CN103936817A - 一种鱼蛋白抗氧化肽的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种鱼蛋白抗氧化肽的制备方法，包括，利用海藻酸钠絮凝鱼汁中的大分子蛋白质的步骤；将絮凝后得到的清液采用不同截断分子量的超滤膜纯化和浓缩，并测定不同分子量肽段的DPPH自由基清除率的步骤；将纯化和浓缩后得到的DPPH自由基清除率最强的肽段采用喷雾干燥，进口温度150～170℃，出口温度60～80℃的步骤。利用本发明方法制备的鱼蛋白抗氧化肽，颜色微黄，水溶性好，抗氧化活性高，能够有效清除自由基，对DPPH自由基清除率可达到67％，表现了其在抗氧化活性的优越性。
Description
技术领域
本发明涉及一种天然抗氧化肽的制备，尤其涉及以废弃物鱼汁为原料，制备高抗氧化活性的鱼蛋白天然抗氧化肽。
背景技术
鱼粉加工过程中，每生产1吨鱼粉，产生2～3吨鱼汁。鱼汁中蛋白质含量高达8％，且必须氨基酸种类齐全，营养价值很高。但是鱼汁中盐含量高，如果直接浓缩干燥，添加到鱼粉中，会造成盐含量超标，影响鱼粉品质。如果直接应用膜法脱盐，膜污染严重。所以，鱼汁一直是鱼粉业的一大难题。
现有制备蛋白氧化肽方法遇到的主要问题，一是原料比较贵，二是采用酶水解的方法，不仅工艺复杂，而且成本较高。
发明内容
本部分的目的在于概述本发明的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和发明名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本发明的范围。
鉴于上述和/或现有鱼蛋白抗氧化肽的制备方法中存在的问题，提出了本发明。
因此，本发明的目的在于解决鱼汁处理问题，同时，提供一种原料来源广，成本低，利用鱼汁下脚料制备鱼蛋白抗氧化肽的方法。
为解决上述技术问题，本发明提供了如下技术方案：一种鱼蛋白抗氧化肽的制备方法，包括，利用海藻酸钠絮凝鱼汁中的大分子蛋白质的步骤；将絮凝后得到的清液采用不同截断分子量的超滤膜纯化和浓缩，并测定不同分子量肽段的DPPH自由基清除率的步骤；将纯化和浓缩后得到的DPPH自由基清除率最强的肽段采用喷雾干燥，进口温度150～170℃，出口温度60～80℃的步骤。
作为本发明所述鱼蛋白抗氧化肽的制备方法的一种优选方案，其中：在用不同截断分子量的超滤膜纯化和浓缩时，采用截断分子量10000，5000，3000，1000规格的超滤膜进行纯化，膜压力采用1～10bar，流速0.1～1m/s并通过检测不同分子量肽段的DPPH自由基清除能力，选定最强的肽段。
作为本发明所述鱼蛋白抗氧化肽的制备方法的一种优选方案，其中：在利用海藻酸钠絮凝鱼汁中的大分子蛋白质的步骤前，将鱼汁pH调节到2.0～6.0。
作为本发明所述鱼蛋白抗氧化肽的制备方法的一种优选方案，其中：所述利用海藻酸钠絮凝鱼汁中的大分子蛋白质的步骤中，海藻酸钠添加量占鱼汁的质量百分比为0.02％～5％。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
(1)本发明使用的原料鱼汁是鱼粉生产过程中的下脚料，其蛋白质含量高达6～8％，氨基酸组成均衡，且来源广泛，价格低廉；
(2)以鱼汁为原料制备抗氧化肽，使鱼汁得到了综合利用，为利用鱼汁开发功能性食品、生物制品等具有高附加值的生物制品奠定了基础；
(3)利用本发明方法制备的鱼蛋白抗氧化肽，颜色微黄，水溶性好，抗氧化活性高，能够有效清除自由基，DPPH自由基清除率很高，可达67％，表现了其在抗氧化活性的优越性。
具体实施方式
为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合具体实施例对本发明的具体实施方式做详细的说明。
在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明，但是本发明还可以采用其他不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似推广，因此本发明不受下面公开的具体实施例的限制。
其次，此处所称的“一个实施例”或“实施例”是指可包含于本发明至少一个实现方式中的特定特征、结构或特性。在本说明书中不同地方出现的“在一个实施例中”并非均指同一个实施例，也不是单独的或选择性的与其他实施例互相排斥的实施例。
具体实施事例中DPPH自由基清除率的测定：
将肽配成1mg/ml的溶液，取2ml肽溶液加入2ml DPPH溶液作为样品组，记为A；同样，取2ml肽溶液加入2ml无水乙醇作为空白组B；同时，取2ml无水乙醇加入2ml DPPH作为对照组C。分别测定A，B，C在517nm下的吸光度。清除率计算采用以下公式：
DPPH自由基清除率＝[1-(A-B)/C]*100％
实施例1
调节鱼汁至pH3.0，加入海藻酸钠，使海藻酸钠浓度为0.16％，搅拌，使充分反应，静置30分钟，排掉底层沉淀。取上清液，采用截断分子量100000，50000，3000，1000的膜进行过滤，流速0.1m/s，压力2bar，并测定不同分子量肽段的DPPH自由基清除能力，分别为19％，25％，29％，67％。收集1000～3000分子量之间的肽段，采用喷雾干燥将浓缩鱼蛋白抗氧化肽干燥。进口温度设为170℃，出口温度70℃。
实施例2
调节鱼汁至pH4.0，加入海藻酸钠，使海藻酸钠浓度为0.05％，搅拌，使充分反应，静置30分钟，排掉底层沉淀。取上清液，采用截留分子量10000，5000，3000，1000的超滤膜进行纯化，超滤压力2bar，流速0.3m/s。测定不同肽段的DPPH自由基清除能力，分别为19％，25％，29％，67％。收集分子量在1000～3000的肽段，采用喷雾干燥将浓缩鱼蛋白抗氧化肽干燥。进口温度设为160℃，出口温度80℃。
应说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。
Claims (4)
1.一种鱼蛋白抗氧化肽的制备方法，其特征在于：包括，
利用海藻酸钠絮凝鱼汁中的大分子蛋白质的步骤；
将絮凝后得到的清液采用不同截断分子量的超滤膜纯化和浓缩，并测定不同分子量肽段的DPPH自由基清除率的步骤；
将纯化和浓缩后得到的DPPH自由基清除率最强的肽段采用喷雾干燥，进口温度150～170℃，出口温度60～80℃的步骤。
2.根据权利要求1所述的鱼蛋白抗氧化肽的制备方法，其特征在于：在用不同截断分子量的超滤膜纯化和浓缩时，采用截断分子量10000，5000，3000，1000规格的超滤膜进行纯化，膜压力采用1～10bar，流速0.1～1m/s并通过检测不同分子量肽段的DPPH自由基清除能力，选定最强的肽段。
3.根据权利要求1所述的鱼蛋白抗氧化肽的制备方法，其特征在于：在利用海藻酸钠絮凝鱼汁中的大分子蛋白质的步骤前，将鱼汁pH调节到2.0～6.0。
4.根据权利要求1所述的鱼蛋白抗氧化肽的制备方法，其特征在于：所述利用海藻酸钠絮凝鱼汁中的大分子蛋白质的步骤中，海藻酸钠添加量占鱼汁的质量百分比为0.02％～5％。
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