剂盒DNA Ligation Kit Ver.2.0(T4DNA连接酶/SolutionI)、限制性内切酶、Taq DNA聚合酶、PrimeSTAR HS DNA聚合酶均为大连TaKaRa公司产品；DNA纯化试剂盒(离心柱型)为TIANGEN公司产品；其余试剂均为分析纯试剂。
一、获得茄子SmMYB1基因全长序列
根据NCBI数据库中茄子(Solanum melongena L.)花青素合成相关基因SmMYB1基因部分核酸序列(FS084890)、番茄ANT1基因(NM_001247488)以及辣椒花青素合成相关基因 CaMYB2(AJ608992)序列，设计克隆SmMYB1基因的全长引物，分别为SmMYB1-F和SmMYB1-R，引物序列如下：
SmMYB1-F：5'-aataaaatgaataatcctcc-3'(SEQ ID No.1)；
SmMYB1-R：5'-cgaaaacagacaatattacta-3'(SEQ ID No.2)；
提取茄子果实表皮总RNA，根据RNA PCR Kit(AMV)Ver.3.0试剂盒说明合成cDNA，再以cDNA为模板，分别以SEQ ID No.1和SEQ ID No.1为引物，扩增SmMYB1基因全长，PCR反应体系为：ddH2O16.5μL、10×PCR Buffer2.5μL、25mM MgCl22.5μL、dNTP(10μM)1.0μL、100μM的上、下游引物各0.5μL、cDNA模板1.0μL、Taq DNA聚合酶0.5μL，共25μL；PCR反应程序为：94℃预变性5分钟；然后94℃变性30秒，56℃退火30秒，72℃延伸1分钟，共35个循环；最后72℃后延伸10分钟。将PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳鉴定，结果如图1所示。结果显示，扩增获得约800bp的目的条带，然后将扩增产物采用DNA纯化试剂盒进行回收纯化，将纯化的SmMYB1基因全长片段与pGEM-T Easy载体连接，获得重组质粒pGEM-T::SmMYB1。将上述重组质粒委托英潍捷基(上海)贸易有限公司进行测序，结果显示，SmMYB1基因全长为825bp，核苷酸序列如SEQ ID No.3所示。
二、构建含茄子SmMYB1基因的重组表达载体
根据pBI121载体的多克隆位点和SmMYB1基因核苷酸序列，设计构建含SmMYB1编码区的表达载体的引物，具体为：
SmMYB1-oF：5'-gcgatctagaaataaaatgaataatcctcc-3'(SEQ ID No.4)，下划直线部分为Xba I酶切位点。
SmMYB1-oR：5'-gactgagctccgaaaacagacaatattacta-3'(SEQ ID No.5)，下划直线部分为Sac I酶切位点。
以重组质粒pGEM-T::SmMYB1为模板，以SEQ ID No.4和SEQ ID No.5为引物，进行PCR扩增，PCR反应体系为：ddH2O16μL、10×PrimeSTAR Buffer(含MgCl2)2.5μL、dNTP(2.5μM)4.0μL、上下游引物各0.5μL、质粒模板1.0μL、PrimeSTAR HS DNA聚合酶0.5μL，共25μL，PCR反应条件为：98℃变性10秒，56℃退火15秒，72℃延伸1.5分钟，共40个循环；最后72℃后延伸10分钟，扩增获得两侧带Sac I和Xba I酶切位点的SmMYB1基因片段；纯化后用Sac I和Xba I双酶切，再与经同样双酶切的pBI121载体在T4DNA连接酶作用下连接，获得重组质粒pBI121::SmMYB1。
三、将重组质粒pBI121::SmMYB1转化农杆菌
将根癌农杆菌LBA4404在含有1.2％(w/w)琼脂、50mg/L利福平和500mg/L链霉素的 YEB固体培养基上划线，28±2℃黑暗条件下培养2-2.5天至长出单菌落；同时分别将含有重组质粒pBI121::SmMYB1的大肠杆菌DH5α和含有游动质粒Prk2013的大肠杆菌在含有50mg/L卡那霉素的LB固体培养基上划线，37±2℃条件下倒置培养14-16小时至长出单菌落；将根癌农杆菌LBA4404单菌落、含有游动质粒Prk2013的大肠杆菌单菌落和含有重组质粒pBI121::SmMYB1的大肠杆菌DH5α单菌落依次重叠均匀涂在含有1.2％(w/w)琼脂的YEB固体培养基(pH7.2)中央直径为1cm的圆圈中，28±2℃黑暗条件下倒置共培养24小时至长出菌团，用接种环挑取菌团适量，在含有质量分数为1.2％的琼脂、50mg/L利福平、500mg/L链霉素和50mg/L卡那霉素的YEB固体培养基(pH7.2)中划线，28±2℃黑暗条件下倒置培养2-2.5天至长出单菌落，挑取3-4个单菌落，用含有50mg/L利福平、500mg/L链霉素和50mg/L卡那霉素的YEB液体培养基(pH7.2)，在28±2℃、黑暗、200rpm条件下摇床培养1.5天至菌液均匀且OD600为1.8-2.0，提取重组质粒，用Sac I和Xba I进行双酶切鉴定，阳性重组子即为pBI121::SmMYB1农杆菌工程菌株，-80℃冻存备用。
