CN103948816A - 一种化风丹药母的发酵制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种化风丹药母的发酵制备方法，所述制备方法简单，生产周期短，所述药母制成的化风丹安全性高，临床疗效好，质量更稳定，可控性好，能有效保证产品的质量，有利于化风丹的现代化生产。

Description

一种化风丹药母的发酵制备方法

技术领域

本发明涉及一种化风丹药母的发酵制备方法，属于药品技术的领域。

技术背景

化风丹是由天麻、僵蚕、全蝎、雄黄、药母、麝香、朱砂、硼砂等十多味中药经加工制作而成的中成药。用于风痰闭阻(头痛、耳鸣、脑动脉硬化、肢体麻木无力及脑萎缩)，中风偏瘫，癫痫，面神经麻痹，口眼歪斜等症的治疗，1951年被列入国务院保护的四大名药之一。药母含生川乌、生半夏、生天南星和白附子等中药粉，其制作方法为：将处方中药物粉碎加入牛胆汁混匀后密闭经发酵而成。

发酵是经净制或处理后的药物，在一定的温度和湿度条件下，通过霉菌和酶的作用，使药物发泡、生衣的方法。发酵法一直是中药炮制方法之一，它借助微生物的作用，改变中药原有药性，提高疗效，降低毒副作用，扩大适应症。毒剧中药在临床上对某些疑难病症具有较好的疗效，如不经过炮制或炮制不当，不但不能达到治疗疾病的目的，反而还能引起中毒，甚至有生命危险。乌头主要含有生物碱类成分，其中以二萜类双酯型生物碱含量最高，该类成分是其毒性成分，经炮制后可降低毒性。化风丹药母的传统制作工艺就是通过发酵来降低药母中原料的毒性。但是原发酵工艺只是简单的将药母置于自然条件下发酵，受外界环境的影响较大，导致发酵所需时间较长，延长了化风丹生产周期；此外由于自然环境变化差异大，药母的发酵仅靠炮制人员凭经验来判断炮制终点，使得药母的质量不够稳定，可控性低，不利于化风丹的现代化生产。

发明内容：

本发明所要解决的技术问题在于提供一种化风丹药母的发酵制备方法。所述方法生产周期短、制成的药母质量稳定，安全性高，可控性好，制成的化风丹临床疗效更好。

为解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案实现：

一种化风丹药母，按照重量组份计算，它由牛胆汁100-200份、白附子20-40份、生半夏20-40份、生天南星20-40份、生川乌20-40份、郁金12-15份、神曲0.1-0.5份制备而成。

具体地说，所述化风丹药母按照重量组份计算，由牛胆汁126.7份、白附子28.2份、生半夏28.2份、生天南星28.2份、生川乌28.2份、郁金14.1份、神曲0.14份制备而成。

所述化风丹药母的发酵制备方法为：取处方中白附子、生半夏、生天南星、生川乌、郁金、神曲粉碎成细粉；加入牛胆汁混合均匀，置于密闭容器中，在温度20～40℃，湿度50～80％的条件下发酵30-35天，取出，干燥，即得；所述牛胆汁应符合以下要求：pH＝6.0～8.0；密度0.800～1.300；固形物：0.0200～0.2500g；胆酸含量：8.000～45.000mg/mL。

