CN103948595B

CN103948595B - 酰亚胺位或4-位取代的1，8-萘酰亚胺衍生物作为parp抑制剂的用途

Info

Publication number: CN103948595B
Application number: CN201410072552.3A
Authority: CN
Inventors: 解丽娟; 高铭
Original assignee: Huaqiao University
Current assignee: Huaqiao University
Priority date: 2014-02-28
Filing date: 2014-02-28
Publication date: 2017-01-04
Anticipated expiration: 2034-02-28
Also published as: CN103948595A

Abstract

本发明属于医药化学领域，公开了酰亚胺位或4‑位取代的1，8‑萘酰亚胺衍生物作为PARP抑制剂的用途，具体涉及通式（I）所示的1，8‑萘酰亚胺衍生物，通式（I）所示化合物药理或生理上可接受的盐，以及包含通式（I）所示化合物的药物组合物作为PARP抑制剂的用途。其中R₁和R₂具有所定义的含义。

Description

酰亚胺位或4-位取代的1，8-萘酰亚胺衍生物作为PARP抑制剂的用途

技术领域

本发明属于医药化学领域，具体涉及酰亚胺位或4-位取代后得到的1，8-萘酰亚胺衍生物作为多聚ADP-核糖聚合酶(PARP)抑制剂的用途。

背景技术

多聚ADP-核糖聚合酶(PARP)是一类重要的核蛋白，参与机体多种生理活动的调节，如DNA修复，基因转入，细胞周期进行，细胞凋亡、坏死，染色体稳定等(J.Med.Chem.2010,53,4561–4584；Bioorg.Med.Chem.2012,20,4635–4645)。

前临床及临床研究表明：PARP抑制剂可以提高放疗以及某些化疗药物如烷化剂、拓扑异构酶抑制剂和铂类抗肿瘤药物的疗效(Expert.Opin.Investig.Drugs.2009,18(1):31-43；Drug.Resist.Update.2009,12:153-156；J.Med.Chem.2009,52,6803–6813；J.Med.Chem.2009,52,868–877)；PARP抑制剂有望作为某些同源重组缺陷性癌症如BRCA相关性乳腺癌、卵巢癌及三阴性乳腺癌的单独治疗药物(Nature.2005,434:917-921；Nature.2005,434:913-917；Future.Oncol.2010,6(4):485-486；J.Med.Chem.2009,52,7170–7185；J.Med.Chem.2010,53,4561–4584)；抑制PARP-1和降低其基因表达均可以产生神经保护作用，达到治疗神经退行性疾病、大脑缺血性损伤和休克等疾病的目的；此外，PARP抑制剂在许多炎性疾病如心肌炎、结肠炎、动脉粥样硬化、糖尿病并发症中可以发挥类似组织保护的作用，对这些疾病有一定的治疗作用(Am.J.Pathol.2008,173(1):2-13；J.Med.Chem.2010,53,4561–4584)。因此，开发PARP抑制剂对于多种疾病的临床治疗具有重要的意义。

发明内容

本发明的目的是开发合成路线简单，理化性质优越、新的、高效的萘酰亚胺类PARP抑制剂。

本发明提供了通式(I)所示的1，8-萘酰亚胺结构衍生物，通式(I)所示化合物药理或生理上可接受的盐及包含通式(I)所示化合物的药物组合物。

a、式(I)中，R₂＝H时，R₁选自以下取代基团：(1)-(CH₂)_n-X，式中：n＝1～6，X为-OH，-NH₂，-SH，卤素或羧基；(2)式中：n＝1～6，R₃和R₄分别选自C₁～C₆的烷基中一种或R₃+R₄为至少含一个N的5～6元杂环。

b、式(I)中，当R₁＝H时，R₂选自以下取代基团：(1)—X，式中：X为卤素，氨基酸，-NO₂，-OH，-NH₂，-SH，-OR其中R为C₁～C₆直链或支链的烷基；(2)-X-(CH₂)_n-Y，式中：X为NH或O时，n＝0，Y＝COR其中R为C₁～C₆直链或支链的烷基；X为NH，O或S时n＝1～6，Y为-NO₂，-OH，-NH₂，-SH，卤素，氨基酸或羧基；(3)式中：X为NH，O或S，n＝1～6，R₃和R₄分别选自C₁～C₆的烷基中一种或R₃+R₄为至少含一个N的5～6元杂环。