四、农杆菌介导的含茄子SmMYB1基因的表达载体转化番茄
将含有pBI121::SmMYB1的农杆菌工程菌株接种于含有质量分数为1.2％的琼脂、50mg/L利福平、500mg/L链霉素和50mg/L卡那霉素、pH为7.2的YEB固体培养基上，在28±2℃黑暗条件下活化2-3天至长出单菌落，挑取单菌落，用含有50mg/L利福平、500mg/L链霉素和50mg/L卡那霉素、pH为7.2的YEB液体培养基20mL，在28±2℃、200rpm条件下扩大培养1.5天，再将所得菌液按体积比为1:100接入含有50mg/L利福平、500mg/L链霉素和50mg/L卡那霉素、pH为7.2的YEB液体培养基中，在28±2℃、200rpm条件下扩大培养至OD600为1.8～2.0，然后28±2℃离心弃上清，菌体用新鲜的YEB液体培养基洗涤，再用含有质量分数为3％的蔗糖、pH为5.8的MS培养基100mL重悬，制得农杆菌工程菌液。
用体积分数为75％的酒精浸泡番茄种子2min，无菌水冲洗3次；灭过菌的饱和Na3PO4浸泡种子20min，并不时剧烈振荡，无菌水冲洗3次；1％(V/V)的NaClO水溶液浸泡种子10min，无菌水冲洗7次；无菌水浸泡种子4h，播种在MS固体培养基上，光照培养箱26℃(16h光照)/18℃(8h黑暗)培养直至子叶展平，切取已展平的子叶即得番茄外植体。将番茄外植体的子叶切下，在MS液体培养基中浸泡1h，滤纸吸干残留液体培养基并放置在质量分数为3％的蔗糖、质量分数为0.8％的琼脂、1mg/L吲哚乙酸、1.75mg/L玉米素、pH为5.8的MS固体培养基中，26℃(16h光照)/18℃(8h黑暗)预培养1d后置于农杆菌工程菌液中浸染15分钟后，放回质量分数为3％的蔗糖、质量分数为0.8％的琼脂、1mg/L吲哚乙酸、1.75mg/L玉米素、pH为5.8的MS固体培养基中，在25±2℃黑暗条件下共培养48小 时，再转入含有质量分数为3％的蔗糖、质量分数为0.8％的琼脂、1.0mg/L吲哚乙酸、1.75mg/L玉米素、500mg/L羧苄青霉素和50mg/L卡那霉素、pH为5.8的MS固体培养基中，在25±2℃、光周期16h/d、光照强度1000-2000lx条件下培养至长出愈伤组织及抗性芽；将长2-3cm的抗性芽切下，转入含有质量分数为3％的蔗糖、质量分数为0.8％的琼脂、250mg/L羧苄青霉素和50mg/L卡那霉素、pH为5.8的MS固体培养基中，在25±2℃、光周期16h/d、光照强度1000-2000lx条件下培养至生根，即得转基因番茄植株，如图2所示。
五、转基因番茄阳性植株的筛选
1.PCR检测NPTII报告基因在转基因番茄植株中的表达
根据载体pBI121::SmMYB1中的NPTII报告基因序列，设计如下特异检测引物：
NPTII-F：5'-gacaatcggctgctctga-3'(SEQ ID No.6)；
NPTII-R：5'-aactccagcatgagatcc-3'(SEQ ID No.7)。
分别取转基因番茄植株和非转基因番茄植株，提取基因组DNA，再以所得基因组DNA为模板、SEQ ID No.6和SEQ ID No.7所示序列为引物进行PCR扩增，检测NPTII报告基因在转基因番茄植株中的表达。PCR产物的琼脂糖凝胶电泳分析结果如图3所示，阳性转基因番茄植株的PCR产物在900bp位置出现目标DNA条带，经测序证明与NPTII报告基因片段序列一致，证实这些植株为转基因番茄阳性植株。
2.qPCR检测SmMYB1基因在转基因番茄阳性植株中的表达
根据SmMYB1基因序列和番茄内参基因GAPDH序列，设计如下引物：
qSmMYB1-F：5'-caagtgacaagcaaactaccg-3'(SEQ ID No.8)；
qSmMYB1-R：5'-tcttctccttcaacagcgtc-3'(SEQ ID No.9)；
qSmGAPDH-F：5'-gtacgacaacgaatggggtta-3'(SEQ ID No.10)；
qSmGAPDH-R：5'-tcatatcagcagcaccagca-3'(SEQ ID No.11)。
