CN103877011A

CN103877011A - 一种细辛脑注射剂及制备方法

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Publication number: CN103877011A
Application number: CN201310114182.0A
Authority: CN
Inventors: 张蕊
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2012-12-21
Filing date: 2013-04-03
Publication date: 2014-06-25
Also published as: CN102973499A; CN103877012A; CN103142515A; CN103142515B

Abstract

本发明提供了一种α－细辛脑注射剂，其以α－细辛脑（α－Ａｓａｒｏｎｅ，化学名为2，4，5-三甲氧基-1-丙烯基苯）为活性成分，采用聚乙二醇-12-羟基硬脂酸酯作为增溶剂，丙二醇作为助溶剂制成注射剂。不仅有效地解决了细辛脑不溶于水的问题，还极大提高了细辛脑注射剂的安全性和稳定性。本发明制备的细辛脑注射剂，稳定性好，制备工艺简单。

Description

一种细辛脑注射剂及制备方法

技术领域

本发明涉及医药制剂领域，尤其是涉及细辛脑的注射剂及其制备方法。

背景技术

α-细辛脑化学名为2，4，5-三甲氧基-1-丙烯基苯，是中药石菖蒲的主要有效成分之一，具有镇静、抗惊厥、解痉、平喘、祛痰、止咳、降血脂、利胆、抗癌等多种药理作用；同时对于肺炎球菌、金黄色葡萄球菌及大肠杆菌的生长有不同程度的抑制作用。在临床上，细辛脑已经广泛用于治疗上呼吸道感染、支气管炎、支气管哮喘、急性及慢性胆囊炎、胆石症、癫痫大发作等病症，尤其是对于肺炎、支气管哮喘和慢性阻塞性肺病(例如慢阻肺、COPD)急性发作的治疗具有显著效果。1982年广西柳州制药厂首次在国内人工成功合成α-细辛脑，并制成片剂和胶囊剂投放市场。

细辛脑作为亲脂性极强而亲水性极差的化合物，目前上市的细辛脑的片剂和胶囊，由于其水溶性极差，口服后不易分散和溶出，与体液接触时有效比表面积小，例如普通口服制剂生物利用度仅为2-5％，根本无法实现预期的治疗效果。现有技术采用多种方式制备细辛脑的注射剂，但存在多种缺陷，例如CN1290495C公开了采用α-细辛脑，加上油、乳化剂、注射用水制成脂微球制剂，工艺复杂，成本高，长期存储脂微球的包裹容易破裂产生泄漏，不利于注射；CN1657071A采用水和有机溶剂溶解细辛脑，制成冻干制剂，冻干粉注射前复溶效果差，产生浑浊，影响使用。

在药用活性物质中，大部分难溶于水的脂溶性药物，给制剂制备过程和临床应用带来很多不便，也对药效的发挥带来诸多不良影响，甚至难以制备成合理的制剂。为了解决此类问题，较为常用的方法之一是以表面活性剂对药物进行增溶。

为了提高其疗效，研究人员通过加入一定表面活性剂，增大细辛脑在水中溶解度，制成了细辛脑注射液。但某些表面活性剂用于注射剂可能导致存在严重的安全隐患，例如：CN1313086C公开了采用吐温80作为增溶剂溶解细辛脑，本领域技术人员应深刻认识到国内外对吐温80安全性研究的大量资料表明吐温80有一定的安全应用范围，如对犬、家兔、猫和猴静脉注射吐温80均会导致一过性的血压降低(尤其是犬的收缩压、舒张压、平均脉压显著降低)(王庆利，彭健吐温80的安全性研究进展毒理学杂志2006，20(4)：262-264页)，因此难以确定该制剂对人体是否造成更为严重的影响；同时，所述产品由于含有较多吐温80，导致产品冻干不完全，外观不佳，更严重的后果是冻干之后复溶效果差，不利于实际临床应用。