前述化风丹药母的发酵制备方法中，所述发酵温度35±5℃，湿度50～80％。

具体地说，所述发酵温度35±3℃，湿度55～65％。

前述化风丹药母的发酵制备方法中，所述牛胆汁的pH＝6.15～7.50。

前述化风丹药母的发酵制备方法中，所述牛胆汁的密度为：0.900～1.200。

前述化风丹药母的发酵制备方法中，所述牛胆汁的固形物为：0.0300～0.2000g。

前述化风丹药母的发酵制备方法中，所述牛胆汁的胆酸含量为：28.000～45.000mg/mL。

具体地说，前述化风丹药母的发酵制备方法为：取处方中白附子、生半夏、生南星、生川乌、郁金、神曲粉碎成细粉；加入牛胆汁混合均匀，置于密闭容器中，在温度35±3℃，湿度为55～65％的条件下发酵30-35天，至药母中所含乌头碱、新乌头碱、次乌头碱总含量在0.0777～0.1147mg/g的范围内时，取出，常温下阴干，即得；所述牛胆汁应符合以下要求：pH＝6.15～7.50；密度0.900～1.200；固形物：0.0300～0.2000g；胆酸含量：28.000～45.000mg/mL。

所述常温下阴干的方法为：先制成鹅蛋形状大小的圆球，放置于风干架上，经30-40天的常温下阴干，待干燥成型后，放置于能通风透气的网袋中悬挂于风干架上，继续风干90-120天，待药种剂圆球呈现有多个蜂窝状小孔时，将圆球药种剂收取粉碎过筛,即得。

与现有技术相比，本发明所述化风丹药母的发酵制备方法具有如下优点：

1、传统药母需70天左右的时间进行发酵，且中途还要上下翻匀。本发明所述方法更为简单，生产周期短，发酵仅需30天左右的时间，节约了人力物力。

2、本发明所述方法制备的药母制成的化风丹，安全性高，临床疗效更好。

3、本发明所述方法制成的药物质量更稳定，可控性好，能有效保证产品的质量。

申请人进行了下列实验，可证明本发明具有有效的效果。

实验例1:工艺研究

1发酵工艺温度、湿度的确定

1.1仪器与试药

仪器：LC-2010CHT型高效液相色谱仪(UV-VIS检测器，LCSolution色谱工作站，日本岛津)；METTLER AE240型电子分析天平(瑞士梅特勒)；KUDDOS型超声波清洗仪(上海商信化玻仪器有限公司)；HH-S型恒温水浴锅(江苏国胜实验仪器厂)；LRH-150S型恒温恒湿培养箱(广东医疗器械厂)。

试药：乌头碱(批号110720-200410)、新乌头碱(批号0799-9403)、次乌头碱(批号11079-200805)对照品均购自中国食品药品检定研究院，乙腈(美国天地)、四氢呋喃色谱纯(天津市科密欧化学试剂有限公司)，乙酸铵(西陇化工股份有限公司)，异丙醇色谱纯(天津市科密欧化学试剂有限公司)水为娃哈哈纯净水，其余试剂均为分析纯。

1.2正交试验优选发酵温度和湿度

1.2.1色谱条件

nertsil ODS-SP色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)，流动相：以乙腈：四氢呋喃＝25:15为A；以乙酸—乙酸铵溶液(先配制0.1mol·L^-1的乙酸铵溶液，再以每1000mL0.1mol·L^-1乙酸铵溶液中加入0.5mL冰醋酸的比例配制而成)为B，进行梯度洗脱，洗脱程序为：0～22min，20％～23％A、80％～77％B；22～40min，23％～25％A、77％～75％B；流速1.0mL·min^-1，柱温30℃，检测波长235nm；理论塔板数按次乌头碱峰计算不低于3000；

1.2.2对照品溶液的制备

取乌头碱、新乌头碱、次乌头碱对照品适量，精密称定，加异丙醇-三氯甲烷(1:1)混合液制成每1mL含乌头碱0.129mg，含新乌头碱0.161mg，含次乌头碱0.140mg的混合对照品溶液。

1.2.3供试品溶液的制备

取化风丹药母约2.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入氨试液1.5mL，精密加入异丙醇-乙酸乙酯(1:1)混合溶液25mL，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，异丙醇-乙酸乙酯(1:1)混合溶液补足减失重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液12.5mL，50摄氏度水浴挥干，残渣精密加入异丙醇-三氯甲烷(1:1)混合液2mL溶解，滤过，取续滤液，即得。