分别取转基因番茄阳性植株和非转基因番茄植株的幼叶，提取总RNA，将总RNA反转录为cDNA，再以所得cDNA为模板，分别以qSmMYB1-F和qSmMYB1-R，qSmGAPDH-F和qSmGAPDH-R为引物进行qPCR，检测SmMYB1基因在转基因番茄阳性植株中的表达量，结果如图4所示。由图4可知，转基因番茄阳性植株中SmMYB1基因都有明显的表达。
六、转基因番茄阳性植株的表型分析
将上述筛选出的转基因番茄阳性植株和非转基因番茄植株按常规方法培育，观察分析转基因番茄阳性植株的表型特征，结果如图5-7所示。由图5可知，转基因番茄的整个植株包括花瓣，柱头，花药，果实，根，茎及叶片都有明显的花色苷积累并呈现紫色；由图6可知， 转基因番茄的番茄果实果皮和果肉内部都有明显的花色苷积累并呈现紫黑色特征。通过高效液相色谱的方法对转基因和野生型番茄果实进行检测分析，发现转基因番茄果肉花色苷最高含量可达0.45mg/g鲜重(图7)。由以上结果可知，该转基因番茄获得的方法不仅对于观赏类植物栽培育种还是生产具有食疗价值的功能性番茄果实都有明显的应用价值。
最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管通过参照本发明的优选实施例已经对本发明进行了描述，但本领域的普通技术人员应当理解，可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变，而不偏离所附权利要求书所限定的本发明的精神和范围。
Claims (10)
1.茄子花青素合成相关基因SmMYB1，其核苷酸序列如SEQ ID No.3所示。
2.含有权利要求1所述茄子花青素合成相关基因SmMYB1的重组表达载体。
3.根据权利要求1所述的重组表达载体，其特征在于：所述重组表达载体是在pBI121载体的Sac I和Xba I酶切位点之间连入如SEQ ID No.3所示核苷酸序列。
4.含有权利要求2或3所述重组表达载体的微生物转化体。
5.根据权利要求4所述的微生物转化体，其特征在于：所述微生物转化体为根癌农杆菌LBA4404。
6.权利要求1所述茄子花青素合成相关基因SmMYB1在培育紫色番茄品种中的应用。
7.权利要求1所述茄子花青素合成相关基因SmMYB1在提高番茄果实花色苷含量中的应用。
8.培育紫色番茄品种的方法，其特征在于，包括如下步骤：
a.构建含如SEQ ID No.3所示核苷酸序列的重组表达载体，然后转化微生物转化体，制得工程菌；
b.将步骤a所得工程菌转化番茄外植体，然后在含30g/L的蔗糖、1mg/L吲哚乙酸、1.75mg/L玉米素、pH为5.8的MS固体培养基中于25±2℃、黑暗下共培养48小时；再转入含有30g/L的蔗糖、1.0mg/L吲哚乙酸、1.75mg/L玉米素、500mg/L羧苄青霉素和50mg/L卡那霉素、pH为5.8的MS固体培养基中，在25±2℃、光周期16h/d、光照强度1000-2000lx条件下培养至长出再生芽；待芽长至2-3cm时切下再生芽，转入含有30g/L的蔗糖、250mg/L羧苄青霉素和50mg/L卡那霉素、pH为5.8的MS固体培养基中，在25±2℃、光周期16h/d、光照强度1000-2000lx条件下培养至生根，即得紫色番茄品种。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述重组表达载体按如下方法制备：用SEQ IDNo.4和SEQ ID No.5所示序列为引物克隆携带酶切位点的茄子花青素合成相关基因SmMYB1，将Sac I和Xba I酶切后再与经同样双酶切的pBI121载体连接。
10.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述转化微生物转化体的方法如下：将根癌农杆菌LBA4404、含有游动质粒Prk2013的大肠杆菌和含有重组表达载体的大肠杆菌DH5α单菌落依次重叠均匀涂在pH7.2的YEB固体培养基中央直径为1cm的圆圈中，28±2℃黑暗条件下倒置培养至长出菌团，用接种环挑取菌团，在含有50mg/L利福平、500mg/L链霉素和50mg/L卡那霉素、pH7.2的YEB固体培养基中划线，然后在28±2℃黑暗条件下倒置培养2-2.5天至长出单菌落，挑取单菌落，用含有50mg/L利福平、500mg/L链霉素、50mg/L卡那霉素、pH7.2的YEB液体培养基在28±2℃、黑暗、200rpm条件下摇床培养至菌液OD600为1.8-2.0，提取质粒，用Sac I和Xba I进行双酶切鉴定，阳性克隆为微生物转化体。