CN103919914B - 一种兽用清瘟解毒口服液的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属于兽用中药口服液制备技术领域,具体涉及一种兽用清瘟解毒口服液的制备方法。该方法包括将药材原料粉碎过筛、酶解、煎煮、微滤、超滤、减压浓缩、定容等步骤,相较于现有技术,可更为有效的酶解植物细胞壁,从而提高药材有效成分的溶出率;并通过微滤与超滤技术的联合使用,有效去除了药液中的杂质,溶液澄清度更高,药材有效成分损失也更少,药物临床疗效得到了较好的保证。本发明通过合理搭配组合生物酶,利用生物酶辅助提取药材中有效成分,有效提升了药液中关键药效成分的含量,使得产品质量得到了较好的提升,因而具有较好的推广应用价值。

Description

一种兽用清瘟解毒口服液的制备方法
技术领域
本发明属于兽用中药口服液制备技术领域,具体涉及一种兽用清瘟解毒口服液的制备方法。
背景技术
清瘟解毒口服液是收录在《兽药地方标准升国家标准》第二册(中国农业出版社,2011年6月第1版)中的一种畜禽用中药口服液,主要成分为地黄、栀子、黄芩、连翘、玄参和板蓝根。本品清热解毒,主治外感发热,在临床中用于鸡多种病毒病的防治。
目前《兽药地方标准升国家标准》第二册对清瘟解毒口服液的制备方法为:以制备1000mL口服液为例,将地黄150g、栀子250g、黄芩225g、连翘200g、玄参150g和板蓝根200g加水煎煮两次,合并煎液,静置,滤过,浓缩,滤过,加入适量苯甲酸钠,加水至1000ml,灌装、灭菌即得。
一般而言,植物药中大多生物活性成分存在于细胞内,少量存在于细胞间隙。植物细胞壁主要是由纤维素、半纤维素、果胶质等大分子组成,植物中小分子化学成分渗透到溶液中,必须要穿透植物细胞壁。传统中药提取工艺如热水、酸、碱、有机溶剂浸提法,受细胞壁主要成分纤维素的阻碍,往往提取效率较低,且有效成分的收率偏低,大量有效成分在植物细胞壁中没有释放到提取溶媒中。同时,传统的除杂工艺通常使用醇沉法、酸碱法以及絮凝沉淀法进行除杂,效率较低,且易损失较多的有效成分,大大降低了制备的经济效益。
现有技术中,专利号2008100526420(一种利用纤维素酶提取清瘟解毒口服液的方法)的文件公布了一种使用单一纤维素酶制备清瘟解毒口服液的方法,该方法虽然使用了纤维素酶来酶解植物细胞壁,但是该专利中由于存在酶活性公开不够充分的嫌疑,且存在对药材细胞壁所含半纤维素、果胶质等破壁效果不佳的缺点,影响有效成分最大限度溶出,因而针对清瘟解毒口服液的制备方法仍有较大的改进空间。
发明内容
本发明目的在于提供一种兽用清瘟解毒口服液的制备方法,相较于现有技术,可以提高药材有效成分的溶出率。
本发明采用的技术方案如下:
一种兽用清瘟解毒口服液的制备方法,以制备1000ml口服液为例,所采用的药材原料包括地黄150g、栀子250g、黄芩225g、连翘200g、玄参150g、板蓝根200g,具体包括如下制备步骤:
(1)将药材原料粉碎,过筛,优选过20目筛;
(2)取药材重量6~10倍重量的水加热至80~85℃,加入步骤(1)中过筛后的药材,恒温浸泡10~30分钟;
所用水优选医用纯化水,用水量优选8倍重量的水;
(3)将步骤(2)所得药液降温至45~50℃,调节pH至4.5~5.0,加入复合酶,搅拌均匀,酶解1~3h,然后升温至75~80℃进行酶灭活处理;
所述调节pH值优选用质量分数为40%的柠檬酸水进行调节;
