TW201315471A

TW201315471A - 使用ＰＩ３Ｋβ抑制劑及包括ＭＥＫ及ＲＡＦ抑制劑之ＭＡＰＫ通道抑制劑之供治療癌症之組合物及方法

Info

Publication number: TW201315471A
Application number: TW101133877A
Authority: TW
Inventors: Carlos Garcia-Echeverria; Loic Vincent; Angela Virone-Oddos
Original assignee: Sanofi Sa
Priority date: 2011-09-16
Filing date: 2012-09-14
Publication date: 2013-04-16

Abstract

本發明係關於包含至少一種MAPK通道抑制劑(包括MEK及RAF抑制劑)及至少一種PI3Kβ抑制劑之組合物，亦及其用於治療癌症之用途。

Description

使用PI3Kβ抑制劑及包括MEK及RAF抑制劑之MAPK通道抑制劑之供治療癌症之組合物及方法

業內持續需要治療癌症之更有效方法及組合物。本發明概言之係關於用於治療癌症之組合物及其用途，且更特定而言係關於包含磷酸肌醇3-激酶β(PI3Kβ或PI3K beta)之抑制劑及MAPK(促分裂原活化蛋白激酶)通道之抑制劑(包括MEK(促分裂原活化蛋白激酶，亦稱為MAP2K)及RAF激酶抑制劑)之組合物。

磷酸肌醇3-激酶(Pl3K)係涉及諸如細胞循環、細胞運動及細胞凋亡等諸多細胞功能之信號傳導分子。PI3K係產生活化若干靶蛋白之第二信使分子之脂質激酶，包括絲胺酸/蘇胺酸激酶，例如PDK1及AKT(亦稱為PKB)。PI3K分為三個種類且種類I包含稱為Pl3Kα、PI3Kβ、PI3Kδ及PI3Kγ之四種不同Pl3K。

Pl3Kβ係IA類成員，其普遍表現且擁有不僅藉由酪胺酸激酶受體活化且亦藉由G蛋白偶合受體活化之獨特特徵(Vanhaesebroeck等人，2001)。

2-{2-[(2S)-2-甲基-2,3-二氫-1H-吲哚-1-基]-2-氧基乙基}-6-(嗎啉-4-基)嘧啶-4(3H)-酮係I類磷酸肌醇-3激酶(PI3K)脂質激酶之PI3Kβ同型異構體之選擇性抑制劑。此化合物有效地靶向PI3Kβ同型異構體(其中IC50為65 nM)且針對其他PI3K同型異構體具有選擇性(其中對於PI3Kα、PI3Kδ及PI3Kγ之IC50分別為1188 nM、465 nM及>10 000 nM)。其抑制Akt以及Akt下游效應子之磷酸化及活化。

在使用此化合物處理之後，具有活化PI3K/AKT通道之腫瘤細胞(例如缺少PTEN之腫瘤細胞)通常經由抑制Akt以及Akt下游效應子之磷酸化、抑制腫瘤細胞增殖及腫瘤細胞死亡誘導來產生反應。

使用MEK激酶抑制劑處理之腫瘤細胞通常經由抑制ERK(細胞外信號調節激酶)之磷酸化、下調Cyclin D1、誘導G1阻止來產生反應，且最終發生細胞凋亡。在藥理學上，MEK抑制完全消除BRAF突變異種移植物腫瘤中之腫瘤生長，而Ras突變腫瘤在大部分情形下僅展現部分抑制(D.B.Solit等人，Nature 2006；439：358-362)。因此，MEK已成為極受關注之用於研發癌症療法之靶。

使用RAF激酶抑制劑處理之腫瘤細胞通常經由抑制MEK及ERK之磷酸化、下調Cyclin D、誘導G1阻止來產生反應，且最終發生細胞凋亡。在藥理學上，BRAF-V600E抑制完全消除BRAF突變異種移植物腫瘤中之腫瘤生長。因此，RAF已成為極受關注之用於研發癌症療法之靶。

1H-苯并咪唑-6-甲醯胺，5-[(4-溴-2-氯苯基)胺基]-4-氟-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基(亦稱為AZD-6244或司美替尼(Selumetinib))係MEK激酶之具有高功效及選擇性(針對其他激酶)之變構抑制劑。司美替尼係用於潛在治療實體腫瘤(例如非小細胞肺癌(NSCLC)、胰腺癌、結腸直腸癌、膽管癌、甲狀腺癌瘤及惡性黑素瘤)之口服MEK1/2抑制劑。

1-丙烷磺醯胺N-[3-[[5-(4-氯苯基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基]羰基]-2,4-二氟苯基](亦稱為PLX 4032或威羅菲尼((Vemurafenib))係RAF激酶之抑制劑。其抑制BRAF(V600E)、野生型BRAF及CRAF-1之活性，其中IC50分別為31 nM、100 nM及48 nM。其針對許多其他激酶顯示選擇性。PLX-4032係可口服利用之小分子，其經研發用於治療具有活化BRAF突變之癌症。其針對具有BRAF V600E突變之黑素瘤細胞系具有明顯抗腫瘤效應，但針對具有野生型BRAF之細胞並非如此。

仍需要更有效地抑制細胞增殖及腫瘤生長同時最小化患者毒性之癌症療法。尤其需要與其他靶定療法組合使用之MEK或RAF抑制劑療法，其會得到更高效率且不會實質上增加或甚至維持或降低業內常用MEK或RAF抑制劑之劑量。

特定而言，本申請案係關於PI3Kβ選擇性抑制劑與MAPK通道調節劑(包括MEK及RAF抑制劑)之組合。

特定而言，本申請案係關於PI3Kβ選擇性抑制劑與MEK抑制劑或RAF抑制劑之組合。

特定而言，本申請案係關於PI3Kβ選擇性抑制劑與MEK抑制劑之組合。

特定而言，本申請案係關於PI3Kβ選擇性抑制劑與RAF抑制劑之組合。

因此，本發明係關於一種醫藥組合，其包含：

- 至少一種式(I)化合物：或其醫藥上可接受之鹽，及- 至少一種MAPK通道抑制劑。

根據一實施例，在本發明之醫藥組合中，MAPK通道抑制劑係選自由MEK及RAF激酶之抑制劑組成之群。

根據一實施例，在本發明之醫藥組合中，MAPK通道抑制劑係MEK激酶及RAF激酶中之一者或兩者之抑制劑。

本發明亦係關於如上文所定義之醫藥組合，其中MAPK通道抑制劑係MEK抑制劑。

根據一實施例，MAPK通道抑制劑係RAF抑制劑。

根據一實施例，MAPK通道抑制劑係BRAF抑制劑。

根據一實施例，如上文所定義之式(I)化合物係PI3K抑制劑，特定而言係PI3Kβ抑制劑。

在一態樣中，提供治療各種癌症之組合物及其用途。

在特定實施例中，提供包括MAPK通道抑制劑(包括MEK及RAF抑制劑)及如上文所定義之具有下列結構式(I)之化合物之組合物。

在一特定實施例中，提供包括MAPK通道抑制劑(包括MEK及RAF抑制劑)及PI3Kβ抑制劑(該PI3Kβ抑制劑具有上述結構式(I))之組合物。

在特定實施例中，提供包括MEK抑制劑或RAF抑制劑及PI3Kβ抑制劑(該PI3Kβ抑制劑具有如上文所定義之式(I))之組合物。

在特定實施例中，提供包括MEK抑制劑及PI3Kβ抑制劑(該PI3Kβ抑制劑具有如上文所定義之式(I))之組合物。

在特定實施例中，提供包括RAF抑制劑及PI3Kβ抑制劑(該PI3Kβ抑制劑具有如上文所定義之式(I))之組合物。

在特定實施例中，提供包括BRAF抑制劑及PI3Kβ抑制劑(該PI3Kβ抑制劑具有如上文所定義之式(I))之組合物。

在上述組合物中，該等MAPK通道抑制劑(包括MEK及RAF抑制劑)可選自熟習此項技術者已知之抑制劑且然後可選自(例如)：

i)MEK抑制劑：AZD6244、RO4987655、RO5126766、TAK-733、MSC1936369B(AS703026)、GSK1120212、BAY86-9766、GDC-0973、GDC-0623、PD325901、ARRY-438162、CI1040、E6201、ARRY300

ii)RAF及/或BRAF選擇性抑制劑：PLX4032、GSK2118436、索拉非尼(Sorafenib)(BAY-43-9006)、BMS-908662(XL-281)、RAF265、RG-7256(RO5212054、PLX3603)、RO5126766、ARQ-736、E-3810、DCC-2036。

根據一具體實施例，在本發明之醫藥組合中，MAPK通道抑制劑係選自由以下組成之群：- 化合物(2a)：或其醫藥上可接受之鹽，及- 化合物(2b)：或其醫藥上可接受之鹽。

在特定實施例中，提供包括具有上式(I)之化合物及上式(2a)之化合物之組合物。

在特定實施例中，提供包括具有上式(I)之化合物上式(2b)之化合物之組合物。在特定實施例中，提供包括具有上式(I)之PI3Kβ抑制劑及具有上式(2a)之MEK抑制劑之組合物。

在特定實施例中，提供包括具有上式(I)之PI3Kβ抑制劑及具有上式(2b)之RAF抑制劑之組合物。

本發明亦係關於如上文所定義之醫藥組合，其中MAPK通道抑制劑係下式之化合物(2a)：或其醫藥上可接受之鹽。

本發明亦係關於如上文所定義之醫藥組合，其中MAPK通道抑制劑係下式之化合物(2b)：或其醫藥上可接受之鹽。

根據一實施例，本發明之醫藥組合可進一步包含醫藥上可接受之載劑。

根據一實施例，本發明之醫藥組合可包含至少一種選自抗癌化合物之另一化合物。

根據一實施例，在本發明之醫藥組合中，可以一定劑量投與化合物(I)，該劑量使得對人類腫瘤進行PI3Kβ靶抑制且預計為約60-600 mg(口服，每天兩次)或120-1200 mg(口服，每天一次)之劑量。

根據一實施例，在本發明之醫藥組合中，MAPK通道抑制劑之量可為10 mg/kg至200 mg/kg(每天一次或每天兩次)。

根據一實施例，在本發明之醫藥組合中，可以約2-200 mg之劑量(每天一次或每天兩次，口服)投與一定量之MEK抑制劑。

根據一實施例，在本發明之醫藥組合中，可以約60-200 mg之劑量(每天兩次，口服)投與RAF抑制劑。

根據一實施例，在本發明之醫藥組合中，以約2-200 mg之劑量(每天一次或每天兩次，口服)投與化合物(2a)抑制劑。

根據一實施例，在本發明之醫藥組合中，以約60-200 mg之劑量(每天兩次，口服)投與化合物(2b)抑制劑。

本發明亦係關於包含如上文所定義之醫藥組合之藥劑。

本發明亦係關於包含如上文所定義之醫藥組合及醫藥上可接受之賦形劑之醫藥組合物。

本發明亦係關於用作藥劑之如上文所定義之醫藥組合。

本發明亦係關於用於治療癌症之如上文所定義之醫藥組合。

根據一實施例，癌症係選自由以下組成之群：非小細胞肺癌、乳癌、胰腺癌、肝癌、前列腺癌、膀胱癌、子宮頸癌、甲狀腺癌、結腸直腸癌、肝癌、肌肉癌、血液惡性病、黑素瘤、子宮內膜癌及胰腺癌。

