CN103933067A - 一种治疗肺癌的纳米银抗癌组合物及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种治疗肺癌的纳米银抗癌组合物。该组合物含有如下浓度的成分：球形纳米银粉末12—200mg/kg；药学上可以接受的分散剂卡波姆700—800mg/kg、三乙醇胺700—800mg/kg、葡萄糖2.8—3.2g/kg、稀释剂为纯水；所述球形纳米银粉末中银的纯度≥99.99%，银颗粒粒径为1—5nm。实验结果表明，本发明的纳米银抗癌组合物能完全抑制人非小细胞肺癌细胞A549的增殖，并引起细胞全部死亡。这说明本申请的纳米银抗癌组合物能够用于治疗肺癌，更能用于制备治疗肺癌的药物。

Description

一种治疗肺癌的纳米银抗癌组合物及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及一种治疗肺癌的纳米银抗癌组合物及其制备方法和应用。
背景技术
肺癌是发病率和死亡率增长最快，对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。近50年来许多国家都报道肺癌的发病率和死亡率均明显增高，男性肺癌发病率和死亡率均占所有恶性肿瘤的第一位，女性发病率占第二位，死亡率占第二位。肺癌的病因至今尚不完全明确，大量资料表明，长期大量吸烟与肺癌的发生有非常密切的关系。已有的研究证明：长期大量吸烟者患肺癌的概率是不吸烟者的10～20倍，开始吸烟的年龄越小，患肺癌的几率越高。此外，吸烟不仅直接影响本人的身体健康，还对周围人群的健康产生不良影响，导致被动吸烟者肺癌患病率明显增加。城市居民肺癌的发病率比农村高，这可能与城市大气污染和烟尘中含有致癌物质有关。
一般来说，目前治疗肺癌的方法一般都是化疗、放疗、手术。每一种治疗方法对人体的损伤都很大，而且并不能完全根绝，还有一定程度上的复发风险。
纳米银材料是近年来应用纳米制备技术，制备的一种新的功能性材料。是将单质金属银或其他含银化合物利用物理或化学的方法制成纳米级别的金属粉末，粒径大多为100纳米以下。由于材料达到了纳米尺寸，表面积大大增加，暴露的原子键及电子增加，活性也极大的增长，所以其理化性质显现一些新的功能。而纳米银最为显著的功能是杀菌能力大幅增强。国家高能所纳米生物效应实验室的研究人员最近发现，经过适当化学修饰的一种纳米颗粒具有高效抑止肿瘤生长的效果，却不直接杀死细胞，不仅增强肿瘤小鼠的免疫能力，而且几乎无毒。这与传统抗肿瘤药物有很大不同，正是肿瘤治疗所追求的效果。令科学家们感兴趣的是，这些纳米颗粒不直接杀死细胞，它们在肿瘤细胞组织里的分布也很少，只有十万分之一。这说明纳米颗粒不是通过直接杀死细胞的方式产生抑止肿瘤的药效，可能存在未知的新的抗肿瘤生长机制，需要开展深入研究。纳米技术的引用，将有利于抗癌药物的研发。
目前，临床使用的抗肿瘤药物大多利用高毒性杀死细胞，在杀死肿瘤细胞的同时，也严重损害了正常细胞。纳米银的最新研究结果克服了这些缺点，被认为是提供了实现高效低毒治疗肿瘤梦想的一种可能的新方案。然而，该研究中采用的化学修饰后的纳米颗粒，其安全性并不高，而且这些化学修饰的纳米颗粒中起到杀灭细胞作用的到底是化学基团还是纳米颗粒本身，并没有相关的机理报道。
目前，国内纳米银粉体生产企业大多以化学方法制备，各种尺寸、大小形状不一，批量生产纯度难控制，应用于药用的人体需求的安全性高的、高纯度，且尺寸、规格、形状统一的纳米银粉体少见。国内已有企业将纳米银的抗菌技术应用到纺织和治疗女性生殖道炎症疾病上，但没有公开应用于肿瘤的情况。
发明内容
本发明旨在克服现有技术的不足，提供一种治疗肺癌的纳米银抗癌组合物及其制备方法，该纳米银抗癌组合物可用于制备治疗和预防肺癌的药物。
为了达到上述目的，本发明提供的技术方案为：
每1kg所述治疗肺癌的纳米银抗癌组合物中含有如下重量的成份：