1.2.4自然发酵条件下样品的含量测定

取3批药物按药母处方量称取白附子、生半夏、生天南星、生川乌、郁金、神曲加入牛胆汁混匀，按药厂发酵条件置于室内，自然发酵，每周取样按上述药母含测方法进行测定。3批含量结果平均值结果见表1。

表1不同发酵时间药母中乌头碱、新乌头碱及次乌头碱含量测定

1.2.5正交试验

1.2.5.1正交试验设计

本发明为明确不同因素对发酵降低毒性影响程度的大小，优选最佳发酵工艺，以药厂炮制人员的经验结合中药炮制学辞典中发酵条件，选择发酵温度、发酵湿度、胆汁pH值为考察因素，按药母处方量称取药粉9份，按L₉(3⁴)正交试验表加入不同胆汁，拌匀，密闭，置恒温恒湿培养箱内按设定温度和湿度进行发酵，取不同发酵时间药母样品，对其中的3种双酯型生物碱的含量进行测定，以总双酯型生物碱减少率为指标，优选最佳发酵条件。考察因素及水平见表2。

表2因素水平表

1.2.5.2不同时间发酵药母双酯型生物碱的含量测定

所有药材预先粉碎过五号筛，按处方量称取共9份混匀，按正交试验表加入相应pH值的胆汁混匀，放置于按正交表设定好条件的恒温恒湿培养箱中进行发酵。每隔1周取发酵药母，按1.2.3项下供试品溶液的制备方法制备供试液，按1.2.1项下色谱条件进行含量测定。测定不同发酵时间，药母中总双酯型生物碱的含量的动态变化。结果见表3～表11。

表3正交1号不同发酵时间药母含量测定

表4正交2号不同发酵时间药母含量测定

表5正交3号不同发酵时间药母含量测定

表6正交4号不同发酵时间药母含量测定

表7正交5号不同发酵时间药母含量测定

表8正交6号不同发酵时间药母含量测定

表9正交7号不同发酵时间药母含量测定

表10正交8号不同发酵时间药母含量测定

表11正交9号不同发酵时间药母含量测定

1.2.5.3正交试验直观分析

在正交实验发酵过程中，前3周生物碱降解较快，之后生物碱含量降解逐渐趋于平缓。到第4周时，药母中总双酯型生物碱基本达到含量限度范围，选择第4周的数据进行分析，直观分析结果见表12，方差分析结果见表13。

表12L₉(3⁴)正交试验安排及结果表

表13发酵工艺正交试验方差分析

从表直观分析可以看出，各因素影响发酵的顺序为C>B>A>D。表方差分析结果表明A、B、C、D因素对发酵降低川乌中双酯型生物碱没有显著差异。结合实际生产，最佳发酵工艺确定为A₃B₁C₂，即温度为35℃，湿度为60％，胆汁pH值为6.9。

1.2.5.4工艺验证

称取3批药母粉，按处方比例加入正交试验优选出的最佳pH值的胆汁混匀。将3批样品置于温度35℃、湿度60％的条件下发酵。于刚开始发酵时和发酵4周后取样，按上述供试液制备方法制备供试液，测定药母中3种双酯型生物碱的总减少率，结果3批药母总双酯型生物碱的平均减少率为75.80％，RSD为2.78％。结果见表14。

表14药母发酵工艺验证结果

本发明采用正交试验优选出发酵的温度和湿度，确定发酵条件后，本发明还对快速发酵用牛胆汁进行深入的研究。

2发酵用牛胆汁优选

2.1胆汁pH值的测定

用精密酸度计测定36批胆汁的pH值。结果见表16。

2.2胆汁中固形物的测定

精密吸取25mL胆汁，置于已干燥至恒重的蒸发皿中，于105℃干燥至恒重，计算胆汁中的固形物。结果见表16。

2.3胆汁密度的测定

测定36批胆汁的密度。结果见表16。

2.4胆汁中总胆酸的测定

精密吸取胆汁0.5mL置蒸发皿中，于80℃水浴挥干，残渣用60％冰醋酸溶解，转移至25mL容量瓶中，用60％冰醋酸稀释至刻度，摇匀。从中精密吸取0.5mL别置25mL量瓶中，加入水∶浓硫酸(1∶1)混合液至刻度，置75℃水浴中加热10min，迅速移至冰浴中放置2min，取出，于紫外分光光度计上388nm处测定。结果见表16。