根據一實施例，癌症係選自由以下組成之群：結腸直腸癌、子宮內膜癌、血液惡性病、甲狀腺癌、乳癌、黑素瘤、胰腺癌及前列腺癌中之任一者。

根據一實施例，本發明係關於如上文所定義之醫藥組合，其用於藉由投與式(I)化合物及投與MAPK通道抑制劑來治療癌症。

根據一實施例，本發明係關於如上文所定義之醫藥組合，其用於藉由投與式(I)化合物及投與化合物(2a)來治療癌症。

根據一實施例，本發明係關於如上文所定義之醫藥組合，其用於藉由投與式(I)化合物及投與化合物(2b)來治療癌症。

根據一實施例，本發明係關於如上文所定義之醫藥組合，其用於藉由投與式(I)化合物隨後投與MAPK通道抑制劑來治療癌症。

根據一實施例，本發明係關於如上文所定義之醫藥組合，其用於藉由投與MAPK通道抑制劑隨後投與式(I)化合物來治療癌症。

根據一實施例，本發明係關於如上文所定義之醫藥組合，其用於藉由投與式(I)化合物隨後投與化合物(2a)來治療癌症。

根據一實施例，本發明係關於如上文所定義之醫藥組合，其用於藉由投與式(I)化合物隨後投與化合物(2b)來治療癌症。

根據一實施例，本發明係關於如上文所定義之醫藥組合，其用於藉由投與化合物(2a)隨後投與式(I)化合物來治療癌症。

根據一實施例，本發明係關於如上文所定義之醫藥組合，其用於藉由投與化合物(2b)隨後投與式(I)化合物來治療癌症。

根據一實施例，本發明係關於用於治療癌症之如上文所定義之醫藥組合，其中式(I)化合物及MAPK通道抑制劑係以產生減小腫瘤體積之協同效應之量使用。

根據一實施例，本發明係關於用於治療癌症之如上文所定義之醫藥組合，其中式(I)化合物及MAPK通道抑制劑係以產生腫瘤停滯之組合效應之量使用。

根據一實施例，本發明係關於如上文所定義之組合，其中癌症係選自由以下組成之群：非小細胞肺癌、乳癌、胰腺癌、肝癌、前列腺癌、膀胱癌、子宮頸癌、甲狀腺癌、結腸直腸癌、肝癌、肌肉癌、血液惡性病、黑素瘤、子宮內膜癌及胰腺癌。

根據一實施例，本發明係關於如上文所定義之組合，其中癌症係選自由以下組成之群：結腸直腸癌、子宮內膜癌、血液惡性病、甲狀腺癌、乳癌、黑素瘤、胰腺癌及前列腺癌。

根據一實施例，本發明係關於如上文所定義之組合，其中在投與式(I)化合物後接著投與MAPK通道抑制劑。

根據一實施例，本發明係關於如上文所定義之組合，其中在投與MAPK通道抑制劑後接著投與式(I)化合物。

根據一實施例，本發明係關於如上文所定義之組合，其中在投與式(I)化合物後接著投與化合物(2a)。

根據一實施例，本發明係關於如上文所定義之組合，其中在投與式(I)化合物後接著投與化合物(2b)。

根據一實施例，本發明係關於如上文所定義之組合，其中在投與化合物(2a)後接著投與式(I)化合物。

根據一實施例，本發明係關於如上文所定義之組合，其中在投與化合物(2b)後接著投與式(I)化合物。

根據一實施例，本發明係關於如上文所定義之組合，其中式(I)化合物及MAPK通道抑制劑係以產生減小腫瘤體積之協同效應之量使用。

根據一實施例，本發明係關於如上文所定義之組合，其中式(I)化合物及MAPK通道抑制劑係使用產生腫瘤停滯之組合效應之量。

本發明亦係關於一種醫藥組合，其包含：- 至少一種如上文所定義之式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽，及- 至少一種選自由以下組成之群之MAPK通道抑制劑：如上文所定義之化合物(2a)或其醫藥上可接受之鹽及如上文所定義之化合物(2b)或其醫藥上可接受之鹽，該醫藥組合用於治療癌症。

本發明亦係關於一種產品，其包含：- 至少一種如上文所定義之式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽，及- 至少一種MAPK通道抑制劑，該產品作為組合製劑同時、單獨或依序用於抗癌療法中。

在上述產品係呈依序用於抗癌療法中之組合製劑之形式時，首先投與式(I)化合物且然後投與MAPK通道抑制劑，或首先投與MAPK且然後投與式(I)化合物。

在另一態樣中，提供治療癌症患者之方法，其包含向該患者投與治療有效量之上文所指定式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽與選自MAPK通道抑制劑(包括MEK及RAF抑制劑)之化合物的組合。

在另一態樣中，提供治療癌症患者之方法，其包含向該患者投與治療有效量之上文所指定式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽與選自MEK抑制劑之化合物的組合。

在另一態樣中，提供治療癌症患者之方法，其包含向該患者投與治療有效量之上文所指定式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽與選自RAF抑制劑之化合物的組合。

在一實施例中，治療癌症患者之方法包含向患者投與一定劑量之MEK或RAF抑制劑及一定劑量之PI3Kβ抑制劑，其中該PI3Kβ抑制劑具有上式(I)。

在一實施例中，治療癌症患者之方法包含向患者投與一定劑量之MEK抑制劑及一定劑量之PI3Kβ抑制劑，其中該MEK抑制劑具有上文所定義之式(2a)，且該PI3Kβ抑制劑具有上文所定義之式(I)。

在一實施例中，治療癌症患者之方法包含向患者投與一定劑量之RAF抑制劑及一定劑量之PI3Kβ抑制劑，其中該RAF抑制劑具有如上文所定義之式(2b)，且該PI3Kβ抑制劑如上文所定義之式(I)。

在一些實施例中，本文所闡述之組合物及使用方法係以協同減小患者腫瘤體積之量(亦即，組合物之量或投與劑量)。在其他實施例中，協同組合達成腫瘤停滯或腫瘤消退。

在另一態樣中，提供套組，其包含：(A)如上文所定義之式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽；(B)如上文所定義之選自由式(2a)及式(2b)組成之群之化合物或其醫藥上可接受之鹽；及視情況(C)使用說明書。

本發明亦係關於一種套組，其包含：- 至少一種如上文所定義之式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽，- 至少一種MAPK通道抑制劑，及- 視情況使用說明書。本發明亦係關於一種套組，其包含：- 至少一種如上文所定義之式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽，- 至少一種選自由以下組成之群之MAPK通道抑制劑：如上文所定義之化合物(2a)或其醫藥上可接受之鹽及如上文所定義之化合物(2b)或其醫藥上可接受之鹽，及- 視情況使用說明書。

自下列詳細說明將明瞭其他目標、特徵及優點。僅出於闡釋意義給出詳細說明及具體實例，此乃因彼等熟習此項技術者自此詳細說明將明瞭屬於本發明精神及範圍內之各種改變及修改。另外，各實例顯示本發明原理且預計不能具體闡釋本發明可應用於對於彼等熟習先前技術者明顯有用之所有實例中。

在一態樣中，提供治療癌症患者之方法。在一實施例中，該方法包含向患者投與如下文進一步所闡述之治療有效量之MAPK通道抑制劑(包括MEK及RAF抑制劑)及治療有效量之PI3Kβ抑制劑。

在一態樣中，提供治療癌症患者之方法。在一實施例中，該方法包含向患者投與如下文進一步所闡述之治療有效量之MEK抑制劑及治療有效量之PI3Kβ抑制劑。

在一態樣中，提供治療癌症患者之方法。在一實施例中，該方法包含向患者投與如下文進一步所闡述之治療有效量之RAF抑制劑及治療有效量之PI3Kβ抑制劑。

在一實施例中，MEK抑制劑具有如上文所定義之結構式(2a)。

式(2a)之MEK抑制劑在本文中稱為「式(2a)化合物」且亦稱為AZD6244。此化合物之製備、性質及MEK抑制能力提供於(例如)國際專利公開案第WO 2003/077914號、特定而言其中之實例10化合物29c及表p37中。WO 2003/077914之全部內容以引用方式併入本文中。式(2a)化合物之中性及鹽形式皆視為屬於本文中。

在一實施例中，RAF抑制劑具有如上文所定義之結構式(2b)。

式(2b)之RAF抑制劑在本文中稱為「式(2b)化合物」且亦稱為PLX4032。化合物(2b)之製備、性質及RAF抑制能力提供於(例如)國際專利公開案第WO 2007/002325號、特定而言其中之實例44化合物P-0956及表2a、2b、2c、2d、2e及2h中。WO 2007/002325之全部內容以引用方式併入本文中。式(2b)化合物之中性及鹽形式皆視為屬於本文中。

在一實施例中，PI3Kβ抑制劑具有如上文所定義之結構式(I)。

式(I)之PI3Kβ抑制劑在本文中稱為「(I)化合物」。化合物(I)之製備、性質及PI3Kβ抑制能力提供於(例如)國際專利公開案第WO 2011/001114號、特定而言其中之實例117及表p 216中。WO 2011/001114之全部內容以引用方式併入本文中。式(I)化合物之中性及鹽形式皆視為屬於本文中。

在一些實施例中，上述化合物可為非溶劑合形式。根據一實施例，上述化合物可呈固體形式。在其他實施例中，該方法中所使用化合物中之一者或兩者呈溶劑合形式。如業內所已知，溶劑合物可使用任一醫藥上可接受之溶劑，例如水、乙醇及諸如此類。一般而言，溶劑合物之存在或其缺乏對於上述MEK或RAF或PI3Kβ抑制劑之效能並不具有實質效應。

儘管式(I)、式(2a)及式(2b)之化合物係以其中性形式繪示，但在一些實施例中，該等化合物係以醫藥上可接受之鹽形式使用。可藉由業內熟知之任一方法來獲得鹽，例如詳盡說明於WO 2011/001114(以引用方式併入本文中)之方法及鹽形式中之任一者。

化合物之「醫藥上可接受之鹽」係指醫藥上可接受且保留藥理學活性之鹽。應理解，醫藥上可接受之鹽無毒。關於適宜醫藥上可接受之鹽可參見Remington's Pharmaceutical Sciences，第17版，Mack Publishing公司，Easton,PA,1985或S.M.Berge等人，「Pharmaceutical Salts」，J.Pharm.Sci.,1977；66：1-19(二者皆以引用方式併入本文中)。