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410230344.1A CN103966235B (zh) | 2014-05-28 | 2014-05-28 | 茄子花青素合成相关基因SmMYB1及其重组表达载体和在培育紫色番茄中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410230344.1A CN103966235B (zh) | 2014-05-28 | 2014-05-28 | 茄子花青素合成相关基因SmMYB1及其重组表达载体和在培育紫色番茄中的应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN103966235A true CN103966235A (zh) | 2014-08-06 |
| CN103966235B CN103966235B (zh) | 2015-12-02 |
Family
ID=51236241
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201410230344.1A Expired - Fee Related CN103966235B (zh) | 2014-05-28 | 2014-05-28 | 茄子花青素合成相关基因SmMYB1及其重组表达载体和在培育紫色番茄中的应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN103966235B (zh) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104145678A (zh) * | 2014-08-15 | 2014-11-19 | 中国科学院昆明植物研究所 | 一种促进转基因番茄生长和虾青素积累的栽培方法 |
| CN104450743A (zh) * | 2014-12-19 | 2015-03-25 | 重庆大学 | 茄子花青素合成相关基因SmMYB1在培育紫色非洲红茄品种中的应用 |
| CN105505947A (zh) * | 2015-12-28 | 2016-04-20 | 重庆大学 | 紫白菜花色苷生物合成调控基因BrTT8在培育光诱导型紫色番茄的应用及方法 |
| CN106947770A (zh) * | 2017-03-18 | 2017-07-14 | 郑州大学 | 苤蓝基因及其在培育紫色微型番茄中的应用 |
| CN108866080A (zh) * | 2018-07-25 | 2018-11-23 | 江苏师范大学 | 番茄胁迫响应基因、其重组表达载体及其在培育耐盐番茄中的应用 |
| CN111996198A (zh) * | 2020-08-26 | 2020-11-27 | 山东农业大学 | 一种茄子茎中花青素调控基因SmbHLH1及其应用 |
-
2014
- 2014-05-28 CN CN201410230344.1A patent/CN103966235B/zh not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| 无: "登录号：XM_004249620.1", 《GENBANK》, 12 March 2013 (2013-03-12), pages 1 * |
| 杜娟: "甘蓝型油菜及其亲本物种PAP基因家族的克隆与比较基因组学研究", 《中国硕士学位论文全文数据库 基础科学辑》, no. 07, 15 July 2010 (2010-07-15), pages 006 - 125 * |
| 邵文婷等: "茄子花青素合成相关基因SmMYB的克隆与表达分析", 《园艺学报》, vol. 40, no. 3, 31 December 2013 (2013-12-31), pages 467 - 478 * |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104145678A (zh) * | 2014-08-15 | 2014-11-19 | 中国科学院昆明植物研究所 | 一种促进转基因番茄生长和虾青素积累的栽培方法 |
| CN104145678B (zh) * | 2014-08-15 | 2016-02-24 | 中国科学院昆明植物研究所 | 一种促进转基因番茄生长和虾青素积累的栽培方法 |
| CN104450743A (zh) * | 2014-12-19 | 2015-03-25 | 重庆大学 | 茄子花青素合成相关基因SmMYB1在培育紫色非洲红茄品种中的应用 |