为解决上述问题，本发明提供了一种细辛脑注射剂，该注射剂采用聚乙二醇-12-羟基硬脂酸酯(也称为“聚乙二醇15羟硬脂酸酯”，polyoxyethylene-660-12-hydroxy stearate，商品名Solutol?HS15)做增溶剂，丙二醇做助溶剂，苯甲醇做防腐剂。首先，现有技术的文献研究已经证实Solutol?HS15具有远优于吐温80的安全性；实验也证明妊娠家兔静脉注射给予含有吐温80187.5mg/kg可导致明显的母体毒性，而静脉注射给予聚乙二醇-12-羟基硬脂酸酯215mg/kg却无明显影响。而且，实验表明HS15能较好地增大α-细辛脑在水中的溶解度。

现有技术也公开了采用HS15作为乳化剂的细辛脑的注射制剂，例如专利文献C101088499A中公开了细辛脑的乳剂，采用大豆油和中链甘油三酸酯混合物的油相、大豆卵磷脂和HS15的乳化剂制成乳剂，并进一步加入冻干保护剂制成干乳剂。但是冻干乳剂的制备工艺复杂，制成品的物理稳定性不好，需要在10℃以下甚至冰冻状态保存，即使在室温下放置一段时间，乳滴都会逐渐聚合破裂，复溶后达不到注射的要求。又例如专利文献CN101647774B中公开了采用HS15作为增溶剂的细辛脑注射剂，按照其实施例1、实施例2和实施例3的制备方法制备细辛脑注射剂后发现该专利制备细辛脑注射剂的方法存在严重缺陷，主要表现在制备过程中主药α-细辛脑的大量损失（至少损失10%）且损失波动大以及灭菌后澄明度不合格，即无法按照现行《中国药典》2010年版要求制成合格药品。又例如专利文献CN102973499A（和本专利为同一申请人）中公开了采用HS15作为增溶剂的细辛脑注射剂，按照其实施例1、实施例2和实施例3的制备方法制备细辛脑注射剂后发现该专利制备细辛脑注射剂的方法存在缺陷，主要表现在制备后获得细辛脑注射液长期考查5个月后澄明度不合格，药品的有效期只能标示为5个月。

现有技术的研究表明，由单一表面活性剂组成的胶束固然有明显作用，但对一些水难溶性药物也存在着表面活性剂用量高，制剂黏度大，稀释稳定性不好，并相应带来的制剂毒副作用、注射疼痛、临床用药要求高等诸多问题。表面活性剂相互间复配形成的混合胶束体系具有增溶性能强于单一表面活性剂溶液的特性。专利文献CN101138550A介绍了可采用HS15和一种或多种其他表面活性剂、磷脂等制成细辛醚的胶束药物制剂。然而，其中磷脂非常容易氧化，生产中均需以氮气保护，生产成本高；产生的溶血磷脂具有很强的毒副作用，是注射液中必须严格控制的杂质。

本发明克服了以上技术偏见，采用安全性和助溶效果更高的表面活性剂HS15作为增溶剂、丙二醇作为助溶剂及苯甲醇作为防腐剂和细辛脑通过经验证的除菌过滤生产工艺（即无菌工艺）制成的水性细辛脑注射液，不仅能有效除菌保证安全性还能避免因高温导致的注射液澄明度不合格的现象。制得的细辛脑注射液完全符合现行《中国药典》2010年版对于注射剂的要求，含量稳定，成品溶液澄明度好。同时安全性试验也证实本专利制得的细辛脑注射液与按照专利文献CN102973499A（和本专利为同一申请人）制得的细辛脑注射液安全性相同，即在安全性上本专利产品和专利文献CN102973499A（和本专利为同一申请人）产品相同均高于现有的以吐温80作为增溶剂的市售细辛脑注射液产品。

发明内容

本发明为了解决现有技术中细辛脑制剂存在的多种安全风险和制剂缺陷，提供一种采用聚乙二醇-12-羟基硬脂酸酯(以下简称HS15)作为增溶剂，丙二醇作为助溶剂，苯甲醇作为防腐剂的细辛脑的注射制剂。