醫藥上可接受之酸加成鹽之實例包括彼等使用無機酸形成者，例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸；以及使用有機酸形成之鹽，例如乙酸、三氟乙酸、丙酸、己酸、環戊烷丙酸、羥乙酸、丙酮酸、乳酸、草酸、馬來酸、丙二酸、琥珀酸、富馬酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、肉桂酸、3-(4-羥基苯甲醯基)苯甲酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、1,2-乙二磺酸、2-羥基乙磺酸、苯磺酸、4-氯苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲苯磺酸、樟腦磺酸、葡庚糖酸、4,4'-亞甲基雙-(3-羥基-2-烯-1-甲酸)、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、第三丁基乙酸、月桂基硫酸、葡糖酸、麩胺酸、羥萘甲酸、水楊酸、硬脂酸、黏康酸、對甲苯磺酸及水楊酸。

在第一組實施例中，同時投與式(2a)之MEK抑制劑與式(I)之PI3Kβ抑制劑。同時投與通常意指兩種化合物在精確相同之時間進入患者中。然而，同時投與亦包括MEK抑制劑及PI3Kβ抑制劑可能在不同時間進入患者中，但時間差足夠小以便在第二所投與化合物進入之前並未將第一所投與化合物提供給患者一段時間以發揮作用。該等延遲時間通常對應於小於1分鐘及更通常而言小於30秒。

在第一組實施例中，同時投與式(2b)之RAF抑制劑與式(I)之PI3Kβ抑制劑。同時投與通常意指兩種化合物在精確相同之時間進入患者中。然而，同時投與亦包括RAF抑制劑及PI3Kβ抑制劑可能在不同時間進入患者中，但時間差足夠小以便在第二所投與化合物進入之前並未將第一所投與化合物提供給患者一段時間以發揮作用。該等延遲時間通常對應於小於1分鐘及更通常而言小於30秒。

在化合物係呈溶液形式之一實例中，可藉由投與含有化合物組合之溶液來達成同時投與。在另一實例中，可採用同時投與單獨溶液，一種溶液含有MEK抑制劑且另一溶液含有PI3Kβ抑制劑。在化合物係呈固體形式之一實例中，可藉由投與含有化合物組合之組合物來達成同時投與。

在化合物係呈溶液形式之一實例中，可藉由投與含有化合物組合之溶液來達成同時投與。在另一實例中，可採用同時投與單獨溶液，一種溶液含有RAF抑制劑且另一溶液含有PI3Kβ抑制劑。在化合物係呈固體形式之一實例中，可藉由投與含有化合物組合之組合物來達成同時投與。

在一實例中，本發明化合物可呈固體形式，特定而言呈錠劑形式。在一實施例中，化合物(I)可以固體形式、特定而言以錠劑形式投與。

在其他實施例中，MEK及PI3Kβ抑制劑並不同時投與。就此而言，在投與第二所投與化合物之前，已將第一所投與化合物提供給患者一段時間以發揮作用。通常，時間差並不延長超過第一所投與化合物在患者中完成其效應之時間，或並不延長超過第一所投與化合物在患者中完全或實質上消除或鈍化之時間。在一組實施例中，在PI3Kβ抑制劑之前投與MEK抑制劑。在另一組實施例中，在MEK抑制劑之前投與PI3Kβ抑制劑。非同時投與中之時間差通常大於1分鐘，且可為(例如)正好、至少、長達或小於5分鐘、10分鐘、15分鐘、30分鐘、45分鐘、60分鐘、2小時、3小時、6小時、9小時、12小時、24小時、36小時或48小時或大於48小時。

在其他實施例中，RAF及PI3Kβ抑制劑並不同時投與。就此而言，在投與第二所投與化合物之前，已將第一所投與化合物提供給患者一段時間以發揮作用。通常，時間差並不延長超過第一所投與化合物在患者中完成其效應之時間，或並不延長超過第一所投與化合物在患者中完全或實質上消除或鈍化之時間。在一組實施例中，在PI3Kβ抑制劑之前投與RAF抑制劑。在另一組實施例中，在RAF抑制劑之前投與PI3Kβ抑制劑。非同時投與中之時間差通常大於1分鐘，且可為(例如)正好、至少、長達或小於5分鐘、10分鐘、15分鐘、30分鐘、45分鐘、60分鐘、2小時、3小時、6小時、9小時、12小時、24小時、36小時或48小時或大於48小時。

在一組實施例中，以治療有效(亦即，治療)量或劑量投與MEK及PI3Kβ抑制劑中之一者或兩者。「治療有效量」係在本身投與患者時有效治療癌症(舉例而言，抑制腫瘤生長，阻止腫瘤生長，或引起腫瘤消退)之MEK或PI3Kβ抑制劑之量。對於特定個體而言在給定情形下證明係「治療有效量」之量可能並不對於100%之以類似方式治療所考慮疾病或病狀之個體皆有效，即使該劑量由熟習此項技術者視為「治療有效量」。對應於治療有效量之化合物量高度取決於癌症類型、癌症階段、所治療患者之年齡及其他因素。一般而言，該等化合物之治療有效量在業內已眾所周知，例如提供於上文所引用之支持性參考文獻中。

在一組實施例中，以治療有效(亦即，治療)量或劑量投與RAF及PI3Kβ抑制劑中之一者或兩者。「治療有效量」係在本身投與患者時有效治療癌症(舉例而言，抑制腫瘤生長，阻止腫瘤生長，或引起腫瘤消退)之RAF或PI3Kβ抑制劑之量。對於特定個體而言在給定情形下證明係「治療有效量」之量可能並不對於100%之以類似方式治療所考慮疾病或病狀之個體皆有效，即使該劑量由熟習此項技術者視為「治療有效量」。對應於治療有效量之化合物量高度取決於癌症類型、癌症階段、所治療患者之年齡及其他因素。一般而言，該等化合物之治療有效量在業內已眾所周知，例如提供於上文所引用之支持性參考文獻中。

在另一組實施例中，以亞治療有效量或劑量投與MEK及PI3Kβ抑制劑中之一者或兩者。亞治療有效量係在本身投與患者時並不隨時間流逝完全抑制既定靶之生物活性之MEK或PI3Kβ抑制劑量。

在另一組實施例中，以亞治療有效量或劑量投與RAF及 PI3Kβ抑制劑中之一者或兩者。亞治療有效量係在本身投與患者時並不隨時間流逝完全抑制既定靶之生物活性之RAF或PI3Kβ抑制劑量。

不論以治療抑或亞治療量投與，MEK抑制劑及PI3Kβ抑制劑之組合應有效治療癌症。若在與PI3Kβ抑制劑組合時該組合有效治療癌症，則MEK抑制劑之亞治療量可為有效量。

不論以治療抑或亞治療量投與，RAF抑制劑及PI3Kβ抑制劑之組合應有效治療癌症。若在與PI3Kβ抑制劑組合時該組合有效治療癌症，則RAF抑制劑之亞治療量可為有效量。

在一些實施例中，化合物組合展現治療癌症、特定而言減小患者腫瘤體積之協同效應(亦即，大於加和效應)。在不同實施例中，端視組合及所用有效量，化合物組合可抑制腫瘤生長，達成腫瘤停滯，或甚至達成實質或完全腫瘤消退。

在一些實施例中，如實例中所展示，在具有腫瘤之小鼠中，可以約100 mg/kg至200 mg/kg之劑量(口服，每天兩次)投與化合物(I)。在具有腫瘤之小鼠中，可以約1 mg/kg至50 mg/kg、較佳地1 mg/kg至30 mg/kg之劑量(口服，每天一次)同時投與化合物(2a)。在具有腫瘤之小鼠中，可以約1 mg/kg至150 mg/kg、較佳地10 mg/kg至100 mg/kg之劑量(口服，每天一次)投與化合物(2b)。

在一些實施例中，如實例中所展示，在具有腫瘤之小鼠中，可以約150 mg/kg之劑量(口服，每天兩次)投與化合物(I)。在具有腫瘤之小鼠中，可以約10 mg/kg或25 mg/kg之劑量(口服，每天一次)同時投與化合物(2a)。在具有腫瘤之小鼠中，可以約50 mg/kg或100 mg/kg之劑量(口服，每天一次)投與化合物(2b)。

根據一實施例，如實例中所展示，可每天兩次投與化合物(I)。

根據一實施例，如實例中所展示，可每天一次投與化合物(2a)及(2b)。

如本文中所使用，術語「約」通常指示某一值之不大於10%、5%或1%之可能變化。舉例而言，「約25 mg/kg」通常指示(以其最廣泛意義)22.5-27.5 mg/kg、亦即25±2.5 mg/kg之值。

儘管MEK、RAF及PI3Kβ抑制劑之量應使得可有效治療癌症，但該等量在組合時較佳地並不對於患者具有過高毒性(亦即，該等量較佳地在如藉由醫學導則所確立之毒性限值內)。在一些實施例中，為預防過高毒性及/或提供更有效癌症治療，提供對於總投與劑量之限制。通常，本文所考慮之量係(例如)每天之量；然而，本文亦考慮半天及兩天或三天之循環。

可使用不同劑量方案來治療癌症。在一些實施例中，在至少3、4、5、6、7、8、9或10天內，每天一次、兩次、三次或四次投與日劑量(例如任一上述實例性劑量)。端視癌症之階段及嚴重程度，可採用較短治療時間(例如，至多5天)以及較高劑量，或可採用較長治療時間(例如，10或更多天或數週或一個月或更長)以及較低劑量。在一些實施例中，每隔一天投與每天一次或兩次之劑量。在一些實施例中，每一劑量含有MEK及PI3Kβ抑制劑二者，而在其他實施例中，每一劑量含有MEK或PI3Kβ抑制劑。在其他實施例中，一些劑量含有MEK及PI3Kβ抑制劑二者，而其他劑量僅含有MEK或PI3Kβ抑制劑。

在一些實施例中，每一劑量含有RAF及PI3Kβ抑制劑二者，而在其他實施例中，每一劑量含有RAF或PI3Kβ抑制劑。在其他實施例中，一些劑量含有RAF及PI3Kβ抑制劑二者，而其他劑量僅含有RAF或PI3Kβ抑制劑。

