CN103889418A - 使用PI3Kβ抑制剂和包括MEK和RAF抑制剂的MAPK通道抑制剂治疗癌症的组合物和方法 - Google Patents

使用PI3Kβ抑制剂和包括MEK和RAF抑制剂的MAPK通道抑制剂治疗癌症的组合物和方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及包含至少一种MAPK通道抑制剂(包括MEK和RAF抑制剂)和至少一种PI3Kβ抑制剂的组合物，以及其用于治疗癌症的用途。

Description

使用PI3Kβ抑制剂和包括MEK和RAF抑制剂的MAPK通道抑制剂治疗癌症的组合物和方法
技术领域
业内持续需要治疗癌症的更有效方法和组合物。本发明一般地涉及用于治疗癌症的组合物和其用途，且更具体地涉及包含磷酸肌醇3-激酶β(PI3Kβ或PI3Kbeta)的抑制剂和MAPK(促分裂原活化蛋白激酶)通道的抑制剂(包括MEK(促分裂原活化蛋白激酶，也称为MAP2K)和RAF激酶抑制剂)的组合物。
背景技术
磷酸肌醇3-激酶(Pl3K)是涉及诸如细胞周期、细胞运动和细胞凋亡等诸多细胞功能的信号传导分子。PI3K是产生活化若干靶蛋白的第二信使分子的脂质激酶，包括丝氨酸/苏氨酸激酶，例如PDK1和AKT(也称为PKB)。PI3K分为三个种类且种类I包含称为Pl3Kα、PI3Kβ、PI3Kδ和PI3Kγ的四种不同Pl3K。
Pl3Kβ是IA类成员，其普遍表达且拥有不仅通过酪氨酸激酶受体活化且也通过G蛋白偶合受体活化的独特特征(Vanhaesebroeck等人，2001)。
2-{2-[(2S)-2-甲基-2,3-二氢-1H-吲哚-1-基]-2-氧代乙基}-6-(吗啉-4-基)嘧啶-4(3H)-酮是I类磷酸肌醇-3激酶(PI3K)脂质激酶的PI3Kβ同工型的选择性抑制剂。此化合物有效地靶向PI3Kβ同工型(其中IC50为65nM)且针对其它PI3K同工型具有选择性(其中对于PI3Kα、PI3Kδ和PI3Kγ的IC50分别为1188nM、465nM和>10000nM)。其抑制Akt以及Akt下游效应子的磷酸化和活化。
在使用此化合物处理之后，具有活化PI3K/AKT通道的肿瘤细胞(例如缺少PTEN的肿瘤细胞)通常经由抑制Akt以及Akt下游效应子的磷酸化、抑制肿瘤细胞增殖和肿瘤细胞死亡诱导来产生应答。
使用MEK激酶抑制剂处理的肿瘤细胞通常经由抑制ERK(细胞外信号调节激酶)的磷酸化、下调细胞周期蛋白D1、诱导G1停止来产生应答，且最终发生细胞凋亡。在药理学上，MEK抑制完全消除BRAF突变异种移植物肿瘤中的肿瘤生长，而Ras突变肿瘤在大部分情形下仅展现部分抑制(D.B.Solit等人，Nature2006；439:358-362)。因此，MEK已成为极受关注的用于研发癌症疗法的靶。
使用RAF激酶抑制剂处理的肿瘤细胞通常经由抑制MEK和ERK的磷酸化、下调细胞周期蛋白D、诱导G1停止来产生应答，且最终发生细胞凋亡。在药理学上，BRAF-V600E抑制完全消除BRAF突变异种移植物肿瘤中的肿瘤生长。因此，RAF已成为极受关注的用于研发癌症疗法的靶。
1H-苯并咪唑-6-甲酰胺5-[(4-溴-2-氯苯基)氨基]-4-氟-N-(2-羟基乙氧基)-1-甲基(也称为AZD-6244或司美替尼(Selumetinib))是MEK激酶的具有高功效和选择性(针对其它激酶)的变构抑制剂。司美替尼是用于潜在治疗实体肿瘤(例如非小细胞肺癌(NSCLC)、胰腺癌、结肠直肠癌、胆管癌、甲状腺癌和恶性黑色素瘤)的口服MEK1/2抑制剂。
1-丙烷磺酰胺N-[3-[[5-(4-氯苯基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基]羰基]-2,4-二氟苯基](也称为PLX4032或威罗菲尼((Vemurafenib))是RAF激酶的抑制剂。其抑制BRAF(V600E)、野生型BRAF和CRAF-1的活性，其中IC50分别为31nM、100nM和48nM。其针对许多其它激酶显示选择性。PLX-4032是可口服利用的小分子，其经研发用于治疗具有活化BRAF突变的癌症。其针对具有BRAFV600E突变的黑色素瘤细胞系具有明显抗肿瘤效应，但针对具有野生型BRAF的细胞并非如此。
仍需要更有效地抑制细胞增殖和肿瘤生长同时最小化患者毒性的癌症疗法。尤其需要与其它靶向疗法组合使用的MEK或RAF抑制剂疗法，其会得到更高效率且不会实质上增加或甚至维持或降低业内常用MEK或RAF抑制剂的剂量。
发明内容
具体地，本申请涉及PI3Kβ选择性抑制剂与MAPK通道调节剂(包括MEK和RAF抑制剂)的组合。
具体地，本申请涉及PI3Kβ选择性抑制剂与MEK抑制剂或RAF抑制剂的组合。
具体地，本申请涉及PI3Kβ选择性抑制剂与MEK抑制剂的组合。
具体地，本申请涉及PI3Kβ选择性抑制剂与RAF抑制剂的组合。
因此，本发明涉及一种药物组合，其包含：
-至少一种式(I)化合物或其药学上可接受的盐，所述式(I)化合物为：
Figure BDA0000492414860000031
和
-至少一种MAPK通道抑制剂。
根据一个实施方案，在本发明的药物组合中，MAPK通道抑制剂选自MEK和RAF激酶的抑制剂。
根据一个实施方案，在本发明的药物组合中，MAPK通道抑制剂是MEK激酶和RAF激酶中的一个或两个的抑制剂。
本发明也涉及如上文所定义的药物组合，其中MAPK通道抑制剂是MEK抑制剂。
根据一个实施方案，MAPK通道抑制剂是RAF抑制剂。
根据一个实施方案，MAPK通道抑制剂是BRAF抑制剂。
根据一个实施方案，如上文所定义的式(I)化合物是PI3K抑制剂，具体地是PI3Kβ抑制剂。
在一个方面，提供组合物和其治疗各种癌症的用途。
在具体实施方案中，提供包含MAPK通道抑制剂(包括MEK和RAF抑制剂)和如上文所定义的具有下列结构式(I)的化合物的组合物。
在一个具体实施方案中，提供包含MAPK通道抑制剂(包括MEK和RAF抑制剂)和PI3Kβ抑制剂(该PI3Kβ抑制剂具有上述结构式(I))的组合物。
在具体实施方案中，提供包含MEK抑制剂或RAF抑制剂和PI3Kβ抑制剂(该PI3Kβ抑制剂具有如上文所定义的式(I))的组合物。
在具体实施方案中，提供包含MEK抑制剂和PI3Kβ抑制剂(该PI3Kβ抑制剂具有如上文所定义的式(I))的组合物。
在具体实施方案中，提供包含RAF抑制剂和PI3Kβ抑制剂(该PI3Kβ抑制剂具有如上文所定义的式(I))的组合物。
在具体实施方案中，提供包含BRAF抑制剂和PI3Kβ抑制剂(该PI3Kβ抑制剂具有如上文所定义的式(I))的组合物。
在上述组合物中，这种MAPK通道抑制剂(包括MEK和RAF抑制剂)可选自本领域技术人员已知的抑制剂且于是可选自(例如)：
i)MEK抑制剂：AZD6244、RO4987655、RO5126766、TAK-733、MSC1936369B(AS703026)、GSK1120212、BAY86-9766、GDC-0973、GDC-0623、PD325901、ARRY-438162、CI1040、E6201、ARRY300
ii)RAF和/或BRAF选择性抑制剂：PLX4032、GSK2118436、索拉非尼(Sorafenib)(BAY-43-9006)、BMS-908662(XL-281)、RAF265、RG-7256(RO5212054、PLX3603)、RO5126766、ARQ-736、E-3810、DCC-2036。
根据一个具体实施方案，在本发明的药物组合中，MAPK通道抑制剂选自：
-化合物(2a)或其药学上可接受的盐，所述化合物(2a)为：
Figure BDA0000492414860000041
和
-化合物(2b)或其药学上可接受的盐，所述化合物(2b)为：
Figure BDA0000492414860000042
在具体实施方案中，提供包含具有上式(I)的化合物和上式(2a)的化合物的组合物。
在具体实施方案中，提供包含具有上式(I)的化合物和上式(2b)的化合物的组合物。在具体实施方案中，提供包含具有上式(I)的PI3Kβ抑制剂和具有上式(2a)的MEK抑制剂的组合物。
在具体实施方案中，提供包含具有上式(I)的PI3Kβ抑制剂和具有上式(2b)的RAF抑制剂的组合物。
本发明也涉及如上文所定义的药物组合，其中MAPK通道抑制剂是下式的化合物(2a)：
Figure BDA0000492414860000051
或其药学上可接受的盐。
本发明也涉及如上文所定义的药物组合，其中MAPK通道抑制剂是下式的化合物(2b)：
或其药学上可接受的盐。
根据一个实施方案，本发明的药物组合可进一步包含药学上可接受的载体。
根据一个实施方案，本发明的药物组合可包含至少一种选自抗癌化合物的其它化合物。
根据一个实施方案，在本发明的药物组合中，可以以一定剂量给予化合物(I)，该剂量使得对人类肿瘤进行PI3Kβ靶抑制且预计为约60-600mg(口服，每天两次)或120-1200mg(口服，每天一次)的剂量。
根据一个实施方案，在本发明的药物组合中，MAPK通道抑制剂的量可为10mg/kg至200mg/kg(每天一次或每天两次)。
根据一个实施方案，在本发明的药物组合中，可以以约2-200mg的剂量(每天一次或每天两次，口服)给予MEK抑制剂。
根据一个实施方案，在本发明的药物组合中，可以以约60-200mg的剂量(每天两次，口服)给予RAF抑制剂。
根据一个实施方案，在本发明的药物组合中，以约2-200mg的剂量(每天一次或每天两次，口服)给予化合物(2a)抑制剂。
根据一个实施方案，在本发明的药物组合中，以约60-200mg的剂量(每天两次，口服)给予化合物(2b)抑制剂。
本发明也涉及包含如上文所定义的药物组合的药剂。
本发明也涉及包含如上文所定义的药物组合和药学上可接受的赋形剂的药物组合物。
本发明也涉及用作药剂的如上文所定义的药物组合。
本发明也涉及用于治疗癌症的如上文所定义的药物组合。
根据一个实施方案，癌症选自：非小细胞肺癌、乳腺癌、胰腺癌、肝癌、前列腺癌、膀胱癌、宫颈癌、甲状腺癌、结肠直肠癌、肝癌、肌癌症、血液学恶性肿瘤、黑色素瘤、子宫内膜癌和胰腺癌。
根据一个实施方案，癌症选自结肠直肠癌、子宫内膜癌、血液学恶性肿瘤、甲状腺癌、乳腺癌、黑色素瘤、胰腺癌和前列腺癌中的任何癌症。
根据一个实施方案，本发明涉及如上文所定义的药物组合，其用于通过给予式(I)化合物和给予MAPK通道抑制剂来治疗癌症。
根据一个实施方案，本发明涉及如上文所定义的药物组合，其用于通过给予式(I)化合物和给予化合物(2a)来治疗癌症。
根据一个实施方案，本发明涉及如上文所定义的药物组合，其用于通过给予式(I)化合物和给予化合物(2b)来治疗癌症。
根据一个实施方案，本发明涉及如上文所定义的药物组合，其用于通过给予式(I)化合物随后给予MAPK通道抑制剂来治疗癌症。
根据一个实施方案，本发明涉及如上文所定义的药物组合，其用于通过给予MAPK通道抑制剂随后给予式(I)化合物来治疗癌症。
根据一个实施方案，本发明涉及如上文所定义的药物组合，其用于通过给予式(I)化合物随后给予化合物(2a)来治疗癌症。
根据一个实施方案，本发明涉及如上文所定义的药物组合，其用于通过给予式(I)化合物随后给予化合物(2b)来治疗癌症。
根据一个实施方案，本发明涉及如上文所定义的药物组合，其用于通过给予化合物(2a)随后给予式(I)化合物来治疗癌症。
根据一个实施方案，本发明涉及如上文所定义的药物组合，其用于通过给予化合物(2b)随后给予式(I)化合物来治疗癌症。
根据一个实施方案，本发明涉及用于治疗癌症的如上文所定义的药物组合，其中式(I)化合物和MAPK通道抑制剂是以产生减小肿瘤体积的协同效应的量使用。
根据一个实施方案，本发明涉及用于治疗癌症的如上文所定义的药物组合，其中式(I)化合物和MAPK通道抑制剂是以产生肿瘤停滞的组合效应的量使用。
根据一个实施方案，本发明涉及如上文所定义的组合，其中癌症选自：非小细胞肺癌、乳腺癌、胰腺癌、肝癌、前列腺癌、膀胱癌、宫颈癌、甲状腺癌、结肠直肠癌、肝癌、肌癌症、血液学恶性肿瘤、黑色素瘤、子宫内膜癌和胰腺癌。
根据一个实施方案，本发明涉及如上文所定义的组合，其中癌症选自：结肠直肠癌、子宫内膜癌、血液学恶性肿瘤、甲状腺癌、乳腺癌、黑色素瘤、胰腺癌和前列腺癌。
根据一个实施方案，本发明涉及如上文所定义的组合，其中在给予式(I)化合物后接着给予MAPK通道抑制剂。