本发明所指的“药理或生理上可接受的盐”意指那些保留生物学有效性和母体化合物性质的盐。这种盐包括与无机酸或有机酸形成的酸加成盐，所述无机酸例如盐酸、氢溴酸、硝酸、磷酸、硫酸、高氯酸等，所述有机酸例如乙酸、抗坏血酸、三氟乙酸、丙酸、羟乙酸、(D)或(L)乳酸、(D)或(L)苹果酸、草酸、富马酸、马来酸、甲磺酸、乙磺酸、苯甲酸、对甲苯磺酸、水杨酸、肉桂酸、扁桃酸、酒石酸、柠檬酸、琥珀酸、羟乙磺酸和丙二酸。

本发明所指的通式(I)所示化合物的药物组合物，包含通式(I)所示化合物和至少一种药学上可接受的载体、稀释剂、赋型剂以及包含一种或多种化疗药物的药物组合物。

本发明提供了检测通式(I)所示化合物、通式(I)所示化合物药理或生理上可接受的盐及包含通式(I)所示化合物的药物组合物具有PARP抑制活性的方法。

本发明提供了通式(I)所示化合物、通式(I)所示化合物药理或生理上可接受的盐及包含通式(I)所示化合物的药物组合物作为PARP抑制剂的用途。

本发明与现有技术相比，具有如下优势：

1.本发明所提供的通式(I)所示化合物结构中含有易于通过氢键与PARP蛋白结合的取代基团，一方面可以提高所述化合物与PARP蛋白的结合能力，从而增强对PARP蛋白的抑制效果；另一方面也可以有效提高所述化合物的水溶性，从而使其更适用于制备药物。

2.本发明所提供的通式(I)所示化合物合成路线简单，采用文献中公开的一般合成路线和实施方案，通过有机化学标准技术可以很容易地制备。

具体实施方式

下面通过实施例具体说明本发明的内容。在本发明中，以下所述的实例是为了更好地阐述本发明，并不是用来限制本发明的范围。

当R₂＝H时，R₁为取代基团时，目标化合物的合成路线如式1所示：

式1酰亚胺N-位取代的目标化合物合成路线

反应试剂和条件：1,8-萘酐，反应溶剂，含有取代基的原料，加热回流2h～24h。

实施例1

N-丁基-1,8-萘二甲酰亚胺(2a)

在圆底烧中瓶加入1,8-萘酐(198mg，mmol)、正丁胺(104μl，1.4mmol)和乙醇(5ml)，80℃加热回流3.5h。将反应液浓缩，得到白色针状晶体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)8.47(s,1H),8.45(s,1H),8.43(d,J＝3.9Hz,1H),8.42(s,1H),7.89–7.81(m,2H),4.12–4.00(m,2H),1.69–1.56(m,2H),1.44–1.32(m,2H),0.94(t,J＝7.3Hz,3H)。

实施例2

N-(N-二甲基氨基乙基)-1,8-萘酰亚胺(2b)

1，8-萘酐(198mg，1mmol)、N，N二甲基乙二胺(115μl，1.3mmol)和乙醇(5ml)，80℃加热回流2h将反应液浓缩干燥，得到淡黄色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)8.48–8.45(m,1H),8.44(t,J＝1.7Hz,1H),8.42(dd,J＝2.9,0.9Hz,1H),8.42–8.40(m,1H),7.87–7.81(m,2H),4.18–4.08(m,2H),3.30(s,2H),2.19(s,6H)。

实施例3

N-羟基-1,8-萘二甲酰亚胺(2c)

1，8-萘酐(198mg，1mmol)、盐酸羟胺(104mg，1.5mmol)、碳酸氢钠(126mg，1.5mmol)和乙醇(5ml)，80℃加热回流2h，冷却反应液，抽滤、洗涤、干燥，得到土黄色粉末固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)10.72(s,1H),8.58–8.37(m,4H),7.87(t,J＝7.7Hz,2H)。

实施例4

N-氨基-1,8-萘酰亚胺(2d)

1，8-萘酐(198mg，1mmol)、水合肼(60mg，1.2mmol)、乙醇(1ml)混溶，加入DMF(3ml)，150℃加热回流2h，冷却反应液，抽滤、洗涤、干燥，得到金黄色针状晶体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)8.49(d,J＝1.1Hz,1H),8.49–8.46(m,1H),8.45(t,J＝3.2Hz,1H),8.43(t,J＝2.1Hz,1H),7.91–7.83(m,2H),5.79(s,2H)。

实施例5

N-羟乙基-1,8-萘酰亚胺(2e)