擬使用本發明治療之癌症類型之實例包括但不限於淋巴瘤、肉瘤及癌瘤，例如，纖維肉瘤、黏液肉瘤、脂肪肉瘤、軟骨肉瘤、骨源性肉瘤、脊索瘤、血管肉瘤、內皮肉瘤、淋巴管肉瘤、滑膜瘤、間皮瘤、淋巴管內皮肉瘤、尤因瘤(Ewing's tumor)、平滑肌肉瘤、橫紋肌肉瘤、結腸癌瘤、胰腺癌、乳癌、卵巢癌、前列腺癌、胃癌、食管癌、鱗狀細胞癌瘤、基底細胞癌瘤、腺癌瘤、汗腺癌瘤、皮脂腺癌瘤、乳頭狀癌瘤、乳頭狀囊腺癌瘤、囊腺癌瘤、髓質癌瘤、支氣管原癌瘤、腎細胞癌瘤、肝細胞瘤、膽管癌瘤、絨膜癌瘤、精原細胞瘤、胚胎性癌瘤、維爾姆斯瘤(Wilms' tumor)、子宮頸癌、睪丸腫瘤、肺癌瘤、非小細胞肺癌瘤、小細胞肺癌瘤、膀胱癌瘤、上皮細胞癌瘤、神經膠質瘤、星形細胞瘤、髓母細胞瘤、顱咽管瘤、室管膜瘤、松果體瘤、血管母細胞瘤、聽神經瘤、少突神經膠質瘤、腦膜瘤、黑素瘤、神經母細胞瘤、視網膜母細胞瘤；甲狀腺癌、子宮內膜癌；白血病，例如，急性淋巴細胞性白血病及急性骨髓細胞性白血病(骨髓母細胞性白血病、前骨髓細胞性白血病、骨髓性單核細胞性白血病、單核細胞性白血病及紅白血病)；慢性白血病(慢性骨髓細胞性(粒細胞性)白血病及慢性淋巴細胞性白血病)；及真性紅細胞增多症、淋巴瘤(何傑金氏病(Hodgkin's disease)及非何傑金氏病(non-Hodgkin's disease))、多發性骨髓瘤、瓦爾登斯特倫氏巨球蛋白血症(Waldenstrom's macroglobulinemia)及重鏈病。

在一些實施例中，所治療癌症係選自由以下組成之群：非小細胞肺癌、乳癌、胰腺癌、肝癌、前列腺癌、膀胱癌、子宮頸癌、甲狀腺癌、結腸直腸癌、肝癌及肌肉癌。在其他實施例中，癌症係選自結腸直腸癌、子宮內膜癌、血液癌、甲狀腺癌、三重陰性乳癌、前列腺癌或黑素瘤。

本文所考慮之患者通常係人類。然而，患者可為需要癌症治療之任一哺乳動物。因此，本文所闡述之方法可應用於人類及獸醫應用中。

本文所用之術語「治療」(treating或treatment)指示該方法已至少減輕異常細胞增殖。舉例而言，該方法可降低患者中之腫瘤生長之速率，或預防腫瘤之繼續生長，或甚至減小腫瘤之大小。

在另一態樣中，提供預防動物中之癌症之方法。就此而言，預防表示使暴露於疾病或易感染該疾病但尚未患該疾病或尚未表現出該疾病症狀之動物不會發展出該疾病的臨床症狀。該方法包括向患者投與如本文所闡述之MEK抑制劑及PI3Kβ抑制劑。該方法包括向有需要之患者投與如本文所闡述之RAF抑制劑及PI3Kβ抑制劑。在一實例中，預防動物中之癌症之方法包括向該動物投與以下組合：式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽與選自由式(2a)及式(2b)組成之群之化合物或其醫藥上可接受之鹽。

抑制MEK及PI3Kβ之化合物或其醫藥上可接受之鹽或溶劑合物形式(呈純形式或適當醫藥組合物形式)可經由投與業內已知藥劑之任一可接受模式來投與。可(例如)經口、經鼻、非經腸(經靜脈內、經肌內或皮下)、局部、經真皮、經陰道內、經膀胱內、經腦池內或經直腸投與化合物。劑型可為(例如)固體、半固體、凍乾粉末或液體劑型，例如錠劑、丸劑、軟質彈性或硬質明膠膠囊、粉末、溶液、懸浮液、栓劑、氣溶膠或諸如此類，較佳地呈適於簡單投與精確劑量之單位劑型。特定投與途徑係經口投與，特定而言係可根據擬治療疾病之嚴重程度來調節便利日劑量方案者。

在另一態樣中，本申請案係關於包括式(2a)之MEK抑制劑及式(I)之PI3Kβ抑制劑之組合物。在另一態樣中，本申請案係關於包括式(2b)之RAF抑制劑及式(I)之PI3Kβ抑制劑之組合物。在一些實施例中，組合物僅包括上述MEK及PI3Kβ抑制劑。在一些實施例中，組合物僅包括上述RAF 及PI3Kβ抑制劑。在其他實施例中，組合物係呈固體(例如，粉末或錠劑)形式，其包括呈固體形式之MEK及PI3Kβ抑制劑及視情況一或多種助劑(例如，佐劑)或呈固體形式之醫藥活性化合物。在其他實施例中，組合物進一步包括業內已知之醫藥上可接受之載劑(亦即，媒劑或賦形劑)中之任一者或組合，由此提供液體劑型。在其他實施例中，組合物係呈固體(例如，粉末或錠劑)形式，其包括呈固體形式之RAF及PI3Kβ抑制劑及視情況一或多種助劑(例如，佐劑)或呈固體形式之醫藥活性化合物。在其他實施例中，組合物進一步包括業內已知之醫藥上可接受之載劑(亦即，媒劑或賦形劑)中之任一者或組合，由此提供液體劑型。

助劑及佐劑可包括(例如)防腐劑、潤濕劑、懸浮劑、甜味劑、矯味劑、加香劑、乳化劑及分配劑。通常藉由各種抗細菌劑及抗真菌劑(例如，對羥基苯甲酸、氯丁醇、苯酚、山梨酸及諸如此類)來提供對微生物作用之預防。亦可包括等滲劑，例如糖、氯化鈉及諸如此類。可注射醫藥形式之延長吸收可藉由使用延遲吸收之試劑(例如，單硬脂酸鋁及明膠)來達成。助劑亦可包括潤濕劑、乳化劑、pH緩衝劑及抗氧化劑，例如檸檬酸、山梨醇酐單月桂酸酯、三乙醇胺油酸酯、丁基化羥基甲苯及諸如此類。

適於非經腸注射之劑型可包含生理學上可接受之無菌水性或非水性溶液、分散液、懸浮液或乳液及用於再構成為無菌可注射用溶液或分散液之無菌粉末。適宜水性及非水性載劑、稀釋劑、溶劑或媒劑之實例包括水、乙醇、多元醇(丙二醇、聚乙二醇、甘油及諸如此類)及其適宜混合物、植物油(例如橄欖油)及可注射有機酯(例如油酸乙酯)。可(例如)藉由下述各項來維持合適流動性：使用諸如卵磷酯等包膜材料，若為分散液則藉由維持所需粒徑，以及使用表面活性劑。

用於經口投與之固體劑型包括膠囊、錠劑、丸劑、粉末及顆粒。在該等固體劑型中，將活性化合物與至少一種常用惰性賦形劑(或載劑，例如檸檬酸鈉或磷酸氫鈣)或以下物質混合：(a)填充劑或增量劑，例如澱粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇及矽酸，(b)黏合劑，例如纖維素衍生物、澱粉、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯啶酮、蔗糖及阿拉伯樹膠，(c)保濕劑，例如甘油，(d)崩解劑，例如瓊脂、碳酸鈣、馬鈴薯或木薯澱粉、海藻酸、交聯羧甲基纖維素鈉、複合矽酸鹽及碳酸鈉，(e)溶液阻滯劑，例如石蠟，(f)吸收促進劑，例如，四級銨化合物，(g)潤濕劑，例如，鯨蠟醇及甘油單硬脂酸酯、硬脂酸鎂及諸如此類，(h)吸附劑，例如，高嶺土及膨潤土，及(i)潤滑劑，例如，滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固體聚乙二醇、月桂基硫酸鈉或其混合物。在膠囊、錠劑及丸劑之情形下，該等劑型亦可包含緩衝劑。

上述固體劑型可使用包衣及外殼(例如腸溶包衣及其他業內熟知者)來製備。其可含有鎮靜劑，且可具有在腸道某一部分中以延遲方式釋放一或多種活性化合物之組成。可使用之包埋組合物之實例為聚合物質及蠟。若合適，則活性化合物亦可呈具有一或多種上述賦形劑之微膠囊化形式。

經口投與之液體劑型包括醫藥上可接受之乳液、溶液、懸浮液、糖漿及酏劑。舉例而言，藉由將本文所闡述之MEK、RAF或PI3Kβ抑制劑化合物或其醫藥上可接受之鹽及可選醫藥佐劑溶解、分散(等等)於以下物質中以由此形成溶液或懸浮液來製備該等劑型，載劑，例如水、鹽水、水性右旋糖、甘油、乙醇及諸如此類；增溶劑及乳化劑，例如乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄醇、苯甲酸苄基酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲醯胺；油，特定而言棉籽油、花生油、玉米胚芽油、橄欖油、蓖麻油及芝麻油；甘油、四氫糠醇、聚乙二醇及山梨醇酐之脂肪酸酯；或該等物質之混合物及諸如此類。

除活性化合物外，懸浮液可含有懸浮劑，例如，乙氧基化異硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇及山梨醇酐酯、微晶纖維素、偏氫氧化鋁、膨潤土、瓊脂及黃蓍膠或該等物質之混合物及諸如此類。

用於直腸投與之組合物為(例如)可藉由混合本文所闡述化合物與(例如)適宜非灌注賦形劑或載劑(例如可可脂、聚乙二醇或栓劑蠟)製得之栓劑，該等栓劑在常溫下為固體但在體溫下為液體且因此在處於適宜體腔內時熔化並在其中釋放活性組份。

用於局部投與之劑型可包括(例如)軟膏、粉末、噴霧劑及吸入劑。可在無菌條件下將活性組份與生理學上可接受之載劑及任一所需防腐劑、緩衝劑或推進劑混合。亦可採用眼科調配物、眼部軟膏、粉末及溶液。

通常，端視預期投與模式，醫藥上可接受之組合物含有約1重量%至約99重量%本文所闡述化合物或其醫藥上可接受之鹽及99重量%至1重量%醫藥上可接受之賦形劑。在一實例中，組合物具有介於約5重量%與約75重量%之間之本文所闡述化合物或其醫藥上可接受之鹽，且剩餘部分係適宜醫藥賦形劑。

彼等熟習此項技術者已知或明瞭該等劑型之實際製備方法。參見(例如)Remington's Pharmaceutical Sciences，第18版(Mack Publishing公司，Easton,Pa.,1990)。

在一些實施例中，組合物並不包括一或多種其他抗癌化合物。在其他實施例中，組合物包括一或多種其他抗癌化合物。舉例而言，所投與組合物可包含所選用於治療之腫瘤類型之標準護理劑。

在另一態樣中，提供套組。本發明套組包括含有本發明之化合物或組合物之封裝。在一實施例中，套組包含化合物(I)或其醫藥上可接受之鹽及選自由化合物(2a)及化合物(2b)組成之群之化合物或其醫藥上可接受之鹽。