根据一个实施方案，本发明涉及如上文所定义的组合，其中在给予MAPK通道抑制剂后接着给予式(I)化合物。
根据一个实施方案，本发明涉及如上文所定义的组合，其中在给予式(I)化合物后接着给予化合物(2a)。
根据一个实施方案，本发明涉及如上文所定义的组合，其中在给予式(I)化合物后接着给予化合物(2b)。
根据一个实施方案，本发明涉及如上文所定义的组合，其中在给予化合物(2a)后接着给予式(I)化合物。
根据一个实施方案，本发明涉及如上文所定义的组合，其中在给予化合物(2b)后接着给予式(I)化合物。
根据一个实施方案，本发明涉及如上文所定义的组合，其中式(I)化合物和MAPK通道抑制剂是以产生减小肿瘤体积的协同效应的量使用。
根据一个实施方案，本发明涉及如上文所定义的组合，其中式(I)化合物和MAPK通道抑制剂是以产生肿瘤停滞的组合效应的量使用。
本发明也涉及一种药物组合，其包含：
-至少一种如上文所定义的式(I)化合物或其药学上可接受的盐，和
-至少一种选自以下的MAPK通道抑制剂：如上文所定义的化合物(2a)或其药学上可接受的盐和如上文所定义的化合物(2b)或其药学上可接受的盐，
所述药物组合用于治疗癌症。
本发明也涉及一种产品，其包含：
-至少一种如上文所定义的式(I)化合物或其药学上可接受的盐，和
-至少一种MAPK通道抑制剂，
所述产品作为组合制剂同时、分开或连续用于抗癌疗法中。
在上述产品是呈连续用于抗癌疗法中的组合制剂的形式时，首先给予式(I)化合物且然后给予MAPK通道抑制剂，或首先给予MAPK且然后给予式(I)化合物。
在另一方面中，提供治疗癌症患者的方法，其包括向该患者给予治疗有效量的上文所指定式(I)化合物或其药学上可接受的盐与选自MAPK通道抑制剂(包括MEK和RAF抑制剂)的化合物的组合。
在另一方面中，提供治疗癌症患者的方法，其包括向该患者给予治疗有效量的上文所指定式(I)化合物或其药学上可接受的盐与选自MEK抑制剂的化合物的组合。
在另一方面中，提供治疗癌症患者的方法，其包括向该患者给予治疗有效量的上文所指定式(I)化合物或其药学上可接受的盐与选自RAF抑制剂的化合物的组合。
在一个实施方案中，治疗癌症患者的方法包括向患者给予一定剂量的MEK或RAF抑制剂和一定剂量的PI3Kβ抑制剂，其中所述PI3Kβ抑制剂具有上式(I)。
在一个实施方案中，治疗癌症患者的方法包括向患者给予一定剂量的MEK抑制剂和一定剂量的PI3Kβ抑制剂，其中所述MEK抑制剂具有上文所定义的式(2a)，且该PI3Kβ抑制剂具有上文所定义的式(I)。
在一个实施方案中，治疗癌症患者的方法包括向患者给予一定剂量的RAF抑制剂和一定剂量的PI3Kβ抑制剂，其中所述RAF抑制剂具有如上文所定义的式(2b)，且该PI3Kβ抑制剂具有如上文所定义的式(I)。
在一些实施方案中，本文所阐述的组合物和使用方法是以协同减小患者肿瘤体积的量(也即，在组合物中或在给予的剂量中)使用。在其它实施方案中，协同组合实现肿瘤停滞或肿瘤消退。
在另一方面中，提供试剂盒，其包含：(A)如上文所定义的式(I)化合物或其药学上可接受的盐；(B)选自如上文所定义的式(2a)和式(2b)的化合物或其药学上可接受的盐；和任选的(C)使用说明书。
本发明也涉及一种试剂盒，其包含：
-至少一种如上文所定义的式(I)化合物或其药学上可接受的盐，
-至少一种MAPK通道抑制剂，和
-任选的使用说明书。
本发明也涉及一种试剂盒，其包含：
-至少一种如上文所定义的式(I)化合物或其药学上可接受的盐，
-至少一种选自以下的MAPK通道抑制剂：如上文所定义的化合物(2a)或其药学上可接受的盐和如上文所定义的化合物(2b)或其药学上可接受的盐，和
-任选的使用说明书。
自下列详细说明将明了其它目标、特征和优点。仅出于说明的目的给出详细描述和具体实施例，这是因为本领域技术人员自此详细描述将明了属于本发明精神和范围内的各种改变和修饰。另外，各实施例显示本发明原理且预计不能具体阐释本发明可应用于对于本领域技术人员明显有用的所有实施例中。
具体实施方式
在一个方面，提供治疗癌症患者的方法。在一个实施方案中，该方法包括向患者给予如下文进一步所阐述的治疗有效量的MAPK通道抑制剂(包括MEK和RAF抑制剂)和治疗有效量的PI3Kβ抑制剂。
在一个方面，提供治疗癌症患者的方法。在一个实施方案中，该方法包括向患者给予如下文进一步所阐述的治疗有效量的MEK抑制剂和治疗有效量的PI3Kβ抑制剂。
在一个方面，提供治疗癌症患者的方法。在一个实施方案中，该方法包括向患者给予如下文进一步所阐述的治疗有效量的RAF抑制剂和治疗有效量的PI3Kβ抑制剂。
在一个实施方案中，MEK抑制剂具有如上文所定义的结构式(2a)。
式(2a)的MEK抑制剂在本文中称为“式(2a)化合物”且也称为AZD6244。此化合物的制备、性质和MEK抑制能力提供于(例如)国际专利公开WO2003/077914，具体地其中的实施例10化合物29c和表p37中。WO2003/077914的全部内容以引用方式并入本文中。式(2a)化合物的中性和盐形式皆视为属于本申请中。
在一个实施方案中，RAF抑制剂具有如上文所定义的结构式(2b)。
式(2b)的RAF抑制剂在本文中称为“式(2b)化合物”且也称为PLX4032。化合物(2b)的制备、性质和RAF抑制能力提供于(例如)国际专利公开WO2007/002325，具体地其中的实施例44化合物P-0956和表2a、2b、2c、2d、2e和2h中。WO2007/002325的全部内容以引用方式并入本文中。式(2b)化合物的中性和盐形式皆视为属于本申请中。
在一个实施方案中，PI3Kβ抑制剂具有如上文所定义的结构式(I)。
式(I)的PI3Kβ抑制剂在本文中称为“化合物(I)”。化合物(I)的制备、性质和PI3Kβ抑制能力提供于(例如)国际专利公开WO2011/001114，具体地其中的实施例117和表p216中。WO2011/001114的全部内容以引用方式并入本文中。式(I)化合物的中性和盐形式皆视为属于本申请中。
在一些实施方案中，上述化合物可为非溶剂化形式。根据一个实施方案，上述化合物可呈固体形式。在其它实施方案中，该方法中所使用化合物中的一种或两种呈溶剂化形式。如业内所已知，溶剂化物可使用任何药学上可接受的溶剂，例如水、乙醇等。一般而言，溶剂化物的存在或其缺乏对于上述MEK或RAF或PI3Kβ抑制剂的效能并不具有实质影响。
尽管式(I)、式(2a)和式(2b)的化合物是以其中性形式绘示，但在一些实施方案中，这种化合物是以药学上可接受的盐形式使用。可通过业内熟知的任何方法来获得盐，例如详尽说明于WO2011/001114(以引用方式并入本文中)中的任何方法和盐形式。
化合物的“药学上可接受的盐”是指药学上可接受且保留药理学活性的盐。应理解，药学上可接受的盐无毒。关于适宜药学上可接受的盐可参见Remington's Pharmaceutical Sciences，第17版，Mack Publishing公司，Easton,PA,1985或S.M.Berge等人，“Pharmaceutical Salts”，J.Pharm.Sci.,1977;66:1-19(二者皆以引用方式并入本文中)。
药学上可接受的酸加成盐的实例包括使用无机酸形成的那些，所述无机酸为例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸；以及使用有机酸形成的那些，所述有机酸为例如乙酸、三氟乙酸、丙酸、己酸、环戊烷丙酸、羟乙酸、丙酮酸、乳酸、草酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、3-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、1,2-乙二磺酸、2-羟基乙磺酸、苯磺酸、4-氯苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲苯磺酸、樟脑磺酸、葡庚糖酸、4,4'-亚甲基双-(3-羟基-2-烯-1-甲酸)、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、叔丁基乙酸、月桂基硫酸、葡糖酸、谷氨酸、羟萘甲酸、水杨酸、硬脂酸、粘康酸、对甲苯磺酸和水杨酸。
在第一组实施方案中，同时给予式(2a)的MEK抑制剂与式(I)的PI3Kβ抑制剂。同时给予通常是指两种化合物在完全相同的时间进入患者中。然而，同时给予也包括以下可能性：MEK抑制剂和PI3Kβ抑制剂在不同时间进入患者中，但时间差足够小，使得在第二所给予化合物进入之前第一所给予化合物没有时间对患者生效。这种延迟时间通常对应于小于1分钟和更通常而言小于30秒。
在第一组实施方案中，同时给予式(2b)的RAF抑制剂与式(I)的PI3Kβ抑制剂。同时给予通常是指两种化合物在完全相同的时间进入患者中。然而，同时给予也包括以下可能性：RAF抑制剂和PI3Kβ抑制剂在不同时间进入患者中，但时间差足够小，使得在第二所给予化合物进入之前第一所给予化合物没有时间对患者生效。这种延迟时间通常对应于小于1分钟和更通常而言小于30秒。
在化合物是呈溶液形式的一个实施例中，可通过给予含有化合物组合的溶液来实现同时给予。在另一个实施例中，可同时给予单独溶液，一种溶液含有MEK抑制剂且另一溶液含有PI3Kβ抑制剂。在化合物是呈固体形式的一个实施例中，可通过给予含有化合物组合的组合物来实现同时给予。
在化合物是呈溶液形式的一个实施例中，可通过给予含有化合物组合的溶液来实现同时给予。在另一个实施例中，可同时给予单独溶液，一种溶液含有RAF抑制剂且另一溶液含有PI3Kβ抑制剂。在化合物是呈固体形式的一个实施例中，可通过给予含有化合物组合的组合物来实现同时给予。
在一个实施例中，本发明化合物可呈固体形式，具体地呈片剂形式。在一个实施方案中，化合物(I)可以固体形式、具体地以片剂形式给予。
在其它实施方案中，MEK和PI3Kβ抑制剂并不同时给予。就此而言，在给予第二所给予化合物之前，已将第一所给予化合物提供给患者一段时间以发挥作用。通常，时间差并不超过第一所给予化合物在患者中完成其效应的时间，或并不超过第一所给予化合物在患者中完全或实质上消除或钝化的时间。在一组实施方案中，在PI3Kβ抑制剂之前给予MEK抑制剂。在另一组实施方案中，在MEK抑制剂之前给予PI3Kβ抑制剂。非同时给予中的时间差通常大于1分钟，且可为(例如)正好、至少、长达或小于5分钟、10分钟、15分钟、30分钟、45分钟、60分钟、2小时、3小时、6小时、9小时、12小时、24小时、36小时或48小时或大于48小时。
在其它实施方案中，RAF和PI3Kβ抑制剂并不同时给予。就此而言，在给予第二所给予化合物之前，已将第一所给予化合物提供给患者一段时间以发挥作用。通常，时间差并不超过第一所给予化合物在患者中完成其效应的时间，或并不超过第一所给予化合物在患者中完全或实质上消除或钝化的时间。在一组实施方案中，在PI3Kβ抑制剂之前给予RAF抑制剂。在另一组实施方案中，在RAF抑制剂之前给予PI3Kβ抑制剂。非同时给予中的时间差通常大于1分钟，且可为(例如)正好、至少、长达或小于5分钟、10分钟、15分钟、30分钟、45分钟、60分钟、2小时、3小时、6小时、9小时、12小时、24小时、36小时或48小时或大于48小时。
在一组实施方案中，以治疗有效(也即，治疗)量或剂量给予MEK和PI3Kβ抑制剂中的一个或两个。“治疗有效量”是在单独给予患者时有效治疗癌症(举例而言，抑制肿瘤生长，阻止肿瘤生长，或引起肿瘤消退)的MEK或PI3Kβ抑制剂的量。对于特定个体而言在给定情形下证明是“治疗有效量”的量可能并不对于100%的以类似方式治疗所考虑疾病或病状的个体皆有效，即使该剂量由本领域技术人员视为“治疗有效量”。对应于治疗有效量的化合物量高度取决于癌症类型、癌症阶段、所治疗患者的年龄和其它因素。一般而言，这些化合物的治疗有效量在业内已众所周知，例如提供于上文所引用的支持性参考文献中。
在一组实施方案中，以治疗有效(也即，治疗)量或剂量给予RAF和PI3Kβ抑制剂中的一个或两个。“治疗有效量”是在单独给予患者时有效治疗癌症(举例而言，抑制肿瘤生长，阻止肿瘤生长，或引起肿瘤消退)的RAF或PI3Kβ抑制剂的量。对于特定个体而言在给定情形下证明是“治疗有效量”的量可能并不对于100%的以类似方式治疗所考虑疾病或病状的个体皆有效，即使该剂量由本领域技术人员视为“治疗有效量”。对应于治疗有效量的化合物量高度取决于癌症类型、癌症阶段、所治疗患者的年龄和其它因素。一般而言，这些化合物的治疗有效量在业内已众所周知，例如提供于上文所引用的支持性参考文献中。