纳米银粉末12—200 mg；
卡波姆700—800 mg；
三乙醇胺700—800 mg；
葡萄糖2.8—3.2 g；
其余为水；
所述纳米银粉末中银的纯度银纯度≥99.99%，银颗粒粒径为1—5nm，银颗粒形状为球形。本发明所述的纳米银粉末是5号纳米银粉末，购自光谷纳米科技有限公司。
制备上述纳米银抗癌组合物的方法，包括如下步骤：
（1）按权利要求1所述的浓度要求准备好纳米银粉末、卡波姆、三乙醇胺、葡萄糖和水；
（2）将卡波姆加入占水总量1/2～2/3的水中，混合，使用超声波分散器分散2～5min；
（3）将纳米银粉末及三乙醇胺加入到经步骤（2）分散处理的混合物中混合，使用超声波分散器分散2～5min；
（4）将葡萄糖和剩余的水加入到经步骤（3）分散处理的混合物中，再次分散1～3min；
（5）待经步骤（4）分散处理后的混合物冷却至2～12℃时，将混合物放入超声波雾化器中分散至雾状物，用收集装置将雾状物收集后冷凝至液体，即得纳米银抗癌组合物。
其中，步骤（2）中超声波分散器的频率为2段频率：16～24KHZ。步骤（3）中超声波分散器的频率为5段频率：40～65KHZ。步骤（4）中超声波分散器的频率为4段频率：30～40KHZ。步骤（5）中超声波雾化器的频率为15段频率：120～180 KHZ。
本发明的纳米银粉末是5号高纯度单质纳米银，且要求银颗粒为球形，银颗粒粒径为1—5nm。球形是纳米银颗粒最稳定的形状，当粒径大于5nm时，颗粒体积增大，其比表面积小、活性变小给药剂量就会相应增大;当颗粒粒径小于1nm时，其制备技术则相当困难，成本高。从安全性及效果最优化的角度来考虑，本申请要求纳米银粉末中银颗粒的粒径范围为1—5nm。本申请将该高纯度、高效能、高稳定性、低浓度、高安全性低浓度的纳米银与其适应的辅料配伍，并以特定的制备方法形成高分散、高稳定、易释放的分散-保护-释放体系。
实验结果表明，本发明的纳米银抗癌组合物能够强烈抑制人非小细胞肺癌A549增殖，并引起细胞死亡。这说明本申请的纳米银抗癌组合物能够治疗肺癌，可以用于制备治疗肺癌的药物。
附图说明
图1为纳米银5#对A549细胞增殖的影响；
图2为纳米银1#对A549细胞增殖的影响。
具体实施方式
实施例中所用纳米银粉末为纳米银1号（0ppm），批号2013.05.21—11，纳米银5号（250PPm），批号：2013.05.21-15，由光谷纳米科技有限公司提供。
实施例1
1kg所述治疗肺癌的纳米银抗癌组合物中含有如下重量的成分：
纳米银粉末0.0625g；
卡波姆0.7000g；
三乙醇胺0.7000g；
葡萄糖3.0000g；
水995.5385g；
所述纳米银粉末中银的纯度≥99.99%，银颗粒粒径为1—5nm，银颗粒形状为球形。
实施例2
1kg所述治疗肺癌的纳米银抗癌组合物中含有如下重量的成分：
纳米银粉末0.0125g；
卡波姆0.8000g；
三乙醇胺0.8000g；
葡萄糖3.0000g；
水995.3885g；
所述纳米银粉末中银的纯度≥99.99%，银颗粒粒径为1—5nm，银颗粒形状为球形。
实施例3
1kg所述治疗肺癌的纳米银抗癌组合物中含有如下重量的成分：
纳米银粉末0.0025g；
卡波姆0.8000g；
三乙醇胺0.8000g；
葡萄糖3.0000 g；
水995.3975g；
所述纳米银粉末中银的纯度≥99.99%，银颗粒粒径为1—5nm，银颗粒形状为球形。
实施例4
制备实施例1至3所述纳米银抗癌组合物的方法，包括如下步骤：
（1）将卡波姆加入占水总量1/2～2/3的水中，混合，使用超声波分散器分散2～5min；
（2）将纳米银粉末及三乙醇胺加入到经步骤（1）分散处理的混合物中混合，使用超声波分散器分散2～5min；
（3）将葡萄糖和剩余的水加入到经步骤（2）分散处理的混合物中，再次分散1～3min；