片語「封裝」意指含有本文所呈現化合物或組合物之任一器皿。在一些實施例中，封裝可為盒子或包裝。用於封裝醫藥產品之封裝材料已為彼等熟習此項技術者所熟知。醫藥封裝材料之實例包括但不限於瓶、管、吸入器、幫

浦、袋、小瓶、容器、注射器、瓶及適用於所選調配物及預期投與及治療模式之任一封裝材料。

套組亦可含有並不含於封裝內但附接於封裝外側之物品(例如移液管)。

套組可含有用於將本發明之化合物或組合物投與患者之說明書。套組亦可包含由管理機構(例如美國食品與藥物管理局(United States Food and Drug Administration)批准之本文化合物之使用說明書。套組亦可含有用於發明性化合物之標記或產品插頁。封裝及/或任一產品插頁本身可由管理機構批准。套組可在封裝中包括呈固相或液相(例如所提供之緩衝液)之化合物。套組亦可包括用於製備實施該等方法之溶液之緩衝液及用於將液體自一個容器轉移至另一容器之移液管。

下文出於闡釋目的對實例進行闡述並闡述本發明之某些具體實施例。然而，申請專利範圍之範圍並不以任一方式由本文所闡述之實例限制。

實例

實施若干活體外實驗以研究PI3Kβ抑制劑(化合物I)與MEK抑制劑(本文之化合物2a)或與RAF抑制劑(本文之化合物2b)之間對於人類黑素瘤細胞系UACC-62及WM-266.4(BRAF突變及PTEN缺失)中之細胞增殖之抑制活性的相互作用。

使用如R.Straetemans,(Biometrical Journal,47,2005)中所闡述之射線設計方式來表徵兩種細胞系中化合物(I)與化合物(2a)或化合物(2b)之間之相互作用，該射線設計方式使得可研究混合物中不同有效分數fi之化合物之協同作用，每一射線之有效分數係恆定的。每一組合及每一細胞系之代表性實驗呈現於下文中。

實例1：化合物(I)與化合物(2a)(AZD-6244)之組合在人類黑素瘤細胞系UACC-62中之活體外活性

為評估式(I)之PI3Kβ選擇性抑制劑與式(2a)之MEK抑制劑AZD-6244之組合的抗增殖活性，使用人類黑素瘤細胞系UACC-62(BRAF突變及PTEN缺失)實施實驗。在活體外組合研究之前，使用UACC-62細胞系研究個別藥劑之活性。測試個別藥劑之目的在於測定其作用之獨立性及測定固定比率藥物組合分析(Fixed Ratio Drug Combination assay)之稀釋設計。

材料及方法

人類黑素瘤UACC-62細胞系係購自NCI(批號：0503000)。在補充有10% FBS及2 mM L-麩醯胺酸之RPMI1640培養基中培養UACC-62細胞。

以30 mM之濃度將化合物(I)及化合物(2a)溶於DMSO中。將其在DMSO中連續稀釋，且然後在含有10%血清之培養基中稀釋50倍，然後以20倍稀釋因子添加於細胞上。藉由表1中所闡述之射線設計來界定所測試之最終濃度。對照及所有處理孔中之DMSO濃度為0.1%。

表1提供用於實施實例1研究之射線設計。射線1：單獨之化合物(I)

將UACC-62細胞以2500個細胞/孔平鋪於適當培養基中之96孔板中並在37℃、5% CO₂下培育6小時。以網格方式使用增加濃度之化合物(I)(介於1 nM至30,000 nM之間)及增加濃度之化合物(2a)(介於0.001 nM至10,000 nM之間)(端視給定藥物比率)來處理細胞，並培育96小時。藉由根據製造商方案使用CelltiterGlo®試劑(Promega)量測細胞內ATP來評估細胞生長。簡言之，向每一板中添加Cell Titer Glo，培育1小時，然後在MicroBeta發光板讀取器上讀取發光信號。一式兩份運行所有板。至少一式兩份運行所有分析。在使用化合物或化合物組合處理4天並將信號與使用媒劑(DMSO)處理之細胞進行比較之後估計細胞生長之抑制。

根據下列等式計算生長抑制百分比(GI%)：GI%=100^＊(1-((X-BG)/(TC-BG))其中各值定義如下：X=含有在單獨之化合物A及B或其組合存在下之細胞之孔的值

BG=具有培養基且不具有細胞之孔之值

TC=含有在媒劑(DMSO)存在下之細胞之孔之值。

該等量測值使得可使用下列統計學方法來確定潛在協同組合：應用使用SAS V9.2之NLMIXED程序之整體非線性混合模型來同時擬合每一射線之濃度-反應曲線。每一射線i之組合指數及其95%置信區間然後使用下列等式來估計：其中IC40_A及IC40_B係獲得每一單獨化合物之40%抑制所需之化合物A及化合物B之濃度，且C_A及C_B係獲得40%抑制所需之混合物中之化合物A及化合物B之濃度。

在相互作用指數(Ki)之置信區間包括1時，則推斷出具有加和作用，在置信區間上限小於1時，推斷出具有協同作用，且在置信區間下限高於1時，推斷出具有拮抗作用。

等效線代表圖(圖1)使得可根據由連接射線1至射線5之直線所代表之加和作用情形看到每一射線之位置。位於此線下方之所有射線對應於潛在協同情形，而位於此線上方之所有射線對應於潛在拮抗情形。

活體外研究之結果

化合物(I)(作為單一藥劑)以3,630 nM之IC40抑制UACC-62細胞之增殖。化合物(2a)(作為單一藥劑)以27 nM之IC40抑制UACC-62細胞之增殖(參見下表2)。

如藉由圖1中之等效線代表圖所闡述，在組合組中，在接近等效濃度(比率1/1(f=0.43)；射線3與比率2/1(f=0.71)；射線4)及化合物(2a)之有效性為化合物(I)之4倍之濃度(比率¼(f=0.19)；射線2)下觀察到協同作用，其中Ki分別為0.34[0.24-0.44]、0.54[0.36-0.73]及0.35[0.26-0.44](參見下表3)

該等數據對應於3個獨立實驗中之代表性研究。對於該三個實驗而言，在有效分數f介於0.10與0.80之間時，觀察到協同作用或具有協同作用趨勢之加和作用。

在所研究範圍中，在f等於0.19、0.43及0.71時，觀察到協同作用。

實例2：化合物(I)與化合物(2b)之組合在人類黑素瘤細胞系UACC-62中之活體外活性

為評估式(I)之PI3Kβ選擇性抑制劑與式(2b)之RAF抑制劑之組合的抗增殖活性，使用人類黑素瘤細胞系UACC-62(BRAF突變及PTEN缺失)實施實驗。在活體外組合研究之前，使用UACC-62細胞系研究個別藥劑之活性。測試個別藥劑之目的在於測定其作用之獨立性及測定固定比率藥物組合分析之稀釋設計。

材料及方法

根據實例1之材料及方法且遵循下表4中所闡述之射線設計來製備化合物(I)及化合物(2b)溶液。

材料及方法與實例1中所闡述相同。

活體外研究之結果

化合物(I)(作為單一藥劑)以17,700 uM之IC40抑制UACC-62細胞之增殖。化合物(2b)(作為單一藥劑)以18 nM之IC40抑制UACC-62細胞之增殖(表5)。

如藉由圖2之等效線圖所闡述，在組合射線中，在等效濃度(射線4(f=0.50))及化合物(2b)比化合物(I)更為有效之濃度(比率1/10(f=0.09)，射線2及比率1/3(f=0.24)；射線3)下觀察到協同作用，其中Ki分別為0.56[0.30-0.81]、0.57[0.40-0.74]及0.38[0.25-0.52](表6)。

在所研究範圍中，在f等於0.09、0.24及0.50時，觀察到協同作用。

該等數據對應於3個獨立實驗中之代表性研究。對於該三個實驗而言，在混合物中化合物(I)及化合物(2b)之所有比例中皆獲得協同作用或具有協同作用趨勢之加和作用。

實例3：化合物(I)與化合物(2a)之組合在人類黑素瘤細胞系WM-266-4中之活體外活性

為評估PI3Kβ選擇性抑制劑化合物(I)與MEK抑制劑化合物(2a)之組合的抗增殖活性，使用人類黑素瘤細胞系WM-266-4(BRAF突變及PTEN缺失)實施實驗。在活體外組合研究之前，使用WM-266-4細胞系研究個別藥劑之活性。測試個別藥劑之目的在於測定其作用之獨立性及測定固定比率藥物組合分析之稀釋設計。使用射線設計方法及有關統計學分析(其評估該組合在不同藥物效能比率下之益處)研究化合物(I)與化合物(2a)之間之相互作用表徵。

材料及方法

人類黑素瘤WM-266-4細胞系係購自ATCC(參考編號：CRL-1676，批號：3272826)。在補充有10% FBS及2 mM L-麩醯胺酸之RPMI1640培養基中培養WM-266-4細胞。

根據實例1之材料及方法且連循下表7中所闡述之射線設計來製備化合物(I)及(2a)稀釋液。

材料及方法與實例1中所闡述相同。

活體外研究之結果

化合物(I)(作為單一藥劑)以834 nM之IC40抑制WM-266-4細胞之增殖。化合物(2a)(作為單一藥劑)以33 nM之IC40抑制WM-266-4細胞之增殖(表8)。

如藉由圖3中之等效線代表圖所闡述，在組合組中，在等效濃度(比率1/1(f=0.56)；射線3)及化合物(2a)之有效性為化合物(I)之3倍之濃度(比率1/3(f=0.29)；射線2)下觀察到協同作用，其中Ki分別為0.50[0.34-0.66]及0.43[0.33-0.53]。

在化合物(I)之有效性為化合物(2a)之4倍之範圍(射線4(f=0.80))中觀察到加和作用，其中Ki為1.01[0.57-1.44](表9)。

在所研究範圍中，在f等於0.29及0.56時，觀察到協同作用。

該等數據對應於3個獨立實驗中之代表性研究。

對於該三個實驗而言，在有效分數f介於0.28與0.56之間時，觀察到協同作用或具有協同作用趨勢之加和作用。

實例4：化合物(I)與化合物(2b)之組合在人類黑素瘤細胞系WM-266.4中之活體外活性

為評估PI3Kβ選擇性抑制劑化合物(I)與RAF抑制劑化合物(2b)之組合的抗增殖活性，使用人類黑素瘤細胞系WM-266.4(BRAF突變及PTEN缺失)實施實驗。在活體外組合研究之前，使用WM-266.4細胞系研究個別藥劑之活性。測試個別藥劑之目的在於測定其作用之獨立性及測定固定比率藥物組合分析之稀釋設計。使用射線設計方法及有關統計學分析(其評估該組合在不同藥物效能比率下之益處)研究化合物(I)與化合物(2b)之間之相互作用表徵。