1，8-萘酐(198mg，1mmol)、乙醇胺(66ml，1.1mmol)和乙醇(5ml)，85℃加热回流18h，冷却反应液，抽滤、洗涤、干燥，得到淡黄色晶体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)8.54–8.29(m,4H),7.81(dd,J＝14.5,7.1Hz,2H),4.77(t,J＝5.9Hz,1H),4.12(t,J＝6.4Hz,2H),3.60(q,J＝6.3Hz,2H)。

实施例6

N-氨基丁基-1，8-萘酰亚胺(2f)

1，8-萘酐(198mg，1mmol)、1，4-丁二胺(1020μl，10mmol)和乙醇(5ml)85℃加热回流24h。趁热抽滤，将滤液倒入冰水混合物种，搅拌，放入冰箱中过夜。抽滤、洗涤、干燥，得到白色晶体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)8.40(t,J＝3.8Hz,1H),8.38(d,J＝1.0Hz,1H),8.36(d,J＝1.0Hz,1H),8.34(d,J＝1.0Hz,1H),7.85–7.75(m,2H),4.08–3.91(m,2H),2.60–2.53(m,2H),2.45–2.31(m,2H),1.68–1.55(m,2H),1.38(dd,J＝13.0,5.9Hz,2H)。

实施例7

1，3-二氧代-1H-苯并异喹啉-2(3H)-乙酸(2g)

1，8-萘酐(198mg，1mmol)、甘氨酸(90mg1.2mmol)加入DMF(5ml)中，85℃反应24h。反应完毕冷却，加入1M的盐酸(2ml)，抽滤、洗涤、干燥，得到淡黄色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)13.07(s,1H),8.52(t,J＝2.2Hz,1H),8.51–8.48(m,2H),8.48(d,J＝1.1Hz,1H),7.89(ddd,J＝8.2,7.5,4.1Hz,2H),4.74(s,2H)。

当R₁＝H时，R₂为取代基团时，目标化合物的合成路线如式2所示：

式24-位取代的目标化合物合成路线

反应试剂和反应条件：A路线.(a)1,8-萘酐，氨水，室温反应10h；(b)1.4-溴-1,8-萘酐，非质子溶剂，含取代基的各种原料，亚铜催化剂，碳酸钾，95℃，回流6～24h；化合物3d和3e，以4-溴-1,8-萘酐、甲醇钠为原料，氢碘酸脱甲基；B路线.(a)4-硝基苊，重铬酸钾，冰醋酸，碳酸钠，盐酸，(b)氨水，室温反应8h，(c)氯化亚锡，浓盐酸，乙醇，加热回流4h。

实施例8

4-溴-1，8-萘酰亚胺(3a)

4-溴-1，8-萘酐(2.77mg，1mmol)溶于氨水(30ml)，室温下反应8h，冷却反应液，抽滤、洗涤、干燥，收率77％，土黄色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)11.69(s,1H),8.53–8.46(m,2H),8.25(d,J＝7.8Hz,1H),8.17(d,J＝7.8Hz,1H),7.96(dd,J＝8.3,7.5Hz,1H)。

实施例9

4-硝基-1,8-萘酰亚胺(3b)

5-硝基苊(186mg1mmol)，重铬酸钾(0.823mg2.8mmol)加入冰醋酸(5ml)中，110℃下回流5h，冷却反应液，倒入冰水混合物，搅拌、抽滤。将滤饼与50％碳酸钠溶液混合煮沸，趁热抽滤，滤液冷却后用盐酸调至pH＝2，静置，抽滤。将滤饼在冰醋酸中重结晶得到淡黄色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)12.03(s,1H),8.66(d,J＝8.2Hz,1H),8.60–8.47(m,3H),8.06(dd,J＝8.4,7.6Hz,1H)。

实施例10

4-甲氧基-1,8-萘酰亚胺(3c)

4-溴-1，8-萘酰亚胺(276mg1mmol)、甲醇钠(216mg4mmol)加入DMSO(10ml)中，室温反应8h，倒入冰水混合物中，搅拌、抽滤、洗涤、干燥，得到乳黄色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)11.55(s,1H),8.52(d,J＝8.2Hz,1H),8.42(dd,J＝14.8,7.7Hz,2H),7.80(t,J＝7.8Hz,1H),7.31(d,J＝8.3Hz,1H),4.13(s,3H)。

实施例11

4-羟基-1,8-萘酰亚胺(3d)