HS15是一种非离子型表面活性剂，具有良好的生物耐受性且应用范围广，并被证明是优秀的增溶剂，本发明采用HS15作为增溶剂，具有以下一些优势：

·低组胺释放——术前无需使用抗组胺剂和类皮质激素；

·低溶血作用；

·较高的人体使用安全性，现有技术的文献研究已经证实其具有远优于吐温80的安全性；

·较高的生理耐受性；

·高增溶能力-使低容量高剂量的注射成为可能；

·低粘度，即使在高浓度时，30％浓度溶液亦可无痛给药；

·已于近期收入德国药典(即将收入到美国和欧洲药典)；

本发明的目的在于提供一种以细辛脑作为活性成分的注射剂及其制备方法。

本发明所述的细辛脑即理解为α-细辛脑，但不限于此，β-细辛脑也同样适于本发明。

本发明的注射剂，其特征在于包含α-细辛脑、聚乙二醇-12-羟基硬脂酸酯、丙二醇和pH调节剂，所述注射溶剂是指注射用水。

作为优选的实施方案，本发明的细辛脑注射剂，主要是包含基于重量份计的α-细辛脑1份，聚乙二醇-12-羟基硬脂酸酯 8～12 份，丙二醇 50 份和适量的注射溶剂。

更优选的实施方案是选取 8 份、 10 份、 12 份的聚乙二醇-12-羟基硬脂酸酯作为增溶剂。

本发明的注射剂，所述注射溶剂是指注射用水，其中，全量的注射用水∶α-细辛脑的比例为1～10∶10(ml∶mg)。

更优选的实施方案是全量的注射用水∶α-细辛脑的比例为2∶8(ml∶mg)。

本发明的细辛脑注射剂还可以采用药学上可接受的方法冻干，制成冻干制剂。所述冻干工艺中可以加上药学上可接受的各种冻干保护剂，优选的是甘露醇。

本发明的制备α－细辛脑注射剂的方法，包括如下步骤：

a、准确称取处方量的α－细辛脑、聚乙二醇-12-羟基硬脂酸酯、丙二醇，配制pH调节剂，密封待用；

b、量取50%处方量体积的注射用水，恒温至60～70℃的条件下加入聚乙二醇-12-羟基硬脂酸酯，搅拌溶解；在60～70℃条件下继续加入α-细辛脑，搅拌使溶解，放冷至室温；再加入丙二醇，搅拌均匀；

c、加注射用水至处方量体积的95%，搅拌混合均匀；调节pH至6.0～6.1，补加注射用水至全量，混合均匀，过滤，分装，即得α－细辛脑注射液。

d、上述步骤b中，加入丙二醇后，还可按冻干保护剂∶全量注射用水比例为10∶100(g∶ml)加入冻干保护剂甘露醇，搅拌溶解；加注射用水至全量，混合均匀，过滤，分装，于-40℃预冻3小时后，抽真空，采用一次升华法得到α－细辛脑冻干粉针。

上述工艺制备的细辛脑注射剂，具有工艺简单、成本低廉、质量稳定、安全性高、临床使用方便等优点。

因此，本发明将为上呼吸道感染、支气管炎、支气管哮喘、急性及慢性胆囊炎、胆石症、癫痫大发作等疾病，特别是肺炎、支气管哮喘和慢性阻塞性肺病急性发作患者提供一种安全有效的细辛脑注射剂。

具体实施方式

实施例1（基于重量份计的α-细辛脑1份，HS15为8份，丙二醇为50份，不灭菌）

称取4g α-细辛脑、32g HS15、200g丙二醇，密封待用；用浓盐酸配制0.01mol/L的盐酸溶液，密封待用；量取500ml注射用水，60℃水浴条件下加入32g HS15，搅拌溶解；在60℃水浴下加入4g α-细辛脑，搅拌使溶解，放冷至室温；再加入200g丙二醇，搅拌均匀；加注射用水至950ml，搅拌混合均匀；用0.01mol/L盐酸溶液调节pH至6.06，补加注射用水至全量1000ml，混合均匀，先经0.45μm微孔滤膜过滤，再经0.22μm微孔滤膜过滤，分装于2ml安瓿中，熔封，检漏，得到α-细辛脑注射液。