在另一组实施方案中，以亚治疗有效量或剂量给予MEK和PI3Kβ抑制剂中的一个或两个。亚治疗有效量是在单独给予患者时并不随时间推移完全抑制既定靶的生物活性的MEK或PI3Kβ抑制剂量。
在另一组实施方案中，以亚治疗有效量或剂量给予RAF和PI3Kβ抑制剂中的一个或两个。亚治疗有效量是在单独给予患者时并不随时间推移完全抑制既定靶的生物活性的RAF或PI3Kβ抑制剂量。
不论以治疗还是亚治疗量给予，MEK抑制剂和PI3Kβ抑制剂的组合应有效治疗癌症。若在与PI3Kβ抑制剂组合时该组合有效治疗癌症，则MEK抑制剂的亚治疗量可为有效量。
不论以治疗还是亚治疗量给予，RAF抑制剂和PI3Kβ抑制剂的组合应有效治疗癌症。若在与PI3Kβ抑制剂组合时该组合有效治疗癌症，则RAF抑制剂的亚治疗量可为有效量。
在一些实施方案中，化合物组合展现治疗癌症，具体地减小患者肿瘤体积的协同效应(也即，大于加和效应)。在不同实施方案中，取决于组合和所用有效量，化合物组合可抑制肿瘤生长，实现肿瘤停滞，或甚至实现实质或完全肿瘤消退。
在一些实施方案中，如实施例中所展示，在具有肿瘤的小鼠中，可以约100mg/kg至200mg/kg的剂量(口服，每天两次)给予化合物(I)。在具有肿瘤的小鼠中，可以约1mg/kg至50mg/kg、优选地1mg/kg至30mg/kg的剂量(口服，每天一次)同时给予化合物(2a)。在具有肿瘤的小鼠中，可以约1mg/kg至150mg/kg、优选地10mg/kg至100mg/kg的剂量(口服，每天一次)给予化合物(2b)。
在一些实施方案中，如实施例中所展示，在具有肿瘤的小鼠中，可以约150mg/kg的剂量(口服，每天两次)给予化合物(I)。在具有肿瘤的小鼠中，可以约10mg/kg或25mg/kg的剂量(口服，每天一次)同时给予化合物(2a)。在具有肿瘤的小鼠中，可以约50mg/kg或100mg/kg的剂量(口服，每天一次)给予化合物(2b)。
根据一个实施方案，如实施例中所展示，可每天两次给予化合物(I)。
根据一个实施方案，如实施例中所展示，可每天一次给予化合物(2a)和(2b)。
如本文中所使用，术语“约”通常指示某一值的不大于10%、5%或1%的可能变化。举例而言，“约25mg/kg”通常指示(以其最广泛意义)22.5-27.5mg/kg、也即25±2.5mg/kg的值。
尽管MEK、RAF和PI3Kβ抑制剂的量应使得可有效治疗癌症，但这种量在组合时优选地并不对于患者具有过高毒性(也即，这种量优选地在如通过医学指导所确立的毒性限值内)。在一些实施方案中，为预防过高毒性和/或提供更有效癌症治疗，提供对于总给予剂量的限制。通常，本文所考虑的量是(例如)每天的量；然而，本文也考虑半天和两天或三天的循环。
可使用不同剂量方案来治疗癌症。在一些实施方案中，在至少3、4、5、6、7、8、9或10天内，每天一次、两次、三次或四次给予日剂量(例如任一上述示例性剂量)。取决于癌症的阶段和严重程度，可采用较短治疗时间(例如，至多5天)以及较高剂量，或可采用较长治疗时间(例如，10或更多天或数周或一个月或更长)以及较低剂量。在一些实施方案中，每隔一天给予每天一次或两次的剂量。在一些实施方案中，每一剂量含有MEK和PI3Kβ抑制剂，而在其它实施方案中，每一剂量含有MEK或PI3Kβ抑制剂。在其它实施方案中，一些剂量含有MEK和PI3Kβ抑制剂，而其它剂量仅含有MEK或PI3Kβ抑制剂。
在一些实施方案中，每一剂量含有RAF和PI3Kβ抑制剂，而在其它实施方案中，每一剂量含有RAF或PI3Kβ抑制剂。在其它实施方案中，一些剂量含有RAF和PI3Kβ抑制剂，而其它剂量仅含有RAF或PI3Kβ抑制剂。
拟使用本发明治疗的癌症类型的实例包括但不限于淋巴瘤、肉瘤和癌瘤，例如，纤维肉瘤、粘液肉瘤、脂肪肉瘤、软骨肉瘤、骨源性肉瘤、脊索瘤、血管肉瘤、内皮肉瘤、淋巴管肉瘤、滑膜瘤、间皮瘤、淋巴管内皮肉瘤、尤因瘤(Ewing'stumor)、平滑肌肉瘤、横纹肌肉瘤、结肠癌瘤、胰腺癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、胃癌、食管癌、鳞状细胞癌瘤、基底细胞癌瘤、腺癌瘤、汗腺癌瘤、皮脂腺癌瘤、乳头状癌瘤、乳头状腺癌瘤、囊腺癌瘤、髓样癌瘤、支气管原癌瘤、肾细胞癌瘤、肝细胞瘤、胆管癌瘤、绒毛膜癌瘤、精原细胞瘤、胚胎性癌瘤、维尔姆斯瘤(Wilms'tumor)、宫颈癌、睾丸肿瘤、肺癌瘤、非小细胞肺癌瘤、小细胞肺癌瘤、膀胱癌瘤、上皮癌瘤、神经胶质瘤、星形细胞瘤、髓母细胞瘤、颅咽管瘤、室管膜瘤、松果体瘤、血管母细胞瘤、听神经瘤、少突神经胶质瘤、脑膜瘤、黑色素瘤、神经母细胞瘤、视网膜母细胞瘤；甲状腺癌、子宫内膜癌；白血病，例如，急性淋巴细胞性白血病和急性髓细胞性白血病(髓母细胞性白血病、前髓细胞性白血病、髓单核细胞性白血病、单核细胞性白血病和红白血病)；慢性白血病(慢性髓细胞性(粒细胞性)白血病和慢性淋巴细胞性白血病)；和真性红细胞增多症、淋巴瘤(何杰金氏病(Hodgkin's disease)和非何杰金氏病(non-Hodgkin's disease))、多发性骨髓瘤、沃尔登斯特伦巨球蛋白血症(Waldenstrom's macroglobulinemia)和重链病。
在一些实施方案中，所治疗癌症选自：非小细胞肺癌、乳腺癌、胰腺癌、肝癌、前列腺癌、膀胱癌、宫颈癌、甲状腺癌、结肠直肠癌、肝癌和肌癌症。在其它实施方案中，癌症是选自结肠直肠癌、子宫内膜癌、血液癌、甲状腺癌、三重阴性乳腺癌、前列腺癌或黑色素瘤。
本文所考虑的患者通常是人类。然而，患者可为需要癌症治疗的任一哺乳动物。因此，本文所阐述的方法可应用于人类和兽医应用中。
本文所用的术语“治疗”(treating或treatment)指示该方法已至少减轻异常细胞增殖。举例而言，该方法可降低患者中的肿瘤生长的速率，或预防肿瘤的继续生长，或甚至减小肿瘤的大小。
在另一方面中，提供预防动物中的癌症的方法。就此而言，预防表示使暴露于疾病或易感染该疾病但尚未患该疾病或尚未表现出该疾病症状的动物不会发展出该疾病的临床症状。该方法包括向患者给予如本文所阐述的MEK抑制剂和PI3Kβ抑制剂。该方法包括向有需要的患者给予如本文所阐述的RAF抑制剂和PI3Kβ抑制剂。在一个实施例中，预防动物中的癌症的方法包括向该动物给予式(I)化合物或其药学上可接受的盐与选自式(2a)和式(2b)的化合物或其药学上可接受的盐的组合。
抑制MEK和PI3Kβ的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物形式(呈纯形式或适当药物组合物形式)可经由业内已知的任何可接受给药模式和药剂来给予。可(例如)口服、经鼻、肠胃外(静脉内、肌内或皮下)、局部、透皮、阴道内、膀胱内、脑池内或经直肠给予化合物。剂型可为(例如)固体、半固体、冻干粉末或液体剂型，例如片剂、丸剂、软质弹性或硬质明胶胶囊剂、粉末剂、溶液剂、混悬剂、栓剂、气溶胶等，优选地呈适于简单给予精确剂量的单位剂型。特定给予途径是口服，具体地是这样的口服：其中可根据拟治疗疾病的严重程度来调节便利日剂量方案。
在另一方面中，本申请涉及包含式(2a)的MEK抑制剂和式(I)的PI3Kβ抑制剂的组合物。在另一方面中，本申请涉及包含式(2b)的RAF抑制剂和式(I)的PI3Kβ抑制剂的组合物。在一些实施方案中，组合物仅包含上述MEK和PI3Kβ抑制剂。在一些实施方案中，组合物仅包含上述RAF和PI3Kβ抑制剂。在其它实施方案中，组合物是呈固体(例如，粉末剂或片剂)形式，其包含呈固体形式的MEK和PI3Kβ抑制剂和任选的呈固体形式的一种或多种助剂(例如，佐剂)或药物活性化合物。在其它实施方案中，组合物进一步包含业内已知的药学上可接受的载体(也即，媒介物或赋形剂)中的任一种或组合，由此提供液体剂型。在其它实施方案中，组合物是呈固体(例如，粉末剂或片剂)形式，其包含呈固体形式的RAF和PI3Kβ抑制剂和任选的呈固体形式的一种或多种助剂(例如，佐剂)或药物活性化合物。在其它实施方案中，组合物进一步包含业内已知的药学上可接受的载体(也即，媒介物或赋形剂)中的任一种或组合，由此提供液体剂型。
助剂和佐剂可包括(例如)防腐剂、润湿剂、助悬剂、甜味剂、矫味剂、加香剂、乳化剂和分散剂。通常通过各种抗细菌剂和抗真菌剂(例如，对羟基苯甲酸类、氯丁醇、苯酚、山梨酸等)来提供对微生物作用的预防。也可包含等渗剂，例如糖、氯化钠等。可注射药物形式的延长吸收可通过使用延迟吸收的试剂(例如，单硬脂酸铝和明胶)来实现。助剂也可包括润湿剂、乳化剂、pH缓冲剂和抗氧化剂，例如柠檬酸、失水山梨醇单月桂酸酯、三乙醇胺油酸酯、丁基化羟基甲苯等。
适于肠胃外注射的剂型可包含生理学上可接受的无菌水性或非水性溶液、分散液、悬浮液或乳液和用于再构成为无菌可注射溶液或分散液的无菌粉末。适宜水性和非水性载体、稀释剂、溶剂或媒介物的实例包括水、乙醇、多元醇(丙二醇、聚乙二醇、甘油等)和其适宜混合物、植物油(例如橄榄油)和可注射有机酯(例如油酸乙酯)。合适的流动性可例如通过以下方法维持：使用诸如卵磷酯等包衣，在分散液的情况中维持所需粒径，和使用表面活性剂。
用于口服给予的固体剂型包括胶囊剂、片剂、丸剂、粉末剂和颗粒剂。在这种固体剂型中，将活性化合物与至少一种惰性常规赋形剂(或载体)如柠檬酸钠或磷酸二钙或以下物质混合：(a)填充剂或膨胀剂，例如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸，(b)粘合剂，例如纤维素衍生物、淀粉、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯啶酮、蔗糖和阿拉伯树胶，(c)保湿剂，例如甘油，(d)崩解剂，例如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、海藻酸、交联羧甲基纤维素钠、复合硅酸盐和碳酸钠，(e)溶液阻滞剂，例如石蜡，(f)吸收促进剂，例如，季铵化合物，(g)润湿剂，例如，鲸蜡醇和甘油单硬脂酸酯、硬脂酸镁等，(h)吸附剂，例如，高岭土和膨润土，和(i)润滑剂，例如，滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂基硫酸钠或其混合物。在胶囊剂、片剂和丸剂的情形下，这种剂型也可包含缓冲剂。
上述固体剂型可使用包衣和外壳(例如肠溶包衣和其它业内熟知的)来制备。其可含有安抚剂，且可具有这样的组成：使得它们在肠道某一部分中以延迟方式释放一种或多种活性化合物。可使用的包埋组合物的实例为聚合物质和蜡。若合适，则活性化合物也可呈具有一种或多种上述赋形剂的微胶囊化形式。
口服给予的液体剂型包括药学上可接受的乳剂、溶液剂、混悬剂、糖浆剂和酏剂。这种剂型例如通过以下方法制备：将本文所阐述的MEK、RAF或PI3Kβ抑制剂化合物或其药学上可接受的盐和任选的药物佐剂溶解、分散(等等)于以下物质中以由此形成溶液或悬浮液：载体，例如水、盐水、右旋糖水溶液、甘油、乙醇等；增溶剂和乳化剂，例如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄醇、苯甲酸苄基酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺；油，具体为棉籽油、花生油、玉米胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油；甘油、四氢糠醇、聚乙二醇和失水山梨醇的脂肪酸酯；或这些物质的混合物等。
除活性化合物外，混悬剂可含有助悬剂，例如，乙氧基化异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇和失水山梨醇酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝、膨润土、琼脂和黄蓍胶或这些物质的混合物等。
用于直肠给予的组合物为(例如)可通过混合本文所阐述化合物与(例如)适宜非刺激性赋形剂或载体(例如可可脂、聚乙二醇或栓剂蜡)制得的栓剂，这种栓剂在常温下为固体但在体温下为液体且因此在处于适宜体腔内时熔化并在其中释放活性组分。
用于局部给予的剂型可包括(例如)软膏剂、粉末剂、喷雾剂和吸入剂。可在无菌条件下将活性组分与生理学上可接受的载体和任一所需防腐剂、缓冲剂或推进剂混合。也可采用眼用制剂、眼部软膏剂、粉末剂和溶液剂。