材料及方法

人類黑素瘤WM-266-4細胞系係購自ATCC(參考編號：CRL-1676，批號：3272826)。在補充有10% FBS及2 mM L-麩醯胺酸之RPMI1640培養基中培養WM-266.4細胞。

根據實例1之材料及方法且遵循下表10中所闡述之射線設計來製備化合物(I)及(2b)稀釋液。

材料及方法與實例1中所闡述相同。

表10：實例4之射線設計 射線1：單獨之化合物(I)

活體外研究之結果

化合物(I)(作為單一藥劑)以6,688 nM之IC40抑制UACC-62細胞之增殖。化合物(2b)(作為單一藥劑)以35 nM之IC40抑制UACC-62細胞之增殖(表11)。

表11：實例4中每一單獨化合物之絕對IC ₄₀ 估計值 使用4參數對數模型估計單一藥劑之絕對IC₄₀

如藉由圖4中之等效線代表圖所闡述，在組合射線中，在等效濃度(射線4(二)(f=0.62))及化合物(2b)比化合物(I)更為有效之濃度(比率1/19(f=0.05)，射線2；比率1/6(f=0.14)：射線3及比率½(f=0.34)：射線4)下觀察到協同作用，其中Ki分別為0.36[0.17-0.54]、0.55[0.42-0.69]、0.28[0.19-0.37]及0.33[0.20-0.45](表12)。

在所研究範圍中，在f等於0.05、0.14、0.34及0.62時，觀察到協同作用。

該等數據對應於3個獨立實驗中之代表性研究。對於該三個實驗而言，在有效分數f介於0.05與0.62之間時，觀察到協同作用或具有協同作用趨勢之加和作用。

活體外結果之匯總(實例1至4)

上述數據顯示，選擇性PI3Kβ抑制劑(化合物I)可與MEK抑制劑(化合物2a)及RAF抑制劑(化合物2b)協同起作用以增加對於腫瘤適應症中之細胞增殖之抑制活性，該等腫瘤適應症展現PI3Kβ通道活化(經由PTEN缺失)及MAPK通道活化(特定而言經由BRAF活化突變)。

實例5：化合物(I)與化合物(2a)之組合對於具有皮下人類黑素瘤腫瘤UACC-62之SCID雌性小鼠之活體內活性

為評估PI3Kβ選擇性抑制劑化合物(I)與MEK抑制劑化合物(2a)之組合之抗腫瘤活性，使用具有人類黑素瘤腫瘤UACC-62(BRAF突變及PTEN缺失)之雌性SCID小鼠來實施實驗。在研究中，測試150 mg/kg(每天兩次(bid))之化合物(I)與10 mg/kg及25 mg/kg(每天一次(qd))之化合物(2a)之組合

材料及方法

在Charles River France(Domaine des Oncins,69210 L'Arbresle,France)使用自Charles River,USA獲得之菌株飼餵CB17/lCR-Prkdc嚴重複合型免疫缺陷(SCID)/Crl小鼠(8-10週齡)。在Charles River USA(Wilmington,MA,USA)飼餵裸NIH-Foxn1 RNU/Crl大鼠(4-5週齡)。在至少5天之適應時間之後開始治療時，小鼠及大鼠分別在18 g及100 g以上。使其自由獲得食物(UAR參考編號：113,Villemoisson,91160 Epinay sur Orge,France)及無菌水。將其置於12小時之明/暗循環下。由實驗動物科學與福利(laboratory animal sciences and welfare，LASW)之督導員記錄環境條件(包括動物飼養、室溫(22℃±2℃)、相對濕度(55%±15%)及照明時間)且將記錄存檔。

藉由在每個SCID雌性小鼠中經皮下(SC)植入3×10⁶個與50%基質膠混合之細胞來確立人類黑素瘤UACC-62腫瘤模型。

在12.5%乙醇/12.5%聚山梨醇酯80/75%等滲葡萄糖(5%水溶液，pH 2)之溶液中製備化合物(I)之調配物。將該製劑在室溫(RT)下儲存於黑暗中。儲備溶液可在化學上保持穩定7天。每隻小鼠之經口(PO)投與之體積為10 mL/kg。

在0.5%羥丙基甲基纖維素/0.1%聚山梨醇酯80之水溶液中製備化合物(2a)之調配物。儲備溶液可在室溫下於黑暗中在化學上保持穩定7天0.且在投藥之前再懸浮。每隻小鼠之經口投與之體積為10 mL/kg。

於皮下植入腫瘤細胞時，使用酒精或Betadine®溶液(Alcyon)將小鼠脅腹中之皮膚消毒，且使用23 G針頭，經皮下單側接種0.2 mL體積之腫瘤細胞懸浮液。

化合物(I)及化合物(2a)及化合物(2b)(呈單一藥劑或組合使用)之投與劑量及計劃表闡述於結果部分中且詳述於下表13至15中。

集合需要開始指定實驗之動物，且在第0天單側植入。對可量測腫瘤實施處理。使實體腫瘤生長至期望體積範圍(排除腫瘤不在期望範圍內之動物)。然後集合小鼠且隨機分配至各種不同治療組及對照組中。於植入UACC-62細胞腫瘤後第11天時開始治療，如結果部分及每一表中所指示。基於療法開始時之體重，以mg/kg形式來表示劑量。每天檢查小鼠，且記錄不良臨床反應。每天將每一組小鼠整體稱重直至達到重量最低點為止。然後，每週將各組稱重一至三次直至實驗結束為止。每週使用卡尺量測腫瘤2至3次直至最終宰殺以進行取樣時為止、直至腫瘤達到2000 mM³為止或直至動物死亡為止(由先出現者決定)。自二維腫瘤量測值估計實體腫瘤體積並根據下列等式進行計算：腫瘤體積(mm³)=長度(mm)×寬度²(mm²)/2

記錄死亡之日期。將存活動物宰殺且對胸腔及腹腔實施宏觀檢驗。

在連續三天期間產生15%體重損失(bwl)(組平均值)、在1天期間產生20% bwl或產生10%或更大藥物死亡之劑量可視為過高毒性劑量。動物體重包括腫瘤重量。

主要效能終點係自基線之腫瘤體積變化，其係藉由治療及對照組之間之中值之比率(△T/△C)來概述。

藉由自指定觀察日之腫瘤體積減去第一治療日(分期日)之腫瘤體積來計算每一治療(T)及對照(C)組中每一動物之腫瘤體積變化且每天皆進行計算。計算治療組之中值△T且計算對照組之中值△C。然後計算比率△T/△C且表示為以下百分比：△T/△C=(中值△T/中值△C)×100

在此模型中，在△T/△C低於40%時，劑量可視為統計學顯著。

在給定劑量之兩種產品之組合比單獨兩種產品中之最佳者(考慮相同劑量)更為有效時，使用術語「治療協同作用」。為研究治療協同作用，在自基線之秩轉換腫瘤體積變化之雙向方差分析之後，實施鄧奈特測試(Dunnett's test)以對每一組合與組合中所涉及劑量之兩種單一藥劑進行比較。在用於SUN4之8.2系統發行版SAS上經由Everstat V5軟體及SAS 9.2軟體實施統計學分析。小於5%之概率(p<0.05)可視為顯著。

活體內研究之結果

療法開始時之中值腫瘤負荷為126 mm³至144 mm³。在腫瘤植入後第11至22天時，分別經口投與(每天兩次及每天一次)單一藥劑化合物(I)(150 mg/kg/adm)及化合物(2a)(25 mg/kg/adm及10 mg/kg/adm)。在組合組中，將化合物(I)之劑量與化合物(2a)之每一劑量組合，如表13中所展示。

化合物(I)及化合物(2a)(作為單一藥劑或組合使用)耐受良好且誘導最小bwl(圖5及表13)。

作為單一藥劑，化合物(I)(150 mg/kg，每天兩次)在統計學上並不顯著且△T/△C>40%。25 mg/kg(每天一次)之化合物(2a)係有效的(在第22天時，△T/△C=2%)且在該等測試條件下低於10 mg/kg之劑量值(每天一次)係有效的(在第22天時，△T/△C=35%)(圖6及表13)。

在組合中，使用化合物(I)及化合物(2a)(25 mg/kg及10 mg/kg，每天一次)之治療係有效的(在第22天時，二者之△T/△C<0%)(圖6及表13)。如藉由表14所展示，用於整體分析之兩種組合皆達到治療協同作用。亦參見表15。

表13：化合物(I)與化合物(2a)之組合對於具有人類

療法開始時之腫瘤大小為100-256 mm³，其中每組之中值腫瘤負荷為144 mm³。藥物調配物：化合物(I)=乙醇/聚山梨醇酯80/葡萄糖5%於水中(12.5/12.5/75)；AZD-6244=0.5%羥丙基甲基纖維素/0.1% PS80於水中。治療持續時間：12天。所用縮寫：bid=每天治療兩次，HDT=所測試最高劑量，△T/△C=治療及對照組之間自基線中值之腫瘤體積之變化比率(TVday-TV0)/(CVday-CV0)^＊100。

^a化合物(I)：在第22天時一次投與

p值：利用鄧奈特測試獲得，以在使用自基線之秩轉換腫瘤體積變化之重複量測值實施雙向Anova之後，對每一組合與組合中所涉及劑量之兩種單一藥劑進行比較

實例6：化合物(I)與化合物(2b)之組合對於具有皮下人類黑素瘤腫瘤UACC-62之SCID雌性小鼠之活體內活性

為評估PI3Kβ選擇性抑制劑化合物(I)與RAF抑制劑化合物(2b)之組合之抗腫瘤活性，使用具有人類黑素瘤腫瘤UACC-62(BRAF突變及PTEN缺失)之雌性SCID小鼠來實施實驗。在研究中，測試151.5 mg/kg(每天兩次(bid))之化合物(I)與50 mg/kg及100 mg/kg(每天一次(qd))之化合物(2b)之組合。

材料及方法

根據實例5之材料及方法來製備化合物(I)之調配物。

在90% Klucel(2%，存於水中，pH4)製備化合物(2b)之調配物，隨後實施渦旋及磁力攪拌。最終溶液之pH為4(黃色懸浮液)。儲備溶液可在室溫下於黑暗中在化學上穩定7天。每隻小鼠之經口投與之體積為10 mL/kg。

化合物(I)及化合物(2b)(用作單一藥劑或組合使用)之投與劑量及計劃表闡述於結果部分中且詳述於下表中。

治療始於在UACC-62細胞腫瘤植入後第8天時，如結果部分及下表16至18中所指示。

此處用於動物管理、腫瘤細胞之皮下植入、研究監測、腫瘤體積、動物死亡及動物體重損失之材料及方法與實例5中所闡述相同。

所用之主要效能終點與實例5中所使用相同。

活體內研究之結果

療法開始時之中值腫瘤負荷為125 mm³至126 mm³。在腫瘤植入後第8至15天時，分別經口投與(每天兩次及每天一次)單一藥劑化合物(I)(151.5 mg/kg/adm)及化合物(2b)(100 mg/kg/adm及50 mg/kg/adm)。在組合組中，將化合物(I)之劑量與化合物(2b)之每一劑量組合，如表16中所展示。