所述复合酶为纤维素酶、果胶酶、淀粉酶的混合物,其中纤维素酶酶活以20000U/g计,用量不小于1.0g,果胶酶酶活以50000U/g计,用量不小于1.0g,淀粉酶酶活以30000U/g计,用量不小于1.0g;
(4)将步骤(3)酶解后药液按现有技术中的中药煎煮方式煎煮两次,即第一次煎煮1~2h,第二次加入药材重量6~8倍重量的水煎煮0.5~1h,将两次煎煮滤液合并,离心处理得上清液;
所述离心转速为5000r/min。离心时间为15min;
(5)将步骤(4)所得上清液进行微滤、超滤;
所述微滤采用微孔滤膜进行过滤,滤膜孔径为0.45微米;
所述超滤采用聚丙烯中空纤维柱进行过滤,其截留分子量为60000道尔顿;
(6)将步骤(5)超滤后滤液减压浓缩至相对密度为1.05~1.06;
(7)将步骤(6)减压浓缩后药液加蒸馏水定容至配制量,即1000mL,然后灌装、灭菌即得清瘟解毒口服液成品。
步骤(3)中的复合酶的用量,优选质量配比为,纤维素酶︰果胶酶︰淀粉酶=2.9~3.1︰1.9~2.1︰0.9~1.1,其中,纤维素酶酶活以20000U/g计,果胶酶酶活以50000U/g计,淀粉酶酶活以30000U/g计。
步骤(3)中的复合酶优选加入半纤维素酶和/或ViscozymeL复合酶,半纤维素酶酶活以30000U/g计,用量不小于1.0g,同时不高于5.0g,ViscozymeL复合酶酶活以100FBG/g计,用量不小于1.0g,同时不高于5.0g。
步骤(3)中复合酶最佳用量配比为,纤维素酶3g(酶活20000U/g)、果胶酶2g(酶活50000U/g)、淀粉酶1g(酶活30000U/g)、ViscozymeL复合酶2.5g(酶活100FBG/g)。
本发明根据清瘟解毒口服液中黄芩、地黄、玄参、板蓝根等根类药材比重较大、细胞壁主要由纤维素、半纤维素构成,且药材均含有一定量果胶成分,而板蓝根药材淀粉含量较多等具体情况,通过正交试验反复验证,从而得到了复合酶的最佳用量配比。本发明所提供的清瘟解毒口服液制备方法,相较于现有技术,可更为有效地酶解植物细胞壁,从而提高药材有效成分的溶出率;并且通过微滤与超滤技术的联合使用,有效去除了药液中的杂质,溶液澄清度更高,药材有效成分损失也更少,药物临床疗效得到了较好的保证。本发明通过合理搭配组合生物酶,利用生物酶辅助提取药材中有效成分,有效提升了药液中关键药效成分的含量,使得产品质量得到了较好的提升,因而具有较好的推广应用价值。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的解释说明,以使本领域技术人员能够更好的实施本发明。
实施例中所用部分原料及仪器设备说明如下:
所用中药材购自安徽亳州中药材市场;
所用生物酶均由诺维信(中国)生物技术有限公司生产;
所用离心机为GQ145高速管式离心机,分离因数:15900R.C.F,由上海天本离心机械有限公司生产;
药液减压浓缩提取设备为RTN系列热回流提取浓缩机组RTN-200L,由湖南金杯药机有限公司生产。
实施例1
兽用清瘟解毒口服液的制备方法,以制备1000ml口服液为例,所采用的药材原料包括地黄150g、栀子250g、黄芩225g、连翘200g、玄参150g、板蓝根200g,具体包括如下制备步骤:
(1)将药材原料粉碎,过20目筛;
(2)取药材重量6倍重量的医用纯化水加热至80℃,加入步骤(1)中过筛后的药材,恒温浸泡10分钟;
(3)将步骤(2)所得药液通入冷凝水降温至45℃,用质量分数为40%的柠檬酸水调节pH至4.5,加入纤维素酶3g(酶活20000U/g)、果胶酶2g(酶活50000U/g)、淀粉酶1g(酶活30000U/g),搅拌均匀,酶解1h,然后升温至75℃进行酶灭活处理;