实施例2（基于重量份计的α-细辛脑1份，HS15为10份，丙二醇为50份，不灭菌）

称取4g α-细辛脑、40g HS15、200g丙二醇，密封待用；用浓盐酸配制0.01mol/L的盐酸溶液，密封待用；量取500ml注射用水，60℃水浴条件下加入40g HS15，搅拌溶解；在60℃水浴下加入4g α-细辛脑，搅拌使溶解，放冷至室温；再加入200g丙二醇，搅拌均匀；加注射用水至950ml，搅拌混合均匀；用0.01mol/L盐酸溶液调节pH至6.05，补加注射用水至全量1000ml，混合均匀，先经0.45μm微孔滤膜过滤，再经0.22μm微孔滤膜过滤，分装于2ml安瓿中，熔封，检漏，得到α-细辛脑注射液。

实施例3（基于重量份计的α-细辛脑1份，HS15为12份，丙二醇为50份，不灭菌）

称取4g α-细辛脑、48g HS15、200g丙二醇，密封待用；用浓盐酸配制0.01mol/L的盐酸溶液，密封待用；量取500ml注射用水，60℃水浴条件下加入48g HS15，搅拌溶解；在60℃水浴下加入4g α-细辛脑，搅拌使溶解，放冷至室温；再加入200g丙二醇，搅拌均匀；加注射用水至950ml，搅拌混合均匀；用0.01mol/L盐酸溶液调节pH至6.06，补加注射用水至全量1000ml，混合均匀，先经0.45μm微孔滤膜过滤，再经0.22μm微孔滤膜过滤，分装于2ml安瓿中，熔封，检漏，得到α-细辛脑注射液。

实施例4（基于重量份计的α-细辛脑1份，HS15为10份，丙二醇为50份，甘露醇2.5份，冻干粉针）

称取4g α-细辛脑、40g HS15、200g丙二醇，密封待用；量取500ml注射用水，60℃水浴条件下加入40g HS15，搅拌溶解；在60℃水浴下加入4g α-细辛脑，搅拌使溶解，放冷至室温；依次加入200g丙二醇和10g甘露醇，搅拌均匀；加注射用水至全量1000ml，混合均匀，先经0.45μm微孔滤膜过滤，再经0.22μm微孔滤膜过滤，分装，于-40℃预冻3小时后，抽真空，使干燥箱内真空度达13.33Pa以下，缓缓升温至-20℃，使药液中的水分蒸发，得到冻干粉针。

实施例4复溶效果：实施例4样品长期放置7个月复溶后仍澄清透明。

对照例1（基于重量份计的α-细辛脑1份，HS15为8份，丙二醇为50份，乙醇12份，100℃30分钟灭菌）（专利文献CN102973499A实施例1）

称取4g α-细辛脑、32g HS15、200g丙二醇，密封待用；量取60ml乙醇密封待用；用浓盐酸配制0.01mol/L的盐酸溶液，密封待用；量取500ml注射用水，60℃水浴条件下加入32g HS15，搅拌溶解；在60℃水浴下加入4g α-细辛脑，搅拌使溶解，放冷至室温；依次加入200g丙二醇和60ml乙醇，搅拌均匀；加注射用水至950ml，搅拌混合均匀；用0.01mol/L盐酸溶液调节pH至6.03，补加注射用水至全1000ml，混合均匀，先经0.45μm微孔滤膜过滤，再经0.22μm微孔滤膜过滤，分装于2ml安瓿中，熔封，经100℃30分钟灭菌，得到α-细辛脑注射液。

对照例2（基于重量份计的α-细辛脑1份，HS15为10份，丙二醇为50份，乙醇12份，100℃30分钟灭菌）（专利文献CN102973499A实施例2）

称取4g α-细辛脑、40g HS15、200g丙二醇，密封待用；量取60ml乙醇密封待用；用浓盐酸配制0.01mol/L的盐酸溶液，密封待用；量取500ml注射用水，60℃水浴条件下加入40g HS15，搅拌溶解；在60℃水浴下加入4g α-细辛脑，搅拌使溶解，放冷至室温；依次加入200g丙二醇和60ml乙醇，搅拌均匀；加注射用水至950ml，搅拌混合均匀；用0.01mol/L盐酸溶液调节pH至6.08，补加注射用水至全1000ml，混合均匀，先经0.45μm微孔滤膜过滤，再经0.22μm微孔滤膜过滤，分装于2ml安瓿中，熔封，经100℃30分钟灭菌，得到α-细辛脑注射液。