化合物(I)及化合物(2b)(作為單一藥劑或組合使用)耐受良好且誘導最小bwl(圖7及表16)。

作為單一藥劑，化合物(I)(151.5 mg/kg，每天兩次)係有效的(在第15天時，△T/△C=39)。100 mg/kg(每天一次)之化合物(2b)係有效的(在第15天時，△T/△C=20)且在該等測試條件下低於50 mg/kg之劑量值(每天一次)係有效的(在第15天時，△T/△C=31)(圖8及表16)。

在組合中，使用化合物(I)及化合物(2b)(100 mg/kg及50 mg/kg，每天一次)之治療係有效的(分別為，在第15天時△T/△C=2及在第15天時△T/△C=11)(圖8及表16)。如藉由表17所展示，用於整體分析之兩種組合皆達到治療協同作用。亦參見表18。

療法開始時之腫瘤大小為80-320 mm³，其中每組之中值腫瘤負荷為125-126 mm³。藥物調配物：化合物I=乙醇/聚山梨醇酯80/葡萄糖5%於水中(12.5/12.5/75)；化合物(2b)=Klucel 2%於水中pH4)。治療持續時間：8天。

所用縮寫：bid=每天治療兩次，△T/△C=治療及對照組之間自基線中值之腫瘤體積之變化比率(TVday-TV0)/(CVday-CV0)^＊100。

^a化合物I：在第15天時之一次投與

^b投用151.5 mg/kg而非150 mg/kg之化合物I。

實例7：化合物(I)與化合物(2a)及(2b)之組合對於具有皮下人類黑素瘤腫瘤WM-266.4之SCID雌性小鼠之活體內活性

為評估PI3Kβ選擇性抑制劑化合物(I)與MEK抑制劑化合物(2a)及RAF抑制劑化合物(2b)之組合之抗腫瘤活性，使用具有人類黑素瘤腫瘤WM-266.4(BRAF突變及PTEN缺失)之雌性SCID小鼠來實施實驗。在研究中，測試150 mg/kg(每天兩次(bid))之化合物(I)與10 mg/kg及25 mg/kg(每天一次(qd))之化合物(2a)及50 mg/kg及100 mg/kg(每天一次(qd))之化合物(2b)之組合

材料及方法

藉由在每個SCID雌性小鼠中經皮下(SC)植入3×10⁶個與50%基質膠混合之細胞來確立人類黑素瘤WM-266.4腫瘤模型。

根據實例5及6之材料及方法來製備化合物(I)、化合物(2a)及化合物(2b)之調配物。

化合物(I)及化合物(2a)及(2b)(用作單一藥劑或組合使用)之投與劑量及計劃表闡述於結果部分中且詳述於下表19至21中。

治療始於在WM-266.4細胞腫瘤植入後第21天時，如結果部分及每一表中所指示。

所用之主要效能終點與實例5中所使用相同。

活體內研究之結果

療法開始時之中值腫瘤負荷為144 mm³。作為單一藥劑，在腫瘤植入後自第21至31天，經口投與(對於化合物(I)而言每天兩次且對於化合物(2a)及(2b)而言每天一次)化合物(I)(150 mg/kg/adm)、化合物(2a)(25 mg/kg/adm及10 mg/kg/adm)及化合物(2b)(100 mg/kg/adm及50 mg/kg/adm)。在組合組中，將化合物(I)之劑量與化合物(2a)及化合物(2b)之每一劑量組合，如表19中所展示。

療法開始時之腫瘤大小為100-196 mm³，其中每組之中值腫瘤負荷為144 mm³。藥物調配物：化合物(I)：乙醇/聚山梨醇酯80/葡萄糖5%於水中pH2(12.5/12.5/75%)，化合物(2b)=Klucel 2%於水中pH4，化合物(2a)=0.5%羥丙基甲基纖維素/0.1% PS80於水中。治療持續時間：11天。所用縮寫：bid=每天治療兩次，△T/△C=治療及對照組之間自基線中值之腫瘤體積之變化比率(TVday-TV0)/(CVday-CV0)^＊100。

^a化合物(I)：在第31天時之一次投與

^b化合物(2a)：在第21天時投與50 mg/kg而非25 mg/kg及在第21天時投與20 mg/kg而非10 mg/kg。

化合物(I)與化合物(2a)之組合對於具有人類WM-266.4之SCID雌性小鼠之抗腫瘤活性

作為單一藥劑，化合物(I)耐受良好，此乃因bwl與藉由具有腫瘤之對照小鼠所誘導者相當，而化合物(2a)與對照相比誘導較高bwl。組合使用之化合物(I)及化合物(2a)具有耐受性且誘導與由單獨化合物(2a)所誘導者相當之bwl(圖9及上表19)。

作為單一藥劑，化合物(I)(150 mg/kg，每天兩次)係有效的(在第31天時，△T/△C=36)。25 mg/kg(每天一次)之化合物(2a)係有效的(在第31天時，△T/△C=21)且在該等測試條件下低於10 mg/kg之劑量值(每天一次)係有效的(在第31天時，△T/△C=36)(圖10及上表19)。

在組合中，使用化合物(I)及化合物(2a)(25 mg/kg及10 mg/kg，每天一次)之治療係有效的(分別為，在第31天時△T/△C=2及在第31天時△T/△C=14)(圖10及上表19)。如藉由下表20所展示，用於整體分析之兩種組合皆達到治療協同作用。亦參見下表21。

化合物(I)與化合物(2b)之組合對於具有人類WM-266.4之SCID雌性小鼠之抗腫瘤活性

作為單一藥劑，化合物(I)及化合物(2b)耐受良好，此乃因bwl與由具有腫瘤之對照小鼠所誘導者相當。組合使用之化合物(I)及化合物(2b)具有耐受性且誘導高於由任一單獨單一藥劑所誘導者之bwl(圖11及上表19)。

作為單一藥劑，化合物(I)(150 mg/kg，每天兩次)係有效的(在第31天時，△T/△C=36)。在該等測試條件下，100 mg/kg及50 mg/kg(每天一次)之化合物(2b)在統計學上並不顯著(在第31天時，△T/△C>40)(圖12及上表19)。

在組合中，使用化合物(I)及化合物(2b)(100 mg/kg及50 mg/kg，每天一次)之治療係有效的(分別為，在第31天時△T/△C=30及35)(圖8及上表19)。如由下表20所展示，用於整體分析之化合物(I)與化合物(2b)(100 mg/kg，每天一次)之組合達到治療協同作用。亦參見下表21。

實例8：化合物(I)與化合物(2a)之組合對於具有皮下人類原發性腫瘤CR-IGR-014P之SCID雌性小鼠之活體內活性

為評估PI3Kβ選擇性抑制劑化合物(I)與MEK抑制劑化合物(2a)之組合之抗腫瘤活性，使用具有人類結腸原發性腫瘤CR-IGR-014P(BRAF突變及PTEN缺失)異種移植物之雌性SCID小鼠來實施實驗。在研究中，測試150 mg/kg(每天兩次(bid))之化合物(I)與10 mg/kg及25 mg/kg(每天一次(qd))之化合物(2a)之組合

材料及方法

藉由經皮下(SC)植入小腫瘤片段來確立人類原發性結腸癌瘤CR-IGR-014P腫瘤模型並維持於使用系列傳代之SCID雌性小鼠中。

根據實例5之材料及方法來製備化合物(I)及(2a)之調配物。

化合物(I)及化合物(2a)(用作單一藥劑或組合使用)之投與劑量及計劃表闡述於結果部分中且詳述於下表22至24中。

治療始於在CR-IGR-014P腫瘤片段植入後第20天時，如結果部分及每一表中所指示。

所用之主要效能終點與實例5中所使用相同。

活體內研究之結果

療法開始時之中值腫瘤負荷為139 mm³至144 mm³。在腫瘤植入後第20至36天時，分別經口投與(每天兩次及每天一次)單一藥劑化合物(I)(150 mg/kg/adm)及化合物(2a)(25 mg/kg/adm及10 mg/kg/adm)。在組合組中，將化合物(I)之劑量與化合物(2a)之每一劑量組合，如下表22中所展示。

作為單一藥劑，化合物(I)及(2a)耐受良好且誘導最小bwl，且在組合使用藥物時出現較高bwl但並無毒性(圖13及表22)。

在該等測試條件下，作為單一藥劑，化合物(I)(150 mg/kg，每天兩次)及化合物(2a)(25 mg/kg及10 mg/kg，每天一次)在統計學上並不顯著(△T/△C>40)(圖14及下表22)。

在組合中，使用化合物(I)及化合物(2a)(25 mg/kg，每天一次)之治療係有效的(在第36天時，△T/△C=28)(圖14及表22)。如由下表23所展示，用於整體分析之化合物(I)與化合物(2a)(25 mg/kg，每天一次)之組合達到治療協同作用。亦參見下表24。

療法開始時之腫瘤大小為100-194 mm³，其中每組之中值腫瘤負荷為139-144 mm³。藥物調配物：化合物(I)=乙醇/聚山梨醇酯80/葡萄糖5%於水中(12.5/12.5/75)；化合物(2a)=0.5%羥丙基甲基纖維素/0.1% PS80於水中。治療持續時間：17天。所用縮寫：bid=每天治療兩次，△T/△C=治療及對照組之間自基線中值之腫瘤體積之變化比率(TVday-TV0)/(CVday-CV0)^＊100。

^a化合物(I)：在第36天時之一次投與

活體內結果之匯總(實例5至8)

在BRAF突變及PTEN缺失之UACC-62及WM-266.4腫瘤模型中，測試化合物(I)與MEK抑制劑化合物(2a)及與RAF抑制劑化合物(2b)之組合，用作單一藥劑之藥物對於腫瘤生長具有一定影響(不論所用劑量如何)，但藥物組合在治療階段期間可更為有效地誘導持續腫瘤停滯且達到治療協同作用。在將化合物(I)與MEK抑制劑化合物(2a)組合之具有Kras突變及PTEN缺失之患者源異種移植物CR-IGR-014P中，亦顯示治療協同作用。

總而言之，在與諸如MEK及RAF抑制劑等靶定療法組合時，選擇性PI3Kβ抑制劑化合物(I)在具有雙重PTEN缺失及BRAF或KRas突變之異種移植物模型中觸發持續抗腫瘤活性。