2.5发酵药母的含量测定

按药母处方量称取药粉，混合均匀，分别加入已经测定过pH值、固形物、密度和胆酸的胆汁，置于正交试验优选出的最佳温度35℃，湿度60％条件下发酵。测定刚刚发酵及发酵至第4周生物碱的含量。

2.6结果与分析

(1)刚刚开始发酵生物碱含量取按药母处方混合好的药母3份，按供试品溶液制备方法制备供试液，测定其中3种双酯型生物碱的总含量，计算出平均值作为刚发酵时药母中总生物碱的含量，结果见表15。

表15刚开始发酵时药母中3种双酯型生物碱的含量

(2)发酵至第四周生物碱含量胆汁pH值、固形物、密度、胆酸和药母指标性成分双酯型生物碱测定结果见表16。

表16胆汁及药母主要指标测定结果

3.1胆汁及药母主要指标分析

表16结果表明，各批胆汁及药母中各指标存在着较大的差异，其中药母指标乌头碱(0～0.0050mg/g)、新乌头碱(0～0.0243mg/g)、次乌头碱(0.0115～0.0665mg/g)、总生物碱(0.0115～0.0908mg/g)及胆汁中固形物(0.0377～0.1941g)、胆酸(9.9401～37.2364mg/mL)差异较大，变异系数分别为280.00％、78.05％、29.02％、34.13％、48.83％、30.77％。胆汁密度(0.998～1.100g/mL)和胆汁pH值(6.27～7.29)差异较小，属于较稳定的指标，变异系数仅为2.14％、4.55％。胆酸、胆汁固形物各批次间存在较大差异，可为药母快速发酵所用胆汁的筛选提供丰富的材料。结果见表17。

表17胆汁及药母主要指标的变化范围

3.2胆汁及药母主要指标间的相关性分析

表16结果表明，胆汁各指标，药母各指标及胆汁指标与药母指标间存在显著相关性。胆汁pH值与密度、胆酸及密度与胆酸间存在极显著(P<0.01)正相关。胆酸与次乌头碱、乌头碱存在显著(P<0.05)负相关。新乌头碱与次乌头碱、乌头碱及次乌头碱与总生物碱间存在极显著(P<0.01)正相关。乌头碱与总生物碱间存在显著(P<0.05)相关性。结果见表18。

表18胆汁及药母主要指标的相关性分析

注：¹⁾在0.05水平(双侧)上显著相关；²⁾在0.01水平(双侧)上显著相关

结果表明在收集到的36份样品中胆汁中胆酸的含量越高，发酵过程中次乌头碱、乌头碱含量减少越快。胆汁的其他指标与双酯型生物碱含量无显著相关性。

3.4胆汁及药母指标聚类分析

利用DPS7.0软件，根据8个指标在36份胆汁和药母的不同表现，以欧氏距离为聚类距离，聚类分析采用离差平方和法，在聚类距离处将供试材料聚为3大类群(图3)，其又有不同的亚类(在此对亚类不作细分)。各类群的平均值和变幅见表19。

第一类群包含14份材料，主要特征是胆汁pH平均值为6.74，变幅6.29～7.14；胆汁密度平均值为1.010，变幅0.998～1.018；胆汁固形物平均值为0.0607，变幅0.0376～0.0792；胆酸平均值为16.9263，变幅9.9401～20.0351。新乌头碱平均值为0.0060，变幅0.0000～0.0167；次乌头碱平均值为0.0424，变幅0.0333～0.0614；乌头碱平均值为0.009，变幅0.0000～0.0048；总生物碱平均值为0.0494，变幅0.0333～0.0825。