对照例3（基于重量份计的α-细辛脑1份，HS15为12份，丙二醇为50份，乙醇12份，100℃30分钟灭菌）（专利文献CN102973499A实施例3）

称取4g α-细辛脑、48g HS15、200g丙二醇，密封待用；量取60ml乙醇密封待用；用浓盐酸配制0.01mol/L的盐酸溶液，密封待用；量取500ml注射用水，60℃水浴条件下加入48g HS15，搅拌溶解；在60℃水浴下加入4g α-细辛脑，搅拌使溶解，放冷至室温；依次加入200g丙二醇和60ml乙醇，搅拌均匀；加注射用水至950ml，搅拌混合均匀；用0.01mol/L盐酸溶液调节pH至6.10，补加注射用水至全1000ml，混合均匀，先经0.45μm微孔滤膜过滤，再经0.22μm微孔滤膜过滤，分装于2ml安瓿中，熔封，经100℃30分钟灭菌，得到α-细辛脑注射液。

对照例4：由CN101647774B实施例1制得，（规格为2ml:10mg）；

对照例5：由CN101647774B实施例2制得，（规格为2ml:10mg）；

对照例6：由CN101647774B实施例3制得，（规格为2ml:10mg）；

对照例7（根据专利CN101647774B[0032]—[0035]所述方法制得）（基于重量份计的α-细辛脑1份，HS15为10份，115℃30分钟热压灭菌）

称取4g α-细辛脑、40g HS15、2g活性炭，密封待用；量取500ml注射用水，60℃水浴条件下加入4g α-细辛脑和40g HS15，搅拌溶解；加入2g活性炭，室温下搅拌20分钟后脱碳过滤；滤液再经0.22μm微孔滤膜过滤，补加注射用水至全量1000ml；再经0.22μm微孔滤膜过滤，分装于2ml安瓿中，熔封，经115℃30分钟热压灭菌，得到α-细辛脑注射液。

对照例8（根据专利CN101647774B[0032]—[0035]所述方法制得）（基于重量份计的α-细辛脑1份，HS15为15份，115℃30分钟热压灭菌）

称取4g α-细辛脑、60g HS15、2g活性炭，密封待用；量取500ml注射用水，60℃水浴条件下加入4g α-细辛脑和60g HS15，搅拌溶解；加入2g活性炭，室温下搅拌20分钟后脱碳过滤；滤液再经0.22μm微孔滤膜过滤，补加注射用水至全量1000ml；再经0.22μm微孔滤膜过滤，分装于2ml安瓿中，熔封，经115℃30分钟热压灭菌，得到α-细辛脑注射液。

对照例9（根据专利CN101647774B[0032]—[0035]所述方法制得）（基于重量份计的α-细辛脑1份，HS15为25份，115℃30分钟热压灭菌）

称取4g α-细辛脑、100g HS15、2g活性炭，密封待用；量取500ml注射用水，60℃水浴条件下加入4g α-细辛脑和100g HS15，搅拌溶解；加入2g活性炭，室温下搅拌20分钟后脱碳过滤；滤液再经0.22μm微孔滤膜过滤，补加注射用水至全量1000ml；再经0.22μm微孔滤膜过滤，分装于2ml安瓿中，熔封，经115℃30分钟热压灭菌，得到α-细辛脑注射液。

实施例1—实施例3，对照例1—对照例9稳定性考察对比

(A) 澄明度

检测方法依据：国家药品监督管理局药品标准细辛脑注射液WS-10001-（HD-0437）-2002 以及《中国药典》2010年版附录ⅨH 可见异物检查法

仪器和设备：YB－3型澄明度检测仪

检测方法：取本品20支，擦净容器外壁，轻轻旋转和翻转容器使药液中存在的可见异物悬浮（注意不要使药液产生气泡），分别在黑色和白色背景下，手持供试品颈部使药液轻轻翻转，用目检测（照度：1000～1500lx）。