(4)将步骤(3)酶解后药液按现有技术中的中药煎煮方式煎煮两次,第一次煎煮1h,第二次加入药材重量6倍重量的水煎煮0.5h,将两次煎煮滤液合并,离心处理得上清液;
所述离心转速为5000r/min,离心15min。
(5)将步骤(4)所得上清液过微孔滤膜进行微滤,滤膜孔径为0.45微米;然后用聚丙烯中空纤维柱进行超滤除去大分子杂质,聚丙烯中空纤维柱截留分子量为60000道尔顿;
(6)将步骤(5)超滤后滤液减压浓缩至相对密度为1.05;
(7)将步骤(6)减压浓缩后药液加蒸馏水定容至1000mL,然后灌装、灭菌即得清瘟解毒口服液成品。
实施例2
兽用清瘟解毒口服液的制备方法,以制备1000ml口服液为例,所采用的药材原料包括地黄150g、栀子250g、黄芩225g、连翘200g、玄参150g、板蓝根200g,具体包括如下制备步骤:
(1)将药材原料粉碎,过20目筛;
(2)取药材重量8倍重量的医用纯化水加热至85℃,加入步骤(1)中过筛后的药材,恒温浸泡30分钟;
(3)将步骤(2)所得药液通入冷凝水降温至50℃,用质量分数为40%的柠檬酸水调节pH至5.0,加入纤维素酶3g(酶活20000U/g)、果胶酶2g(酶活50000U/g)、淀粉酶1g(酶活30000U/g)、ViscozymeL复合酶(酶活100FBG/g)2.5g,搅拌均匀,酶解3h,然后升温至80℃进行酶灭活处理;
(4)将步骤(3)酶解后药液按现有技术中的中药煎煮方式煎煮两次,第一次煎煮2h,第二次加入药材重量8倍重量的水煎煮1h,将两次煎煮滤液合并,离心处理得上清液;
所述离心转速为5000r/min,离心15min;
(5)将步骤(4)所得上清液过微孔滤膜进行微滤,滤膜孔径为0.45微米;然后用聚丙烯中空纤维柱进行超滤除去大分子杂质,聚丙烯中空纤维柱截留分子量为60000道尔顿;
(6)将步骤(5)超滤后滤液减压浓缩至相对密度为1.06;
(7)将步骤(6)减压浓缩后药液加蒸馏水定容至1000mL,然后灌装、灭菌即得清瘟解毒口服液成品。
实验例
为进一步检验按照本发明所提供方法制备的清瘟解毒口服液的药效,发明人按照《兽药地方标准升国家标准》第二册中所记载的检验标准(中国农业出版社,2011年6月第1版),对现有工艺和本发明所提供方法所制备的药液进行了检验比对,具体检验比对结果如下表:
其中现有工艺所采用对比产品为河南牧翔动物药业有限公司按《兽药地方标准升国家标准》第二册所述制备工艺生产批号为:13111407Z01的清瘟解毒口服液,本发明所提供制备方法为实施例2所制备的清瘟解毒口服液。
从上表可以看出,按照现有工艺制备和本发明所提供方法所制备的清瘟解毒口服液均符合相关药品检验规定,且本发明与现有技术相比,所制备的药液的外观更加澄清,药材有效成分含量更高,关键药效成分可提高20%以上,因而具有较好的推广应用价值。
需要说明的是,本发明请求保护范围并非局限于上述实施例,在上述实施例基础上,本领域技术人员针对提取药液用水量、离心参数、减压浓缩密度等参数进行适当修改即可得出多种方案,但本技术方案的主要改进点在于通过复合酶的加入,加速了药液提取的进度,且大大提高了药材有效成分的溶出率。同时微滤和超滤技术的联合应用,使除杂过程更加快捷,即无需像现有技术中提取药液后尚需长时间的静置过程。因此只要是本领域技术人员在制备清瘟解毒口服液产品过程中,使用复合酶进行酶解辅助提取药材有效成分,以及联合使用微滤和超滤进行除杂,即可视为落入本发明专利请求保护范围之内。