通常，取决于预期给予模式，药学上可接受的组合物含有约1重量%至约99重量%本文所阐述化合物或其药学上可接受的盐和99重量%至1重量%药学上可接受的赋形剂。在一个实施例中，组合物具有介于约5重量%与约75重量%之间的本文所阐述化合物或其药学上可接受的盐，且剩余部分是适宜药物赋形剂。
本领域技术人员已知或明了这种剂型的实际制备方法。参见(例如)Remington's Pharmaceutical Sciences，第18版(Mack Publishing公司，Easton,Pa.,1990)。
在一些实施方案中，组合物并不包含一种或多种其它抗癌化合物。在其它实施方案中，组合物包含一种或多种其它抗癌化合物。举例而言，所给予组合物可包含所选用于治疗的肿瘤类型的标准护理剂。
在另一方面中，提供试剂盒。本发明试剂盒包含含有本发明的化合物或组合物的包装。在一个实施方案中，试剂盒包含化合物(I)或其药学上可接受的盐和选自化合物(2a)和化合物(2b)的化合物或其药学上可接受的盐。
词组“包装”是指含有本文所呈现化合物或组合物的任一器皿。在一些实施方案中，包装可为盒子或包裹。用于包装药物产品的包装材料已为本领域技术人员所熟知。药物包装材料的实例包括但不限于瓶、管、吸入器、泵、袋、小瓶、容器、注射器、瓶和适用于所选制剂和预期给予和治疗模式的任一包装材料。
试剂盒也可含有并不含于包装内但附接于包装外侧的物品(例如移液管)。
试剂盒可含有用于将本发明的化合物或组合物给予患者的说明书。试剂盒也可包含由管理机构(例如美国食品与药物管理局(United States Foodand Drug Administration)批准的使用本文化合物的说明书。试剂盒也可含有用于本发明化合物的标签或产品插页。包装和/或任何产品插页本身可由管理机构批准。试剂盒可在包装中包含呈固相或液相(例如所提供的缓冲液)的化合物。试剂盒也可包含用于制备实施这种方法的溶液的缓冲液和用于将液体自一个容器转移至另一容器的移液管。
下文出于阐释目的对实施例进行阐述并阐述本发明的某些具体实施方案。然而，权利要求的范围并不以任一方式由本文所阐述的实施例限制。
附图说明
图1是化合物(I)与化合物(2a)的组合在人类黑色素瘤细胞系UACC-62中的体外活性的等效线代表图。
图2是化合物(I)与化合物(2b)的组合在人类黑色素瘤细胞系UACC-62中的体外活性的等效线代表图。
图3是化合物(I)与化合物(2a)的组合在人类黑色素瘤细胞系WM-266.4中的体外活性的等效线代表图。
图4是化合物(I)与化合物(2b)的组合在人类黑色素瘤细胞系WM-266.4中的体外活性的等效线代表图。
图5提供曲线图，其展示在评估化合物(I)(150mg/kg，每天两次)与化合物(2a)(AZD-6244)(10mg/kg和25mg/kg，每天一次)的组合对于具有人类黑色素瘤肿瘤UACC-62的SCID雌性小鼠的抗肿瘤活性期间的体重变化。
具有白色正方形的曲线对应于对照；具有实线的曲线对应于化合物(I)(150mg/kg，每天两次)；具有虚线和黑色三角形的曲线对应于化合物(2a)(25mg/kg，每天一次)；具有虚线和黑色菱形的曲线对应于化合物(2a)(10mg/kg，每天一次)；具有实线和黑色三角形的曲线对应于化合物(I)(150mg/kg，每天两次)和化合物(2a)(25mg/kg，每天一次)的组合；具有实线和黑色菱形的曲线对应于化合物(I)(150mg/kg，每天两次)和化合物(2a)(10mg/kg，每天一次)的组合；且黑色三角形曲线对应于口服治疗。
图6提供曲线图，其展示化合物(I)(150mg/kg，每天两次)与化合物(2a)(AZD-6244)(10mg/kg和25mg/kg，每天一次)的组合对于具有人类黑色素瘤肿瘤UACC-62的SCID雌性小鼠的抗肿瘤活性。
具有白色正方形的曲线对应于对照；具有实线的曲线对应于化合物(I)(150mg/kg，每天两次)；具有虚线和黑色三角形的曲线对应于化合物(2a)(25mg/kg，每天一次)；具有虚线和黑色菱形的曲线对应于化合物(2a)(10mg/kg，每天一次)；具有实线和黑色三角形的曲线对应于化合物(I)(150mg/kg，每天两次)和化合物(2a)(25mg/kg，每天一次)的组合；具有实线和黑色菱形的曲线对应于化合物(I)(150mg/kg，每天两次)和化合物(2a)(10mg/kg，每天一次)的组合；且黑色三角形曲线对应于口服治疗。
图7提供曲线图，其展示在评估化合物(I)(151.5mg/kg，每天两次)与化合物(2b)(PLX-4032)(50mg/kg和100mg/kg，每天一次)的组合对于具有人类黑色素瘤肿瘤UACC-62的SCID雌性小鼠的抗肿瘤活性期间的体重变化。
具有白色正方形的曲线对应于对照；具有实线的曲线对应于化合物(I)(151.5mg/kg，每天两次)；具有虚线和黑色三角形的曲线对应于化合物(2b)(100mg/kg，每天一次)；具有虚线和黑色菱形的曲线对应于化合物(2b)(50mg/kg，每天一次)；具有实线和黑色三角形的曲线对应于化合物(I)(151.5mg/kg，每天两次)和化合物(2b)(100mg/kg，每天一次)的组合；具有实线和黑色菱形的曲线对应于化合物(I)(151.5mg/kg，每天两次)和化合物(2b)(50mg/kg，每天一次)的组合；且黑色三角形曲线对应于口服治疗。
图8提供曲线图，其展示化合物(I)(151.5mg/kg，每天两次)与化合物(2b)(PLX-4032)(50mg/kg和100mg/kg，每天一次)的组合对于具有人类黑色素瘤肿瘤UACC-62的SCID雌性小鼠的抗肿瘤活性。
具有白色正方形的曲线对应于对照；具有实线的曲线对应于化合物(I)(151.5mg/kg，每天两次)；具有虚线和黑色三角形的曲线对应于化合物(2b)(100mg/kg，每天一次)；具有虚线和黑色菱形的曲线对应于化合物(2b)(50mg/kg，每天一次)；具有实线和黑色三角形的曲线对应于化合物(I)(151.5mg/kg，每天两次)和化合物(2b)(100mg/kg，每天一次)的组合；具有实线和黑色菱形的曲线对应于化合物(I)(151.5mg/kg，每天两次)和化合物(2b)(50mg/kg，每天一次)的组合；且黑色三角形曲线对应于口服治疗。
图9提供曲线图，其展示在评估化合物(I)(150mg/kg，每天两次)与化合物(2a)(AZD-6244)(10mg/kg和25mg/kg，每天一次)的组合对于具有人类黑色素瘤肿瘤WM-266.4的SCID雌性小鼠的抗肿瘤活性期间的体重变化。
具有白色正方形的曲线对应于对照；具有实线的曲线对应于化合物(I)(150mg/kg，每天两次)；具有虚线和黑色三角形的曲线对应于化合物(2a)(25mg/kg，每天一次)；具有虚线和黑色菱形的曲线对应于化合物(2a)(10mg/kg，每天一次)；具有实线和黑色三角形的曲线对应于化合物(I)(150mg/kg，每天两次)和化合物(2a)(25mg/kg，每天一次)的组合；具有实线和黑色菱形的曲线对应于化合物(I)(150mg/kg，每天两次)和化合物(2a)(10mg/kg，每天一次)的组合；且黑色三角形曲线对应于口服治疗。
图10提供曲线图，其展示化合物(I)(150mg/kg，每天两次)与化合物(2a)(AZD-6244)(10mg/kg和25mg/kg，每天一次)的组合对于具有人类黑色素瘤肿瘤WM-266.4的SCID雌性小鼠的抗肿瘤活性。
具有白色正方形的曲线对应于对照；具有实线的曲线对应于化合物(I)(150mg/kg，每天两次)；具有虚线和黑色三角形的曲线对应于化合物(2a)(25mg/kg，每天一次)；具有虚线和黑色菱形的曲线对应于化合物(2a)(10mg/kg，每天一次)；具有实线和黑色三角形的曲线对应于化合物(I)(150mg/kg，每天两次)和化合物(2a)(25mg/kg，每天一次)的组合；具有实线和黑色菱形的曲线对应于化合物(I)(150mg/kg，每天两次)和化合物(2a)(10mg/kg，每天一次)的组合；且黑色三角形曲线对应于口服治疗。
图11提供曲线图，其展示在评估化合物(I)(150mg/kg，每天两次)与化合物(2b)(PLX-4032)(50mg/kg和100mg/kg，每天一次)的组合对于具有人类黑色素瘤肿瘤WM-266.4的SCID雌性小鼠的抗肿瘤活性期间的体重变化。
具有白色正方形的曲线对应于对照；具有实线的曲线对应于化合物(I)(150mg/kg，每天两次)；具有虚线和黑色三角形的曲线对应于化合物(2b)(100mg/kg，每天一次)；具有虚线和黑色菱形的曲线对应于化合物(2b)(50mg/kg，每天一次)；具有实线和黑色三角形的曲线对应于化合物(I)(150mg/kg，每天两次)和化合物(2b)(100mg/kg，每天一次)的组合；具有实线和黑色菱形的曲线对应于化合物(I)(150mg/kg，每天两次)和化合物(2b)(50mg/kg，每天一次)的组合；且黑色三角形曲线对应于口服治疗。
图12提供曲线图，其展示化合物(I)(150mg/kg，每天两次)与化合物(2b)(PLX-4032)(50mg/kg和100mg/kg，每天一次)的组合对于具有人类黑色素瘤肿瘤WM-266.4的SCID雌性小鼠的抗肿瘤活性。
具有白色正方形的曲线对应于对照；具有实线的曲线对应于化合物(I)(150mg/kg，每天两次)；具有虚线和黑色三角形的曲线对应于化合物(2b)(100mg/kg，每天一次)；具有虚线和黑色菱形的曲线对应于化合物(2b)(50mg/kg，每天一次)；具有实线和黑色三角形的曲线对应于化合物(I)(150mg/kg，每天两次)和化合物(2b)(100mg/kg，每天一次)的组合；具有实线和黑色菱形的曲线对应于化合物(I)(150mg/kg，每天两次)和化合物(2b)(50mg/kg，每天一次)的组合；且黑色三角形曲线对应于口服治疗。
图13提供曲线图，其展示在评估化合物(I)(150mg/kg，每天两次)与化合物(2a)(AZD-6244)(10mg/kg和25mg/kg，每天一次)的组合对于具有人类原发性结肠肿瘤CR-IGR-014P的SCID雌性小鼠的抗肿瘤活性期间的体重变化。
具有白色正方形的曲线对应于对照；具有实线的曲线对应于化合物(I)(150mg/kg，每天两次)；具有虚线和黑色三角形的曲线对应于化合物(2a)(25mg/kg，每天一次)；具有虚线和黑色菱形的曲线对应于化合物(2a)(10mg/kg，每天一次)；具有实线和黑色三角形的曲线对应于化合物(I)(150mg/kg，每天两次)和化合物(2a)(25mg/kg，每天一次)的组合；具有实线和黑色菱形的曲线对应于化合物(I)(150mg/kg，每天两次)和化合物(2a)(10mg/kg，每天一次)的组合；且黑色三角形曲线对应于口服治疗。
图14提供曲线图，其展示化合物(I)(150mg/kg，每天两次)与化合物(2a)(AZD-6244)(10mg/kg和25mg/kg，每天一次)的组合对于具有人类原发性结肠肿瘤CR-IGR-014P的SCID雌性小鼠的抗肿瘤活性。
具有白色正方形的曲线对应于对照；具有实线的曲线对应于化合物(I)(150mg/kg，每天两次)；具有虚线和黑色三角形的曲线对应于化合物(2a)(25mg/kg，每天一次)；具有虚线和黑色菱形的曲线对应于化合物(2a)(10mg/kg，每天一次)；具有实线和黑色三角形的曲线对应于化合物(I)(150mg/kg，每天两次)和化合物(2a)(25mg/kg，每天一次)的组合；具有实线和黑色菱形的曲线对应于化合物(I)(150mg/kg，每天两次)和化合物(2a)(10mg/kg，每天一次)的组合；且黑色三角形曲线对应于口服治疗。
实施例
实施若干体外实验以研究在PI3Kβ抑制剂(化合物I)与MEK抑制剂(本文的化合物2a)或与RAF抑制剂(本文的化合物2b)之间对于人类黑色素瘤细胞系UACC-62和WM-266.4(BRAF突变和PTEN缺失)中的细胞增殖的抑制活性的相互作用。
使用如R.Straetemans,(Biometrical Journal,47,2005)中所阐述的射线设计方式来表征在化合物(I)与化合物(2a)或化合物(2b)之间对于两种细胞系的相互作用，该射线设计方式使得可研究混合物中不同有效分数fi的化合物的协同作用，每一射线的有效分数是恒定的。每一组合和每一细胞系的代表性实验呈现于下文中。
实施例1：化合物(I)与化合物(2a)(AZD-6244)的组合在人类黑色素瘤细胞系UACC-62中的体外活性