4-甲氧基-1,8-萘酰亚胺(227mg1mmol)、48％氢碘酸(12ml)、苯酚(5ml)和醋酸(10ml)，140℃加热回流48h。反应液浓缩、柱层析，以二氯甲烷和甲醇为展开剂，得到淡黄色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)11.83(s,1H),11.43(s,1H),8.71–8.23(m,3H),7.75(t,J＝7.5Hz,1H),7.14(d,J＝8.0Hz,1H)。

实施例12

1H-苯并异喹啉-1,3(2H)-二酮，6-(丁基氨基)(3e)

4-溴-1，8-萘酰亚胺(276mg，1mmol)、丁胺(400μl，4mmol)，二异丙胺(55.2mg，10％mmol)、碘化亚铜(27.6mg，10％mmol)、碳酸钾(69mg，0.5mmol)，加入DMSO(5ml)中，85℃反应13h。浓缩反应液，以二氯甲烷和甲醇为展开剂进行柱层析，得到橘黄色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)11.21(s,1H),8.69(d,J＝8.4Hz,1H),8.37(d,J＝7.2Hz,1H),8.19(t,J＝7.4Hz,1H),7.75–7.60(m,2H),6.74(d,J＝8.6Hz,1H),3.36(dd,J＝12.8,6.8Hz,2H),1.74–1.63(m,2H),1.42(dq,J＝14.6,7.3Hz,2H),0.94(t,J＝7.4Hz,3H)。

实施例13

1H-苯并异喹啉-1,3(2H)-二酮，6-[[2-(二甲基氨基)乙基]氨基]-2-甲基(3f)

4-溴-1，8-萘酰亚胺(276mg，1mmol)、N,N二甲基乙二胺(352mg，4mmol)、碳酸钾(69mg，0.5mmol)、碘化亚铜(27.6mg，10％mmol)，加入乙二醇单甲醚(5ml)中，85℃反应11h。反应液浓缩，以二氯甲烷、甲醇为展开剂进行柱层析，得到橙黄色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)11.24(s,1H),8.64(d,J＝8.2Hz,1H),8.38(d,J＝7.1Hz,1H),8.21(d,J＝8.5Hz,1H),7.62(dt,J＝10.6,6.6Hz,2H),6.78(d,J＝8.6Hz,1H),3.48(dd,J＝12.3,6.4Hz,2H),2.62(t,J＝6.7Hz,2H),2.25(s,6H)。

实施例14

1H-苯并异喹啉-1,3(2H)-二酮，6–[(2-氨基丁基)氨基](3g)

4-溴-1，8-萘酰亚胺(276mg，1mmol)、1，4-丁二胺(1020μl，10mmol)、氧化亚铜(27.6mg，10％mmol)、碳酸钾(69mg，0.5mmol)加入DMSO(7ml)中，90℃反应10h。浓缩反应液，以二氯甲烷、甲醇为展开剂进行柱层析，得到橙黄色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)8.69(d,J＝8.2Hz,1H),8.36(t,J＝8.6Hz,1H),8.20(d,J＝8.5Hz,1H),7.84(t,J＝61.5Hz,1H),7.67–7.61(m,1H),6.75(d,J＝8.6Hz,1H),2.61(t,J＝6.8Hz,2H),1.78–1.66(m,2H),1.54–1.38(m,2H),1.35–1.03(m,4H)。

实施例15

1H-苯并异喹啉-1,3(2H)-二酮，6-[(2-羟乙基)氨基](3h)

4-溴-1，8-萘酰亚胺(276mg，1mmol)、乙醇胺(400μl，4mmol)、碳酸钾(69mg，0.5mmol)、碘化亚铜(27.6mg，10％mmol)加入DMSO(5ml)中，90℃反应6h。浓缩反应液，以二氯甲烷和甲醇为展开剂进行柱层析，得到橙黄色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)11.22(s,1H),8.68(d,J＝8.5Hz,1H),8.38(d,J＝7.3Hz,1H),8.21(d,J＝8.5Hz,1H),7.66(t,J＝7.8Hz,2H),6.80(d,J＝8.6Hz,1H),4.87(t,J＝5.1Hz,1H),3.70(dd,J＝10.6,5.3Hz,2H),3.47(q,J＝5.7Hz,2H)。

实施例16

1H-苯并异喹啉-1,3(2H)-二酮，6-[(2-羟乙基)硫代](3i)