标准规定：不得检出烟雾状微粒柱、金属屑、玻璃屑、长度或最大粒径超过2mm的纤维和块状物等明显外来异物。微细可见异物如有检出仅1支，再取20支同法复试，均不得检出。

放置条件：长期稳定性试验条件，温度25℃±2℃，湿度60%±10%

结果：

对照例1、对照例2、对照例3长期放置澄明度不合格现象描述：灭菌后澄明度合格，长期放置4个月后澄明度仍合格，长期放置到5个月后少量样品（ 约占10%-30% ）有微小结晶析出。

对照例4、对照例5、对照例6、对照例7、对照例8、对照例9澄明度不合格现象描述：灭菌后绝大部分成品均有大块油滴析出，浮于液面或粘于安瓿内壁。放置后部分样品的油状物不会消失，甚至产生白色颗粒状物质漂浮于溶液中。

澄明度稳定性考察结论：1、按照专利文献CN101647774B制备方法制得的细辛脑注射液澄明度无法达到现行《中国药典》2010年版的规定要求，无法作为临床药物使用。2、按照专利文献 CN102973499A 制备方法制得的细辛脑注射液澄明度能达到现行《中国药典》2010年版的规定要求，但是药品的有效期只能标示为5个月。

(B) 主药含量

检测方法依据：国家药品监督管理局药品标准细辛脑注射液WS-10001-（HD-0437）-2002

检测方法：取本品5支，混匀，精密量取2ml，置50ml量瓶中，加乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置50ml量瓶中，加乙醇稀释至刻度，照分光光度法（《中国药典》2010版二部附录IV Ａ），在313nm的波长处测定吸收度，按细辛脑C₁₂H₁₆O₃的吸收系数（E

）为380.8计算，即得。

标准规定：本品为细辛脑加入适量助溶剂制成的灭菌水溶液。含细辛脑（C₁₂H₁₆O₃）应为标示量的93.0%～107.0%。（此处标示量即为药品规格）

结果：

上述实验结果表明专利文献CN101647774B和CN102973499A提出的细辛脑注射液制备方法存在缺陷，不适用于细辛脑注射液的实际生产和使用。专利文献CN101647774B的缺陷主要在于其制备过程中的主药含量损失波动大以及成品澄明度不理想，致使该工艺无法生产出符合现行药典规定的含量稳定且澄清透明的细辛脑注射液。专利文献CN102973499A的缺陷主要在于成品长期放置后澄明度不理想，致使该工艺生产出的细辛脑注射液药品的有效期太短，不方便实际贮藏和使用。而本发明恰好克服了这两项技术难题，能生产出符合现行药典规定的含量稳定、澄清透明且有较长有效期的细辛脑注射液。

实施例2与对照例2安全性对比

比较本发明实施例2与对照例2的细辛脑注射液的安全性。

一、产品制备

二、安全性试验

安全性判定依据：根据不同处方产品对豚鼠产生主动过敏性的差异和程度来比较其安全性。

动物试验单位：成都岐黄药物非临床研究有限公司

1、实验材料：

药品

品名：细辛脑注射液

批号：实施例2、对照例2

规格：2ml：8mg

生产单位：成都力思特制药股份有限公司

用法用量：静脉注射。1.静脉推注：一次16～24mg，稀释于20%葡萄糖注射液40ml中，缓慢静脉推注，一日2～3次。小儿剂量酌减。2.静脉滴注：成人一次16～24mg，儿童一次0.5mg/kg，用5%或10%葡萄糖注射液稀释成0.01%～0.02%的溶液，静脉滴注，一日2次。

贮藏：避光保存。

剂量计算：根据说明书：

临床日用最大剂量：24mg×3次/60kg=1.2mg/kg；

临床受试品最大浓度：24mg/40ml=0.6mg/ml。

对照品

10%葡萄糖注射液，规格：250ml：25g，批号：C110618B1，四川科伦药业股份有限公司生产。

卵蛋白粉：规格：100g，批号：F20100819，国药集团化学试剂有限公司生产。

动物

豚鼠36只，体重251.7～335.2g，18雌18雄，符合一级动物标准，由四川省实验动物专委会养殖场提供，动物生产许可证号：SCXK（川）2008-14号。采用豚鼠全价颗粒饲料，由四川省实验动物专委会养殖场提供。自由饮用城市生活饮水。饲养环境为普通系统，温度16～26℃，相对湿度40～70%，自然通风、换气，自然光照。