为评估式(I)的PI3Kβ选择性抑制剂与式(2a)的MEK抑制剂AZD-6244的组合的抗增殖活性，使用人类黑色素瘤细胞系UACC-62(BRAF突变和PTEN缺失)实施实验。在体外组合研究之前，使用UACC-62细胞系研究单个药剂的活性。测试单个药剂的目的在于测定其作用的独立性和测定固定比率药物组合分析(Fixed Ratio Drug Combination assay)的稀释设计。
材料和方法
人类黑色素瘤UACC-62细胞系是购自NCI(批号：0503000)。在补充有10%FBS和2mML-谷氨酰胺的RPMI1640培养基中培养UACC-62细胞。
以30mM的浓度将化合物(I)和化合物(2a)溶于DMSO中。将其在DMSO中连续稀释，且然后在含有10%血清的培养基中稀释50倍，然后以20倍稀释因子添加于细胞上。通过表1中所阐述的射线设计来限定所测试的最终浓度。对照和所有处理孔中的DMSO浓度为0.1%。
表1提供用于实施实施例1研究的射线设计。
射线1：单独的化合物(I)
(I) 30000 10000 3000 1000 300 100 30 10 3 1
(2a) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
射线2(对于3而言≈1)：f=0.09
(I) 30000 10000 3000 1000 300 100 30 10 3 1
(2a) 1000 300 100 30 10 3 1 0.3 0.1 0.03
射线3(对于1而言≈1)：f=0.23
(I) 30000 10000 3000 1000 300 100 30 10 3 1
(2a) 300 100 30 10 3 1 0.3 0.1 0.03 0.01
射线4(对于1而言≈3)：f=0.49
(I) 30000 10000 3000 1000 300 100 30 10 3 1
(2a) 100 30 10 3 1 0.3 0.1 0.03 0.01 0.003
射线5：单独的化合物(2a)
(I) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
(2a) 10000 3000 1000 300 100 30 10 3 1 0.3
将UACC-62细胞以2500个细胞/孔于适当培养基中的96孔板中涂板并在37℃、5%CO2下孵育6小时。以网格方式使用浓度递增的化合物(I)(介于1nM至30,000nM之间)和浓度递增的化合物(2a)(介于0.001nM至10,000nM之间)(取决于给定药物比率)来处理细胞，并孵育96小时。通过以下方法评估细胞生长：根据制造商的规程，使用
Figure BDA0000492414860000231
试剂(Promega)量测细胞内ATP。简而言之，向每一板中添加CellTiterGlo，孵育1小时，然后在MicroBeta发光板读取器上读取发光信号。一式两份运行所有板。至少一式两份运行所有分析。
在使用化合物或化合物组合处理4天并将信号与使用媒介物(DMSO)处理的细胞进行比较之后估计细胞生长的抑制。
根据下列等式计算生长抑制百分比(GI%)：
GI%=100*(1-((X-BG)/(TC-BG))
其中各值定义如下：
X=在单独的化合物A和B或其组合的存在下含有细胞的孔的值
BG=具有培养基且不具有细胞的孔的值
TC=在媒介物(DMSO)的存在下含有细胞的孔的值。
这些量测值使得可使用下列统计学方法来确定潜在协同组合：
应用使用SASV9.2的NLMIXED程序的整体非线性混合模型来同时拟合每一射线的浓度-应答曲线。每一射线i的组合指数
E ( Y ) = E min + E max - E min 1 + exp ( - m log ( Conc IC 50 ) )
和其95%置信区间然后使用下列等式来估计：
C A IC 40 A + C B IC 40 B = K i
其中IC40A和IC40B是获得每一单独化合物的40%抑制所需的化合物A和化合物B的浓度，且CA和CB是获得40%抑制所需的混合物中的化合物A和化合物B的浓度。
在相互作用指数(Ki)的置信区间包括1时，则推断出具有加和作用，在置信区间上限小于1时，推断出具有协同作用，且在置信区间下限高于1时，推断出具有拮抗作用。
等效线代表图(图1)使得可根据由连接射线1至射线5的直线所代表的加和作用情形看到每一射线的位置。位于此线下方的所有射线对应于潜在协同情形，而位于此线上方的所有射线对应于潜在拮抗情形。
体外研究的结果
化合物(I)(作为单一药剂)以3,630nM的IC40抑制UACC-62细胞的增殖。化合物(2a)(作为单一药剂)以27nM的IC40抑制UACC-62细胞的增殖(参见下表2)。
表2：实施例1中每一单独化合物的绝对IC40估计值
使用4参数逻辑模型估计单一药剂的绝对IC40
Figure BDA0000492414860000251
如通过图1中的等效线代表图所阐述，在组合组中，在接近等效浓度(比率1/1(f=0.43)；射线3与比率2/1(f=0.71)；射线4)和化合物(2a)的有效性为化合物(I)的4倍的浓度(比率1/4(f=0.19)；射线2)观察到协同作用，其中Ki分别为0.34[0.24-0.44]、0.54[0.36-0.73]和0.35[0.26-0.44](参见下表3)
这些数据对应于3个独立实验中的代表性研究。对于该三个实验而言，在有效分数f介于0.10与0.80之间时，观察到协同作用或具有协同作用趋势的加和作用。
表3：实施例1中的相互作用表征
Ki指数使得可限定在两种化合物之间所观察到的相互作用。
Figure BDA0000492414860000252
在所研究范围中，在f等于0.19、0.43和0.71时，观察到协同作用。
实施例2：化合物(I)与化合物(2b)的组合在人类黑色素瘤细胞系UACC-62中的体外活性
为评估式(I)的PI3Kβ选择性抑制剂与式(2b)的RAF抑制剂的组合的抗增殖活性，使用人类黑色素瘤细胞系UACC-62(BRAF突变和PTEN缺失)实施实验。在体外组合研究之前，使用UACC-62细胞系研究单个药剂的活性。测试单个药剂的目的在于测定其作用的独立性和测定固定比率药物组合分析的稀释设计。
材料和方法
根据实施例1的材料和方法且遵循下表4中所阐述的射线设计来制备化合物(I)和化合物(2b)溶液。
表4：实施例2的射线设计
射线1：单独的化合物(I)
P1 30000 10000 3000 1000 300 100 30 10 3 1
P2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
射线2(对于3而言≈1)：f=0.31
P1 30000 10000 3000 1000 300 100 30 10 3 1
P2 300 100 30 10 3 1 0.3 0.1 0.03 0.01
射线3(对于1而言≈1)：f=0.59
P1 30000 10000 3000 1000 300 100 30 10 3 1
P2 100 30 10 3 1 0.3 0.1 0.03 0.01 0.003
射线4(对于1而言≈3)：f=0.82
P1 30000 10000 3000 1000 300 100 30 10 3 1
P2 30 10 3 1 0.3 0.1 0.03 0.01 0.003 0.001
射线5；单独的化合物2b
P1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
P2 10 3 1 0.3 0.1 30 10 3 1 0.3
材料和方法与实施例1中所阐述相同。
体外研究的结果
化合物(I)(作为单一药剂)以17,700nM的IC40抑制UACC-62细胞的增殖。化合物(2b)(作为单一药剂)以18nM的IC40抑制UACC-62细胞的增殖(表5)。
表5：实施例2中每一单独化合物的绝对IC40估计值
使用4参数逻辑模型估计单一药剂的绝对IC40
Figure BDA0000492414860000261
如通过图2的等效线图所阐述，在组合射线中，在等效浓度(射线4(f=0.50))和化合物(2b)比化合物(I)更为有效的浓度(比率1/10(f=0.09)，射线2和比率1/3(f=0.24)；射线3)观察到协同作用，其中Ki分别为0.56[0.30-0.81]、0.57[0.40-0.74]和0.38[0.25-0.52](表6)。
表6：实施例2中的相互作用表征
Ki指数使得可限定在两种化合物之间所观察到的相互作用。
Figure BDA0000492414860000262
在所研究范围中，在f等于0.09、0.24和0.50时，观察到协同作用。
这些数据对应于3个独立实验中的代表性研究。对于该三个实验而言，在混合物中化合物(I)和化合物(2b)的所有比例皆获得协同作用或具有协同作用趋势的加和作用。
实施例3：化合物(I)与化合物(2a)的组合在人类黑色素瘤细胞系WM-266-4中的体外活性
为评估PI3Kβ选择性抑制剂化合物(I)与MEK抑制剂化合物(2a)的组合的抗增殖活性，使用人类黑色素瘤细胞系WM-266-4(BRAF突变和PTEN缺失)实施实验。在体外组合研究之前，使用WM-266-4细胞系研究单个药剂的活性。测试单个药剂的目的在于测定其作用的独立性和测定固定比率药物组合分析的稀释设计。使用射线设计方法和有关统计学分析(其评估该组合在不同药物效能比率下的益处)研究化合物(I)与化合物(2a)之间的相互作用表征。
材料和方法
人类黑色素瘤WM-266-4细胞系是购自ATCC(参考编号：CRL-1676，批号：3272826)。在补充有10%FBS和2mML-谷氨酰胺的RPMI1640培养基中培养WM-266-4细胞。
根据实施例1的材料和方法且遵循下表7中所阐述的射线设计来制备化合物(I)和(2a)稀释液。
材料和方法与实施例1中所阐述相同。
表7：实施例3的射线设计方案
射线1：单独的化合物I
化合物(I) 30000 10000 3000 1000 300 100 30 10 3 1
化合物(2a) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
射线2(对于3而言≈1)：f=0.16
化合物(I) 30000 10000 3000 1000 300 100 30 10 3 1
化合物(2a) 3000 1000 300 100 30 10 3 1 0.3 0.1
射线3(对于1而言≈1)：f=0.38
化合物(I) 30000 10000 3000 1000 300 100 30 10 3 1
化合物(2a) 300 300 30 30 3 3 1 0.3 0.1 0.03
射线4(对于1而言≈3)，f=0.66
化合物(I) 30000 10000 3000 1000 300 100 30 10 3 1
化合物(2a) 300 100 30 10 3 1 0.3 0.1 0.03 0.01
射线5：单独的化合物2a
化合物(I) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
化合物(2a) 10000 3000 1000 300 100 30 10 3 1 0.3
体外研究的结果
化合物(I)(作为单一药剂)以834nM的IC40抑制WM-266-4细胞的增殖。化合物(2a)(作为单一药剂)以33nM的IC40抑制WM-266-4细胞的增殖(表8)。
表8：实施例3中每一单独化合物的绝对IC40估计值
使用4参数逻辑模型估计单一药剂的绝对IC40
绝对IC40(nM)
化合物(I) 834.0[409;1259.0]
化合物(2a) 33.5[29.5;37.4]
如通过图3中的等效线代表图所阐述，在组合组中，在等效浓度(比率1/1(f=0.56)；射线3)和化合物(2a)的有效性为化合物(I)的3倍的浓度(比率1/3(f=0.29)；射线2)观察到协同作用，其中Ki分别为0.50[0.34-0.66]和0.43[0.33-0.53]。
在化合物(I)的有效性为化合物(2a)的4倍的范围(射线4(f=0.80))中观察到加和作用，其中Ki为1.01[0.57-1.44](表9)。
表9：实施例3中的相互作用表征
相互作用指数(Ki)使得可限定在两种化合物之间所观察到的相互作用。