該等活體外及活體內數據證實，使用PI3Kβ抑制劑(且特定而言係化合物(I))與MAPK通道抑制劑(作為MEK抑制劑且特定而言係化合物(2a)，或作為RAF抑制劑且特定而言係化合物(2b))之組合有益於治療來自不同適應症之腫瘤，該等腫瘤展現PI3Kβ通道活化(經由PTEN缺失)及MAPK通道活化(特定而言經由BRAF活化突變或RAS突變)。該等腫瘤可特定而言係PTEN缺失/BRAF突變之黑素瘤。

上述數據顯示：

‧選擇性PI3Kβ抑制劑(化合物I)可與MEK抑制劑(化合物2a)及與RAF抑制劑(化合物2b)協同起作用以增加對於腫瘤適應症中之細胞增殖之抑制活性，該等腫瘤適應症展現PI3Kβ通道活化(經由PTEN缺失)及MAPK通道活化(特定而言經由BRAF活化突變)。

‧選擇性PI3Kβ抑制劑(化合物I)可與MEK抑制劑(化合物2a)及與RAF抑制劑(化合物2b)協同起作用以增加腫瘤生長之臨床前動物模型、腫瘤適應症(其展現PI3Kβ通道活化(經由PTEN缺失)及MAPK通道活化(特定而言經由BRAF活化突變))之抗腫瘤活性，且不會誘導額外毒性。

圖1係化合物(I)與化合物(2a)之組合在人類黑素瘤細胞系UACC-62中之活體外活性之等效線代表圖。

圖2係化合物(I)與化合物(2b)之組合在人類黑素瘤細胞系UACC-62中之活體外活性之等效線代表圖。

圖3係化合物(I)與化合物(2a)之組合在人類黑素瘤細胞系WM-266.4中之活體外活性之等效線代表圖。

圖4係化合物(I)與化合物(2b)之組合在人類黑素瘤細胞系WM-266.4中之活體外活性之等效線代表圖。

圖5提供展示在評估化合物(I)(150 mg/kg，每天兩次)與化合物(2a)(AZD-6244)(10 mg/kg及25 mg/kg，每天一次)之組合對於具有人類黑素瘤腫瘤UACC-62之SCID雌性小鼠之抗腫瘤活性期間體重變化的圖線。

具有白色正方形之曲線對應於對照；具有實線之曲線對應於化合物(I)(150 mg/kg，每天兩次)；具有虛線及黑色三角形之曲線對應於化合物(2a)(25 mg/kg，每天一次)；具有虛線及黑色菱形之曲線對應於化合物(2a)(10 mg/kg，每天一次)；具有實線及黑色三角形之曲線對應於化合物(I)(150 mg/kg，每天兩次)及化合物(2a)(25 mg/kg，每天一次)之組合；具有實線及黑色菱形之曲線對應於化合物(I)(150 mg/kg，每天兩次)及化合物(2a)(10 mg/kg，每天一次)之組合；且黑色三角形曲線對應於口服治療。

圖6提供展示化合物(I)(150 mg/kg，每天兩次)與化合物(2a)(AZD-6244)(10 mg/kg及25 mg/kg，每天一次)之組合對於具有人類黑素瘤腫瘤UACC-62之SCID雌性小鼠之抗腫瘤活性之圖線。

圖7提供展示在評估化合物(I)(151.5 mg/kg，每天兩次)與化合物(2b)(PLX-4032)(50 mg/kg及100 mg/kg，每天一次)之組合對於具有人類黑素瘤腫瘤UACC-62之SCID雌性小鼠之抗腫瘤活性期間體重變化的圖線。

具有白色正方形之曲線對應於對照；具有實線之曲線對應於化合物(I)(151.5 mg/kg，每天兩次)；具有虛線及黑色三角形之曲線對應於化合物(2b)(100 mg/kg，每天一次)；具有虛線及黑色菱形之曲線對應於化合物(2b)(50 mg/kg，每天一次)；具有實線及黑色三角形之曲線對應於化合物(I)(151.5 mg/kg，每天兩次)及化合物(2b)(100 mg/kg，每天一次)之組合；具有實線及黑色菱形之曲線對應於化合物(I)(151.5 mg/kg，每天兩次)及化合物(2b)(50 mg/kg，每天一次)之組合；且黑色三角形曲線對應於口服治療。

圖8提供展示化合物(I)(151.5 mg/kg，每天兩次)與化合物(2b)(PLX-4032)(50 mg/kg及100 mg/kg，每天一次)之組合對於具有人類黑素瘤腫瘤UACC-62之SCID雌性小鼠之抗腫瘤活性之圖線。

圖9提供展示在評估化合物(I)(150 mg/kg，每天兩次)與化合物(2a)(AZD-6244)(10 mg/kg及25 mg/kg，每天一次)之組合對於具有人類黑素瘤腫瘤WM-266.4之SCID雌性小鼠之抗腫瘤活性期間體重變化的圖線。

圖10提供展示化合物(I)(150 mg/kg，每天兩次)與化合物(2a)(AZD-6244)(10 mg/kg及25 mg/kg，每天一次)之組合對於具有人類黑素瘤腫瘤WM-266.4之SCID雌性小鼠之抗腫瘤活性之圖線。

圖11提供展示在評估化合物(I)(150 mg/kg，每天兩次)與化合物(2b)(PLX-4032)(50 mg/kg及100 mg/kg，每天一次)之組合對於具有人類黑素瘤腫瘤WM-266.4之SCID雌性小鼠之抗腫瘤活性期間體重變化的圖線。

具有白色正方形之曲線對應於對照；具有實線之曲線對應於化合物(I)(150 mg/kg，每天兩次)；具有虛線及黑色三角形之曲線對應於化合物(2b)(100 mg/kg，每天一次)；具有虛線及黑色菱形之曲線對應於化合物(2b)(50 mg/kg，每天一次)；具有實線及黑色三角形之曲線對應於化合物(I)(150 mg/kg，每天兩次)及化合物(2b)(100 mg/kg，每天一次)之組合；具有實線及黑色菱形之曲線對應於化合物(I)(150 mg/kg，每天兩次)及化合物(2b)(50 mg/kg，每天一次)之組合；且黑色三角形曲線對應於口服治療。

圖12提供展示化合物(I)(150 mg/kg，每天兩次)與化合物(2b)(PLX-4032)(50 mg/kg及100 mg/kg，每天一次)之組合對於具有人類黑素瘤腫瘤WM-266.4之SCID雌性小鼠之抗腫瘤活性之圖線。

圖13提供展示在評估化合物(I)(150 mg/kg，每天兩次)與化合物(2a)(AZD-6244)(10 mg/kg及25 mg/kg，每天一次)之組合對於具有人類原發性結腸腫瘤CR-IGR-014P之SCID雌性小鼠之抗腫瘤活性期間體重變化的圖線。

圖14提供展示化合物(I)(150 mg/kg，每天兩次)與化合物(2a)(AZD-6244)(10 mg/kg及25 mg/kg，每天一次)之組合對於具有人類原發性結腸腫瘤CR-IGR-014P之SCID雌性小鼠之抗腫瘤活性之圖線。

Claims

一種醫藥組合，其包含：式(I)化合物：或其醫藥上可接受之鹽，及至少一種MAPK通道抑制劑或其醫藥上可接受之鹽。
如請求項1之醫藥組合，其中該MAPK通道抑制劑係MEK激酶及RAF激酶中之一者或兩者之抑制劑。
如請求項2之醫藥組合，其中該MAPK通道抑制劑係MEK抑制劑。
如請求項2之醫藥組合，其中該MAPK通道抑制劑係RAF抑制劑。
如請求項2之醫藥組合，其中該MAPK通道抑制劑係：化合物(2a)：或其醫藥上可接受之鹽，或化合物(2b)：或其醫藥上可接受之鹽。
如請求項2之醫藥組合，其中該MAPK通道抑制劑係下式之化合物(2a)：或其醫藥上可接受之鹽。
如請求項2之醫藥組合，其中該MAPK通道抑制劑係下式之化合物(2b)：或其醫藥上可接受之鹽。
如請求項1至7中任一項之醫藥組合，其進一步包含醫藥上可接受之載劑。
如請求項1至7中任一項之醫藥組合，其包含至少一種選自抗癌化合物之另一化合物。
如請求項1至7中任一項之醫藥組合，其用作藥劑。
一種藥劑，其包含如請求項1至9中任一項之醫藥組合。
一種醫藥組合物，其包含如請求項1至9中任一項之醫藥組合及醫藥上可接受之賦形劑。
一種如請求項1至9中任一項之醫藥組合之用途，其用以製造用於治療癌症之藥劑。
如請求項13之用途，其中該癌症係選自由以下組成之群：非小細胞肺癌、乳癌、胰腺癌、肝癌、前列腺癌、膀胱癌、子宮頸癌、甲狀腺癌、結腸直腸癌、肝癌、肌肉癌、血液惡性病、黑素瘤、子宮內膜癌及胰腺癌。
如請求項13之用途，其中該癌症係選自由以下組成之群：結腸直腸癌、子宮內膜癌、血液惡性病、甲狀腺癌、乳癌、黑素瘤、胰腺癌及前列腺癌。
如請求項13之用途，其中在投與該式(I)化合物後接著投與該MAPK通道抑制劑。
如請求項13之用途，其中在投與該MAPK通道抑制劑後接著投與該式(I)化合物。
如請求項13之用途，其中在投與該式(I)化合物後接著投與該化合物(2a)。
如請求項13之用途，其中在投與該式(I)化合物後接著投與該化合物(2b)。
如請求項13之用途，其中在投與該化合物(2a)後接著投與該式(I)化合物。
如請求項13之用途，其中在投與該化合物(2b)後接著投與該式(I)化合物。
如請求項13之用途，其中該式(I)化合物及該MAPK通道抑制劑係以產生減小腫瘤體積之協同效應之量使用。
如請求項13之用途，其中該式(I)化合物及該MAPK通道抑制劑係以產生腫瘤停滯之組合效應之量使用。
一種醫藥組合，其包含：式(I)化合物：或其醫藥上可接受之鹽，及至少一種選自由以下組成之群之MAPK通道抑制劑：化合物(2a)：或其醫藥上可接受之鹽，及化合物(2b)：或其醫藥上可接受之鹽，該醫藥組合用於治療癌症。
一種產品，其包含：式(I)化合物：或其醫藥上可接受之鹽，及至少一種MAPK通道抑制劑或其醫藥上可接受之鹽，該產品作為組合製劑供同時、單獨或依序用於抗癌療法中。
一種套組，其包含：至少一種式(I)化合物：或其醫藥上可接受之鹽，至少一種MAPK通道抑制劑或其醫藥上可接受之鹽，及視情況使用說明書。
一種套組，其包含：至少一種式(I)化合物：或其醫藥上可接受之鹽，至少一種選自由以下組成之群之MAPK通道抑制劑：化合物(2a)：或其醫藥上可接受之鹽，及化合物(2b)：或其醫藥上可接受之鹽，及視情況使用說明書。