第二类群包含8份材料，主要特征是胆汁pH平均值为6.84，变幅6.59～7.23；胆汁密度平均值为1.015，变幅1.011～1.019；胆汁固形物平均值为0.0697，变幅0.0536～0.0813；胆酸平均值为23.7319，变幅22.3944～26.0997。新乌头碱平均值为0.0120，变幅0.0048～0.0243；次乌头碱平均值为0.0455，变幅0.0248～0.0665；乌头碱平均值为0.0006，变幅0.0000～0.005；总生物碱平均值为0.0581，变幅0.0296～0.0908。

第三类群包含14份材料，主要特征是胆汁pH平均值为6.86，变幅6.27～7.29；胆汁密度平均值为1.029，变幅1.003～1.100；胆汁固形物平均值为0.1086，变幅0.0517～0.1941；胆酸平均值为32.6415，变幅28.4798～37.2364。新乌头碱平均值为0.0082，变幅0.0000～0.0190；次乌头碱平均值为0.0388，变幅0.0115～0.0592；乌头碱平均值为0.0000，变幅0.0000～0.0000；总生物碱平均值为0.0470，变幅0.0115～0.0710。结果见图1，表19。

表19胆汁及药母指标各类群的特征表

实验例2：对比实验研究

1.原工艺药母中新乌头碱、次乌头碱与乌头碱的检测结果：

1.1原工艺药母：由遵义廖元和堂药业有限公司提供。

其制备方法为：白附子、生天南星、生川乌、生半夏、郁金分别粉碎成末，用牛胆汁将上述5味药搅拌均匀，装入陶瓷缸内，再加入神曲密封常温自然发酵30天，将药物上下翻转均匀，再发酵30-40天，取出，制成鹅蛋形状大小的圆球，放置于风干架上，经30-40天的阴干，待干燥成型后，放置于能通风透气的网袋中悬挂于风干架上，继续风干90-120天，待药种剂圆球呈现有多个蜂窝状小孔时，将圆球药种剂收取粉碎过筛,即得。

1.2检测方法：用高效液相色谱法进行检测，同实验例1中1.2.1、1.2.2、1.2.3。

1.2.3结果见表20、表21。

表20药母含测结果

表21药母含测分析结果

2.本发明工艺药母中新乌头碱、次乌头碱与乌头碱的检测结果：

2.1本发明工艺药母：按照实施例1的方法进行制备

2.2检测方法：用高效液相色谱法进行检测，同实验例1中1.2.1、1.2.2、1.2.3。

2.2.3结果见见表22、表23。

表22药母含测结果

表23药母含测分析结果

由表20-23可知，遵义廖元和堂药业有限公司提供的样品检测结果偏差较大，变异系数也较大。而本发明所述方法制备的药母检测结果接近，变异系数较小。且新乌头碱、次乌头碱与乌头碱的含量更少，说明本发明所述工艺制备的药母毒性小，质量稳定性好，可控性高。

实验例3：药效学研究

1.实验材料

1.1实验动物：昆明种品系小鼠(20±2g)雄性、购自重庆市实验动物中心。

1.2实验药物

1.2.1本发明化风丹：按照本发明实施例1所述方法进行制备药母，再按照下述方法制成化风丹。

处方：药母182g、紫苏叶162.9g、僵蚕72.8g、全蝎36.7g、天南星(制)36.7g、苍术36.7g、雄黄26.7g、硼砂72.5g、巴豆霜12.5g、麝香2.5g、冰片36.7g、天麻72.8g、荆芥18.3g、檀香3.3g、朱砂24.2g。