f值 Ki(95%置信区间) 相互作用表征
射线2 0.29 0.4340[0.3341;0.5339] 协同作用
射线3 0.56 0.5002[0.3364;0.6640] 协同作用
射线4 0.80 1.0078[0.5734;1.4422] 加和作用
在所研究范围中，在f等于0.29和0.56时，观察到协同作用。
这些数据对应于3个独立实验中的代表性研究。
对于该三个实验而言，在有效分数f介于0.28与0.56之间时，观察到协同作用或具有协同作用趋势的加和作用。
实施例4：化合物(I)与化合物(2b)的组合在人类黑色素瘤细胞系WM-266.4中的体外活性
为评估PI3Kβ选择性抑制剂化合物(I)与RAF抑制剂化合物(2b)的组合的抗增殖活性，使用人类黑色素瘤细胞系WM-266.4(BRAF突变和PTEN缺失)实施实验。在体外组合研究之前，使用WM-266.4细胞系研究单个药剂的活性。测试单个药剂的目的在于测定其作用的独立性和测定固定比率药物组合分析的稀释设计。使用射线设计方法和有关统计学分析(其评估该组合在不同药物效能比率下的益处)研究化合物(I)与化合物(2b)之间的相互作用表征。
材料和方法
人类黑色素瘤WM-266-4细胞系是购自ATCC(参考编号：CRL-1676，批号：3272826)。在补充有10%FBS和2mML-谷氨酰胺的RPMI1640培养基中培养WM-266.4细胞。
根据实施例1的材料和方法且遵循下表10中所阐述的射线设计来制备化合物(I)和(2b)稀释液。
材料和方法与实施例1中所阐述相同。
表10：实施例4的射线设计
射线1：单独的化合物(I)
P1 30000 10000 3000 1000 300 100 30 10 3 1
P2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
射线2(对于3而言≈1)：f=0.29
P1 30000 10000 3000 1000 300 100 30 10 3 1
P2 300 100 30 10 3 1 3 1 0.0 0.1
射线3(对于1而言≈1)：f=0.56
P1 30000 10000 3000 1000 300 100 30 10 3 1
P2 300 30 30 3 3 1 0.3 0.1 0.03 0.01
射线4(对于1而言≈3)，f=0.80
P1 30000 10000 3000 1000 300 100 30 10 3 1
P2 300 100 30 10 3 1 0.3 0.1 0.03 0.01
射线4(二)(对于1而言≈9)，f=0.93
P1 30000 10000 3000 1000 300 100 30 10 3 1
P2 100 30 10 3 1 0.3 0.1 0.03 0.01 0.003
射线5；单独的化合物2b
P1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
P2 10000 3000 1000 300 100 30 10 3 1 0.3
体外研究的结果
化合物(I)(作为单一药剂)以6,688nM的IC40抑制UACC-62细胞的增殖。化合物(2b)(作为单一药剂)以35nM的IC40抑制UACC-62细胞的增殖(表11)。
表11：实施例4中每一单独化合物的绝对IC40估计值
使用4参数逻辑模型估计单一药剂的绝对IC40
绝对IC40(nM)
化合物(I) 6687.6[1809.3;11566]
化合物(2b) 34.9[28.6;41.3]
如通过图4中的等效线代表图所阐述，在组合射线中，在等效浓度(射线4(二)(f=0.62))和化合物(2b)比化合物(I)更为有效的浓度(比率1/19(f=0.05)，射线2；比率1/6(f=0.14)：射线3和比率1/2(f=0.34)：射线4)观察到协同作用，其中Ki分别为0.36[0.17-0.54]、0.55[0.42-0.69]、0.28[0.19-0.37]和0.33[0.20-0.45](表12)。
表12：实施例4中的相互作用表征
相互作用指数(Ki)使得可限定在两种化合物之间所观察到的相互作用。
f值 Ki(95%置信区间) 相互作用表征
射线2 0.05 0.5545[0.4155;0.6936] 协同作用
射线3 0.14 0.2795[0.1923;0.3668] 协同作用
射线4 0.34 0.3279[0.2033;0.4526] 协同作用
射线4(二) 0.62 0.3562[0.1693;0.5431] 协同作用
在所研究范围中，在f等于0.05、0.14、0.34和0.62时，观察到协同作用。
这些数据对应于3个独立实验中的代表性研究。对于该三个实验而言，在有效分数f介于0.05与0.62之间时，观察到协同作用或具有协同作用趋势的加和作用。
体外结果的汇总(实施例1至4)
上述数据显示，选择性PI3Kβ抑制剂(化合物I)可与MEK抑制剂(化合物2a)和RAF抑制剂(化合物2b)协同起作用以增加对于肿瘤适应症中的细胞增殖的抑制活性，这种肿瘤适应症展现PI3Kβ通道活化(经由PTEN缺失)和MAPK通道活化(具体地经由BRAF活化突变)。
实施例5：化合物(I)与化合物(2a)的组合对于具有皮下人类黑色素瘤肿瘤UACC-62的SCID雌性小鼠的体内活性
为评估PI3Kβ选择性抑制剂化合物(I)与MEK抑制剂化合物(2a)的组合的抗肿瘤活性，使用具有人类黑色素瘤肿瘤UACC-62(BRAF突变和PTEN缺失)的雌性SCID小鼠来实施实验。在研究中，测试150mg/kg(每天两次(bid))的化合物(I)与10mg/kg和25mg/kg(每天一次(qd))的化合物(2a)的组合
材料和方法
在Charles River France(Domaine des Oncins,69210L'Arbresle,France)使用自Charles River,USA获得的菌株饲喂CB17/lCR-Prkdc严重复合型免疫缺陷(SCID)/Crl小鼠(8-10周龄)。在Charles RiverUSA(Wilmington,MA,USA)饲喂裸NIH-Foxn1RNU/Crl大鼠(4-5周龄)。在至少5天的适应时间之后开始治疗时，小鼠和大鼠分别在18g和100g以上。使其自由获得食物(UAR参考编号：113,Villemoisson,91160Epinay sur Orge,France)和无菌水。将其置于12小时的明/暗循环下。由实验动物科学与福利(laboratory animalsciences and welfare，LASW)的督导员记录环境条件(包括动物饲养、室温(22℃±2℃)、相对湿度(55%±15%)和照明时间)且将记录存盘。
通过在每个SCID雌性小鼠中经皮下(SC)植入3×106个与50%基质胶混合的细胞来确立人类黑色素瘤UACC-62肿瘤模型。
在12.5%乙醇/12.5%聚山梨酯80/75%等渗葡萄糖(5%水溶液，pH2)的溶液中制备化合物(I)的制剂。将该制剂在室温(RT)储存于黑暗中。储备溶液可在化学上保持稳定7天。每只小鼠的口服(PO)给予的体积为10mL/kg。
在0.5%羟丙基甲基纤维素/0.1%聚山梨酯80的水溶液中制备化合物(2a)的制剂。储备溶液可在室温于黑暗中在化学上保持稳定7天且在给药之前再悬浮。每只小鼠的口服给予的体积为10mL/kg。
于皮下植入肿瘤细胞时，使用酒精或
Figure BDA0000492414860000311
溶液(Alcyon)将小鼠胁腹中的皮肤消毒，且使用23G针头，经皮下单侧接种0.2mL体积的肿瘤细胞悬浮液。
化合物(I)和化合物(2a)和化合物(2b)(呈单一药剂或组合使用)的给药剂量和计划表阐述于结果部分中且详述于下表13至15中。
集合需要开始指定实验的动物，且在第0天单侧植入。对可量测肿瘤实施处理。使实体肿瘤生长至期望体积范围(排除肿瘤不在期望范围内的动物)。然后集合小鼠且随机分配至各种不同治疗组和对照组中。于植入UACC-62细胞肿瘤后第11天时开始治疗，如结果部分和每一表中所指示。基于疗法开始时的体重，以mg/kg形式来表示剂量。每天检查小鼠，且记录不良临床反应。每天将每组小鼠作为整体称重，直至达到重量最低点为止。然后，每周将各组称重一至三次直至实验结束为止。每周使用卡尺量测肿瘤2至3次直至最终宰杀以进行取样时为止、直至肿瘤达到2000mM3为止或直至动物死亡为止(由先出现者决定)。自二维肿瘤量测值估计实体肿瘤体积并根据下列等式进行计算：
肿瘤体积(mm3)=长度(mm)×宽度2(mm2)/2
记录死亡的日期。将存活动物宰杀且对胸腔和腹腔实施宏观检验。
在连续三天期间产生15%体重损失(bwl)(组平均值)、在1天期间产生20%bwl或产生10%或更大药物死亡的剂量可视为过高毒性剂量。动物体重包括肿瘤重量。
主要效能终点是自基线的肿瘤体积变化，其是通过治疗和对照组之间的中值的比率(ΔT/ΔC)来概述。
通过自指定观察日的肿瘤体积减去第一治疗日(分期日)的肿瘤体积来计算每一治疗(T)和对照(C)组中每一动物的肿瘤体积变化且每天皆进行计算。计算治疗组的中值ΔT且计算对照组的中值ΔC。然后计算比率ΔT/ΔC且表示为以下百分比：
ΔT/ΔC=(中值ΔT/中值ΔC)×100
在此模型中，在ΔT/ΔC低于40%时，剂量可视为统计学显著。
在给定剂量的两种产品的组合比单独两种产品的最佳效果(考虑相同剂量)更为有效时，使用术语“治疗协同作用”。为研究治疗协同作用，在自基线的秩转换肿瘤体积变化的双向方差分析之后，实施邓奈特测试(Dunnett's test)以对每一组合与组合中所涉及剂量的两种单一药剂进行比较。在用于SUN4的8.2系统发行版SAS上经由Everstat V5软件和SAS9.2软件实施统计学分析。小于5%的概率(p<0.05)可视为显著。
体内研究的结果
疗法开始时的中值肿瘤负荷为126mm3至144mm3。在肿瘤植入后第11至22天时，分别口服给予(每天两次和每天一次)单一药剂化合物(I)(150mg/kg/adm)和化合物(2a)(25mg/kg/adm和10mg/kg/adm)。在组合组中，将化合物(I)的剂量与化合物(2a)的每一剂量组合，如表13中所展示。
化合物(I)和化合物(2a)(作为单一药剂或组合使用)耐受良好且诱导最小bwl(图5和表13)。
作为单一药剂，化合物(I)(150mg/kg，每天两次)在统计学上并不显著且ΔT/ΔC>40%。25mg/kg(每天一次)的化合物(2a)是有效的(在第22天时，ΔT/ΔC=2%)且在这种测试条件下在10mg/kg的低剂量(每天一次)是有效的(在第22天时，ΔT/ΔC=35%)(图6和表13)。
在组合中，使用化合物(I)和化合物(2a)(25mg/kg和10mg/kg，每天一次)的治疗是有效的(在第22天时，二者的ΔT/ΔC<0%)(图6和表13)。如通过表14所展示，用于整体分析的两种组合皆达到治疗协同作用。也参见表15。
表13：化合物(I)与化合物(2a)的组合对于具有人类UACC-62的SCID雌性小鼠的抗肿瘤活性
Figure BDA0000492414860000321
Figure BDA0000492414860000331
疗法开始时的肿瘤大小为100-256mm3，其中每组的中值肿瘤负荷为144mm3。药物制剂：化合物(I)=乙醇/聚山梨酯80/5%葡萄糖水溶液(12.5/12.5/75)；AZD-6244=0.5%羟丙基甲基纤维素/0.1%PS80水溶液。治疗持续时间：12天。所用缩写：bid=每天治疗两次，HDT=所测试最高剂量，
ΔT/ΔC=在治疗和对照组之间自基线中值的肿瘤体积的变化比率(TVday-TV0)/(CVday-CV0)*100。
a化合物(I)：在第22天时给予一次
表14：化合物(I)与化合物(2a)的组合对于具有人类UACC-62的SCID雌性小鼠的抗肿瘤活性：治疗协同作用测定
Figure BDA0000492414860000332
p值：利用邓奈特测试获得，以在使用自基线的秩转换肿瘤体积变化的重复量测值实施双向Anova之后，对每一组合与组合中所涉及剂量的两种单一药剂进行比较
表15：
Figure BDA0000492414860000341
实施例6：化合物(I)与化合物(2b)的组合对于具有皮下人类黑色素瘤肿瘤UACC-62的SCID雌性小鼠的体内活性