Claims (6)

1.一种兽用清瘟解毒口服液的制备方法,以制备1000ml口服液为例,所采用的药材原料由地黄150g、栀子250g、黄芩225g、连翘200g、玄参150g、板蓝根200g组成,其特征在于,该方法包括如下制备步骤:
(1)将药材原料粉碎,过筛;
(2)取药材重量6~10倍重量的水加热至80~85℃,加入步骤(1)中过筛后的药材,恒温浸泡10~30分钟;
(3)将步骤(2)所得药液降温至45~50℃,调节pH至4.5~5.0,加入复合酶,搅拌均匀,酶解1~3h,然后升温至75~80℃进行酶灭活处理;
所述复合酶为纤维素酶、果胶酶、淀粉酶的混合物,其中纤维素酶酶活以20000U/g计,用量不小于1.0g,果胶酶酶活以50000U/g计,用量不小于1.0g,淀粉酶酶活以30000U/g计,用量不小于1.0g;
(4)将步骤(3)酶解后药液煎煮两次,第一次煎煮1~2h,第二次加入药材重量6~8倍重量的水煎煮0.5~1h,将两次煎煮滤液合并,离心处理得上清液;
(5)将步骤(4)所得上清液进行微滤、超滤;
(6)将步骤(5)超滤后滤液减压浓缩至相对密度为1.05~1.06;
(7)将步骤(6)减压浓缩后药液加蒸馏水定容至配制量,灌装、灭菌即得清瘟解毒口服液成品。
2.如权利要求1所述兽用清瘟解毒口服液的制备方法,其特征在于,步骤(3)中的复合酶的质量配比为,纤维素酶∶果胶酶∶淀粉酶=2.9~3.1∶1.9~2.1∶0.9~1.1。
3.如权利要求2所述兽用清瘟解毒口服液的制备方法,其特征在于,步骤(3)中的复合酶还可加入半纤维素酶和/或ViscozymeL复合酶,半纤维素酶酶活以30000U/g计,用量不小于1.0g,同时不高于5.0g,ViscozymeL复合酶酶活以100FBG/g计,用量不小于1.0g,同时不高于5.0g。
4.如权利要求3所述兽用清瘟解毒口服液的制备方法,其特征在于,步骤(3)中复合酶为,纤维素酶3g,酶活以20000U/g计;果胶酶2g,酶活以50000U/g计;淀粉酶1g,酶活以30000U/g计;ViscozymeL复合酶2.5g,酶活以100FBG/g计。
5.如权利要求1所述兽用清瘟解毒口服液的制备方法,其特征在于,步骤(5)中所述微滤采用微孔滤膜进行过滤,滤膜孔径为0.45微米;所述超滤采用聚丙烯中空纤维柱进行过滤,其截留分子量为60000道尔顿。
6.如权利要求1所述兽用清瘟解毒口服液的制备方法,其特征在于,步骤(3)中所述调节pH值选用质量分数为40%的柠檬酸水进行调节。
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Denomination of invention: Preparation method of a veterinary anti plague and detoxification oral liquid

Granted publication date: 20160608

Pledgee: China Construction Bank Corporation Zhengzhou Railway Sub Branch

Pledgor: HENAN SOAR VETERINARY PHARMACEUTICAL Co.,Ltd.|HENAN MUXIANG BIOTECHNOLOGY Co.,Ltd.

Registration number: Y2024980004821

CP03 Change of name, title or address
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Address after: No. 9, Yugang Road, Airport Economic Comprehensive Experimental Zone, Zhengzhou City, Henan Province, 451162

Patentee after: Henan Muxiang Biotechnology Co.,Ltd.

Country or region after: China

Address before: 451162 airport road five, Zhengzhou, Henan

Patentee before: HENAN SOAR VETERINARY PHARMACEUTICAL Co.,Ltd.

Country or region before: China