（4）待经步骤（3）分散处理后的混合物冷却至2～12℃时，将混合物放入超声波雾化器中分散至雾状物，用收集装置将雾状物收集后冷凝至液体，即得纳米银抗癌组合物。
其中，步骤（1）中超声波分散器的频率为2段频率：16～24KHZ；步骤（2）中超声波分散器的频率为5段频率：40～65KHZ；步骤（3）中超声波雾化器的频率为15段频率：120～180 KHZ。
实施例5
实施例4制备的纳米银抗癌组合物对A549细胞增殖的影响的检测。
1 实验材料
将用纳米银1号为原料按实施例4所述方法制备的纳米银抗癌组合物命名为纳米银1#，将用纳米银5号为原料按实施例4所述方法制备的纳米银抗癌组合物命名为纳米银5#，作为实验组。
2 试验方法
采用X-celligence实时细胞分析系统，实时动态记录给药后72h内药物对肿瘤细胞增殖的影响。E-Plate培养板中每孔含细胞5000个（初始值）、培养基190μL，每孔加入药液体积为10μL。设置纳米银1#和纳米银5#不同剂量组，即50、10、2μL组，并设置一个溶剂对照组（0.1%DMSO），一个无细胞的培养基对照组（Medium），观察纳米银对A549细胞增殖的影响。
3        实验结果
纳米银1#对A549细胞增殖的影响结果见图2，纳米银5#对A549细胞增殖的影响，结果见图1。
4        实验结论
结果表明如图2，对照组1号不同剂量（浓度）对A549的增殖均没有明显的抑制作用，说明对照组1号不抑制A549的增殖；如图1纳米银5号50ul（62.5ppm)、10ul(12.5ppm)组完全抑制A549的增殖，并引起细胞全部死亡；2ul (2.5ppm)组则对A549的增殖没有明显的抑制作用，说明纳米银5号抑制A549的增殖。

Claims (7)

1.一种治疗肺癌的纳米银抗癌组合物，其特征在于，每1kg所述组合物中含有如下重量的成份：
纳米银粉末12—200 mg；
卡波姆700—800 mg；
三乙醇胺700—800 mg；
葡萄糖2.8—3.2 g；
其余为水；
所述纳米银粉末中银的纯度银纯度≥99.99%，银颗粒粒径为1—5nm，银颗粒形状为球形。
2.一种制备如权利要求1所述纳米银抗癌组合物的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
（1）按权利要求1所述的浓度要求准备好纳米银粉末、卡波姆、三乙醇胺、葡萄糖和水；
（2）将卡波姆加入占水总量1/2～2/3的水中，混合，使用超声波分散器分散2～5min；
（3）将纳米银粉末及三乙醇胺加入到经步骤（2）分散处理的混合物中混合，使用超声波分散器分散2～5min；
（4）将葡萄糖和剩余的水加入到经步骤（3）分散处理的混合物中，再次分散1～3min；
（5）待经步骤（4）分散处理后的混合物冷却至2～12℃时，将混合物放入超声波雾化器中分散至雾状物，用收集装置将雾状物收集后冷凝至液体，即得纳米银抗癌组合物。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤（2）中超声波分散器的频率为2段频率：16～24KHZ。
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤（3）中超声波分散器的频率为5段频率：40～65KHZ。
5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤（4）中超声波分散器的频率为4段频率：30～40KHZ。
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤（5）中超声波雾化器的频率为15段频率：120～180 KHZ。
7.如权利要求1所述纳米银抗癌组合物在制备治疗肺癌药物中的应用。
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