仪器

电子天平，BS600L型，量程600g，精密度0.1g，上海友声衡器有限公司生产。

电子天平，FA1004型，量程100g，精密度0.0001g，上海良平仪器仪表有限公司生产。

材料

一次性使用无菌注射器，规格：1ml，批号：20120122，失效期：201412，江西洪达医疗器械集团有限公司生产。

一次性使用无菌注射器，规格：2.5ml，批号：20101212，失效期：201311，江西洪达医疗器械集团有限公司生产。

一次性使用无菌注射器，规格：5ml，批号：20101009，失效期：201309，成都市新津事丰医疗器械有限公司生产。

2、实验系统及选择理由

试验时在成都岐黄药物非临床研究有限公司动物房豚鼠观察室观察和试验，动物使用许可证号：SYXK（川）2010－096。

选择理由：根据《化学药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则》过敏试验选择使用豚鼠，为一级试验动物，故在开放系统中饲养及观察。

3、试验分组

取豚鼠36只，按体重分层分组，分为6组，6只/组，雌雄各半：

阴性对照组（10%葡萄糖注射液）；

阳性对照组（卵蛋白粉）；

高剂量组1（细辛脑注射液对照例2）；

低剂量组1（细辛脑注射液对照例2）；

高剂量组2（细辛脑注射液实施例2）；

低剂量组2（细辛脑注射液实施例2）；

4、试验方法

给药剂量及周期设计：在过敏试验中，为充分暴露药液的免疫原性，应选用浓度最大、剂量最大的临床给药方式作为参考。因此考虑以临床日用最大剂量1.2mg/kg为剂量参考，以临床受试品最大浓度0.6mg/ml为浓度参考。

给药周期及给药途径：隔日腹腔注射1次致敏，共3次，末次致敏后第14天脚背静脉注射激发。

致敏前阴性对照品准备：取10%葡萄糖注射液备用。

致敏前阳性对照品准备：称取适量卵蛋白粉，溶解于10%葡萄糖注射液配成浓度为2mg/ml的溶液备用。

致敏前受试品准备：高剂量组1：取细辛脑注射液对照例2加10%葡萄糖注射液稀释成浓度2.4mg/ml的溶液备用；低剂量组1：取细辛脑注射液对照例2加10%葡萄糖注射液稀释成浓度0.6mg/ml的溶液备用；高剂量组2：取细辛脑注射液实施例2加10%葡萄糖注射液稀释成浓度2.4mg/ml的溶液备用；低剂量组2：取细辛脑注射液实施例2加10%葡萄糖注射液稀释成浓度0.6mg/ml的溶液备用。

致敏方法：各组按组别腹腔注射各溶液进行致敏，隔日1次，共3次。给药方案见表3

注：高剂量组1和低剂量组1采用细辛脑注射液对照例2配制；高剂量组2和低剂量组2采用细辛脑注射液实施例2配制。

激发前阴性对照品准备：取10%葡萄糖注射液备用。

激发前阳性对照品准备：称取适量卵蛋白粉，溶解于10%葡萄糖注射液配成浓度为2mg/ml的溶液备用。

激发前受试品准备：高剂量组1：取细辛脑注射液对照例2加10%葡萄糖注射液稀释成浓度2.4mg/ml的溶液备用；低剂量组1：取细辛脑注射液对照例2加10%葡萄糖注射液稀释成浓度0.6mg/ml的溶液备用；高剂量组2：取细辛脑注射液实施例2加10%葡萄糖注射液稀释成浓度2.4mg/ml的溶液备用；低剂量组2：取细辛脑注射液实施例2加10%葡萄糖注射液稀释成浓度0.6mg/ml的溶液备用。