为评估PI3Kβ选择性抑制剂化合物(I)与RAF抑制剂化合物(2b)的组合的抗肿瘤活性，使用具有人类黑色素瘤肿瘤UACC-62(BRAF突变和PTEN缺失)的雌性SCID小鼠来实施实验。在研究中，测试151.5mg/kg(每天两次(bid))的化合物(I)与50mg/kg和100mg/kg(每天一次(qd))的化合物(2b)的组。合。
材料和方法
通过在每个SCID雌性小鼠中经皮下(SC)植入3×106个与50%基质胶混合的细胞来确立人类黑色素瘤UACC-62肿瘤模型。
根据实施例5的材料和方法来制备化合物(I)的制剂。
在90%Klucel(2%水溶液，pH4)中制备化合物(2b)的制剂，随后实施涡旋和磁力搅拌。最终溶液的pH为4(黄色悬浮液)。储备溶液可在室温于黑暗中在化学上稳定7天。每只小鼠的口服给予的体积为10mL/kg。
化合物(I)和化合物(2b)(用作单一药剂或组合使用)的给予剂量和计划表阐述于结果部分中且详述于下表中。
治疗始于在UACC-62细胞肿瘤植入后第8天时，如结果部分和下表16至18中所指示。
此处用于动物管理、肿瘤细胞的皮下植入、研究监测、肿瘤体积、动物死亡和动物体重损失的材料和方法与实施例5中所阐述相同。
所用的主要效能终点与实施例5中所使用相同。
体内研究的结果
疗法开始时的中值肿瘤负荷为125mm3至126mm3。在肿瘤植入后第8至15天时，分别口服给予(每天两次和每天一次)单一药剂化合物(I)(151.5mg/kg/adm)和化合物(2b)(100mg/kg/adm和50mg/kg/adm)。在组合组中，将化合物(I)的剂量与化合物(2b)的每一剂量组合，如表16中所展示。
化合物(I)和化合物(2b)(作为单一药剂或组合使用)耐受良好且诱导最小bwl(图7和表16)。
作为单一药剂，化合物(I)(151.5mg/kg，每天两次)是有效的(在第15天时，ΔT/ΔC=39)。100mg/kg(每天一次)的化合物(2b)是有效的(在第15天时，ΔT/ΔC=20)且在这种测试条件下在50mg/kg的低剂量(每天一次)是有效的(在第15天时，ΔT/ΔC=31)(图8和表16)。
在组合中，使用化合物(I)和化合物(2b)(100mg/kg和50mg/kg，每天一次)的治疗是有效的(分别为，在第15天时ΔT/ΔC=2和在第15天时ΔT/ΔC=11)(图8和表16)。如通过表17所展示，用于整体分析的两种组合皆达到治疗协同作用。也参见表18。
表16：化合物(I)与化合物(2b)的组合对于具有人类UACC-62的SCID雌性小鼠的抗肿瘤活性
疗法开始时的肿瘤大小为80-320mm3，其中每组的中值肿瘤负荷为125-126mm3。药物制剂：化合物I=乙醇/聚山梨酯80/5%葡萄糖水溶液(12.5/12.5/75)；化合物(2b)=2%Klucel水溶液，pH4)。治疗持续时间：8天。
所用缩写：bid=每天治疗两次，ΔT/ΔC=治疗和对照组之间自基线中值的肿瘤体积的变化比率(TVday-TV0)/(CVday-CV0)*100。
a化合物I：在第15天时给予一次
b化合物I给药151.5mg/kg而非150mg/kg。
表17：化合物(I)与化合物(2b)的组合对于具有人类UACC-62的SCID雌性小鼠的抗肿瘤活性：治疗协同作用测定
Figure BDA0000492414860000361
p值：利用邓奈特测试获得，以在使用自基线的秩转换肿瘤体积变化的重复量测值实施双向Anova之后，对每一组合与组合中所涉及剂量的两种单一药剂进行比较
表18.
Figure BDA0000492414860000362
实施例7：化合物(I)与化合物(2a)和(2b)的组合对于具有皮下人类黑色素瘤肿瘤WM-266.4的SCID雌性小鼠的体内活性
为评估PI3Kβ选择性抑制剂化合物(I)与MEK抑制剂化合物(2a)和RAF抑制剂化合物(2b)的组合的抗肿瘤活性，使用具有人类黑色素瘤肿瘤WM-266.4(BRAF突变和PTEN缺失)的雌性SCID小鼠来实施实验。在研究中，测试150mg/kg(每天两次(bid))的化合物(I)与10mg/kg和25mg/kg(每天一次(qd))的化合物(2a)和50mg/kg和100mg/kg(每天一次(qd))的化合物(2b)的组合
材料和方法
通过在每个SCID雌性小鼠中经皮下(SC)植入3×106个与50%基质胶混合的细胞来确立人类黑色素瘤WM-266.4肿瘤模型。
根据实施例5和6的材料和方法来制备化合物(I)、化合物(2a)和化合物(2b)的制剂。
化合物(I)和化合物(2a)和(2b)(用作单一药剂或组合使用)的给予剂量和计划表阐述于结果部分中且详述于下表19至21中。
治疗始于在WM-266.4细胞肿瘤植入后第21天时，如结果部分和每一表中所指示。
此处用于动物管理、肿瘤细胞的皮下植入、研究监测、肿瘤体积、动物死亡和动物体重损失的材料和方法与实施例5中所阐述相同。
所用的主要效能终点与实施例5中所使用相同。
体内研究的结果
疗法开始时的中值肿瘤负荷为144mm3。作为单一药剂，在肿瘤植入后自第21至31天，口服给予(对于化合物(I)而言每天两次且对于化合物(2a)和(2b)而言每天一次)化合物(I)(150mg/kg/adm)、化合物(2a)(25mg/kg/adm和10mg/kg/adm)和化合物(2b)(100mg/kg/adm和50mg/kg/adm)。在组合组中，将化合物(I)的剂量与化合物(2a)和化合物(2b)的每一剂量组合，如表19中所展示。
表19.化合物(I)与化合物(2a)和(2b)的组合对于具有人类WM-266.4的SCID雌性小鼠的抗肿瘤活性
Figure BDA0000492414860000371
Figure BDA0000492414860000381
疗法开始时的肿瘤大小为100-196mm3，其中每组的中值肿瘤负荷为144mm3。药物制剂：化合物(I)：乙醇/聚山梨酯80/pH2的5%葡萄糖水溶液(12.5/12.5/75%)，化合物(2b)=2%Klucel，pH=4，化合物(2a)=0.5%羟丙基甲基纤维素/0.1%PS80水溶液。治疗持续时间：11天。所用缩写：bid=每天治疗两次，ΔT/ΔC=治疗和对照组之间自基线中值的肿瘤体积的变化比率(TVday-TV0)/(CVday-CV0)*100。
a化合物(I)：在第31天时给予一次
b化合物(2a)：在第21天时给予50mg/kg而非25mg/kg和在第21天时给予20mg/kg而非10mg/kg。
化合物(I)与化合物(2a)的组合对于具有人类WM-266.4的SCID雌性小鼠的抗肿瘤活性
作为单一药剂，化合物(I)耐受良好，这是因为bwl与由具有肿瘤的对照小鼠所诱导的bwl相当，而化合物(2a)与对照相比诱导较高bwl。组合使用的化合物(I)和化合物(2a)具有耐受性且诱导与由单独化合物(2a)所诱导的bwl相当的bwl(图9和上表19)。
作为单一药剂，化合物(I)(150mg/kg，每天两次)是有效的(在第31天时，ΔT/ΔC=36)。25mg/kg(每天一次)的化合物(2a)是有效的(在第31天时，ΔT/ΔC=21)且在这种测试条件下在10mg/kg的低剂量(每天一次)是有效的(在第31天时，ΔT/ΔC=36)(图10和上表19)。
在组合中，使用化合物(I)和化合物(2a)(25mg/kg和10mg/kg，每天一次)的治疗是有效的(分别为，在第31天时ΔT/ΔC=2和在第31天时ΔT/ΔC=14)(图10和上表19)。如通过下表20所展示，用于整体分析的两种组合皆达到治疗协同作用。也参见下表21。
化合物(I)与化合物(2b)的组合对于具有人类WM-266.4的SCID雌性小鼠的抗肿瘤活性：
作为单一药剂，化合物(I)和化合物(2b)耐受良好，这是因为bwl与由具有肿瘤的对照小鼠所诱导的bwl相当。组合使用的化合物(I)和化合物(2b)具有耐受性且诱导高于由任一单独单一药剂所诱导bwl的bwl(图11和上表19)。
作为单一药剂，化合物(I)(150mg/kg，每天两次)是有效的(在第31天时，ΔT/ΔC=36)。在这种测试条件下，100mg/kg和50mg/kg(每天一次)的化合物(2b)在统计学上并不显著(在第31天时，ΔT/ΔC>40)(图12和上表19)。
在组合中，使用化合物(I)和化合物(2b)(100mg/kg和50mg/kg，每天一次)的治疗是有效的(分别地，在第31天时ΔT/ΔC=30和35)(图8和上表19)。如由下表20所展示，用于整体分析的化合物(I)与化合物(2b)(100mg/kg，每天一次)的组合达到治疗协同作用。也参见下表21。
表20：化合物(I)与化合物(2a)和(2b)的组合对于具有人类WM-266.4的SCID雌性小鼠的抗肿瘤活性：治疗协同作用测定
Figure BDA0000492414860000391
Figure BDA0000492414860000401
p值：利用邓奈特测试获得，以在使用自基线的秩转换肿瘤体积变化的重复量测值实施双向Anova之后，对每一组合与组合中所涉及剂量的两种单一药剂进行比较
表21
实施例8：化合物(I)与化合物(2a)的组合对于具有皮下人类原发性肿瘤CR-IGR-014P的SCID雌性小鼠的体内活性
为评估PI3Kβ选择性抑制剂化合物(I)与MEK抑制剂化合物(2a)的组合的抗肿瘤活性，使用具有人类结肠原发性肿瘤CR-IGR-014P(BRAF突变和PTEN缺失)异种移植物的雌性SCID小鼠来实施实验。在研究中，测试150mg/kg(每天两次(bid))的化合物(I)与10mg/kg和25mg/kg(每天一次(qd))的化合物(2a)的组合
材料和方法
通过经皮下(SC)植入小肿瘤片段来确立人类原发性结肠癌瘤CR-IGR-014P肿瘤模型并维持于使用系列传代的SCID雌性小鼠中。
根据实施例5的材料和方法来制备化合物(I)和(2a)的制剂。
化合物(I)和化合物(2a)(用作单一药剂或组合使用)的给予剂量和计划表阐述于结果部分中且详述于下表22至24中。
治疗始于在CR-IGR-014P肿瘤片段植入后第20天时，如结果部分和每一表中所指示。
此处用于动物管理、肿瘤细胞的皮下植入、研究监测、肿瘤体积、动物死亡和动物体重损失的材料和方法与实施例5中所阐述相同。
所用的主要效能终点与实施例5中所使用相同。
体内研究的结果
疗法开始时的中值肿瘤负荷为139mm3至144mm3。在肿瘤植入后第20至36天时，分别口服给予(每天两次和每天一次)单一药剂化合物(I)(150mg/kg/adm)和化合物(2a)(25mg/kg/adm和10mg/kg/adm)。在组合组中，将化合物(I)的剂量与化合物(2a)的每一剂量组合，如下表22中所展示。
作为单一药剂，化合物(I)和(2a)耐受良好且诱导最小bwl，且在组合使用药物时出现较高bwl但并无毒性(图13和表22)。
在这种测试条件下，作为单一药剂，化合物(I)(150mg/kg，每天两次)和化合物(2a)(25mg/kg和10mg/kg，每天一次)在统计学上并不显著(ΔT/ΔC>40)(图14和下表22)。
在组合中，使用化合物(I)和化合物(2a)(25mg/kg，每天一次)的治疗是有效的(在第36天时，ΔT/ΔC=28)(图14和表22)。如由下表23所展示，用于整体分析的化合物(I)与化合物(2a)(25mg/kg，每天一次)的组合达到治疗协同作用。也参见下表24。
表22.化合物(I)与化合物(2a)的组合对于具有人类CR-IGR-014P的SCID雌性小鼠的抗肿瘤活性
Figure BDA0000492414860000411
Figure BDA0000492414860000421
疗法开始时的肿瘤大小为100-194mm3，其中每组的中值肿瘤负荷为139-144mm3。药物制剂：化合物(I)=乙醇/聚山梨酯80/5%葡萄糖水溶液(12.5/12.5/75)；化合物(2a)=0.5%羟丙基甲基纤维素/0.1%PS80水溶液。治疗持续时间：17天。所用缩写：bid=每天治疗两次，ΔT/ΔC=治疗和对照组之间自基线中值的肿瘤体积的变化比率(TVday-TV0)/(CVday-CV0)*100。
a化合物(I)：在第36天时给予一次
表23.化合物(I)与化合物(2a)的组合对于具有人类CR-IGR-014P的SCID雌性小鼠的抗肿瘤活性：治疗协同作用测定
Figure BDA0000492414860000422
p值：利用邓奈特测试获得，以在使用自基线的秩转换肿瘤体积变化的重复量测值实施双向Anova之后，对每一组合与组合中所涉及剂量的两种单一药剂进行比较
表24.