制法：以上十五味，除药母、朱砂和麝香外，其余紫苏叶等十二味，粉碎成细粉，与药母、糯米粉混匀，用水泛丸；朱砂水飞与麝香混合快速研匀，并均匀的泛于药丸表面，待其附着后，加入虫蜡(川蜡)与药丸混合，抛光，烘干，即得。

1.2.2原工艺化风丹：市售，遵义廖元和堂药业有限公司生产。

2.实验方法

2.1动物分组及给药

采用成组实验设计法，40只昆明小鼠按体重差异，随机分为空白组、模型组、本发明化风丹组、原工艺化风丹组，每组10只。采用D-半乳糖注射法建立衰老模型。空白组不给予任何药物，与模型组同时每天颈背皮下注射生理盐水0.5mL/20g，6周后给予生理盐水；模型组于每天颈背皮下注射5％D-半乳糖0.5mL/20g；6周后给予生理盐水。其余均于实验前6周开始每天颈背皮下注射5％D-半乳糖0.5mL/20g，6周后，本发明化风丹组每天灌胃2mg/kg本发明化风丹，原工艺化风丹组每天灌胃2mg/kg原工艺化风丹。

2.2实验方法

2.2.1小鼠的被动回避能力测试：避暗箱是由大小相同的明暗两室组成，明室为监测室，暗室为通电室，其体积为18cm*25cm*20cm，两室之间有一直径为5cm的通道。明室上方悬挂1个60W的白炽灯。暗室底部由间隔lcm的铜丝组成，通36V电压，实验开始后，首先关闭电击电源，将小鼠背朝通道放入监测箱，任其自由活动3min，使其熟悉环境。随后，进行记忆获得训练，打开电击开关将小鼠背对洞口，小鼠因嗜暗习性进入暗室，受到电击后，立即逃离暗室。24h后，再次进行测试，将小鼠重新放入监测室，小鼠第1次进入暗室的时间为潜伏期，小鼠进入的次数为错误次数。

2.2.2小鼠跳台实验：将动物放置反应箱中适应3min，然后通上36V交流电，动物受到刺激后，反应是立即跳到平台上，多数可能再次或多次跳到通电的铜栅上，受到电击后，又快速跳回平台上，如此训练5min。24h后，重新测试，为记忆保持试验，第1次跳下平台的时间记为潜伏期，5min内跳下的次数为错误次数。

2.3实验结果与结论

2.3.1小鼠在给予受试药物后，各给药组的被动回避错误次数与模型组比较均有统计学差异(P<0.05或P<0.01)，本发明化风丹组与原工艺化风丹组比较有显著性差异(P<0.05)。结果见表24

表24各组小鼠被动回避能力比较

注：与空白组比较，△P＜0.05，△△P＜0.01；

与模型组比较，#P＜0.05，##P＜0.01；

与原工艺化风丹组比较，*P＜0.05。

以上实验研究结果表明，本发明化风丹组与原工艺化风丹组均有降低衰老模型小鼠的被动回避错误次数的作用；其中本发明化风丹组优于原工艺制剂组(P＜0.05)。

2.3.2小鼠在给予受试药物后，各给药组的跳台错误次数与模型组比较均有统计学差异(P<0.05或P<0.01)，本发明化风丹组与原工艺化风丹组比较有显著性差异(P<0.05)。结果见表25。