| CN105505947A (zh) * | 2015-12-28 | 2016-04-20 | 重庆大学 | 紫白菜花色苷生物合成调控基因BrTT8在培育光诱导型紫色番茄的应用及方法 |
| CN106947770A (zh) * | 2017-03-18 | 2017-07-14 | 郑州大学 | 苤蓝基因及其在培育紫色微型番茄中的应用 |
| CN108866080A (zh) * | 2018-07-25 | 2018-11-23 | 江苏师范大学 | 番茄胁迫响应基因、其重组表达载体及其在培育耐盐番茄中的应用 |
| CN111996198A (zh) * | 2020-08-26 | 2020-11-27 | 山东农业大学 | 一种茄子茎中花青素调控基因SmbHLH1及其应用 |
| CN111996198B (zh) * | 2020-08-26 | 2022-06-24 | 山东农业大学 | 一种茄子茎中花青素调控基因SmbHLH1及其应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN103966235B (zh) | 2015-12-02 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103966235B (zh) | 茄子花青素合成相关基因SmMYB1及其重组表达载体和在培育紫色番茄中的应用 | |
| CN107312793A (zh) | Cas9介导的番茄基因编辑载体及其应用 | |
| CN103484436B (zh) | 来源于玉米的与生育期相关的蛋白ZmHUB2及其编码基因与应用 | |
| CN105755020B (zh) | 三七丝裂原活化蛋白激酶激酶基因PnMAPKK1及其应用 | |
| CN107254478A (zh) | 番茄sllcd基因及其应用 | |
| CN104450743A (zh) | 茄子花青素合成相关基因SmMYB1在培育紫色非洲红茄品种中的应用 | |
| CN103525828B (zh) | 番茄SlEBI基因及其RNAi表达载体和应用 | |
| CN109735538B (zh) | 一种提高森林草莓叶片再生效率的载体及其制备方法和应用 | |
| CN117187294B (zh) | BnaC5.ACBP4基因在提高植物耐水淹性中的应用 | |
| CN114525284A (zh) | 红皮龙眼花色苷生物合成调控基因DlMYB1-HP及其应用 | |
| CN104774869A (zh) | 通过沉默番茄基因SlNZG培育耐贮番茄植株的方法 | |
| CN103243111B (zh) | 菊花GA20ox和CPD双基因RNAi载体及其构建方法和应用 | |
| CN102618556B (zh) | 辣椒CaCOI1.2基因及其重组表达载体和应用 | |
| CN102586250A (zh) | 一种姜花萜类花香基因Hctps1启动子及其应用 | |
| CN102550414A (zh) | 一种淀粉基质专用水稻的转基因培育方法 | |
| CN111996192A (zh) | 创制果实无绿色青肩番茄材料的方法及其应用 | |
| CN108866080B (zh) | 番茄胁迫响应基因、其重组表达载体及其在培育耐盐番茄中的应用 | |
| CN105039345B (zh) | 一种增强桑树耐盐能力的miRNA的克隆及其应用 | |
| CN106636193A (zh) | 一种利用RNAi载体调节菊花开花时间的方法 | |
| CN103183731A (zh) | 石斛DnMYB类转录因子、编码基因、载体、工程菌及应用 | |
| CN103667290B (zh) | 玉米营养器官特异性启动子及其应用 | |
| CN106754970A (zh) | 一种通过控制LsFT 基因来培育耐抽薹型生菜的方法 | |
| CN104293808B (zh) | 一种杂交鹅掌楸LhMKK2基因及其表达蛋白和应用 | |
| CN107312794A (zh) | 玫瑰RrNUDX1基因在改变植物花期中的应用 | |
| CN105505947A (zh) | 紫白菜花色苷生物合成调控基因BrTT8在培育光诱导型紫色番茄的应用及方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20151202 Termination date: 20180528 |