4-溴-1,8-萘酰亚胺(276mg，1mmol)、2-巯基乙醇(364μl，5mmol)加入乙二醇单甲醚(5ml)中，加热回流4.5h。冷却反应液，抽滤、洗涤、干燥，得到黄色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)11.83(s,1H),11.43(s,1H),8.64–8.23(m,3H),7.75(t,J＝7.5Hz,1H),7.14(d,J＝8.0Hz,1H)，3.61–2.35(m,2H),2.08(s,2H)。

实施例17

1H-苯并异喹啉-1,3(2H)-二酮,6-[(2-氨基3-羧基乙基)硫基](3j)

4-溴-1,8-萘酰亚胺(276mg，1mmol)、半胱氨酸(605mg，5mmol)、碳酸钾(69mg，0.5mmol)加入乙二醇单甲醚(10ml)中，加热回流6h，冷却、抽滤、洗涤、干燥，得到淡黄色固体，¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)11.82(s,1H),8.69(s,1H),8.53(s,2H),8.25(d,J＝28.6Hz,2H),7.98(s,2H),2.08(s,2H)。

实施例18

N-(2，3-二氢-1，3-二氧代-1H-苯并〔de〕异喹啉-6-氨基)(3k)

4-胺基-1,8-萘酰亚胺(212mg，1mmol)、吡啶(2ml)、醋酸(0.5ml)和醋酸酐(4ml)混合，加热回流3h，冷却、抽滤、洗涤、干燥，得到黄褐色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)11.66(s,1H),10.38(s,1H),8.70(d,J＝8.5Hz,1H),8.54–8.35(m,2H),8.30(t,J＝9.0Hz,1H),7.90(dt,J＝15.8,7.9Hz,1H),2.27(d,J＝14.0Hz,3H)。

实施例19

本发明化合物对PARP的抑制作用

实验试剂：(1)实施例中描述的4-胺基-1，8-萘酰亚胺结构类似物；(2)PARP通用显色方法试剂盒：(TREVIGEN,ME,USA,R&D Catalog Number4677-096-K)。

测试具体步骤：

A.核糖基化反应：

(1)每孔加入50μl1×PARP buffer，再水化组蛋白，室温孵育30min。用滤纸吸净每孔内的液体。

(2)每孔加入10μl梯度稀释后的抑制剂。

(3)加入稀释的PARP-HAS酶(每孔0.5U)到含有抑制剂的孔里，室温下孵育10min。

(4)对照：①活性对照：每孔0.5U PARP-HAS酶，无抑制剂，提供100％活性参照点；②阴性对照：含有不同浓度抑制剂的孔，无PARP-HAS酶，检测背景吸光度。

(5)每孔加入25μl1×PARP Cocktail，室温下孵育60min。

B.检测

(1)用1×PBS+0.1％Triton X-100，清洗平板两次，每孔200μl，随后用1×PBS，清洗平板两次，每孔200μl，确保清洗结束后用滤纸将每孔的液体吸净。

(2)每孔加入50μl稀释的Strep-HRP，室温下孵育60min。

(3)用1×PBS+0.1％Triton X-100，清洗平板两次，每孔200μl，随后用1×PBS，每孔200μl，清洗两次，确保清洗结束后用滤纸将每孔的液体吸净。

(4)每孔加入50μl预热好的TACS-Sapphire，室温避光显色15min。

(5)每孔加入50μl0.2MHCl，终止反应，并在450nm下读取吸光度。

表1本发明部分化合物对PARP-1的抑制活性(IC₅₀值)

由表1数据可以发现所发明的化合物具有一定的对PARP-1的抑制作用，其中化合物3f和3h的抑制作用较为明显。

Claims

1.一种通式(I)所示的4-位取代的1，8-萘酰亚胺结构衍生物或其药理上可接受的盐在制备抑制PARP活性可以得到改善的疾病的治疗药物中的用途，所述抑制PARP活性可以得到改善的疾病为癌症：

式(I)中，R₁＝H，R₂选自以下取代基团：式中：X为NH，n＝2，R₃和R₄均选自CH₃。

2.一种包含权利要求1中通式(I)所述化合物或其药理上可接受的盐的药物组合物在制备抑制PARP活性可以得到改善的疾病的治疗药物中的用途，所述抑制PARP活性可以得到改善的疾病为癌症。

3.一种权利要求1中通式(I)所述化合物或其药理上可接受的盐在制备癌症的放疗和化疗药物的增敏剂中的用途。

4.一种包含权利要求1中通式(I)所述化合物或其药理上可接受的盐的药物组合物在制备癌症的放疗和化疗药物的增敏剂中的用途。