Figure BDA0000492414860000431
体内结果的汇总(实施例5至8)
当在BRAF突变和PTEN缺失的UACC-62和WM-266.4肿瘤模型中，测试化合物(I)与MEK抑制剂化合物(2a)和与RAF抑制剂化合物(2b)的组合时，用作单一药剂的药物对于肿瘤生长具有一定影响(不论所用剂量如何)，但药物组合在治疗阶段期间可更为有效地诱导持续肿瘤停滞且达到治疗协同作用。在具有Kras突变和PTEN缺失的患者源异种移植物CR-IGR-014P中，将化合物(I)与MEK抑制剂化合物(2a)组合，也显示治疗协同作用。
总而言之，在具有双重PTEN缺失和BRAF或KRas突变的异种移植物模型中，在与诸如MEK和RAF抑制剂等靶向疗法组合时，选择性PI3Kβ抑制剂化合物(I)触发持续抗肿瘤活性。
这些体外和体内数据证实，使用PI3Kβ抑制剂(且具体地是化合物(I))与MAPK通道抑制剂(作为MEK抑制剂且具体地是化合物(2a)，或作为RAF抑制剂且具体地是化合物(2b))的组合有益于治疗来自不同适应症的肿瘤，这种肿瘤展现PI3Kβ通道活化(经由PTEN缺失)和MAPK通道活化(具体地经由BRAF活化突变或RAS突变)。这些肿瘤可具体地是PTEN缺失/BRAF突变的黑色素瘤。
上述数据显示：
·选择性PI3Kβ抑制剂(化合物I)可与MEK抑制剂(化合物2a)和与RAF抑制剂(化合物2b)协同起作用以增加对于肿瘤适应症中的细胞增殖的抑制活性，这种肿瘤适应症展现PI3Kβ通道活化(经由PTEN缺失)和MAPK通道活化(具体地经由BRAF活化突变)。
·在展现PI3Kβ通道活化(经由PTEN缺失)和MAPK通道活化(具体地经由BRAF活化突变)的肿瘤适应症中，选择性PI3Kβ抑制剂(化合物I)可与MEK抑制剂(化合物2a)和与RAF抑制剂(化合物2b)协同起作用以在肿瘤生长的临床前动物模型中增加抗肿瘤活性，且不会诱导额外毒性。

Claims (37)

1.一种药物组合，其包含：
-式(I)化合物或其药学上可接受的盐，所述式(I)化合物为：
Figure FDA0000492414850000011
和
-至少一种MAPK通道抑制剂或其药学上可接受的盐。
2.如权利要求1的药物组合，其中所述MAPK通道抑制剂是MEK激酶和RAF激酶中的一个或两个的抑制剂。
3.如权利要求2的药物组合，其中所述MAPK通道抑制剂是MEK抑制剂。
4.如权利要求2的药物组合，其中所述MAPK通道抑制剂是RAF抑制剂。
5.如权利要求2的药物组合，其中所述MAPK通道抑制剂是：
-化合物(2a)或其药学上可接受的盐，所述化合物(2a)为：
Figure FDA0000492414850000012
或
-化合物(2b)或其药学上可接受的盐，所述化合物(2b)为：
Figure FDA0000492414850000013
6.如权利要求2的药物组合，其中所述MAPK通道抑制剂是下式的化合物(2a)：
Figure FDA0000492414850000021
或其药学上可接受的盐。
7.如权利要求2的药物组合，其中所述MAPK通道抑制剂是下式的化合物(2b)：
Figure FDA0000492414850000022
或其药学上可接受的盐。
8.如权利要求1至7中任一项的药物组合，其进一步包含药学上可接受的载体。
9.如权利要求1至7中任一项的药物组合，其包含至少一种选自抗癌化合物的其它化合物。
10.一种药剂，其包含如权利要求1至9中任一项的药物组合。
11.一种药物组合物，其包含如权利要求1至9中任一项的药物组合和药学上可接受的赋形剂。
12.如权利要求1至9中任一项的药物组合，其用作药剂。
13.如权利要求1至9中任一项的药物组合，其用于治疗癌症。
14.如权利要求13的组合，其中所述癌症选自：非小细胞肺癌、乳腺癌、胰腺癌、肝癌、前列腺癌、膀胱癌、宫颈癌、甲状腺癌、结肠直肠癌、肝癌、肌癌症、血液学恶性肿瘤、黑色素瘤、子宫内膜癌和胰腺癌。
15.如权利要求13的组合，其中所述癌症选自：结肠直肠癌、子宫内膜癌、血液学恶性肿瘤、甲状腺癌、乳腺癌、黑色素瘤、胰腺癌和前列腺癌。
16.如权利要求13的组合，其中在给予所述式(I)化合物后接着给予所述MAPK通道抑制剂。
17.如权利要求13的组合，其中在给予所述MAPK通道抑制剂后接着给予所述式(I)化合物。
18.如权利要求13的组合，其中在给予所述式(I)化合物后接着给予所述化合物(2a)。
19.如权利要求13的组合，其中在给予所述式(I)化合物后接着给予所述化合物(2b)。
20.如权利要求13的组合，其中在给予所述化合物(2a)后接着给予所述式(I)化合物。
21.如权利要求13的组合，其中在给予所述化合物(2b)后接着给予所述式(I)化合物。
22.如权利要求13的组合，其中所述式(I)化合物和所述MAPK通道抑制剂是以产生减小肿瘤体积的协同效应的量使用。
23.如权利要求13的组合，其中所述式(I)化合物和所述MAPK通道抑制剂是以产生肿瘤停滞的组合效应的量使用。
24.如权利要求13的用于其用途的组合，其中所述癌症选自：非小细胞肺癌、乳腺癌、胰腺癌、肝癌、前列腺癌、膀胱癌、宫颈癌、甲状腺癌、结肠直肠癌、肝癌、肌癌症、血液学恶性肿瘤、黑色素瘤、子宫内膜癌和胰腺癌。
25.如权利要求13的用于其用途的组合，其中所述癌症选自：结肠直肠癌、子宫内膜癌、血液学恶性肿瘤、甲状腺癌、乳腺癌、黑色素瘤、胰腺癌和前列腺癌。
26.如权利要求13的用于其用途的组合，其中在给予所述式(I)化合物后接着给予所述MAPK通道抑制剂。
27.如权利要求13的用于其用途的组合，其中在给予所述MAPK通道抑制剂后接着给予所述式(I)化合物。
28.如权利要求13的用于其用途的组合，其中在给予所述式(I)化合物后接着给予所述化合物(2a)。
29.如权利要求13的用于其用途的组合，其中在给予所述式(I)化合物后接着给予所述化合物(2b)。
30.如权利要求13的用于其用途的组合，其中在给予所述化合物(2a)后接着给予所述式(I)化合物。
31.如权利要求13的用于其用途的组合，其中在给予所述化合物(2b)后接着给予所述式(I)化合物。
32.如权利要求13的用于其用途的组合，其中所述式(I)化合物和所述MAPK通道抑制剂是以产生减小肿瘤体积的协同效应的量使用。
33.如权利要求13的用于其用途的组合，其中所述式(I)化合物和所述MAPK通道抑制剂是以产生肿瘤停滞的组合效应的量使用。
34.一种药物组合，其包含：
-式(I)化合物或其药学上可接受的盐，所述式(I)化合物为：
Figure FDA0000492414850000041
和至少一种选自以下的MAPK通道抑制剂：
-化合物(2a)或其药学上可接受的盐，所述化合物(2a)为：
Figure FDA0000492414850000042
和
-化合物(2b)或其药学上可接受的盐，所述化合物(2b)为：
Figure FDA0000492414850000043
所述药物组合用于治疗癌症。
35.一种产品，其包含：
-式(I)化合物或其药学上可接受的盐，所述式(I)化合物为：
Figure FDA0000492414850000044
和
-至少一种MAPK通道抑制剂或其药学上可接受的盐，
所述产品作为组合制剂供同时、分开或连续用于抗癌疗法中。
36.一种试剂盒，其包含：
-至少一种式(I)化合物或其药学上可接受的盐，所述式(I)化合物为：
Figure FDA0000492414850000051
-至少一种MAPK通道抑制剂或其药学上可接受的盐，
和
-任选的使用说明书。
37.一种试剂盒，其包含：
-至少一种式(I)化合物或其药学上可接受的盐，所述式(I)化合物为：
Figure FDA0000492414850000052
-至少一种选自以下的MAPK通道抑制剂：
化合物(2a)或其药学上可接受的盐，所述化合物(2a)为：
和
化合物(2b)或其药学上可接受的盐，所述化合物(2b)为：
-和任选的使用说明书。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113440616A (zh) * 2020-03-25 2021-09-28 上海科州药物研发有限公司 Ras或raf突变型癌症的联合疗法

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PE20151785A1 (es) * 2013-03-21 2015-12-20 Novartis Ag Terapia de combinacion
MX2015014063A (es) * 2013-04-05 2015-12-11 Sanofi Sa Composicion anti tumoral que comprende un inhibidor selectivo pi3kbeta y un inhibidor selectivo pi3kalfa.
US10111897B2 (en) 2013-10-03 2018-10-30 Duke University Compositions and methods for treating cancer with JAK2 activity
WO2015161230A1 (en) * 2014-04-19 2015-10-22 Massachusetts Institute Of Technology Methods of reducing kinase inhibitor resistance
CA3049926A1 (en) 2017-01-17 2018-07-26 Heparegenix Gmbh Protein kinase inhibitors for promoting liver regeneration or reducing or preventing hepatocyte death
KR101950094B1 (ko) 2017-07-28 2019-02-19 이성재 보릿대 공예품 제작방법

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011001114A1 (fr) * 2009-07-02 2011-01-06 Sanofi-Aventis Nouveaux derives de (6-oxo-1,6-dihydro-pyrimidin-2-yl)-amide, leur preparation et leur utilisation pharmaceutique comme inhibiteurs de phosphorylation d'akt(pkb)

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PL233493B1 (pl) 2002-03-13 2019-10-31 Array Biopharma Inc Związek benzoimidazolowy, jego zastosowanie oraz zawierająca go kompozycja farmaceutyczna
JP5007304B2 (ja) 2005-06-22 2012-08-22 プレキシコン，インコーポレーテッド キナーゼ調節のための化合物および方法，およびその適応症
FR2951169B1 (fr) * 2009-10-09 2011-12-02 Sanofi Aventis Nouveaux derives de (6-oxo-1,6-dihydro-pyrimidin-2-yl)-amide, leur preparation et leur utilisation pharmaceutique comme inhibiteurs de phosphorylation d'akt(pkb)

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011001114A1 (fr) * 2009-07-02 2011-01-06 Sanofi-Aventis Nouveaux derives de (6-oxo-1,6-dihydro-pyrimidin-2-yl)-amide, leur preparation et leur utilisation pharmaceutique comme inhibiteurs de phosphorylation d'akt(pkb)

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Y.N. VASHISHT GOPAL ET AL.: "Basal and Treatment-Induced Activation of AKT Mediates Resistance to Cell Death by AZD6244 (ARRY-142886) in Braf-Mutant Human Cutaneous Melanoma Cells", 《CANCER RES》, vol. 70, no. 21, 1 November 2010 (2010-11-01), pages 8736 - 8747, XP055013950, DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-10-0902 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113440616A (zh) * 2020-03-25 2021-09-28 上海科州药物研发有限公司 Ras或raf突变型癌症的联合疗法

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