激发方法：末次致敏后第14天各组按组别脚背静脉注射各溶液进行激发。给药方案见表4。

初次、最后一次致敏和激发当日测定每组每只动物的体重。

每次致敏后及激发静脉注射后立刻至30分钟，按下表5详细观察每只动物的反应症状及死亡时间。最长观察3小时。按表6评价标准进行评价。

5、试验结果及分析

致敏期间豚鼠一般情况观察正常，无异常情况出现。

激发后过敏情况统计见表7，试验结果分析见表8

各组与阴性对照组比较 ***P1<0.001 **P1<0.01 *P1<0.05

各受试组与阳性对照组比较 △△△P2<0.001 △△P2<0.01 △P2<0.05

高剂量组2与高剂量组1比较 ○○○P3<0.001 ○○P3<0.01 ○P3<0.05

低剂量组2与低剂量组1比较 □□□P4<0.001 □□P4<0.01 □P4<0.05

表7、8结果显示：细辛脑注射液全身主动过敏性试验中，①、阴性对照组、阳性对照组及两批批细辛脑注射液试验期间各组豚鼠体重均有所增加，各组间体重无差异性。②、阴性对照组豚鼠激发后过敏反应阴性，阳性对照组豚鼠激发后过敏反应极强阳性，阳性对照组与阴性对照组有极显著差异（P<0.001），表明试验数据准确度高；③、低剂量组1、与阴性对照组过敏反应均为阴性，无差异，与阳性对照组有极显著差异（P<0.001）；低剂量组2与阴性对照组过敏反应均为阴性，无差异，与阳性对照组有极显著差异（P2<0.001）；④、高剂量组2与高剂量组1过敏反应无差异（P＞0.05）；低剂量组2与低剂量组1过敏反应无差异（P＞0.05）。

6、结论

根据细辛脑注射液全身过敏性试验研究表明，本发明实施例2细辛脑注射液【采用聚乙二醇-12-羟基硬脂酸酯作为增溶剂、丙二醇作为助溶剂和细辛脑通过经验证的除菌过滤生产工艺（即无菌工艺）制成】的安全性与对照例2细辛脑注射液【（专利文献CN102973499A实施例2），采用聚乙二醇-12-羟基硬脂酸酯作为增溶剂、丙二醇和乙醇作为助溶剂和细辛脑通过100℃30分钟灭菌制成】相同，结合专利文献CN102973499A（和本专利为同一申请人）的安全性实验数据，表明本专利产品在安全性上高于现有的以吐温80作为增溶剂的市售细辛脑注射液产品。

Claims

1.一种细辛脑注射液，其特征在于包含主药α-细辛脑，增溶剂聚乙二醇-12-羟基硬脂酸酯、助溶剂丙二醇，其中包含基于重量份计的α-细辛脑1份，聚乙二醇-12-羟基硬脂酸酯8～12份，丙二醇50份；其制备方法为：

a、准确称取处方量的α-细辛脑、聚乙二醇-12-羟基硬脂酸酯、丙二醇，密封待用；

b、量取50%处方量体积的注射用水，恒温至60～70℃的条件下加入聚乙二醇-12-羟基硬脂酸酯，搅拌溶解，在60～70℃条件下继续加入α-细辛脑，搅拌使溶解，放冷至室温，再加入丙二醇，搅拌均匀，加注射用水至处方量体积的95%，搅拌混合均匀，调节pH至6.0～6.1，补加注射用水至全量，混合均匀，过滤，无菌分装，即得α－细辛脑注射剂。

2.根据权利要求1所述的α-细辛脑注射剂，特征在于采用盐酸溶液作为pH调节剂。

3.根据权利要求1或2所述的α-细辛脑注射剂，其特征在于按常规方法制成α－细辛脑冻干粉针，其中冻干保护剂选自甘露醇。

4.根据权利要求1所述的α-细辛脑注射剂，特征在于选取8份、10份或12份的聚乙二醇-12-羟基硬脂酸酯作为增溶剂。

5.根据权利要求1所述的α-细辛脑注射剂在制备治疗上呼吸道感染、支气管炎、支气管哮喘、急性及慢性胆囊炎、胆石症、癫痫大发作的药物中的应用。

6. 根据权利要求1所述的α-细辛脑注射剂在制备治疗肺炎和慢性阻塞性肺病急性发作的药物中的应用。