表25各组小鼠跳台能力比较

注：与空白组比较，△P＜0.05，△△P＜0.01；

与模型组比较，#P＜0.05，##P＜0.01；

与原工艺化风丹组比较，*P＜0.05。

以上实验研究结果表明，本发明化风丹组与原工艺化风丹组均有降低衰老模型小鼠的跳台错误次数的作用；其中本发明化风丹组优于原工艺化风丹组(P＜0.05)。

附图说明

图1为36份胆汁及药母主要指标聚类图

具体实施方式：

实施例1：

组方：牛胆水126.7g、白附子28.2g、生半夏28.2g、生南星28.2g、生川乌28.2g、郁金14.1g、神曲0.14g

工艺：取处方中白附子、生半夏、生南星、生川乌、郁金、神曲粉碎成细粉；加入牛胆汁混合均匀，置于密闭容器中，在温度35±3℃，湿度为55～65％的条件下发酵30-35天，至药母中所含乌头碱、新乌头碱、次乌头碱总含量在0.0777～0.1147mg/g的范围内时，取出，制成鹅蛋形状大小的圆球，放置于风干架上，经30-40天的常温下阴干，待干燥成型后，放置于能通风透气的网袋中悬挂于风干架上，继续风干90-120天，待药种剂圆球呈现有多个蜂窝状小孔时，将圆球药种剂收取粉碎过筛,即得；所述牛胆汁应符合以下要求：pH＝6.15～7.50；密度0.900～1.200；固形物：0.0300～0.2000g；胆酸含量：28.000～45.000mg/mL。

Claims (10)

1.一种化风丹药母的发酵制备方法，其特征在于：按照重量组份计算，它由牛胆汁100-200份、白附子20-40份、生半夏20-40份、生天南星20-40份、生川乌20-40份、郁金12-15份、神曲0.1-0.5份按照下述方法制备而成：取处方中白附子、生半夏、生天南星、生川乌、郁金、神曲粉碎成细粉；加入牛胆汁混合均匀，置于密闭容器中，在温度20～40℃，湿度50～80％的条件下发酵30-35天，取出，干燥，即得；所述牛胆汁应符合以下要求：pH＝6.0～8.0；密度0.800～1.300；固形物：0.0200～0.2500g；胆酸含量：8.000～45.000mg/mL。

2.如权利要求1所述化风丹药母的发酵制备方法，其特征在于：按照重量组份计算，它由牛胆汁126.7份、白附子28.2份、生半夏28.2份、生天南星28.2份、生川乌28.2份、郁金14.1份、神曲0.14份制备而成。

3.如权利要求1所述化风丹药母的发酵制备方法，其特征在于：所述发酵条件为：温度35±5℃，湿度50～80％。

4.如权利要求3所述化风丹药母的发酵制备方法，其特征在于：所述发酵条件为：温度35±3℃，湿度55～65％。

5.如权利要求1所述化风丹药母的发酵制备方法，其特征在于：所述牛胆汁的pH＝6.15～7.50。

6.如权利要求1所述化风丹药母的发酵制备方法，其特征在于：所述牛胆汁的密度为：0.900～1.200。

7.如权利要求1所述化风丹药母的发酵制备方法，其特征在于：所述牛胆汁的固形物为：0.0300～0.2000g。

8.如权利要求1所述化风丹药母的发酵制备方法，其特征在于：所述牛胆汁的胆酸含量为：28.000～45.000mg/mL。

9.如权利要求1-8中任一项所述化风丹药母的发酵制备方法，其特征在于：取处方中白附子、生半夏、生南星、生川乌、郁金、神曲粉碎成细粉；加入牛胆汁混合均匀，置于密闭容器中，在温度35±3℃，湿度为55～65％的条件下发酵30-35天，至药母中所含乌头碱、新乌头碱、次乌头碱总含量在0.0777～0.1147mg/g的范围内时，取出，常温下阴干，即得；所述牛胆汁应符合以下要求：pH＝6.15～7.50；密度0.900～1.200；固形物：0.0300～0.2000g；胆酸含量：28.000～45.000mg/mL。

10.如权利要求9中所述化风丹药母的发酵制备方法，其特征在于：所述常温下阴干的方法为：先制成鹅蛋形状大小的圆球，放置于风干架上，经30-40天的常温下阴干，待干燥成型后，放置于能通风透气的网袋中悬挂于风干架上，继续风干90-120天，待药种剂圆球呈现有多个蜂窝状小孔时，将圆球药种剂收取粉碎过筛,即得